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文档简介
1、细胞工程生态工程教材教法分析,海淀区2018年高三生物一次复习研究,1,克隆技术(细胞工程)-知识框架,融合方法基因组分析生理研究疾病诊断治疗育种,1,克隆技术-测试说明要求和纯化,基本原则:细胞工程学科概念,1,克隆第一,克隆技术-植物细胞工程学科,(a)组织培养-教学理念:在以1 sturd实验为材料的同时分析细胞、分子水平的变化,阅读2 P34胡萝卜的组织培养内容,了解组织培养原理步骤,操作实验!3组织培养概念概要,练习训练,分裂,分裂和全能知识记忆,明确的程序,分析原理,规范术语,概念的深化理解和应用,1,细胞全能,分裂,分化-植物组织培养的基础,1,1细胞分化,组织分化,1,细胞的全
2、能,分裂,分化-植物组织培养的基础,1,克隆技术-植物细胞工程学科,执事基因:所有细胞都需要表达的基因,其产物是维持细胞基本生命活动的必要条件。例如:各种酶基因和结构蛋白基因,组织特异性基因:徐璐指不同细胞类型的完全表达的基因,其产物赋予了不同类型细胞特异性的形态结构特征和奇特的生理功能。基因调控,如卵清蛋白基因:其产物用于调节组织特异性基因的表达,起到激活作用或抑制作用。影响细胞分化的外源:包括环境因素、细胞外物质(细胞基质、粘附分子、细胞因子、激素等)以及细胞间的相互作用。(a)组织培养-中难点分析:(2015江苏高考)下图是白细胞和血管内皮细胞之间识别、粘合后白细胞通过血管壁进入炎症组织
3、的示意图。以下叙述的错误是a .内皮细胞识别与白细胞膜的糖蛋白结合,将白细胞粘在B上。白细胞粘附在血管上,迁移时需要消耗ATP C。在粘合,转移过程中,白细胞需要基因的选择性表达。白细胞利用细胞膜的选择通过血管壁进入炎症组织,利用细胞的全能性。广义是指细胞发展成完整有机体的个人潜能或特性。植物细胞的全能性:具有完整核的植物细胞具有形成完整植物所需的所有遗传信息,在适当的条件下具有分化成完整植物的潜在能力。在生长发育过程中,徐璐不同器官、组织细胞的基因表达存在很大差异,牙齿差异是遗传信息表达调控机制发生变化的结果,不是遗传信息不可逆转的失踪或钝化。细胞万能的表达:从离子培养的植物细胞或组织诱导生
4、长,分化成完整植物的过程成为植物细胞万能的表达。1、细胞的全能、分裂、分化-植物组培基础,1、克隆技术-植物细胞工程学科,(1)组织培养茎尖,根尖分生组织细胞,形成层细胞的全能性可以分别形成茎叶、根和其他组织和器官。少数植物分化成熟的一些器官(如着陆点根叶,叶肉细胞的全能直接表达,分化为新植物);在许多植物中,非分生组织细胞很难在整个植物中表达细胞的全能性。将它们与整个植物分裂后,在适当的培养条件下,诱导细胞脱分化和再分化,才能表达细胞的全能性,形成完整的植物。1,细胞全能,分裂,分化-植物组织培养的基础,一,克隆技术-植物细胞工程学科,(a)组织培养-中难点分析:2,植物组织培养-,(a)组
5、织培养-中难点分析脱分化过程中细胞的变化:细胞质显着变浓,大液泡消失,核体积变大,转移到细胞中央,细胞器(如线粒体)增加,质体变成原生质体。脱分化的本质:2,植物组织培养-过程,一,克隆技术-植物细胞工程学科,(a)组织培养-重难点分析,因此光的作用比合成光聚合物光照,调节细胞分化状态更大,还会影响生长所的极性运输,影响生长所信号传导系统,引起器官分化,2,植物组织培养-过程,1,克隆技术-植物细胞工程学科,(1)组织培养离子培养条件下,没有经过受精过程,但通过胚胎发育过程形成的胚胎的类似物统称为体细胞胚胎或胚体。直接途径:外植体的某些部位直接诱导体细胞胚的间接途径。也就是说,先形成愈合组织,
6、然后在体细胞胚胎或悬浮培养中形成胚胎性细胞团,再形成体细胞胚胎。-类虫热交法地图,2,植物组织培养-过程,1,克隆技术-植物细胞工程学科,(1)组织培养-重难点分析:2,植物组织培养-诱导愈伤组织形成的培养基,诱导分化亚的培养基,1.00,三体细胞杂交概念概要,练习训练,体细胞杂交的意义和工作原理,明确的程序,规范术语,明确的原理,概念的深化理解和运用,1,植物体细胞杂交-过程,1,克隆技术-植物细胞1。植物体细胞杂交-过程,1,克隆技术-植物细胞工程,(2)植物体细胞杂交-重卵分析:原生质体:具有去除细胞壁的细胞或质膜包围的生活力的暴露细胞。原生质体没有细胞壁,有利于细胞融合、体细胞杂交、基
7、因转移、单细胞培养。原生质体易于摄取外来遗传物质,以理想的受体系统进行各种遗传操作的研究,应用于体细胞杂交植物遗传育种。原生质体分离和培养期间,需要保护渗透调节剂(山梨醇、甘露醇、葡萄糖、甘蔗)。一般在适当的高渗溶液中比较稳定。(b)植物细胞杂交-中难点分析:一,克隆技术-植物细胞工程学科,融合过程中两个细胞膜徐璐接触并破裂,形成细胞壁的变化过程图,一,植物细胞杂交-过程,一,植物徐璐其他细胞的核聚变形成真正的杂交细胞。如果其中一个核完全消失,就会形成细胞质杂种。亲缘关系太远,可能会排除其中一个核的染色体。杂交细胞筛选是关键技术之一。(b)植物细胞杂交-中难点分析:一、克隆技术-植物细胞工程学
8、科,一、植物细胞杂交-过程,(b)植物细胞杂交-中难点分析物理特性筛选方法:亲本原生质体的大小、颜色、悬浮密度等差异如果用离心法将双核体与亲本原生质体分离,得到融合体。生长特性筛选法:利用原生质体对培养基成分的要求和反应的差异选择杂交细胞。例如,亲本原生质体的生长需要外源激素,有些杂交细胞在双亲互补作用下产生内源激素,杂种细胞可以在没有激素的培养基中生长。杂交细胞筛选,(b)植物细胞杂交-重难点分析:一,克隆技术-植物细胞工程学科,一,植物细胞杂交-过程,药物选择,物理特性选择,使用双重荧光标记比较分析杂交植物与双亲的表型差异。例如,叶子的大小和形状、花的形状和颜色、叶脉、叶柄、花茎、表皮的有
9、无等。细胞学鉴定。杂交植物细胞的染色体数目增加到哪一侧亲本细胞的染色体数目?瞳孔酶鉴定。瞳孔酶是功能相同的酶,是特异性基因的产物。杂交细胞的同功酶谱一般是双亲酶谱的总和,但有时也出现没有双亲的新带分子生物学鉴定。随机扩增多态DNA技术,如RAPD、RFLP和AFLP,也称为随机引物PCR。可以分析未知的全部序列的基因组。其应用是基于对徐璐不同模板DNA用相同的讲义放大的话,可以得到相同的波段频谱(模板基因组之间可能有动员性),也可以得到不同的光谱的推论。只有出现在特定DNA上的条带可以用作该模板的分子标记。事实上,每个基因组DNA总是有差异的,所以使用RAPD就可以进行分子标记研究。对于特定引
10、物,复杂的基因组生成的扩展条带数也将增加。分子生物学鉴定-RAPD,分子生物学鉴定-RAPD,一,克隆技术-植物细胞工程学科分生组织细胞分裂和生长速度快,病毒在植物体细胞中繁殖速度比较慢。病毒通过血管组织或细胞间灯丝传播到其他组织细胞,茎端分生组织不分化,没有血管组织,因此根尖、茎端生长点区域几乎没有病毒。细胞培养以单细胞或细胞团在培养基中培养次代谢产物,牙齿方法操作简单,重复性好,群体大等优点。主要有研究制药(如抗癌剂紫杉醇、治疗药紫荆、保健药人参皂苷等)、食品添加剂(如生姜、香薰等)、调味品(如胡椒、玉兰香等)、食用色素(如花色素苷等)一株植物的叶子或火药作为外植体栽培的植物的基因型相同。
11、b .在培养过程中,应给予适当的光,以促进愈伤组织的光合作用C。愈伤组织可以用作植物体细胞引诱的材料。因为细胞多能性很高。适当提高培养基中细胞分裂素的比例,有助于愈伤组织分化为芽。2下一次生物学过程中显示细胞万能的是a .转基因小麦的种子发育为小麦幼苗B。胚胎干细胞通过诱导分化成神经细胞C。杂交瘤细胞在培养基上无限增殖。通过体细胞杂交获得白菜-甘蓝杂交植物,4(2n=12海淀期)红豆树可以生产抗癌剂紫杉醇,为了种植生产紫杉醇的木柴,研究人员将红豆树(1)种子的胚胎接种为外植体用一定量的紫外线照射杉木原生质体,破坏部分染色体,未接受紫外线的木柴原生质体用化学诱导剂_ _ _ _ _ _ _柴火细
12、胞染色体数目为12,红豆细胞_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _。实验时,研究人员判断组号为_ _ _ _ _ _的细胞是杂交细胞,并使用PCR方法进一步鉴定牙齿细胞。放大PCR牙齿DNA时,分别为_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _和,5(2016年海淀期)研究人员利用野生型二倍体马铃薯(2n=24)和耐青马病的二倍体茄子(2n=24)进行体细胞杂交,种植耐青马病的马铃薯。(1)研究人员在自然界中,土豆和茄子之间,分别使用_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _(2)土豆和茄子的叶子融合土豆和茄子的原生质体,在培养基上培养细胞,在培养基上培养_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _结果如下。根据上述结果,马铃薯-茄子四倍体融合细胞的DNA相对含量约为_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _。图中的结果显示,杂交植物B必须是_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _
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