实验四五六球菌ppt课件

1、1,.,实验四 球菌,引起人类化脓性感染的主要细菌，又称化脓性球菌 常见有： 葡萄球菌属 链球菌属 肠球菌属 奈瑟菌属,2,.,菌种,葡萄球菌属：金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球 菌、腐生葡萄球菌 链球菌属：甲型溶血型链球菌、乙型溶血性链球菌、肺炎链球菌 奈瑟氏菌属：微黄奈瑟氏菌 肠球菌属,3,.,葡萄球菌属,菌种： 金黄色葡萄球菌 表皮葡萄球菌 腐生葡萄球菌,4,.,实验目的,掌握葡萄球菌属的分离培养方法与鉴定方法 掌握葡萄球菌属的菌落特点 菌体形态及染色性,5,.,实验内容,细菌菌落形态及色素的观察 做GS染色，镜下形态的观察 接种血平板，观察细菌的生长表现、色素及 溶血 生化反应： 1.触酶试

2、验 2.血浆凝固酶试验 3.甘露醇试验,6,.,实验器材,菌种、血平板、血浆、3%H2O2、甘露醇培养基、滤纸片、玻片、擦镜纸、吸水纸、污物缸等,7,.,细菌菌落形态及色素的观察: 单个菌落为中等大小,圆形,表面光滑,边缘整齐,不透明,产脂溶性色素.,金黄色葡萄球菌呈金黄色菌落,有-溶血环,8,.,葡萄球菌镜下形态的观察,革兰阳性,无芽胞无鞭毛,葡萄堆状排列,9,.,生化反应,触酶试验： 原理：某些细菌能产生过氧化氢酶，将对细菌有害的H2O2 分解成H2O、O2 方法：在洁净载玻片上，滴加3% H2O2溶液12d,用接种环 挑取普通琼脂上的菌落，观察结果。 结果：产生大量气泡者（+），不产生气

3、泡者（） 鉴别：葡萄球菌（+）、链球菌（）,10,.,血浆凝固酶试验： 原理：金黄色葡萄球菌能产生血浆凝固酶，可使血浆中可溶性的纤维蛋白原变为不溶性的纤维蛋白，结合型血浆凝固酶附着于细菌表面，在玻片上形成凝块；游离型的血浆凝固酶则可使试管中的血浆发生凝固。试管法37 孵育0.5h. 方法（玻片法）： 对照区 试验区,生理盐水 血浆 细菌 细菌,结果：出现凝集现象者为阳性。 鉴别: (金+表-腐-),11,.,甘露醇发酵试验： 原理：致病性葡萄球菌多能发酵甘露醇产酸，使培养基 由紫色变为黄色 方法: 将3种细菌分别接种于甘露醇发酵管，35孵育 1824h,观察结果。 结果判断：培养基浑浊，由紫色

4、变为黄色（+） 仍为紫色（-） 鉴别： 金黄色葡萄球菌（+） 表皮葡萄球菌（-） 腐生葡萄球菌（-）,12,.,思考题： 为什么甘露醇试验阳性是黄色？,13,.,链球菌属,菌种： 甲型溶血型链球菌 乙型溶血型链球菌 肺炎链球菌,14,.,实验目的,掌握链球菌属的分离培养与鉴定方法 掌握链球菌的菌落特点、菌体形态及染色性,15,.,实验器材,菌种、GS染液、血平板、菊糖发酵管、10%去氧胆酸钠溶液、optochin药敏纸片、杆菌肽药敏纸片、小鼠、1ml注射器、剪刀镊子、滤纸片、玻片、吸水纸、擦镜纸、牛皮纸、棉签等,16,.,实验内容,细菌菌落形态及溶血的观察 做GS染色，镜下形态的观察 生化反应

5、试验： 1. 杆菌肽敏感试验 2. CAMP试验 3. Optochin试验 4. 胆汁溶菌试验 5. 菊糖发酵试验 6. 小白鼠毒力试验,17,.,细菌菌落形态及溶血的观察 1.灰白色、圆形凸起、表面光滑、边缘整齐的针 尖样大小菌落，菌落周围出现不同的溶血 2.根据血平板上的溶血情况分：,甲型():草绿色溶血环,18,.,丙型():无溶血环,乙型():透明溶血环,19,.,细菌镜下形态观察,革兰阳性球菌、圆形或卵圆形、成双或呈链状排列,肺炎链球菌成双排列，细菌形似矛头，周围有空晕，此为荚膜。,20,.,生化反应,1.杆菌肽敏感试验： 原理：A群化脓性链球菌对杆菌肽几乎 100%敏感， 而其他

6、 链球菌对杆菌肽通常耐药。故此试验可对A群化脓性 链球菌进行鉴别。 方法：挑取被检的链球菌菌落，密集涂布于血琼脂平板上， 将杆菌肽纸片贴于血琼脂平板上，35孵育1824h 观察结果(培养不需要放CO2)。 结果：在杆菌肽纸片周围出现抑菌环为敏感， A群（+），其他群链球菌（-）,21,.,2.CAMP试验： 原理：B群溶血性链球菌能产生“CAMP”因子，该物质可促进 金黄色葡萄球菌溶血素的活性，故在血琼脂平板上两 种细菌交界处溶血能力增强，形成箭头状透明那个溶血 区。,方法：在血平板上，用金 葡菌划种一条横 线， 再将被检菌距金葡菌 接种线3mm处呈直角 接种一短线，35培 1824h观察结果

7、。 结果：如图,22,.,3.Optochin 敏感试验： 原理：Optochin （乙基氢化羟基奎宁），能干扰肺炎链 球菌叶酸合成，抑制该菌的生长，故肺炎链球菌对 Optochin 敏感，而其它链球菌对其耐药。 方法：挑取待检菌密集划线接种于血琼脂平板上，贴放 Optochin纸片，35孵育1824h ，观察 抑菌环。 结果：抑菌圈直径14mm为敏感，肺炎链球菌（+） 抑菌圈直径14mm时，参照胆汁溶菌试验判断是 肺炎链球菌还是甲型溶血性链球菌,23,.,4.胆汁溶菌试验 原理：胆汁或胆盐能活化肺炎链球菌的自溶酶，促进细菌 细胞膜破损或菌体裂解而自溶。 方法（平板法）：在血琼脂平板上选择出待

8、检的呈草绿色 溶血的菌落，观察记录菌落特点，然后于菌落上滴1 滴100g/L去氧胆酸钠溶液，35孵育1530min 观察 结果。 结果：菌落消失为阳性，菌落不消失为阴性。 肺炎链球菌（+）、甲型链球菌（-）,24,.,5.菊糖发酵试验： 原理：各种细菌含有分解不同糖（醇、苷）类的酶，因 而对各种糖（醇、苷）类的代谢能力也各不相同， 即使能分解某种糖（醇、苷）类，其代谢产物可因 菌种而异。检查细菌对培养基中所含糖（醇、苷） 降解后产酸或产酸产气的能力，可用以鉴定细菌种 类。方法：将待检的细菌分别接种到菊糖培养基中，置35， 5%CO2条件下，孵育1824h观察结果。 结果：能分解糖（醇、苷）产酸

9、的细菌，培养基中的指示 剂呈酸性反应（如酚红变为黄色），不分解糖则无 变化。 肺炎链球菌（+）、甲型链球菌（-）,25,.,6.小白鼠毒力试验： 原理：小白鼠对肺炎链球菌十分敏感，少量有荚膜的肺炎 链球菌可使小白鼠感染致死。 方法:将平板上的肺炎链球菌用无菌生理盐水洗下，取0.1ml 注射于小白鼠腹腔，饲养12d，观察小白鼠情况。 结果：若小白鼠在12d内死亡为阳性，解剖腹膜印片、革 兰染色法镜检可见革兰阳性、有荚膜的双球菌。,26,.,奈瑟氏菌属,菌种：微黄奈瑟菌（代替脑膜炎奈瑟菌） 实验目的：掌握脑膜炎奈瑟菌的形态和培养特性。 实验内容：1.培养特性和菌落观察：营养要求高，接种血平 板或巧

10、克力平板，置35 ，5%CO2条件下， 孵育1824h观察结果，可见圆形突起、光滑湿 润、无色透明、边缘整齐、似露滴状 ，直径 为23mm。 2. GS染色，形态观察： G-双球菌、肾形、成双排列、凹面相对。 3.生化反应： 氧化酶试验。 4.淋病奈瑟菌示教片。 实验器材：菌种、氧化酶试剂、滤纸片等,27,.,氧化酶试验: 原理：某些细菌具有氧化酶，能将盐酸二甲基对苯二胺 或（盐酸四甲基对苯二胺）氧化成紫红色（蓝色）的醌类化合物。 方法：用滤纸条蘸取被检菌落少许，用滴管吸取氧化酶试 剂，滴加于滤纸条菌落上，观察颜色变化。 结果：阳性者立刻出现红色(蓝色)，继而逐渐加深，阴性不变色。 脑膜炎奈瑟菌（+）,28,.,淋病奈瑟菌示教,革兰染色阴性、肾形双球菌，无芽胞无鞭毛。,29,.,总结,球菌的鉴定程序,30,.,后面内容直接删除就行 资料可以编辑修改使用 资料可以编辑修改使用,31,.,主要经营：网络软件设计、图文设计制作、发布广告等 公司秉着以优质的服务对待每一位客户，做到让客户满意！,32,.,致力于数据挖掘，合同简历、论文写作、PPT设计、计划书、策划案、学习课件