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文档简介

1、实验二,人体x-染色质的观察,一.实验目的,观察与区别X染色质：通过实验初步掌握简易方法，识别其形态及所在部位，为进一步研究人体染色质的畸变与疾病提供参考条件。,二.实验原理,1949年Barr等发现，在雌猫的神经细胞核内有一个凝缩的深染小体，而在雄性的细胞中没有。 后来了解，在雌体中的两条X染色体在间期时有一条(或这条的大部分)处于凝集而不活动状态，从而形成了这种X-染色质(或称性染色质、Barr小体)。,进一步发现，所有哺乳类雌体细胞中都有一条这种表现的X染色体； 在个别的雌或雄体中，有多于2条X染色体时，在间期细胞内除一条外，其余都将形成X-染色质(Barr小体)，以维持剂量补偿。,Ly

2、on假说： 1961年由Lyon提出，又称单个活性X染色体假说。 1正常雌性哺乳动物的体细胞中，两条X染色体中只有一条有活性(activation X, Xa)，另一条失活(inactivation X, Xi)； 2失活是随机的； 3失活发生在胚胎发育的早期； 4杂合体雌性在伴性基因的作用上是嵌合体(mosaic)。,人类正常的男女体细胞中，分别有XY和XX性染色体，女性的两条X染色体中，在间期也有一条不表现活性而保持浓缩状态，因此易于用适当的染料加以显示，成为便于观察的X-染色质（Barr小体）。, X染色质的形态：,1.结构致密的浓染小体，轮廓清楚； 2.大小约1u左右，常附着于核膜边缘

3、或靠近内侧； 3.其形状有微凸形、三角形、卵形、短棒形及双球形；,三.实验材料,1.女性口腔颊部黏膜细胞 2.毛发根部细胞,四.实验仪器及试剂,仪器:显微镜 试剂: 1N盐酸、蒸馏水、改良苯酚品红,五.实验方法和步骤,1.口腔颊部黏膜细胞的观察： a.刮取口腔黏膜细胞: 漱口，用牙签从女性口腔两侧颊部刮取上皮黏膜细胞，原位刮2-3次，分别涂抹在干净载片上，每次可涂1-2片，涂抹范围约盖片大小(男性做对照)。 b.染色: 待稍干后，滴加1-2滴改良苯酚品红，染色10-15分钟。,c.压片: 加盖片，覆以吸水纸，用手指轻度压片。 d.镜检: 镜下检测典型的可数细胞，标准是： 核质呈网状或细颗粒状分

4、布； 核膜清晰、无缺损； 染色适度； 周围无杂质。,2毛发根部细胞的观察： 拔取一根带有毛根的头发，自基部截取2cm左右置载片上，再加一滴1N盐酸解离5-7分钟，待毛根后鞘软化后拔去毛干，蒸馏水清洗3-5次，滴加一滴染液染10-15分钟，吸取多余的染料，再覆以盖片，隔一片吸水纸用手指轻度加压后镜检。,六.实验结果,1.观察50个女性可数细胞，同时观察50个男性者为对照，分别计算显示X-染色质细胞所占的百分比。 2.观察中选绘4-5个典型细胞，示明X-染色质的形态部位。,Barr小体,Barr小体,七 .实验分析与讨论,1.分析此次实验成败的原因。 2. 此次实验有哪些地方可以改进?,八.思考题,为什么雄性的一条X-染色体不浓缩？它的合

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