实验设计(硕士).ppt

1、A,1,实验设计一、实验设计概论（一）概念（二）重要性及意义二、实验设计原则三、实验设计三要素四、实验设计内容（一）课题研究设计（二）实验操作设计1.基本程序2.具体步骤和注意事项五、计算机在科学研究中的应用,A,2,一、概论（一）概念实验设计:是从事科学研究的设想和计划是进行科学研究必须首先经过的步骤也是能否达到研究目的的关键所在包括课题研究设计和实验操作设计,A,3,（二）重要性和意义良好的设计是成功的一半能否达到研究目标的关键所在设计按设计操作结果目标蛋白检测技术：ELISAWesternBlot免疫组化放免检测抗体芯片免疫共沉淀,A,4,二、实验设计原则1.为目标服务2.简捷化的原则用

2、简单的方法能解决的问题不要用复杂的方法以节省时间和经费3.要有创新意识学术思路创新技术方法创新研究有所发现和突破4.可行理论基础实践条件,A,5,三、实验设计三要素1.分组随机化避免偏倚2.设置对照组通过比较得结论，认识规律和特点3.实验的可重复性样本量的问题普遍规律：个别一般,A,6,四、实验设计的内容（一）课题研究设计研究生开题报告、课题研究计划1.选题方面在充分调研了解某项目研究的目的和意义、国内外研究动态的基础上，立题科学性、迫切性和实用性,A,7,2.明确研究目标从事科学研究要解决的问题，达到的目标3.确定研究内容研究内容为研究的核心，内容为目标服务4.选定研究方法据研究内容而定，方

3、法为内容服务不能为方法而方法5.解决关键技术内容创新的关键，技术创新的主要内容。,A,8,6.可行性分析不仅要创新，而且可行，缺一不可技术路线可行研究方法可行7.工作基础预实验研究内容研究方法,A,9,8.条件保障实验室建设仪器设备情况9.课题组成员人在科学研究中起决定作用周密的实验，无人无法进行,A,10,（二）实验操作设计研究生一定要掌握1.基本程序熟悉观察指标确定研究方法查阅资料，熟悉该研究方法的各项内容确定实验流程物品、器材准备试剂配制实验操作程序实施结果判定、记录数据处理,A,11,2.具体步骤和注意事项（1）明确观察指标了解课题研究的整体设计关键是明确要解决的问题明确研究内容根据研

4、究内容确定观察指标,A,12,（2）选择合适的技术方法简单、创新、可行基因检测技术PCR：扩增杂交：膜杂交：SouthernBlotNorthernBlot原位杂交基因芯片：集成化,A,13,（）熟悉技术方法的有关知识原理：明白为什么能用此方法解决问题如PCR原理：DNAn扩增核酸分子杂交探针标记步骤：不仅知道如何做还知道为什么这么做（howandwhy),A,14,A,15,关键步骤：实验成败的关键改建创新技术方法结果判定阳性与阴性结果的判定与分析真假阳性与意义如何避免、克服和改进,A,16,（）关于试剂配制问题整个实验的关键一旦试剂配制不当会导致整个实验的失败如：抗凝剂凝血有核细胞分离,A

5、,17,选对试剂：磷酸盐，Tris-HCl,钠盐是否含水，分子量是多少浓度：原装试剂纯度与浓度不一定是100%如：盐酸，甲醛稀释的倍数关系：抗体等,A,18,Ph值：适宜AP-碱性（8.2）HRP中性（7.4）多聚甲醛配制（8.0）溶液：水（最常用）甲醇和乙醇等,A,19,消毒、灭菌问题是否要求无菌操作高压灭菌应用于能耐高温试剂，如盐溶液过滤除菌应用于不耐高温试剂，如蛋白制剂,A,20,试剂储存问题避免蛋白制剂的反复冻融温度：室温，-20-80，-180时间：有效期，半衰期过滤,A,21,（）操作流程物品器材准备充分有条不紊，避免随用随抓的坏习惯无菌问题,A,22,边做边思考明白每一步所起作用

6、假如去掉此步，会有什么影响假如改进此步，会有什么效果技术改进与创新的基础加样要看清试剂否则导致整个实验失败,A,23,做上一步要想到下一步如何做提前做好准备，避免手忙脚乱如冰冻切片后固定，要提前配好固定液结果要妥善保管，及时记录保密，丢失阳性结果丧失如荧光染色及时照相，因结果不稳定,A,24,根据需要设置对照实验保证结果的科学性和可信性1.阴性对照2.阳性对照3.空白对照4.溶液对照：配试剂的溶液5.参比标准对照：用标准的药物做对照6.质控对照：控制实验稳定性对照,A,25,（）记录与归档包括结果观察和实验方法两部分应一并归档边做边记录，避免归档时重整理蓝黑或黑墨水记录切忌用圆珠笔记录，否则，

7、无法归档打印原件归档,A,26,实验记录的基本要求真实、及时、准确、完整谨防随意乱记和随意涂改更不能伪造，编造数据实验记录的内容实验的名称、目的、设计方案、时间材料、方法、过程、观察指标实验结果及分析等,A,27,（7）数据处理问题要贯彻在研究工作的全过程利用计算机进行分析处理在数据处理过程中，善于发现问题反馈修正研究和设计中的不足边实验边处理数据不易遗漏和丢失数据若待实验结束后再处理、整理数据往往会发现重要数据的丢失,A,28,（8）在整个实验过程中注意发现新现象和意想不到的结果重大的发现往往在偶然中获得的不应删改实验记录，一定要真实,A,29,五、计算机在科学研究中的应用1.查阅资料（internet)2.实验设计(words)3.实验记录（Exce