DB22T 3680-2024实验用水貂 胚胎采集及移植技术规程

22Technicalcodeofexperimentalminkembryocollectionandtransfer2024-12-31发布DB22/T3680—2024I请注意本文件中的某些内容可能涉及专利。本文件的本文件主要起草人：刁云飞、李晓霞、许保增DB22/T3680—20241实验用水貂胚胎采集及移植技术规程冲胚液embryoflushingm用于采集胚胎时，将胚胎从输卵管或子宫角中冲洗出体外并提供保护的化胚胎保存液embryopreservationme用于暂时保存采集到的胚胎，提供营养、保护的4技术流程冲胚、胚胎收集、胚胎质量鉴定、胚胎移植。实验用水貂胚胎采集及移植技术流程见图2(见第5章)(见第7章)(见第8章)(见第9章)(见第10章)(见第11章)(见第6章)(见9.1)(见9.2)(见9.3)体况健康良好，生殖机能正常，且处于发情期。6.1.2水貂手术前应禁食6h~12h。丸及输精管暴露。36.2.3将睾丸放回阴囊内，使用可吸收外科缝合线将切口进行缝合，用5%碘酊消毒。将供体水貂与种公貂同笼配种，交配完成后及时将供体水貂放回原笼内。每天1次，连续交配2d。8.1.1药品及试剂包括麻醉药、苏醒药，器材的选择参见表A.1。8.1.2供体水貂第二次交配后第2d进行输卵管采集。8.1.3术前禁食6h~12h。8.1.4供体水貂麻醉按6.1.3执行。8.1.5对麻醉后的水貂腹中线倒数第二乳头处进行备皮，先用5%碘酊进行消毒，再用75%酒精脱碘。8.2.1在腹中线倒数第二乳头处做一个2cm左右切口，将两侧子宫角、输卵管、卵巢暴露，观察左用5%碘酊消毒。9.1冲胚将8.2.1采集到的输卵管放在平皿里进行冲胚。使用无针头注射器吸入5mL冲胚液(冲胚液配制方法参见表B.1),安装冲胚针从输卵管伞口处插入，用镊子将包裹冲胚针处的输卵管夹紧，将5mL在体式显微镜下收集冲胚液中的胚胎。将收集到的胚胎放入胚胎保存液中(胚见表B.2)。在无菌操作室内，将存放胚胎的平皿放在37℃恒温板上，体视显微镜下检查、对胚胎质量进行分级、鉴定胚胎发育阶段并记录，记录表见C.1。放入38.5℃、5%CO₂浓度的饱和湿度培养箱中保存DB22/T3680—202449.3.2胚胎质量分级9.3.2.2胚胎可分为A、B、C、D四个等级，A级、Ba)A级：胚胎发育阶段与胚龄一致，轮廓清晰，卵周隙适中，若2细胞期则分裂球大小均匀、c)C级：胚胎发育阶段与胚龄不太一致，轮廓尚清晰，细胞球收缩较大或膨胀过大，卵周隙大d)D级：胚胎发育阶段与胚龄不一致，轮廓不清晰，细胞膜破10.1.2将与供体水貂同期发情的受体水貂与结扎公貂同笼交配刺激排卵，10.1.3受体水貂麻醉操作方法按6.1.3执行，备皮、消后将胚胎移植针缓慢拔出。按照同样方法将5枚胚胎移植入另一侧输DB22/T3680—20245公貂结扎、供体输卵管采集、胚胎收集、受体胚胎移植----针口外径不能大于1.5mm，内径不能小于DB22/T3680—20246B.1冲胚液的推荐配方及配制方法见表B.2胚胎保存液的推荐配方级配制方法见表DB22/T36