《动物实验技术》课件-任务1：小鼠脓毒症模型病理切片的HE染色与检测分析

动物实验技术HE染色小鼠肝组织200倍镜下视野染色前染色后显微镜下的”万花筒“病理切片染色是指利用特定的染料对组织或细胞中的结构和成分进行着色，以便在显微镜下观察和分析其形态学特征的常规实验室技术。通过不同染料，在展示细胞结构的基础上，不仅可以通过不同颜色显示纤维结缔组织、肌肉组织、神经组织、血液和淋巴组织、骨和软骨组织等；可用于脂质、糖类、蛋白质和核酸、色素、淀粉样物、无机物、神经内分泌颗粒和其他细胞器、病原微生物等的观察；在科学研究与临床疾病诊断、治疗中发挥重要作用。二、任务所需试剂与耗材实验动物昆明小鼠，5只/组；SD大鼠，3只/组试剂无菌生理盐水，50ml/组防护手套2套/组器材1ml注射器，5支/组显微镜下的”万花筒“HE-肺-小鼠（肺结节转移）HE-肝-小鼠（肝纤维化）HE-海马-大鼠HE-结肠-小鼠HE-肾-大鼠显微镜下的”万花筒“应用1.癌与肉瘤的鉴别；2.骨基质内有网织纤维，浓缩的分泌物、血浆或水肿液无网织纤维；3.炎细胞与癌细胞的鉴别；4.是生前坏死、还是死后自溶的鉴别；5.血管性肿瘤的鉴别；6.肝硬化以及慢性肝炎肝细胞碎片状坏死或纤维化的诊断；7.萎缩性胃炎的诊断；8.有助于癌浸润的诊断·胶原纤维染色应用主要用于观察肾小球基底膜、结肠杯状细胞中性黏液物质，以及用于某些肿瘤的鉴别诊断等。·粘液染色“大名鼎鼎”的HE染色·染色原理苏木精—伊红染色法(hematoxylin-eosinstaining)，简称HE染色法，石蜡切片技术里常用的染色法之一;HE染色法是组织学、胚胎学、病理学教学与科研中最基本、使用最广泛的技术方法。苏木精碱性酸性物质（嗜碱性）细胞核内染色质及胞质内的核酸结合伊红酸性细胞质及细胞外基质结合碱性物质（嗜酸性）最终结果最终结果蓝紫色红色实验所需仪器、试剂与耗材·仪器设备·试剂配置（1）二甲苯（Ⅰ、Ⅱ）各300ml、70%/80%/90%梯度乙醇溶液各300ml，无水乙醇；（2）苏木精染色液，伊红染色液，1%盐酸酒精溶液（3）中性树胶·所需耗材玻片架，盖玻片通风橱，烘箱，显微镜总结分化作用：染色后，用某些特定的溶液将组织过多结合的染色剂脱去，这个过程称为分化作用，所用的溶液称为分化液。HE染色中用0.5%盐酸-乙醇作为分化液，因酸能破坏苏木精的醌型结构，使组织与色素分离而褪色。经苏木精染色后，必须用0.5%盐酸-乙醇分化，使细胞核过多结合的苏木精染料和细胞浆吸附的苏木精染料脱去，在进行伊红染色，才能保证细胞核与细胞浆染色的分明。分化是HE染色中极为关键的一步。返蓝作用：分化之后，苏木精在酸性条件下处于红色离子状态，呈红色，在碱性条件下处于蓝色离子状态，呈蓝色。组织切片经0.5%盐酸-乙醇分化后呈红色或粉红色，故分化之后应立即用水出去组织切片上的酸而终止分化，再用弱碱性水使苏木精染上的细胞核呈现蓝色，这个过程称为返蓝作用或蓝化作用。总结脱蜡水化苏木素染核HE染色流程分化反蓝伊红染质脱水透明封片三、靶向定位、综合提升了解病理切片染色的重要意义与广泛应用掌握HE染色原理及其重要性·知识目标做好个人防护；能熟练完成多种病理切片HE染色工作任务·能力目标不断磨砺技术技能，积极思考、深入探索，解决实际工作中的具体问题，培养岗位技术技能·素质目标学习目标了解病理切片染色的重要意义与广泛应用掌握HE染色原理及其重要性·知识目标做好个人防护；能熟练完成多