SCI论文写作与投稿 第2版-课件 5-SCI论文结果与讨论写作(一)

5SCI论文结果与讨论写作（一）SCI论文写作与投稿5.1结果的内容与结构5.2结果的写作要求5.3结果写作的常见问题5.4结果写作实例评析5.5“材料与方法”“结果”对比5SCI论文结果与讨论写作（一）第2页2025年3月31日SCI论文写作与投稿1）结果的内容

论文主题研究的直接、显式发现（原始结果），包括研究简述和结果报告。（1）研究简述。对某研究作不带细节的简洁描述或介绍，涉及主题、目标、对象、方法、常识、特例等：对象包括对象设置、样本选取或制备，涉及数量、时间、实验次数、范围、成员、储存等，常识包括概念、原理、知识等介绍。常识在表面上不属结果，却是结果写作较重要的内容，缺少这部分内容而直接展示或描述结果，会让读者有突兀之感，易造成阅读障碍，必要的常识是结果写作的重要内容。结果与方法密切对应，方法产生结果，结果来自方法，结果一定是针对某一特定方法使用的具体结果，方法有某种调整或变化，对应的结果就随着发生相应变化。最核心的内容应是对方法的描述，不是详写方法具体内容与步骤，而是提及方法名称或对方法简要交待，通常用简短语句（一两句话）交待用了什么方法即可，必要时可辅以常识。这里的方法是以下结果报告中描述的结果的来源。

5.1

结果的内容及结构第3页（2）结果报告。结果描述，对研究简述的研究所获得的原始结果详细描述，是经过某种处理而形成的与主题、方法对应的主要处理结果。相对随后对其进行讨论而得出的新结果（讨论结果，研究结果）也一种原始结果。原始结果一般是直接、明显、具体、肤浅、感性，多用图表显示，加上文字表述；讨论结果通常是间接、隐含、抽象、深奥、理性的，常用文字表述（宜定性和定量相结合）。原始结果用图表显示形成图表结果，用文字表述形成文字结果。文字表述可从不同层次、方面来进行，如说明、对比、解释、样本选取或制备等，即对原始结果以不同的文字表达方式从不同角度重新描述，就形成不同的文字结果类型，如说明结果、对比结果、解释结果、样本选取或制备结果等，本质上就是结果分析。其中不同层次、方面通常限于本原始结果范围内，即从多个不同角度来考察、分析结果。如果考察、分析的角度超出了本原始结果，比如加进了他人、作者前期相关研究结果以及知识、文献等来进行论证、整合或体系化，则属于讨论。结果有典型实例、案例的结果支撑时，论文的可信度、说服力会提升。

5.1

结果的内容及结构第4页2）结果的结构主题1（一级层次标题）研究简述（主题、目标、对象、方法、常识等）结果报告（图表结果、说明结果、对比结果、解释结果等）主题2（一级层次标题）研究简述（主题、目标、对象、方法、常识等）结果报告（图表结果、说明结果、对比结果、解释结果等）……主题n（一级层次标题）研究简述（主题、目标、对象、方法、常识等）结果报告（图表结果、说明结果、对比结果、解释结果等）主题1（一级层次标题）子主题1.1（二级层次标题）

研究简述（主题、目标……

）

结果报告（图表结果、说明结果……）子主题1.2（二级层次标题）

研究简述（主题、目标……）

结果报告（图表结果、说明结果……）……

5.1

结果的内容及结构第5页第6页

总结：结果的内容与结构（1）统筹确定主题。结果涉及多个主题及其分解，包含多个层次、类别的数据资料，层次、类别不同，结果的性质就不同，而具体性质又决定结果在讨论中的重要、详略程度及描述细节、表述手段。结果写作应统筹全文来确定主题，与前文材料与方法及后文讨论相结合，全盘考虑，系统关联，主次分清，让论文各个相关部分贯通、协调、对应而自成一体。

（2）确定层次标题。结果表达分若干段，一段对应一个主题，或为层次标题形式，每个标题有一段或几段，对应一个主题。标题与主题密切相关，主题可成为标题或包含在标题中。按主题重要、复杂程度及类别等对结果布局，从最重要到最不重要、由简单到复杂、按研究问题逻辑关系、按类别相同或差异性排列，与材料与方法、讨论中的相应标题基本对应。

5.2

结果的写作要求第7页（3）避免重复表述。论文中有些内容可能有交叉，既可写到这部分，也可写到那部分，最终写到哪部分，取决于论文内容布局和结构安排，布局和安排不当就会造成重复。结果写作须明确哪些内容纳入结果，哪些放到讨论，前者通常只描述结果而不解释，但后者须解释，且解释越详细、深入越好，并与已有成果比较，解释，但不必与结果中已详述的内容重复。（4）科学整理数据。对数据选用合适方法按轻重、主次做科学分类、整理，提炼、取舍，避免所有数据全盘托出，或只选取符合自己预期的数据。对异常数据给予说明，除非有确凿证据表明其错误方可舍去。对过多出现的数据可考虑以补充部分的形式呈现。考察数据的准确、详实、一致及相关性。准确指真实，不伪造和篡改数据；详实指完整，不隐瞒或遗漏数据；一致指同一，不出现前后矛盾的数据；相关指相扣，不出现与主题无关的数据。

5.2

结果的写作要求第8页（5）客观描述结果。对各主要方法及由其获得的现象、数据客观真实地从多个角度、层面来描述，基本按结果的内容及结构来行文，如研究简述和结果报告，最好有典型实例（常见例证）、最佳案例（理想例证）结果的支撑。（6）表述言简意赅。结果的内容取自基础科研活动，较为全面、详细，主题或目的可能不够集中，表述也较为随意，但经过了处理、分析后的结果，内容上有所聚类、凝练、集中，对其表述应简洁、严谨、概括。不要简单堆积实验记录、数据或观察、调查事实，而要突出有代表性和科学价值的数据，重要数据详述，一般数据简述，可有可无数据去掉。

5.2

结果的写作要求第9页（7）取舍文字图表。采用文字、图、表多种方式表示结果，文字优先。数据较少时，如对少量测定结果，宜用文字；数据较多时，宜用图表。图表数据通常应完整、全面，再配以文字说明、总结，指出数据所蕴含的特性、趋势、意义，但避免赘述，忌用冗长语句介绍、解释图表。对相同的数据用文字、图、表同时表述时，不要重复过多，但可以少量重复，即应有所侧重，以一种方式为主。（8）淡化解释结果。原始结果属一手材料，结果写作侧重结果说明、分析，而不是结果解释，解释意味着融进了个人主观色彩，容易破坏结果的原始性。必要时可适当解释，描述结果间差异，帮助读者先清楚了解结果的意义。结果和讨论合写时，结果中常有详细的解释结果，但这种解释主要是针对讨论而出现的，属于讨论。

5.2

结果的写作要求第10页（9）避免讨论结果。结果侧重展现、展示，不是议事、说理。避免总结结果的启示，探究结果的机理，推理结果的意义，提出结果的展望。这些属于对结果的讨论和认识，对整个论文很重要，但论文核心毕竟在于“论”，通过对结果的讨论来提出新认识，因此这类内容应放在讨论部分，放在结果部分就会错位。

（10）正确使用单位。结果中往往有较多的量值（数据）展示、呈现，离不开数值和计量单位。

5.2

结果的写作要求第11页实验数据或图表结果太多，相应的分析结果、说明结果偏少或没有出现了不充分、不准确或不一致的数据，降低了研究结果的可信度用仿真结果代替实验结果和测量数据，结果作为论据的可靠性有限实验预测、测量结果不明确，同一量的测量数据的有效位数不一致正文与图和（或）表对同一结果或对象的展示、说明重复或不一致图特别是照片图的质量较差，字符、标尺等无法看清，多文种混用图表中的信息不能支撑论题、论点，出现了无关或可有可无的数据对结果展现、表述类别的区分认识不够，把对结果的分析当作讨论对结果的意义解释太多，加进过多的作者个人认识，主观色彩浓厚对常规结果对他人研究重要性的认识不够，忽视对常规结果的说明

5.3

结果写作的常见问题第12页H7N9virulentmutantsdetectedinchickensinChinaposeanincreasedthreattohumans

CellResearch,Vol.27,No.12,Dec.2017:1409-1421第13页

5.4

结果写作实例评析实例的结果部分（主题、层次标题）第14页结果实例主题1评析（一）目标：监测家禽中H7N9病毒的演变样本收集及处置：201307~201701，24省家禽市场、农场、野生鸟类栖息地和屠宰场，112593；接种到10日大鸡胚检测结果：①3664种流感病毒；293株H7N9已在17省分离出来；②6种从福建、广东、江苏和浙江鸡场采集样本中分离出来；

③其他病毒从活禽市场收集的样本中分离出来第15页结果实例主题1评析（二）目标：检测可能显著影响病毒生物特性的关键突变方法：对293种病毒的HA、PB2基因部分测序发现结果：①293种禽流感病毒中有280、266种在HA上分别有186V、226L突变，但无一种在PB2上有627K或701N突变；②在2017年广东的鸡体中分离出的7种病毒中，在HA裂解位点里有编码4种氨基酸(-KRTA-)的12种额外核苷酸(-aaacggactgcg-)第16页结果实例主题1评析（三）目标：研究病毒间的基因关系方法：对来自不同采样时间、地点和物种的83种代表性病毒测序病毒HA结果：①HA基因在核苷酸水平上共享88-100%的一致性，形成4个系统发育组；②第1组的HA共享超过97%的一致性，与2013/H7N9的HA聚合在一起；③其他3组HA属当时出现在中国且仅在鸭子中检测的病毒病毒NA结果：①NA基因在核苷酸水平上共享90-100%的一致性，形成3个系统发育组；②病毒6个内部基因表现出明显多样性，83种病毒的PB2、PB1、PA、NP、M、NS基因在核苷酸水平上共享84.8、88.6、86.8、86.4、88.5-100%的一致性；③PB1、NP分别在系统发育树中形成8个组，PB2、PA、M、NS形成6、9、5、4个组第17页结果实例主题1评析（四）基因组分类结果：①H7N9分为23种不同基因型；②主要病毒归为基因1、2型，分别在8、9个省检测到，其他病毒只在1～3个省检测到；③携带4种氨基酸插入其HA的7种病毒属于基因1~3型时间尺度系统发育分析结果：HA突变可能由两种不同H7N9病毒引起，其中一种与其他病毒重组会形成几种基因型第18页结果实例主题2评析已有结果：与鸡体高致病性H5和H7流感病毒有关的HA裂解位点里的最小序列是-BXBR-或-RXXR-[34,35]；新H7N9的序列是-KRTAR-，符合高致病性的-RXXR-的标准；并非有这些序列的所有H5或H7病毒都是鸡致病性的[36,37]事实：H7N9突变体从活禽市场健康鸡体分离出来目标：调查指数毒株CK/SD008毒性

方法：测试此毒株的静脉致病指数IVPI

[38]对象：10个6周大无特定病原体(SPF)鸡群材料：0.1ml1:10稀释无细菌尿囊液，含CK/SD008107.7鸡胚半数感染量EID50方法：静脉注射接种病毒结果：所有鸡接种24h后死亡，IVPI值3方法：收集3只接种病毒的鸡大脑和内脏，鸡胚病毒滴度结果：器官检测到接种病毒，平均滴度值5.3～7.9log10EID50/g方法：13只SPF鸡鼻内接种CK/SD008的106EID50；3只鸡接种3日后杀死，病毒滴定，另外10只鸡观察疾病和死亡迹象。结果：接种后鸡的咽部和泄殖腔拭子中能检测到病毒在鸡体系统复制；被观察的鸡在感染后4日内死亡结论：2013年中国出现的在2017年分离出的H7N9已突变为鸡高致病性毒株第19页已有结果：H5N1的HA裂解位点上的多重碱性氨基酸序列是对哺乳动物产生致命的先决条件[25,39]；但并非所有有这种序列的H5N1在哺乳动物中均是致命的[40,41]）目标：在HA中插入四胺基酸是否会增加H7N9在哺乳动物中的毒性方法：对HA插入的老鼠和雪貂测试病毒的复制和毒性：①3只6周BALB/c老鼠鼻内接种CK/SD008106.0EID50病毒，3日后杀死；②收集鼻甲、肺、脾脏、肾脏和大脑，病毒滴定；③5只老鼠组接种101.0-107.0EID50，确定病毒老鼠半数致死量MLD50，持续两周每天监测老鼠体重、疾病体征及死亡结果：①老鼠鼻甲和肺中有病毒复制，脾脏、肾脏或大脑中没有；②接种任何剂量病毒的老鼠中均未发现疾病体征或死亡情况，所有老鼠体重增加结论：CK/SD008的MLD50大于7.5log10EID50结果实例主题3评析第20页目标：评估雪貂体中的病毒复制方法：两只雪貂鼻内接种CK/SD008的106.0EID50，4日后收集器官，鸡胚病毒滴定结果：两只雪貂肺、扁桃体、大脑检测到CK/SD008，脾脏或肾脏中没有(与2013年H7N9禽流感病毒只在扁桃体和呼吸道复制不同[16])方法：①评估雪貂CK/SD008传播常规动物模型；②用未传播的CK/S1053作阴性对照；③三只雪貂组鼻内接种CK/S1053、CK/SD008的106EID50；④雪貂放在带有隔离器的不同笼子；⑤24h后将三只幼雪貂放在相邻笼子；⑥每两只雪貂用分隔物分开；⑥接种2日(暴露1日)后每隔2日收集雪貂鼻腔清洗液，评估病毒脱落；⑦接种14日后收集所有雪貂血清，血凝抑制抗体检测结果实例主题4评析结果：观察结束时，鼻腔清洗液有病毒，由暴露的幼雪貂的血清转化来，证实呼吸道飞沫传播①所有直接感染雪貂体内检测到病毒；②暴露9日从暴露在感染CK/SD008的3只雪貂中一只检测到低病毒滴度，暴露在感染CK/S1053的任一雪貂未检测到；③暴露或感染CK/SD008的雪貂体重减少1.9-8.2%，直接感染CK/S1053的下降4.0-4.6%；④每一直接感染组的两只雪貂体温升高；⑤血清转化发生在所有直接感染病毒的雪貂及暴露在感染CK/SD008的雪貂组的一只雪貂结论：CK/SD008在雪貂体低效呼吸道飞沫方式传播，与本课题2013年成果类似[16]第21页已有结果：PB2中两种氨基酸627K、701N对哺乳动物流感病毒的毒性和传播很重要，本课题以前成果(一些H9N2的内部基因与H7N9的相似，由雪貂感染后易获得PB2627K或701N突变，即PB2两种突变，简称PB2突变)；CK/SD008不含PB2突变目标：研究这些突变是否发生在CK/SD008在雪貂体内复制过程中方法：对接种4日后的雪貂器官及传播研究中的雪貂鼻腔清洗液中PB2基因测序结果：传播研究中直接感染的雪貂器官和鼻腔清洗液中含携带PB2突变的病毒；暴露的雪貂鼻腔清洗液中的病毒只含PB2627K突变。从家禽分离出来的H7N9中未检测到PB2突变，从人分离出来的648个H7N9中约有83%含有PB2突变结论：H7N9在人体复制过程中容易获得这些突变结果实例主题5评析新目标：评估CK/SD008在人体复制后获得突变的风险方法：对鸡胚有限稀释，从雪貂肺样本中提纯突变体结果：分析基因组序列，确认两种病毒，每种含一种PB2突变方法：进一步研究老鼠和雪貂结果：①PB2突变显著提升CK/SD008的聚合酶活性；②老鼠鼻甲和肺的PB2两种病毒滴度明显高于用CK/SD008接种的老鼠；③所有3只老鼠的大脑及1只老鼠的脾脏和肾脏中检测到PB2病毒；④PB2病毒造成严重疾病，在低剂量下致死老鼠(MLD50为1.8、3.4log10EID50)第22页方法：评估PB2两种病毒在雪貂体内的复制（对接种PB2病毒与CK/SD008的雪貂的器官组织嗜性、病毒滴定进行比较，研究其在雪貂的呼吸道飞沫传播）结果：①直接感染组中，所有雪貂均检测到病毒；PB2/627K暴露组中，在一只暴露1日后的雪貂和另外几日测试的所有三只雪貂检测到病毒；PB2/701N暴露组中，在一只暴露3、5日后的雪貂和两只暴露7、9日后的雪貂检测到病毒。②一只感染PB2/627K的雪貂在接种7日后体温升高，但在感染PB2/701N的雪貂中未检测到明显体温变化。③直接感染病毒的雪貂有11.3～28.9%的体重下降。④一只接种PB2/627K的雪貂显示出严重疾病(震颤和斜颈)，接种10日后开始瘫痪(杀死)；一只接种PB2/701N的雪貂病得很重，10日后死亡。⑤所有接种、暴露的雪貂中均发生血清转化方法：重复PB2/627K雪貂传播实验，将CK/S1053、A/Anhui/1/2013(AH/1)作为阴性、阳性对照结果：没有检测到CK/S1053传播，但检测到PB/627K、AH/1传给了所有三只雪貂结论：新鸡致命性H7N9在老鼠中高度致命，在PB2获627K或701N突变后，在雪貂中传播更有效结果实例主题6评析第23页已有结果：受体结合偏好对流感病毒传播很重要，在HA的G186V、Q226L中的两种氨基酸突变出现在本研究中分离出的H7N9禽流感病毒的90%以上，这两种氨基酸在H7禽流感病毒与人类受体结合的过程中起着关键作用[18]方法：测试CK/SD008及在2013年分离出来的携带HA186V、226L的两种病毒CK/S1053和AH/1的受体结合特性结果：CK/SD008和CK/S1053、AH/1与α2,6-siaylglycopolymer（人类受体）的结合比与α2,3-siaylglycopolymer（禽类受体）的结合更有亲和力结果实例主题7评析第24页已有结果：热稳定性对某些高致病性H5N1实验室适应性病毒的传播有重要意义[6]方法：对包括本传播研究中使用的五种H7N9病毒、一种2016年的H7N9禽流感病毒和一种H5N1禽流感病毒在内的七种流感病毒的热稳定性与2009年的H1N1大流行性流感病毒(SC/1)进行比较，并使用Imai等[6]所述的方法结果：2013年的两种H7N9禽病毒CK/S1053、AH/1比人病毒SC/1更不稳定，但CK/SD008及其PB2突变体连同2016年的H7N9、H5N1有与SC/1相近或更强的热稳定性结果实例主题8评析第25页第26页

6.5

“结果”“材料与方法”对比“结果”与“材料与方法”内容类别对比MaterialsandMethodsResults第27页结果主题1与“材料与方法”主题3对比1.H7N9禽流感病毒监测和遗传分析(1)目标：监测家禽中H7N9病毒的演变样本收集及处置：201307~201701，24省家禽市场、农场、野生鸟类栖息地和屠宰场，112593；接种到10日大鸡胚检测结果：①3664种流感病毒；293株H7N9已在17省分离出来；②6种从福建、广东、江苏和浙江鸡场采集样本中分离出来；

③其他病毒从活禽市场收集的样本中分离出来目标：检测可能显著影响病毒生物特性的关键突变方法：对293种病毒的HA、PB2基因部分测序发现结果：①293种禽流感病毒中有280、266种在HA上分别有186V、226L突变，但无一种在PB2上有627K或701N突变；②在2017年广东的鸡体中分离出的7种病毒中，在HA裂解位点里有编码4种氨基酸(-KRTA-)的12种额外核苷酸(-aaacggactgcg-)3.样本收集和病毒隔离样本制备：201307～201701、112593个、分类(鸟的环境、泄殖腔和气管拭子)、24省、来源(活禽市场、家禽养殖场、家禽屠宰场、野生鸟类栖息地粪便)隔离方法：放置在最低基本培养基中，接种到鸡胚，收集尿囊液，检测鸡红细胞HA活性隔离材料：样本收集管、青霉素、链霉素、基本培养基、鸡胚、抗血清、禽流感病毒等，涉及数量，适用范围，具体方法(接种、收集、检测、直接测序)、环境条件(温度、时间)等ResultsMaterialandMethods第28页结果主题1与“材料与方法”主题4对比H7N9禽流感病毒监测和遗传分析(2)目标：研究病毒间的基因关系方法：对来自不同采样时间、地点和物种的83种代表性病毒测序病毒HA结果：①HA基因在核苷酸水平上共享88-100%的一致性，形成4个系统发育组；②第1组的HA共享超过97%的一致性，与2013/H7N9的HA聚合在一起；③其他3组HA属当时出现在中国且仅在鸭子中检测的病毒病毒NA结果：①NA基因在核苷酸水平上共享90-100%的一致性，形成3个系统发育组；②病毒6个内部基因表现出明显多样性，83种病毒的PB2、PB1、PA、NP、M、NS基因在核苷酸水平上共享84.8、88.6、86.8、86.4、88.5-100%的一致性；③PB1、NP分别在系统发育树中形成8个组，PB2、PA、M、NS形成6、9、5、4个组基因组分类结果：①H7N9分为23种不同基因型；②主要病毒归为基因1、2型，分别在8、9个省检测到，其他病毒只在1～3个省检测到；③携带4种氨基酸插入其HA的7种病毒属于基因1~3型；时间尺度系统发育分析结果：HA突变可能由两种不同H7N9病毒引起，其中一种与其他病毒重组会形成几种基因型4.遗传和系统发育分析子对象1：H7N9的RNA目标：提取H7N9的RNA方法：完成RT-PCR、产品测序、使用引物序列、编辑核苷酸序列、分析系统发育、评估树拓扑、基因片段组分类材料：病毒提取试剂盒、基因特异性引物、生物系统DNA分析仪、DNAStar软件包Seqman模块、MegaClustalW软件包等子对象2：两组H7N9病毒目标：创建HA基因贝叶斯时间分辨系统树方法：分析核苷酸替换模型、对数正态分布式不相关松弛时钟、灵活有效种群容量树；运行MCMC链，每3000步取样；丢弃前10%老化样本；选择MCMC设置，实现200个参数岗位老化有效样本容量；评估数据材料：Tracer1.6的AICM模块ResultsMaterialandMethods第29页结果主题2与“材料与方法”主题6对比2.鸡体中H7N9HA基因突变CK/SD008的复制和毒性已有结果：与鸡体高致病性H5和H7流感病毒有关的HA裂解位点里的最小序列是-BXBR-或-RXXR-[34,35]；新H7N9的序列是-KRTAR-，符合高致病性的-RXXR-的标准；并非有这些序列的所有H5或H7都是鸡致病性的[36,37]事实：H7N9突变体都是从活禽市场中健康的鸡体分离出来的目标：调查CK/SD008毒性方法：测试CK/SD008的静脉致病指数IVPI[38]对象：10个6周大无特定病原体(SPF)鸡群材料：0.1ml1:10稀释无细菌尿囊液，含CK/SD008107.7鸡胚半数感染量EID50方法：静脉注射接种病毒结果：所有鸡接种24h后死亡，IVPI值3方法：收集3只接种病毒的鸡的大脑和内脏，鸡胚病毒滴度结果：器官检测到接种病毒，平均滴度值5.3～7.9log10EID50/g方法：13只SPF鸡鼻内接种CK/SD008的106EID50；3只鸡接种3日后杀死，病毒滴定，另外10只鸡观察疾病和死亡迹象结果：接种后鸡的咽部和泄殖腔拭子中能检测到病毒在鸡体系统复制；被观察的鸡在感染后4日内死亡结论：2013年中国出现的在2017年分离出的H7N9已突变为鸡高致病性毒株6.鸡研究目标：确定病毒的病原性、静脉致病指数(IVPI)对象1：13只鸡的组(①10只6周龄鸡+②3只接种病毒疫苗的死鸡的器官)方法：①放在隔离器的笼子，静脉接种，观察疾病或死亡；②接种病毒疫苗、收集死鸡器官、病毒滴定材料：①白色来亨鸡、无细菌含病毒尿囊液(0.1ml1:10稀释)；②CK/SD008、鸡胚对象2：13只鸡的组方法：鼻内接种(病毒疫苗)：①杀死3只(接种3日)，收集死鸡气管、泄殖腔拭子及器官，病毒滴定；②对其他10只观察疾病或死亡材料：①CK/SD008的106EID50病毒疫苗、鸡胚；②阴性对照鸡ResultsMaterialandMethods第30页结果主题3与“材料与方法”主题7对比3.H7N9病毒CK/SD008在老鼠体内的复制和毒性已有结果：H5N1的HA裂解位点上的多重碱性氨基酸序列是对哺乳动物产生致命的先决条件[25,39]；但并非所有有这种序列的H5N1在哺乳动物中均是致命的[40,41]）目标：在HA中插入四胺基酸是否会增加H7N9在哺乳动物中的毒性方法：对HA插入的老鼠和雪貂测试病毒的复制和毒性：①3只6周BALB/c老鼠鼻内接种CK/SD008106.0EID50病毒，3日后杀死；②收集鼻甲、肺、脾脏、肾脏和大脑，病毒滴定；③5只老鼠组接种101.0-107.0EID50，确定病毒老鼠半数致死量MLD50，持续两周每天监测老鼠体重、疾病体征及死亡结果：①老鼠鼻甲和肺中有病毒复制，脾脏、肾脏或大脑中没有；②接种任何剂量病毒的老鼠中均未发现疾病体征或死亡情况，所有老鼠体重增加结论：CK/SD008的MLD50大于7.5log10EID507.老鼠研究目标1：确定老鼠半数致死量(MLD50)的值对象：5只老鼠的组方法：轻度麻醉、鼻内接种疫苗、体重减轻和死亡数监测材料：老鼠(VitalRiverLaboratories,Beijing,China)，CO2，10倍序列稀释剂

(含50μl

CK/SD008101-107或CK/SD008PB2/627K、701N101-106EID50病毒疫苗)目标2：评估病毒的复制对象：3只老鼠的组方法：轻度麻醉、鼻内接种疫苗、杀死老鼠、收集老鼠器官、病毒传染性滴定材料：CO2、含50μl测试病毒的106EID50疫苗、鸡胚ResultsMaterialandMethods第31页结果主题5与“材料与方法”主题7对比5.H7N9病毒CK/SD008PB2在老鼠体内的复制和毒性已有结果：PB2中两种氨基酸627K、701N对哺乳动物流感病毒的毒性和传播很重要[22-27]，本课题以前成果(一些H9N2的内部基因与H7N9的相似，由雪貂感染后易获得PB2627K或701N突变，即PB2两种突变，简称PB2突变)[42]；CK/SD008不含PB2突变目标：研究这些突变是否发生在CK/SD008在雪貂体内复制过程中方法：对接种4日后的雪貂器官及传播研究中的雪貂鼻腔清洗液中PB2基因测序结果：传播研究中直接感染的雪貂器官和鼻腔清洗液中含携带PB2突变的病毒；暴露的雪貂鼻腔清洗液中的病毒只含PB2627K突变。从家禽分离出来的H7N9中未检测到PB2突变，从人分离出来的648个H7N9中约有83%含有PB2突变结论：H7N9在人体复制过程中容易获得这些突变新目标：评估CK/SD008在人体复制后获得突变的风险方法：对鸡胚有限稀释，从雪貂肺样本中提纯突变体

结果：分析基因组序列，确认两种病毒，每种含一种PB2突变

方法：进一步研究老鼠和雪貂

结果：①PB2突变显著提升CK/SD008的聚合酶活性；②老鼠鼻甲和肺的PB2两种病毒滴度明显高于用CK/SD008接种的老鼠；③所有3只老鼠的大脑及1只老鼠的脾脏和肾脏中也检测到PB2病毒；④PB2病毒造成严重疾病，在低剂量下致死老鼠(MLD50为1.8、3.4log10EID50)7.老鼠研究目标1：确定老鼠半数致死量(MLD50)的值对象：5只老鼠的组方法：轻度麻醉、鼻内接种疫苗、体重减轻和死亡数监测材料：老鼠(VitalRiverLaboratories,Beijing,China)，CO2，10倍序列稀释剂

(含50μl

CK/SD008101-107或CK/SD008PB2/627K、701N101-106EID50病毒疫苗)目标2：评估病毒的复制对象：3只老鼠的组方法：轻度麻醉、鼻内接种疫苗、杀死老鼠、收集老鼠器官、病毒传染性滴定材料：CO2、含50μl测试病毒的106EID50疫苗、鸡胚ResultsMaterialandMethods第32页结果主题4与“材料与方法”主题8对比4.H7N9病毒CK/SD008在雪貂体内的复制和传播目标：评估雪貂体中的病毒复制方法：2只雪貂鼻内接种CK/SD008的106.0EID50，4日后收集器官，鸡胚病毒滴定结果：2只雪貂肺、扁桃体、大脑检测到CK/SD008，脾脏或肾脏中没有(与2013年H7N9禽流感病毒只在扁桃体和呼吸道复制不同[16])方法：①评估雪貂CK/SD008传播常规动物模型；②用未传播的CK/S1053作阴性对照；③3只雪貂组鼻内接种CK/S1053、CK/SD008的106EID50；④雪貂放在带有隔离器的不同笼子；⑤24h后将3只幼雪貂放在相邻笼子；⑥每2只雪貂用分隔物分开；⑥接种2日(暴露1日)后每隔2日收集雪貂鼻腔清洗液，评估病毒脱落；⑦接种14日后收集所有雪貂血清，血凝抑制抗体检测结果：观察结束时，鼻腔清洗液有病毒，由暴露的幼雪貂的血清转化来，证实呼吸道飞沫传播。①所有直接感染雪貂体内检测到病毒；②暴露9日后从暴露在感染CK/SD008的3只雪貂中1只检测到低病毒滴度，暴露在感染CK/S1053的任一雪貂都未检测到；③暴露或感染CK/SD008的雪貂体重减少1.9-8.2%，直接感染CK/S1053的下降4.0-4.6%；④每一直接感染组的两只雪貂体温升高；⑤血清转化发生在所有直接感染病毒的雪貂及暴露在感染CK/SD008的雪貂组中的1只结论：CK/SD008在雪貂体内以低效呼吸道飞沫方式传播，与本课题2013年研究成果类似[16]8.雪貂研究目标1：病毒复制

对象：两只雪貂组(4月龄，血清对流感病毒呈阴性雌性，WuxiCayFerretFarm)方法：麻醉、鼻内接种疫苗、杀死、收集器官、病毒滴定材料：氯胺酮(2020mg/kg)、甲苯噻嗪(1mg/kg)，测试病毒的106EID50疫苗(500L)，鸡胚目标2：呼吸道飞沫传染；HI抗体检测

对象：3只雪貂的组；3只幼龄雪貂的组方法：鼻内接种疫苗、放在隔离器的笼子；幼龄放在与隔离器相邻笼子(双层网隔开)。收集鼻洗液、血清，病毒传染性滴定材料：106EID50病毒疫苗、隔离器、笼子、双层网分隔物、鸡胚条件：笼子空气自由流通；接种1日后暴露，14日收集血清；环境温度20-22℃，相对湿度30-40%；气流方向水平，接种雪貂流向暴露雪貂，气流速度0.1m/sResultsMaterialandMethods第33页结果主题6与“材料与方法”主题8对比6.H7N9病毒CK/SD008

PB2在雪貂体内的复制、毒性及传播方法：评估PB2两种病毒在雪貂体内的复制(对接种PB2与CK/SD008的雪貂器官组织嗜性、病毒滴定作比较，研究在雪貂的呼吸道飞沫传播)结果：①直接感染组所有雪貂均检测到病毒；PB2/627K暴露组在1只暴露1日后的雪貂和另外几日测试的所有3只雪貂检测到病毒；PB2/701N暴露组中，在1只暴露3、5日后的雪貂和两只暴露7、9日后的雪貂检测到病毒。②1只感染PB2/627K的雪貂在接种7日后体温升高，但在感染PB2/701N的雪貂中未检测到明显体温变化。③直接感染病毒的雪貂有11.3～28.9%的体重下降。④1只接种PB2/627K的雪貂显示出严重疾病(震颤和斜颈)，接种10日后开始瘫痪(杀死)；1只接种PB2/701N的雪貂病得很重，10日后死亡。⑤所有接种、暴露的雪貂中均发生血清转化方法：重复PB2/627K病毒在雪貂中的传播实验研究，将CK/S1053、A/Anhui/1/2013(AH/1)分别作为阴性、阳性对照结果：未检测到CK/S1053传播，检测到PB/627K、AH/1传给所有3只雪貂结论：新鸡致命性H7N9在老鼠中高度致命，在PB2获627K或701N突变后，在雪貂中传播更有效8.雪貂研究目标1：病毒复制

对象：两只雪貂组(4月龄，血清对流感病毒呈阴性雌性，W