试剂标准操作规程（SOP）-APOE

文件号：AA第1版页数PAGE3共4页试剂标准操作规程项目载脂蛋白E（APOE）方法免疫比浊法仪器H7600系列编写人日期审核人日期批准人日期文件分发部门和/或个人本规程自年月日起实施 目录检测原理标本采集与处理2.1受检者的准备2.2静脉采血2.3抗凝剂2.4标本处理3.试剂3.1试剂3.2校准血清3.3试剂与校准血清的稳定性4.仪器5.操作6.计算7.操作性能7.1精密度7.2准确度7.3灵敏度7.4可报告范围7.5特异性7.6干扰8.参考值9.临床意义附录A:参数1.检测原理血清（浆）中的载脂蛋白E与羊抗人载脂蛋白E抗体引起抗原抗体反应，产生混浊。根据对浊度的测定，求出载脂蛋白E的浓度。载脂蛋白E+羊抗人载脂蛋白E抗体抗原抗体沉淀物2．标本采集与处理2.1受检者的准备：病人空腹12h，不饮酒24h后采集血样。体检对象抽血前应有两周的的正常状况记录。妊娠后期各项血脂都会增高，应在产后或中哺乳后3个月检验才能反应其基本血脂水平。注意有无应用影响血脂的药物，如降血脂药、避孕药等。此外，对于体检者，采血的季节都应做相关记录，因为血脂水平有季节性变动，为了前后比较应在每年同一季节检验，应嘱体检对象在抽血前24小时内不做剧烈运动。2.2静脉采血：除非是卧床的病人，一般在采血时取坐位。体位影响水分在血管内外的分布，会影响测试项目的浓度。在采血前至少应静坐5分钟，一般从肘静脉取血，使用止血带的时间不超过1分钟，穿刺成功后立即松开止血带。2.3抗凝剂：血浆使用肝素作为抗凝剂。2.4标本处理：血标本室温放置30min～45min后离心分离血清，置洁净试管加盖低温保存。3．试剂3.1试剂：本科使用上海华臣生物试剂有限公司APOE试剂盒，为液体双试剂，各组分如下：品牌：华臣生物试剂包装规格见试剂说明书。各组份在测定反应中的含量试剂1缓冲液：丙二醇缓冲液（pH8.5）100mmol/L聚乙二醇试剂2胶乳液：羊抗人载脂蛋白E抗体10U/mL3.2：校准血清使用上海华臣生物试剂有限公司提供的APOE标准液。校准频次：全点定标：试剂换批号使用时或质控结果超过规定的2SD范围，需要全点定标。3.3试剂与校准血清的稳定性：原包装试剂储存在2-8℃至标签所示失效日期。试剂开瓶后，在仪器中至少可保存20天。试剂储存在18-22℃稳定15天，试剂应避免污染。试剂R1颜色为无色，试剂R2颜色为无色至浅黄色，当试剂变色，按照试剂失效处理。APOE标准液在2-8℃储存至标签所示失效日期，复溶后-20℃保存，可稳定一个月，2-8℃储存可稳定一周，参见校准血清说明书。4．仪器H7600系列型号仪器。5．操作样品为血清。本法为终点法。参数见后附，附录A。试剂参数设置、定标操作以及样本检测常规操作，见仪器操作规程。6．计算定标：采用多点定标方式，用各浓度水平标准品吸光度值与对应的浓度做标准曲线。计算：对于自动生化仪，曲线拟合方式选择SPLINE或log-logit4P法。样本含量由样本吸光度值△A在标准曲线上对应计算得到。7．操作性能7.1精密度：批内CV<7%，批间CV<9%7.2准确度：测量结果在质控血清靶值±2SD范围内。不同方法学试剂的质控结果之间会存在差异，使用时请确保质控选择与试剂的方法学保持一致。7.3灵敏度：载脂蛋白E浓度为：100mg/L时，浊度吸光度A340nm约0.151~0.256。7.4可报告范围：血清与试剂用量之比为6:210:70时，测定上限为120mg/L。7.5特异性：测量值在给定值的90%-110％范围内。7.6干扰：内源性干扰物溶血为1000mg/ml、脂血2000mg/ml、黄疸30mg/ml、抗坏血酸300mg/ml对测试结果无明显影响。8．参考值27-45mg/L