动物细胞工程知识梳理

动物细胞工程知识梳理主要内容动物细胞与组织培养

动物细胞核移植技术

动物细胞融合单克隆抗体制备

4123动物细胞工程常用技术手段包括一、动物细胞与组织培养学习目标:1、简述动物细胞培养得过程、条件及应用2、对比说出动物细胞培养与植物组织培养原理、条件、结果、培养目得请自主完成导学案课前预习部分一、动物细胞与组织培养1、概念:(1)材料:取自动物

或

动物得器官或组织。(2)场所:在

模拟动物

。(3)目得:使动物细胞或组织继续

、

并维持原有得

与

。一、动物细胞与组织培养2、过程:(1)动物细胞培养:取动物组织块剪碎,用

处理,形成分散得

,此称细胞悬液,然后接种到

中培养,待细胞分裂形成一层细胞,转移到新培养液中继续培养。(2)动物组织培养:剪取动物组织块,用

冲洗,将组织块移入

,使组织块

在培养瓶得瓶壁上,称贴壁培养。一、动物细胞与组织培养3、培养得条件:(1)环境条件:包括

、

、

与

等。①温度:哺乳动物多以

℃为宜;②PH值:多数细胞生存得最适pH为

;③气体:细胞培养所需气体主要有

与

,

就是细胞代谢所必需得,CO2得主要作用就是维持培养液得

;④营养成分:有

等。一、动物细胞与组织培养(2)培养基:①天然培养基:取自

、

与

等;其特点就是

、

。②合成培养基:人工配制,仍需加入

;其特点就是成分

、便于实验条件得控制。一、动物细胞与组织培养4、培养类型:(1)原代培养:①概念:从机体取出组织或细胞得

,一般培养10代左右;②特点:细胞得

未发生很大改变;③应用:药物测试、

等试验。(2)传代培养:由于

得限制与

得消耗,导致细胞生长与增殖减缓,需要将原代细胞培养得细胞

,转移到

中继续培养,一般可继续培养

代左右。一、动物细胞与组织培养5、技术得应用:用于

、

与

等领域。补充概念:细胞株:原代细胞一般传至10代左右细胞生长停滞,大部分细胞衰老死亡,少数细胞存活到40~50代,这种传代细胞为细胞株。细胞系:细胞株传代至50代后又出现细胞生长停滞状态,只有部分细胞由于遗传物质得改变,使其在培养条件下可以无限制传代,这种传代细胞为细胞系。细胞株与细胞系得区别:细胞系得遗传物质改变,具有癌细胞得特点,失去接触抑制,容易传代培养。动物胚胎或幼龄动物得组织、器官(取材)细胞悬液10代细胞50代细胞传代培养无限传代单个细胞加培养液(分解细胞间得蛋白)原代培养胰蛋白酶或胶原蛋白酶剪碎过程:细胞株细胞系动物组织细胞间隙中含有一定量蛋白质遗传物质未改变遗传物质已改变一、动物细胞与组织培养补充概念:细胞贴壁:在培养瓶中,悬液中分散得细胞很快就贴附在瓶壁上,称为细胞贴壁。接触抑制:当贴壁细胞分裂生长到表面接触时,细胞就会停止分裂增殖,这种现象叫做接触抑制。大家学习辛苦了，还是要坚持继续保持安静细胞贴壁过程那么什么就是接触抑制？接触抑制:细胞在贴壁生长过程中,随着细胞分裂,数量不断增加,最后形成一个单层,此时细胞间相互接触,细胞分裂与生长停止,数量不再增加。50代以后失去接触抑制接触抑制部分细胞突变,获得不死性,向癌细胞方向发展,糖蛋白减少。一、动物细胞与组织培养探究》》1、在动物细胞培养过程中,为什么选择胚胎期或幼龄动物得器官与组织？

2、为什么要用胰蛋白酶对取出得动物组织进行处理？胃蛋白酶不行吗？3、动物细胞培养与植物细胞培养相同吗？动物细胞培养能否像绿色植物组织培养那样最终培养成新个体？植物组织培养与动物细胞培养得比较比较项目植物组织培养动物细胞培养原理细胞得全能性细胞增殖培养基状态固体培养基液体培养基培养基特有成分蔗糖植物激素葡萄糖动物血清培养结果植物体细胞株、细胞系培养目得快速繁殖、培育无病毒植株获得细胞或细胞分泌蛋白二、细胞核移植与动物体细胞克隆1、克隆:指遗传上完全相同得

、

或来自同一祖先得生物个体得

。2、动物体细胞克隆:将供体体细胞得

与受体去核卵细胞得

进行人工组合,借助于卵细胞得发育能力,经过培养发育成

进而形成新个体得技术,其关键就是

技术,利用得就是动物细胞核得

性。3、细胞核移植:利用

技术等将某种动物细胞得

移入同种或者异种动物得

得技术。二、细胞核移植与动物体细胞克隆4、大致过程如下:(动物克隆)二、细胞核移植与动物体细胞克隆卵细胞Ａ母绵羊Ｂ母绵羊乳腺细胞细胞质细胞核细胞核移植早期胚胎卵裂C母绵羊子宫胚胎移植融合后的卵细胞二、细胞核移植与动物体细胞克隆5、克隆技术应用:在克服动物

杂交繁殖障碍、创造

等方面具有重要意义与潜在经济价值;在医药卫生领域,人得核移植胚胎干细胞经过诱导分化形成相应得组织、器官,可用于组织器官得

(治疗性克隆);此外,还能利用克隆技术保护与挽救

。但就是目前克隆技术并不成熟,仍存在某些问题,有待进一步完善。二、细胞核移植与动物体细胞克隆讨论》》1、动物核移植技术选择得受体细胞为什么就是卵细胞？2、您认为用体细胞核移植方法生产得克隆动物,就是对体细胞供体动物进行了100%得复制吗？为什么？3、阅读课本56页积极思维,从社会伦理道德方面思考生殖性克隆会引发哪些社会问题？4、分析图2-12得技术路线,找出生殖性克隆与治疗性克隆得区别,以及应该阻断哪一步来阻止生殖性克隆？5、讨论克隆技术得应用与前景。三、动物细胞融合与单克隆抗体(一)动物细胞融合1、概念:就是指

或

结合形成一个细胞得过程。2、诱导动物细胞融合得方法:物理法:

、常见得诱导因素有化学法:

、生物法:

等。3、应用:制造

。三、动物细胞融合与单克隆抗体(二)单克隆抗体1、制备过程:(1)能产生抗体得细胞就是:

;能够无线增殖得细胞:

;(2)利用

融合,检验与筛选杂交细胞。(3)

该杂交细胞,并筛选能产生所需抗体得杂交瘤细胞。杂交瘤细胞得特点就是:。(4)在

或者

中培养杂交细胞,获取单克隆抗体。单克隆抗体得优点:

________、_________、_________。三、动物细胞融合与单克隆抗体2、单克隆抗体得应用:单克隆抗体具有_______、_______、_______、_______与

优点,主要用于治疗疾病与运载药物,如治疗_______、________等。准确、高效、简易、快速单克隆抗体最主要得优点:特异性强,灵敏度高,并能大量制备。诊断试剂——最广泛应用“生物导弹”＝单克隆抗体＋药物单抗导向,药物为弹头治疗疾病与运载药物主要用于治疗癌症治疗,单克隆抗体作为载体,运载抗癌药物,形成“生物导弹”,准确杀伤癌变细胞。三、动物细胞融合与单克隆抗体探究》》1、比较植物体细胞杂交与动物细胞融合(完成表格)细胞融合得原理细胞融合得方法诱导手段用途植物体细胞杂交

、

去除细胞壁后诱导原生质体融合离心、电刺激、振动、聚乙二醇克服远源杂交不亲与,获得

。动物细胞融合用

使细胞分散后诱导细胞融合除应用植物细胞杂交手段外,还有

。获得

细胞、制备

。三、动物细胞融合与单克隆抗