DB64T-奶牛活体采卵体外胚胎生产与移植技术规程编制说明

PAGEPAGEPAGE5宁夏回族自治区地方标准编制说明宁夏回族自治区畜牧工作站2024年12月目录1.工作概况32.编制目的和意义33.编制原则和依据54.标准编制过程74.1准备阶段84.2编制阶段94.3征求意见94.4技术审查104.5主要编制人员分工105.国内外有关标准现状106.采用的国际标准117.重大分歧意见的处理经过和依据128.标准作为推荐自愿性采用标准的意见129.与有关的现行法律、法规和强制性标准的关系1210.其他应予说明的事项12编制说明一、工作概况（一）任务来源牛奶产业是自治区第十三次党代会确定的“六特”产业之一，自治区党委和政府高度重视牛奶产业发展，着力推进产业布局区域化、经营规模化、生产标准化、发展产业化，打造“中国高端奶之乡”。我区已成为全国奶业优势产区和优质高端乳制品生产原料的重要基地，始终坚持把科技创新作为产业发展驱动力，注重提高奶牛遗传改良。2023年4月，由宁夏畜牧工作站申请地方标准的立项，按照《自治区市场监管厅关于下达宁夏地方标准制（修）订计划的通知》，批准《奶牛活体采卵体外胚胎生产与移植技术规程》地方标准的制（修）订，结合牛奶产业发展全产业链提升需求的实际情况，编制《奶牛活体采卵体外胚胎生产与移植技术规程》地方标准，标准由宁夏农业农村厅（归口单位全称）提出并归口。制订的《奶牛活体采卵体外胚胎生产与移植技术规程》，立足于当前全区奶产业高质量发展实际，按照“稳定养殖规模、提高单产水平”的发展路径，加快牛奶产业转型提档，推动产业高质量发展。规程规范了荷斯坦奶牛活体采卵体外胚胎生产与移植技术的术语与定义，确立了体外胚胎生产与移植操作方法及流程，明确了供体的选择与处理、卵母细胞的采集、体外胚胎生产、胚胎质量鉴定、胚胎移植与妊娠检查等方面的技术要求。完善种子母牛快速扩繁体系，加快推进优质高产奶牛核心群选育，对促进我区奶牛遗传改良快速发展意义重大。（二）起草单位本标准项目主要承担单位：宁夏畜牧工作站协作单位：宁夏反刍种性研究科技有限公司、宁夏农垦乳业有限公司下属奶牛场等。二、编制目的和意义近年来，宁夏奶牛群体遗传改良工作取得了较为显著的成效，但无论与国外育种先进水平相比，还是与现代奶业的发展需求相比，奶牛群体遗传改良工作仍然相对滞后，奶牛育种和繁殖技术融合度不够、集成创新能力不足已成为制约奶牛群体快速改良的瓶颈因素之一。因此，需要在已有的基础上攻克关键技术障碍，实现奶牛种质选育、良种高效扩繁及性别控制等关键技术的有效整合和无缝衔接，延伸产业链条，构建奶牛种业创新体系，实现育繁推一体化格局。活体采卵-体外胚胎生产技术通过选择具有高遗传价值的种子母牛作为供体母牛，采集供体母牛卵母细胞，经过卵母细胞体外成熟培养、体外受精等程序，培育成体外胚胎，再将生产的优质奶牛体外胚胎移植到低产牛群。拟制订的《奶牛活体采卵体外胚胎生产与移植技术规程》，立足于当前全区奶产业高质量发展实际，按照“稳定养殖规模、提高单产水平”的发展路径，加快牛奶产业转型提档，推动产业高质量发展。规程规范了活体采卵、体外受精、胚胎培养以及胚胎移植等体外胚胎生产移植关键环节技术要求和操作流程，为生产高质量体外胚胎和选育优质种子母牛提供技术支撑。一方面，通过精准筛选优质高产供体母牛，组建体外胚胎种子母牛核心群，能够帮助牧场实现快速改良低产牛群，提高后代遗传品质，实现优质高产奶牛的快速扩繁。另一方面，进一步优化了采卵技术、供体母牛选择、胚胎培养等技术体系，提高体外胚胎质量，降低生产成本，头均回收可用卵母细胞数达10枚/头·次以上，单枚胚胎生产成本控制在1200元左右，比购买优质胚胎（3000～4000元/枚）节约1800元/枚以上，具有很大的应用价值。对打造宁夏优质高产奶牛“生产配套系”，推进奶牛群体质量提升，缩短时代间隔，加快推广体外胚胎批量化生产和产业化示范及产业发展降本增效提供有力技术支撑，推动我区奶牛良种育、繁、推一体化水平再上新台阶。三、编制原则和依据1.编制原则本文件的制定严格遵循国家有关方针政策和法律法规，编写规则及表述按照GB/T1.1－2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的要求编写。在标准制定过程中力求做到：技术内容的叙述正确无误；文字表达准确、简明、易懂；标准的构成严谨合理；内容编排、层次划分等符合逻辑与规定。2.主要技术内容确定的依据本文件起草组在编写过程中调研了国内奶牛场体外胚胎生产的流程及技术要点，收集并梳理了相关的国标、行标、地标以及防疫条例，通过调研区内规模奶牛场生产实践情况，结合多年来我区开展奶牛胚胎移植研究工作实际，总结奶牛体外胚胎生产移植技术发展现状，按照奶牛胚胎生产移植操作流程，从供体的选择与处理、卵母细胞的采集、体外胚胎生产、胚胎质量鉴定、胚胎冷冻保存、胚胎移植与妊娠检查等方面规范了荷斯坦奶牛活体采卵体外胚胎生产与移植技术，用于指导规模奶牛场体外胚胎生产。3.试验基础2002年，在全国率先以省为单位，全面开展奶牛选育工作。2013年以来，自治区畜牧工作站先后承担实施了《优质高产奶牛选育》《奶牛高效繁殖技术示范推广》《优质高产奶牛活体采卵-体外胚胎（OPU-IVP）工厂化生产技术研究集成与产业化示范》等项目，与中国农业大学、西北农林科技大学、中国农科院、宁夏大学等科研院所及北京首农、宁夏反刍种性研究科技有限公司、山东奥克斯等国内顶级育种公司深度合作，创建国家级奶牛核心育种场3个，培育良种繁育示范场18个，组建优质高产奶牛核心群5000头，头均单产15.2吨，培育种公牛112头，其中“宁京一号”种公牛基因检测育种值（GCPI）3977，达到国际领先水平。在西夏区、灵武市、利通区、海原县建成奶牛胚胎生产技术示范中心4个，实现了体外胚胎工厂化生产，加速推进优质高产奶牛良种选育和快速扩繁。2005-2007年，自治区畜牧工作站主持自治区重大科技攻关项目《奶业生产关键技术研究与产业化示范》，子项目《奶牛性控胚胎移植技术示范》主要是开展性控胚胎引进与移植。该项目2007年12月结题并通过了自治区科技厅的成果验收。2013-2017年，自治区畜牧工作站主持实施自治区农业育种专项《优质高产奶牛选育》项目（项目编号：2013NYYZ05），子课题《奶牛快速扩繁》（项目编号：2013NYYZ0502）重点是在育种示范场进行优质高产奶牛性控胚胎生产与移植技术研究。依据项目《遗传育种》课题的遗传评估结果，分别选择遗传评估育种值（EBV）和基因组育种值（GEBV）排名靠前的成年荷斯坦母牛和青年荷斯坦母牛或优选父母亲遗传性能和生产性能优秀青年荷斯坦母牛作为供体，引进进口优质验证荷斯坦奶牛性控冻精进行选配，进行优质高产奶牛性控胚胎生产与移植。项目累计选择优秀荷斯坦供体牛793头，引进进口验证荷斯坦奶牛性控冻精4000支，完成冲胚375头，回收可用胚胎1058枚，头均获得可用胚2.8枚。鲜胚移植受体牛受胎率达到46.4%；冻胚移植受胎率达到36.2%。在项目实施过程中，项目组技术人员深入示范场一线开展研究工作，积累了大量试验数据和实践经验，掌握了奶牛性控胚胎移植关键技术，为技术标准制订奠定了良好基础。2022-2024年，实施优质高产奶牛活体采卵体外胚胎工厂化生产技术研究集成与产业化示范项目，在农垦乳业公司和金宇浩兴牧场组建优质高产开放式青年母牛核心群500头以上，应用青年母牛基因组选择（GS）+活体采卵-体外胚胎生产（OPU-IVP）工厂化生产技术生产体外优质胚胎2.17万枚，移植鲜胚1.1万枚，受胎率47%，冷冻胚胎1.07万枚，受胎率37%，头均获得胚胎3.2枚，单枚胚胎生产成本1200元左右，低于市场价1800元，实现“一代化”遗传改良和定向选育，推动体外胚胎批量化生产和产业化示范。四、标准编制过程1.成立起草组该文件由宁夏回族自治区畜牧工作站提出，地方标准项目任务下达后，畜牧工作站联合宁夏农垦乳业股份有限公司、宁夏反刍种性研究科技有限公司等相关单位组成的标准起草组，开展标准文本的起草、讨论、征求意见、审定等工作，并明确工作组各成员的分工及其任务和职责。宁夏回族自治区畜牧工作站是财政全额拨款事业单位，直属宁夏农业农村厅。单位先后主持实施了优质高产奶牛选育技术研究与应用、奶业关键技术研究与集成示范、奶牛高效养殖关键技术研究与示范、奶牛品种改良与良种补贴、优质粗饲料加工利用技术研究与示范、奶牛生产性能测定技术应用研究与示范推广等农业农村部、科技部和自治区科研推广项目20多项，先后获省部级奖励20多项，制（修）订奶牛群体改良、肉牛良繁饲养等地方标准40余项，发表论文80余篇。2.准备阶段（2023年6月～2023年10月）2024年1月，成立项目标准编制工作组，明确工作组各成员的分工及其任务和职责。收集并梳理奶牛活体采卵体外胚胎生产与移植相关国家标准、行业标准、地方标准及参考资料，按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的要求，编制本标准。3.编制阶段（2023年11月～2024年3月）3.1收集调研成果项目标准编制工作组组织各课题负责人和相关专家开展系统性的调研，制定适用于我区规模奶牛场胚胎生产的主要内容框架，调研并收集了供体的选择与处理、卵母细胞的采集、体外胚胎生产、胚胎质量鉴定、胚胎冷冻保存、胚胎移植与妊娠检查等方面主要技术数据。3.2研究讨论形成初稿项目组内对技术规程内容进行多次研讨，确定标准框架和主要内容，并进行编写形成了标准文本初稿。同时，征求相关领域专家、企业负责人对本标准的意见。3.3讨论稿形成项目组邀请相关领域专家、企业家、项目组内成员征求本标准的意见和建议，标准编制小组根据反馈的征求意见和建议，对标准草案和编制说明进行认真的修改和完善，形成《奶牛活体采卵体外胚胎生产与移植技术规程》讨论稿。4.征求意见阶段（2024年4月～2024年10月）征求意见稿起草完成后，项目组向区内产学研相关领域的专家发送了标准征求意见稿文本和编制说明，共收集意见13条，采纳了12条，并根据采纳意见对标准文本进一步修改并形成了送审稿。5.技术审查计划于2024年12月，申请市场监督管理厅组织邀请自治区畜牧兽医领域有关专家召开标准技术审查会议。6.主要编制人员分工脱征军，高级畜牧师，承担标准中具体方向、主要内容的制定及具体撰写工作。周佳敏，畜牧师，主要负责各项数据收集、技术规程内容制定及执行工作。吉广强，畜牧师，主要负责数据处理及具体撰写工作。田佳，高级畜牧师，主要负责各项数据的审核工作。张艳梅等其他人员参与了标准编写的其他工作。五、国内外有关标准现状经检索，目前暂无与该标准相关的国家标准和行业标准；与该标准相关的地方标准主要局限于离体采卵方面，主要规定了卵巢的摘取、卵母细胞的采集等内容，本规程规范了活体采卵流程和标准，细化了胚胎培养操作流程和技术要点，具有更高的遗传潜力。1.辽宁省市场监督管理局《牛体外受精胚胎生产及非手术法移植技术操作规程》（DB21T34