遗传病的诊断

遗传病的诊断

DiagnosisofGeneticDisease

遗传病的诊断

前言遗传病的常规诊断产前诊断基因诊断

第一节遗传病的常规诊断

一、遗传疾病诊断的主要内容病史采集症状与体征家系分析细胞遗传学检查生化检查基因诊断染色体检查的指征①有明显的智力发育不全、生长迟缓或伴有其他先天畸形者;②夫妇之一有染色体异常，如平衡结构重排、嵌合体等;③家族中已有染色体或先天畸形的个体;④多发性流产妇女及其丈夫;⑤原发性闭经和女性不育症;⑥无精子症男子和男性不育症;⑦两性内外生殖畸形者;⑧疑为先天愚型的患儿及其父母;⑨原因不明的智力低下伴有大耳、大睾丸和(或)多动症者;⑩30岁以上的高龄孕妇。Multi-colorFISH/

SpectralKaryotypingFISHforSRYNormalMaleXXSRY+Red=XRYGreen=centromereofX第二节产前诊断遗传学检查

细胞培养、染色体检查、分子诊断等；生化检查

特殊蛋白质、酶、代谢底物、中间产物和终产物等；物理诊断

B超、X线、胎儿镜、电子监护等。需产前诊断的对象：夫妇之一有染色体畸变，特别是平衡易位携带者，或者夫妇染色体正常，但出生过染色体异常的患儿的夫妇；35岁以上的高龄孕妇；夫妇之一有开放性神经管畸形，或出生过这种畸形患儿的夫妇；夫妇之一有先天性代谢缺陷，或出生过这种患儿的夫妇；X连锁遗传病基因携带者孕妇；原因不明的习惯性流产的孕妇；羊水过多的孕妇；夫妇之一有致畸因素接触史的孕妇；具有遗传病家族史，又系近亲婚配的孕妇。

虽然具备了上述条件，但如果出现先兆流产、妊娠时间过长、有出血倾向者，则不宜做产前诊断，另外应拒绝仅要求仅做胎儿性别的检查。取胎儿细胞方法有：羊膜穿刺法（15-17w）绒毛取样法（10-11w）脐带穿刺（>18w）胎儿镜检查B超孕妇外周血胎儿细胞富集PGD第三节基因诊断一、分子诊断学的发展从第一代遗传标志（RFLP）第二代遗传标志（STR）第三代遗传标志（SNP）二、分子诊断的策略和常用技术基因诊断的策略基因突变的检测mRNA检测基因连锁检测基因诊断的基本技术核酸杂交聚合酶链反应DNA测序基因芯片技术其它常用的技术

PCR-RFLPPCR利用一对或数对特异性引物，将目标DNA扩增；酶切利用某些限制性内切酶消化PCR产物，如PCR产物中含有相应的酶切位点序列，DNA链则被切开；电泳利用琼脂糖凝胶或聚丙烯酰胺凝胶分离酶切后的PCR产物，根据电泳图谱判断结果。PCR-ASO：使用只有几十个核苷酸的探针，检测被检DNA中的同源序列。由于探针比较短，当被检DNA序列与探针不完全互补，甚至只要有一个碱基的差异，杂交分子就不能稳定形成，因此该方法的灵敏度非常高，特异性也非常好。PCR-ASOPCR-SSCP

当双链DNA变性为两条单链后，各自会在中性条件下形成各自特定的空间构象，因而在电泳时将在不同的位置上出现各自电泳条带。如果DNA序列发生变化，甚至只有一个碱基变化，空间构象也有可能发生变化，电泳条带也随之变化。PCR-SSCP三、分子诊断技术的应用基因诊断在遗传病中的应用例如：镰状细胞贫血的基因诊断酶解正常人DNA和患者DNA，用标记的

珠蛋白基因为探针作Southern杂交

镰状细胞贫血的基因诊断限制性内切酶MstⅡ切割的序列是CCTNAGG（其中N是任何一种核苷酸），切割正常DNA产生1.1kb

珠蛋白的DNA片段；若切割患者DNA时，由于A

T破坏了MstⅡ的位点，便形成1.3kb

珠蛋白的DNA片段。基因诊断在肿瘤中的作用肺癌乳腺癌结肠癌四、疾病分子诊断的展望

未来的分子诊断主要发展方向胚胎着床前诊断—在囊胚8个细胞期，通过对其中一个细胞的染色体核型分折和原位杂交，从而将人类的遗传缺陷控制在最早期阶段。母体