检验科PCR组授权考试题

检验科PCR组授权考试题一、选择题1.实时荧光定量PCR（qPCR）的基本原理是:（）。[单选题]*A.通过电泳分离DNA片段B.通过荧光信号实时监测DNA扩增√C.通过测序分析DNA序列D.通过杂交检测DNA片段2.qPCR中Ct值的含义是:（）。[单选题]*A.荧光信号达到阈值时的循环数√B.DNA扩增的总循环数C.荧光信号的最大强度D.DNA片段的长度3.以下哪种荧光染料常用于qPCR（）。[单选题]*A.溴化乙锭（EB）B.SYBRGreenI√C.考马斯亮蓝D.苏丹红4.qPCR与普通PCR的主要区别在于:（）。[单选题]*A.qPCR不需要引物B.qPCR可以实时监测扩增过程√C.qPCR不需要DNA模板D.qPCR只能在低温下进行5.在qPCR实验中，内参基因的作用是:（）。[单选题]*A.提高荧光信号强度B.作为实验的阴性对照C.校正样本间的差异√D.增加DNA模板量6.qPCR引物设计的关键点不包括:（）。[单选题]*A.引物长度一般为18-22bpB.引物应避免形成二聚体C.引物的GC含量应低于20%√D.引物应具有较高的特异性7.qPCR实验中，以下哪种对照是必需的?（）。[单选题]*A.阳性对照B.阴性对照C.无模板对照（NTC）D.以上都是√8.qPCR实验中，防止污染的最有效方法是:（）。[单选题]*A.使用一次性耗材B.在超净台中操作C.使用UNG酶防污染系统D.以上都是√9.qPCR反应体系中，以下哪种成分是必需的?（）。[单选题]*A.DNA模板B.引物C.荧光染料D.以上都是√10.qPCR实验中，以下哪种操作会导致假阳性结果?（）。[单选题]*A.样本污染√B.引物二聚体C.反应体系不完整D.以上都是11.qPCR数据分析中，Ct值与模板量的关系是:（）。[单选题]*A.Ct值越小，模板量越多√B.Ct值越大，模板量越多C.Ct值与模板量无关D.Ct值越大，荧光信号越强12.以下哪种方法可以用于qPCR数据的标准化?（）。[单选题]*A.使用内参基因B.使用标准曲线C.使用阴性对照D.以上都是√13.qPCR在临床诊断中最常用于:（）。[单选题]*A.病原体检测√B.蛋白质定量C.细胞计数D.组织切片分析14.qPCR在肿瘤标志物检测中的优势是:（）。[单选题]*A.高灵敏度B.高特异性C.快速检测D.以上都是√15.qPCR在遗传病诊断中的应用主要是:（）。[单选题]*A.检测基因突变√B.检测蛋白质表达C.检测细胞形态D.检测代谢产物16.qPCR实验中的质量控制措施不包括:（）。[单选题]*A.使用内参基因B.使用标准曲线C.忽略阴性对照√D.重复实验17.qPCR实验的灵敏度通常是指:（）。[单选题]*A.检测到最低模板量的能力√B.检测到最高模板量的能力C.检测到荧光信号的能力D.检测到引物二聚体的能力18.PCR产物长期储存最好置于:（）。[单选题]*A.4℃B.常温C.16℃D.-20℃√19.qPCR实验的重复性是指:（）。[单选题]*A.同一实验在不同时间的结果一致性√B.同一实验在同一时间的结果一致性C.不同实验在不同时间的结果一致性D.以上都不是20.数字PCR（dPCR）与qPCR的主要区别是:（）。[单选题]*A.dPCR不需要荧光信号B.dPCR可以绝对定量DNA拷贝数√C.dPCR不需要DNA模板D.dPCR只能在低温下进行21.多重qPCR技术的优势是:（）。[单选题]*A.同时检测多个目标基因√B.提高荧光信号强度C.减少实验时间D.以上都是22.qPCR在临床应用中涉及的伦理问题主要是:（）。[单选题]*A.数据隐私保护B.实验操作规范C.试剂质量控制D.以上都是√23.qPCR技术在临床实验室中的法规要求包括:（）。[单选题]*A.实验人员资质B.实验室认证C.数据记录与保存D.以上都是√24．根指卫生部第45号令《可感染人类的高致病性病原微生物菌（毒）种或样本运输管理规定》的要求，下列属于提交申请办理准运证审批范围的是:1）第一类病原微生物菌（毒）种或样本。2）第二类病原微生物菌（毒）种或样本3）第一类病原微生物运输包装分类为A类的病原微生物的菌（毒）种或样本4）疑似高致病性病原微生物菌（毒）种或样本（）。[单选题]*A1）2）3）B.1）2）4）C.1）2）3）4）√D.1）3）4）25.申请跨省、自治区、直辖市运输高致病性病原微生物菌(毒)种或样本的，应当将申请材料提交何单位进行初审（）。[单选题]*A、国家卫生健康委员会B.中国疾病预防控制中心C.出发地省级卫生行政部门√D.目的地省级卫生行政部门26.下列可以鉴别PCR过程是否发生污染的措施是:（）。[单选题]*A.增加PCR反应的循环数B.设置阴性对照√C.设置阳性对照D.设置内参照27.关于新冠核酸检测实验过程中的质量控制，以下说法错误的是（）。[单选题]*A.每批检测至少有1份弱阳性质控和3份阴性质控(通常2份为试剂）自带阴性质控品，1份为生理盐水）B.质控没有必要每批次都做√C.质控品应随机放在临床标本中间参与从提取到扩增检测的全过程D.弱阳性质控测定应为阳性，3份阴性质控应全部为阴性，视为在控。反之，则为失控,不可发出报告，应及时分析原因，必要时重新检测样本。28.以下不是新冠病毒结构蛋白的是（）。[单选题]*A.N蛋白B.S蛋白C.M蛋白D.T蛋白√29.在基因扩增检验中，要使用带滤芯吸头吸加液体，主要是为了（）。[单选题]*A.防止吸液时产生的气溶胶对加样器前端的污染B.控制吸液量C.防止吸液时液体对加样器前端的污染D.以上全是√30.PCR技术的操作步骤依次是（）。[单选题]*A.高温变性、中温延伸、低温复性B．高温变性、低温复性、中温延伸√C．中温延伸、高温变性、低温复性D.中温延伸、低温复性、高温变性31.标准的PCR过程一般分为变性、复性、延伸三大步，这三大步需要的温度依次是（）。[单选题]*A.94°√C,55°C,72°CB.72°C,50°C,92°CC.50°C,92°C，72°CD.80°C,50°C,72°C32.新型冠状病毒核酸检测采用哪两个基因为特异性检测靶标（）。[单选题]*A.ORFlab和S基因B.ORFlab和N基因√C.S基因和N基因D.M基因和N基因33.PCR反应正确过程应为（）。[单选题]*A.退火一变性一一延伸B.变性一退火一延伸√C.退火一延伸一变性D.变性一延伸一退火34.二代测序平台构建文库的顺序为（）。[单选题]*A.片段化-末端修复-连接-PCR√B.片段化-连接-末端修复-PCRC.连接-片段化-末端修复-PCRD.连接-片段化-PCR-末端修复35.PCR技术的本质是（）。[单选题]*A.核酸杂交技术B.核酸重组技术C.核酸扩增技木√D.核酸变任技术36.PCR反应的最大特点是强大的扩增能力与极高的灵敏性但最大问题是（）。[单选题]*A.费用高B.操作繁杂C.易污染√D.速度馒37．实时荧光定量PCR利用（）对未知模板进行核酸的定性和定量的分析方法。[单选题]*A.同位素B.苏丹红染料C.伊红染粒D.荧光信号√38.—代测序中，加入的带荧光的碱基为（）。[单选题]*A.NTPB.INTPC.ddNTP√D.dddNTP39.下列哪项不是PCR技术应用领域（）。[单选题]*A.基因工程B.血清IgG检测√C.克隆D.DNA序列测定40.荧光阈值是指3-15个循环之间的基线荧光信号均值的标准差的（）倍，高于阈值的荧光信号被认为是真是信号，用于定义样本阈值循环数。[单选题]*A.5B.10√C.15D.2041.关于核酸扩增结果的判读，下列描述正确的是（）。[多选题]*A.ORFlab和N基因同时阳性时，判定为阳性√B.若仅ORFlab或N基因其中之一检测结果阳性时，需重新提取原标本的核酸进行复查，复查后ORFlab或N基因仍为阳性时，判定为阳性√C.2个位点的Ct值位于阳性Ct值和阴性Ct值之间或其中1个位点判读为阳性，另1个位点的Ct值位于阳性Ct值和阴性Ct值之间，判定为可疑阳性。√D.2个位点中的1个位点为阴性，另1个位点的Ct值位于阳性Ct值和阴性Ct值之间，判读为可疑阳性√42.性能验证的时机正确的是（）。[多选题]*A.每年应进行性能验证B.任何影响检验程序分析性能的情况发生后，应在检验程序重新启用前对受影响性能进行验证。√C.现用检验程序任一要素变更，如试剂升级、校准品溯源性改变等应重新进行验证。√D.检验程序常规应用前√43.荧光定量结果中无CT值出现，其可能的原因为（）。[多选题]*A.PCR参数设置错误，在设计循环参数时没有设置荧光信号采集√B.模板降解√C.反应体系错误或酶失效或引物探针降解√D.电脑设置了自动休眠√44.PCR扩增曲线基线期起始荧光信号波动不稳定，哪些不是造成该现象的原因（）。[多选题]*A.反应体系配置未充分混匀B.扩增试剂/耗材批间差导致非特异性扩增√C.反应液配置后保存不当√D.可能有污染√45.PCR扩增曲线样本内标未起或荧光强度低可能是哪些原因引起的（）。[多选题]*A.样本采样欠佳，没有刮取到足够细胞√B.样本保存不当，核酸降解√C.样本加错位或漏加√D.提取失败√46.qPCR实验中，Ct值越小，表示目标基因的