霍乱病原菌检测标本的采集方法、运输和保存课件

霍乱病原菌检测标本的

采集方法、运输和保存重庆市南岸CDC：一、标本的采集和送检

（一）标本采集和送检的要求标本采集是否规范，能从很大程度上影响检验工作的质量。标本采集应由受过专门培训的人员来执行，同时注意生物安全防护，防止样品污染、交叉污染和自身感染。标本应有唯一编号作为唯一性标识。标本在采集后应立即放入冷藏箱中，注意勿使标本局部冷冻，并尽快送往实验室进行分离培养。（二）标本种类及其采样方法病人标本应尽可能采集粪便。根据调查需要以及标本的可及性，如下标本也作为检材：病人呕吐物、尸体肠内容物、粪便污染衣物及相关物体表面如地面、水体、食品、水生动物、苍蝇等，但根据实际情况，也不限于这些标本。标本转运培养基配方见附件3“常用的标本保存液和细菌培养基”。4如病人不能自然排出大便、可使用肛拭或肛门采便管采集。用棉拭子（用于PCR检测的标本，不要使用棉拭子而应使用灭菌人造纤维拭子或塑料棒采集）或肛门采便管先在灭菌生理盐水中蘸湿后（棉拭子贴管壁挤出多余的液体），由肛门插入直肠内3cm～5cm（幼儿约2cm～3cm）处，旋转360°，自肛管内壁表面拭取采集。应注意棉拭子大小是否适宜、光滑、结实且不易脱落。然后立即置于冷藏箱内，送往实验室。肛拭子标本如不能在2h内送达实验室，应插入Cary-Blair运送培养基运送，注意培养基应埋住粪便拭子，手接触的部分在管口折断弃去。粪便标本如果运送时间不超过24h，还可将其放在碱性蛋白胨水中室温运送。标本与碱性蛋白胨水的比例为8mL～10mL碱性蛋白胨水可加入1mL～3mL液体便或指甲大小的成形便。过多的粪便量会降低保存液的pH值。如果没有合适采便器材以及没有运送培养基时，可用无菌吸水纸条浸于液体粪便中，然后将吸水纸条密封于塑料袋中，放入冷藏箱中运往实验室。2.病人呕吐物用无菌压舌板或棉拭子挑取少量呕吐物作为检材，放入灭菌塑料管、自封塑料袋或灭菌带盖瓶中，密封。立即置于冷藏箱内，送往实验室.3.水体包括河口水、江河水、沟渠水、池塘水、湖水、井水、港湾海水、乡镇自来水厂源水、医院污水排放口、下水道排放口、海水产品养殖水、海水产品交易市场的出水口等。需要时也可采集水体的底泥作为检材。4.食品针对不同的可疑食品，采集整体或部分标本，带至实验室。注意采集过程中不同食品及不同部位不能交叉污染。5.海水产品选取活海水产品或涂抹拭子，置于塑料袋内（拭子标本可按粪便拭子保存运输方法处置），尽快送往实验室。如在一箱甲鱼中可采取数只甲鱼的体表作为一个标本送检，这比只做一只甲鱼体内检查其阳性检出机会可能更多。霍乱监测时，海水产品常作为重点采集监测的对象。注意采集过程中不同食品及不同部位不能交叉污染。6.物体表面标本用灭菌棉拭蘸以碱性蛋白胨水涂擦沾染粪便的衣物表面、食物操作台、砧板等等相关物体或怀疑污染物体表面，放入到碱性蛋白胨水中，密封，常温下运往实验室。7.苍蝇标本在每个采样点以10～15只苍蝇作为一份标本放入自封袋或试管中，密封，置于冷藏箱中送实验室。生物安全的要求霍乱属于肠道传染病，对实验室操作以及样品采集等方面的生物安全应按照肠道感染细菌性疾病的通用生物安全要求。另外，霍乱在我国属于传染病法规定的甲类报告管理传染病，在卫生部《人间传染的病原微生物名录》（2006年）中，霍乱弧菌流行株危害程度为第二类，属于高致病性微生物级别（非流行株危害程度为第三类），要求在生物安全II级实验室（BSL-2）操作病原体。运输箱附表2霍