定量测定规范的质量控制

定量测定范例的质量控制

云南省临床查验中心

孙虹

临床实心空检测的目的：■

为疾病的诊断、预防、治疗和疗效视察,

康健状况评估提供须要的信息。

要求：查验结果必，

如何评价检测的准确性?

系统误差•

偏倚

▼

（总1误差

偏差（不（触圆_,

随机误差

不精密度

室内质控T随机误控T粘机度

质量控制

室间质评T系统误芥T正确设

一、室内质控的目的

1、检测、控制本实验测定事情的粘密度

2、检测其准确度的改变

3、提高通例测定事情的批间、批内标本

检测结果的一致性

二、准备事情

1.培训人员

JJLUJ壬.三；I，

底子知识

一般要领

质控事情的技能主干

2.创建标准操纵规程

有,套完整的标准操纵规程文件（SOP）

是整个质控事情的保障O

3.仪器的校准和保养

量值测定中检测系统的校准

校准的界说：

在规定条件下，为确定丈量仪器或丈量系统

所指示的量值，与对应的由标准所复现的量值之

间「系的如操纵。

校准的作用:

校准仪器、试剂等造成的系统偏差。

校准确定查验结果的准份

校准

校准是非常重要的，它确定了阐发要领学产乍

信弓与陈诉的试验结果之间的干系，校准通常由检，

两个或史，个口知要检测物浓度的操纵来执行。I

校准频率：每批、每H、每周、每月、更长的隔断|

校准规矩：凭据厂家的检测系统说明书，使用其提

供的或规定的校准品；

凭据厂家推荐的校准品的数量、类型和

浓度，以及校准的可担当限和频率进行

——一工用件

校准品是制造商提供的检测系统专用］

的，一般没有任何系统、试剂通用的校准

同一个校准品适用于差别系统必须有I

决不能将一个校准品、一个校准值

用于种种差别仪器1

不然，检测结果禁绝确,

校准品与质控品的区别

校准品质控品

确定文际阐发物浓度或评估、监测、控制检测

活性与阐发检测系统之系统的精密度

用途

间的佶号干系

溯源性耍求具有溯源性不需要有溯源

4.质控品的选择

•人血清基质、漫衍均匀

•无熏染性

・添加剂和调制物数量少

•瓶间变异小:酶类CV<2%,

其它CV(1%

•冻干品其复溶稳定

•包罗实验室所需项目及浓度:参考值、病理值、

医学决定水平和/或要害要领性能限如上下限。

•到实验空后的行效期在1年以上。

5.质控A的正确使用与生存.

•严格按说明/操纵5

•复沼要价保确保溶剂的质量

・、溶剂的显要准确并每次保持参加量一致

•复溶切忌剧烈振荡

•按说明/规定的要领生存，不消逾期品

•质控品底叮患者样木同样条件下测定J

三、室内质控要领的设计

各临床实验室可凭据各自的质量要求、检测.

统、检测项目的差别，选用差别的室内质控要纨

I

1.成果函数图法

2.质工控制娱领选择和设计表格■

3.操纵历程范例(OPSpecs)图法

4.浅易质控法

四、浅易室内质量控制法

1.确定质量目标

用允许总误差(TEa)的形式体现可担当的

许误差范畴。

允许总误差TEa：临床可担当的误差范畴。

阐发系统的总误差(TE)必须在临床可担当.

水平范畴内(允许总误差TEa),这种检测要领，

川广临床逋例查验。

1£=系统误差(SE)+随机误差(RE)

TE=偏倚(bias%)+1.65义不精密度(CV%)

目前国内通常以美国CLIA88能力验证

(室间质量评价)阐发质量要求和生物变异

作为允许总误差(TEa)。

与欧洲提出的弹生化项目的允许误差（与靶值的偏差）

美国CLIA488

K7.20%0.5mmol/L

Na0.90%4.Ommol/L

Cl2.13%5.0%

Ca-2.80%7.5%

TP4.80%10%

Alb4.36%10%

Glu7.00%10%

Crea7；90%15%

Urea20.8%9.0%

UA13.8%17%

Choi10.4%10%

TG42.6%25%

Bil36.2%20%

AST23.1%20%

ALT45.3%20%

CK68.0%30%

AMS15.1%30%

LDH13.2%20%

ALP一14.3%30%

2,确定控制限

捽制限通常以标准差倍数体现,实验室各个,:

目不精密度（CV%）目标为:

3。精密度:CV%<1/3TEa

4。精密度：CV%<1/4TEa

5。精密度：CV%<1/5TEa

6。精密度：CV%<1/6TEa

六西格玛(6o)质量治理看法

。是一个希腊字母，在数理统计中体现

“标准差”,。质量水平是历程满足要求的一种

度吊:，。水平越高满足要求的能力越强。

o=(TEa-bias)/CVH

CV%：来自本实验室该项目累积室内质控布控数据

bias%：来□本实验室该项II参加室间质评的偏倚

化学CLIA可担当性能:4Sigma精5Sigma精密良6Sigm^|

试验项目留度

谷丙转氨酶20%5.00%4.00%13.30%JtM

白卵白10%2.50%2.00%，1.7O9T2^H

碱性磷酸酶30%7.50%6.00%,5.

淀粉酶30%7.50%6.00%_]5.

0.4mg/dLO.1mg/dL0.08mg/dL0.067

70L

总胆红素20%5.00%3.30%MM

5mmHg1.251mmHg0.8mm■■

PC021.60%J

8%2.00%1.」

pH0.041.00%0.008」

总钙.1.0mg/dL0.250.2mg/dL0.17^M|

氯5%1.25%喇的卫・

总胆固醉10%2.50%2.00%，1.

高密度脂卵白胆冏醇7.50%-6.00*4m5.00%

舰艇激酶30%7.50%一6.00%F

0.3mg/dl0.0750.06mg/dL0.05

肌肌15%3.75%____,2.50%

5mmHg_______1.251mmHg0.8I..H

¥§60%~]

pC028%2.00%1.30%

pH0.041.00%0.008J0.OOO67^B

总钙1.0mg/dL0.250.2mg/dL

氯5%1.25%胖就310.

总胆固醇10%2.50%2.00%J|1.70%

高密度脂卵白胆固醇7.50%6.00%J5.00%JH

觥假激酗30%7.50%6.00%，5.00%

0.3mg/dl_____0.0750.06mg/dL0.051H

肌酊15%3.75%2.50%JH

T6mg/dLL5■2mg/dL.

mg/dL―

总钙1.0mg/dL0.250.2mg/dL0.

氯5%1.25%爬6“]0.83%^BM

总胆固醇10%2.50%2.00%,1.

高密度脂卵白胆固醇7.50%6.00%J5.00%

加媵激酶30%7.50%6.00%J5.00%

0.3mg/dl0.0750.06mg/dL0.05

肌酊15%3.75%弊觎■2.50%

6mg/dL1.51.2mg/dl.1.0

葡萄糖10%2.50%烈网，_，L70%JM|

总铁20%5.00%4.00%333.

乳酸脱氢酶J20%5.00%4.00%_J3.30%_^^!

5.00%j

镁25%6.25%4.20%2^M

钾0.5mmol/L0.1mmol/L0.08

9•曲班/L1.00-----Jmmo1/L

oi/L

总卵白10%2.50%2：8or

2mg/dL0.50.33^1

尿素氮9%2.25%1助服」1.50%

17%■i.3.

毒理学试验项目

五、室内质控的实际操纵

1,设定靶值

门―(h论定俏、『定1’■

首月：20或更多独立批至少20个测定结果的均值.

第1-第5个月：以逐月累枳。

・常用靶值

最初20个数据和3-5个月在控数据的累积均值.

2.设定控制限

控制限通常以标准差倍数体现.

・暂定标准差

首月：20或更多独立批至少20个测定结果的

标准差。

第1-第5个月：以后逐月累积。

•常用标准差1

以CL为例

在五个月中每月CL控制物测定值

第

第

第

第月

月

月

月

月

三

二

一

1980097100

29709980196

00

39502■0299・01

八32

410304920010

510097・0496404

A1^

一

0霏0

6A10405・0000

790Q8qQ596

«ZKx

89WU0Iu0101

4L031

9I0296・0499

X-07

09503LI0104XI05

101

1097096A100

29397990495

3I00969796«01

XA-

410697QQ0195

1xx

5120z02

14y02Q0

694991o598

02iO6

796051o501A

97941o10100

195«01

103Q5AI

A91007

«04/L9

<1

控制数据盘算的每月（和累积）

统计量—平均数和标准一

每月总数盘算的统计量

月份nExiLxi2X

120198519750799.255.11

220199519931999.754.09

(40)(3980)(396825)1

3202000200434100.104.78

(60)(5980)(597259)I

4202022204592101.102.97

(80)(9002)(801851)___・

520199119845799.55—3.65

(100)(9993)(1000308)

♦CL暂定靶值(x)=99.25

•CL暂定标准差(SD)=5.11,CV=5.15%

•CL常用靶值(x)=99.93•

♦CL常用标准差(SD)=4.15,CV=4.15%

以TEa作为质量目标,美国CLIA88CL的TEa为5%

若要到达4。精密度要求:'

CL||<JCV%=TEaX1/4(5%X1/4)=1.25%；

SD二靶值XCV%=99.93mmol/LXL25=1.25mmol/L

但实测SD=4.15mmol/L>r25mmol/L

重测CV=4.15mmol/L>k25mmol/L

可能出现的问题

如CV很小，

假失控率太

高，浪费人

力物力。

△

4_____

Z7

10%1•：V=1%

3.质控要领的性能特征

(1)头藻检出概率Ped.

指检出凌驾允许阐发误差那部分误差的概率.d

想的Ped应为1.00。

⑵假失控概率Pfr.

当阐发批除了自己固有的随机误差外没有其他

差时，判断阐发批失控的概率,理想的Pfr应为O.

通常误差检出概率达90%以上，假失控概率

在5%以卜川・满足一般临床实验室的质量要求。

Ped和Pfr呈正相关，高Ped和低Pfr取决于对

我1种控制规矩的精心选择和取舍O・

4.绘制质控图:将差别浓度水平绘制在图上

•Levey-Jennings控制图:

・Z-分数图:标准差指数图

•Youden图:

•质捽佟I:是对历程质量加以测定、记录，从而

进行评估和监察历程是否处于控制■

态的-种统计要领设计的图。■

诊断：评估-个历程的稳定性■

控制：决定某一历程何时需要调解，何时

需要保持原有状态

确认：确认某一历程的改造效果

判的r:判断历程正常照旧异常

•产物质量变异遵循一定的统计规律，具有变异

性，变异具有统计规律性。

•变异并非漫无边际，而是在一定的范畴内凭据

一定的统计规律变异，如计量数值听从正态分

Q」衍。

计量数值听从正态漫衍

68.2%

0.135%95.5%

99.7%

LI-3ou-2ou-1oLi+1o口+2。口+3。

产物质量特性值落在U±30

正态漫衍曲线下的面积

控制图的演变

u-3。

UCL

Levey-Jennings质量控制图

时间：2005年9月项目：TP5位：g/L

浓度水平：正常(Precinorm)仪器：日立7600要领:双缩旅

血清来源；PNU(194739)已坐：56.4SD：1.4

z-分数图

4o

3♦o

2•o

1•o

0•o

1・o

•^

2o正

•

3O3

•病

4#O!

5.质控要领（规矩）的应用I

将设计的质控规矩用于质控数据，判断每一

析批是在控照旧失控。

•用广检制随机”的规矩

13S:6在随机误差——

•用于检出系统误差的规矩

22S：警告.

3is：存在系统误差

4is：存在系统误差j

7x、8x、9x、10x：存在系统误差

•多规矩控制法

•Level1

・Level1Level2

(within)

6.失控原因阐发

无牢固模式，一般原则：

由易到难、由近到远

经验：重点阐发上批测定与这批的差别

•阐发失控项目：所有或单个项目

1）所有项目：首先排除试剂因素,主要考虑质控品和

仪器；

2）单个项目:首先考虑试剂因素,其次是质控品.

是仪器.

•阐发原始数据

查察未经盘算换算的检测数据如吸光度，对

该项口同批测定的全部原始数据（校准品、试齐IJ

空白、质控品、样本）结合近期室内质控宁静时

”，脸进行画发，可预tr失控大偏向。

•作察反响曲线

有可能一定要实时查察失控项目全程反响施

线，阐发反响曲线的改变如：空白吸光度、终点］

吸光度、峰值崎岖、反响时间、田和R2的参加时］

•杳察校准曲线

存眷校准曲线空白吸光度、K值等与以往校准

［tti线的差别o

•仔细回顾阐发具体检测历程

失控后应对该批检测的全历程进行迅速、仔

细的H顾，阐发有无特殊情况产生如:

试剂标签、试剂位置、质控品复溶及瓶盖松

动、仪器颠簸、试剂和校准品有无调换厂家、批

小到期、一盘算结果々'无改变等。

・选择性复杳

为了验证上述的开端阐发，进一步查清失控

因，可对卜述样本进行选择性复查：■

(1)市测失控时使用的质控品：.

(2)新开一瓶质控品,重测失控项目;

(3)通测失控时使用的校准品；I

(4)电新开一支相同批号的校准品;J

(5)重测少数几个患者样本（已知病情、近期做过）；

(6)如有条件加测一瓶定值质控品。

常见的失控原囚

室内质控方案设计不当导致的失控

•靶值设置不当，偏离中心线，常见原因使用质控

品标定值做靶化

•控制限设置不当，过窄或过宽，常见原因未使用

本实验室实测的标准差，直接使用1/4TEa或质书

品标准并做控制限。

正常Z■分数质控图

।♦恐泣）”不襄箕♦则

o

«

-

13579111315171921232527293124681012141618202224262830

2MM24倒阳冏

Z•分数质控图(正偏离)

屎段(UA)Z制蝴

2009-12-0li201(W1-31

Z•分数质控图（负偏离）

天口冬,猿贸垦后州A$T）Z分款目

F1

3579111315171921232527293124681012141618202224262830

2012-01520KW1-31

Z■分数质控图（SD设置过大）

27293124681012141618202224262830

200Q3侄201Ml・31

数质控图（SD设置过小）

»BiTESTO)Zfr»B

200HW11W10-30

试剂使用不当导致的失控■

•试剂的变质、污染或配制错误

查当天与前天有差别的试剂]

有差别无差别

调换试剂重测查易变质、稳定性差、

快失效的试剂，逐•更

•试剂稳定性差，结果出现向上或向下渐进的倾

向，调换新试剂立刻得到纠正；■

•试剂调换批号未校准（特别是免疫比浊项目），

结果突然出现向上或向下移漂，校准后得以红

Z•分数质控图（试剂配置错误）

层鼾世带范窗TPSM分

Z•分数质控图（试剂稳定性/）

3

1

1

O

0

A

•u

2

次

4

M

3579111315171921232527293124681012141618202224262830

2M9-12-01120KW1-31

Z•分数质控图（试剂稳定性差）

蝠体生成¥血别姻

4kWWWWHIHHMWIHMWMWMHHWfl

159131721252926101418222630481216202428159131721252937111519232731481216202428

200蝴侄201Ml训

Z•分数质控图（调换试剂批吮

质控品使用不当导致的失控]

•调换新批号质控乩未重新设定靶值，结果漂移；;

•质控晶复溶后使用或安排时间过长,部分项目TB、

DB、Glu测定结果逐渐下降；

•质控品复溶不当导致结果偏离靶值，校准无法纠a

•质控品使用历程中污染

Z•分数质控图（调换质控品批3

O

0

&・

邑

1234567891011121314151617181920212223242526272829303112345678910111213U15161718192021

200M24倒01邮由

Z■分数质控图（质控品不稳定）

|+警泣逅♦泄/龙心无WI

13579111315171921232527293124681012141618

2009-12-01f20im31

复溶不当导致结果偏离靶俏.

野蜘柿耳认12翼用胭

|+中式"+晔式匹

O

M

123456789101112131415161718192021222324252627282930311234567891011121314151617181920212223

2ml24版Q1M1.23

Z.分数质控图（质控品污染）

施极旗涮呼凶期

・1■野三二i+M飞凌工

.....................Si—

|TTTTTTT-HTTTTT-HTTT-H-I-HTTT-HTTTT-“H-ITT-HTTT-H-IT-I

12345678910111213141516171BIS20212223242526272829X3112345S789101112131415161718192021

200却如包M附力

•仪器出现不良问题导致的失控

•操纵失误

•校准错误

Z•分数质控图（气泡导致采样不敷）

白茹IALBM嫡

Z■分数质控图（样本针）

舜辩励?嗾01蛔咖

1234567891011121314151617111920212223242S262T2129X311234567891011121314151617181920212223

2009.I24M©01W)1.23

Z■分数质控图（校准品逾期）

1234$$78910111213141S1617111920212223242526272829303112345871910111213141$1S17IIIS2021223

2009.124HS01M1.23

失控情况处理惩罚及原因阐发步]

调■

填写失控陈诉单上报实验室卖力人

由卖力人作出是否蝌的明

（人为不对、偶然误差）

阐发失控原因1

新开一瓶质控物（质控物使用、保管）

新开另一批号质控物（质控物使用、保管）

重新校准（校准错误）

、室间质量评价的目的和用途

界说：EQA是通过实验室间的比对判定实验室校，

检测能力的运动。

作为一种质量控制东西资助实验室提高腐，

质量，阐发实验中存在的问题，采取相应技伐，

行改造。一

的：是创建参评实验室间的可比性，而不是得到

参评文代室间结果的一致。

特征：将一个检测系统与其他一个或多个检测系统

所得的结果进行比对，以确定本实验室该项

检测与其他实验室的异同。

1.评价其检测能力

EQA陈诉可以资助实验室人员发明该实验室

和其它实验室检测水平的差别，可以客观反应该

买险空的检测能力o

2.识别同题并采取改造步伐I

EQA结果综合比力了每个参加实验室检测

项目的终末质量,可资助实验室确定自U/W

加实验室中检测水平的崎岖，如果自身检测，

果与靶值有显著差别，需阐发每一个实抬空过

程，找出存在的问题并采取相应的改造步伐。

导致EQA失败的主要原因:

/1\

(

\7检测仪器未经校准并有效维护

/x

(2)

\z未做室内质控或室内质控失控

/\

(3)

\/试剂质量不稳定

/\

(4

\7实验人员的能力不能满足实验要求

/X

(5)

\/EQA的样品处理惩罚不当

/X

(6)

\/EQA样本质存在质量问题-

/\

(7

\7EQA评价问题d

3.改造阐发能力和实隘要领

如果实验室要改变实验室要领和选购新仪器

时，EQA的信息可以资助实验室做出选择。通过

阐发EQA的信息资料-，可选择更准确、更可靠、

更稳定大概说更适合于本实验室特殊要求的实验

嬖领和/或仪器。

选择新检测系统时考虑：I

♦找出多数实验室用的检测系统

•比力差别系统的靶值或公议值，了解差别系统内

参加实验室的变异系数1^1

♦视察了解芥别实险室检测系统的区别

4.确定重点投入和培训需求

EQA可以资助实验室确定哪个专业、检测项目

蛊要增强培训事情。

5.实验室质量的客观证据

•文监.迪过得到满意的质评结果来证明实验室检测系统的

准确性和吁律性；

•《临床实验室治理步伐》考核查抄表中准确性评价步伐包

含EQA结果；

•纵然实险室EQA结果不理想,若实验室阐发了实验历程，

查找问题，采取改造步伐并做好记录，也可以作为质量1

油的证据。一

6,支持实嘛室认可

在实验室认可领域，EQA越来越受到各国及国

际认可组织的垂视,成为实验室认可运动1U不可或，

的一项重要内容，它反应实验室是否胜任从事某项

检测的能力。

7.增加实将军用户的信心.

一次EQA结果的解释具有一定的局限性，但利

用多次EQA结果阐发实验室检测水平就比力客观和

8.实验室质量包管的外部羁系东西■

EQA结果可以作为卫生行政主管部分和医院管

理拧对实抬军质用实施肮督的再耍东西。■

二、靶值简直定

室间质评靶值确定十分重要，主要三种类型］

•公议值：通常为要领组的平均值或稳健丈量中位数

•从外部推导得到参考值（参考实验室或决定/参考要领）-

二、室I'nJ质评偏差

是指视察值对付某其中心值的差，即检测值

相对付平均值的差别。

空间质评偏落％=测定结果-靶值x100%

Sil

四、室间质评的评估区间（PT上下限）

•适当的区间:

牢固区间（靶值±4mmoI/L）

牢固百分比（靶值±10%）

・基于公议标准差（s）的区间：

靶值±2/3S

项目CLIA88可评价区间评价区间

担当准则（云南省）（部中心）

靶值±25%靶值±25%靶值±25%

IgA、IgM靶值±3s幽值±25%靶佰±2s

C3、C4靶值±3s吧值±25%靶值±2s

CRP无wire±30%靶值±2s

RF靶值±2个稀释靶位士30%靶值±2s

抗0100黑准确靶侑±30%靶值±2s

K、入轻无靶值士25%靶值±2s

链

「-GT无值±30%靶值士20%

其余生化靶值土牢固百分比采取CLIA88采取CLIA88

■项目靶佰土吊固区间可担当准则

可担当准则

使用标准差的区间可能出现的两种情况

•评估区同不适本地变窄

在极精密要领上使用±2/3s单位，可担当范

比临床需要窄许多o

•评估IX间不适本地变宽

在极不精密要领上使用±2/3s单位，可担当

国比临床需要宽许多。

EQA运动流程■

临床查验中心

（定期向参控实验室发通知、质控物）

参控实抬室检测后将结果回报临床查验中心

临床查没中心对结果统计阐发与评价

将评价结果反馈给参控实验室■

室间质量评价（EQA）

国际EQA

全国EQA

省内EQA

—kI，/1>\44lc▲AlAfL\11

JJ|"l——I口JVif/\Jj

通例化学EQA

特殊卵白EQA

临床血液学EQA

显微镜形态EQA

尿液化学阐发EQA

凝血试验EQA

微生物学EQA

熏染性疾病血清标记物EQA

内排泄与肿瘤标记物EQA

五、EQA结果的阐发

1.在一次EQA中多个结果偏于靶值的一侧，提示存j

在系统误差，可能与其校准、参数设置不正确、试

剂、滋扰物质等仃关；

卵：AFP刺

MH犍州Rft««(«研丽TRMiR雅献

2009118.69.8•12248.3-11.31

20091241.546.4•105641.0-51,8*«il

20091326.830.0•106726.6-33.4*aa

2009143.64.1•12203.5-47*aa

20091514.8•103014.7-18.3tad

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