青蒿琥酯抗肿瘤作用研究课件

青蒿琥酯抗肿瘤作用研究作者zcm青蒿琥酯抗肿瘤作用研究前言青蒿琥酯抗肿瘤作用研究1.青蒿类药物简介青蒿素是1972年我国中医研究院从青蒿中分离出的活性物质以后我国科学家成功研制了比青蒿素抗疟疾作用更强的双氢青蒿素和青蒿琥酯等多种青蒿素类药物。近年研究发现青蒿素类药物具有抗肿瘤作用。青蒿琥酯抗肿瘤作用研究青蒿素类药物的化学结构特点：含有过氧化物桥结构(C-O-O-C)。青蒿琥酯抗肿瘤作用研究Molt-4:人淋巴母细胞白血病细胞株

青蒿琥酯抗肿瘤作用研究青蒿琥酯抗肿瘤作用研究我们设想：全铁转铁运蛋白+青蒿琥酯进行抗肿瘤实验青蒿琥酯抗肿瘤作用研究实验目的观察全铁转铁蛋白与青蒿琥酯联合在体内、体外的抗肿瘤作用。青蒿琥酯抗肿瘤作用研究实验分为两个部分：体外------细胞学体内-------动物学青蒿琥酯抗肿瘤作用研究细胞学实验----材料肿瘤细胞株：HCT-8（人结肠癌细胞株）K-562（人红白血病细胞株）MCF-7（人乳腺癌细胞株）试剂：

RPMI1640胰蛋白酶MTT（噻唑兰）DMSO（二甲基亚砜）5-氟脲嘧啶（5-Fu）青蒿琥酯青蒿琥酯抗肿瘤作用研究细胞学实验-技术路线培养HCT-8、K562、MCF-7肿瘤细胞株青蒿琥酯空白对照全铁转铁蛋白计算生长的抑制率全铁转铁蛋白测定OD值加入DMSO加入MTT氟尿嘧啶青蒿琥酯青蒿琥酯抗肿瘤作用研究细胞学实验---统计学处理

IC50计算使用SPSS软件包的概率单位法(Probit)

组间比较t检验。青蒿琥酯抗肿瘤作用研究动物学实验青蒿琥酯抗肿瘤作用研究动物实验---材料瘤株：小鼠肉瘤S-180。动物：昆明种小鼠（BALB/c–nu裸小鼠）,体重18~22g,雌雄不限，在同一批试验中使用性别相同的小鼠。药物：青蒿琥酯环磷酰胺(CTX)青蒿琥酯抗肿瘤作用研究动物学实验-技术路线给裸鼠接种S180瘤株空白对照静脉注射全铁转铁蛋白计算抑瘤率加剥离瘤块，称瘤重处死动物CTX腹腔注射青蒿琥酯腹腔注射青蒿琥酯青蒿琥酯抗肿瘤作用研究动物学实验----统计学处理数据分析使用SPSSV10.0各实验组与阴性对照组及CTX组间比较采用成组t检验。

青蒿琥酯抗肿瘤作用研究细胞学——

实验结果与讨论青蒿琥酯抗肿瘤作用研究结论1

1mg/ml浓度全铁转铁蛋白具有促进HCT-8、K562及MCF-7细胞生长的作用青蒿琥酯抗肿瘤作用研究统计学分析有显著性（P<0.05）。青蒿琥酯抗肿瘤作用研究统计学分析有显著性（P<0.05）。青蒿琥酯抗肿瘤作用研究统计学分析有显著性（P<0.05）。青蒿琥酯抗肿瘤作用研究恶性肿瘤细胞生长繁殖速度快，需要大量的Fe3+肿瘤细胞表面的转铁蛋白受体（TFR）高表达。青蒿琥酯抗肿瘤作用研究使用全铁转铁蛋白可以提高细胞内的含量，促进肿瘤细胞生长。青蒿琥酯抗肿瘤作用研究结论2

青蒿琥酯在体外对HCT-8、K562及MCF-7细胞有明显的杀伤作用青蒿琥酯抗肿瘤作用研究IC50=1.99±0.66ug/ml青蒿琥酯抗肿瘤作用研究IC50=1.62±0.76ug/mlIC50=10.54±1.25ug/ml上述结果与文献报道一致青蒿琥酯抗肿瘤作用研究结论3

全铁转铁蛋白不能明显增强青蒿琥酯对HCT-8、K562及MCF-7的杀伤作用青蒿琥酯抗肿瘤作用研究P>0.05P<0.05青蒿琥酯抗肿瘤作用研究各剂量组间t检验：P>0.05青蒿琥酯抗肿瘤作用研究各剂量组间t检验：P>0.05青蒿琥酯抗肿瘤作用研究与Henry等的研究结果不一致与Henry等的研究的相似点：药物类似：化学结构、抗疟疾作用、毒副作用以及抗肿瘤作用细胞株：同为人恶性肿瘤细胞株使用的培养液相同：RPMI1640加入的全铁转铁蛋白浓度相同---1ug/ml=12.6uM结果不同，Why？青蒿琥酯抗肿瘤作用研究我们的分析青蒿琥酯的抗肿瘤作用机制可能不是铁离子介导的过氧基断裂产生大量的氧自由基而杀死肿瘤细胞，而可能是其他机制。

全铁转铁蛋白为肿瘤细胞提供了生长繁殖所需的Fe2+----促进生长

青蒿琥酯杀伤肿瘤细胞----抑制生长联合使用----作用相互抵消青蒿琥酯抗肿瘤作用研究理由一人骨髓中的造血细胞、粘膜上皮细胞均生长快、代谢旺盛，其细胞内Fe2+的含量高。而动物学研究及临床实践发现青蒿素类药物很安全，没有发现有明显的骨髓抑制和粘膜损伤。说明青蒿素类药物不是直接与Fe2+发生反应而释放出大量氧自由基。青蒿琥酯抗肿瘤作用研究理由二至今只有两篇报道全铁转铁蛋白显著增强双氢青蒿素对肿瘤细胞的杀伤作用的文献，分别是：

1、1995年HenryLai和NarendraP.Singh的Selectivecancercellcytotoxicityfromexposuretodihydroartemisininandholotransferrin.2、2001年NarendraP.Singh和HenryLai的Selectivetoxicityofdihydroartemisininandholotransferrintowardhumanbreastcancercells.而上述2篇文献的作者均相同。近10年未再见有类似报道。青蒿琥酯抗肿瘤作用研究结论4

青蒿琥酯在体内对S180肉瘤有明显的抗肿瘤作用青蒿琥酯抗肿瘤作用研究与阴性对照组比较P>0.05P<0.05P<0.01青蒿琥酯抗肿瘤作用研究结果与文献报道一致青蒿琥酯抗肿瘤作用研究结论

1浓度为1mg/ml的全铁转铁蛋白有促进HCT-8、K562和MCF-7肿瘤细胞生长的作用。

2青蒿琥酯对人肿瘤细胞株HCT-8、K562和MCF-7具有一定的体外抑瘤作用，IC50值为1.99~10.54μg/ml。3我们发现加用浓度为1mg/ml的全铁转铁蛋白不能增强青蒿琥酯对HCT-8、K562和MCF-7瘤株的生长抑制作用。4腹腔注射青蒿琥酯对小鼠S180肉瘤具有一定的抑制作用。青蒿琥酯抗肿瘤作用研究致谢感谢xxxxxxxx青蒿琥酯抗肿瘤作用研究谢谢！青蒿琥酯抗肿瘤作用研究细胞学实验-技术路线培养HCT-8、K562、MCF-7肿瘤细胞株青蒿琥酯空白对照全铁转铁蛋白计算生长的抑制率全铁转铁蛋白测定OD值加入DMSO加入MMT氟尿嘧啶青蒿琥酯只有细胞没有药物本底孔测试孔OD需减去本底OD4h，使用96孔板培养3h终浓度1mg/ml终浓度1mg/ml培养96h培养4h5mg/ml的MTT10ul1