2025年浙教版选择性必修3生物上册月考试卷含答案

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A.上述酵母菌在接种前的处理是对其进行等浓度梯度的稀释B.在含葡萄糖类似物的培养基上，导入CST1的酵母菌存活率最高C.据图推测，CST1的功能可能是转运葡萄糖进入细胞D.导入cst1E81K的酵母菌葡萄糖吸收速率大于导入CST1的酵母菌9、野生型大肠杆菌菌株能在基本培养基上生长，氨基酸营养缺陷型突变株无法合成某种氨基酸，只能在完全培养基上生长，下图为纯化某氨基酸营养缺陷型突变株的部分流程图，①②③④代表培养基，A、B、C表示操作步骤，D、E为菌落。下列叙述正确的是（）

A.图中①②④为完全培养基，③为基本培养基B.A操作的目的是提高突变率，增加突变株的数量C.B的正确操作是用涂布器蘸取菌液后均匀地涂布在②表面D.经C过程原位影印及培养后，可从④中挑取D进行纯化培养10、下图表示动物细胞培养的基本流程。有关叙述正确的是（）

A.在C瓶中进行的细胞培养称为原代培养B.培养瓶D可以通过松盖处理满足细胞培养的气体环境需要C.培养瓶D无需放置在CO2培养箱中，但需要保持恒温D.D瓶细胞出现接触抑制时，用胰蛋白酶处理，再用离心法收集细胞分瓶培养11、甲流试剂盒中的抗血凝素单克隆抗体能与甲流病毒的血凝素蛋白（HA）特异性结合，发挥诊断作用。利用小鼠制备抗HA单克隆抗体的流程如图，下列叙述正确的是（）

A.制备抗HA单克隆抗体使用的B淋巴细胞取自注射过HA的小鼠脾脏B.在特定的选择培养基上，未融合的亲本细胞和融合的具有同种核的细胞都会死亡C.放入96孔板的细胞为多种杂交瘤细胞，均能产生所需抗体D.将图中细胞群a在体外大规模培养，可以提取出大量的抗HA单克隆抗体评卷人得分三、填空题(共5题，共10分)12、一般包括______、______等技术13、禁止生物武器公约。

（1）1972年4月10日，苏联、美国、英国分别在其首都签署了《禁止试制、生产和储存并销毁细菌（生物）和毒剂武器公约》（简称_____）；并于1975年3月26日生效。1984年11月15日，我国也加入了这一公约。

（2）我国在任何情况下_____、_____、_____生物武器，并反对生物武器及其技术和设备的扩散。14、最常用的载体是______，它是一种裸露的、结构简单的、独立于细菌染色体之外，并具有______能力的_____。15、去除DNA中的杂质，可以在滤液中加入2mol/L浓度的NaCL溶液，目的是____去除__________________；再调节NaCL溶液浓度为0．14mol/L，目的是_______________，_______________去除_______________；最后用浓度为2mol/L的NaCL溶液重新溶解________________16、什么是生物武器？简述生物武器的危害。__________评卷人得分四、实验题(共2题，共16分)17、最新调查显示手机每平方厘米就驻扎了12万个细菌；这个数字足以令马桶坐垫上的细菌队伍汗颜。某生物兴趣小组的同学，利用手机表面的细菌进行了相关的培养研究。

（1）为研究手机表面微生物的种类；用稀释涂布平板法进行细菌的纯化和分离。下面的四种菌落分布情况中，哪些选项是通过稀释涂布平板法得到的_____

（2）研究小组用琼脂扩散法测定玫瑰精油对手机表面细菌的抑制情况。该方法的操作步骤如下：首先制备牛肉膏蛋白胨平板，用涂布器将5种细菌分别接种到5个平板上，得到细菌平板。然后制备直径为5mm的滤纸圆片，采用_____灭菌法处理，将灭菌的滤纸片部分放入适宜浓度的玫瑰精油中，对照组放入_____中，浸泡10min，后将滤纸片放在5个细菌平板表面。最后将平板放入恒温培养箱中倒置培养48小时。通过测量_____来检测玫瑰精油对5种细菌的抑制效果。18、酵母菌与人们的日常生活密切相关；也是现代生物技术研究常用的生物。

(1)利用酵母菌发酵产生酒精的过程中，要先充气后闭气，原因是_____。

(2)利用玉米秸秆生产酒精时，水解秸秆所用的纤维素酶可来自微生物，分离产生该酶的微生物时，所需要的培养基为_____（按功能分），培养基中的碳源为_____。

(3)虽然不同的生物对营养物质的需求不同，但是培养这些微生物的培养基，一般都含有四大营养成分，即_____、_____、_____和碳源。培养基灭菌的常用方法为_____。

(4)接种微生物常用的两种方法是_____、_____。实验室接种微生物时，常在酒精灯火焰旁进行，这样操作的目的是_____。评卷人得分五、综合题(共3题，共6分)19、中国甜柿的自然脱涩与乙醛代谢关键酶基因（PDC）密切相关；推测涩味程度可能与PDC基因的表达情况有关。为筛选PDC基因的调控蛋白，科研人员构建了质粒A和质粒G（如图1；图2所示），利用酵母菌进行了相关实验探究。

（1）启动子位于基因首端，是__________的位点，启动子区域还存在着许多调控蛋白的结合位点，可影响基因的转录水平。PDC基因的启动子序列未知，为获得大量该基因启动子所在片段，可利用限制酶将基因组DNA进行酶切，然后在__________的作用下将已知序列信息的接头片段连接在PDC基因的上游，根据接头片段和PDC基因编码序列设计引物进行_________。

（2）利用质粒A构建含有PDC基因启动子片段的重组质粒并导代谢缺陷型酵母菌，用不含______的培养基可筛选出成功转化的酵母菌Y1H。质粒G上的AD基因表达出的AD蛋白与启动子足够靠近时，能够激活后续基因转录，因此需获得待测蛋白与AD蛋白的融合蛋白用于后续筛选。科研人员从中国甜柿中提取RNA，将逆转录形成的各种_________与质粒G连接后导入酵母菌，此时应选择质粒G中的位点_______。（填序号1～5）作为cDNA的插入位点；最终获得携带不同cDNA片段的酵母菌群Y187。

（3）重组酵母Y187与Y1H能够进行接合生殖，形成的接合子含有两种酵母菌质粒上的所有基因。若接合子能在含有金担子素的培养基中生存，则推测待测蛋白是PDC基因的调控蛋白，请结合图3阐述作出该推测的理由________。

（4）筛选出PDC基因的调控蛋白后，为满足生产上的需要对其进行改良，这种技术属于___________工程，该工程的起点是____________。20、花椰菜（2n=18；用MM表示）属十字花科，经人工长期定向选育，对黑腐病无抗性。黑芥（2=16，用NN表示）为花椰菜近缘野生种，对黑腐病等多种常见病害具有抗性。我国科学家将紫外线（UV）照射处理的黑芥叶肉原生质体和花椰菜下胚轴原生质体融合，获得了抗黑腐病的杂合新植株（过程如下图）

请回答下列问题：

(1)用______________酶处理可以获得有活力的原生质体。

(2)图①表示______________过程；诱导过程常用的化学物质是________。

(3)图②是图①经______________和______________后形成的______________组织。由图②经______________过程形成图③。理论上获得的杂种植株染色体组成为______________（用字母M和N表示）。

(4)已知供体黑芥叶肉原生质体在UV处理前后形态上没有明显的区别；但是在和下胚轴原生质体融合时较易破碎。在培养3天之内，用显微镜观察细胞中是否存在_________（细胞器），作为早期鉴别杂合细胞的标志，初步筛选出融合细胞。

(5)请说出鉴定新植株是否抗黑腐病的方法_____。

(6)对双亲和部分杂合新植株的染色体计数，结果如下表所示。。植株花椰菜黑芥杂合新植株H1杂合新植株H2杂合新植株H3染色体数/条1816581930

根据表中数据，尝试推测杂合新植株H2、H3染色体数目少于34（双亲染色体数之和），杂合新植株H1染色体数目大于34可能的原因_____。根据杂合细胞染色体数目推测细胞融合的特点以及这种融合过程中出现的特点可能具有的应用价值______。21、玉米具有一定抗盐碱能力和抗低温能力；这与其抗逆性基因M有关。为研究基因M转入水稻后在逆境胁迫应答中的重要作用，科学家做了如下实验：首先将基因M和绿色荧光蛋白基因重组得到目的基因，该基因的两端同时拥有HindⅢ和BamHⅠ切点，随后将目的基因导入水稻并测定了基因M在水稻中的表达水平。

(1)当用图1所示质粒与目的基因构建重组质粒时，最合适的限制酶是___________。

(2)根据图2，宜选择玉米的__________（填器官名称）提取mRNA，然后在体外通过___________的方式获得玉米抗逆性基因M，再用____________技术扩增，该技术的简要步骤是__________。

(3)将重组质粒导入水稻幼胚，加入含有___________的培养基筛选，提取培养后的水稻幼胚DNA，设计引物对目的基因进行电泳鉴定，通过图3结果可知号水稻材料已成功插入目的基因。研究人员又用显微镜观察转基因水稻细胞，发出绿色荧光的相应植株为目的植株，依据图4结果，后续还需进行的实验步骤为__________。参考答案一、选择题(共5题，共10分)1、B【分析】【分析】

醋酸菌好氧性细菌；当缺少糖源时和有氧条件下，可将乙醇（酒精）氧化成醋酸。当氧气；糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸。醋酸菌生长的最佳温度是在30℃～35℃。

【详解】

A；醋的制作需用醋酸菌；醋酸菌是一种好氧菌，所以在制作过程中需适时通氧气，A正确；

B；醋酸菌是一种嗜温菌；温度要求较高，一般在30-35℃左右，B错误；

C；醋酸菌能在氧气充足；糖源不足的条件下将果酒转变为乙醛，在生成醋酸，因此可以制作果醋，C正确；

D；当氧气、糖源充足时；醋酸菌可将葡萄中的糖分解成醋酸，D正确。

故选B。2、B【分析】【分析】

蛋白质工程指以蛋白质的结构规律及其与生物功能的关系作为基础；通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行基因改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活的需要。

【详解】

A；蛋白质工程能通过基因修饰或基因合成；定向对现有蛋白质分子的结构进行改造，使之更加符合人类需要，A正确；

B；蛋白质工程能通过基因修饰或基因合成；实现对蛋白质分子的结构进行改造的，蛋白质工程操作的直接对象是基因，而不是蛋白质，B错误；

C；蛋白质工程可以通过基因合成；制造自然界不曾存在过的新型蛋白质分子，C正确；

D；蛋白质工程是在基因工程的基础上；延伸出来的第二代基因工程，二者密不可分，D正确。

故选B。

【点睛】3、D【分析】1；培养基选择分解尿素的微生物的原理：培养基的氮源为尿素；只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素，以尿素作为氮源。缺乏脲酶的微生物由于不能分解尿素，缺乏氮源而不能生长发育繁殖，而受到抑制，所以用此培养基就能够选择出分解尿素的微生物。

2；分解尿素的细菌的鉴定细菌合成的脲酶将尿素分解成氨；氨会使培养基的碱性增强。在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂培养细菌，若指示剂变红，可确定该种细菌能够分解尿素。

3；统计菌落数目的方法：

（1）显微镜直接计数法①原理：利用特定细菌计数板或血细胞计数板；在显微镜下计算一定容积的样品中微生物数量；②方法：用计数板计数；③缺点：不能区分死菌与活菌；

（2）间接计数法（活菌计数法）①原理：当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌．通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌。②操作：a、设置重复组，增强实验的说服力与准确性；b；为了保证结果准确；一般选择菌落数在30～300的平板进行计数。③计算公式：每克样品中的菌株数=（c÷V）×M，其中c代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数，V代表涂布平板时所用的稀释液的体积（mL），M代表稀释倍数。

【详解】

A；分离土壤中分解尿素的细菌；培养基中要有尿素、琼脂糖、葡萄糖，尿素给分解尿素的细菌提供氮源，不能加硝酸盐，否则无法起到选择出尿素分解菌的作用，A错误；

B；用活菌计数法统计结果时；有的活菌在培养过程中会死亡，而有的菌落是由多个活菌共同形成的，故活菌的实际数目往往比统计的菌落数高，B错误；

C；脲酶将尿素分解成氨使培养基的pH增加；加入酚红指示剂后变红，C错误；

D；每克样品中的菌株数=（C÷V）×M；其中C代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数，V代表涂布平板时所用的稀释液的体积（mL），M代表稀释倍数，D正确。

故选D。4、A【分析】【分析】

胚胎发育过程：

（1）卵裂期：细胞进行有丝分裂；数量增加，胚胎总体积不增加；

（2）桑葚胚：32个细胞左右的胚胎；之前所有细胞都能发育成完整胚胎的潜能属全能细胞；

（3）囊胚：细胞开始分化；其中个体较大的细胞叫内细胞团将来发育成胎儿的各种组织；而滋养层细胞将来发育成胎膜和胎盘；胚胎内部逐渐出现囊胚腔。注：囊胚的扩大会导致透明带的破裂，胚胎伸展出来，这一过程叫孵化；

（4）原肠胚：内细胞团表层形成外胚层；下方细胞形成内胚层，由内胚层包围的囊腔叫原肠腔。

【详解】

A；在桑葚胚阶段；32个细胞左右的胚胎，胚胎的内部无含有液体的腔，A错误；

B；胚胎干细胞是一类未分化的细胞；可以从早期胚胎或原始性腺中分离获得，B正确；

C；桑葚胚的细胞一般都具有全能性；囊胚的细胞逐渐分化，C正确；

D；受精卵早期分裂时；胚胎中细胞数目不断增加，但胚胎的总体积并不增加，甚至略微缩小，D正确。

故选A。5、D【分析】【分析】

PCR技术的条件：模板DNA；四种脱氧核苷酸、一对引物、热稳定DNA聚合酶（Taq酶）；PCR的操作过程：①高温变性：DNA解旋过程（PCR扩增中双链DNA解开不需要解旋酶；高温条件下氢键可自动解开）；低温复性：引物结合到互补链DNA上；③中温延伸：合成子链。

【详解】

A；在高温条件下；DNA的之间的氢键断裂形成2条DNA单链，A错误；

B；解旋后；2条单链上和引物结合的部分的碱基序不同，因为PCR技术中需要两种引物，B错误；

C；在耐高温的DNA聚合酶的作用下；以2条单链分别为模板在引物的3’端延伸形成各自的子链，C错误；

D；PCR技术中一次循环需要的步骤为高温变性、低温复性、中温延伸；可见通过控制PCR仪的温度，可重复循环多次PCR，使DNA数量呈指数式增长，D正确。

故选D。二、多选题(共6题，共12分)6、A:B【分析】【分析】

单克隆抗体的制备过程是：对小动物注射抗原；从该动物的脾脏中获取效应B细胞，将效应B细胞与骨髓瘤细胞融合，筛选出能产生单一抗体的杂交瘤细胞，克隆化培养杂交瘤细胞（体内培养和体外培养），最后获取单克隆抗体。

【详解】

A；制备单克隆抗体是动物细胞融合技术最重要的应用；融合后形成的杂交瘤细胞既能无限增殖，又能产生单克隆抗体，A正确；

B；单克隆抗体具有特异性强、纯度高、灵敏度高；并可能大量制备的特点，B正确；

C；体内诱生法制备的单克隆抗体需要注入到小鼠的体内；最后从小鼠的腹腔中提取腹水，此方法比较麻烦，而且抗体的量也较少，因此对于工业上需求较多的抗体而言，通常是采用体外培养法，C错误；

D；单克隆抗体是由骨髓瘤细胞和效应B细胞形成的杂交瘤细胞产生的；D错误。

故选AB。7、A:B【分析】【分析】

微卫星DNA是真核生物基因组中的简单重复序列；由于重复单位的重复次数在个体间呈高度特异性并且数量丰富，可以作为分子标记应用于人类亲子鉴定；种群遗传多样性研究。

【详解】

AB；微卫星DNA是真核生物基因组中的简单重复序列；且重复单位的重复次数在个体间呈高度特异性，因此可用于人类亲子鉴定、物种间亲缘关系鉴定、物质和遗传多样性的研究等，AB正确；

C；诱导基因突变的因素有物理因素、化学因素和生物因素；与微卫星DNA的特性无关，C错误；

D；冠状病毒的遗传物质是RNA；其测序与微卫星DNA的特性无关，D错误。

故选AB。8、A:C【分析】【分析】

从左图看出；在添加麦芽糖的培养基中空质粒组；导入CST1和导入cst1E81K的酵母菌的酵母菌菌落数目相差不大，但在麦芽糖+葡萄糖类似物组中，导入CST1的酵母菌菌落数目最少，说明吸收葡萄糖类似物最多。

【详解】

A；从图中可以看出；后一稀释浓度是前一稀释浓度的5倍，所以是进行等浓度梯度的稀释，A错误；

B；在含葡萄糖类似物的培养基上；导入CST1的酵母菌菌落颜色最浅，说明存活率最低，B错误；

C；导入CST1的酵母菌在葡萄糖类似物的培养基上菌落数目降低；由于葡萄糖类似物被吸收后可以杀死酵母菌，因此可以推测CST1能转运葡萄糖类似物进入酵母菌，所以其功能可能是转运葡萄糖进入细胞，C正确；

D、在麦芽糖+葡萄糖类似物的培养基中，导入cst1E81K的酵母菌菌落数目多，说明其存活率更高，由于葡萄糖类似物被吸收后可以杀死酵母菌，因此可以推测导入cst1E81K的酵母菌葡萄糖吸收速率小于导入CST1的酵母菌；D错误。

故选C。9、A:D【分析】【分析】

由题图信息分析可知；图中首先利用培养基扩增菌体，然后在涂布在平板上，再通过影印法将菌种接种到两种培养基中，分别是基本培养基；完全培养基；野生型大肠杆菌菌株能在基本培养基上生长，而氨基酸营养缺陷型菌株由于发生基因突变无法合成某种氨基酸只能在完全培养基上生长，据此利用培养基的种类便可以选择出氨基酸突变株。

【详解】

A；野生型大肠杆菌菌株能在基本培养基上生长；氨基酸营养缺陷型突变株无法合成某种氨基酸，只能在完全培养基上生长，根据题干信息和图形分析，图中①②④中含有菌落，①②④为完全培养基，③中影印处无菌落，③为基本培养基，A正确；

B；紫外线可以提高突变的频率；而A操作即培养的目的是提高已经突变菌株的浓度（A操作不能提高突变率），即增加突变株的数量，B错误；

C；B操作是将菌液滴加到培养基表面；再用涂布器将菌液均匀的涂布在②表面，C错误；

D；从图中可看出；D在③基本培养基中无法生长，在完全培养基中可生长，说明D是氨基酸缺陷型菌落，故经C过程影印及培养后，可从④培养基中挑取D菌落进行纯化培养，D正确。

故选AD。10、A:B:D【分析】【分析】

动物细胞培养的过程：取动物组织块→剪碎组织→用胰蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养液中（原代培养）→放入二氧化碳培养箱培养→贴满瓶壁的细胞用酶分散为单个细胞；制成细胞悬液→转入培养液（传代培养）→放入二氧化碳培养箱培养。

【详解】

A；将动物组织分散为单个细胞制成细胞悬液中进行的第一次培养为原代培养；因此在C瓶中进行的细胞培养称为原代培养，A正确；

BC、进行动物细胞培养时，通常采用培养皿或松盖培养瓶，将其置于含95%空气和5%CO2的混合气体的培养箱中进行培养，以满足细胞培养的气体环境需要，其中氧气是细胞呼吸必需的，CO2是为了维持培养液的pH；B正确；C错误；

D；D瓶细胞出现接触抑制时；应用胰蛋白酶处理使其分散为单个细胞，再用离心法收集细胞分瓶以进行传代培养，D正确。

故选ABD。11、A:B:D【分析】【分析】

单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应；之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。

【详解】

A；抗原与抗体的结合具有特异性；为制备抗HA单克隆抗体，则使用的B淋巴细胞应取自注射过HA的小鼠脾脏，A正确；

B；在特定的选择培养基上；未融合的亲本细胞（B淋巴细胞类型、骨髓瘤细胞类型）和融合的具有同种核的细胞（B淋巴细胞-B淋巴细胞型和骨髓瘤-骨髓瘤细胞型）都会死亡，B正确；

C；将B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合后；放入96孔板，不一定都能产生所需抗体，还需进行抗体阳性检测，C错误；

D；据图可知；图中细胞群a在加入HA抗原后呈阳性，说明细胞群a产生了抗HA抗原的抗体，故将图中细胞群a在体外大规模培养，可以提取出大量的抗HA单克隆抗体，D正确。

故选ABD。三、填空题(共5题，共10分)12、略

【解析】①.动物细胞培养和核移植技术、②.动物细胞融合与单克隆抗体13、略

【分析】【详解】

为最大程度的保障人类权益；签署了禁止生物武器公约：

（1）《禁止试制；生产和储存并销毁细菌（生物）和毒剂武器公约》；简称《禁止生物武器公约》。

（2）我国对于生物武器的态度是在任何情况下不发展、不生产、不储存生物武器，并反对生物武器及其技术和设备的扩散。【解析】①.《禁止生物武器公约》②.不发展③.不生产④.不储存14、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】质粒自我复制双链环状DNA分子15、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】不容的杂质析出DNA过滤溶液中的杂质DNA16、略

【分析】【详解】

生物武器种类：包括致病菌类、病毒类、生化毒剂类等，以及经过基因重组的致病菌等。生物武器致病力强、攻击范围广。把这些病原体直接或者间接通过食物、生活必需品和带菌昆虫等散布，经由消化道、消化道和皮肤等侵入人、畜体内，造成大规模伤亡，也能损害植物，若用与战争，则可以对军队和平民造成大规模杀伤后果。【解析】生物武器种类：包括致病菌类、病毒类、生化毒剂类等，以及经过基因重组的致病菌等。生物武器致病力强、攻击范围广。把这些病原体直接或者间接通过食物、生活必需品和带菌昆虫等散布，经由消化道、消化道和皮肤等侵入人、畜体内，造成大规模伤亡，也能损害植物。四、实验题(共2题，共16分)17、略

【分析】【分析】

1；微生物常见的接种的方法①平板划线法：将已经溶化的培养基倒入培养皿制成平板、划线接种、在恒温箱里培养。在线的开始部分；微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过适量稀释后，均匀涂布在固体培养基表面，经培养后可形成单个菌落。

2；常用的灭菌方法：干热灭菌法、灼烧灭菌法、高压蒸汽灭菌法。

【详解】

（1）培养微生物的培养基一般含有水；碳源、氮源和无机盐；在除上述几种主要营养物质的基础上，培养基还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。

（2）制备固体培养基的基本步骤有：计算→称量→溶化→灭菌→倒平板。等平板冷却凝固后；应将平板倒置，这样做的目的是，防止培养基冷却过程中形成的水滴落到培养基表面对培养基造成污染，又可以避免培养基中的水分过快的挥发。

（3）由图和分析可知；A；B、C为通过稀释涂布平板法得到的菌落（菌落分布较均匀），D为通过平板划线法得到的菌落（菌落分布在线条上）。

故选ABC。

（4）为保持滤纸的干燥；灭菌时应用干热灭菌法，不宜采用高压蒸汽灭菌法。将灭菌的滤纸片分别放入适宜浓度的玫瑰精油和无菌水中（对照）浸泡10min，再将滤纸片放在5个细菌平板表面，最后将平板放入恒温箱中倒置培养48h。通过测量透明圈直径(抑菌圈直径)可判断玫瑰精油对5种供试细菌的抑制效果，抑菌圈越大，说明抑制作用越强。

【点睛】

本题考查微生物的培养、筛选、琼脂扩散法测定玫瑰精油的抑菌情况等知识，要求识记培养基的成分、筛选方法，熟练掌握实验步骤。【解析】ABC干热无菌水透明圈的直径（大小）18、略

【分析】【分析】

1；培养基的种类及用途：（1）按物理性质可分为液体培养基、半固体培养基和固体培养基。液体培养基应用于工业或生活生产；固体培养基应用于微生物的分离和鉴定，半固体培养基则常用于观察微生物的运动及菌种保藏等。（2）按照培养基的用途，可将培养基分为选择培养基和鉴别培养基。

2；灭菌（1）灭菌是指使用强烈的理化方法杀死物体内外所有的微生物；包括芽孢和孢子。（2）灭菌方法有灼烧灭菌、干热灭菌、湿热灭菌。①接种环、接种针、试管口等使用灼烧灭菌法；②玻璃器皿、金属用具等使用干热灭菌法，所用器械是干热灭菌箱；③培养基、无菌水等使用高压蒸汽灭菌法，所用器械是高压蒸汽灭菌锅。

【详解】

（1）利用酵母菌发酵产生酒精的过程中；要先充气后闭气，原因是酵母菌是兼性厌氧菌，因此果酒发酵时先通气使酵母菌大量繁殖，后闭气使酵母菌进行酒精发酵。

（2）利用玉米秸秆生产酒精时，水解秸秆所用的纤维素酶可来自微生物，由于该培养基以秸秆（纤维素）为唯一碳源，原则上，只有能分解纤维素的微生物才能在该培养基上生存，因此按功能分，该培养基属于选择培养基。

（3）虽然不同的生物对营养物质的需求不同；但是培养这些微生物的培养基，一般都含有水；无机盐、碳源、氮源（基本成分）和生长因子等。培养基灭菌的常用方法为高压蒸汽灭菌法。

（4）分散的微生物在适宜的固体培养基表面或内部可以繁殖形成肉眼可见的、有一定形态结构的菌落。采用平板划线法和稀释涂布平板法能将单个微生物分散在固体培养基上，之后经培养得到的单菌落一般是由单个微生物繁殖形成的纯培养物。实验室接种微生物时，常在酒精灯火焰旁进行，这样操作的目的是酒精灯火焰旁存在无菌区域，可以避免周围环境中的微生物的污染。【解析】(1)先充气有利于酵母菌进行有氧呼吸大量繁殖；当酵母菌繁殖到一定数量后，需要闭气造成无氧环境，让酵母菌进行无氧呼吸产生酒；

(2)选择培养基纤维素。

(3)水无机盐氮源高压蒸汽灭菌法。

(4)平板划线法稀释涂布平板法避免周围环境中的微生物的污染五、综合题(共3题，共6分)19、略

【分析】【分析】

1；基因工程的工具：限制酶、DNA连接酶。

2；基因工程的步骤：目的基因的获取、基因表达载体的构建、目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与鉴定。

【详解】

（1）启动子是RNA聚合酶识别和结合的位点；直接决定转录起始。该操作为目的基因和运载体的酶切和连接，限制酶切割后需要在DNA连接酶的作用下连接；已知接头片段连接在PDC基因的上游，且已知序列信息，则可以按照PDC基因启动子上游的接头片段与PDC基因编码序列设计引物进行PCR扩增。

（2）由质粒A的图谱可知带有选择功能的基因片段有尿嘧啶合成基因；金担子素抗性基因两种；但是金担子素抗性基因无法启动，所以选择尿嘧啶合成基因作为选择依据，则在选择培养基配制时不加尿嘧啶。从中国甜柿中提取的RNA可以通过逆转录形成各种cDNA，将各种cDNA片段与质粒G连接后导入酵母菌，插入时不能破坏其他蛋白质基因的表达，而且需要插入到启动子和终止子之间才能保证表达，因此选择2作为cDNA的插入位点。

（3）依据题干；重组酵母Y187与Y1H接合子应同时含有质粒A；质粒G，则接合子有质粒A为含有PDC基因、金担子素抗性基因的质粒；质粒G为可正常表达AD蛋白、待测蛋白的质粒，接合子中待测蛋白与AD蛋白形成了融合蛋白，若待测蛋白是PDC基因的调控蛋白，就能与PDC基因启动子结合，则AD蛋白携带的待测蛋白靠近PDC基因启动子，激活PDC基因的转录，并激活金担子素抗性基因的表达，使酵母菌表现出金担子素抗性。

（4）筛选出PDC基因的调控蛋白后；为满足生产上的需要对其进行改良，这种技术属于蛋白质工程，蛋白质工程的设计流程为预期的蛋白质功能→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找出相对应的脱氧核苷酸序列（基因），所以起点是预期蛋白质的功能。

【点睛】

本题考查到了基因工程的细节内容，不仅要有基础知识的储备，还要有获取信息的能力和表达分析能力。题目作答过程中一定要根据题意来回答，不能抛开题目。【解析】RNA聚合酶识别和结合DNA连接酶PCR尿嘧啶cDNA2接合子中待测蛋白与AD蛋白形成了融合蛋白，若待测蛋白是PDC基因的调控蛋白，就能与PDC基因启动子结合，AD蛋白也能靠近PDC基因启动子并激活金担子素抗性基因的表达，使酵母菌表现出金担子素抗