外泌体研究进展课程02外泌体的提取与纯化

®第二课外泌体的提取与纯化解螺旋|

知识金牌《外泌体研究进展》课程外泌体提取的方法外泌体提取的原理

商品化的提取试剂盒不同提取方法的比较内容常见问题外泌体提取方法01解

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长知识金牌外泌体提取方法超速离心法密度梯度超速离心法超滤法磁珠捕获法多聚物沉淀法柱子纯化法微流控芯片法商用化试剂盒外泌体提取原理02知识金牌超速离心法细胞上清液离心去细胞离心去碎片沉淀外泌体重悬外泌体解螺旋|陪伴医生科研成长通过10万g的离心力而获得外泌体的方法知识金牌密度梯度超速离心法细胞上清液离心去细胞离心去碎片沉淀外泌体纯化外泌体解螺旋|陪伴医生科研成长通过密度梯度介质及10万g的离心力而获得外泌体的方法磁珠捕获法

知

识

金牌PS亲和磁珠法：该方法将PS（磷脂酰丝氨酸）与磁珠结合，利用亲和原理捕获外泌体囊泡外的PS。免疫磁珠法：该方法将CD63/CD81/CD9等抗体与磁珠结合，利用抗原-抗体原理捕获外泌体囊泡外的膜蛋白。解螺旋|陪伴医生科研成长知识金牌超滤原理超滤法细胞上清液0.22um过滤去除大颗粒3~10Kd超滤去除小蛋白解螺旋|陪伴医生科研成长多聚物沉淀法

知

识

金牌聚乙二醇（PEG）为常用的多聚物，可与疏水性蛋白和脂质分子结合共沉淀。细胞上清液离心去细胞离心去碎片

多聚物共孵育沉淀外泌体解螺旋|陪伴医生科研成长知识金牌柱子纯化法细胞上清液样品预处理上柱洗柱洗脱解螺旋|陪伴医生科研成长知识金牌微流控芯片法解螺旋|陪伴医生科研成长知识金牌ExoQuickMagCapture™Exosome

Isolation

KitUmibio商用化试剂盒解螺旋|陪伴医生科研成长商品化的提取试剂盒03知识金牌ExoQuickSBI外泌体提取试剂盒多聚物沉淀法解螺旋|陪伴医生科研成长上市最早的产品文献支持最多的产品知识金牌多聚物沉淀法针对不同样品Life

Tech外泌体提取试剂盒解螺旋|陪伴医生科研成长知识金牌Qiagen外泌体提取试剂盒柱子纯化原理外泌体提取和RNA提取外泌体提取RNA提取样品预处理解螺旋|陪伴医生科研成长知识金牌Wako外泌体提取试剂盒MagCapture™ Exosome

Isolation

Kit磁珠捕获法解螺旋|陪伴医生科研成长知识金牌柱子纯化原理解螺旋|陪伴医生科研成长101Bio外泌体提取试剂盒知识金牌Umibio外泌体提取试剂盒多聚物沉淀法+柱子纯化法外泌体沉淀外泌体纯化样品预处理解螺旋|陪伴医生科研成长知识金牌其他提取试剂盒EVSecond柱子纯化原理qEV

Exosome

Isolation柱子纯化原理ExoCap

™

Streptavidin

Kit磁珠捕获原理解螺旋|陪伴医生科研成长不同提取方法的比较04解

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长知识金牌不同提取方法的比较解

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长知识金牌不同提取方法的比较J

Extracell

Vesicles.

2014

Sep

18;3.超速离心密度离心SBI产品Life产品解

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科

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成

长知识金牌不同提取方法的比较TCL:总细胞裂解液UC： 超速离心

ODG：超速密度梯度离心EQ：

SBI试剂盒提取TEI：

Life

Tech试剂盒提取Characterization

of

exosome

preparations

by

Western

blotJ

Extracell

Vesicles.

2014

Sep

18;3.不同提取方法的比较

知

识

金牌UC： 超速离心；ODG：超速密度梯度解离螺

心旋

；|

E陪Q伴：医

生S科BI研试成剂长盒提取；TEI：

Life

Tech试剂盒提取Morphological

characterization

and

quantification

of

exosome

preparations解

螺

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科

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成

长知识金牌PLoS

One.2017

Jan23;12(1)Microscopic

analysis

of

the

morphology

of

isolated

exosomesUC：

超速离心Exoquick：

SBI试剂盒提取TEIR：

Life

Tech试剂盒提取解

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研

成

长知识金牌不同提取方法的比较Analysis

of

the

protein

content

of

exosome

preparationsTCL:总细胞裂解液UC： 超速离心

ODG：超速密度梯度离心EQ：

SBI试剂盒提取TEI：

Life

Tech试剂盒提取J

Extracell

Vesicles.

2014

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18;3.解

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长知识金牌UC： 超速离心；ODG：超速密度梯度离心；EQ：

SBI试剂盒提取；TEI：

Life

Tech试剂盒提取Identification

of

the

RNA

content

in

exosome

preparations不同提取方法的比较J

Extracell

Vesicles.

2014

Sep

18;3.解

螺

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医

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长知识金牌UC： 超速离心

ODG：超速密度梯度离心EQ：

SBI试剂盒提取Agilent

microarray-based

RNA

profiling

of

exosome

samples.J

Extracell

Vesicles.

2014

Sep

18;3.常见问题05知识金牌培养细胞时，如何去除血清来源的外泌体？多数情况下，细胞在体外培时养需要血清，而血清中一般都含有外泌体，为避免血清对细胞外泌体的污染，可采用以下几种方法：将细胞培养用的血清通过1×105g超速离心10h以去除血清外泌体；选择无血清培养基进行细胞培养；选择去外泌体血清进行细胞培养；解螺旋|陪伴医生科研成长知识金牌无外泌体血清培养基（或者无血清培养基）在什么时候使用？解螺旋|陪伴医生科研成长细胞在正常含血清的培养基中培养一定的时间后，细胞融合度约为60%-70%时，移去原有含血清的培养基，换成新鲜的无外泌体血清培养基（或者无血清培养基），继续培养24-48h，细胞融合度达