2025年中图版选修1生物下册月考试卷含答案

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A.进行果醋和果酒发酵的最适温度相同B.该装置既可阻止空气进入，也便于发酵产生的气体排出C.去除弯管中的水，该装置即可满足果醋发酵时底层发酵液中大量醋酸菌的呼吸D.发酵过程中，发酵液的pH逐渐降低，密度逐渐下降7、用稀释涂布平板法测定同一土壤样品中的细菌数，在对应稀释倍数为106的培养基中，对该实验有关叙述错误的是（）A.涂布了三个平板，统计的菌落数分别是210、240和250，取平均值233B.涂布了一个平板，统计的菌落数是230C.设置对照实验的主要目的是排除实验组中非测试因素对实验结果的影响，提高实验结果的可信度D.统计某一稀释度的5个平板的菌落数依次为M1、M2、M3、M4、M5，以M3作为该样品菌落数估计值8、下列关于果酒和果醋的制作原理、发酵过程的叙述中不正确的是（）A.果酒和果醋的发酵菌种不同，但代谢类型相同B.制作果酒和果醋时都应用70％的酒精对发酵瓶消毒C.变酸果酒的表面观察到的菌膜可能是醋酸菌的菌落D.果酒和果醋的制作可用同一装置，但需控制不同发酵条件9、某同学设计了图示的发酵装置；下列有关叙述正确的是()

A.该装置可阻止空气进入，用于果酒发酵B.该装置便于果酒发酵中产生的气体排出C.去除弯管中的水，该装置可满足果醋发酵时底层发酵液中大量醋酸菌的呼吸D.去除弯管中的水后，该装置与巴斯德的鹅颈瓶作用相似10、下列关于传统发酵技术的叙述，错误的是（）A.较高温度和密闭环境有利于果醋的发酵B.盐的用量、酒的种类和用量、温度等均会影响腐乳风味C.果酒、果醋和腐乳制作的微生物细胞呼吸产生CO2的场所都是细胞质基质D.与自然发酵相比，人工接种菌种不易被杂菌污染评卷人得分三、填空题(共8题，共16分)11、电泳分类：________凝胶电泳；__________凝胶电泳。

在测定蛋白质相对分子质量时通常使用__________________凝胶电泳。蛋白质在聚丙烯酰胺凝胶中的迁移率取决于它所带________的多少以及__________等因素。而在SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳中，SDS能使蛋白质发生________，由几条肽链组成的蛋白质复合体在SDS的作用下会______成单条肽链，因此测定的结果只是________的相对分子质量。同时SDS所带的大量负电荷大大超过了蛋白质分子原有的电荷量，因而掩盖了不同种蛋白质间的电荷差别，使电泳迁移率完全取决于__________。12、____________、________________和________________等条件会影响酶的活性。13、新鲜的柑橘皮中含有大量的果蜡、果胶和水分，如果直接压榨，出油率较低。为了提高出油率，需要将柑橘皮____________去水，并用______________浸泡。为了使橘皮油易于与水分离，还要分别加入相当于橘皮质量0．25%的_____和5%的_______________，并调节pH至___________________。14、水蒸气蒸馏后，锥形瓶中将收集到乳白色的乳浊液，这是玫瑰精油与____________的混合物。这时只需要向乳化液中加入___________，增加盐的浓度，就会出现明显的分层。然后用__________将这两层分开。分离的油层还会含有一定的水分，一般加入一些_______吸水，放置过夜，再_____除去固体硫酸钠就要可以得到玫瑰油了。15、植物芳香油的提取方法有蒸馏、____________和________________等。16、提取出的植物芳香油具有很强的_____________，其组成也比较复杂，主要包括__________化合物及其衍生物。17、天然香料的主要来源是动物和植物，微生物中的___________也可以产生芳香化合物。18、蛋白质是生命活动不可缺少的物质。随着人类基因组计划的进展以及多种生物基因组测序工作的完成；人类跨入了后基因组和蛋白质组时代。血红蛋白是人和其他脊椎动物红细胞的主要组成成分，负责血液中氧气和二氧化碳的运输。

（1）分离血红蛋白的方法是_____，其原理是根据_____来分离蛋白质。

（2）蛋白质的提取和分离一般分为四步：样品处理、粗分离、_____和纯度鉴定。

（3）血红蛋白因含有_____而呈现红色，采集血液时需要预先加入柠檬酸钠，目的是_____。在血红蛋白样品处理和粗分离中需要用到很多试剂，如在红细跑的洗涤中需要用到生理盐水直至上清液不再呈现黄色；在血红蛋白的释放过程中需用到蒸馏水和40%体积的_____，目的是使红细胞破裂释放血红蛋白；在透析过程中需要将透析袋放入20mmol/L的_____中。

（4）本实验用的是交联葡聚糖凝胶（SephadexG-75），其中“G”表示_____，“75”表示凝胶得水值，即每克凝胶膨胀时吸收水分7.5g。在装填凝胶时色谱柱内不能出现气泡的原因是_____，给色谱柱添加样品的具体操作是_____。

（5）判断纯化的蛋白质是否达到要求，选用的检测方法是_____。评卷人得分四、实验题(共1题，共5分)19、下图描述了采用富集方法；从土壤中分离能降解酚类化合物——对羟基苯甲酸的微生物的实验过程。

回答下列问题：

（1）本实验所需培养基的碳源为_________，该碳源进入细菌细胞内的主要作用_______（答出两点即可）。

（2）①→③重复培养的目的是_____________________________。

（3）培养20小时后，观察到平板上有形态和颜色不同的菌落，这说明样品中有多种分解对羟基苯甲酸的细菌，依据是___。

（4）若要固定化分解对羟基苯甲酸的细菌，一般采用_____的方法，若要分离纯化对羟基苯甲酸分解酶，根据分子量大小采用_____方法，也可以根据__________________因素的不同采用电泳法分离对羟基苯甲酸分解酶。评卷人得分五、非选择题(共3题，共6分)20、下表是某种微生物培养基的配方表；请据表回答：

。牛肉膏。

蛋白胨。

NaCl

琼脂。

水。

0.5g

1g

0.5g

2g

200mL

（1）此培养基的营养成分有五类；其中蛋白胨提供的营养物质是________________。

（2）在培养基制备过程中；各种成分溶化后分装前，必须的操作是______________。

（3）微生物培养最基本的要求是无菌操作；下列对培养基；培养皿、接种环、双手、空气、牛奶所采用的灭菌消毒方法的正确顺序依次是______________。（填序号）

①化学消毒②高压蒸汽灭菌③干热灭菌④紫外灭菌⑤灼烧灭菌⑥巴氏消毒法。

（4）巴氏消毒法与煮沸消毒法相比；其优点是___________________。

（5）用稀释涂布平板法统计菌落数目时，最好选择群落在__________的平板进行计数。若统计出在一稀释倍数为105的平板上的平均菌落数为30个；所用稀释液的体积为0.2mL，则每毫升样品中的细菌数为_______________________________________。

（6）纯化菌株时，通常使用的划线工具是_____________。划线的某个平板培养后，第一划线区域的划线上都不间断地长满了菌，第二划线区域的第一条线上无菌落，其它划线上有菌落。造成划线无菌落可能的操作失误有______________。21、固定化酶技术运用工业化生产前；需要获得酶的有关参数。如下图：曲线①表示某种酶在各种温度下酶活性相对于最高酶活性的百分比；曲线②是将该种酶在不同温度下保温足够长的时间，再在酶活性最高的温度下测其残余酶活性，由此得到酶的热稳定性数据。请回答下列问题：

（1）酶中一定有的化学元素有_____；从上图可以看出，酶的活性容易受到_____的影响。

（2）固定化酶常用的方法有_____。

（3）与普通酶制剂相比；固定化酶在生产中的主要优点是_____。

（4）曲线②中；35℃和80℃的数据点是在_____℃时测得的。该种酶固定化后运用于生产，最佳温度范围是_____。

（5）研究发现有甲、乙两种物质能降低该种酶的催化效率，该酶催化的底物浓度变化会改变甲物质对酶的影响，而不会改变乙物质对酶的影响。下图是降低酶活性的两种机制模型，符合甲、乙物质对酶影响的模型分别是_____、_____。22、酸菜是经乳酸菌发酵而成的一种发酵食品；制作过程中极易积累亚硝酸盐。一些乳酸菌能合成亚硝酸盐还原酶，能够显著降低亚硝酸盐含量。请回答相关问题。

（1）为获得高产亚硝酸盐还原酶的乳酸菌；某研究组以东北传统自然发酵酸菜为材料进行分离。

①在进行乳酸菌分离纯化时；科研人员将酸菜发酵液稀释后涂布在含溴甲酚绿（遇酸变色）的__________（“选择”或“鉴别”）培养基上，___________（“需氧”或“厌氧”）培养一段时间后，挑取周围变色的_________临时保存。

②在进行高产亚硝酸盐还原酶菌株筛选时；将临时保存的各菌种分别接种到含______的液体培养基中培养一段时间，离心收集上清液，在________酸化条件下，依次加入对氨基苯磺酸；N-1-萘基乙二胺盐酸盐进行反应，筛选反应显色较_____的菌株。

（2）利用筛选得到的菌种进行酸菜腌制；测定亚硝酸盐含量（单位：mg/kg），结果如下表所示：

据表分析，亚硝酸盐含量最高时的腌制条件是________________________。为避免细菌大量繁殖，产生大量的亚硝酸盐，除控制好表中涉及的腌制条件外，还需控制好腌制的____________。评卷人得分六、综合题(共1题，共4分)23、天津独流老醋历史悠久；独具风味；其生产工艺流程如下图。

（1）在酒精发酵阶段，需添加酵母菌。在操作过程中，发酵罐先通气，后密闭。通气能提高________的数量，有利于密闭时获得更多的酒精产物。果汁发酵后是否有酒精产生，可以用________来检验。

（2）在醋酸发酵阶段；独流老醋采用独特的分层固体发酵法，发酵30天。工艺如下。

①发酵过程中，定期取样测定醋酸杆菌密度变化，趋势如图。据图分析，与颠倒前相比，B层醋酸杆菌在颠倒后密度变化的特点是________________，由此推测，影响醋酸杆菌密度变化的主要环境因素是营养物质、pH和________。

②乳酸含量高是独流老醋风味独特的重要成因。发酵过程中，发酵缸中颠倒前的________层和颠倒后的________层的培养基有利于乳酸菌繁殖；积累乳酸。

③成熟醋醅中乳酸菌的种类明显减少，主要原因是发酵后期营养物质消耗等环境因素的改变，加剧了不同种类乳酸菌的________，淘汰了部分乳酸菌种类。参考答案一、选择题(共5题，共10分)1、C【分析】【分析】

平板划线操作的基本步骤是：

（一）；右手持接种环；经火焰灭菌，待冷却后，在火焰旁打开盛有菌液的试管棉塞，并将试管口通过火焰，将已经冷却的接种环伸入菌液，沾取一环菌液，将试管口通过火焰并塞上棉塞。

（二）；左手斜持琼脂平板；皿盖打开一条缝，右手于火焰近处将接种环迅速伸入平板内，划三至五条平行线，盖上皿盖，注意接种环不应划破培养基表面。

（三）；烧灼接种环；杀灭环上残留菌液，待冷却（是否冷却，可先在培养基边缘处试触，若琼脂溶化，表示未凉，稍等再试），从第一区域划线的末端开始往第二区内划线，重复以上操作，在第三、四、五区内划线，注意不要将最后一区的划线与第一区相连。

（四）；将平板倒置；放入培养箱中培养。

【详解】

接种前先要用火焰灼烧接种环；目的是避免接种环上可能存在的微生物污染培养物，A正确；每次划线前，灼烧接种环是为了杀死上次划线结束后接种环上残留的菌种，B正确；第二区域内划线时，接种环上的菌种直接来源于上一次划线的末端，C错误；划线结束后，灼烧接种环是为了杀死上次划线结束后接种环上残留的菌种，避免细菌污染环境和感染操作者，D正确。

故选C。2、B【分析】【分析】

参与果酒发酵的微生物是酵母菌；为兼性厌氧型生物；参与果醋发酵的微生物是醋酸菌，为需氧型生物；参与腐乳制作的微生物是毛霉，为需氧型微生物。

【详解】

A；果醋发酵阶段应保持通气；以满足醋酸菌代谢的需要，A错误；

B；腌制腐乳的卤汤中的香辛料可以抑制细菌的增殖；同时可以调味，B正确；

C；用自然菌种发酵酿酒时；依赖于葡萄表面的酵母菌，对封有葡萄汁的发酵瓶高压灭菌会杀死其中的酵母菌，C错误；

D；将长满毛霉的腐乳坯放在瓶中加盐时；接近瓶口的盐要铺厚，避免杂菌感染，D错误。

故选B。

【点睛】

果酒和果醋制作原理与发酵条件的比较：

。

果酒制作。

果醋制作。

菌种。

酵母菌。

醋酸菌。

菌种来源。

附着在葡萄皮上的野生型酵母菌。

变酸酒表面的菌膜。

发酵过程。

有氧条件下，酵母菌通过有氧呼吸大量繁殖：C6H12O6＋6O2―→

6CO2＋6H2O；无氧条件下，酵母菌通过无氧呼吸产生酒精：C6H12O6―→2C2H5OH＋2CO2

氧气、糖源充足时：C6H12O6＋2O2―→

2CH3COOH＋2CO2＋2H2O；缺少糖源、氧气充足时：C2H5OH＋O2―→

CH3COOH＋H2O

温度。

一般酒精发酵18～25℃；繁殖最适为20℃左右。

最适为30～35℃

气体。

前期：需氧；后期：无氧。

需要充足的氧气。

时间。

10～12天。

7～8天。

3、B【分析】【分析】

1.植物芳香油的提取一般由蒸馏法；萃取法和压榨法三种方法；蒸馏法一般用于提取挥发性强、能随水分一同蒸馏的芳香油，压榨法一般使用于从柑橘、柠檬等易焦糊的原料中提取芳香油，萃取法一般适宜用于提取易溶于有机溶剂、化学性质稳定的芳香油。

2．提取玫瑰精油的实验。

(1)方法：水蒸气蒸馏法。

(2)实验流程。

。实验步骤关键点①鲜玫瑰花＋清水二者质量比为1∶4②水蒸气蒸馏在蒸馏瓶中加几粒沸石；防止液体过度沸腾；控制蒸馏的时间和速度。

③油水混合物呈乳白色的乳浊液，加入NaCl使乳化液明显分层④分离油层用分液漏斗把油水分离⑤除水加入无水Na2SO4吸收水分，再过滤除去⑥玫瑰精油出油率＝玫瑰精油质量/原料质量

3.提取橘皮精油的实验。

(1)方法：一般采用压榨法。

(2)实验流程。

。实验步骤关键点①石灰水浸泡橘皮石灰水的作用：破坏细胞结构；分解果胶，防止橘皮压榨时滑脱，提高出油率；为了能使橘皮均匀地浸泡，可将其粉碎。

②漂洗目的是洗去石灰水；防止影响精油的质量，漂洗完后要沥干水分。

③压榨分别加入相当于橘皮质量0.25%的NaHCO3和5%的Na2SO4；并调节pH至7～8，目的是使橘皮油易与水分离。

④过滤、离心加入明矾；使之沉淀并变澄清，然后用布袋过滤，除去固体物和残渣。然后进行离心，除去质量较小的残留固体物，用分液漏斗或者吸管分离上层橘皮油。

⑤静置分离的产品放在5～10℃的冰箱中；静置5～7d，使杂质沉淀，吸取上层橘皮油。

⑥再次过滤用滤纸过滤；取滤液，和上层橘皮油混合。

【详解】

A、橘皮易焦糊适宜用压榨法提取，不能用蒸馏法提取，这是因为橘皮精油的有效成分在用水蒸汽蒸馏时会发生部分水解，使用水中蒸馏又会产生原料焦糊的问题，A错误；B、分离出的玫瑰精油油层还会含有一定的水分，可加入无水Na2SO4吸水，放置过夜，再过滤除去固体Na2SO4就可以得到玫瑰油了；B正确；

C、新鲜的橘皮中含有大量的果蜡、果胶等，为了提高出油率，需用Ca（OH）2溶液浸泡；能够破坏细胞结构，分解果胶，防止橘皮压榨时滑脱，提高出油率，C错误；

D；用于提炼玫瑰精油的玫瑰花应在花开的盛期采收；因为此时花朵含油量较高，D错误；

因此选B。

【点睛】

本题主要考查了在玫瑰精油和橘皮精油提取过程中相关的化学药品的作用及其注意事项等相关知识，意在考查考生理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系，形成知识的网络结构的能力。4、D【分析】【分析】

酶促反应的原理：酶能降低化学反应的活化能。酶具有专一性；高效性和作用条件温和的特性。

【详解】

A；溶菌酶能够溶解细菌的细胞壁；具有抗菌消炎的作用，A正确；

B；果胶酶可将果胶分解成可溶性的半乳糖醛酸。因此生产果汁时；加入果胶酶可以提高果汁产量，还能提高果汁的澄清度，B正确；

C；含酶牙膏可以清除口腔中大多数细菌；保护口腔健康，使牙齿亮洁，C正确；

D；自然界中存在的酶并不完全适于在生活和生产上应用；因此有些需要进行改造，D错误。

故选D。5、C【分析】【分析】

血红蛋白的提取与分离的实验步骤主要有：（1）样品处理：①红细胞的洗涤（低速短时间离心）；②血红蛋白的释放（需要加入蒸馏水和甲苯），③分离血红蛋白（中速长时间离心）。（2）粗分离：①分离血红蛋白溶液，②透析。（3）纯化：调节缓冲液面→加入蛋白质样品→调节缓冲液面→洗脱→收集分装蛋白质。（4）纯度鉴定--SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳。

【详解】

由分析可知；血红蛋白的提取和分离一般分为样品处理；粗分离、纯化和纯度鉴定，C正确。

故选C。

【点睛】二、多选题(共5题，共10分)6、B:D【分析】【分析】

果酒制作的原理：先通气；酵母菌进行有氧呼吸而大量繁殖，后密封，酵母菌进行无氧呼吸产生酒精。果醋制作的原理：醋酸菌是嗜温菌，也是嗜氧菌，因此其进行果醋发酵时需要不间断的供氧。

【详解】

A；果酒发酵的最适温度是18～25℃；果醋发酵的最适温度是30～35℃，错误；

B；果酒发酵需要无氧环境；该装置鹅颈中的水可以隔绝空气，创造无氧环境，果酒发酵中产生的气体是二氧化碳，该装置便于二氧化碳的排除，正确。

C；醋酸菌是嗜氧菌；即使去除弯管中的水，该装置也不能满足果醋发酵时底层发酵液中大量醋酸菌呼吸所需的氧气，错误；

D；果酒发酵过程中；葡萄糖分解变成酒精，因此发酵液密度会逐渐减小；同时pH会逐渐降低，呈酸性，正确。

故选BD。7、B:D【分析】【分析】

据题文和选项的描述可知：该题考查学生对统计菌落数目的相关知识的识记和理解能力。

【详解】

用稀释涂布平板法测定同一样品中的细菌数时，为了保证结果准确，在每一个梯度浓度内，至少要涂布3个平板，确定对照组无菌后，选择菌落数在30～300的平板进行记数，求其平均值，再通过计算得出土壤中的细菌总数，A正确，B、D错误；设置对照实验的主要目的是排除实验组中非测试因素对实验结果的影响，提高实验结果的可信度，C正确。8、A:C【分析】【分析】

果酒；果醋制作的注意事项。

(1)材料的选择与处理：选择新鲜的葡萄；榨汁前先将葡萄冲洗，并除去枝梗，以防葡萄汁流失及污染。冲洗以洗去灰尘为目的，且不要太干净，以防洗去野生型酵母菌。

(2)防止发酵液被污染的方法①榨汁机要清洗干净并晾干。②发酵瓶要洗净并用体积分数为70%的酒精消毒；或用洗洁精洗涤。③装入葡萄汁后要封闭充气口。

【详解】

A；果酒发酵的菌种是酵母菌；其代谢类型为异养兼性厌氧型，而果醋发酵的菌种是醋酸菌，其代谢类型是异养需氧型，A符合题意；

B；制作果酒和果醋时均需要对发酵瓶消毒；均可用体积分数为70%的酒精进行消毒，B不符合题意；

C；在变酸果酒的表面观察到的菌膜可能是醋酸菌在液面大量繁殖而形成的；液体表面不能形成菌落，C符合题意；

D；果酒和果醋的制作可用同一装置；但需控制不同发酵条件，果酒制作需要无氧环境，适宜温度为18～25℃，而果醋制作需要有氧环境，适宜温度为30～35℃，D不符合题意。

故选AC。9、A:B:D【分析】【详解】

果酒制作是厌氧发酵，该装置水可阻止空气进入；果酒发酵产生的气体是CO2，该装置便于CO2的排出；该装置弯管为了排出发酵产生的气体，不能保证果醋发酵需要的O2；去除弯管中的水后；与巴斯德的鹅颈瓶作用相似，排出气体，避免杂菌污染。

【考点定位】本题考查果酒、果醋的制作，意在考查考生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系，形成知识的网络结构的能力。10、A:C【分析】【分析】

1；在利用酵母菌发酵时最好是先通入足够的无菌空气在有氧环境下一段时间使其繁殖；再隔绝氧气进行发酵；酒精发酵的最佳温度是在18℃～25℃，pH最好是弱酸性。

2；醋酸菌是好氧性细菌；当缺少糖源时和有氧条件下，可将乙醇（酒精）氧化成醋酸；当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸；醋酸菌生长的最佳温度是在30℃～35℃。

3；豆腐的主要营养成分是蛋白质和脂肪；都是大分子有机化合物，难以消化、吸收，毛霉、酵母菌等多种微生物分泌的蛋白酶，能将蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸，脂肪酶可将脂肪分解成甘油和脂肪酸，在多种微生物的协同下，豆腐转变成腐乳。

【详解】

A；果醋制作的菌种是醋酸菌；属于好氧菌，故密闭环境不利于果醋的发酵，A错误；

B；腐乳制作过程中；盐的用量、酒的种类和用量、温度等均会影响腐乳风味，B正确；

C、参与果酒制作的酵母菌是兼性厌氧型真核生物，参与果醋制作的醋酸菌是需氧型原核生物，参与腐乳制作的毛霉是需氧型真核生物，所以果酒制作的微生物细胞呼吸产生CO2的场所是细胞质基质或线粒体、果醋制作的微生物细胞呼吸产生CO2的场所是细胞质基质，而腐乳制作的微生物细胞呼吸产生CO2的场所是线粒体；C错误；

D；与自然发酵相比；人工接种过程中利用了严格的灭菌措施，可以防止其它杂菌污染，且发酵获得的产品品质更好，D正确。

故选AC。

【点睛】三、填空题(共8题，共16分)11、略

【分析】【详解】

电泳分为琼脂糖凝胶电泳和聚丙烯酰胺凝胶电泳；在测定蛋白质相对分子质量时通常使用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳；蛋白质在聚丙烯酰胺凝胶中的迁移率取决于它所带静电荷多少以及分子大小等因素。而在SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳中，SDS能使蛋白质发生完全变性，由几条肽链组成的蛋白质复合体在SDS的作用下会解聚成单条肽链，因此测定的结果只是单条肽链的相对分子质量。同时SDS所带的大量负电荷大大超过了蛋白质分子原有的电荷量，因而掩盖了不同种蛋白质间的电荷差别，使电泳迁移率完全取决于分子的大小。【解析】琼脂糖聚丙烯酰胺SDS-聚丙烯酰胺静电荷分子大小完全变性解聚单条肽链分子的大小12、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】温度pH酶的抑制剂13、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】干燥石灰水NaHCO3Na2SO47~814、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】水氯化钠(NaCl)分液漏斗无水Na2SO4过滤15、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】压榨萃取16、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】挥发性萜类17、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】真菌18、略

【分析】【分析】

血红蛋白存在于红细胞内；由四条肽链构成，两条α肽和两条β肽链，每条肽链围绕一个亚铁血红素基团，一个血红素基团可携带一分子氧或一分子二氧化碳。

【详解】

（1）分离血红蛋白的方法是凝胶色谱法（又叫分配色谱法）；是根据相对分子质量的大小来分离蛋白质，相对分子质量大的蛋白质分子直接穿过凝胶颗粒间的空隙，路径短，移动速度快，优先可收集到；相对分子质量小的蛋白质分子进入凝胶珠的内部，路径长，移动速度慢，可在后收集。

（2）蛋白质的提取和分离一般分为四步：样品处理；粗分离、纯化和纯度鉴定。

（3）血红蛋白因含有亚铁血红素基团而呈现红色；采集血液时需要预先加入柠檬酸钠防止血液凝固。在血红蛋白样品处理和粗分离中需要用到很多试剂，如在红细跑的洗涤中需要用到生理盐水直至上清液不再呈现黄色；在血红蛋白的释放过程中需用到蒸馏水和40%体积的甲苯，破坏细胞膜，释放血红蛋白；在透析过程中需要将透析袋放入20mmol/L磷酸缓冲液，除去无机盐和小分子蛋白质。

（4）纯度鉴定中；用的是交联葡聚糖凝胶，其中“G”表示凝胶的交联程度；膨胀程度和分离范围。在装填凝胶时色谱柱内不能出现气泡，气泡会搅乱蛋白质的洗脱次序，降低分离效果。给色谱柱添加样品的具体操作是吸管吸1mL样品加到色谱柱的顶端，滴加样品时，吸管管壁贴着管壁环绕移动加样，同时注意不要破坏凝胶面。

（5）经过凝胶色谱法获得的蛋白质；为了确定其是否达要求，可用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法进行检测。

【点睛】

本题考查血红蛋白的提取和分离方法、凝胶色普的操作、异常原因分析，要求考生熟记课本相关知识，并理解运用。【解析】凝胶色谱法（又叫分配色谱法）相对分子质量的大小纯化亚铁血红素基团防止血液凝固甲苯磷酸缓冲液凝胶的交联程度、膨胀程度及分离范围气泡会搅乱蛋白质的洗脱次序，降低分离效果吸管吸1mL样品加到色谱柱的顶端，滴加样品时，吸管管壁贴着管壁环绕移动加样，同时注意不要破坏凝胶面。SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳四、实验题(共1题，共5分)19、略

【分析】【分析】

1；培养基的种类：

2；固定方法：

【详解】

（1）要分离能降解对羟基苯甲酸的微生物应该用以对羟基苯甲酸为唯一碳源的培养基；该碳源进入细菌细胞内的主要作用是为细胞生物生命活动提供能量，为其他有机物的合成提供原料。

（2）①→③重复培养的目的是增大分解对羟基苯甲酸微生物的比例，确保能够从样品中分离得到单菌落。

（3）一定条件下；同种细菌形成的菌落特征是相同的，不同菌种在相同条件下形成的菌落特征不同，因此培养20小时后，观察到平板上有形态和颜色不同的菌落，这说明样品中有多种分解对羟基苯甲酸的细菌。

（4）固定化细胞一般采用包埋法。若要分离纯化分解对羟基苯甲酸酶；根据分子量大小采用凝胶色谱法，也可以根据所带电荷的差异和分子大小（形状）等因素采用电泳方法分离纯化分解对羟基苯甲酸酶。

【点睛】

本题结合图解，考查微生物的分离和培养，要求考生识记培养基的营养构成及种类；识记接种微生物的方法，能结合图中和题中信息准确答题。【解析】对羟基苯甲酸为细胞生物生命活动提供能量；为其他有机物的合成提供原料增加分解对羟基苯甲酸微生物的浓度，确保能够从样品中分离得到单菌落不同菌种在相同条件下形成的菌落特征不同包埋。

凝胶色谱所带电荷的差异、分子大小、分子形状五、非选择题(共3题，共6分)20、略

【分析】【分析】

1；培养基的成分包括碳源、氮源、水、无机盐和生长因子．

2；制备牛肉膏蛋白胨培养基的步骤为计算→称量→溶化→调pH→灭菌→倒平板．

3；消毒和灭菌。

4；微生物常见的接种的方法。

①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板；接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。

②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后；均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。

【详解】

（1）微生物培养基的成分包括碳源；氮源、水、无机盐和生长因子。蛋白胨在培养基可以为微生物提供碳源、氮源和生长因子。

（2）配制培养基时为保证无菌；各种成分在溶化后分装前必须进行调节pH，然后再灭菌。

（3）培养基常用高压蒸汽灭菌法进行灭菌；培养皿常用干热灭菌法灭菌，接种环常用灼烧灭菌，双手应用化学药剂消毒，空气可用紫外线杀菌，牛奶常用巴氏消毒法消毒，故对培养基；培养皿、接种环、双手、空气、牛奶所采用的灭菌消毒方法的正确顺序依次是②③⑤①④⑥。

（4）与煮沸消毒法相比；巴氏消毒法在较低温度下，既可以杀死病菌，又能保持物品中营养物质损失较少和风味不变。

（5）使用稀释涂布平板法统计活菌数目时，为了保证结果准确，一般选择菌落数在30～300的平板进行计数。若统计出在一稀释倍数为105的平板上的平均菌落数为30个，所用稀释液的体积为0.2mL，则每毫升样品中的细菌数为30÷0.2×105=1.5×107个。

（6）纯化菌株时，通常使用的划线工具是接种环。划线的某个平板培养后，第一划线区域的划线上都不间断地长满了菌，第二划线区域所划的第一条线上无菌落，其他划线上有菌落。造成划线无菌落可能的操作失误有：①接种环灼烧后未冷却；②划线未从第一区域末端开始。【点睛】本题考查微生物的分离和培养，要求考生识记培养基的组成成分、种类及功能；识记培养基的制备过程；识记接种微生物常用的两种方法，能结合所学的知识准确答题。【解析】碳源、氮源、生长因子调节pH②③⑤①④⑥在达到消毒目的的同时，营养物质损失较少30～3001.5×107接种环接种环灼烧后未冷却；划线未从第一区域末端开始21、略

【分析】试题分析：本题考查酶作用的影响因素；酶的固定化；考查对酶的化学组成、影响酶促反应的因素、酶固定化技术的理解和识记。解答本题，应结合曲线、模型，理解温度、抑制剂影响酶活性的机理。

（1）酶的化学成分为蛋白质或RNA；其中一定有的化学元素有C；H、O、N，从上图可以看出，酶的活性容易受到温度的影响。

（2）酶的分子相对较小；固定化酶常用的方法有物理吸附和化学结合。

（3）与普通酶制剂相比；固定化酶在生产中的主要优点是可反复使用，并易与产物分离。

（4）根据曲线①可知；该酶的最适温度为80℃，曲线②中，35℃和80℃的数据点是在80℃℃时测得的。该酶在60～70℃时可较长时间保持酶活性，且酶活性较高，固定化后运用于生产，最佳温度范围是60～70℃。

（5）该酶催化的底物浓度变化会改变甲物质对酶的影响；而不会改变乙物质对酶的影响。说明甲物质与底物竞争酶上相同的结合位点，乙物质与底物在酶上的结合位点不同，甲；乙物质对酶影响的模型分别是A、B。

【点睛】解答第（5）的关键是：根