2025年湘教版选择性必修3生物上册月考试卷

…………○…………内…………○…………装…………○…………内…………○…………装…………○…………订…………○…………线…………○…………※※请※※不※※要※※在※※装※※订※※线※※内※※答※※题※※…………○…………外…………○…………装…………○…………订…………○…………线…………○…………第=page22页，总=sectionpages22页第=page11页，总=sectionpages11页2025年湘教版选择性必修3生物上册月考试卷588考试试卷考试范围：全部知识点；考试时间：120分钟学校：______姓名：______班级：______考号：______总分栏题号一二三四五六总分得分评卷人得分一、选择题(共9题，共18分)1、据媒体报道；《自然》子刊杂志发表了一篇最新论文，介绍了一种能够阻断新冠病毒感染的全人源单克隆抗体。下列叙述错误的是（）

A.人B细胞在超免疫缺陷鼠体内受到抗原刺激会增殖分化产生抗体B.人抗体基因克隆前需要进行多次筛选和检测C.产生的重组抗体，需要细胞膜上载体蛋白的协助才能释放到细胞外D.全人源单克隆抗体能有效降低人体的免疫排斥反应2、从土壤中筛选纤维素分解菌的实验设计，正确的是（）A.土壤取样→梯度稀释→稀释涂布平板→挑选菌落B.土壤取样→选择培养→稀释涂布平板→挑选菌落C.土壤取样→梯度稀释→选择培养→挑选菌落D.土壤取样→梯度稀释→稀释涂布平板→选择培养→挑选菌落3、在做分离“分解尿素的细菌”实验时，A同学从对应10-6培养基中筛选出大约150个菌落，而其他同学只选择出大约50个菌落。下列有关叙述不正确的是（）A.A同学出现这种结果的原因可能是土样不同B.可以将A同学配制的培养基在不加土样的情况下进行培养作为空白对照，以证明培养基是否受到污染C.让其他同学用与A同学一样的土壤进行实验，如果结果与A同学一样，则可证明A同学无误D.B选项的实验思路遵循了实验的对照原则，而C选项的没有4、转基因食品存在“是否安全”的争议，有人认为转基因食品是有害的。比如抗“草甘膦（除草剂）”转基因农作物的种植，使喷洒除草剂的人患癌症。请用已学知识判断以下说法正确的是（）A.自古就有“吃啥补啥”的说法，所以吃了转基因食品，则其中的基因会整合到人的基因组中B.严格管理好目的基因和控制好目的基因的表达部位，则转基因食品安全性可以得到保障C.若食用转基因大米，就一定会对人的健康造成危害D.抗除草剂植物生产的食品会导致人患癌症5、高等哺乳动物受精后不久，受精卵开始进行细胞分裂。经桑椹胚、囊胚、原肠胚和组织器官的分化，最后发育成一个完整的幼体，完成胚胎发育的全过程。如图为该过程中的某一时期示意图，下列有关叙述错误的是（）

A.图中①②③依次为透明带、滋养层、内细胞团B.高等哺乳动物的细胞分化开始于图示时期，终止于生命结束C.胚胎从①中伸展出来的过程叫做孵化D.进行胚胎分割时，应选择图示时期之后的胚胎进行6、如表所示为配制1000mL某微生物培养基的配方，有关叙述错误的是（）。成分NaNO3K2HPO4FeSO4MgSO4·7H2O葡萄糖青霉素琼脂用量3g1g0．01g0．5g30g0．1万单位15g

A.依物理性质划分，该培养基属于固体培养基；依用途划分，该培养基属于选择培养基B.由培养基成分可知，该培养基所培养微生物的同化作用类型是异养型，培养的微生物可以是酵母菌或毛霉C.本培养基中青霉素的添加满足了微生物生长对特殊营养物质的要求D.若用该培养基分离能分解尿素的细菌，应除去青霉素和NaNO3并加入尿素7、随着克隆羊“多莉”、克隆犬“龙龙”等克隆动物的不断出现，克隆人似乎离我们越来越近了。但生殖性克隆人会给人类社会带来诸多伦理问题。下列叙述正确的是（）A.生殖性克隆可破坏人类的基因多样性B.我国政府不赞成、不允许、不支持但可接受生殖性克隆人实验C.生殖性克隆人的出现有可能破坏现有的家庭和社会结构D.我国政府主张全面禁止生物武器和克隆技术8、动物细胞培养是动物细胞工程常用的技术手段。下列相关叙述正确的是（）A.CO2培养箱中95%的氧气可保证细胞进行正常呼吸B.原代培养的贴壁细胞需经胰蛋白酶处理后再进行传代培养C.传代培养中的细胞失去增殖能力是由于细胞发生分化所致D.对杂交瘤细胞进行克隆培养即可获得所需的单克隆抗体9、下列关于生物学实验研究方法和原理等叙述中错误的是A.提取组织DNA是利用不同化合物在溶剂中溶解度的差异B.配制以尿素为唯一氮源的培养基为选择性培养基，可筛选出尿素分解细菌C.叶绿体中色素提取的原理是：各种色素在层析液中溶解度不同D.PCR呈指数扩增DNA片段是因为上一轮反应产物可作为下一轮反应模板评卷人得分二、多选题(共9题，共18分)10、科学家通过“治疗性克隆”研究发现；利用病人本身的细胞可治疗其患有的某些疾病。一般将胚胎干细胞进行基因修饰后，经诱导分化成相应的组织器官用于移植。其过程如下图所示。下列关于“治疗性克隆”的叙述不正确的是（）

A.人类“治疗性克隆”属于生物工程中的细胞工程B.该治疗过程中应用的主要技术有核移植、动物细胞培养、胚胎移植等C.此过程体现了胚胎干细胞具有全能性D.“治疗性克隆”与“异体器官移植”相比，其优点之一是避免了免疫排斥反应11、下列关于“转基因”的叙述，错误的是（）A.转入的外源基因不会使作物的其他基因的表达受到影响B.被转移的基因是功能已知的基因，人们对它们研究得已经相当透彻，绝对不会引起安全性问题C.在“转基因”的过程中，必须用到工具酶D.转基因技术成果已进入人类的生产和生活，特别是在医药和农业生产上发挥了极大的作用12、从胰岛素依赖型糖尿病患者的骨髓中分离骨髓间充质干细胞（MSC），诱导分化成胰岛样细胞，再导入该患者体内。放射性免疫分析结果表明诱导的胰岛样细胞团可以正常分泌胰岛素，患者的血糖恢复正常。下列说法正确的是（）A.培养骨髓间充质干细胞的培养液通常需加入血清B.在体外连续培养时，利用胰蛋白酶将接触抑制的骨髓间充质干细胞分开C.在功能上，骨髓间充质干细胞具有发育的全能性D.治疗成功后，康复者的血型有可能发生改变13、下列关于传统发酵技术的叙述，错误的是（）A.较高温度和密闭环境有利于果醋的发酵B.盐的用量、酒的种类和用量、温度等均会影响腐乳风味C.果酒、果醋和腐乳制作的微生物细胞呼吸产生CO2的场所都是细胞质基质D.与自然发酵相比，人工接种菌种不易被杂菌污染14、下列实验过程中，出现的正常现象有（）A.制作果酒时，发酵瓶中溶液产生较多泡沫B.用果酒制作果醋过程中，液面出现一层褐色菌膜C.制作腐乳过程中，豆腐表面发黏且长有白色菌丝D.用固定化酵母进行酒精发酵，凝胶珠浮在液面15、研究人员从土壤中筛选得到酵母菌纤维素酶高产菌株；并对其降解纤维素的条件进行了研究。据图分析正确的是（）

A.筛选该高产菌株需要在纤维素为唯一碳源的培养基中培养B.探究最适温度时应尽可能将发酵液的pH控制在9左右C.该酵母菌高产菌株产生纤维素酶的最适温度是35℃D.利用该高产菌株降解纤维素时需严格保持厌氧环境16、扩展青霉常见于腐烂苹果中，其分泌的展青霉素（Pat）是一种具有致突变作用的毒素。为研究腐烂苹果中Pat的分布，进行了如图实验，其中“病健交界处”为病斑与正常部位的交界处，依据与病斑的距离不同将苹果划分为①~⑤号部位，其中⑤为剩余部分。测定病斑直径为1、2、3cm的苹果中①~⑤号部位的Pat含量，结果如下。下列说法正确的是（）

A.该实验自变量是腐烂苹果中的病斑大小和离病斑距离大小B.可向扩展青霉培养液中加入青霉素以防止杂菌污染C.病斑越大，靠近腐烂部位的果肉中Pat含量越高D.由实验结果可知，苹果去除腐烂部位后可放心食用17、下图为植物体细胞杂交技术流程图，其中甲和乙分别表示两种二倍体植物细胞，所含有的染色体组分别是AA和BB。据图分析错误的是（）

A.图中①过程通常用纤维素酶和果胶酶处理，目的是获得原生质层B.过程②中关键环节是原生质体的融合，可用灭活的病毒诱导C.经过②和③过程形成的c细胞的染色体组不一定为AABBD.该技术流程的目的是获得杂种植株，优点是打破生殖隔离，实现远缘杂交育种18、下列有关动物细胞培养的表述错误的是（）A.培养环境中需要O2，不需要CO2B.细胞要经过脱分化形成愈伤组织C.培养液通常含有糖类，氨基酸，无机盐，维生素和动物血清D.培养瓶中的细胞培养到一定阶段后分瓶后才能继续增殖评卷人得分三、填空题(共6题，共12分)19、醋酸菌的最适生长温度为____________________℃。20、重组DNA或重组质粒导入受体细胞后，筛选______的依据是______。21、在____________的温度范围内，DNA的双螺旋结构解体，双链分开，这过程成为__________。22、请回答有关植物细胞工程的问题：

（1）在植物中，一些分化的细胞，经过________的诱导，可以脱分化失去其__________而转变成未分化细胞。

（2）胡萝卜的组织培养中，将接种后的胡萝卜组织块，放在恒温_________（填：“光照”或“黑暗”）条件下培养。一段时间后，将生长良好的愈伤组织转接到_________培养基上继续培养。

（3）在植物组织培养过程中，由于培养细胞一直处于不断的分生状态，因此容易受到__________的影响而产生突变。为筛选出具有抗盐性状的突变体，需将种子播种在含_____的培养基上，获得所需个体。23、应用分析与比较的方法，对生殖性克隆与治疗性克隆进行列表阐述｡

生殖性克隆与治疗性克隆的比较。比较项目生殖性克隆治疗性克隆含义__________用到的技术__________目的__________24、在日常生活中，我们还遇到哪些有关生物技术安全与伦理问题？我们能基于所学生物学知识参与这些问题的讨论吗？尝试举一个实例加以说明______。评卷人得分四、判断题(共2题，共4分)25、生物武器包括致病菌类、病毒类和生化毒剂类等。()A.正确B.错误26、“设计试管婴儿”与“试管婴儿”相比在植入前需要对胚胎进行遗传学诊断。()A.正确B.错误评卷人得分五、实验题(共4题，共40分)27、如图是从土壤中筛选纤维素分解菌的流程图；回答下列问题：

（1）土壤取样时，一般选择__________________丰富的环境。选择培养的目的是________________________。

（2）若测得稀释一定倍数的0.1mL稀释液中纤维素分解菌的菌落数平均值为51，通过计算得知每毫升样品中有5.1×107个纤维素分解菌，则该稀释液的稀释倍数为_________。

（3）鉴别纤维素分解菌的培养基中应加入CR染料，它可以与纤维素形成_________色复合物。若在鉴别培养基上得到部分有透明圈的菌落（如图），则降解纤维素能力最强的是菌落__________。

28、单克隆抗体在防治H7N9型禽流感上具有显著疗效。下图是科研人员制备H7N9病毒的单克隆抗体X的过程。回答下列问题：

（1）上图中B淋巴细胞是取自______________的动物或人。融合的M细胞先用选择培养基进行筛选，再进行克隆化培养和_______________以得到符合要求的N细胞，N细胞的名称是______________。

（2）为了进一步研究H7N9病毒的单克隆抗体X（以下简称抗体X）的效果及作用机制；科学家开展了如下实验：

实验一：在体外将抗体X与HA蛋白（H7N9病毒表面的一种蛋白）混合，检测抗体X对HA蛋白的亲和力。实验结果如下表所示。（注：KD值越小，抗体和HA蛋白的亲和力越高；机体Y为一种已知的H7N9病毒的抗体。）。抗体种类KD抗体X5．32×10-9M抗体Y1．95×10-9M

实验二：以一定浓度的H7N9病毒感染小鼠；一天后向小鼠腹腔分别注射一定剂量的抗体X；Y；14天后测定小鼠存活情况和体重变化。实验结果表明：抗体X的体内治疗效果优于抗体Y。

①实验一结果表明：对H7N9病毒HA蛋白亲和力更高的抗体是__________。

②分析实验一和实验二的结果差异，研究人员提出假说：抗体除了中和病毒活性之外，还可以通过和巨噬细胞表面的受体相结合，从而增强巨噬细胞的吞噬作用，进而清除被病毒感染的靶细胞。请以巨噬细胞、感染了H7N9病毒的肺上皮细胞、细胞培养液、抗体X、抗体Y和无关抗体等为材料，设计实验验证上述假说。写出实验思路__________。29、炭疽；是一种由炭疽芽孢杆菌引起的人兽共患性传染病，也是我国规定的乙类传染病。回答下列有关问题：

(1)人通常是通过接触患炭疽的动物或动物制品被感染，皮肤炭疽病在人类炭疽病中最为常见，这类患者的皮肤渗出物中含有炭疽芽孢杆菌。皮肤炭疽病疑似患者就医时，医生先要取患者的皮肤渗出物稀释后涂布到固体培养基上，经过一段时间的培养获得的平板可能是_____。A．B．C．D．(2)挑取上述培养基上的菌落进行如图所示实验（注：实验组中的噬菌体能特异性地侵染炭疽芽孢杆菌）。

①该实验的目的是_____。

②对照组试管中应加入_____，实验过程中为避免杂菌污染进行的操作包括_____（至少写出两点）。

③实验结果为_____时；表明该疑似患者被炭疽芽孢杆菌感染。

④实验过程中需将锥形瓶固定在摇床上，在35℃下振荡培养24h，直至液体培养基变浑浊。振荡培养说明炭疽芽孢杆菌的代谢类型是_____，振荡培养的目的是_____。液体培养基变浑浊的原因是_____。

(3)对炭疽芽孢杆菌进行计数时，选用10-4、10-5、10-6三个稀释度的菌液，各取0．2mL涂布，每个稀释度作三次重复，经24h恒温培养后结果如表。稀释度10-410-510-6平板编号A1A2A3B1B2B3C1C2C3菌落数31529830245535112911

由表可知，最适合计数的稀释度为_____，原因是_____。30、研究者改造与肠道共生的大肠杆菌；口服该工程菌后激活机体特异性免疫，实现肿瘤的预防和治疗。

(1)部分肠道细菌能够分泌外膜囊泡（OMV）；如图1．OMV能穿越肠道上皮屏障活化肠黏膜内丰富的免疫细胞。细菌溶素A（ClyA）是外膜囊泡上含量较高的特异蛋白。

研究者利用含图2所示元件的表达载体转化大肠杆菌制备工程菌，ClyA基因的作用是_____；Fc表达产物能够与树突状细胞表面的特异性受体结合，提高树突状细胞_____OMV的能力。

(2)为研究上述工程菌在人为可控条件下引发特异性免疫反应的效果，研究者用健康小鼠进行如下实验：。组别第0、3、8天口服工程菌每次服用工程菌12小时后，饮用含阿拉伯糖的水结果检测第1组空载体+第12天，每组随机取5只小鼠等量的脾脏细胞与黑色素瘤细胞共培养，检测杀伤率，结果如图3．第2组ClyA-Fc+第3组ClyA-OVA+第4组第5组

注：“+”；“-”代表是否饮用；

口服工程菌12小时后其在肠道内存在数量较多。

①第4、5组的操作是_____。图3结果说明工程菌在人为可控条件下引发特异性免疫反应，理由是_____。

②为进一步验证上述结论，研究者进行如下实验：先加入_____（填选项前字母）保温后漂洗，再加入_____（填选项前字母）保温后漂洗，检测荧光细胞的数目，若第5组_____为最大值；则上述结论成立。

A．带有红色荧光标记的OVA抗原肽复合物。

B．带有绿色荧光标记的细胞毒性T细胞特异性抗体。

C．第1-5组小鼠脾脏细胞。

③肿瘤患者术后极易复发，研究者重复上表实验，并在第3次口服工程菌后第50天给小鼠注射黑色素瘤细胞。目的是_____。

(3)该工程菌的研发为不同肿瘤的精准治疗和预防提供了可能。依据本研究，设计针对肺癌治疗的工程菌表达载体元件：_____。评卷人得分六、综合题(共4题，共12分)31、现代生物工程技术推动了免疫学和畜牧业的发展。

（1）制备单克隆抗体需要借助动物细胞融合技术；其过程中与植物不同的方法是使用________诱导，融合细胞首先需要经过_________培养获得杂交瘤细胞；还需进行_______化培养和抗体检测，经多次筛选，用专一抗体检验呈阳性才可获得足够数量的____________，再进行体内或体外培养，大量制备单克隆抗体。

（2）对大面积烧伤病人；借助________技术可获取大量自身健康皮肤用于移植。培养的条件需要________________；合适的营养、适宜的温度、通入______________混合气体。

（3）用细胞核移植技术繁育良种牛的培育过程需要进行胚胎移植，移植前需要对受体牛进行__技术处理，对外来胚胎基本不发生__________，为胚胎在受体内的存活提供了可能。32、利用固定化酵母直接发酵甜菜汁生产燃料乙醇；下图表示相关的工艺流程，请分析回答：

（1）图中的步骤①中，溶化海藻酸钠时要注意_____，如果在CaCl2溶液中形成的凝胶珠颜色过浅，说明_________。步骤②中加入果胶酶的作用是_____。

（2）图中的步骤④体现了固定化酵母_____、_____的优点。

（3）酵母菌异化作用的类型是_____；利用酵母菌制作果酒的原理可用反应式：_________表示。

（4）果汁发酵后是否有酒精产生，在酸性条件下，所用试剂与酒精反应呈现_____。33、为扩大可耕地面积；增加粮食产量，黄河三角洲等盐碱地的开发利用备受关注。我国科学家应用耐盐基因培育出了耐盐水稻新品系。

（1）获得耐盐基因后，构建重组DNA分子所用的限制性内切酶作用于图中的___________处，DNA连接酶作用于___________处（填a或b）

（2）将重组DNA分子导入水稻受体细胞的常用方法有农杆菌转化法和___________法。

（3）为了确定耐盐转基因水稻是否培育成功，既要用放射性同位素标记的___________作探针进行分子杂交检测，又要用___________的方法从个体水平鉴定水稻植株的耐盐性。34、糖化酶是将淀粉转化为葡萄糖的酶，大部分野生酵母菌因缺乏糖化酶基因而不能直接利用淀粉。研究人员将经诱变处理后获取的黑曲霉菌高产糖化酶基因导入毕赤酵母CS115（对氨苄青霉素不敏感）中，构建能直接利用淀粉的工程菌，该过程所用质粒（仅示部分结构）如图1所示。质粒的外侧链为a链，内侧链为b链。基因Ampr转录的模板链属于b链的片段。三种限制酶的识别序列及切割位点见下表。请回答下列问题。限制酶BamHIPstIXbaI识别序列和切割位点（5′→3′）G↓GATCCC↓TGCAGT↓CTAGA

(1)为获得糖化酶高产菌株，研究人员将经诱变处理后的黑曲霉菌接种到___________含量高的培养基上，恒温培养适宜时间后滴加碘液，挑选出透明圈（不产生蓝色）直径___________的菌株；再进行复筛以及稳定性遗传实验。

(2)质粒复制的模板链是___________（选填“a”、“b”、“a和b”、“a或b”）链。高产糖化酶基因插入质粒后，其转录的模板链属于___________链的片段。

(3)构建高产糖化酶基因表达载体时，使用限制酶切割pPIC9K，37℃，15min后需将温度升高至65℃并保温20min，目的是使___________，从而终止酶切反应。图2是高产糖化酶基因示意图（仅示部分碱基），为使其能定向插入表达载体并成功表达，则PCR扩增时引物的碱基序列为___________。

①5′-TCTAGATCTGTTGAAT-3′②5′-TCTAGAAGACAACTTA-3′

③5′-CTGCAGCTTGGATGAT-3′④5′-GGATCCCTTGGATGAT-3′

⑤5′-GGATCCGAACCTACTA-3′⑥5′-CTCGAGTCTGTTGAAT-3′

(4)毕赤酵母GS115是一种组氨酸营养缺陷型微生物，自身不能合成生长必需的组氨酸，因此可利用________的基础培养基（不含淀粉）初步筛选导入高产糖化酶基因表达载体的毕赤酵母GS115，再将筛选出的细胞转接至含甲醇的培养液中进行发酵产酶性能测定。参考答案一、选择题(共9题，共18分)1、C【分析】【分析】

图中显示将人的造血干细胞等移植至超免疫缺陷鼠；移植后的老鼠在抗原的刺激后，分离出人B细胞发现可以产生抗体。

【详解】

A；根据图示；人B细胞在超免疫缺陷鼠体内受到抗原刺激会增殖分化产生抗体，A正确；

B；人抗体基因克隆前需要进行多次筛选和检测；B正确；

C；抗体属于分泌蛋白；是通过胞吐作用释放出细胞，不需要载体蛋白，C错误；

D；全人源单克隆抗体能有效降低人体的免疫排斥反应；D正确。

故选C。2、B【分析】【分析】

从土壤中分离纤维素分解菌的一般步骤是：土壤取样→选择培养→梯度稀释→涂布培养和筛选菌株．筛选纤维素分解菌需要用以纤维素为唯一碳源的选择培养基；纤维素分解菌可以用刚果红染液进行鉴别，在培养基中加入刚果红染液，在其菌落周围会出现透明圈。

【详解】

从从土壤中分离纤维素分解菌的一般步骤是：土壤取样→选择培养→梯度稀释→涂布培养和筛选菌株。

故选B。

【点睛】3、D【分析】【分析】

1.生物实验应遵循对照原则；等量原则、单一变量原则和控制无关变量原则。

2.A同学的实验结果可能是培养基污染造成的；还可能是A同学实验操作过程中污染造成的，也可能是与其他同学所取土壤样品不同造成的，关键是设法排除影响结果的因素。

【详解】

A；A同学出现这种结果的原因可能是土样不同；也可能是操作中污染造成的，A正确；

B；A同学的实验结果可能是培养基污染造成的；可以将A同学配制的培养基在不加土样的情况下进行培养作为空白对照，以证明培养基是否受到污染，B正确；

C；如果是A同学实验操作过程中污染造成的；让其他同学用与A同学一样的土壤进行实验，如果结果与A同学一样，则可证明A同学无误，C正确；

D；B、C选项的实验思路都遵循了实验的对照原则；D错误。

故选D。

【点睛】4、B【分析】【分析】

转基因生物的安全性问题：食物安全（滞后效应；过敏源、营养成分改变）、生物安全（对生物多样性的影响）、环境安全（对生态系统稳定性的影响）。

【详解】

A.吃了转基因食品；其中的基因会被消化分解，因此不会整合到人的基因组中，A错误；

B.严格管理好目的基因和控制好目的基因的表达部位；则转基因食品安全性可以得到保障，B正确；

C.食用转基因大米不一定会对人的健康造成危害；C错误；

D.抗除草剂植物生产的食品不一定会导致人患癌症；D错误。

故选B。5、D【分析】【分析】

图中①②③依次为透明带；滋养层、内细胞团。动物胚胎发育的基本过程：受精卵→2细胞→4细胞→8细胞→桑椹胚→囊胚→原肠胚→幼体；细胞开始分化的时期是：囊胚期（其中内细胞团细胞具有全能性，为胚胎干细胞）。胚胎分割是指采用机械方法将早期胚胎切割成2等分、4等分或8等分等，经移植获得同卵双胚或多胚的技术，进行胚胎分割时，应选择发育良好、形态正常的桑椹胚或囊胚。

【详解】

A.如图是囊胚期示意图；①②③依次称之为透明带；滋养层、内细胞团，A正确；

B.细胞分化贯穿于整个生命历程；在胚胎时期达到最大限度，高等哺乳动物胚胎发育中的细胞分化开始于囊胚期，终止于生命结束，B正确；

C.胚胎从①中伸展出来的过程叫做孵化；C正确；

D.进行胚胎分割时，应选择发育良好、形态正常的桑椹胚或囊胚，图示细胞所处时期可以进行，D错误。

故选D。6、C【分析】【分析】

1；培养基的营养构成一般都含有碳源、氮源、水和无机盐。此外还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求；

2；培养基按照物理性质分为固体培养基和液体培养基；按照用途分为选择培养基和鉴别培养基；

3；选择培养基是在培养基中添加某物质；抑制杂菌生长，促进所需微生物生长，培养分离出特定的微生物；

4；培养基的配制原则：①目的要明确；②营养要协调；③pH要适宜；

5；以尿素为唯一氮源的培养基可以分离出分解尿素的细菌。

【详解】

A；培养基的配方中含琼脂和青霉素；按照培养基的物理性质属于固体培养基，按照用途划分属于选择培养基，青霉素是抗生素，抑制细菌的生长等，A正确；

B；培养基的配方中含有葡萄糖；该培养基所培养的是同化类型为异养型，而细菌不能在含有青霉素的培养基中生存，所以可能培养的是酵母菌或毛霉，B正确；

C；培养基中的青霉素主要起杀菌作用；不是营养物质，不满足微生物生长对特殊营养物质的要求，C错误；

D；以尿素为唯一氮源的培养基可以分离出分解尿素的细菌；所以要去掉其他氮源和青霉素，D正确。

故选C。7、C【分析】【分析】

1；生殖性克隆就是以产生新个体为目的克隆；目的是产生一个独立生存的个体。2、中国政府：禁止生殖性克隆人，坚持四不原则（不赞成、不允许、不支持、不接受任何生殖性克隆人实验），不反对治疗性克隆人。

【详解】

A；克隆属于无性繁殖；因此不会破坏人类基因的多样性，A错误；

B；生殖性克隆涉及伦理问题；我国政府不允许进行任何生殖性克隆人实验，B错误；

C；“克隆人”的出现将对现有社会的家庭结构、伦理体系造成巨大的冲击；所以生殖性克隆人的出现有可能破坏现有的家庭和社会结构，C正确；

D；我国政府主张全面禁止生物武器；但不反对治疗性克隆人，D错误。

故选C。8、B【分析】【分析】

动物细胞培养的条件。

（1）无菌；无毒的环境：①消毒、灭菌；②添加一定量的抗生素；定期更换培养液；以清除代谢废物。

（2）营养物质：糖；氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等；还需加入血清、血浆等天然物质。

（3）适宜的温度和pH。

（4）气体环境：95%空气（细胞代谢必需的）和5%的CO2（维持培养液的pH）。

【详解】

A、CO2培养箱中的混合气体是95%的空气和5%的CO2（维持pH）；A错误；

B；原代培养过程中用胰蛋白酶处理后分瓶可以有效解除细胞间的接触抑制；从而保证细胞的增殖过程，B正确；

C；正常细胞的细胞分裂次数是有限的；据此可知，传代培养中的细胞失去增殖能力是由于细胞衰老或遗传物质发生改变所致，C错误；

D；对杂交瘤细胞进行克隆化培养和抗体检测；将抗体检测呈阳性的杂交瘤细胞再在体外大规模培养或注射到小鼠腹腔内增殖，从细胞培养液或小鼠的腹水中获得所需的单克隆抗体，D错误。

故选B。9、C【分析】【分析】

【详解】

A、DNA提取的原理之一是：利用DNA在NaCl溶液浓度0.14mol/L时溶解度最小，2mol/LNaCl溶液中溶解度最大，A正确；

B、配制以尿素为唯一氮源的培养基为选择性培养基，可筛选出尿素分解细菌，B正确；

C、叶绿体中色素分离的原理是：各种色素在层析液中溶解度不同，C错误；

D、PCR扩增DNA片段过程中，上一轮反应产物可作为下一轮反应模板，D正确。

故选C。二、多选题(共9题，共18分)10、B:C【分析】【分析】

1；治疗性克隆：指利用克隆技术产生特定细胞和组织（皮肤、神经或肌肉等）用于治疗性移植。生殖性克隆：指将克隆技术用于生育目的；即用于产生人类个体。2、分析题图：图示为治疗性克隆的大概过程，即从患者身上提取一个体细胞核，移植到去核的卵细胞中，形成一个新细胞，经过动物细胞培养成胚胎干细胞，经过细胞分裂、分化形成组织和器官。

【详解】

A；人类“治疗性克隆”应用的主要技术有核移植、动物细胞培养；属于生物工程中的动物细胞工程，A正确；

B；由图可知；该治疗过程中应用的主要技术有核移植、动物细胞培养，没有应用胚胎移植技术，B错误；

C；此过程没有形成完整个体；不能体现胚胎干细胞的全能性，C错误；

D；“治疗性克隆”与“异体器官移植”相比；器官来自于同一个体，其优点之一是避免了免疫排斥反应，D正确。

故选BC。11、A:B【分析】【分析】

1；基因工程的工具：（1）限制酶：能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列；并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂；（2）DNA连接酶：连接的是两个核苷酸之间的磷酸二酯键；（3）运载体：常用的运载体：质粒、噬菌体的衍生物、动植物病毒。

2；转基因生物的安全性问题：食物安全（滞后效应、过敏源、营养成分改变）、生物安全（对生物多样性的影响）、环境安全（对生态系统稳定性的影响）。

【详解】

A；外源基因插入宿主基因组的部位往往是随机的；因而极有可能破坏原有基因，并使之表达受到影响，A错误；

B；目前科学家对基因的结构、基因间的相互作用以及基因的调控机制等都了解相当有限；再加上转移的基因虽然是功能已知的基因，但不少却是异种生物的基因，因此可能会引起安全性问题，B错误；

C；在“转基因”的过程中；必然用到工具酶，如限制酶和DNA连接酶，C正确；

D；转基因技术成果在农业和医药上发挥了极大的作用；已进入人类的生产和生活，D正确。

故选AB。

【点睛】12、A:B【分析】【分析】

动物细胞培养的原理利用的是细胞的增殖；培养过程需要无毒无菌的环境；充足的营养、适宜的温度和pH以及适宜的气体环境。

【详解】

A；细胞体外培养所需的营养物质与体内基本相同；需要加入血清，以补充培养基中缺乏的物质，A正确；

B；在体外连续培养时；常采用胰蛋白酶或者胶原蛋白酶将细胞分开，B正确；

C；骨髓间充质干细胞可以分化成胰岛样组织细胞；但没有发育成一个完整的个体人，不能说明其具有发育的全能性，C错误；

D；由于导入的是胰岛样细胞；与血型无关，治疗成功后康复者的血型不可能发生改变，D错误。

故选AB。13、A:C【分析】【分析】

1；在利用酵母菌发酵时最好是先通入足够的无菌空气在有氧环境下一段时间使其繁殖；再隔绝氧气进行发酵；酒精发酵的最佳温度是在18℃～25℃，pH最好是弱酸性。

2；醋酸菌是好氧性细菌；当缺少糖源时和有氧条件下，可将乙醇（酒精）氧化成醋酸；当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸；醋酸菌生长的最佳温度是在30℃～35℃。

3；豆腐的主要营养成分是蛋白质和脂肪；都是大分子有机化合物，难以消化、吸收，毛霉、酵母菌等多种微生物分泌的蛋白酶，能将蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸，脂肪酶可将脂肪分解成甘油和脂肪酸，在多种微生物的协同下，豆腐转变成腐乳。

【详解】

A；果醋制作的菌种是醋酸菌；属于好氧菌，故密闭环境不利于果醋的发酵，A错误；

B；腐乳制作过程中；盐的用量、酒的种类和用量、温度等均会影响腐乳风味，B正确；

C、参与果酒制作的酵母菌是兼性厌氧型真核生物，参与果醋制作的醋酸菌是需氧型原核生物，参与腐乳制作的毛霉是需氧型真核生物，所以果酒制作的微生物细胞呼吸产生CO2的场所是细胞质基质或线粒体、果醋制作的微生物细胞呼吸产生CO2的场所是细胞质基质，而腐乳制作的微生物细胞呼吸产生CO2的场所是线粒体；C错误；

D；与自然发酵相比；人工接种过程中利用了严格的灭菌措施，可以防止其它杂菌污染，且发酵获得的产品品质更好，D正确。

故选AC。

【点睛】14、A:C:D【分析】【分析】

1；参与果酒制作的微生物是酵母菌；其新陈代谢类型为异养兼性厌氧型。果酒制作的原理：（1）在有氧条件下，进行有氧呼吸大量繁殖；（2）在无氧条件下，产生酒精和二氧化碳。

2；参与果醋制作的微生物是醋酸菌；其新陈代谢类型是异养需氧型。果醋制作的原理：当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的果糖分解成醋酸。当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。

3；参与腐乳制作的微生物主要是毛霉；其新陈代谢类型是异养需氧型。腐乳制作的原理：毛霉等微生物产生的蛋白酶能将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可将脂肪分解成甘油和脂肪酸。

【详解】

A；果酒制作时；除了产生酒精，还会产生大量二氧化碳，因此发酵瓶中容易产生较多泡沫，A正确；

B；用果酒制作果醋过程中；液面出现一层白色菌膜，而不是褐色菌膜，B错误；

C；制作腐乳过程中；豆腐表面发黏且长有白色菌丝，C正确；

D；用固定化酵母进行酒精发酵；酒精浓度越来越高，因此凝胶珠逐渐浮上液面，D正确。

故选ACD。

【点睛】15、A:B【分析】【分析】

分解纤维素微生物的分离实验原理：

（1）土壤中存在着大量纤维素分解酶；包括真菌；细菌和放线菌等，它们可以产生纤维素酶。纤维素酶是一种复合酶，可以把纤维素分解为纤维二糖，进一步分解为葡萄糖使微生物加以利用，故在用纤维素作为唯一碳源的培养基中，纤维素分解菌能够很好地生长，其他微生物则不能生长。

（2）在培养基中加入刚果红；可与培养基中的纤维素形成红色复合物，当纤维素被分解后，红色复合物不能形成，培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈，从而可筛选纤维素分解菌。

【详解】

A；筛选该高产菌株需要在纤维素为唯一碳源的培养基中培养；A正确；

B；由pH与纤维素酶活性的曲线图分析可知；当pH为9时，纤维素酶的活性最高，故在探究最适温度时应尽可能将发酵液的pH控制在9左右，B正确；

C；由温度与纤维素酶活性的曲线图分析可知；当温度为35℃时纤维素酶的活性最大，但是由于缺少35℃之后的温度实验组，故无法判断该酵母菌高产菌株产生纤维素酶的最适温度是35℃，C错误；

D；酵母菌是兼性厌氧微生物；在有氧条件下，酵母菌进行有氧呼吸，大量繁殖，故在降解初期需要给酵母菌提高有氧环境，以保证酵母菌的数量，D错误。

故选AB。

【点睛】16、A:B:C【分析】【分析】

1；据图分析可知；①号部位为病斑区域，即腐烂部位，①与②交界处为“病键交界处”，是腐烂部位与未腐烂部位交界的地方，②③④⑤均为未腐烂部位，且距离腐烂部位依次变远。

2；在曲线图中；病班部位的Pat含量最高，而距离病班部位越来越远，Pat含量就会越来越少。

【详解】

A；由曲线图可知；该实验自变量是腐烂苹果中的病斑大小和离病斑距离大小，A正确；

B；青霉素可以抑制细菌生长；可向扩展青霉培养液中加入青霉素以防止杂菌污染，B正确；

C；病斑越大；说明病斑中扩展青霉素的密度就越大，产生的Pat就越多，C正确；

D；如果只去除腐烂部位；那么未腐烂部位中的Pat仍然会对人体造成伤害，存在健康风险，故窝烂苹果去除腐烂部位后不能食用，D错误。

故选ABC。17、A:B【分析】【分析】

植物体细胞杂交的过程：

其原理是植物细胞具有全能性和细胞膜具有流动性。植物体细胞杂交技术可以可以克服远缘杂交不亲和的障碍；培育作物新品种方面所取得的重大突破。

【详解】

A；植物细胞壁主要成分是纤维素和果胶；因此①过程通常用纤维素酶和果胶酶处理除去细胞壁获得原生质体，不是原生质层，A错误；

B；过程②表示诱导原生质体融合；常使用聚乙二醇作为诱导剂，B错误；

C；经过②和③过程形成的c细胞的染色体组不一定为AABB；也有可能为AAAA或BBBB，C正确；

D；两个物种具有生殖隔离；不能杂交产生可育后代，通过植物体细胞杂交技术可以打破生殖隔离，实现远缘杂交育种，D正确。

故选AB。18、A:B【分析】【分析】

动物细胞培养需要满足以下条件：①无菌、无毒的环境：培养液应进行无菌处理。通常还要在培养液中添加一定量的抗生素，以防培养过程中的污染。此外，应定期更换培养液，防止代谢产物积累对细胞自身造成危害。②营养：合成培养基成分：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等。通常需加入血清、血浆等天然成分。③温度：适宜温度。④气体环境：95%空气+5%CO2。

【详解】

A、动物细胞培养中，培养环境中需要O2，也需要CO2（用来维持培养液的pH）；A错误；

B；动物细胞培养不需要脱分化；植物细胞要经过脱分化才形成愈伤组织，B错误；

C；动物细胞培养中常用含糖类、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清的液体培养基；C正确；

D；动物细胞培养过程中会出现接触抑制现象而停止分裂增殖；故培养瓶中的细胞培养到一定阶段后要用胰蛋白酶处理，分瓶后才能继续增殖，D正确。

故选AB。三、填空题(共6题，共12分)19、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】30～3520、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】含有基因表达载体受体细胞标记基因是否表达。21、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】80—100℃变性22、略

【分析】【分析】

植物组织培养的条件：①细胞离体和适宜的外界条件（如适宜温度；适时的光照、pH和无菌环境等）；②一定的营养（无机、有机成分）和植物激素（生长素和细胞分裂素）。决定植物脱分化和再分化的关键因素是植物激素的种类和比例；特别是生长素和细胞分裂素的协同作用在组织培养过程中非常重要，被称为“激素杠杆”。

【详解】

（1）在植物中；一些分化的细胞，经过激素的诱导，可以脱分化失去其特有的结构和功能而转变成未分化细胞。

（2）胡萝卜的组织培养中；将接种后的胡萝卜组织块，放在恒温黑暗条件下培养。一段时间后，将生长良好的愈伤组织转接到分化培养基上继续培养。

（3）在植物组织培养过程中；由于培养细胞一直处于不断的分生状态，因此容易受到培养条件和外界压力的影响而产生突变。为筛选出具有抗盐性状的突变体，需将种子播种在含一定浓度的盐的培养基上，获得所需个体。

【点睛】

本题考查植物组织培养的相关知识，要求考生识记植物组织培养的过程、原理及条件，掌握植物组织培养技术的相关应用，能结合所学的知识准确分析，属于考纲识记和理解层次的考查。【解析】①.激素②.特有的结构和功能③.黑暗④.分化⑤.培养条件和外界压力⑥.一定浓度的盐23、略

【分析】【详解】

生殖性克隆指利用克隆技术获得胚胎；并将胚胎孕育成为人类个体的克隆性技术，其目的是用于生育，获得人的复制品；治疗性克隆是指利用克隆技术产生特定细胞或组织等，用于治疗性移植的克隆性技术，其目的是用于医学研究和疾病的治疗。

据概念可知，实现生殖性克隆和治疗性克隆都会用到的技术有体细胞核移植技术、动物细胞培养技术、早期胚胎培养技术、胚胎移植技术等；治疗性克隆在获取胚胎干细胞后，根据治疗目的诱导干细胞分化形成各种组织和器官，供患者移植用，故治疗性克隆还会应用到的技术为干细胞培养技术。【解析】生殖性克隆指利用克隆技术获得胚胎，并将胚胎孕育成为人类个体的克隆性技术治疗性克隆是指利用克隆技术产生特定细胞或组织等，用于治疗性移植的克隆性技术体细胞核移植技术、动物细胞培养技术、早期胚胎培养技术、胚胎移植技术等体细胞核移植技术，早期胚胎培养技术、动物细胞培养技术、胚胎移植技术、干细胞培养技术等用于生育，获得人的复制品用于医学研究和疾病的治疗24、略

【分析】【详解】

在日常生活中；我们遇到的有关生物技术安全与伦理问题有：生殖性克隆人伦理问题；试管婴儿与设计试管婴儿伦理问题、转基因产品的安全性与伦理问题和生物武器的安全性等。

例如转基因产品的安全性：转基因技术的安全性的争议；主要集中在两个方面，一是对人是否安全，二是对环境的影响。

对人的安全方面；支持转基因技术的人认为投放市场的转基因作物都是经过充分实验的，被改变的基因仅限于增加作物的抗病；抗灾害能力，并且在北美地区转基因食品已经使用的很多年，可以说现在美国加拿大20岁左右的年轻人从小就是吃转基因食品长大的；反对转基因技术的人认为转基因食品有害，他们的证据主要是一位科学家的实验证明，用转基因食品喂养的小白鼠癌症发病率明显升高，但问题是这个实验只成功过一次，后来别的科学家在相同的条件下都没能再现这个实验结果。

在环境方面对转基因技术的争议是最大的；也是欧洲人反对转基因技术的重要依据，反对人持有的观点是，通过改良基因创造出抵抗病虫害和其他灾害的植物，这种技术如果失去控制可能会把农作物改造成适应性极强的超级植物，自然平衡使任何生物都不可能占绝对优势地位，但转基因技术产生的超级植物可能会打破自然平衡而泛滥成灾。

伦理问题：由于转基因技术创新打破了物种界限,使不同物种间的基因可以进行前所未有的新组合,其可能造成的危害难以预见,这就使转基因技术创新呈现前所未有的复杂性,并不可避免地会引发很多全新的社会伦理问题,引出种种有关生物科学家的道德责任和学术自由的哲学争论。在转基因植物技术创新中,功利主义的预设和学术自由的主张必须以人类的价值、尊严和社会公正为前提条件。相关领域的科学家必须担当起必要的道德责任,把握好伦理横杆,以促使转基因植物技术创新沿着科学的轨道健康发展。【解析】在日常生活中；我们遇到的有关生物技术安全与伦理问题有：生殖性克隆人伦理问题；试管婴儿与设计试管婴儿伦理问题、转基因产品的安全性与伦理问题和生物武器的安全性等。

例如转基因产品的安全性：转基因技术的安全性的争议；主要集中在两个方面，一是对人是否安全，二是对环境的影响。

对人的安全方面；支持转基因技术的人认为投放市场的转基因作物都是经过充分实验的，被改变的基因仅限于增加作物的抗病；抗灾害能力，并且在北美地区转基因食品已经使用的很多年，可以说现在美国加拿大20岁左右的年轻人从小就是吃转基因食品长大的；反对转基因技术的人认为转基因食品有害，他们的证据主要是一位科学家的实验证明，用转基因食品喂养的小白鼠癌症发病率明显升高，但问题是这个实验只成功过一次，后来别的科学家在相同的条件下都没能再现这个实验结果。

在环境方面对转基因技术的争议是最大的；也是欧洲人反对转基因技术的重要依据，反对人持有的观点是，通过改良基因创造出抵抗病虫害和其他灾害的植物，这种技术如果失去控制可能会把农作物改造成适应性极强的超级植物，自然平衡使任何生物都不可能占绝对优势地位，但转基因技术产生的超级植物可能会打破自然平衡而泛滥成灾。

伦理问题：由于转基因技术创新打破了物种界限,使不同物种间的基因可以进行前所未有的新组合,其可能造成的危害难以预见,这就使转基因技术创新呈现前所未有的复杂性,并不可避免地会引发很多全新的社会伦理问题,引出种种有关生物科学家的道德责任和学术自由的哲学争论。在转基因植物技术创新中,功利主义的预设和学术自由的主张必须以人类的价值、尊严和社会公正为前提条件。相关领域的科学家必须担当起必要的道德责任,把握好伦理横杆,以促使转基因植物技术创新沿着科学的轨道健康发展。四、判断题(共2题，共4分)25、A【分析】【详解】

生物武器是利用生物战剂杀伤人员、牲畜、毁坏植物的武器。生物武器种类包括致病菌、病毒、生化毒剂以及经过基因重组的致病菌等，故正确。26、A【分析】【分析】

“设计试管婴儿”在植入前需要对胚胎进行遗传学诊断；而“试管婴儿”是解决不孕不育等问题，不需要进行遗传学诊断。

【详解】

“设计试管婴儿”与“试管婴儿”相比在植入前需要通过多种技术手段对胚胎进行遗传学诊断；以便选择合适的设计出来的试管婴儿。

故正确五、实验题(共4题，共40分)27、略

【分析】【分析】

1；选择培养基是指通过培养混合的微生物；仅得到或筛选出所需要的微生物，其他不需要的种类在这种培养基上是不能生存的。

2；分解纤维素的微生物的分离的实验原理：

（1）土壤中存在着大量纤维素分解酶；包括真菌；细菌和放线菌等，它们可以产生纤维素酶。纤维素酶是一种复合酶，可以把纤维素分解为纤维二糖，进一步分解为葡萄糖能被微生物利用，故在用纤维素作为唯一碳源的培养基中，纤维素分解菌能够很好地生长，其他微生物则不能生长。

（2）在培养基中加入刚果红；可与培养基中的纤维素形成红色复合物，当纤维素被分解后，红色复合物不能形成，培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈，从而可筛选纤维素分解菌。

3；统计菌落数目的方法：

（1）显微镜直接计数法：

①原理：利用特定细菌计数板或血细胞计数板；在显微镜下计算一定容积的样品中微生物数量；

②方法：用计数板计数；

③缺点：不能区分死菌与活菌。

（2）间接计数法（活菌计数法）：

①原理：当样品的稀释度足够高时；培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌。

②操作：

a；设置重复组；增强实验的说服力与准确性。

b；为了保证结果准确；一般选择菌落数在30～300的平板进行计数。

③计算公式：每克样品中的菌株数=（c÷V）×M；其中c代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数，V代表涂布平板时所用的稀释液的体积（mL），M代表稀释倍数。

【详解】

（1）土壤取样时；一般选择纤维素丰富的环境。选择培养的目的是增加纤维素分解菌的数量。

（2）若测得稀释一定倍数的0.1mL稀释液中纤维素分解菌的菌落数平均值为51，通过计算得知每毫升样品中有5.1×107个纤维素分解菌，则由每mL样品中的菌株数=（c÷V）×M可得，该稀释液的稀释倍数＝5.1×107÷51×0.1=105。

（3）鉴别纤维素分解菌的培养基中应加入CR染料；它可以与纤维素形成红色复合物。若在鉴别培养基上得到部分有透明圈的菌落，透明圈越大说明降解纤维素能力越强，所以图中降解纤维素能力最强的是菌落1。

【点睛】

本题结合流程图，考查微生物的分离和培养，解题关键是识记土壤微生物分离的原理及方法；识记培养基的种类及作用，能结合图中信息准确答题。【解析】纤维素增加纤维素分解菌的数量105红①28、略

【分析】【分析】

1；分析题图：小鼠骨體瘤细胞和取自感染病毒的人体内的浆细胞进行细胞融合；M表示融合细胞，N表示筛选出的杂交瘤细胞。

【详解】

（1）分析题图：小鼠骨體瘤细胞和取自感染病毒的人体内的浆细胞进行细胞融合，M表示融合细胞，N表示筛选出的杂交瘤细胞；B淋巴细胞是取自感染H7N9病毒的动物或人；随后将B淋巴细胞与骨髓瘤细胞进行融合，对融合后的细胞用选择培养基进行筛选，挑选出B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合的细胞，然后再进行克隆化培养和抗体检测，以得到符合要求的N细胞，N细胞的名称是杂交瘤细胞；

（2）①据题中图表分析，KD值越小，抗体和HA蛋白的亲和力越高；抗体Y的KD值小于抗体X的KD值，故对H7N9病毒HA蛋白亲和力更高的抗体是抗体Y；

②抗体X的体内治疗效果优于抗体Y，但对H7N9病毒HA蛋白亲和力更高的抗体是抗体Y，验证抗体除了中和病毒活性之外，还可以通过和巨噬细胞表面的受体相结合，从而增强巨噬细胞的吞噬作用，进而清除被病毒感染的靶细胞，需要进行抗体X和抗体Y的对照实验，并与无关抗体进行比较，可以将巨噬细胞及感染了H7N9病毒的肺上皮细胞分别加入A；B、C三组细胞培养液中；并向这三组培养液中分别加入无关抗体、抗体X和抗体Y，一段时间后检测并比较肺上皮细胞的裂解百分比。

【点睛】

对单克隆抗体制备流程、抗体效果检测原理和实验目的及用品的分析，是解决本题的关键。【解析】①.感染过H7N9病毒②.抗体检测③.杂交瘤细胞④.Y⑤.将巨噬细胞及感染了H7N9病毒的肺上皮细胞分别加入A、B、C三组细胞培养液中，并向这三组培养液中分别加入无关抗体、抗体X和抗体Y，一段时间后检测并比较肺上皮细胞的裂解百分比。29、略

【分析】【分析】

1；稀释涂布平板法：将待测样品制成均匀的系列稀释液；尽量使样品中的微生物细胞分散开，使成单个细胞存在，再取一定稀释度、一定量的稀释液接种到平板中，使其均匀分布于平板中的培养基内。2、平板划线法：把混杂在一起的微生物或同一微生物群体中的不同细胞，用接种环在平板表面上作多次由点到线的划线稀释而获得较多独立分布的单个细胞，并让其成长为单菌落的方法。

【详解】

（1）A；B、C中的菌落分布较均匀；是通过稀释涂布平板法获得的，而D是通过平板划线法获得的，划线平板法是从上一次划线的末端开始划线。故选ABC。

（2）①从整个实验过程可以看出；实验通过对皮肤渗出物稀释培养形成的菌落进行扩大培养后，利用噬菌体的作用检测其中是否含有炭疽芽孢杆菌。②对照组中加入的液体不应含有噬菌体，因此应加入等量的生理盐水；在进行微生物培养时为防止杂菌的混入，消毒和灭菌工作是关键，主要包括对操作的空间；操作者的衣着和手进行清洁和消毒；将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等进行灭菌；实验操作在酒精灯火焰附近进行；操作过程中避免已经灭菌的材料用具与周围物品相接触等。③若实验组液体培养基的浑浊度低于对照组，说明实验组中的炭疽芽孢杆菌被噬菌体侵染与破坏，即该疑似患者感染了炭疽芽孢杆菌。④炭疽芽孢杆菌属于细菌，能寄生在人和动物体内，说明它是异养型生物，培养时需要借助摇床振荡培养，说明它是需氧型生物；振荡培养的目的是增加培养液中的氧气含量，使细菌与营养物质充分接触，有利于炭疽芽孢杆菌的大量繁殖；培养液变浑浊表明炭疽芽孢杆菌大量繁殖。

（3）分析表中数据可知，只有稀释度为10-5时菌落数在30~300之间，适合用于计数。【解析】(1)ABC

(2)检验皮肤炭疽病疑似患者的皮肤渗出物中是否含有炭疽芽孢杆菌与实验组等量的生理盐水对操作的空间；操作者的衣着和手进行清洁和消毒；将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等进行灭菌；实验操作在酒精灯火焰附近进行；操作过程中避免已经灭菌的材料用具与周围物品相接触实验组液体培养基的浑浊度比对照组低（异养）需氧型增加培养液中的氧气含量；使细菌与营养物质充分接触炭疽芽孢杆菌大量繁殖。

(3)10-5稀释度为10-5时菌落数在30~300之间30、略

【分析】【分析】

树突状细胞为抗原呈递细胞；可识别；摄取和传递抗原信息。

【详解】

（1）细菌溶素A（ClyA）是外膜囊泡上含量较高的特异蛋白；而OMV能穿越肠道上皮屏障活化肠黏膜内丰富的免疫细胞。所以，ClyA基因的作用为表达出细菌溶素A（ClyA），使OVA和Fc定位至OMV表面，进而融合基因可以被免疫细胞识别。Fc表达产物能够与树突状细胞表面的特异性受体结合，进而提高树突状细胞识别；摄取和传递抗原信息的能力。

（2）①根据表格和柱状图可知；服用的工程菌采用“加法原理”，逐渐增加部件，且第4组和第5组工程菌都是完整的，即第4组:ClyA-OVA-Fc第5组:ClyA-OVA-Fc，但是第4组饮用含阿拉伯糖的水，进而激活融合基因的表达；第5组不饮用含阿拉伯糖的水，不能激活融合基因的表达。所以，第3；5组含有OVA，在人为控制口服阿拉伯糖后产生OMV，激活特异性免疫，对肿瘤细胞的杀伤率较高；1、2组缺乏OVA，第4组无阿拉伯糖诱导，杀伤率均低。

②小鼠脾脏细胞具有免疫细胞；可在抗原刺激下引起特异性免疫。带有红色荧光标记的OVA抗原肽复合物可引起小鼠脾脏细胞发生特异性免疫，故先加入第1-5组小鼠脾脏细胞和带有红色荧光标记的OVA抗原肽复合物进行保温，判断特异性免疫的强度；

故选AC。

再加入带有绿色荧光标记的细胞毒性T细胞特异性抗体；目的是检测OVA抗原肽复合物是否能够产生特异性细胞毒性T细胞。

故选B。

若第5组同时被红色和绿色荧光标记的细胞数目占比越多；说明工程菌在人为可控条件下引发特异性免疫反应，结论成立。

③肿瘤患者术后极易复发；说明特异性免疫功能减弱。所以，可多次注射黑色素瘤细胞，进而研究该口服工程菌是否能够诱发长期免疫记忆，从而抑制肿瘤复发。

（3）本实验中融合基因里面有OVA（黑色素瘤细胞特异性抗原），所以只需将OVA替换为肺癌细胞特异性抗原即可。即将元件中的OVA替换为肺癌细胞特异性表达的抗原基因。【解析】(1)表达ClyA；使OVA和Fc定位至OMV表面识别；摄取。

(2)第4组:ClyA-OVA-Fc和-第5组:ClyA-OVA-Fc和+第3；5组含有OVA；在人为控制口服阿拉伯糖后产生OMV，激活特异性免疫，对肿瘤细胞的杀伤率较高;1、2组缺乏OVA，第4组无阿拉伯糖诱导，杀伤率均低ACB同时被红色和绿色荧光标记的细胞数目占比研究该口服工程菌是否能够诱发长期免疫记忆，从而抑制肿瘤复发。

(3)将元件中的OVA替换为肺癌细胞特异性表达的抗原基因六、综合题(共4题，共12分)31、略

【分析】【分析】

1；动物细胞培养的条件：

（1）无菌；无毒的环境：①消毒、灭菌；②添加一定量的抗生素；③定期更换培养液；以清除代谢废物。

（2）营养物质：糖；氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等；还需加入血清、血浆等天然物质。

（3）温度和PH：36.5℃±0.5℃；适宜的pH：7.2～7.4。

（4）气体环境：95%空气（细胞代谢必需的）和5%的CO2（维持培养液的PH）。

2；单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应；之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。

3；胚胎移植的基本程序主要包括：①对供、受体的选择和处理（选择遗传特性和生产性能优秀的供体；有健康的体质和正常繁殖能力的受体．用激素进行同期发情处理，用促性腺激素对供体母牛做超数排卵处理）；②配种或人工授精；③对胚胎的收集、检查、培养或保存（对胚胎进行质量检查，此时的胚胎应发育到桑椹或胚囊胚阶段）；④对胚胎进行移植；⑤移植后的检查。

4；胚胎移植的生理学基础：

①动物发情排卵后；同种动物的供；受体生殖器官的生理变化是相同的．这就为供体的胚胎移入受体提供了相同的生理环境。

②早期胚胎在一定时间内处于游离状态．这就为胚胎的收集提供了可能。

③受体对移入子宫的外来胚胎不发生免疫排斥反应．这为胚胎在受体的存活提供了可能。

④供体胚胎可与受体子宫建立正常的生理和组织联系；但供体胚胎的遗传特性在孕育过程中不受影响。

【详解】

(1)植物原生质体融合的方法分为两大类——物理法和化学法；物理法包括离心；振动、电激；化学法一般是用聚乙二醇作为诱导剂来诱导细胞融合。动物细胞融合常用