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文档简介
浆膜腔积液检验人体胸腔、腹腔和心包腔统称为浆膜腔。正常情况下,浆膜腔内只有少量液体,起润滑作用。在病理情况下浆膜腔内有大量液体潴留形成浆膜腔积液
胸腔积液
根据部位不同分为
腹腔积液
心包腔积液
渗出液(transudate)根据产生原因及性质分为
漏出液(exudate)
(一)漏出液(transudate)多为双侧性,通过毛细血管滤出,并在组织间隙或浆膜腔内积聚的非炎症性组织液称为漏出液。(二)渗出液(exudate)渗出液多为单侧性炎性积液,病因比较复杂,常见于结核性和细菌性感染、转移性肺癌、乳腺癌、淋巴瘤、卵巢癌、消化液刺激及外伤等。确定浆膜腔积液的性质,对疾病诊断有重要意义。一、标本采集与处理
1.标本采集浆膜腔积液标本由临床医师行浆膜腔穿刺术采集。1管无菌管,供细菌学检验2管
供化学和免疫学检验3管
供一般性状和细胞学检验2.标本转运(1)标本运送:标本采集后应立即在30分钟内送检,以防止细胞变形、出现凝块或细菌溶解破坏,否则应将标本置于4℃冰箱内保存。(2)生物安全:浆膜腔积液内可能含有各种病原生物,应按潜在生物危害物质处理。标本的采集、运送、检查及处理等过程要符合实验室生物安全原则,注意个人生物安全防护。二、一般性状检验
(一)量1.参考区间:正常胸腔、腹腔、心包腔内均有少量液体。(胸腔液<20ml,腹腔液<50ml,心包腔液15~30ml)2.临床意义:病理情况下,浆膜腔内液体增多,其量与病变的部位及严重程度相关,可达数百至上千毫升。(二)颜色:参考区间:正常清亮、淡黄色临床意义:漏出液颜色较浅,渗出液因病因不同而颜色各异。颜色临床意义红色穿刺损伤、恶性肿瘤、内脏损伤、出血性疾病等黄色各种原因引起的黄疸乳白色/灰白色丝虫病、淋巴结结核、化脓性感染、腹膜癌等引起的淋巴管损伤或脓性成分增多绿色铜绿假单胞菌感染、胆汁渗入棕色阿米巴脓肿破溃、陈旧性出血黑色曲霉菌感染(三)透明度
用清晰透明、微浑、浑浊报告。
1.参考区间:清晰透明。
2.临床意义:积液透明度与其所含的细胞、细菌和蛋白质数量等有关。漏出液因其所含细胞、细菌及蛋白质量少而呈清晰透明或微浑液体。渗出液常因含大量细胞、细菌而呈现不同程度混浊。
(四)凝固性漏出液一般不易凝固或出现凝块。渗出液由于含有较多的纤维蛋白原和细菌、细胞破坏后释放的凝血活酶,可有凝块形成,但若其中含有纤溶酶时,可不出现凝固。(五)比重
1.测定方法:比重计法或折射仪法2.临床意义:积液比重的高低取決于所含溶质的数量及种类。漏出液中由于含细胞、蛋白质成分少,所以比重<1.015;渗出液中由于含有较多的细胞和蛋白质,故比重常>1.018。三、化学与免疫学检验(一)黏蛋白定性试验1.检查方法
又称李凡他试验(Rivaltatest)。浆膜上皮细胞在炎症刺激下分泌黏蛋白增加,黏蛋白是一种酸性糖蛋白,等电点为pH3.0~5.0,在稀乙酸溶液中可以产生白色云雾状沉淀,即Rivalta反应。2.参考区间:阴性3.方法学评价黏蛋白定性试验(Rivaltatest)是一种简单的黏蛋白过筛试验,简便、快速,不需特殊设备,临床实验室常用,能粗略的区分漏出液和渗出液。4.临床意义渗出液中因含较多的黏蛋白,所以Rivalta试验呈阳性;漏出液呈阴性,但漏出液经长期重吸收蛋白质浓缩后,亦可呈阳性反应。5.质量保证(1)假阳性:球蛋白不溶于水且可呈云雾状混浊,若积液中球蛋白含量增高,可引起假阳性。(2)试验时,冰乙酸与蒸馏水应充分混匀,且应在黑色背景下观察结果。(3)离心:积液中细胞数目较多时,应将积液离心后取上清液进行试验。(二)其他项目检验1.化学项目检验2.肿瘤标志物和免疫学指标检验(一)化学项目检验浆膜腔积液化学检验主要包括蛋白、糖、脂类及酶的测定等。
浆膜腔积液常用化学检验及临床意义指标检测方法临床意义蛋白质定量双缩脲法漏出液:<25g/L渗出液:>30g/L蛋白电泳乙酸纤维素薄膜电泳漏出液:α、γ球蛋白低于血浆,清蛋白相对较高渗出液:与血浆蛋白接近葡萄糖GOD-POD法、己糖激酶法漏出液:与血糖接近或略低渗出液:明显低于血糖,若积液葡萄糖/血糖<0.5,见于风湿性积液、积脓、恶性积液、结核性积液等胆固醇胆固醇氧化酶法腹膜腔积液胆固醇>1.6mmol/L,为恶性积液;<1.6mmol/L,为肝硬化积液。三酸甘油酯磷酸甘油氧化酶法积液三酸甘油酯>1.26mmol/L,提示乳糜性积液;<0.57mmol/L,排除乳糜性积液
续表
浆膜腔积液常用化学检验及临床意义指标检测方法临床意义乳酸脱氢酶(LDH)速率法渗出液LDH活性:化脓性感染积液>恶性积液>结核性积液腺苷脱氨酶(ADA)比色法、紫外分光光度法ADA活性:结核性>恶性>非炎症性积液,>40U/L应考虑结核性淀粉酶(AMY)EPS法腹膜腔积液AMY活性明显增高:见于胰腺炎、胰腺肿瘤等;胸膜腔积液AMY活性明显增高:见于食管穿孔、胰腺外伤合并胸腔积液溶菌酶(LZM)ELISA法感染性和结核性积液:LZM增高结核性积液:LZM积液/LZM血>1.0恶性积液:LZM积液/LZM血<1.0碱性磷酸酶(ALP)酶速率法浆膜表面癌细胞可释放ALP,故ALP积液/ALP血>1.0
(二)肿瘤标志物和其他免疫学指标检查
浆膜腔积液肿瘤标志物和其他指标的临床意义指标临床意义癌胚抗原(CEA)正常:0μg/L~5μg/L(CLIA)增高:CEA>20μg/L,CEA积液/CEA血清>1.0时,有助于恶性积液的诊断(对腺癌所致积液诊断价值最高)甲胎蛋白(AFP)正常:0μg/L~8.1μg/L(CLIA)增高:腹膜腔积液AFP>300μg/L时,有助于诊断原发性肝癌糖链抗原125(CA125)增高:提示可能卵巢癌转移肿瘤坏死因子(TNF)TNF明显增高:见于结核性积液,也见于风湿病、子宫内膜异位所致腹膜腔积液,但增高程度低C反应蛋白(CRP)<10mg/L为漏出液;>10mg/L为渗出液类风湿因子(RF)积液RF效价>1︰320,且高于血清,可做为诊断类风湿积液的依据四、显微镜检验(一)细胞计数1.检验方法与脑脊液计数方法相同,应计数全部有核细胞(包括间皮细胞),同时计数红细胞数。2.参考区间漏出液<100×106/L;渗出液>500×106/L。3.临床意义
积液中出现少量红细胞,常因穿刺损伤出血所致,因此积液中出现少量的红细胞对渗出液和漏出液的鉴别意义不大;若积液中出现大量的红细胞,则提示为出血性渗出液,常见于恶性肿瘤、结核病等。4.质量保证(1)标本送检应及时,以免积液凝固或细胞破坏而引起的结果不准确。(2)进行细胞计数时,应将积液标本充分混匀,否则影响计数结果。(3)若因穿刺损伤引起血性积液,在做白细胞计数时应进行校正。校正公式为:白细胞/L(校正)=积液白细胞/L-
5.方法学评价与脑脊液细胞计数基本相同。(二)有核细胞染色分类计数1.检验方法将积液离心取沉淀进行涂片染色,油镜下分类。此时若有异常细胞,应另行描述报告。(1)直接分类法:细胞计数的同时,在高倍镜下根据细胞核的形态,将单个核细胞(包括淋巴细胞、单核细胞、间皮细胞)数与多个核细胞数记录下来,最后用百分比表示。若白细胞<150×106/L,可不进行分类计数。(2)染色分类法:若直接分类区分细胞较难时,可将积液离心,取沉淀进行涂片染色,油镜下分类。此时若有异常细胞,应另行描述报告。2.参考区间漏出液中细胞较少,以淋巴细胞和巨噬细胞为主;渗出液根据病因、病情不同而变化。3.临床意义
积液中有核细胞分类及临床意义见下表。有核细胞分类临床意义中性粒细胞增多化脓性渗出液、早期结核性积液、肺梗死、膈下脓肿,细胞总数常>1000×106/L、急性感染浆膜腔积液淋巴细胞增多见于结核、病毒感染、系统性红斑狼疮、梅毒、肿瘤等慢性病变浆细胞增多成熟浆细胞见于非特异性炎症,幼稚浆细胞见于骨髓瘤浆膜浸润间皮细胞增多提示浆膜上皮脱落旺盛,可见于淤血、恶性肿瘤等嗜酸性粒细胞增多超敏反应和寄生虫病所致渗出液;也可见于多次反复穿刺、人工气胸、术后积液、结核性渗出液吸收期、霍奇金淋巴瘤、间皮瘤。其他细胞含铁血黄素细胞可出现于陈旧性血性积液;狼疮细胞可偶见于系统性红斑狼疮积液癌细胞见于恶性肿瘤浆膜腔积液中有核细胞分类及临床意义2025/2/524淋巴细胞2025/2/525中性粒细胞2025/2/526中性粒细胞淋巴细胞间皮细胞间皮细胞:表示浆膜刺激或受损。约15-30μm,圆形、椭圆或不规则形,核在中心或偏位,胞浆多,可有空泡。2025/2/527间皮细胞2025/2/528狼疮细胞:偶见于SLE患者的浆膜液中2025/2/529癌细胞:大量形态不规则、胞体大小不等、核偏大并可见核仁及胞质染色较深的细胞,应高度重视2025/2/530浆细胞:少量出现没有重要临床意义;若在胸水中见到较多的浆细胞,可能是增殖性骨髓瘤。4.质量保证(1)积液进行离心时,速度不能过快,以免影响细胞形态。(2)标本量较少时,用玻片离心沉淀或细胞室沉淀法收集细胞效果更好。(3)涂片固定时间不宜过长,固定温度不宜过高。5.方法学评价直接分类法操作简单,但结果准确性较低;染色分类法虽操作复杂,但结果准确性好,且较容易发现肿瘤细胞。(三)其他有形成分1.寄生虫
对乳糜样积液离心后沉淀物中可检查有无微丝蚴;阿米巴积液可检查有无阿米巴滋养体;包虫病患者积液中可检查有无棘球蚴头节。2.细菌
漏出液不需做细菌检查,如怀疑渗出液,应无菌操作离心沉淀后,取沉淀物涂片做革兰和抗酸染色、显微镜检验。3.结晶胆固醇结晶,积液中出现胆固醇结晶可见于陈旧性胸腔积液、胆固醇性胸膜炎积液,含铁血黄素颗粒可见于血性积液。积液中嗜酸性粒细胞增多时,常伴有Charcot-Leyden结晶。五、浆膜腔积液检验的临床应用浆膜腔积液检验对判断积液的性质和病因具有重要价值。常规理学、化学和细胞学检验,鉴别积液性质的符合率较低;随着特异性化学和免疫学检测指标的增加,提高了浆膜腔积液性质诊断的符合率。1.浆膜腔积液检查项目分级:20世纪90年代以来,浆膜腔积液检查发展到细胞学、生物学、微生物学、免疫学、遗传学等多项指标优化组合检查。除了提供鉴别漏出液与渗出液的依据外,还提供鉴别良性和恶性、结核性和化脓性积液的依据,目前,根据诊断需要,将积液检查项目分为3级,见下表!分级检验项目一级检查颜色、透明度、比重、Rivalta试验、酸碱度、总蛋白、细胞计数及分类、微生物学检验等二级检查CRP、FDP、LD、ADA、AMY、糖蛋白等三级检查
CEA、AFP、肿痛特异性抗原、HCG、蛋白质组分分析等浆膜腔积液检验项目分级2.漏出液和渗出液的鉴别
原因不明的浆膜腔积液,经检查大致可分为渗出液或漏出液。但是,有些浆膜腔积液既有渗出液的特点,又有漏出液的性质,这些积液称为“中间型积液”。因此,判断积液的性质除了依据实验室的检查结果外,还应结合临床其他检查结果,进行综合分析,才能准确诊断。漏出液与渗出液的鉴别见下表。
漏出液
渗出液病因非炎症所致
炎症、肿瘤所致外观淡黄色、浆液性
不定,可为黄色、血色、脓样透明度透明、偶见轻度混浊
多为混浊比密<1.015
>1.018凝固性不凝
常易凝李凡他试验阴性
阳性pH>7.4
<6.8蛋白定量<25g/L
>30g/L积液总蛋白/血清总蛋白<0.5
≥0.5葡萄糖与血糖相近
可变化,常<3.33mmol/LLD<200U/L>200U/L积液/血清LD比值<0.6>0.6有核细胞计数<100×106/L
>500×106/L有核细胞分类淋巴细胞及间皮细胞为主急性炎症以中性粒细胞为主,慢性炎症、结核、肿瘤或风湿以淋巴细胞为主细菌未找到
可找到病原菌清蛋白梯度胸水>12g/L,腹水>11g/L胸水<12g/L,腹水<11g/L3.良性与恶性浆膜腔积液的鉴别
浆膜腔积液检查对良性或恶性浆膜腔积液鉴别有一定价值,尤其是积液中的脱落细胞检查和染色体检查对鉴别良性与恶性浆膜腔积液非常重要,主要鉴别指标见下表。
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