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PAGEPAGE9专题综合评估(五)本试卷分第Ⅰ卷(选择题)和第Ⅱ卷(非选择题)两部分。满分100分,考试时间60分钟。第Ⅰ卷(选择题,共50分)一、选择题(本大题共25个小题,每小题2分,共50分)1.在分别蛋白质过程中,运用缓冲液的作用是(B)A.维持溶液浓度不变B.维持溶液酸碱度不变C.催化蛋白质分别过程顺当完成D.无实际意义解析:分别蛋白质要用缓冲液,缘由是缓冲液在肯定范围内能抵制外界酸碱对溶液pH的影响,维持pH基本不变。2.洗涤红细胞时,离心所采纳的方法是(B)A.低速长时间离心B.低速短时间离心C.高速长时间离心D.高速短时间离心解析:高速或长时间离心,会导致白细胞和淋巴细胞一同沉淀,得不到纯净的红细胞,既而影响后面血红蛋白的提取纯度。3.在装填凝胶柱时,不得有气泡存在的缘由是(A)A.气泡会搅乱洗脱液中蛋白质的洗脱次序,降低分别效果B.气泡阻碍蛋白质的运动C.气泡能与蛋白质发生化学反应D.气泡会在装填凝胶的时候,使凝胶不紧密解析:在装填凝胶柱时,不得有气泡存在的缘由是气泡会搅乱洗脱液中蛋白质的洗脱次序,降低分别效果。4.下列各项中,不是电泳使样品中各种分子分别的缘由的是(D)A.带电性质差异 B.分子的大小C.分子的形态 D.分子的变性温度解析:电泳是指带电粒子在电场的作用下发生迁移的过程。带电性质不同、分子的大小和形态不同都会影响带电粒子在电场中的迁移速度,而迁移速度与分子变性温度无关。5.在SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳过程中,不同蛋白质的迁移率完全取决于(B)A.电荷的多少B.分子的大小C.肽链的多少D.分子形态的差异解析:SDS能与蛋白质形成蛋白质—SDS复合物,SDS所带负电荷的量大大超过了蛋白质分子原有的电荷量,因而掩盖了不同种蛋白质间的电荷差别,使电泳迁移率完全取决于分子的大小。6.关于DNA聚合酶催化合成DNA子链的说法中,正确的是(A)A.以DNA为模板,使DNA子链从5′端延长到3′端的一种酶B.TaqDNA聚合酶必需在每次高温变性处理后再添加C.DNA聚合酶能特异性地复制整个DNA的全部序列D.TaqDNA聚合酶是从深海生态系统中发觉的解析:在PCR扩增DNA分子的过程中,各种组分要一次性加入;DNA聚合酶只能特异性地催化DNA特异片段的复制;TaqDNA聚合酶是从美国黄石国家公园的一个热泉中发觉的。7.PCR一般要经过三十多次循环,从其次轮循环起先,上一次循环的产物也作为模板参加反应,由引物Ⅰ延长而成的DNA单链做模板时将(D)A.仍与引物Ⅰ结合进行DNA子链的延长B.无需与引物结合,在酶的作用下从头合成子链C.同时与引物Ⅰ和引物Ⅱ结合进行子链延长D.与引物Ⅱ结合进行DNA子链的延长解析:PCR扩增中,从其次轮循环起先由引物Ⅰ延长而成的DNA单链做模板时将与引物Ⅱ结合进行DNA子链的延长;由引物Ⅱ延长而成的DNA单链做模板时将与引物Ⅰ结合进行DNA子链的延长。8.在DNA粗提取与鉴定试验中,有两次DNA的沉淀析出:①DNA在0.14mol/L氯化钠溶液中的溶解度最低;②DNA在冷却的体积分数为95%的酒精中能沉淀析出。其依据的原理是(C)A.两次都是①B.两次都是②C.第一次是①,其次次是②D.第一次是②,其次次是①解析:第一次沉淀析出,利用的是原理①,因为在这种浓度的NaCl溶液中,DNA的溶解度最低,而蛋白质的溶解度增加,所以通过过滤能将DNA分别开,以除去蛋白质。后一次沉淀析出,利用的是原理②,即DNA不溶于冷酒精,而蛋白质能溶于冷酒精。9.PCR反应的最大特点是具有较大扩增实力与极高的灵敏性,但令人头痛的问题是易污染,极其微量的污染即可造成假阳性的产生。防止污染的方法不包括(C)A.将样品的处理、配制PCR反应液、PCR循环扩增及PCR产物的鉴定等步骤分区或分室进行B.吸样枪吸样要慢,吸样时尽量一次性完成,枪头小套、小离心管应一次性运用,以免交叉污染C.全部的PCR试剂都应放置于大瓶分装,以削减重复加样次数,避开污染机会D.PCR试剂、PCR反应液应与样品及PCR产物分开保存,不应放于同一冰盒或同一冰箱解析:全部的PCR试剂都应放置于小瓶分装,一次性用完,避开因多次运用造成污染。10.DNA的粗提取和鉴定试验中,提取鸡血细胞的核物质和析出含DNA的黏稠物这两步中都用到了蒸馏水,其作用分别是(C)A.防止鸡血细胞失水皱缩和稀释NaCl溶液至0.14mol/LB.防止鸡血细胞失水皱缩和溶解DNAC.使鸡血细胞吸水涨破和稀释NaCl溶液至0.14mol/LD.使鸡血细胞吸水涨破和溶解DNA解析:鸡血细胞在清水中会吸水涨破,从而释放出核物质。DNA在NaCl溶液中的溶解度,是随着NaCl溶液浓度的变更而变更的,在NaCl溶液浓度为0.14mol/L时,其溶解度最小,有利于DNA的析出。11.下列关于凝胶色谱法的说法正确的是(D)A.是依据蛋白质对其他分子的亲和力来分别蛋白质的B.凝胶是一些微小的无孔的球体,小球体都是由多糖类化合物构成的C.相对分子质量较小的蛋白质的路程较长,但移动速度较快D.相对分子质量较大的蛋白质只能在凝胶外部移动,路程较短,移动速度较快解析:凝胶色谱法是依据相对分子质量的大小分别蛋白质的有效方法。所用的凝胶事实上是一些微小的多孔球体,这些小球体大多数是由多糖类化合物构成的,在小球体内部有很多贯穿的通道,当相对分子质量不同的蛋白质通过凝胶时,相对分子质量较小的蛋白质简单进入凝胶内部的通道,路程较长,移动速度较慢;而相对分子质量较大的蛋白质无法进入凝胶内部的通道,只能在凝胶外部移动,路程较短,移动速度较快。相对分子质量不同的蛋白质分子因此得以分别。12.在血红蛋白的整个提取过程中,不断用磷酸缓冲液处理的目的是(D)A.防止血红蛋白被O2氧化B.血红蛋白是一种两性物质,须要酸中和C.磷酸缓冲液会加速血红蛋白的提取过程D.让血红蛋白处在稳定的pH范围内,维持其结构和功能解析:利用磷酸缓冲液模拟细胞内的pH环境,保证血红蛋白的正常结构和功能,便于分别视察(红色)和科学探讨(活性)。13.下列有关PCR技术的叙述,正确的是(B)A.每一轮回的模板DNA都来自反应前加入的组分B.每一轮回的引物都来自反应前加入的组分C.DNA聚合酶在反应中不断损耗,加入的组分中应含有大量的DNA聚合酶D.反应中须要肯定量的DNA连接酶和限制性核酸内切酶解析:在进行PCR时,作为模板的DNA只需加入少量,因为每一轮回的产物可作为下一轮回的模板,A错误;PCR一般要经验30多次循环,引物的须要量较大,这些引物都是在反应前加入的,B正确;PCR反应中所用DNA聚合酶为耐高温的DNA聚合酶,此酶可反复运用,故加入的组分中只需含肯定量的DNA聚合酶即可,C错误;PCR反应中不须要DNA连接酶和限制性核酸内切酶,D错误。14.利用PCR技术将某DNA分子扩增n代,则须要(A)A.测定DNA分子两端的脱氧核苷酸序列,以便设计引物对B.2n对引物参加子代DNA分子的合成C.向反应体系中加入解旋酶、DNA聚合酶等D.保持反应体系温度恒定,确保扩增的正常进行解析:利用PCR技术扩增DNA时须要引物的参加,因此须要测定DNA分子两端的脱氧核苷酸序列,以便设计引物对,A正确;DNA分子的复制方式为半保留复制,因此2n-1对引物参加子代DNA分子的合成,B错误;PCR过程中双链DNA解开不须要解旋酶,且PCR扩增DNA分子是在较高温度下进行的,因此须要耐高温的DNA聚合酶,C错误;PCR扩增的过程为高温变性、低温复性、中温延长,可见反应体系温度并不恒定,D错误。15.在PCR试验操作过程中,下列说法不正确的是(A)A.在微量离心管中添加各种试剂时,只需一个枪头B.离心管的盖子肯定要盖严,防止液体外溢C.用手轻弹离心管侧壁的目的是使反应液充分混合D.离心的目的是使反应液集中在离心管底部,提高反应效果解析:在微量离心管中添加各种试剂时,每吸取一种试剂后,移液器上的枪头必需更换,以确保试验的精确性。16.对在凝胶柱上加入样品和洗脱的操作不正确的是(C)A.加样前要使柱内凝胶面上的缓冲液下降到与凝胶面平齐B.让吸管管口沿管壁环绕移动贴壁加样至色谱柱顶端,不要破坏凝胶面C.打开下端出口,待样品完全进入凝胶层后,干脆连接缓冲液洗脱瓶起先洗脱D.待红色的蛋白质接近色谱柱底端时,每5mL收集一管,连续收集流出液解析:样品完全进入凝胶层后,加入磷酸缓冲液到适当高度,再连接缓冲液洗脱瓶起先洗脱。17.凝胶色谱法洗脱时加入磷酸缓冲液,下列说法不正确的是(A)A.在肯定范围内,能对抗外来大量强酸、强碱对pH的影响,维持pH基本不变B.选用磷酸缓冲液(pH=7.0)可用Na2HPO4和NaH2PO4按相应配比配制C.缓冲溶液通常是由1~2种化合物(缓冲剂)溶解于水中制得,调整缓冲剂的配比就可制得不同pH范围的缓冲液D.缓冲溶液广泛应用于生化试验、微生物培育、组织切片和细菌的染色等的探讨解析:缓冲液的调整实力是有限的。18.下列关于“DNA的粗提取与鉴定”试验叙述,错误的是(C)A.酵母和菜花均可作为提取DNA的材料B.DNA既溶于2mol/LNaCl溶液也溶于蒸馏水C.向鸡血细胞液中加蒸馏水搅拌,可见玻璃棒上有白色絮状物D.DNA溶液加入二苯胺试剂沸水浴加热,冷却后变蓝解析:本题考查DNA的粗提取和鉴定试验,意在考查考生对试验原理的理解和对试验操作要求的驾驭状况。原则上含DNA的生物材料都可用来提取DNA,只是选用DNA含量高的生物组织,胜利的可能性更大;DNA在2mol/LNaCl溶液和蒸馏水中溶解度都较大;向鸡血细胞液中加蒸馏水搅拌,鸡血细胞会吸水裂开,但在蒸馏水中不会析出DNA;DNA溶液加入二苯胺试剂后需沸水浴加热,待冷却后溶液变蓝。19.下列有关缓冲溶液的说法,不正确的是(A)A.缓冲溶液能够抵制外界任何酸和碱对溶液pH的影响,维持pH基本不变B.缓冲溶液通常由1~2种缓冲剂溶解于水中配制而成C.调整缓冲剂的运用比例就可以制得在不同pH范围内运用的缓冲溶液D.生物体内进行的各种生物化学反应都是在肯定的pH下进行的解析:缓冲溶液通常由1~2种缓冲剂溶解于水中配制而成。调整缓冲剂的运用比例就可以制得在不同pH范围内运用的缓冲溶液。在肯定范围内,缓冲溶液能够抵制外界的酸和碱对溶液pH的影响,维持pH基本不变,超过肯定范围,缓冲溶液就起不到这样的作用了。20.下列叙述错误的是(C)A.在肯定范围内,缓冲溶液能够抵制外界的酸和碱对溶液pH的影响,维持pH基本不变B.电泳是指带电粒子在电场的作用下发生迁移的过程C.洗涤红细胞时,用五倍体积的蒸馏水充分冲洗D.缓冲溶液通常由1~2种缓冲剂溶解于水中配制而成解析:明确缓冲液的作用是做该类题目的关键。洗涤红细胞时,应是加入五倍体积的生理盐水,以维持红细胞的正常形态和结构。21.如凝胶色谱柱取长为40cm,内径为1.6cm的玻璃管。下列有关说法不正确的是(B)A.凝胶色谱柱直径的大小不影响分别的效果,但直径过大造成洗脱液体积增大,样品的稀释度过大B.凝胶色谱柱过超群过1m,不影响分别的效果,但耗用洗脱液过多,样品的稀释度过大C.凝胶色谱柱过短,则影响混合物的分别度D.以上说法有两种正确解析:凝胶色谱柱直径大小不影响分别的效果,但是直径过大会造成洗脱液体积增大,样品的稀释度过大,因此应选择直径不超过2cm的色谱柱。凝胶色谱柱的高度与分别度有关,一般不超过1m,过短也会影响混合物的分别。22.下列有关提取和分别血红蛋白的试验叙述错误的是(A)A.该试验的材料必需选用鸡血B.通过透析法可以去除样品中相对分子质量较小的杂质,此为样品的粗提取C.凝胶色谱法是利用蛋白质的相对分子质量的大小分别蛋白质D.电泳法是利用各种分子带电性质的差异及分子的大小和形态不同进行分别解析:该试验的材料不能选用鸡血,而应用哺乳动物成熟的红细胞,因为后者没有细胞核和各种细胞器,有利于得到较纯净的血红蛋白;透析袋可允许小分子自由进出,而大分子则保留在袋内,因此通过透析法可以去除样品中相对分子质量较小的杂质,此为样品的粗提取;凝胶色谱法是利用蛋白质的相对分子质量的大小分别蛋白质;电泳法是利用各种分子带电性质的差异及分子的大小和形态不同进行分别的。23.关于电泳的说法不正确的是(C)A.电泳是指带电粒子在电场的作用下发生迁移的过程B.带电分子会向着与其所带电荷相反的电极移动C.蛋白质在聚丙烯酰胺凝胶中的迁移率取决于它所带净电荷的多少D.用SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳,蛋白质的电泳迁移率完全取决于分子的大小解析:蛋白质在聚丙烯酰胺凝胶中的迁移率取决于它所带净电荷的多少以及分子的大小等因素。SDS能与各种蛋白质形成蛋白质—SDS复合物,SDS所带负电荷的量大大超过了蛋白质分子原有的电荷量,因而掩盖了不同种蛋白质间的电荷差异,使电泳迁移率完全取决于分子的大小。24.关于DNA的粗提取与鉴定的试验中,依据的原理不包括(C)A.DNA在NaCl溶液中的溶解度,随NaCl浓度的不同而不同B.利用DNA不溶于酒精的性质,可除去细胞中溶于酒精的物质而得到较纯的DNAC.DNA是大分子有机物,不溶于水而溶于某些有机溶剂D.在沸水中,DNA遇二苯胺会出现蓝色反应解析:DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同,利用这一特点选择适当的盐浓度就能使DNA充分溶解,而使杂质沉淀,或者相反,以达到分别目的;DNA不溶于酒精溶液,但是某些蛋白质则可溶于其中;在沸水浴的条件下,DNA被二苯胺染成蓝色。25.下列关于凝胶色谱法的原理及操作不正确的是(C)A.是利用凝胶把分子大小不同的物质分别开的一种方法B.在洗脱过程中,大分子不能进入凝胶内部而最先流出,而小分子可以进入凝胶内部而流速缓慢,以致最终流出C.凝胶内部有很微细的多孔网状结构,其孔隙大小与被分别的物质分子的大小无相应关系D.一般状况下,凝胶对要分别的物质没有吸附作用,因此全部要分别的物质都应当被洗脱出来解析:凝胶色谱法是依据相对分子质量大小分别蛋白质的有效方法,凝胶是由多糖类化合物构成的,其内部有很微细的多孔网状结构,小分子蛋白质可以进入凝胶内部,路程较长,移动速度慢;而相对分子质量较大的蛋白质无法进入凝胶内部,路程较短,移动速度快,因此在洗脱过程中分别。选用不同种凝胶,其网状结构不同,孔隙大小不同,可分别的分子大小不同,二者是相关的,故C项不正确。第Ⅱ卷(非选择题,共50分)二、非选择题(本大题共5个题,共50分)26.(10分)“DNA的粗提取和物理性状视察”试验装置如下图,分析回答:(1)试验材料选用鸡血细胞液,而不用鸡全血,主要缘由是鸡血细胞液中含有较高含量的DNA。(2)在图A所示的试验步骤中加蒸馏水的目的是加速细胞膜裂开,通过图B所示的步骤取得滤液,再在滤液中加入2mol/LNaCl溶液的目的是使滤液中的DNA溶于浓盐溶液;图中C所示试验步骤中加蒸馏水的目的是使DNA析出。(3)为鉴定试验所得丝状物的主要成分是DNA,可滴加甲基绿溶液,结果丝状物被染成绿色。解析:解答本题,主要区分两次蒸馏水的作用:第一次运用是使鸡血细胞吸水涨破,DNA从细胞中出来进入滤液;其次次运用是使溶解于2mol/L的NaCl溶液中的DNA析出与杂质分别。本题还涉及DNA的鉴定,鉴定结果是丝状物被染成绿色,则运用的指示剂为甲基绿,且无水浴加热这一条件。27.(10分)有4瓶失去标签的无色透亮液体。已知各装有:大肠杆菌超标的自来水,丙种球蛋白溶液(一种抗体),溶解有DNA分子的2mol/L的NaCl溶液,葡萄糖溶液。(1)请依据供应的鉴定方法的第一步,简要写出用相应物质进行鉴定的其余步骤和结果。第一步:各取4种液体少许分别倒入4个试管中,缓慢加入蒸馏水并用玻璃棒搅拌,则出现丝状物的溶液,为溶解有DNA分子的2_mol/L的NaCl溶液。其次步:向其余3支试管中加入伊红—美蓝试剂,呈现深紫色的为大肠杆菌超标的自来水。第三步:将其余2种溶液各取少许分别倒入2支试管中,加入双缩脲试剂,呈现紫色反应的为丙种球蛋白溶液。最终一瓶为葡萄糖溶液。(2)除上述鉴定DNA的方法外,还可以用哪些方法进行鉴定?加入二苯胺试剂并在沸水浴的条件下变为蓝色或加入冷却的酒精溶液,搅拌出现丝状物。28.(10分)PCR技术成为分子生物学试验的一种常规手段,在很短的时间内,可以将DNA扩增几百万倍甚至几十亿倍,使分子生物学试验所需的遗传物质不再受限于活的生物体。(1)加热至94°C的目的是使DNA样品的氢键断裂,这一过程在生物体细胞内是通过解旋酶的作用来完成的。(2)新合成的DNA分子与模板DNA分子完全相同的缘由是DNA分子中独特的双螺旋结构和复制过程中严格遵循碱基互补配对原则。(3)若要检测一个人是否感染了艾滋病病毒,你认为可以用PCR扩增血液中的D。A.白细胞DNA B.病毒蛋白质C.血浆抗体 D.病毒核酸29.(10分)下图表示以鸡血为试验材料进行DNA的粗提取与鉴定的操作程序,请分析回答问题。(1)步骤一中,向鸡血细胞液中加入蒸馏水并搅拌,可使鸡血细胞裂开。(2)步骤二:过滤后收集含有DNA的滤液。(3)步骤三、四的操作原理是DNA在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同,通过限制NaCl溶液的浓度去除杂质,步骤四通过向溶液中加入蒸馏水调整NaCl溶液物质的量浓度为0.14mol/L时,DNA将会析出,过滤去除溶液中的杂质。(4)步骤七:向步骤六过滤后的滤液中,加入等体积的冷却的体积分数为95%的酒精,静置2~3min,溶液中会出现白色丝状物,这就是粗提取的DNA。(5)步骤八:DNA遇二苯胺试剂,沸水浴5min,冷却后,溶液呈蓝色。解析:本题考查DNA的粗提取与鉴定的相关学问。第一步加入蒸馏水的目的是使红细胞涨破,释放出核物质;其次步收集含有核物质的滤液;由于DNA在不同浓度的NaCl溶液中的溶解度不同,所以通过限制NaCl溶液的浓度可以分别溶解DNA和析出DNA,并且对DNA进行提纯;第四步加入蒸馏水的目的是渐渐稀释NaCl溶液,使其物质的量浓度达到0.14mol/L,这时DNA在NaCl溶液中溶解度最低,可以析出DNA。DN
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