2025年鲁人新版选择性必修3生物上册阶段测试试卷

…………○…………内…………○…………装…………○…………内…………○…………装…………○…………订…………○…………线…………○…………※※请※※不※※要※※在※※装※※订※※线※※内※※答※※题※※…………○…………外…………○…………装…………○…………订…………○…………线…………○…………第=page22页，总=sectionpages22页第=page11页，总=sectionpages11页2025年鲁人新版选择性必修3生物上册阶段测试试卷571考试试卷考试范围：全部知识点；考试时间：120分钟学校：______姓名：______班级：______考号：______总分栏题号一二三四五总分得分评卷人得分一、选择题(共8题，共16分)1、美国科学家在研究生长在墨西哥某地的野玉米后发现；这种玉米含有包括苏云金芽孢杆菌（一种产生抗虫毒蛋白的细菌）基因在内的转基因作物的基因，由此可见（）

①转基因作物的基因可传播到野生植物中。

②转基因作物可对天然植物的基因多样性构成威胁。

③为防止基因污染；应当禁止转基因作物的研究。

④自然杂交过程实质上是一个长期的转基因过程，两者没有区别A.①④B.②③C.①②D.①③2、在筛选纤维素分解菌的培养基中加入刚果红染料；研究者观察到几个有透明圈的菌落。据图分析正确的是（）

A.透明圈内的刚果红染料已被分解B.能产生淀粉酶的微生物菌落周围可形成模糊的透明圈C.菌落②中的菌株降解纤维素能力最强D.图中培养基可用牛肉膏、蛋白胨配制3、将特定药物与单克隆抗体相结合制成的“生物导弹”，能够用于杀死人类某些癌细胞，其过程如图所示。下列有关叙述错误的是（）

A.经①形成的杂交瘤细胞都能无限增殖并产生特定抗体B.①过程的基本原理和植物原生质体融合的基本原理相同C.②过程需要筛选并克隆单个杂交瘤细胞D.抗体的靶向作用使③过程具有高度特异性4、植株甲是自花传粉的二倍体植物，基因型为AaBb；这两对基因独立遗传。下图为利用植株甲培育植株A；B、C、D的过程。将植株甲自交所结的种子种下，可得到植株C。下列叙述正确的是。

A.利用植株甲的花粉粒获得植物A的育种方法称为单倍体育种B.植株A经秋水仙素处理可获得染色体数加倍的纯合四倍体植株BC.可选用植株B的根尖作材料观察细胞分裂中期染色体数目加倍D.若不考虑突变和交叉互换，植株C与植株D基因型相同的概率是1/45、两种生物之间存在着天然的生殖隔离，用传统的有性杂交的方法很难得到杂种后代。经过长期的实验，科学家采用体细胞杂交的方法得到了两种植物的杂种植物，如图是植物体细胞杂交方法的流程图。下列有关说法错误的是（）

A.图中由B细胞获得B原生质体需要使用纤维素酶和果胶酶去除植物细胞的细胞壁B.杂交过程的关键是原生质体的融合，可以使用离心法、聚乙二醇融合法等方法来诱导C.若提供B细胞的植株都为二倍体，则图中杂种植株也为二倍体且是可育的D.图中培养愈伤组织发育为杂种植株的培养基中，需要加入蔗糖和一些植物激素等6、1958年，美国科学家斯图尔德应用植物组织培养技术，将二倍体胡萝卜韧皮部的一些细胞进行离体培养，最终发育成完整的新植株（如图）。关于这一科学事实，下列叙述中错误的是（）

①实验需要无菌和人工控制的条件②培养基中需添加植物激素、无机盐、糖类等物质③取胡萝卜的其他部分（如茎、叶、花）不能培养成小植株④图中培养瓶1和试管2中的成分相同A.①②B.③④C.②③D.①④7、下列有关质粒的叙述，正确的是（）A.质粒是广泛存在于细菌细胞中的一种颗粒状细胞器B.质粒是真核细胞细胞核或原核细胞拟核DNA之外，能自主复制的小型环状双链DNA分子C.质粒只有在侵入宿主细胞后，才能在宿主细胞内复制D.基因工程中常用的载体除了质粒外，还有核DN动植物病毒以及噬菌体8、用于动物细胞培养的细胞大都取自胚胎或出生不久的幼龄动物的器官或组织，其主要原因是这样的组织或细胞（）A.容易产生各种变异B.具有更高的全能性C.取材十分方便D.分裂增殖的能力强评卷人得分二、多选题(共5题，共10分)9、驱蚊草含有香茅醛，能散发出一种特殊的柠檬型香气，从而达到驱蚊且对人体无害的效果。驱蚊草是把天竺葵的原生质体和香茅草的原生质体进行诱导融合培育而成的。下列关于驱蚊草培育的叙述，错误的是（）A.驱蚊草的培育属于细胞工程育种，优点是克服了远缘杂交不亲和的障碍B.驱蚊草培育过程要用到纤维素酶、果胶酶、PEG等试剂或电刺激等方法C.驱蚊草培育过程不同于植物组织培养，无细胞脱分化和再分化的过程D.驱蚊草培育利用了植物体细胞杂交技术，育种原理是基因突变10、下列关于土壤中纤维素分解菌的分离与计数，叙述正确的是（）A.可从富含腐殖质的林下土壤中筛选产纤维素酶菌B.培养基中应含大量的葡萄糖或蔗糖提供生长营养C.培养微生物的试剂和器具都要进行高压蒸汽灭菌D.菌种分离和菌落计数都可以使用固体培养基11、免疫PCR是对微量抗原的一种检测方法。下图是利用该技术检测牛乳中微量抗生素的流程图：首先将抗体1固定在微板上，冲洗后加入待检的牛乳，再加入DNA标记的抗体2，进行PCR扩增，最后进行电泳检测，相关叙述正确的是（）

A.图示中的DNA可以是非牛乳基因中的DNA片段B.如果第三次冲洗不充分则有可能出现假阳性现象C.电泳检测结果只能判断阳性与否，无法判断牛乳中抗生素的含量D.微量抗原抗体反应通过PCR技术间接扩增放大，从而达到可检测的水平12、下列关于试管婴儿和克隆猴的叙述，错误的是（）A.受精过程中，透明带和卵细胞膜的反应保证了受精卵染色体数目的正常B.克隆猴的性状表现与细胞核供体的一模一样，体现了动物细胞核具有全能性C.试管婴儿的生殖方式属于无性生殖，克隆猴的生殖方式属于有性生殖D.“设计试管婴儿”与“试管婴儿”在操作上唯一的区别是前者需要进行遗传学诊断13、下列关于微生物发酵的叙述，错误的是（）A.制备培养基过程中，需要在灭菌后进行pH的调节B.制作果酒时适当加大接种量可以提高发酵速率，抑制杂菌生长C.现代发酵工程选育出性状优良的菌种后即可进行发酵罐内的发酵D.醋酸菌能将乙醇变成乙醛而后变为乙酸，故夏天开瓶后的红酒容易变酸评卷人得分三、填空题(共7题，共14分)14、DNA连接酶与DNA聚合酶作用的异同:

DNA聚合酶只能将______加到已有的核苷酸片段的末端，形成磷酸二酯键。DNA连接酶是连接_____的末端，形成磷酸二酯键。15、最常用的载体是______，它是一种裸露的、结构简单的、独立于细菌染色体之外，并具有______能力的_____。16、______——“分子手术刀”17、通过____________的方式，来控制NaCL溶液的浓度，使DNA在盐溶液中溶解或析出。18、胚胎工程。

胚胎工程指对动物早期胚胎或配子所进行的多种显微操作和处理技术，由______、______、______、胚胎冷冻保存技术和______技术等组成的现代生物技术。19、蛋白质工程是指以______作为基础，通过______，对现有蛋白质进行_____，或制造一种______，以满足人类的生产和生活的需求。（基因工程在原则上只能生产______的蛋白质）

20、植物体细胞杂交的意义：_____。评卷人得分四、实验题(共4题，共28分)21、在酿酒；酿醋、制作腐乳、酸奶过程中都要涉及各种微生物；请回答下列问题。

（1）酿酒利用的微生物是酵母菌，制作过程中，酵母菌先在有氧条件下大量繁殖，然后再进行酒精发酵，检测酒精的原理是：橙色的重铬酸钾溶液，在酸性条件下与酒精发生化学反应，变成________________色。如果葡萄酒酿造过程中葡萄汁中含有醋酸菌，在酒精发酵旺盛时，醋酸菌不能将葡萄汁中的糖发酵为醋酸，原因是_______________________________________________________。

（2）醋酸发酵时温度一般应控制为_______________。

（3）在臭豆腐的制备过程中，常用的微生物主要是________________，在此过程中，豆腐相当于微生物生长的______________________。

（4）民间制作腐乳时，豆腐块上生长的微生物，在制作时一般要加盐、酒，若加入的酒精浓度（含量）过低，会出现什么现象？__________________________________。

（5）在腌制泡菜的过程中，起主要作用的微生物是乳酸菌，用水封坛的作用是__________________________，欲检测泡菜在腌制过程中产生的亚硝酸盐含量，使用检测试剂后颜色变为_____________。22、某研究者用抗原（A）分别免疫3只同种小鼠（X；Y和Z）；每只小鼠免疫5次，每次免疫一周后测定各小鼠血清抗体的效价（能检测出抗原抗体反应的血清最大稀释倍数），结果如下图所示。

若要制备杂交瘤细胞；需取免疫后小鼠的B淋巴细胞（染色体数目为40条），并将该细胞与体外培养的小鼠骨髓瘤细胞（染色体数目为60条）按一定比例加入试管中，再加入聚乙二醇诱导细胞融合，经筛选培养及抗体检测，得到不断分泌抗A抗体的杂交瘤细胞。

回答下列问题：

（1）制备融合所需的B淋巴细胞时，所用免疫小鼠的血清抗体效价需达到16000以上，则小鼠最少需要经过___________次免疫后才能有符合要求的。达到要求的X、Y、Z这3只免疫小鼠中，最适合用于制备B淋巴细胞的是___________小鼠，理由是______________。

（2）细胞融合实验完成后，融合体系中除含有未融合的细胞和杂交廇细胞外，可能还有________，体系中出现多种类型细胞的原因是________________。

（3）杂交瘤细胞中有______个细胞核，染色体数目最多是_________条。

（4）未融合的B淋巴细胞经过多次传代培养后都不能存活，原因是_____________________。23、苹果树腐烂病是由黑腐皮壳菌引起的；是限制苹果产量的重要因素之一。生产上主要以化学药剂防治该病。为开发生物防治途径，科研人员拟从土壤中分离筛选出能抑制黑腐皮壳菌生长的枯草芽孢杆菌，实验流程图如图1：

（1）①中木糖和硝酸钾的作用分别是______________。

（2）②→③中梯度稀释的目的是_____________________________________________。

（3）制作的平板需要倒置的目的除了防止培养基中水分过快蒸发之外，还有______________。

（4）现有经纯化后获得的4个枯草芽孢杆菌品系，为探究哪个品系对黑腐皮壳菌的抑制效果更好，科研人员在如图2平板中的A处接种黑腐皮壳菌，在距离A处等距离的B1～B4处分别接种等量的4个枯草芽孢杆菌品系，在适宜条件下培养3﹣5天后，通过观察_________________________筛选出抑菌更好的枯草芽孢杆菌菌株。

图2

（5）在利用稀释涂布平板法统计土样中活菌的数目时，为了保证结果准确，一般选择菌落数在______________的平板进行计数。该方法所得结果往往比实际细菌的数目要少，原因是__________________________________。24、研究者改造与肠道共生的大肠杆菌；口服该工程菌后激活机体特异性免疫，实现肿瘤的预防和治疗。

(1)部分肠道细菌能够分泌外膜囊泡（OMV）；如图1．OMV能穿越肠道上皮屏障活化肠黏膜内丰富的免疫细胞。细菌溶素A（ClyA）是外膜囊泡上含量较高的特异蛋白。

研究者利用含图2所示元件的表达载体转化大肠杆菌制备工程菌，ClyA基因的作用是_____；Fc表达产物能够与树突状细胞表面的特异性受体结合，提高树突状细胞_____OMV的能力。

(2)为研究上述工程菌在人为可控条件下引发特异性免疫反应的效果，研究者用健康小鼠进行如下实验：。组别第0、3、8天口服工程菌每次服用工程菌12小时后，饮用含阿拉伯糖的水结果检测第1组空载体+第12天，每组随机取5只小鼠等量的脾脏细胞与黑色素瘤细胞共培养，检测杀伤率，结果如图3．第2组ClyA-Fc+第3组ClyA-OVA+第4组第5组

注：“+”；“-”代表是否饮用；

口服工程菌12小时后其在肠道内存在数量较多。

①第4、5组的操作是_____。图3结果说明工程菌在人为可控条件下引发特异性免疫反应，理由是_____。

②为进一步验证上述结论，研究者进行如下实验：先加入_____（填选项前字母）保温后漂洗，再加入_____（填选项前字母）保温后漂洗，检测荧光细胞的数目，若第5组_____为最大值；则上述结论成立。

A．带有红色荧光标记的OVA抗原肽复合物。

B．带有绿色荧光标记的细胞毒性T细胞特异性抗体。

C．第1-5组小鼠脾脏细胞。

③肿瘤患者术后极易复发，研究者重复上表实验，并在第3次口服工程菌后第50天给小鼠注射黑色素瘤细胞。目的是_____。

(3)该工程菌的研发为不同肿瘤的精准治疗和预防提供了可能。依据本研究，设计针对肺癌治疗的工程菌表达载体元件：_____。评卷人得分五、综合题(共4题，共8分)25、醪糟是以糯米为主要原料；利用微生物发酵制作的民间传统食品。在醪糟发酵过程中起主要作用的是甜酒曲中的好氧霉菌；酵母菌和乳酸菌。醪糟的生产流程如下：糯米的选择→淘洗→浸泡→蒸饭→冷却→拌甜酒曲→发酵→煮沸→保存。回答下列问题：

（1）霉菌产生的______能将糯米中的淀粉分解为葡萄糖等，使醪糟具有甜味；酵母菌使醪糟产生酒味的化学反应式是______；乳酸菌是______（填“真核”或“原核”）生物；其发酵产物是醪糟酸味的主要来源。

（2）拌入甜酒曲之前，需将蒸熟的糯米进行冷却，目的是______。发酵前期应保证氧气的供应，使______大量繁殖；后期应减少空气进入或隔绝空气，有利于______。

（3）发酵好的醪糟煮沸后，可转移到灭菌玻璃瓶中密封保存，密封之前应对瓶口进行______灭菌；防止瓶口被污染。

（4）研究发现，通过控制发酵温度可以调节醪糟口味，原因是温度既影响酶的活性也影响______。26、细胞的全能性是指细胞经过分裂和分化后，仍具有产生完整有机体或_____的潜能和特性。27、Ⅰ．下图表示通过核移植等技术获得某种克隆哺乳动物（二倍体）的流程。

回答下列问题：

（1）过程①表示去除细胞核，该过程一般要在卵母细胞培养至______期再进行，去核时常采用_______的方法。

（2）经过多次传代后，供体细胞中遗传物质的稳定性会降低，因此，选材时必须关注传代次数，通常选择传代_______以内的细胞。

（3）②是胚胎移植，胚胎移植的实质是早期胚胎在相同生理环境条件下_____________的转移。

（4）培育克隆人和克隆动物的原理基本相同。中国政府对克隆人的态度是禁止生殖性克隆人，不反对________________________。

Ⅱ．我国珠江三角洲地区；为充分利用土地，创造了一种挖深鱼塘；垫高基田、塘基植桑、塘内养鱼的高效人工生态系统——桑基鱼塘，如图所示。据图回答有关问题：

（1）生态工程遵循的基本原理有_____________________（至少答出两点）；整体性原理和系统学与工程学原理等。

（2）该生态工程能将蚕沙、蔗叶、滤泥等变成鱼类的饵料，塘泥中的微生物能将有机物转化成无机物，为甘蔗、桑树的光合作用提供无机营养，这一过程不但实现了废弃物的________；而且体现了生态经济的“循环经济”原则。

（3）桑基鱼塘的生产方式与改造前的传统耕作方式比较，主要的优点有________________（至少答出两点）。28、肠道病毒EV71是RNA病毒；其表面蛋白为VP1～VP4，分别由V1～V4基因控制。为研究VP1～VP4的抗原性，从中筛选出EV71的疫苗抗原，研究人员利用基因工程技术生产了上述4种蛋白质。如图是制备V1基因表达载体的过程示意图，请回答下列问题：

gus：控制合成的酶使β-葡萄糖苷酸水解为蓝色物质。

Kan：卡那霉素抗性基因。

（1）以RNA为模板，通过4组RT-PCR可分别获取V1～V4基因（DNA）。RT-PCR所需要的酶有_____，该过程中子链延伸时所需的能量较为特殊，一般来自_____。

（2）为方便目的基因与质粒的连接，通常将限制酶的切点设计在引物上。引物一般为单链DNA，新合成子链的延伸方向为5’→3’。PCR获取V1基因时，10引物中限制酶切点的碱基序列应设计为上游引物3’_____5’，下游引物3’_____5’。

（3）用相关限制酶处理质粒和V1基因后，再与_____酶混合，加入大肠杆菌温育。一段时间后，将菌液涂布在含有_____和_____的平板上，经培养，在平板上长出白色和蓝色两种菌落，其中_____菌落含有V1基因表达载体，判断依据是_____。参考答案一、选择题(共8题，共16分)1、C【分析】【分析】

1；转基因生物的安全性问题：食物安全（滞后效应、过敏源、营养成分改变）、生物安全（对生物多样性的影响）、环境安全（对生态系统稳定性的影响）。

2；生物安全问题：转基因植物扩散到种植区外变成野生种或杂草；转基因植物竞争能力强；可能成为“入侵的外来物种”；转基因植物的外源基因与细菌或病毒杂交，重组出有害的病原体；可能使杂草成为有抗除草剂基因的“超级杂草”。

【详解】

①转基因作物可通过花粉散落到它的近亲野生作物上；如野生玉米中含有了抗虫基因，从而造成基因污染，①正确；

②转基因植物的基因传播到野生植物中；使野生植物的基因库发生了改变，会对植物基因多样性构成威胁，②正确；

③虽然转基因生物存在危害；但应该客观辩证地对待转基因技术，不能因噎废食，③错误；

④自然杂交是通过受粉的方式实现基因交流；由于生殖隔离的原因，自然杂交一般发生于同种生物之间，而转基因技术是在异种生物之间进行，二者区别很大，④错误。

故选C。

【点睛】2、B【分析】【分析】

分解纤维素的微生物的分离的实验原理：①土壤中存在着大量纤维素分解酶；包括真菌；细菌和放线菌等，它们可以产生纤维素酶．纤维素酶是一种复合酶，可以把纤维素分解为纤维二糖，进一步分解为葡萄糖使微生物加以利用，故在用纤维素作为唯一碳源的培养基中，纤维素分解菌能够很好地生长，其他微生物则不能生长。②在培养基中加入刚果红，可与培养基中的纤维素形成红色复合物，当纤维素被分解后，红色复合物不能形成，培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈，从而可筛选纤维素分解菌。

【详解】

A；透明圈内的纤维素已被分解；而不是刚果红染料被分解，A错误；

B；能产生淀粉酶的微生物菌落周围可形成模糊的透明圈；B正确；

C；菌落①中的菌株降解纤维素能力最强；C错误；

D；图中培养基应该以纤维素为唯一碳源；因此不可用牛肉膏、蛋白胨配制，D错误。

故选B。3、A【分析】【分析】

1；单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应；之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。

2；单克隆抗体的作用：①作为诊断试剂：（最广泛的用途）具有准确、高效、简易、快速的优点．②用于治疗疾病和运载药物：主要用于治疗癌症；可制成“生物导弹。

【详解】

A；经①形成的杂交瘤细胞不一定都能产生特定抗体；需要经过抗体阳性检测筛选出能产生特异性抗体的杂交瘤细胞，A错误；

B；①过程的原理和植物原生质体融合的原理基本相同；都是细胞膜的流动性，B正确；

C；②过程需要采用抗体阳性检测筛选出能产生特异性抗体的杂交瘤细胞；然后进行克隆化培养（包括体内培养和体外培养），C正确；

D；抗体的靶向作用（特异性的和抗原结合）使③过程具有高度特异性；D正确。

故选A。4、D【分析】【分析】

如图由植株A获得植株B的方法是单倍体育种；获得植株C是利用甲自交；是杂交育种，获得植株D的方法是植物组织培养。

【详解】

A；育种工作者常采用花药离体培养的方法来获得植株A；经秋水仙素处理获得染色体数加倍的植株B，该种育种方法是单倍体育种，A错误；

B；植株A经秋水仙素处理可获得染色体数加倍的纯合二倍体植株B；B错误；

C；鉴定染色体是否加倍的方法之一是观察细胞中的染色体数目；鉴定时一般不宜选用植株B的根尖作材料，因为秋水仙素处理的是单倍体植株A的芽尖，植株B的根细胞并没有经过诱导，染色体数目没有加倍，C错误；

D、将植株甲自交所结的种子（基因型为AaBb的概率为1/4）种下去，可得到植株C，若不考虑突变和交叉互换，植株C与植株D基因型（基因型为AaBb）相同的概率是1/4；D正确。

故选D。5、C【分析】【分析】

植物的体细胞杂交是将不同植物的细胞通过细胞融合技术形成杂种细胞；进而利用植物的组织培养将杂种细胞培育成多倍体的杂种植株。植物体细胞杂交依据的原理是细胞膜的流动性和植物细胞的全能性。

【详解】

A；获得原生质体需要去掉植物的细胞壁；植物细胞壁主要由纤维素和果胶组成，所以需要使用纤维素酶和果胶酶，A正确；

B、杂交过程的关键是原生质体的融合，人工诱导原生质体融合的方法有物理法（电融合法、离心法等）和化学法（聚乙二醇融合法、高Ca2+—高pH融合法等）；B正确；

C；若提供A、B细胞的植株都为二倍体；则图中杂种植株应该为异源四倍体且是可育的，C错误；

D；培养愈伤组织发育为杂种植株的培养基为MS培养基；MS培养基中需要加入蔗糖和一些植物激素（主要是生长素和细胞分裂素）等，D正确。

故选C。6、B【分析】【分析】

植物组织培养就是在无菌和人工控制的条件下；将离体的植物器官；组织、细胞，培养在人工配制的培养基上，给予适宜的培养条件，诱导其产生愈伤组织、丛芽，最终形成完整的植株。

【详解】

①植物组织培养需要在无菌；无毒的条件下进行；培养在人工配制的培养基上，给予适宜的培养条件，①正确；

②培养基中需添加植物激素（主要是生长素和细胞分裂素）调节生命活动；无机盐、蔗糖等营养物质满足植物代谢的需求；②正确；

③植物组织培养利用植物细胞的全能性；胡萝卜的其他部分（如茎；叶、花）也具有全能性，因此能培养成小植株，③错误；

④图中培养瓶1中进行的是脱分化过程；而试管2中是再分化过程，因此二者的成分不完全相同，④错误。

③④错误。

故选B。7、B【分析】【分析】

1；常用的运载体：质粒、噬菌体和动植物病毒；质粒是一种裸露的、结构简单、独立于真核细胞细胞核或原核细胞拟核DNA之外，并具有自我复制能力的环状DNA分子。

2；作为运载体必须具备的条件：①要具有限制酶的切割位点；②要有标记基因（如抗性基因）；以便于重组后对重组DNA的筛选；③能在宿主细胞中稳定存在并复制；④是安全的，对受体细胞无害，而且要易从供体细胞分离出来。

【详解】

A；质粒是广泛存在于细菌细胞中的一种环状DNA；不是细胞器，A错误；

B；质粒是一种裸露的、结构简单、独立于真核细胞细胞核或原核细胞拟核DNA之外；并具有自我复制能力的环状DNA分子，如存在与酵母菌细胞质中的质粒和存在于细菌拟核DNA之外的细胞质中质粒，B正确；

C；质粒侵入宿主细胞后；能在宿主细胞内复制，也能在原细菌细胞内复制和表达，C错误；

D；基因工程中常用的载体除了质粒外；还有动植物病毒以及噬菌体，D错误。

故选B。8、D【分析】【分析】

胚胎和出生不久的幼龄动物的细胞分裂能力强；易于培养。动物细胞培养的目的是通过亲代细胞的增殖获得大量的子代细胞，所以需要培养的细胞具有较强的分裂能力。

【详解】

动物细胞培养利用细胞增殖的原理；高度分化的动物细胞不能分裂，所以动物细胞培养必须选不断分裂的细胞进行培养，而胚胎或幼龄动物的器官或组织分裂能力旺盛，因此动物细胞培养时，所用组织和细胞大都来自胚胎或出生不久的幼龄动物。D符合题意。

故选D。二、多选题(共5题，共10分)9、C:D【分析】【分析】

植物的体细胞杂交是将不同植物的细胞通过细胞融合技术形成杂种细胞；进而利用植物的组织培养将杂种细胞培育成多倍体的杂种植株。在进行植物体细胞杂交时需要使用纤维素酶和果胶酶去掉植物细胞的细胞壁，使用化学方法（聚乙二醇）或物理方法诱导原生质体融合，不能用灭活的病毒诱导。可根据植物细胞的质壁分离和复原鉴定杂种细胞是否再生细胞壁，从而确定原生质体融合是否完成。植物体细胞杂交的意义：在克服远源杂交不亲和的障碍；培育作物新品种方面所取得的重大突破。

【详解】

A；驱蚊草是把天竺葵的原生质体和香茅草的原生质体进行诱导融合培育而成的；采用了植物体细胞杂交技术，属于细胞工程育种，其优点是能克服远缘杂交不亲和的障碍，A正确；

B；要获得天竺葵的原生质体和香茅草的原生质体；需要采用酶解法（纤维素酶、果胶酶），诱导天竺葵的原生质体和香茅草的原生质体的融合可采用化学法（PEG等试剂）或物理法（电刺激等），B正确；

C；驱蚊草培育过程不同于植物组织培养；但需要采用植物组织培养技术，因此有细胞脱分化和再分化的过程，C错误；

D；驱蚊草培育利用了植物体细胞杂交技术；育种原理是染色体数目变异，D错误。

故选CD。10、A:D【分析】【分析】

纤维素分解菌能合成和分泌纤维素酶，纤维素酶是一种复合酶，包括C1酶；Cx酶和葡萄糖苷酶；前两种酶使纤维素分解成纤维二糖，第三种酶将纤维二糖分解成葡萄糖。用以纤维素为唯一碳源的培养基可以筛选出纤维素分解菌。

【详解】

A；木材、秸秆中富含纤维素；故可以从富含腐殖质的林下土壤中筛选产纤维素酶菌，A正确；

B；应该用以纤维素为唯一碳源的培养基筛选纤维素分解菌；只有纤维素分解菌能够存活，B错误；

C；接种室、接种箱等常用紫外线消毒法处理；接种环等常用灼烧灭菌法处理，吸管、培养皿等常用干热灭菌法处理，培养基用高压蒸汽灭菌法处理，C错误；

D；菌落只能在固体培养基中形成；菌种分离和菌落计数都可以使用固体培养基，D正确。

故选AD。11、A:B:D【分析】【分析】

免疫PCR是一种抗原检测系统；将一段已知序列的DNA片段标记到抗体2上，通过抗原抗体的特异性识别并结合，抗体2会和固定抗体1；抗生素形成复合物“固定抗体1—抗生素—抗体2”，再用PCR方法将这段DNA进行扩增，通过检测PCR产物的量，即可推知固定抗体1上吸附的抗生素的量。

【详解】

A；免疫PCR中所用的DNA不选用受检样品（牛乳）中可能存在的DNA。待检测的牛乳中可能含有牛乳腺细胞的DNA（其上含有牛乳基因的DNA片段）；若图示中的DNA用牛乳基因中的DNA片段，经过PCR扩增后的产物中，不仅有抗体2上的DNA扩增产物，还可能有牛乳中本身含有的牛乳基因片段的扩增产物，使检测结果偏大，A正确；

B；如果第三次冲洗不充分；可能使残留的、呈游离状态的抗体2上的DNA也作为PCR的模板参与扩增，会出现假阳性现象，B正确；

CD；微量抗原抗体反应；是通过PCR技术扩增抗体2上连接的DNA，最后通过检测扩增产物—DNA的量来确定抗生素的量的方法。因此，PCR扩增产物的量与牛乳中抗生素的量呈正相关，抗原、抗体的数量可通过PCR技术间接扩增放大，C错误，D正确。

故选ABD。12、B:C:D【分析】【分析】

1；“试管婴儿”是利用体外授精和胚胎移植的方法；解决不孕夫妇的生育问题。

2；设计试管婴儿概念：是指体外受精形成的胚胎在植入母体孕育前；根据人们的需要，将胚胎的一个细胞取出，进行某些设计，当检测结果符合人们需要时，再把胚胎植入母体孕育。

【详解】

A；透明带和卵细胞膜的反应可以防止多精入卵；从而保证受精卵染色体数目的正常，A正确；

B；由于细胞质中也存在基因控制生物性状；所以克隆猴的性状不完全与细胞核供体的相同，B错误；

C；试管婴儿技术与正常的生殖过程相比仅仅是受精和早期胚胎发育的场所不同；实质没有变化，属于有性生殖；而克隆猴是将动物体细胞的细胞核移植到去核的卵细胞后发育成的新个体，属于无性生殖的范畴，C错误；

D；设计试管婴儿与试管婴儿的主要区别是前者在胚胎植入前需进行遗传学诊断；设计试管婴儿有时除体外受精、胚胎培养和胚胎移植外还需要借助其它技术，D错误。

故选BCD。13、A:C【分析】【分析】

果酒的制作利用酵母菌的无氧呼吸产生酒精；醋酸菌在糖源；氧气充足时；直接将葡萄糖氧化为醋酸；在糖源不足、氧气充足时，可利用酒精，即乙醇作为呼吸底物，先将乙醇变成乙醛而后变为乙酸（醋酸）。

【详解】

A；制备培养基过程中；pH的调节应在灭菌前进行，A错误；

B；制作果酒时适当加大接种量；酵母菌菌体的基数增大，可使其快速形成优势菌群，抑制杂菌生长，提高发酵速率，B正确；

C；现代发酵工程选育出性状优良的菌种后；为满足发酵过程的需要，还要对菌种进行扩大培养，之后才可进行发酵罐内的发酵，C错误；

D；醋酸菌能够氧化酒精产生醋酸；造成葡萄酒的败坏。首先，乙醇被氧化生成乙醛，然后乙醛再被氧化生成醋酸（乙酸），故夏天开瓶后的红酒容易变酸，D正确。

故选AC。三、填空题(共7题，共14分)14、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】单个核苷酸两个DNA片段15、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】质粒自我复制双链环状DNA分子16、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】限制性核酸内切酶（限制酶17、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】滴加蒸馏水逐渐稀释2mol/L浓度的NaCL溶液18、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】体外受精技术、胚胎移植技术、胚胎分割技术性别控制19、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】蛋白质分子的结构规律及其生物功能的关系基因修饰或基因合成改造新的蛋白质自然界已存在20、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】克服了远缘杂交不亲和的障碍。四、实验题(共4题，共28分)21、略

【分析】【分析】

1；参与果酒制作的微生物是酵母菌；其新陈代谢类型为异养兼性厌氧型。在有氧条件下可生产二氧化碳和水，无氧条件下可生产酒精和二氧化碳。

2；腐乳制作中用盐腌制的目的：①盐能抑制微生物的生长；避免豆腐块腐败变质；②加盐可以析出豆腐中的水分，使豆腐块变硬，在后期制作过程中不会过早酥烂；③有调味作用。

（1）

检测酒精的原理是：橙色的重铬酸钾溶液；在酸性条件下与酒精发生化学反应，变成灰绿色。醋酸菌是好氧型细菌，而果酒发酵是无氧环境(或醋酸菌需要在有氧且温度是30～35℃条件下，才能将糖转化为醋酸或因为酒精发酵时的缺氧环境能抑制醋酸菌生长，且醋酸菌的发酵需要充足的氧气），所以在酒精发酵旺盛时，醋酸菌不能将葡萄汁中的糖发酵为醋酸；

（2）

酵母菌的异化作用类型为兼性厌氧型；即在有氧条件下可生成水和二氧化碳，在无氧条件下生成酒精和二氧化碳；醋酸发酵的主要菌种是醋酸菌，醋酸菌的最适宜温度是30-35℃，故醋酸发酵时温度一般应控制为30～35℃；

（3）

豆腐的发酵中参与的微生物很多如青霉；酵母、曲霉、毛霉等；其中起主要作用的是毛霉，毛霉等微生物将豆腐中的营养基质如蛋白质、脂肪等分解；豆腐相当于培养基，能提供毛霉等菌种生长的条件；

（4）

民间制作腐乳时；豆腐块上生长的微生物，在制作时一般要加盐；酒（酒的含量一般控制在12%左右），若加入的酒精浓度（含量）过低，会出现不足以抑制微生物的生长，导致豆腐腐败变质的现象；

（5）

泡菜的制作的菌种是乳酸菌；属于厌氧型细菌，用水封坛的作用是隔绝空气，制造无氧环境，为乳酸菌的发酵提供无氧环境；在盐酸酸化条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮反应生成重氮盐，重氮盐与N-1-萘基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰红色染料。

【点睛】

本题主要考查果酒的制作、腐乳的制作、腌制泡菜等知识点，意在考查考生的识记能力和理解所学知识要点，把握知识间内在联系，形成知识网络结构的能力；能运用所学知识，准确判断问题的能力。【解析】（1）灰绿醋酸菌是好氧型细菌；而果酒发酵是无氧环境(或醋酸菌需要在有氧且温度是30～35℃条件下，才能将糖转化为醋酸或因为酒精发酵时的缺氧环境能抑制醋酸菌生长，且醋酸菌的发酵需要充足的氧气）

（2）30—35℃

（3）毛霉培养基。

（4）不足以抑制微生物生长；使豆腐腐败变质。

（5）制造无氧环境玫瑰红色22、略

【分析】【详解】

本题以杂交瘤细胞为背景；考查了动物细胞融合；细胞分裂和细胞分化。

（1）在第四次免疫后；Y的血清抗体效价大于16000，所以最少需要经过四次免疫.由图可知，血清抗体效价均达到16000以上时，Y的效价最大，最适合用于制备B淋巴细胞。

（2）B细胞与骨髓瘤细胞在一起融合时；可能发生B细胞与骨髓瘤细胞融合，B细胞之间的融合，骨髓瘤细胞之间的融合和B细胞与骨髓瘤细胞融合。由于细胞细胞融合是随机的，且融合率达不到100%，故体系中会出现多种类型的细胞。

（3）由于核膜也具有流动性；故小鼠的免疫B淋巴细胞核与其骨髓瘤细胞核会融合形成一个杂交的细胞核。B细胞有40条染色体，骨髓瘤细胞有60条染色体，融合后的杂交瘤细胞有100条染色体。

（4）未融合的B淋巴细胞是已分化的细胞；不能无限增殖，所以多次培养后不能存活。

【点睛】

本题考查动物细胞工程，意在考查考生识记所列知识点，并能运用所学知识做出合理的判断或得出正确的结论的能力。【解析】4YY小鼠的血清抗体效价最高B淋巴细胞相互融合形成的细胞、骨髓瘤细胞相互融合形成的细胞细胞融合是随机的，且融合率达不到100%1100不能无限增殖23、略

【分析】【分析】

微生物的分离：①利用该分离对象对某一营养物质的“嗜好”；专门在培养基中加入该营养物质，使该微生物大量增殖。这些物质主要是一些特殊的碳源；氮源，如纤维素可用来富集纤维素分解微生物，尿素可用来富集尿素分解微生物。②利用该分离对象对某种抑制物质的抗性，在混合培养物中加入该抑制物质，经培养后，由于原来占优势的它种微生物的生长受到抑制，而分离对象却可趁机大量增殖，使之在数量上占优势。如筛选酵母菌和霉菌，在培养基中加入青霉素，因青霉素可抑制细菌和放线菌的细胞壁的合成，从而抑制两类微生物的生长，而酵母菌和霉菌正常生长增殖。

【详解】

（1）微生物的生长需要碳源；氮源、水和无机盐；①中木糖含有C、H、O元素，故能提供碳源，硝酸钾中含有N元素，可以提供氮源和无机盐。

（2）分离筛选枯草芽孢杆菌需要得到单菌落；②→③中梯度稀释的目的是将聚集在一起的微生物分散成单个细胞，从而能在固体培养基表面形成单个菌落。

（3）制作的平板需要倒置的目的除了防止培养基中水分过快蒸发之外；还可以防止冷凝水落入培养基造成污染。

（4）分析题意可知，A处接种黑腐皮壳菌，在距离A处等距离的B1~B4处分别接种等量的4个枯草芽孢杆菌品系；在适宜条件下培养3－5天，由于枯草芽孢杆菌能抑制黑腐皮壳菌生长，通过观测黑腐皮壳菌菌落的形状（黑腐皮壳菌菌落边缘与4个枯草芽孢杆菌菌落的距离），就能筛选出抑菌更好的枯草芽孢杆菌菌株。

（5）在利用稀释涂布平板法统计土样中活菌的数目时；为了保证结果准确，一般选择菌落数在30~300的平板进行计数。当两个或多个细菌连在一起时平板上观察到的只是一个菌落，故该方法所得结果往往比实际细菌的数目要少。

【点睛】

本题考查微生物的分离和计数的相关知识，意在考查考生利用所学知识解决实际问题的能力，难度中等。【解析】提供碳源，提供氮源和无机盐将聚集在一起的微生物分散成单个细胞，从而能在固体培养基表面形成单个菌落防止冷凝水落入培养基造成污染观测黑腐皮壳菌菌落的形状（黑腐皮壳菌菌落边缘与4个枯草芽孢杆菌菌落的距离）30～300当两个或多个细菌连在一起时平板上观察到的只是一个菌落24、略

【分析】【分析】

树突状细胞为抗原呈递细胞；可识别；摄取和传递抗原信息。

【详解】

（1）细菌溶素A（ClyA）是外膜囊泡上含量较高的特异蛋白；而OMV能穿越肠道上皮屏障活化肠黏膜内丰富的免疫细胞。所以，ClyA基因的作用为表达出细菌溶素A（ClyA），使OVA和Fc定位至OMV表面，进而融合基因可以被免疫细胞识别。Fc表达产物能够与树突状细胞表面的特异性受体结合，进而提高树突状细胞识别；摄取和传递抗原信息的能力。

（2）①根据表格和柱状图可知；服用的工程菌采用“加法原理”，逐渐增加部件，且第4组和第5组工程菌都是完整的，即第4组:ClyA-OVA-Fc第5组:ClyA-OVA-Fc，但是第4组饮用含阿拉伯糖的水，进而激活融合基因的表达；第5组不饮用含阿拉伯糖的水，不能激活融合基因的表达。所以，第3；5组含有OVA，在人为控制口服阿拉伯糖后产生OMV，激活特异性免疫，对肿瘤细胞的杀伤率较高；1、2组缺乏OVA，第4组无阿拉伯糖诱导，杀伤率均低。

②小鼠脾脏细胞具有免疫细胞；可在抗原刺激下引起特异性免疫。带有红色荧光标记的OVA抗原肽复合物可引起小鼠脾脏细胞发生特异性免疫，故先加入第1-5组小鼠脾脏细胞和带有红色荧光标记的OVA抗原肽复合物进行保温，判断特异性免疫的强度；

故选AC。

再加入带有绿色荧光标记的细胞毒性T细胞特异性抗体；目的是检测OVA抗原肽复合物是否能够产生特异性细胞毒性T细胞。

故选B。

若第5组同时被红色和绿色荧光标记的细胞数目占比越多；说明工程菌在人为可控条件下引发特异性免疫反应，结论成立。

③肿瘤患者术后极易复发；说明特异性免疫功能减弱。所以，可多次注射黑色素瘤细胞，进而研究该口服工程菌是否能够诱发长期免疫记忆，从而抑制肿瘤复发。

（3）本实验中融合基因里面有OVA（黑色素瘤细胞特异性抗原），所以只需将OVA替换为肺癌细胞特异性抗原即可。即将元件中的OVA替换为肺癌细胞特异性表达的抗原基因。【解析】(1)表达ClyA；使OVA和Fc定位至OMV表面识别；摄取。

(2)第4组:ClyA-OVA-Fc和-第5组:ClyA-OVA-Fc和+第3；5组含有OVA；在人为控制口服阿拉伯糖后产生OMV，激活特异性免疫，对肿瘤细胞的杀伤率较高;1、2组缺乏OVA，第4组无阿拉伯糖诱导，杀伤率均低ACB同时被红色和绿色荧光标记的细胞数目占比研究该口服工程菌是否能够诱发长期免疫记忆，从而抑制肿瘤复发。

(3)将元件中的OVA替换为肺癌细胞特异性表达的抗原基因五、综合题(共4题，共8分)25、略

【分析】【分析】

分析题目可知；醪糟制作过程中用到霉菌，可将淀粉分解为葡萄糖，酵母菌可以利用葡萄糖进行无氧呼吸，产生酒精，使醪糟有酒香味，乳酸菌能产生特殊的酸香味，长期储存的醪糟要有无菌思想，注意操作过程中防治杂菌污染，和注意发酵进程的控制。

【详解】

（1）霉菌产生淀粉酶的能将糯米中的淀粉分解为葡萄糖等，使醪糟具有甜味；酵母菌使醪糟产生酒味的化学反应式是C6H12O6→2C2H5OH+2CO2；乳酸菌是原核生物；其发酵产物是醪糟酸味的主要来源。

（2）拌入甜酒曲之前；需将蒸熟的糯米进行冷却，目的是防止高温杀死甜酒曲中的微生物。发酵前期应保证氧气的供应，使霉菌和酵母菌大量繁殖；后期应减少空气进入或隔绝空气，有利于酒精发酵和乳酸发酵。

（3）发酵好的醪糟煮沸后；可转移到灭菌玻璃瓶中密封保存，密封之前应对瓶口进行灼烧灭菌，防止瓶口被污染。

（4）研究发现；通过控制发酵温度可以调节醪糟口味，原因是温度既影响酶的活性也影响微生物的生长繁殖。

【点睛】

醪糟等微生物发酵过程中，注意控制发酵进程，得到相应的产物。【解析】淀粉酶C6H12O6→2C