2025年教科新版选择性必修3生物上册阶段测试试卷含答案

…………○…………内…………○…………装…………○…………内…………○…………装…………○…………订…………○…………线…………○…………※※请※※不※※要※※在※※装※※订※※线※※内※※答※※题※※…………○…………外…………○…………装…………○…………订…………○…………线…………○…………第=page22页，总=sectionpages22页第=page11页，总=sectionpages11页2025年教科新版选择性必修3生物上册阶段测试试卷含答案考试试卷考试范围：全部知识点；考试时间：120分钟学校：______姓名：______班级：______考号：______总分栏题号一二三四五六总分得分评卷人得分一、选择题(共6题，共12分)1、关于细胞工程技术在生产实践中应用的叙述，正确的是（）A.用马铃薯幼苗茎尖进行组织培养，可获得抗病毒新品种B.愈伤组织细胞分裂能力强，可作为体细胞诱变育种材料C.动物细胞经过细胞培养可以直接获得动物的组织或器官D.动物胚胎细胞分化程度低，可优先作为核移植受体细胞2、基因工程自20世纪70年代兴起后得到了飞速发展，目前已经成为生物科学的核心技术，下列有关基因工程的应用的描述正确的是（）A.利用农杆菌转化法培育得到的转基因植物，可能会引起基因污染B.从人类基因组文库中获得胰岛素基因导入大肠杆菌，可获得具生物学功能的胰岛素C.用基因枪法将肠乳糖酶基因导入奶牛受精卵，可培育出产低乳糖牛乳的奶牛D.若将腺苷酸脱氨酶基因转入淋巴细胞后回输患者进行基因治疗，该基因可遗传给子代3、基因工程中要使目的基因在受体细胞中稳定存在并能够表达和发挥作用，需要构建基因农达载体，构建过程如图。有关说法不正确的是（）

A.构建重组质粒a是基因工程的核心步骤B.重组质粒a形成过程中，需要BamHI酶和DNA连接酶C.用含有氨苄青霉素的培养基筛选转化成功的大肠杆菌D.图中大肠杆菌感受态细胞可通过Ca2+处理法获得4、某生物兴趣小组为测定药物对体外培养细胞的毒性，准备对小鼠肝细胞进行培养。下列说法正确的是（）A.将肝组织剪碎后用胃蛋白酶处理可得到肝细胞悬液B.在培养过程中通常要通入5%的CO2以刺激细胞呼吸C.在持续的培养过程中，肝细胞会出现停止增殖的现象D.该试验中用到的培养液也能用来培养乙肝病毒5、从红豆杉细胞中提取的紫杉醇是目前最好的抗肿瘤药物之一。为提高红豆杉细胞培养物中紫杉醇的产量；研究人员构建紫杉醇合成关键酶基因（Bapt）的超表达载体，并将其导入红豆杉细胞，具体流程如下图。相关说法正确的是（）

A.过程①和②使用的酶均为DNA聚合酶B.p1303载体上可能含有增强Bapt基因表达的序列C.可使用Bapt基因制成的探针检测过程⑤是否成功D.改造的红豆杉细胞需组织培养至完整植株再进行紫杉醇提取6、下列关于育种的描述中，不正确的是（）A.选择育种是一种古老的育种方法，它的局限性在于进展缓慢，可选择的范围有限B.人工诱变是创造动植物新品种和微生物新类型的重要方法，突出优点是可以提高突变率C.对于基因工程或分子生物学实验室向外排放转基因细菌等必须严加管制D.将两匹奔跑速度快、耐力持久的种马交配，所生小马一定能继承“双亲”的特征，不仅跑得快，而且耐力持久评卷人得分二、多选题(共9题，共18分)7、下列关于人早期胚胎发育过程中桑椹胚和囊胚的叙述中，正确的是（）A.囊胚与桑椹胚相比，每个细胞内DNA总量增加B.囊胚期出现了细胞分化，但遗传物质未发生改变C.囊胚期内细胞团和滋养层细胞差异不是复制水平上的差异，而是转录水平上的差异引起D.桑椹胚的形成在卵巢，囊胚的形成在输卵管8、在传统发酵技术中；果醋的制作往往在果酒制作基础上进行。下图甲是醋酸发酵装置，乙是培养液pH变化曲线图，下列叙述不正确的是（）

A.发酵初期不通气，溶液中没有气泡产生B.中期可以闻到酒香，说明进行了酒精发酵C.后期接种醋酸菌，适当通气并保持原有温度D.图乙中能正确表示pH变化的曲线是③9、从蓝光到紫外线都能使绿色荧光蛋白（GFP）激发；发出绿色萤光。研究人员将某病毒的外壳蛋白（L1）基因与GFP基因连接，获得了L1-GFP融合基因，并将其插入质粒PO，构建了重组质粒P1。下图为P1部分结构和限制酶酶切位点的示意图，相关叙述正确的是（）

A.将L1-GFP融合基因插入质粒PO时，使用了E1、E2和E4三种限制性核酸内切酶B.可借助基因工程、核移植技术、早期胚胎培养及胚胎移植技术获得转基因的克隆牛C.可采用抗原-抗体杂交技术检测该融合基因是否存在于转基因牛的不同组织细胞中D.若在某转基因牛皮肤细胞中观察到绿色荧光，则说明L1基因在该细胞中完成表达10、下图1表示的是某DNA分子上的一些限制性内切酶的酶切位点。用XhoI和SalI两种限制酶分别处理该DNA分子；经电泳分离结果如图2。以下叙述正确的是（）

A.所用两种限制性核酸内切酶识别的核苷酸序列可能相同B.限制酶通过作用于磷酸二酯键和氢键得到相应产物C.根据泳道②电泳示意图可知使用的限制性内切酶为XhoID.用两种限制酶同时处理后进行电泳，条带可多于6条11、下图为科学家在实验室中培养“人造牛肉”的简要过程；下列相关叙述正确的是（）

A.用胰蛋白酶处理牛肌肉组织，获得分裂能力强的肌肉母细胞B.生物反应器内应控制好适宜的温度，并冲入纯氧保证细胞呼吸C.培养液中的支架提供了更多的细胞吸附面积，有利于细胞贴壁生长D.“人造牛肉”的培养有利于牛肉的工厂化生产，减少环境污染12、聚羟基脂肪酸酯(PHA)是由嗜盐细菌合成的一种胞内聚酯，它具有类似于合成塑料的理化特性，且废弃后易被生物降解，可用于制造无污染的“绿色塑料”。科学家从某咸水湖中寻找生产PHA菌种的流程图如下。下列叙述错误的是（）

A.步骤②可用稀释涂布平板法接种到含合成塑料的选择培养基上B.步骤③所用的培养基中营养物质浓度越高，对嗜盐细菌的生长越有利C.步骤④所用到的培养基应加入琼脂，以便挑取单菌落获得纯化菌株D.挑取菌落时，应挑取多个菌落并分别测定嗜盐细菌的PHA含量13、勤洗手是预防病毒感染的有效措施。某公司在防控新型冠状病毒期间推出一款新型免洗洗手凝胶。为衡量该凝胶的清洗效果；研究人员检测了用凝胶洗手前后手部细菌的含量。凝胶洗手前的检测流程见下图。下列叙述错误的是（）

A.统计洗手前手部细菌的数量，选择的接种方法是平板划线法B.除图中操作外，还需要设置一组未接种的空白培养基进行培养C.培养基上的一个菌落只可能来源于样品稀释液中的一个活菌D.初步判断培养基上菌种的类型，需要用显微镜观察菌体的形状14、下列有关动物细胞培养的表述错误的是（）A.培养环境中需要O2，不需要CO2B.细胞要经过脱分化形成愈伤组织C.培养液通常含有糖类，氨基酸，无机盐，维生素和动物血清D.培养瓶中的细胞培养到一定阶段后分瓶后才能继续增殖15、全球首个鼻喷新冠肺炎疫苗已获准临床试验，该疫苗是在流感病毒载体上，插入新冠病毒基因片段，制成活病毒载体疫苗，模拟呼吸道病毒天然感染途径，激活局部免疫应答和全身性免疫应答，从而发挥保护作用。下列相关叙述正确的是（）A.疫苗制备过程中，对流感病毒进行改造利用的原理是基因突变B.从接种方式来看，该疫苗的优点是通过鼻喷接种，无针、无痛C.该疫苗需侵入人体细胞中经基因表达后才能发挥作用D.该疫苗可通过激活淋巴细胞，产生细胞免疫和体液免疫评卷人得分三、填空题(共9题，共18分)16、动物细胞融合的意义：克服了______，成为研究_____、_____、肿瘤和生物新品种培育的重要手段。17、功能：能够识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列，并且使每一条链中______部位的两个核苷酸之间的______断开，因此具有______。18、酵母菌是______________微生物。酵母菌进行有氧呼吸的反应式如下：______________________；酵母菌进行无氧呼吸的反应式如下：_________________。19、随着现代生物技术的飞速发展；转基因动物；克隆动物和试管动物相继问世，请回答下列问题：

（1）转基因动物、克隆动物和试管动物培育过程中都要用到的生物技术包括______。

（2）核移植是动物克隆的第一步，包括体细胞核移植和胚胎细胞核移植，其中后者更易成功，原因是______。核移植常用处于______（填时期）的______为受体细胞。

（3）在“试管动物”的培育过程中，常采用______（填激素名称）处理可使雌性个体一次排出多枚卵母细胞。从雄性个体采集的精子需______后才能进行受精作用；防止多精入卵的两道屏障依次为______；卵细胞膜反应。

（4）若考虑环境承载力，转基因动物、克隆动物和试管动物不宜放置到自然环境中，这遵循了生态工程的______原理。20、细胞贴壁和接触抑制：悬液中分散的细胞很快就______，称为______。细胞数目不断增多，当贴壁细胞分裂生长到表面______时，细胞就会_____，这种现象称为______。21、概念：动物细胞培养就是从动物机体中取出相关的______，将它分散成______，然后放在适宜的______中，让这些细胞______。22、动物细胞培养的流程：

取动物组织块（动物胚胎或幼龄动物的器官或组织）→剪碎→用______处理分散成______→制成______→转入培养瓶中进行______培养→贴满瓶壁的细胞重新用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞继续_____培养。23、基因工程是蛋白质工程的关键技术；蛋白质工程是基因工程的延伸。有人对基因工程和蛋白质工程的关系进行了比较，并归纳为下表。

基因工程与蛋白质工程的比较。比较项目蛋白质工程蛋白质工程原理中心法则中心法则区别过程获取目的基因→构建表达载体→导入受体细胞→目的基因的检测与鉴定预期蛋白质功能→设计蛋白质结构→推测氨基酸序列→合成DNA→表达出蛋白质实质定向改造生物的遗传特性，以获得人类所需要的生物类型或生物产品（基因的异体表达）定向改造蛋白质的分子结构以生产人类所需要的蛋白质定向改造蛋白质的分子结构以生产人类所需要的蛋白质结果生产自然界中已有的蛋白质生产自然界中已有的蛋白质生产自然界中已有的蛋白质联系蛋白质工程是第二代基因工程

上表的比较是否正确？如果有不妥之处，尝试进行修改。_________24、最后检测目的基因是否翻译成______，方法是从转基因生物中提取______，用相应的______进行______。评卷人得分四、判断题(共2题，共12分)25、胚胎发育早期，细胞的数量不断增加，胚胎的总体积也增加。()A.正确B.错误26、基因工程技术已被广泛用于改良动植物品种、提高作物和畜产品的产量等方面。（选择性必修3P87）()A.正确B.错误评卷人得分五、实验题(共1题，共7分)27、为生产具有特定性能的α-淀粉酶；研究人员从某种海洋细菌中克隆了α-淀粉酶基因（1656个碱基对），利用基因工程大量制备琢α-淀粉酶，实验流程见下图。请回答下列问题：

（1）利用PCR技术扩增α-淀粉酶基因前；需先获得细菌的_________。

（2）为了便于扩增的DNA片段与表达载体连接；需在引物的____端加上限制性酶切位点，且常在两条引物上设计加入不同的限制性酶切位点，主要目的是________________。

（3）进行扩增时；反应的温度和时间需根据具体情况进行设定，下列选项中_______的设定与引物有关，________的设定与扩增片段的长度有关。（填序号）

①变性温度②退火温度③延伸温度④变性时间⑤退火时间⑥延伸时间。

（4）下图表示筛选获得的工程菌中编码α-淀粉酶的mRNA的部分碱基序列：

图中虚线框内mRNA片段包含___个密码子；如虚线框后的序列未知，预测虚线框后的第一个密码子最多有__种。

（5）获得工程菌表达的α-淀粉酶后；为探究影响酶活性的因素，以浓度为1%的可溶性淀粉为底物测定酶活性，结果如下：

。缓冲液。

50mmol/LNa2HPO4-KH2PO4

50mmol/LTris-HCl

50mmol/LGly-NaOH

pH

6．0

6．5

7．0

7．5

7．5

8．0

8．5

9．0

9．0

9．5

10．0

10．5

酶相对活性%

25．4

40．2

49．8

63．2

70．1

95．5

99．5

85．3

68．1

63．7

41．5

20．8

根据上述实验结果，初步判断该α-淀粉酶活性最高的条件为______。评卷人得分六、综合题(共3题，共12分)28、某地利用胚胎工程实现良种肉牛产业化生产；请结合胚胎工程相关知识回答下列问题：

（1）胚胎工程是指对动物_____所进行的多种显微操作和处理技术。体外受精对精子和卵细胞的具体要求是_____。

（2）早期胚胎培养时_____（填“需要”或“不需要”）用胰蛋白酶进行处理，原因是_____。

（3）胚胎工程技术的终端环节是_____，其最显著的意义在于_____；在胚胎移植过程中，外来胚胎能在受体内存活的生理学基础是_____。

（4）如果供体母牛具有很多优良性状，可利用体细胞克隆技术加速遗传改良进程。用于核移植的体细胞一般选用10代以内的细胞，原因是_____。29、某女性的线粒体携带某种严重致病基因；她的前两个孩子因患该病夭亡，后来她接受一个健康女性捐赠的卵母细胞，生有了一个拥有“三父母”的婴儿，培育过程如图所示。

请据此回答下列有关问题：

(1)该健康婴儿培育过程中依次涉及__________、______________；早期胚胎培养和胚胎移植等技术。

(2)图中取自健康女性的卵母细胞是___________（填“A”或“B”）。取卵之前对该女性需要注射____________（填激素）。

(3)哺乳动物胚胎的培养液成分一般都比较复杂，除一些无机盐和有机物类外，还需添加维生素、激素、氨基酸、核苷酸等营养成分，以及_____________等物质。

(4)据图分析，理论上医疗团队在进行胚胎移植时没有必要对胚胎的性别进行选择，理由是________________30、长期高血糖可引发血管细胞衰老。科研人员为研究S蛋白在因高血糖引发的血管细胞衰老中的作用；以腺病毒为载体将编码S蛋白的S基因导入血管细胞，实现S蛋白在血管细胞中的大量表达。

(1)腺病毒的遗传物质为DNA，其复制需要E1、E2、E3基因共同完成。为将S基因导入腺病毒，科研人员首先构建了含S基因的重组质粒，如图1所示。在构建含S基因的重组质粒时，通过_______的方法可鉴定重组质粒是否插入了S基因。将图1中含S基因的重组质粒用_______酶切割后，获得改造后的腺病毒DNA；将其导入A细胞(A细胞含有E3基因，可表达E3蛋白)，如图2所示。腺病毒DNA在A细胞内能够_______；从而产生大量重组腺病毒，腺病毒进入宿主细胞后不整合到宿主细胞染色体上。

(2)综合上述信息，从生物安全性角度分析重组腺病毒载体的优点：_______(写出2点)。

(3)用含S基因的重组腺病毒分别感染正常人及糖尿病患者的血管细胞，使S蛋白在血管细胞中大量表达。对正常人、糖尿病患者及二者转入S基因后血管细胞中能促进细胞衰老的Ⅰ蛋白进行检测，结果如图3所示(颜色越深代表表达量越高)。可用_______法检测Ⅰ蛋白的表达量，实验结果显示_______血管细胞中Ⅰ蛋白表达量最高，推测S蛋白对高血糖引发的血管细胞衰老的作用及机制是_______。参考答案一、选择题(共6题，共12分)1、B【分析】【分析】

1；作物脱毒材料：分生区（如茎尖）细胞；植物脱毒方法：进行组织培养；结果：形成脱毒苗。

2；突变体的利用（1）原因：在植物组织培养的过程中；由于培养细胞一直处于不断的分生状态，因此容易受到培养条件和外界压力的影响而产生突变。（2）利用：筛选出对人们有利的突变体培育成新品种。

3；若想利用此技术得到细胞产物；只需培养到愈伤组织即可．若想制造人工种子，需要培养到胚状体。（在胚状体外包一层人工种皮即可）

【详解】

A；一定大小的草莓茎尖的病毒极少；甚至无病毒，进行组织培养，可获得无病毒新品种，A错误；

B；愈伤组织细胞分裂能力强；容易受到培养条件和外界压力的影响而产生突变，可作为体细胞诱变育种材料，B正确；

C；动物细胞经过细胞培养可以直接获得动物细胞或者细胞产物；不能直接获得动物的组织或器官，C错误；

D；动物胚胎细胞分化程度低；可优先作为核移植供体细胞，而不是受体细胞，D错误。

故选B。2、A【分析】【分析】

基因工程是指按照人类的愿望；将不同生物的遗传物质在体外人工剪切并和载体重组后转入细胞内进行扩增，并表达产生所需蛋白质的技术，其原理是基因重组。

【详解】

A；农杆菌转化法把目的基因导入到受体细胞的染色体DNA上；目的基因有可能通过减数分裂进入精子，若果精子与野生型同种生物的卵细胞受精则会造成基因污染，A正确；

B；从人类基因组文库中获得胰岛素基因有内含子；在大肠杆菌中，其初始转录产物中与内含子对应的RNA序列不能被切除，无法表达出胰岛素，B错误；

C；动物基因工程常用的是显微注射技术；基因枪法属于植物转基因方法之一，C错误；

D；由于此处基因治疗是把表达载体导入淋巴细胞；而淋巴细胞不会产生配子，故目的基因不会传给子代个体，D错误。

故选A。3、C【分析】【分析】

基因工程技术的基本步骤：(1)目的基因的获取：从基因文库中获取；利用PCR技术扩增和人工合成。(2)基因表达载体的构建：基因工程的核心步骤；基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。(3)将目的基因导入受体细胞。(4)目的基因的检测与鉴定。

【详解】

A；构建重组质粒a——目的基因与运载体的结合是基因工程的核心步骤；A正确；

B；重组质粒a形成过程中；需要BamHI酶切割质粒获得黏性末端，需要DNA连接酶把目的基因与载体黏性末端之间的磷酸二酯键连接起来，B正确；

C；质粒中有抗氨苄青霉素基因；用含有氨苄青霉素的培养基能筛选导入了质粒的大肠杆菌，但该大肠杆菌有可能导入的是空质粒，C错误；

D、图中大肠杆菌感受态细胞可通过Ca2+处理法获得；D正确。

故选C。4、C【分析】【分析】

1.动物细胞培养的流程：取动物组织块（动物胚胎或幼龄动物的器官或组织）→剪碎→用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养瓶中进行原代培养→贴满瓶壁的细胞重新用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞继续传代培养；

2.细胞贴壁和接触抑制：悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上；称为细胞贴壁．细胞数目不断增多，当贴壁细胞分裂生长到表面相互抑制时，细胞就会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的接触抑制。

【详解】

A；处理肝组织块获得到肝细胞悬液用胰蛋白酶；不能用胃蛋白酶，A错误；

B、在培养过程中加入5%的CO2是为了维持培养液pH的相对稳定；B错误；

C；正常细胞不具有无限增殖能力；培养一段时间后会停止分裂，C正确；

D；病毒只能寄生在活细胞中；不能用培养液直接培养，D错误。

故选C。5、B【分析】【分析】

基因工程技术的基本步骤：

（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取；利用PCR技术扩增和人工合成；

（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤；基因表达载体包括目的基因；启动子、终止子和标记基因等；

（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同；导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法；基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法；

（4）目的基因的检测与鉴定：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因—DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA—分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质：分子水平鉴定用抗原—抗体杂交技术；个体水平上的鉴定：抗虫鉴定；抗病鉴定、活性鉴定等。

【详解】

A；①为逆转录过程；需要逆转录酶的催化；②为PCR扩增过程，该过程需要使用Taq酶，A错误；

B；根据题干信息“研究人员构建紫杉醇合成关键酶（Bapt）基因的超表达载体来提高紫杉醇产量”可知；p1303载体上可能含有增强子序列，作用是促进Bapt基因的表达，B正确；

C；因为红豆杉细胞中本身存在Bapt基因；不管超表达载体是否成功导入，都能与Bapt基因探针形成杂交分子，因此不能通过Bapt基因探针来检测步骤⑤是否成功，C错误；

D；要获得细胞产物；只需要培养到愈伤组织阶段即可，不需要培育成完整的红豆杉植株，D错误。

故选B。6、D【分析】【分析】

1；四种育种方法：

。

杂交育种。

诱变育种。

单倍体育种。

多倍体育种。

方法。

（1）杂交→自交→选优。

辐射诱变；激光诱变、化学药剂处理。

花药离体培养；秋水仙素诱导加倍。

秋水仙素处理萌发的种子或幼苗。

原理。

基因重组。

基因突变。

染色体变异（染色体组先成倍减少；再加倍，得到纯种）

染色体变异（染色体组成倍增加）

2；转基因技术是指按照人们的意愿；进行严格的设计，并通过体外DNA重组和转基因等技术，赋予生物以新的遗传特性，从而创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。

【详解】

A；选择育种是一种古老的育种方法；它的局限性在于进展缓慢，可选择的范围有限，A正确；

B；由于基因突变能产生新的基因；所以人工诱变是创造动植物新品种和微生物新类型的重要方法，它突出的优点是可以提高突变率，加速育种工作的进程，B正确；

C；转基因生物的外源基因与细菌或病毒杂交；重组出有害的病原体，故对于基因工程或分子生物学实验室向外排放转基因细菌等必须严加管制，C正确；

D；将两匹奔跑速度快、耐力持久的种马交配；其原理是基因重组，变异是不定向的，所以不一定能够获得跑得快、耐力持久的小马，D错误。

故选D。二、多选题(共9题，共18分)7、B:C【分析】【分析】

胚胎发育过程：（1）卵裂期：细胞进行有丝分裂；数量增加，胚胎总体积不增加；（2）桑椹胚：32个细胞左右的胚胎；（3）囊胚：细胞开始分化，其中个体较大的细胞叫内细胞团将来发育成胎儿的各种组织；而滋养层细胞将来发育成胎膜和胎盘；胚胎内部逐渐出现囊胚腔；（4）原肠胚：内细胞团表层形成外胚层，下方细胞形成内胚层，由内胚层包围的囊腔叫原肠腔。

【详解】

A；由桑椹胚发育到囊胚进行的是有丝分裂；形成的每个细胞内DNA总量不变，A错误；

B；囊胚期细胞出现了细胞分化；但细胞分化的实质是基因的选择性表达，因此其遗传物质未发生改变，B正确；

C；囊胚期内细胞团和滋养层细胞的差异不是DNA复制水平上的差异；而是转录水平上的差异，即基因的选择性表达，C正确；

D；受精卵在输卵管中形成；后在子宫中发育，故胚胎发育的早期不可能在卵巢，D错误。

故选BC。8、A:C:D【分析】【分析】

1；参与果酒制作的微生物是酵母菌；其新陈代谢类型为异养兼性厌氧型。

果酒制作的原理：

（1）在有氧条件下，反应式如下：C6H12O6+6H2O+6O2→6CO2+12H2O；

（2）在无氧条件下，反应式如下：C6H12O6→2CO2+2C2H5OH。

2；参与果醋制作的微生物是醋酸菌；其新陈代谢类型是异养需氧型。果醋制作的原理：当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的果糖分解成醋酸。当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。

【详解】

A；若发酵初期不通入气体；由于锥形瓶中含有少量空气，溶液中酵母菌也可通过有氧呼吸产生二氧化碳，即使没有空气，酵母菌也能通过无氧呼吸产生二氧化碳，因此有气泡产生，A错误；

B；中期可以闻到酒香；说明有酒精产生，即进行了酒精发酵，B正确；

C；由于醋酸菌是嗜氧菌；也是嗜温菌，因此后期接种醋酸菌，需通气并适当升高温度，C错误；

D；醋酸发酵过程中；发酵液的pH会进一步降低，因此图乙中能正确表示pH变化的曲线是②，D错误。

故选ACD。9、B:D【分析】【分析】

基因工程技术的基本步骤：

（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取；利用PCR技术扩增和人工合成。

（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤；基因表达载体包括目的基因；启动子、终止子和标记基因等。

（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同；导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法；基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。

（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术。个体水平上的鉴定：抗虫鉴定；抗病鉴定、活性鉴定等。

【详解】

A；将L1-GFP融合基因插入质粒P0时；使用了El和E4两种限制性核酸内切酶，A错误；

B；可借助基因工程、核移植技术、早期胚胎培养及胚胎移植技术获得转基因的克隆牛；B正确；

C；可采用DNA分子杂交技术检测该融合基因是否存在于转基因牛的不同组织细胞中；抗原-抗体杂交技术用于检测目的基因是否成功表达，C错误；

D；若在某转基因牛皮肤细胞中观察到绿色荧光；则说明L1基因在该细胞中完成表达，D正确。

故选BD。10、C:D【分析】【分析】

题图分析：限制酶SalⅠ有三处切割位点；切割后产生4个DNA片段，泳道①中是用SalⅠ处理得到的酶切产物；限制酶XhoⅠ有2处切割位点，切割后产生3个DNA片段，泳道②中是用XhoⅠ处理得到的酶切产物。

【详解】

A；酶具有专一性；不同的限制酶识别并切割不同的核苷酸序列，A错误；

B；限制酶通过作用于磷酸二酯键得到相应产物；B错误；

C；分析图1；限制酶XhoⅠ有2处切割位点，切割后产生3个DNA片段，泳道②中是用XhoⅠ处理得到的酶切产物，C正确；

D；用两种限制酶同时处理后进行电泳；若某些位点未被切割，则条带可多于6条，D正确。

故选CD。11、A:C:D【分析】【分析】

用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞继续传代培养。动物细胞培养过程中悬液中的细胞会很快贴附在瓶壁上。动物细胞培养的气体环境：95%空气（细胞代谢必需的）和5%CO2。“人造牛肉”的培养不仅产量高；并可以减少成本和降低环境污染。

【详解】

A；胰蛋白酶处理动物组织；可以使组织分散成单个细胞，利于动物细胞培养，A正确。

B、动物细胞培养的气体环境：95%空气（细胞代谢必需的）和5%CO2；B错误。

C；动物细胞培养过程中悬液中的细胞会很快贴附在瓶壁上。所以细胞贴附瓶壁的培养瓶或培养皿的内表面光滑；无毒，易于贴附，如果想得到大量的产物，可以增大细胞吸附面积，有利于细胞贴壁生长，C正确。

D；人造牛肉”的培养有利于牛肉的工厂化生产；同时也可减少对土地、饮用水和饲料的需求，且温室气体等其他环境污染物也会减少，D正确。

故选ACD。12、A:B:C【分析】【分析】

聚羟基脂肪酸酯（PHA）是由嗜盐细菌合成的一种胞内聚酯；要从某咸水湖中寻找生产PHA菌种，首先要进行目的菌株的筛选，可将咸湖水接种在含盐量较高的选择培养基上，筛选培养得到嗜盐细菌；然后，从选择培养基上挑选多个单菌落分别进行扩大培养，扩大培养的培养基是液体培养基；最后检测嗜盐细菌的数目和PHA的产量，选择PHA产量最高的嗜盐细菌作为目的菌株。

【详解】

A；PHA是由嗜盐细菌合成的一种胞内聚酯；要筛选嗜盐细菌，步骤②可用稀释涂布平板法接种到含盐量较高的选择培养基上，A错误；

B；步骤③培养基浓度过高；会导致菌体失水死亡，不利于嗜盐细菌的生长，B错误；

C；步骤④扩大培养应选用液体培养基；液体培养基中无需加入琼脂，C错误；

D；要挑选高产聚羟基脂肪酸酯（PHA）的嗜盐菌；挑取菌落时，应挑取多个菌落并分别测定嗜盐细菌的PHA含量，进行比较，D正确。

故选ABC。13、A:C:D【分析】微生物常见的接种方法（稀释涂布平板法可用于微生物的计数）：

①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板；接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。

②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后；均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。

【详解】

A；平板划线无法得知稀释倍数；不能用于活菌计数，故统计洗手前手部细菌的数量，选择的接种方法是稀释涂布平板法，A错误；

B；除图中操作外；还需要设置一组未接种的空白培养基进行培养，以验证培养基是否被杂菌污染，B正确；

C；由于当两个或多个细胞连在一起时；平板上显示的只是一个菌落，故培养基上的一个菌落可能来源于样品稀释液中的一个、甚至几个活菌，C错误；

D；由于菌落肉眼可见；故初步判断培养基上菌种的类型，可用肉眼观察菌体的形态特征，D错误。

故选ACD。14、A:B【分析】【分析】

动物细胞培养需要满足以下条件：①无菌、无毒的环境：培养液应进行无菌处理。通常还要在培养液中添加一定量的抗生素，以防培养过程中的污染。此外，应定期更换培养液，防止代谢产物积累对细胞自身造成危害。②营养：合成培养基成分：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等。通常需加入血清、血浆等天然成分。③温度：适宜温度。④气体环境：95%空气+5%CO2。

【详解】

A、动物细胞培养中，培养环境中需要O2，也需要CO2（用来维持培养液的pH）；A错误；

B；动物细胞培养不需要脱分化；植物细胞要经过脱分化才形成愈伤组织，B错误；

C；动物细胞培养中常用含糖类、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清的液体培养基；C正确；

D；动物细胞培养过程中会出现接触抑制现象而停止分裂增殖；故培养瓶中的细胞培养到一定阶段后要用胰蛋白酶处理，分瓶后才能继续增殖，D正确。

故选AB。15、B:C:D【分析】【分析】

分析题文描述：题述的疫苗是借助基因工程研制而成的；改造利用的原理是基因重组。疫苗属于抗原，在抗原的刺激下，机体可以产生特异性免疫反应。特异性免疫包括体液免疫与细胞免疫。

【详解】

A；该疫苗是在流感病毒载体上；插入新冠病毒基因片段制成的，改造利用的原理是属于基因重组，A错误；

B；鼻喷疫苗都配有鼻喷装置；以鼻喷接种方式外用，是一种无针、无痛的接种方式，B正确；

C；该疫苗插入的新冠病毒基因片段；需要在细胞内经表达产生蛋白质后，才能发挥作用，C正确；

D；该疫苗可以侵入到人体细胞中；使机体既能产生细胞免疫，又能产生体液免疫，D正确。

故选BCD。三、填空题(共9题，共18分)16、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】远缘杂交的不亲和性细胞遗传细胞免疫、17、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】特定磷酸二酯键特异性18、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】兼性厌氧C6H12O6+6H2O+6O2→6CO2+12H2OC6H12O6→2C2H5OH+2CO219、略

【分析】【分析】

1；动物核移植的概念：将动物的一个细胞的细胞核移入一个去掉细胞核的卵母细胞中；使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育为动物个体，核移植得到的动物称克隆动物；

2；早期胚胎培养的培养液成分；除无机盐和有机盐外，还需要添加维生素、激素、氨基酸、核苷酸等营养成分，并需添加动物血清等天然成分。

【详解】

（1）转基因动物；试管动物和克隆动物分别在体外得到早期胚胎后；都要通过胚胎移植获得新个体。

（2）核移植包括体细胞核移植和胚胎细胞核移植；其中后者更易成功，原因是胚胎细胞分化程度低，恢复全能性相对容易，而体细胞分化程度高，全能性不易表达；核移植常用的减数第二次分裂中期的去核卵母细胞作为受体细胞，其中去核的目的是避免原细胞核中遗传物质对克隆动物的影响，保证克隆动物的核遗传物质来自供体细胞。

（3）促性腺激素处理可促使雌性个体超数排卵；即使良种母牛一次排出多枚卵母细胞。精子需要经过获能处理才能受精；防止多精入卵的两道屏障依次为透明带反应；卵细胞膜反应。

（4）要考虑环境承载力；处理好生物与环境的协调与平衡，这体现了生态工程的协调与平衡原理。

【点睛】

本题考查细胞工程、胚胎工程和生态工程的有关知识，意在考查考生理解能力、获取信息的能力和综合运用能力。【解析】胚胎移植（或胚胎的早期培养和胚胎移植）胚胎细胞分化程度低，恢复全能性相对容易MⅡ中期去核卵母细胞促性腺激素获能透明带反应协调与平衡20、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】贴附在瓶壁上细胞贴壁相互抑制停止分裂增殖细胞的接触抑制。21、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】组织单个细胞培养基生长和繁殖22、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】胰蛋白酶单个细胞细胞悬液原代传代23、略

【分析】【详解】

蛋白质工程是指以蛋白质分子的结构规律及其生物功能的关系作为基础，通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行改造，或制造一种新的蛋白质，其结果是生产自然界没有的蛋白质。【解析】蛋白质工程的结果是生产自然界没有的蛋白质24、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】蛋白质蛋白质抗体抗原－抗体杂交四、判断题(共2题，共12分)25、B【分析】【详解】

胚胎发育早期；细胞数量不断增加，但胚胎总体积不变或略有缩小。

故错误。26、A【分析】【详解】

目前，基因工程技术已被广泛用于改良动植物品种、提高作物和畜产品的产量等方面，例如转基因抗虫植物；将植物花青素代谢相关的基因导入牵牛花中，使其呈现自然界没有的颜色，提高了观赏价值；将外源生长素基因导入鲤鱼体内，转基因鲤鱼生长速率加快等，所以正确。五、实验题(共1题，共7分)27、略

【分析】【分析】据图分析；图示为利用基因工程大量制备α-淀粉酶的过程，目的基因是α-淀粉酶基因，与体构建基因表达载体，然后将目的基因导入大肠杆菌，接着对目的基因进行检测与鉴定，最后利用工程菌培养获得大量的α-淀粉酶产品。

【详解】（1）α-淀粉酶基因来自于海洋细菌；因此为了利用PCR技术扩增α-淀粉酶基因，必须先获得细菌的基因组DNA。

（2）目的基因与运载体结合前需要用限制酶对两者进行切割；延伸是在引物的3’端延伸，为了保证目的基因的完整性，因此需在引物的5’端加上限制性酶切位点，且为了使DNA片段能定向插入表达载体，减少自连，常在两条引物上设计加入不同的限制性酶切位点。

（3）进行扩增时；退火温度的设定与引物有关，延伸时间的设定与扩增片段的长度有关。

（4）根据题意分析；虚线框内mRNA片段内含有24个碱基，每3个碱基构成一个密码子，因此包含24÷3=8个密码子；构成mRNA的碱基有4种，若虚线框后的序列未知，预测虚线框后的第一个密码子最多有4×4-3=13种。

（5）根据表格数据分析可知，在pH为8.5，缓冲液为50mmol/LTris-HCl的条件下；α-淀粉酶相对活性为99.5%，活性最高。

【点睛】解答本题的关键是基因工程的四个基本步骤以及PCR技术的过程、条件，回忆相关知识点和注意事项，结合提示分析答题。【解析】基因组DNA5’使DNA片段能定向插入表达载体，减少自连②⑥813pH为8．5，缓冲液为50mmol/LTris-HCl六、综合题(共3题，共12分)28、略

【分析】【分析】

胚胎移植；又称受精卵移植，是指将雌性动物的早期胚胎，或者通过体外受精及其他方式得到的胚胎，移植雌性动物体内，使之继续发育为新个体的技术。本质是生产胚胎的供体和孕育胚胎的受体共同繁殖后代的过程。其意义为：1.可以充分发挥雌性优良个体的繁殖能力。2.大大缩短了供体本身的繁殖周期。3.增加了供体一生繁殖后代的数量。胚胎移植的生理学基础：（1）同种动物的供，受体的生殖器官的生理变化是相同的，为供体胚胎移入受体提供相同的生理环境。（2）早期胚胎在一定时间内处于游离状态，为胚胎的收集提供了可能。（3）受体对移入子宫的外来胚胎基本上不发生免疫排斥反应，为胚胎在受体内的存活提供了可能。（4）供体胚胎可与受体子宫建立正常的生理和组织联系，但供体胚胎的遗传特性在孕育过程中不受任何影响。

（1）

胚胎工程是指对动物早期胚胎或配子所进行的多种显微操作和处理技术；如体外受精；胚胎移植、胚胎分割、胚胎干细胞培养等技术。体外受精时，精子必须进行获能处理，卵细胞培养到减数第二次分裂中期，才能使精卵细胞具备受精能力。

（2）

由于早期胚胎培养最终得到的是胚胎；不是游离的细胞，所以早期胚胎培养时不需要用胰蛋白酶进行处理使之成为游离的细胞。

（3）

胚胎移植是胚胎工程技术的终端环节；其意义为：可以充分发挥雌性优良个体的繁殖能力，大大缩短了供体本身的繁殖周期，增加了供体一生繁殖后代的数量。由于受体对移入子宫的外来胚胎基本上不发生免疫排斥反应，为外来胚胎能在受体内存活提供了生理学基础。

（4）

由于10代以内的细胞一般能保证正常的二倍体核型；没有发生遗传物质的改变，可保持亲本的优