2025年浙教版选择性必修3生物上册月考试卷含答案

…………○…………内…………○…………装…………○…………内…………○…………装…………○…………订…………○…………线…………○…………※※请※※不※※要※※在※※装※※订※※线※※内※※答※※题※※…………○…………外…………○…………装…………○…………订…………○…………线…………○…………第=page22页，总=sectionpages22页第=page11页，总=sectionpages11页2025年浙教版选择性必修3生物上册月考试卷含答案考试试卷考试范围：全部知识点；考试时间：120分钟学校：______姓名：______班级：______考号：______总分栏题号一二三四五总分得分评卷人得分一、选择题(共9题，共18分)1、科研人员通过研究利用来自埃及血吸虫的特殊蛋白作为治疗性分子，来减少化疗诱导的出血性膀胱炎患者的出血和疼痛症状。若通过破解埃及血吸虫的特殊蛋白的结构从而推出其基因结构，以指导对牛基因的修改，从而让牛也能产生埃及血吸虫的特殊蛋白，此过程的名称和依据的原理分别是（）A.基因突变：DNA→RNA→蛋白质B.蛋白质工程：RNA→RNA→蛋白质C.基因工程：DNA→RNA→蛋白质D.蛋白质工程：蛋白质→RNA→DNA→RNA→蛋白质2、印度沙漠猫是一种珍稀猫科动物,通过胚胎工程技术,可以让家猫代孕而繁育,主要步骤如图所示。下列相关叙述正确的是()

A.步骤甲、乙分别是指精子获能、胚胎分割B.诱导超数排卵所注射的激素只能作用于特定细胞C.受精卵发育成早期胚胎所需营养主要来源于培养液D.步骤甲使用的培养液和早期胚胎培养液成分基本相同3、乳酸乙酯是白酒中重要的呈香物质，由乳酸脱氢酶催化产生，影响白酒品质和风格。科研人员将酿酒酵母质粒上的丙酮酸脱氢酶基因（PD）替换为植物乳杆菌中的乳酸脱氢酶基因（L-PG），可获得乳酸乙酯高产菌株，该过程如下图所示。下列关于该过程的分析不合理的是（）

A.转入的L-PG基因表达产物不能影响酿酒酵母活性B.可以利用PCR技术筛选含有L-PG基因的受体细胞C.通过同源重组实现酵母菌的PD基因被替换为L-PG基因D.标记基因Ampr可检测是否成功构建乳酸乙酯高产菌株4、下图为单克隆抗体制备过程的示意图。下列有关叙述错误的是（）

A.X细胞是从脾脏中提取的已免疫的B淋巴细胞B.Y细胞是杂交瘤细胞，必须取用培养10代以内的细胞C.图中的过程至少需要筛选两次且方法不同，最终保留抗体检测呈阳性的细胞D.图中能产生单克隆抗体的细胞在培养过程中不会出现接触抑制的现象5、自养型微生物与异养型微生物的培养基的主要差别是()A.碳源B.氮源C.无机盐D.特殊营养物质6、黑茶是一种后发酵茶，通常用采摘的鲜茶经过数道工序制成，富含多肽、氨基酸、维生素等营养物质。黑茶刚制成时有酒香气，滑润甘甜，保存时间越久的老茶，茶香味越浓厚。下列叙述错误的是（）A.黑茶制作过程主要利用酵母菌等多种微生物进行发酵B.发酵过程中发酵条件变化会影响微生物的生长繁殖和代谢途径C.黑茶发酵可以将蛋白质、纤维素等大分子转化成小分子有机物D.新茶发酵完成后要进行灭菌并密封，有利于茶的长期保存7、下图为酿造糯米甘蔗酒的生产流程，其中使用的酒曲中含有糖化菌和酿酒菌。下列叙述正确的是（）

A.甘蔗汁和糯米能为酒曲中的菌提供碳源和氮源等B.糖化菌分泌的淀粉酶水解淀粉的过程消耗ATPC.恒温发酵过程中应不断搅拌以增加溶解氧D.若拌曲时被醋酸杆菌污染，会将发酵产物中的乙醇转化为乙酸和CO28、下列实践与基因工程无关的是（）A.研制酵母乙肝疫苗B.细胞产物工厂化生产C.选择“工程菌”来生产胰岛素D.培育转基因抗虫棉9、中科院神经科学研究所宣布克隆出了五只带有节律缺陷的基因编辑猴，这五只猴的供体细胞来自BMAL1基因敲除具有睡眠障碍症状的X猴，下列分析正确的是（）A.克隆猴是有性繁殖的后代，其产生涉及核移植、体外胚胎培养、胚胎移植等技术B.为了保证五只克隆猴的核遗传物质相同，只能在胚胎移植前进行胚胎分割C.遗传背景相同的克隆猴，可用于睡眠障碍症的病因机制研究及药物研制D.为得到大量的克隆猴，需对代孕母猴进行同期发情和超数排卵处理评卷人得分二、多选题(共7题，共14分)10、关于胚胎工程的叙述，不正确的是（）A.胚胎工程的理论基础是体内受精和早期胚胎发育B.胚胎收集中冲卵指的是从母体输卵管中冲取卵子C.受精的标志为雌原核和雄原核融合D.胚胎移植时对所有供体牛和受体牛都要进行同期发情处理11、驱蚊草含有香茅醛，能散发出一种特殊的柠檬型香气，从而达到驱蚊且对人体无害的效果。驱蚊草是把天竺葵的原生质体和香茅草的原生质体进行诱导融合培育而成的。下列关于驱蚊草培育的叙述，错误的是（）A.驱蚊草的培育属于细胞工程育种，优点是克服了远缘杂交不亲和的障碍B.驱蚊草培育过程要用到纤维素酶、果胶酶、PEG等试剂或电刺激等方法C.驱蚊草培育过程不同于植物组织培养，无细胞脱分化和再分化的过程D.驱蚊草培育利用了植物体细胞杂交技术，育种原理是基因突变12、苯丙酮尿症是一种严重的单基因遗传病。图1是某患者的家族系谱图，其中部分成员Ⅰ1、Ⅰ2、Ⅱ1和Ⅱ2的DNA经限制酶MspⅠ酶切，产生不同的片段，经电泳后与相应探针杂交结果见图2.下列分析正确的是（）

A.个体Ⅱ1是杂合体的概率为2/3B.个体Ⅱ2与一杂合体婚配生患病孩子的概率为0C.个体Ⅱ3是隐性纯合体，有19kb探针杂交条带D.个体Ⅱ4可能为杂合体，有2个探针杂交条带13、为保障公共健康；需要定期对公共饮用水进行卫生检测。饮用水的卫生标准是100mL不得检出大肠杆菌或者1000mL不超过3个大肠杆菌。若要确定饮用水是否合格，可采用膜过滤法检测，过程如下图所示。下列相关叙述错误的是（）

A.检测前一般需要对水样收集瓶、培养皿、镊子等进行干热灭菌B.完成过滤后需将滤膜置于固体培养基上，在25℃下培养观察C.为减少实验误差，应按照上述实验步骤多次取样重复进行检测D.可用血细胞计数板直接计数法替代膜过滤法检测饮用水中的大肠杆菌数量14、2020年7月20日，国际医学权威期刊《柳叶刀》上发表了新冠病毒疫苗II期临床试验的成果。该试验是由陈薇院士等人领衔的团队开展的研究，试验中使用的疫苗是一种腺病毒载体重组新冠病毒疫苗(基因重组疫苗)。试验结果表明，单次接种疫苗28天后，99．5%的受试者产生了特异性抗体，95．3%受试者产生了中和抗体，89%的受试者产生了特异性T细胞免疫反应。这表明，陈薇团队研发的新冠疫苗可为健康人群提供“三重保护”，将新冠病毒“拒之门外”。下列叙述正确的是（）A.该疫苗的制备需要用到限制性核酸内切酶和DNA连接酶B.受试者接受重组新冠病毒疫苗的接种后，体内能产生分泌特定抗体的效应T细胞C.主要通过检测受试者体内新冠病毒抗体的含量来评价试验的有效性D.新冠肺炎康复患者可以不注射该疫苗15、2019年12月以来，新型冠状病毒导致的肺炎在世界范围爆发，造成多人死亡。科学工作者经研究，发现了数种快速检验新冠肺炎病原体的方法，以正确诊断。下列与新型冠状病毒研究、诊断有关的说法中正确的是（）A.镜检法：在光学显微镜下直接观察病人的痰液或血液，以发现病原体B.PCR技术：体外基因复制技术，可把病原体的基因逆转录后在几十分钟内扩增到数百万倍C.抗原—抗体法：用特殊制备的病原体蛋白质与病人血清中的相关抗体特异性结合，发现病原体D.DNA探针技术：用放射性同位素、荧光因子等标记的DNA分子做探针，利用DNA分子杂交原理来检测病原体16、基因定点突变技术通过改变基因特定位点的核苷酸来改变蛋白质的氨基酸序列；常用于研究某个氨基酸对蛋白质的影响，其原理是利用人工合成的诱变寡核苷酸引物和多种酶来合成突变基因，过程如图所示。下列分析错误的是（）

A.基因定点突变的原理是使基因发生碱基对的替换B.诱变寡核苷酸引物的延伸需要消耗四种核糖核苷酸C.突变基因的合成是以正常基因的单链作为模板的D.延伸过程遵循碱基互补配对原则，且需要DNA聚合酶的催化评卷人得分三、填空题(共6题，共12分)17、基因的“剪刀”是_____，它的化学本质是_____，它只能识别一种特定的_____，并在_____上切割DNA分子；基因的“针线”是______，它能连接DNA骨架上的_____，DNA的骨架由___________构成；基因的运载体是将_____送入_____的运输工具。目前常用的运载体有_____、________和_____。质粒存在于许多_____和______等生物中，是拟核或_____外能够_____的很小的环状_____。18、其它载体：_______19、注意：a生理基础：______，______

b植物细胞融合前需用______和______除去细胞壁20、近年来，克隆技术的发展取得了巨大突破｡在日常生活中，我们遇到过与克隆技术有关的问题吗？_____。21、我国中科院神经科学研究所团队率先攻克了体细胞克隆灵长类动物这一世界难题｡他们首次成功培育出体细胞克隆猴，分别叫中中和华华（下图）｡猴子与人类同属灵长类，此前克隆灵长类动物在技术上存在着不可逾越的障碍｡克隆猴的诞生打破了这个障碍，也再次引起人们对于克隆人的担忧和猜测｡

从1997年宣布克隆羊多莉（上图）的出生，到2018年克隆猴中中､华华的诞生，这期间一些科学家试图克隆人｡举例说出克隆人面临哪些伦理问题｡_____22、有时还需进行______的鉴定。如转基因抗虫植物是否出现______。评卷人得分四、实验题(共4题，共36分)23、【生物技术实践】

科学家发现家蝇体内存在一种抗菌活性蛋白；这种蛋白质具有极强的抗菌能力，受到研究者重视。

（1）分离该抗菌蛋白可用电泳法，其原理是根据蛋白质分子的______________、大小及形状不同，在电场中的________不同而实现分离。

（2）可用金黄色葡萄球菌来检验该蛋白的抗菌特性。抗菌实验中所用培养基中的牛肉膏和蛋白胨主要为细菌生长提供_________和_______________。

（3）分别在加入和未加入该抗菌蛋白的培养基中接种等量菌液。培养一定时间后，比较两种培养基中菌落的_____________；确定该蛋白质的抗菌效果。

（4）细菌培养常用的接种方法有_______和___________。实验结束后，对使用过的培养基应进行_____________处理。24、某化工厂为了处理排出污水中的一种有害的；难以降解的有机化合物A；其研究团队用化合物A、磷酸盐镁盐和微量元素等配制了培养基，成功地筛选出能高效降解化合物A的细菌（目的菌）。实验的主要步骤如下图所示，请分析回答问题。

（1）在培养基中加入化合物A的目的是______________，这种培养基属于____________培养基。

（2）培养若干天后，应选择培养瓶中化合物A含量__________的培养液，接入新的培养液中连续培养，使目的菌的数量____________。

（3）若要研究目的菌的生长规律，可挑取单个菌落进行液体培养，再采用______方法进行计数。请你预测目的菌的种群数量会发生怎样的变化。

（4）将目的菌用于环境保护实践时，还有哪些问题需要解决？_______

（5）有人提出，可以通过改造细菌的基因来获得能够降解化合物A的细菌，请分析这种方法是否可行。_______25、柑橘溃疡病是由地毯草黄单胞杆菌引起的；发生在柑橘的一种病害；植株受害后会发生落叶、落果，严重时叶片落光，整株枯死。利用基因工程将来自水稻的Xa27基因导入柑橘可获得抗柑橘溃疡病的植株，利用植物组织离体培养技术则可培育无病毒植株。回答下列问题：

(1)为了获得脱毒苗，通常可以选取植株______附近的组织进行离体培养，选取该部位组织的原因是______。

(2)如图1表示科研人员利用柑橘幼苗获得抗病转基因植株的过程：

①基因表达载体必需的结构除复制原点、启动子、终止子、目的基因外，还有______。

②共培养时，Ti质粒的作用是______。

③共培养后，要利用选择培养基进行培养，目的是______。

④再分化过程中，诱导愈伤组织生根、生芽的先后顺序为______。

⑤从个体生物学水平鉴定柑橘再生植株时可采用______（填具体操作）的方法。经鉴定有几棵植株没有抗病的能力，分别提取这几棵植株的DNA，依据______的特异性碱基序列设计引物，扩增后利用______进行检测；结果如图2。

据图2分析，植株A、E、F不具有抗病能力的原因可能是______，植株B、C不具有抗病能力的原因可能是______。26、研究者改造与肠道共生的大肠杆菌；口服该工程菌后激活机体特异性免疫，实现肿瘤的预防和治疗。

(1)部分肠道细菌能够分泌外膜囊泡（OMV）；如图1．OMV能穿越肠道上皮屏障活化肠黏膜内丰富的免疫细胞。细菌溶素A（ClyA）是外膜囊泡上含量较高的特异蛋白。

研究者利用含图2所示元件的表达载体转化大肠杆菌制备工程菌，ClyA基因的作用是_____；Fc表达产物能够与树突状细胞表面的特异性受体结合，提高树突状细胞_____OMV的能力。

(2)为研究上述工程菌在人为可控条件下引发特异性免疫反应的效果，研究者用健康小鼠进行如下实验：。组别第0、3、8天口服工程菌每次服用工程菌12小时后，饮用含阿拉伯糖的水结果检测第1组空载体+第12天，每组随机取5只小鼠等量的脾脏细胞与黑色素瘤细胞共培养，检测杀伤率，结果如图3．第2组ClyA-Fc+第3组ClyA-OVA+第4组第5组

注：“+”；“-”代表是否饮用；

口服工程菌12小时后其在肠道内存在数量较多。

①第4、5组的操作是_____。图3结果说明工程菌在人为可控条件下引发特异性免疫反应，理由是_____。

②为进一步验证上述结论，研究者进行如下实验：先加入_____（填选项前字母）保温后漂洗，再加入_____（填选项前字母）保温后漂洗，检测荧光细胞的数目，若第5组_____为最大值；则上述结论成立。

A．带有红色荧光标记的OVA抗原肽复合物。

B．带有绿色荧光标记的细胞毒性T细胞特异性抗体。

C．第1-5组小鼠脾脏细胞。

③肿瘤患者术后极易复发，研究者重复上表实验，并在第3次口服工程菌后第50天给小鼠注射黑色素瘤细胞。目的是_____。

(3)该工程菌的研发为不同肿瘤的精准治疗和预防提供了可能。依据本研究，设计针对肺癌治疗的工程菌表达载体元件：_____。评卷人得分五、综合题(共4题，共12分)27、微生物培养是指借助人工配制的培养基和人为创造的培养条件,使某些做生物快速生长繁殖的过程。它可以对已纯化的单一菌种进行培养和利用；也可以对混合菌种或自然样品(如土壤)中的微生物进行培养，然后根据培养基上所生长微生物的种类和数量，可在一定程度上估算微生物的多样性与数量。请分析回答下列问题。

（1）将马铃薯去皮切块；加水煮沸一定时间，过滤得到马铃薯浸出液。在马铃薯浸出液中加入一定量蔗糖和琼脂用水定容后灭菌，得到M培养基。马铃薯浸出液为微生物生长提供了多种营养物质，营养物质类型除氮源外还有______________________。若在M培养基中用淀粉取代蔗糖，接种土壤滤液并培养，平板上长出菌落后可通过加入_________(显色剂)筛选出能产淀粉酶的微生物。该方法能筛选出产淀粉酶微生物的原理是_______________________。

（2）为了调查某河流的水质状况；某研究小组采用稀释涂布平板法检测水样中的细菌含量。在涂布接种前，随机取若干灭菌后的空平板先行培养了一段时间，这样做的目的是_______________________________然后，将1mL水样稀释100倍，在3个平板上用涂布法分别接种入0．1mL稀释液。经适当培养后3个平板上的菌落数分别为39；38和37。据此可得出每升水样中的活菌数为_________________

（3）用平板划线法分离水样中的细菌，划线的某个平板培养后，第一划线区域的划线上都不间断地长满了涂，第二划线区域的第一条线上无涂落，其他划线上有菌落。造成划线无菌落可能的操作失误有__________________________________________________________________（答出两条）。若将得到的菌株接种到液体培养基中并混匀，一部分进行静置培养，另一部分进行振荡培养。结果发现振荡培养的细菌比静置培养的细菌生长速度快，分析其原因是___________。28、学习以下材料；回答（1）~（5）题。

CRISPR/Cas基因编辑技术的脱靶检测1987年；科学家发现大肠杆菌基因组DNA中有一些重复结构：一段29个碱基的序列反复出现了多次，两两之间都被32个碱基形成的看似无规律的间隔序列隔开，这种重复结构被命名为CRISPR（图1）。进一步研究发现，多种细菌均有CRISPR结构，且很多间隔序列与侵染细菌的一些噬茵体基因组序列一致。CRISPR的间隔序列转录形成的RNA（sgRNA）在细胞内与Cas9酶结合成复合体，一旦在细胞中发现能与sgRNA配对的DNA分子，Cas9酶就会对该DNA分子进行切割，破坏其功能（图2）。

科学家基于此；构建了对DNA序列进行定点切割的CRISPR/Cas9基因编辑技术。将编码Cas9酶和sgRNA的基因作为目的基因，构建基因表达载体后导入受体细胞，可对细胞内某个基因定点切割，引发被切割部位的随机突变。科研人员在CRISPR/Cas9编辑系统基础上开发了CBE单碱基编辑系统，将Cas9酶替换成CBE融合蛋白，能将靶位点的胞嘧啶C脱氦基成尿嘧啶U，进而通过DNA复制实现碱基对替换。

基因编辑可能造成非目标序列的碱基改变；称为脱靶。我国科研工作者建立了一种脱靶检测技术，在小鼠受精卵分裂到2细胞时期，编辑其中1个，胚胎继续发育到14.5天时，利用细胞分选技术选出被编辑过和未被编辑过的细胞，再进行DNA提取和全基因组测序，比较两组差异（图3）。脱靶检测发现CRISPR/Cas9编辑系统脱靶率较低，而CBE系统脱靶率较高，必须加以改进才能应用于遗传病的临床治疗。

（1）列表比较限制性内切核酸酶和CRISPR/Cas9复合体作用的异同点。_______________________

（2）大肠杆菌不同菌株CRISPR区域中的间隔序列是不同的，导致这种差异最可能的原因是___________。

（3）CBE编辑系统将靶位点胞嘧啶脱氨基后，细胞复制___________次后，子代DNA中靶位点碱基对由C-G彻底替换成______________；实现单碱基编辑。

（4）小鼠受精卵可以从雌鼠输卵管中采集或通过____________技术获得。向2细胞期胚胎中的1个细胞进行显微注射时，因不需长期在受体细胞中稳定存在和表达，可以以RNA形式注入的有___________（填序号）。

①Cas9mRNA②CBEmRNA

③sgRNA④标记基因RNA

（5）脱靶检测过程中标记基因的作用是___________。与用同一品系小鼠不同受精卵进行脱靶检测相比，上述脱靶检测技术更加精准，原因是____________。29、柑橘汁生产过程中出现的苦味问题一直备受关注。柑橘类果汁中主要有柚皮苷和柠檬苦素（C26H30O8）两类产生苦味的物质，分离培养高效降解柠檬苦素的菌株，可有效解决柑橘汁苦味的问题。某兴趣小组同学进行了柠檬苦素高效降解菌的分离和筛选实验。下表为选择培养基的配方，回答下列问题：。K2HPO4KClMgSO4KNO3酵母膏琼脂H2ONaCl柠檬苦素10g5g5g3g1g20g1000mL2g20g

(1)从该培养基的配方来看，能提供氮源的物质有_______，该培养基的选择作用主要通过表中_____成分来实现。配制培养基时，需对玻璃器皿采用_______法进行灭菌。

(2)用接种环轻轻刮取初筛得到的菌株，接入50mL牛肉膏蛋白胨液体培养基中，37℃、150r/min摇床培养12h；取适量菌液接种到上述培养基中，重复多次，得到不同的菌落。

①菌株接入牛肉膏蛋白胨液体培养基中，目的是对菌体进行_______；

②摇床培养过程中不断振荡的作用是_______；同时可说明该菌新陈代谢的基本类型为______；

③采用稀释涂布平板法将菌液接种于选择培养基上，经过培养，平板上生长着大量的菌落，难以数清，造成该现象的原因最可能是_______。

(3)从上述不同形态的菌落挑取样品，并进行涂布、划线纯化培养，最终纯化出8株菌，分别编号为1、2，3，4，5，6、7、8．在相同条件下，测定这8株菌对柠檬苦素的降解率，得到如图所示结果。从柱形图可看出，降解柠檬苦素能力最强的是____号菌株。

30、SD藻是一种可以生产生物柴油的海洋单细胞生物。SD藻可利用光能合成糖类进行生长；在SD藻的脂肪酸合成过程（如图，示意图）中，乙酰辅酶A羧化酶（ACCase）是脂肪酸合成关键酶。研究者通过技术手段改变编码SD藻ACCase基因的第1999位碱基可以提高油脂合成量。在大规模生产中，研究者会挑选颜色较绿且繁殖更快的SD藻，这种SD藻可以生成更多油脂，以获得更多生物柴油。

(1)SD藻叶绿体具有的功能有：_________，SD的内质网具有的功能有_________。（编号选填）

①暂时储存有机物的场所②能量转化的场所③清除衰老细胞结构的场所④发生蛋白质加工的场所⑤物质转化的场所。

(2)根据题中信息，能合成脂肪酸的SD藻属于____。A．RNA病毒B．原核生物C．DNA病毒D．真核生物(3)改变编码SD藻乙酰辅酶A化基因的第1999位碱基，对该酶产生了什么影响?列举其中3个：__________________________________。

(4)若须在实验室中培养SD藻并大量合成脂肪酸，从下列①-⑥中，选择并组合形成合理的原料配置方案:__________。（编号选填）

①大量有机碳源②氮源③少量无机碳源④Mg2+等金属离子⑤血浆生长因子⑥大量无机碳源。

(5)颜色较绿且繁殖更快的SD藻细胞，为什么可以生成更多生物柴油?阐述分析过程__________。

表列出了在连续的时期I～V中，SD藻细胞内发生的事件。时期细胞内事件I①细胞核位于细胞中央；②遗传物质复制II③染色质凝集成团块状；④核膜消失Ⅲ⑤染色质团排在细胞中央；⑥形成桶状纺锤体IV⑦染色质团平均厚度是0.5-0.6m；⑧染色质团分成均等的两团V⑨核膜重新出现；⑩染色质团随胞质分而分至两个子细胞

(6)根据题意推测，表1中描述的是SD藻的哪个过程:__________。（编号选填）

①有丝分裂②细胞分化③细胞凋亡④细胞衰老⑤减数分裂。

(7)表1①-⑩中，支持你做出第6中判断的遗传物质方面的证据是:_______；支持你做出第6题中判断的其他细胞结构方面的证据是:________（编号选填）参考答案一、选择题(共9题，共18分)1、D【分析】【分析】

1；基因突变是基因结构的改变；包括碱基对的增添、缺失或替换。基因突变发生的时间主要是细胞分裂的间期。

2；蛋白质工程的本质是通过基因改造或基因合成；对先有蛋白质进行改造或制造新的蛋白质，所以被形象地称为第二代基因工程；基因工程在原则上只能生产自然界已存在的蛋白质。

【详解】

本题通过改造基因来实现对蛋白质的改造；属于蛋白质工程，该工程依据的原理为蛋白质→RNA→DNA→RNA→蛋白质。

故选D。2、B【分析】【分析】

分析题图：步骤甲为受精作用；步骤乙为胚胎移植，其中诱导超数排卵用的是促性腺激素，受精过程使用的培养液是获能溶液或专用受精溶液，早期胚胎培养的培养液成分，除了一些无机盐和有机盐类外，还需添加维生素；激素、氨基酸、核苷酸以及血清等。

【详解】

A；步骤甲、乙分别指受精作用、胚胎移植；A错误；

B；诱导超数排卵所注射的激素是促性腺激素；只能作用于性腺，B正确；

C；受精卵发育成早期胚胎所需营养主要来自受精卵；C错误；

D；受精过程使用的培养液是获能溶液或专用的受精溶液；与早期胚胎培养液有区别，D错误。

故选B。

【点睛】

本题是对胚胎工程的考查，解答本题的关键在于理解试管动物培养的过程、超数排卵的激素作用特点和早期胚胎培养的营养物质来源以及几种不同培养液的成分：动物细胞培养液、植物组织培养基成分、体外受精培养液、早期胚胎培养液。3、D4、B【分析】【分析】

分析图示可知；给小鼠注射抗原后，从小鼠体内收集经过免疫的细胞（X细胞），与体外培养的Y（骨髓瘤细胞）细胞融合，经过培养后筛选能产生特异性抗体的杂交瘤细胞。

【详解】

A；单克隆抗体的制备是用经过免疫的B细胞和骨髓瘤细胞融合；制备杂交瘤细胞，所以X细胞是从脾脏中提取的已免疫的B淋巴细胞，A正确；

B；Y细胞是骨髓瘤细胞；B错误；

C；图中筛选过程至少两次且方法不同；第一次筛选是选择杂交瘤细胞，需要抑制同种细胞的融合体、以及未融合的细胞的增殖；第二次筛选是用抗体检测的方法选择能产生特异性抗体的杂交瘤细胞，最终保留抗体检测呈阳性的细胞，C正确；

D；由于杂交瘤细胞即保留了骨髓瘤细胞无限增殖的特点；又有浆细胞产生特异性抗体的作用，所以图中能产生单克隆抗体的细胞在培养过程中不会出现接触抑制的现象，D正确。

故选B。

【点睛】5、A【分析】【详解】

自养型微生物与异养型微生物的主要差别在于自养型微生物可以利用无机碳合成自身的有机物；用于各项生命活动；而异养型微生物只能以有机碳作为碳源，所以两种培养基的主要差别在于碳源，A正确。

故选A。6、D【分析】【分析】

酒精发酵是在无氧条件下；微生物（如酵母菌）分解葡萄糖等有机物，产生酒精；二氧化碳等不彻底氧化产物，同时释放出少量能量的过程。

【详解】

A；黑茶刚制成时有酒香气；说明黑茶制作过程中有酵母菌（无氧呼吸可以产生酒精）的参与，A正确；

B；发酵一般为微生物的无氧呼吸（部分为有氧呼吸）；温度、pH、氧气含量等等发酵条件，都会影响到微生物的生长繁殖和代谢途径，B正确；

C；黑茶富含多肽、氨基酸、维生素等营养物质；说明黑茶发酵可以将蛋白质、纤维素等大分子转化成小分子有机物，C正确；

D；老茶保存过程中仍在发酵；因此新茶发酵完成后进行灭菌并密封不利于进一步发酵，D错误。

故选D。7、A【分析】【分析】

果酒的制作离不开酵母菌；酵母菌是兼性厌氧微生物，在有氧条件下，酵母菌进行有氧呼吸，大量繁殖，把糖分解成二氧化碳和水；在无氧条件下，酵母菌能进行酒精发酵。故果酒的制作原理是酵母菌无氧呼吸产生酒精。

【详解】

A；甘蔗汁和糯米中含有蛋白质（元素组成是C、H、O、N等）和糖（元素组成是C、H、O）等物质；能为酒曲中的菌提供碳源和氮源等，A正确；

B；酶的作用机理是降低化学反应的活化能；糖化菌分泌的淀粉酶水解淀粉的过程不需要消耗ATP，B错误；

C；发酵过程中有酿酒菌；主要是酵母菌，酵母菌需要在无氧条件下进行发酵，故不能搅拌增加溶解氧，C错误；

D；若拌曲时被醋酸杆菌污染；由于缺少糖源，此时醋酸杆菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为乙酸，D错误。

故选A。8、B【分析】【分析】

1；植物基因工程的应用：（1）抗虫转基因植物；（2）抗病转基因植物；（3）抗逆转基因植物；（4）转基因改良植物品质。总之基因工程在农业上用于生产高产、稳产和具有优良品质的品种；能产生抗逆性品种。

2；动物基因工程的成果：（1）提高动物的生长速度：外源生长激素基因；（2）改善畜产品的品质；（3）转基因动物生产药物；（4）转基因动物作器官移植的供体；（5）基因工程药物；如人胰岛素、细胞因子、抗体、疫苗、生长激素、干扰素等。

【详解】

A；将乙肝病毒相关基因转入酵母菌；获得乙肝疫苗，运用了基因工程，A错误；

B；将一种植物的叶绿体移入另一种植物以提高光合作用效率；这属于细胞工程技术的应用，与基因工程无关，B正确；

C；选择“工程菌”来生产胰岛素；需要将胰岛素基因导入工程菌，属于基因工程技术的应用，因此与基因工程有关，C错误；

D；培育转基因抗虫棉；需要将抗虫基因导入棉花细胞内，属于基因工程技术的应用，因此与基因工程有关，D错误。

故选B。9、C【分析】【分析】

克隆属于无性繁殖；在克隆过程中无需对代孕母体进行超数排卵处理，进行同期发情处理后进行胚胎移植即可。

【详解】

A；克隆猴属于无性繁殖；A错误；

B；为了保证五只克隆猴的核遗传物质相同；供体细胞相同即可，无需胚胎分割，B错误；

C；遗传背景相同的克隆猴；带有节律缺陷的基因编辑猴具有睡眠障碍症状，可用于睡眠障碍症的病因机制研究及药物研制，C正确；

D；不需要对代孕母猴进行超数排卵处理；进行同期发情处理后进行胚胎移植即可，D错误。

故选C。二、多选题(共7题，共14分)10、B:C:D【分析】【分析】

1；胚胎工程--指对动物早期胚胎或配子所进行的多种显微操作和处理技术；如体外受精、胚胎移植、胚胎分割、胚胎干细胞培养等技术。经过处理后获得的胚胎，还需移植到雌性动物体内产生后代，以满足人类的各种需求。理论基础：哺乳动物的体内受精和早期胚胎发育规律。

2；精过程为：顶体反应→穿越放射冠→穿越透明带（透明带反应）→卵细胞膜反应（卵黄膜封闭作用）→卵子完成减数第二次分裂并释放第二极体→雌雄原核的形成、核膜消失；雌、雄原核融合形成合子→第一次卵裂开始。

3；胚胎移植的基本程序主要包括：①对供、受体的选择和处理（选择遗传特性和生产性能优秀的供体；有健康的体质和正常繁殖能力的受体。用激素进行同期发情处理，用促性腺激素对供体母牛做超数排卵处理）；②配种或人工授精；③对胚胎的收集、检查、培养或保存（对胚胎进行质量检查，此时的胚胎应发育到桑椹或胚囊胚阶段）；④对胚胎进行移植；⑤移植后的检查。

【详解】

A；胚胎工程的理论基础是哺乳动物的体内受精和早期胚胎发育规律；A正确；

B；胚胎收集中冲卵指的是从母体输卵管中冲取早期胚胎；B错误；

C；受精的标志为在卵黄膜和透明带之间观察到两个极体；C错误；

D；胚胎移植时对供体母牛和受体牛都要进行同期发情处理；对供体公牛不需要进行同期发情处理，D错误。

故选BCD。

【点睛】11、C:D【分析】【分析】

植物的体细胞杂交是将不同植物的细胞通过细胞融合技术形成杂种细胞；进而利用植物的组织培养将杂种细胞培育成多倍体的杂种植株。在进行植物体细胞杂交时需要使用纤维素酶和果胶酶去掉植物细胞的细胞壁，使用化学方法（聚乙二醇）或物理方法诱导原生质体融合，不能用灭活的病毒诱导。可根据植物细胞的质壁分离和复原鉴定杂种细胞是否再生细胞壁，从而确定原生质体融合是否完成。植物体细胞杂交的意义：在克服远源杂交不亲和的障碍；培育作物新品种方面所取得的重大突破。

【详解】

A；驱蚊草是把天竺葵的原生质体和香茅草的原生质体进行诱导融合培育而成的；采用了植物体细胞杂交技术，属于细胞工程育种，其优点是能克服远缘杂交不亲和的障碍，A正确；

B；要获得天竺葵的原生质体和香茅草的原生质体；需要采用酶解法（纤维素酶、果胶酶），诱导天竺葵的原生质体和香茅草的原生质体的融合可采用化学法（PEG等试剂）或物理法（电刺激等），B正确；

C；驱蚊草培育过程不同于植物组织培养；但需要采用植物组织培养技术，因此有细胞脱分化和再分化的过程，C错误；

D；驱蚊草培育利用了植物体细胞杂交技术；育种原理是染色体数目变异，D错误。

故选CD。12、B:C:D【分析】苯丙酮尿症是一种严重的单基因遗传病，假设该病受一对等位基因A、a控制，分析图1，Ⅰ1、Ⅰ2都无病，但其女儿Ⅱ3却有病，所以该病为常染色体隐性遗传病，Ⅱ3基因型为aa，Ⅰ1和Ⅰ2的基因型都为Aa，再结合图2的酶切结果可知，Ⅰ1、Ⅰ2、Ⅱ1的基因型相同，因此Ⅱ1的基因型为Aa，Ⅱ2表现正常，且从酶切结果看，Ⅱ2与Ⅱ1基因型（Aa）不同，所以Ⅱ2的基因型为AA，由此可以推知，23kb探针杂交条带对应正常显性基因A，19kb探针杂交条带对应隐性基因a。

【详解】

A、由分析可知，个体Ⅱ1的基因型为Aa；杂合体的概率为1，A错误；

B、由分析可知，个体Ⅱ2的基因型为AA；与杂合体Aa婚配，生患病孩子aa的概率为0，B正确；

C、个体Ⅱ3是患者，是隐性纯合体，故有19kb探针杂交条带；C正确；

D、个体Ⅱ4是Ⅰ1（Aa）和Ⅰ2（Aa）所生的表现正常的后代；基因型可能是AA或Aa，若为杂合体就有2个探针杂交条带，D正确。

故选BCD。13、B:D【分析】【分析】

细菌的数目可以通过滤膜法来测定。将已知体积的水过滤后；将滤膜放在伊红美蓝培养基上培养。在该培养基上，大肠杆菌的菌落呈黑色，根据黑色菌落的数目，计算水样中大肠杆菌的数量。微生物接种时，为了避免其它杂菌的污染，接种过程要进行无菌操作。灼烧灭菌常适用于接种环；接种针；干热灭菌常适用于玻璃器皿（吸管、培养皿）和金属用具；高压蒸汽灭菌常适用于无菌水、培养基。

【详解】

A；检测前需要对水样收集瓶、滤膜、培养基、镊子灭菌；防止杂菌干扰，A正确；

B；完成过滤后需将滤膜置于固体培养基上；在37℃下培养观察，B错误；

C；为减少实验误差；按照上述实验步骤多次取样重复进行检测，取平均值作为实验数据，C正确；

D；大肠杆菌较小；不能用血细胞计数板直接计数法替代膜过滤法检测，D错误。

故选BD。14、A:C:D【分析】【分析】

疫苗研制已经发展了三代：

第一代疫苗指的是灭活疫苗和减毒活疫苗；通过体外培养病毒，然后用灭活的病毒刺激人体产生抗体，它是使用最为广泛的传统疫苗；

第二代疫苗又称为亚单位疫苗；是通过基因工程原理获得的具有免疫活性的病原特异性结构蛋白，刺激人体产生抗体；

第三代疫苗是核酸疫苗；又称基因疫苗，包括DNA疫苗和mRNA疫苗，其中DNA疫苗是将编码某一抗原蛋白的基因作为疫苗，注射到人体中，通过正常的人体生理活动产生抗原蛋白，诱导机体持续作出免疫应答产生抗体。

【详解】

A；该疫苗是基因重组疫苗；需要将腺病毒载体和新冠病毒的基因进行连接，所以该疫苗的制备需要用到限制性核酸内切酶和DNA连接酶，A正确；

B；受试者接受重组新冠病毒疫苗的接种后；体内能产生分泌特定抗体的浆细胞，B错误；

C；主要通过检测受试者体内新冠病毒抗体的含量来评价试验的有效性；C正确；

D；新冠肺炎康复患者体内产生了新冠病毒抗体和和相应的记忆细胞；可以不注射该疫苗，D正确。

故选ACD。15、B:C:D【分析】【分析】

1；PCR全称为聚合酶链式反应；是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术；原理：DNA复制。前提条件：要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一对引物；条件：模板DNA、四种脱氧核苷酸、一对引物、热稳定DNA聚合酶（Taq酶）；过程：①高温变性：DNA解旋过程；②低温复性：引物结合到互补链DNA上；③中温延伸：合成子链；

2；基因工程的基本操作步骤主要包括四步：①目的基因的获取；②基因表达载体的构建；③将目的基因导入受体细胞；④目的基因的检测与鉴定。

【详解】

A；镜检法：在电子显微镜下直接观察病人的痰液或血液；以发现病原体，但光学显微镜不能观察到新冠病毒，A错误；

B；PCR技术：体外基因复制技术；可在几十分钟内把病原体的基因扩增到数百万倍，再经过电泳与病毒样本进行对比，便能知道是否感染病毒，B正确；

C；病毒进入人体后会刺激机体产生特异性免疫反应；产生相应抗体，由于抗体与抗原结合具有特异性，因此抗原通过用特殊制备的病原体蛋白质与病人血清中的相关抗体特异性结合以发现病原体，C正确；

D；DNA探针技术：用放射性同位素、荧光因子等标记的DNA分子做探针；利用核酸分子杂交原理来检测病原体，鉴定被检测标本上的遗传信息，达到检测是否感染病毒的目的，D正确。

故选BCD。16、B:C【分析】【分析】

1；DNA复制过程为：

（1）解旋：需要细胞提供能量；在解旋酶的作用下，两条螺旋的双链解开。

（2）合成子链：以解开的每一段母链为模板；在DNA聚合酶等酶的作用下，利用游离的4种脱氧核苷酸为原料，按照碱基互补配对原则，合成与母链互补的子链。

（3）形成子代DNA分子：延伸子链；母链和相应子链盘绕成双螺旋结构。

2；特点：边解旋边复制；复制方式：半保留复制。

3；条件：模板是亲代DNA分子的两条链；原料是游离的4种脱氧核苷酸；能量是ATP；酶是解旋酶、DNA聚合酶。

【详解】

A；定点突变改变特定位点的核苷酸；先是人工合成诱变寡核苷酸引物，随后经过延伸和复制，产生新的突变基因，A正确；

B；诱变寡核苷酸引物的延伸需要消耗四种脱氧核苷酸；B错误；

C；突变基因的合成以正常基因的单链为模板；C错误；

D；延伸过程中遵循碱基互补配对原则；该过程需要将脱氧核苷酸连接起来，所以需要DNA聚合酶的催化，D正确。

故选BC。三、填空题(共6题，共12分)17、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】限制酶蛋白质核苷酸序列特定的切点DNA连接酶缺口磷酸-脱氧核糖外源基因受体细胞质粒噬菌体动植物病毒细菌酵母菌细胞核自主复制DNA分子18、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】噬菌体、动植物病毒19、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】细胞膜流动性植物细胞全能性纤维素酶果胶酶20、略

【分析】【详解】

在日常生活中；我们遇到过的与克隆技术有关的问题有：

①濒临灭绝动物的克隆：克隆可以拯救濒危的国家保护动物以及植物；我们可运用克隆，复制濒临灭绝的生物，让其不至于在我们的生活中消失；

②农业克隆：应用于农业等领域；通过转基因的方式，增加粮食的亩产量，提高土地的单位出产量；

③细胞克隆替代或者修复人体细胞问题；比如胚胎干细胞；

④畜牧业克隆：应用于畜牧业，提升优良品种群体基数，缩短畜牧育种年限。【解析】有，比如：①濒临灭绝动物的克隆；②农业克隆：应用于农业等领域，通过转基因的方式，增加粮食的亩产量，提高土地的单位出产量；③细胞克隆替代或者修复人体细胞问题，比如胚胎干细胞；④畜牧业克隆：应用于畜牧业，提升优良品种群体基数，缩短畜牧育种年限。21、略

【分析】【详解】

①克隆人是对人权和人的尊严的挑战：

人不仅是自然人；在生物进化中人自从脱离了动物界，还成为有价值观念的社会的人，因此人是具有双重属性的，是生物；心理和社会的集合体。克隆人也就是人工无性生殖的人，只在遗传性状上与原型人一致，而人的心理、行为、社会特征和特定人格是不能克隆的，因此克隆人是不完整的人，是一个丧失自我的人，严重违反了人权，危害人类尊严；

②克隆人冲击了现有的婚姻家庭和两性关系等传统的伦理道德观念：

克隆人的出现将彻底搅乱代际关系和家庭伦理定位；克隆人过程中可以出现体细胞核供者；卵细胞供者以及孕育者三位生物学父母，以及抚养者的社会学父母的多种选择，被克隆者只是生物学上复制，人类世代的传承也将被打破，家庭伦理关系含混不清；

③克隆人是制造在心理上和社会地位上都不健全的人；

④克隆人违反生物进化的自然发展规律：

人类所以发展到如此高的进化文明程度，是由其自然发展规律形成的。而克隆人要把有性生殖倒退到无性生殖，这种行为如不加阻止，必将给人类种下无穷的灾难。【解析】①克隆人是对人权和人的尊严的挑战；②克隆人冲击了现有的婚姻家庭和两性关系等传统的伦理道德观念；③克隆人是制造在心理上和社会地位上都不健全的人；④克隆人违反生物进化的自然发展规律等。22、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】个体生物学水平抗虫性状。四、实验题(共4题，共36分)23、略

【分析】【详解】

（1）电泳法分离蛋白质；是根据蛋白质分子的电荷；大小及形状不同，在电场中的迁移速度不同而实现分离。

（2）牛肉膏和蛋白胨中蛋白质较多；可作为碳源和氮源。

（3）加入抗菌蛋白的培养基中；金黄色葡萄球菌应该不能生长或生长很少，未加入抗菌蛋白的培养基中金黄色葡萄球菌应该能生长，菌落较多。

（4）平板划线法、稀释涂布平板法都能使接种的菌种在固体培养上充分分散，对使用过的培养基应进行灭菌处理，是为了防止细菌扩散污染。【解析】①.电荷（带电情况）②.迁移速度③.碳源④.氮源⑤.数量⑥.平板划线法⑦.稀释涂布平板法（稀释混合平板法）⑧.灭菌24、略

【分析】【分析】

分析题干信息；该实验的目的是筛选出高效降解化合物A的细菌，在以化合物A为唯一碳源的培养基中只有能降解化合物A的微生物才能以化合物A为碳源和氮源生长繁殖，不能利用化合物A的微生物因缺乏碳源和氮源，无法生长繁殖。

【详解】

（1）由题意可知；本实验是分离出降解的有机化合物A的菌种，所以培养基中加入化合物A的目的是筛选降解的有机化合物A的菌种，这种培养基属于选择培养基。

（2）由于“目的菌”有降解的有机化合物A的作用；所以培养若干天后，应选择培养瓶中化合物A含量低的培养基，接入新的培养液中连续培养，使“目的菌”的数量进一步增加。

（3）若研究“目的菌”的群体生长规律；将单个菌落进行液体培养，再采用稀释涂布平板方法进行计数。培养液中目的菌的种群数量在开始一段时间范围内，由于营养充分；空间充裕，种群数量类似于“J”形增长，随着营养物质的消耗，种群增长速率逐渐下降，最终会达到K值，继续培养，由于营养物质缺乏、有害代谢物积累、pH改变等，种群数量将会下降。

（4）将目的菌用于环境保护实践之前；还要对目的菌进行研究，检测其是否会产生对环境有害的代谢物；当使用大量目的菌时会不会使目的菌成为优势菌群，对其他微生物的生存构成威胁，从而打破微生物菌群的平衡等。

（5）可以利用基因工程的方法；将能降解化合物A的基因导入受体菌中来实现。但在使用之前要检验其安全性。

【点睛】

本题考查了微生物分离与培养的有关知识，要求考生能够识记培养基的成分和培养条件，掌握微生物分离与纯化的方法与步骤，再结合所学知识准确判断。【解析】筛选出能降解化合物A的细菌选择低增多稀释涂布平板培养液中目的菌的种群数量在开始一段时间范围内，由于营养充分、空间充裕，种群数量类似于“J”形增长，随着营养物质的消耗，种群增长速率逐渐下降，最终会达到K值，继续培养，由于营养物质缺乏、有害代谢物积累、pH改变等，种群数量将会下降将目的菌用于环境保护实践之前，还要对目的菌进行研究，检测其是否会产生对环境有害的代谢物；当使用大量目的菌时会不会使目的菌成为优势菌群，对其他微生物的生存构成威胁，从而打破微生物菌群的平衡等可以利用基因工程的方法，将能降解化合物A的基因导入受体菌中来实现。但在使用之前要检验其安全性25、略

【分析】【分析】

1；基因工程的基本操作步骤：①目的基因的获取和筛选；②基因表达载体的构建；③将目的基因导入受体细胞；④目的基因的检测与鉴定；

2；植物顶端分生区附近(如茎尖)的病毒极少；甚至无病毒，切取一定大小的茎尖进行组织培养，再生的植株就有可能不带病毒，从而获得脱毒苗。

【详解】

（1）为了获得脱毒苗；通常选取植株茎尖（或顶端分生区附近的组织）进行离体培养，选取该组织的原因是此处病毒极少甚至无病毒。

（2）①基因表达载体上除有复制原点；启动子、终止子、目的基因外；还有标记基因（便于筛选目的基因）；

②农杆菌Ti质粒上的T-DNA片段可以携带目的基因并整合至植物细胞的染色体DNA上；

③选择培养的目的是筛选出含有目的基因的柑橘细胞；

④先诱导生芽有利于生根；故再分化阶段，需要先诱导愈伤组织生芽，待长出芽后，再将其转接到诱导生根的培养基上，进一步诱导形成试管苗；

⑤在个体生物学水平可用接种地毯草黄单胞杆菌（或喷施地毯草黄单胞杆菌菌液）的方法，观察植株是否患有柑橘溃疡病来直接鉴定再生植株；分析再生植株没有抗病能力的原因，可以提取各植株的DNA，依据Xa27基因（目的基因）的特异性碱基序列设计引物，扩增后用（凝胶）电泳分离PCR产物进行检测；植株B、C没有出现条带，则可能是因为没有导入目的基因；植株A、E、F出现条带但不具有抗病能力，则可能是因为导入植物细胞的目的基因不能转录或转录后未翻译或翻译出的蛋白质没有活性等。【解析】(1)茎尖（或顶端分生区）此处病毒极少甚至无病毒。

(2)标记基因携带目的基因并整合至植物细胞的染色体DNA上筛选出含有目的基因的植物细胞先诱导生芽，再诱导生根接种地毯草黄单胞杆菌（或喷施地毯草黄单胞杆菌菌液）Xa27基因（凝胶）电泳导入植物细胞的目的基因不能表达（或不能转录，转录后不能翻译，翻译出的蛋白质没有活性等，合理即可）没有导入目的基因26、略

【分析】【分析】

树突状细胞为抗原呈递细胞；可识别；摄取和传递抗原信息。

【详解】

（1）细菌溶素A（ClyA）是外膜囊泡上含量较高的特异蛋白；而OMV能穿越肠道上皮屏障活化肠黏膜内丰富的免疫细胞。所以，ClyA基因的作用为表达出细菌溶素A（ClyA），使OVA和Fc定位至OMV表面，进而融合基因可以被免疫细胞识别。Fc表达产物能够与树突状细胞表面的特异性受体结合，进而提高树突状细胞识别；摄取和传递抗原信息的能力。

（2）①根据表格和柱状图可知；服用的工程菌采用“加法原理”，逐渐增加部件，且第4组和第5组工程菌都是完整的，即第4组:ClyA-OVA-Fc第5组:ClyA-OVA-Fc，但是第4组饮用含阿拉伯糖的水，进而激活融合基因的表达；第5组不饮用含阿拉伯糖的水，不能激活融合基因的表达。所以，第3；5组含有OVA，在人为控制口服阿拉伯糖后产生OMV，激活特异性免疫，对肿瘤细胞的杀伤率较高；1、2组缺乏OVA，第4组无阿拉伯糖诱导，杀伤率均低。

②小鼠脾脏细胞具有免疫细胞；可在抗原刺激下引起特异性免疫。带有红色荧光标记的OVA抗原肽复合物可引起小鼠脾脏细胞发生特异性免疫，故先加入第1-5组小鼠脾脏细胞和带有红色荧光标记的OVA抗原肽复合物进行保温，判断特异性免疫的强度；

故选AC。

再加入带有绿色荧光标记的细胞毒性T细胞特异性抗体；目的是检测OVA抗原肽复合物是否能够产生特异性细胞毒性T细胞。

故选B。

若第5组同时被红色和绿色荧光标记的细胞数目占比越多；说明工程菌在人为可控条件下引发特异性免疫反应，结论成立。

③肿瘤患者术后极易复发；说明特异性免疫功能减弱。所以，可多次注射黑色素瘤细胞，进而研究该口服工程菌是否能够诱发长期免疫记忆，从而抑制肿瘤复发。

（3）本实验中融合基因里面有OVA（黑色素瘤细胞特异性抗原），所以只需将OVA替换为肺癌细胞特异性抗原即可。即将元件中的OVA替换为肺癌细胞特异性表达的抗原基因。【解析】(1)表达ClyA；使OVA和Fc定位至OMV表面识别；摄取。

(2)第4组:ClyA-OVA-Fc和-第5组:ClyA-OVA-Fc和+第3；5组含有OVA；在人为控制口服阿拉伯糖后产生OMV，激活特异性免疫，对肿瘤细胞的杀伤率较高;1、2组缺乏OVA，第4组无阿拉伯糖诱导，杀伤率均低ACB同时被红色和绿色荧光标记的细胞数目占比研究该口服工程菌是否能够诱发长期免疫记忆，从而抑制肿瘤复发。

(3)将元件中的OVA替换为肺癌细胞特异性表达的抗原基因五、综合题(共4题，共12分)27、略

【分析】【分析】

1；微生物培养基的主要营养成分有碳源、氮源、水和无机盐等。

2；微生物常用的接种方法有平板划线法、稀释涂布平板法。

3；每克样品中的菌株数=（C÷V）×M；其中C代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数，V代表涂布平板时所用的稀释液的体积（ml），M代表稀释倍数。

【详解】

（1）微生物生长繁殖所必需的营养物质主要包括碳源；氮源、水和无机盐等；淀粉遇碘变蓝色；若在M培养基中用淀粉取代蔗糖，接种土壤滤液并培养，平板上长出菌落后可通过加入碘液筛选出能产生淀粉酶的微生物，产生淀粉酶的菌落周围淀粉被水解，可根据是否形成透明圈来判断。

（2）在涂布接种前，随机取若干灭菌后的空白平板先培养一段时间，这样做的目的是检测培养基灭菌是否合格：若空白平板上无菌落形成，则说明培养基灭菌合格；平均每个平板上的菌落数为（39＋38＋37）/3=38，稀释了100倍，取样0.1ml，则每毫升水中的活菌数为38×100÷0.1=38000个，则每升水中的活菌数为38000×1000=3.8×107个。

（3）接种时常用接种环；平板划线法要求灼烧的接种环冷却后再划线，否则会灼伤菌株甚至死亡，且划线时要从上一次划线的末端开始划线，这样接种环上才有菌株；静置培养时，只有表层营养液中的溶解氧较高，大部分细菌不能得到充足的氧气，同时营养物质也不能得到充分的利用，故细菌生长速度较慢，而震荡培养可以提高培养液中溶解氧的含量，同时可使菌体与培养液充分接触，提高培养液中营养物质的利用率，故细菌生长速度较快。

【点睛】

本题考查微生物的分离和培养，要求考生识记接种微生物常用的两种方法，掌握无菌技术，能结合所学的知识准确答题。【解析】碳源、水和无机盐碘液淀粉遇碘液呈蓝色，产淀粉酶的微生物能分解淀粉，在菌落周围会形成透明圈检测培养基灭菌是否合格3.8×107接种环灼烧后没有冷却就开始划线划线未从第一区域末端开始振荡培养能提高培养液的含氧量，同时可以使菌体与培养液充分接触，提高营养物质的利用率28、略

【分析】不同菌株的祖先种感染的噬菌体有差异2T-A体外受精①②③分选被编辑细胞与未编辑细胞的后代来自同一受精卵的基因相同；实验组和对照组结果差异是基因编辑工具不同造成的。

【分析】

限制性核酸内切酶能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列；并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂。

【详解】

（1）列表如下：

。

限制酶。

CRISPR/Cas9

不同点。

识别；切割DNA的特定核苷酸序列。

根据sgRNA识别与之配对的DNA分子后进行切割；且能引发突变。

相同点。

均能切割DNA

（2）大肠杆菌不同菌株CRISPR区域中的间隔序列是不同的；结合题干“间隔序列与侵染细菌的一些噬茵体基因组序列一致”推测，导致这种差异最可能的原因是不同菌株的祖先种感染的噬菌体有差异。

（3）根据题意；CBE单碱基编辑系统，将Cas9酶替换成CBE融合蛋白，能将靶位点的胞嘧啶C脱氦基成尿嘧啶U，第一次复制的两个子代DNA中，相应位置的碱基对分别是G-C和U-A，再经过第二次复制，得到的4个子代DNA中相应位置的碱基对分别是G-C；C-G、U-A、和A-T，所以复制2次后，子代DNA中靶位点碱基对由C-G彻底替换成T-A.

（4）小鼠受精卵可以从雌鼠输卵管中采集或通过体外受精技术获得。向2细胞期胚胎中的1个细胞进行显微注射的目的是为了比较CRISPR/Cas9编辑系统和CBE系统的脱靶率；因此可以RNA形式注入的有①Cas9mRNA；②CBEmRNA和③sgRNA.

（5）脱靶检测过程中标记基因的作用是分选被编辑细胞与未编辑细胞的后代。若是用同一品系小鼠不同受精卵进行脱靶检测；不同小鼠受精卵的基因会不同，有可能对实验结果造成影响；对2细胞期胚胎中的1个细胞进行脱靶检测技术更加精准，原因是来自同一受精卵的基因相同，实验组和对照组结果差异是基因编辑工具不同造成的。

【点睛】

本题以CRISPR/Cas基因编辑技术为背景考查了考生对基因工程相关知识的理解能力和知识迁移能力。【解析】。

限制酶。

CRISPR/Cas9

不同点。

识别；切割DNA的特定核苷酸序列。

根据sgRNA识别与之配对的DNA分子后进行切割；且能引发突变。

相同点。

均能切割DNA

29、略

【分析】【分析】

1；消毒是使用较为温和的物理或化学方法杀死物体表面或内部的部分微生物（不包芽孢和孢子）；而灭菌是指使用强烈的理化因素杀死物体内外所用的微生物（包括芽孢和孢子）。消毒