2025年粤教新版选择性必修3生物上册月考试卷

…………○…………内…………○…………装…………○…………内…………○…………装…………○…………订…………○…………线…………○…………※※请※※不※※要※※在※※装※※订※※线※※内※※答※※题※※…………○…………外…………○…………装…………○…………订…………○…………线…………○…………第=page22页，总=sectionpages22页第=page11页，总=sectionpages11页2025年粤教新版选择性必修3生物上册月考试卷331考试试卷考试范围：全部知识点；考试时间：120分钟学校：______姓名：______班级：______考号：______总分栏题号一二三四五六总分得分评卷人得分一、选择题(共5题，共10分)1、杜泊羊以其生长速度快；肉质好等优点；被称为“钻石级”肉用绵羊。科研工作者通过胚胎工程快速繁殖杜泊羊的流程如下图所示，相关叙述正确的是（）

A.选用的雌性杜泊羊只要有健康的体质和正常繁殖能力就行B.从卵巢中采集的卵母细胞都已完成减数分裂ⅡC.为避免代孕锦羊对植入胚胎产生排斥反应，应注射免疫抑制剂D.采集的精子需要进行获能处理2、中国科学院团队对雌性猕猴进行克隆；成功获得“中中”和“华华”两姐妹，突破了现有技术无法体细胞克隆非人灵长类动物的世界难题，为建立人类疾病的动物模型，研究疾病机理，研发诊治药物带来光明前景。如图为“中中”和“华华”培育的流程，相关叙述不正确的是（）

A.该过程属于无性繁殖B.图中的卵子实际上是次级卵母细胞C.③过程是动物胚胎的体外培养过程，需无菌、无毒环境D.中中、华华的性别由纤维细胞的遗传物质决定3、某实验室做了如图所示的实验研究；下列与实验相关的叙述正确的是（）

A.过程①导入的诱导基因使成纤维母细胞发生基因突变B.丙细胞既能持续分裂，又能分泌单一的抗体C.过程②的培养过程中实现了动物细胞的全能性D.过程③④所用的培养基中都含有聚乙二醇4、下列有关“DNA的粗提取与鉴定”实验的叙述，错误的是（）A.实验用到的研磨液中往往需要加入DNA酶抑制剂B.洋葱研磨液需用滤纸过滤，以保证提取的DNA量C.将二苯胺试剂加入溶有丝状物的NaCl溶液中，沸水浴呈蓝色D.若提取的丝状物为黄色，说明其可能含有蛋白质等杂质成分5、关于微生物的实验室培养和菌种保存的叙述，正确的是（）A.平板划线法和稀释涂布平板法分别用的接种工具是涂布器和接种环B.若液体培养基需震荡培养，其目的是使微生物分布均匀以便涂布C.长期保存的菌种，需放在-20℃的冷冻箱中保存D.斜面培养基中含有大量营养物，可以长期保存菌种评卷人得分二、多选题(共9题，共18分)6、人参是一种名贵药材；具有良好的滋补作用。口服α-干扰素在慢性乙肝；丙肝及部分肿瘤的治疗中有一定疗效。下图为科研人员制备能合成干扰素的人参愈伤组织细胞的流程，①~④表示相关的操作，EcoRⅠ、BamHⅠ为限制酶，它们的识别序列及切割位点如表所示。下列选项正确的是（）

。限制酶。

识别序列和切割位点。

EcoRI

BamHI

A.步骤①中，利用PCR技术扩增干扰素基因时，设计引物序列的主要依据是干扰素基因两端的部分核苷酸序列B.科研人员在两种引物的一端分别加上了GAATTC和GGATCC序列，目的是方便后续的剪切和连接C.在过程③中T—DNA整合到受体细胞的染色体DNA上D.过程④中，科研人员最终未能检测出干扰素基因，其原因可能是干扰素基因未能导入人参愈伤组织细胞7、下图是胚胎干细胞潜能示意图,相关叙述正确的是()

A.由细胞形态判断,4种细胞中细胞②最可能连续分裂B.胚胎干细胞能分化为各种细胞的实质是基因的选择性表达C.分化得到的各种细胞,功能不同的主要差异是特定蛋白不同D.定向诱导胚胎干细胞分化形成的组织或器官,进行自体移植可避免免疫排斥反应8、转MT-like基因的衣藻对Pb、Cd等重金属离子的抗性明显增强，对Cb2+富集效应显著。某研究小组计划通过多聚酶链式反应（PCR）技术扩增MT-like基因，并进一步通过基因工程手段构建净化重金属废水的工程菌。下列有关PCR操作的叙述，正确的是（）A.PCR扩增需要加入Taq酶和DNA连接酶B.需设计一对与MT-like基因两端序列互补的引物C.设计引物时要避免引物之间形成互补碱基对D.长度相同，但GC含量高的引物需要更高的退火温度9、下列有关哺乳动物精子和卵子的发生以及受精作用的叙述，不正确的是（）A.采集到的精子和卵子相遇即可发生受精作用B.排卵就是排出成熟卵子的过程C.卵子形成时的分裂过程均在卵巢内完成D.卵子受精的标志是在卵细胞膜和透明带之间观察到两个极体10、猪瘟病毒（CSFV）蛋白质外壳上的E2蛋白；对于病毒入侵细胞至关重要。研究人员利用E2蛋白来制备抗CSFV单克隆抗体的过程如图。下列叙述错误的是（）

A.注射E2蛋白后，从小鼠脾脏中获得的B淋巴细胞均能产生E2蛋白抗体B.过程②可使用PEG融合法或灭活病毒诱导法，得到的③不一定是杂交瘤细胞C.细胞③经一次筛选即可得到足量多的能产生E2蛋白抗体的杂交瘤细胞D.此过程生产的单克隆抗体既可用于CSFV的检测，也可用于该种猪瘟的治疗11、下面为制备单克隆抗体过程示意图，下列相关叙述错误的是（）

A.①表示B淋巴细胞和骨髓瘤细胞均是从小鼠的脾脏中提取的B.④中的筛选是通过抗原—抗体反应进行的C.④中的筛选是为了获得能产生多种抗体的杂交瘤细胞D.⑤可以无限增殖12、某植物有甲、乙两品种，科研人员在设计品种乙组织培养实验时，参照品种甲的最佳激素配比（见下表）进行预实验。为确定品种乙的II阶段的最适细胞分裂素浓度，参照表中α2（α2>2．0μmol·L-1），以0．5μmol·L-1为梯度，设计5个浓度水平的实验，其中细胞分裂素最高浓度设为M。下列有关叙述正确的是（）。品种甲组织培养阶段细胞分裂素/（μmol·L-1）生长素/（μmol·L-1）I诱导形成愈伤组织α1b1II诱导形成幼芽α2b2Ⅲ诱导生根α3b3

A.表中发生基因选择性表达的是II和Ⅲ阶段B.实验中共配制了2种不同的培养基，即生根培养基和生芽培养基C.确定品种乙II阶段最适细胞分裂素浓度的实验中，M为α2+2μmol·L-1D.生长素和细胞分裂素的配比是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键因素13、某牧场引进一只产肉性能优异的良种公羊；为了在短时间内获得具有该公羊优良性状的大量后代，该牧场通过以下流程进行了相关操作。下列有关叙述错误的是（）

A.在体外受精前对采集到的精子要进行获能处理B.用孕激素对供体母羊进行处理，可获得更多的卵母细胞C.为避免受体母羊对植入胚胎产生排斥反应，应注射免疫抑制剂D.为了提高已有胚胎的利用率，可采用胚胎分割技术14、甲、乙是严重危害某二倍体观赏植物的病菌。研究者发现抗甲基因、抗乙基因可分别表达合成相应的蛋白质抑制甲、乙的细胞增殖，并获得了抗甲、乙的转基因植株，再将二者杂交后得到F1，结合单倍体育种技术，培育出同时抗甲、乙的植物新品种。以下相关叙述错误是（）A.分别导入不同受体细胞的抗甲、抗乙基因都能有效能编码相应的蛋白质B.培育该植物新品种的过程利用了基因工程、杂交育种和单倍体育种技术C.该新品种的培育利用了基因重组、基因突变、染色体变异等生物学原理D.培育出的该植物新品种植株是四倍体，和原植物存在着明显的生殖隔离评卷人得分三、填空题(共7题，共14分)15、纤维素酶是一种__________，一般认为它至少包括三种组分，即__________、___________和_______________，前两种酶使纤维素分解成___________，第三种酶将纤维二糖分解成_____________。正是在这三种酶的协同作用下，纤维素最终被__________成葡萄糖，为微生物的生长提供营养，同样，也可以为人类所利用。16、基因的“剪刀”是_____，它的化学本质是_____，它只能识别一种特定的_____，并在_____上切割DNA分子；基因的“针线”是______，它能连接DNA骨架上的_____，DNA的骨架由___________构成；基因的运载体是将_____送入_____的运输工具。目前常用的运载体有_____、________和_____。质粒存在于许多_____和______等生物中，是拟核或_____外能够_____的很小的环状_____。17、原核基因采取______获得，真核基因是______。人工合成目的基因的常用方法有______和______。18、通常将DNAD的羟基（—OH）成为_______________端，而磷酸基团的末端成为___________端。由于_______________，因此DNA需要引物，因此DNA的合成方向总是从_________________延伸。19、随着现代生物技术的飞速发展；转基因动物；克隆动物和试管动物相继问世，请回答下列问题：

（1）转基因动物、克隆动物和试管动物培育过程中都要用到的生物技术包括______。

（2）核移植是动物克隆的第一步，包括体细胞核移植和胚胎细胞核移植，其中后者更易成功，原因是______。核移植常用处于______（填时期）的______为受体细胞。

（3）在“试管动物”的培育过程中，常采用______（填激素名称）处理可使雌性个体一次排出多枚卵母细胞。从雄性个体采集的精子需______后才能进行受精作用；防止多精入卵的两道屏障依次为______；卵细胞膜反应。

（4）若考虑环境承载力，转基因动物、克隆动物和试管动物不宜放置到自然环境中，这遵循了生态工程的______原理。20、科学家采用定点诱变的方法构建T4溶菌酶的新蛋白质，发现其中一种新蛋白质的第9和第164位氨基酸残基被转换为半胱氨酸残基，并形成一个二硫键。这种新蛋白质的热稳定性会有什么变化？这项技术的要点是什么？_________21、最后检测目的基因是否翻译成______，方法是从转基因生物中提取______，用相应的______进行______。评卷人得分四、判断题(共2题，共6分)22、蛋白质工程是在基因工程的基础上，延伸出来的第二代基因工程。()A.正确B.错误23、蛋白质工程的基本思路是：从预期的蛋白质功能出发→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到并改变相对应的脱氧核苷酸序列（基因）或合成新的基因→获得所需要的蛋白质。（选择性必修3P94）()A.正确B.错误评卷人得分五、实验题(共3题，共9分)24、新冠肺炎目前已成为影响全球的严重肺部传染性疾病；为遏制新冠肺炎传播，必须快速检测出新冠病毒感染者并排除非携带者，同时尽快研制出新冠疫苗，以便采取针对性的预防措施。

（1）目前检测的方法主要是病毒核酸检测，该方法利用核酸强大的体外扩增能力。主要原理：取得咽拭子样本提取出RNA，并将RNA转变为DNA，接着用PCR扩增，最后再用荧光标记的_________检测病毒DNA的存在。其中RNA转变为DNA的过程需在样本中加入_________酶，PCR需在样本中再加入_________，一般要经历30多次循环，每次循环可以分为_________三步。

（2）目前研制的新冠疫苗主要是基因工程疫苗。我国陈薇院士团队成功开发了一种以人复制缺陷腺病毒为载体的重组新型冠状病毒疫苗，用来制备该疫苗的目的基因由________的一段无毒序列构成，在构建基因表达载体时，需将目的基因插在腺病毒载体的_________之间，构建基因表达载体的目的是_____________________________。25、霍山石斛多糖具有显著的免疫调节效应。为探究引起该免疫调节效应的物质是大分子霍山石斛多糖还是多糖小分子片段；某科研小组进行了如下实验：将霍山石斛的某种多糖与牛血清蛋白偶联制作成抗原；并生产出单克隆抗体，利用该抗体探究霍山石斛多糖引起的免疫调节效应。制备单克隆抗体的流程如图所示。请回答：

（1）图中细胞a是免疫后小鼠体内的___________，通常情况下该细胞不能进行增殖，原因是___________。

（2）与植物原生质体融合相比，①过程特有的诱导因素是___________。若只存在细胞的两两融合，融合体系中除未融合的细胞外，还可能有__________和__________。筛选时，需用特定的____________培养基才能把实验所需细胞选择出来。

（3）在筛选过程中需进行__________和__________，以便获得足够数量的能分泌特异性抗体的细胞，还需用___________作为检测特异性抗体的物质。

（4）将筛选出的细胞注射到小鼠腹腔内，可从小鼠____________中提取单克隆抗体。

（5）研究发现，霍山石斛多糖可降解产生小分子片段，这些片段不能与获得的单克隆抗体结合。科研小组用霍山石斛多糖给小鼠灌胃后，取出小肠、肝、脾、肾和肺进行抗原-抗体杂交实验，发现除肠腔外其他组织均未检测到霍山石斛多糖。该实验____________（填“能”或“不能”）说明引起免疫调节效应的是大分子霍山石斛多糖，理由是___________。26、炭疽；是一种由炭疽芽孢杆菌引起的人兽共患性传染病，也是我国规定的乙类传染病。回答下列有关问题：

(1)人通常是通过接触患炭疽的动物或动物制品被感染，皮肤炭疽病在人类炭疽病中最为常见，这类患者的皮肤渗出物中含有炭疽芽孢杆菌。皮肤炭疽病疑似患者就医时，医生先要取患者的皮肤渗出物稀释后涂布到固体培养基上，经过一段时间的培养获得的平板可能是_____。A．B．C．D．(2)挑取上述培养基上的菌落进行如图所示实验（注：实验组中的噬菌体能特异性地侵染炭疽芽孢杆菌）。

①该实验的目的是_____。

②对照组试管中应加入_____，实验过程中为避免杂菌污染进行的操作包括_____（至少写出两点）。

③实验结果为_____时；表明该疑似患者被炭疽芽孢杆菌感染。

④实验过程中需将锥形瓶固定在摇床上，在35℃下振荡培养24h，直至液体培养基变浑浊。振荡培养说明炭疽芽孢杆菌的代谢类型是_____，振荡培养的目的是_____。液体培养基变浑浊的原因是_____。

(3)对炭疽芽孢杆菌进行计数时，选用10-4、10-5、10-6三个稀释度的菌液，各取0．2mL涂布，每个稀释度作三次重复，经24h恒温培养后结果如表。稀释度10-410-510-6平板编号A1A2A3B1B2B3C1C2C3菌落数31529830245535112911

由表可知，最适合计数的稀释度为_____，原因是_____。评卷人得分六、综合题(共3题，共21分)27、金黄色葡萄球菌肠毒素（SEs）是一类可溶性小分子蛋白质；是引起细菌性食物中毒及肠胃炎的主要因素之一。回答下列问题：

(1)为了用基因工程制备SEs纯品，科研人员首先需要___________；若采用___________技术进行这一阶段的操作，前提条件是要有一段_________________________________；以便合成引物。

(2)科研人员利用如图所示的质粒进行基因工程操作的核心步骤，即___________，已知在新霉素抗性基因内部存在HindIII识别序列，质粒的其他部位和目的基因内部均无XbaI、SacI、HindIII三种限制酶的识别位点，假设SEs基因为680bp，在进行操作时，若选择SacI对目的基因和质粒进行酶切，缺点是___________；若选择XbaI、SacI对目的基因和质粒进行酶切，缺点是_________________，因此最好选用_______________对目的基因和质粒进行酶切。操作成功后的结构（M）长___________bp。

(3)若以大肠杆菌为受体细胞，导入M前需在大肠杆菌的培养液中加入适量的___________。28、环境雌激素（EEs）是指能够扰乱动物内分泌活动；生理活性与雌激素较为相似的动物体外化学物质。斑马鱼幼鱼的卵黄蛋白原（vtg）基因在正常情况下不表达，在EEs诱导下可表达且表达水平与EEs的浓度呈正相关。为了简便直观地检测水体中EEs污染情况，研究人员培育了一种转基因斑马鱼，部分过程如图所示，相关限制酶识别序列及切割位点如表。

限制酶识别序列及切割位点SphICGTAC↓GHindIIIA↓AGCTTKpnIGGTAC↓C

请根据图表回答下列问题：

(1)上图的操作属于基因工程基本操作步骤中的______；当EEs存在时，野生斑马鱼的vtg基因启动子可以激活______基因的表达，从作用效果上来看该启动子是一种______型启动子。

(2)对vtg基因启动子进行扩增前，应设计合适的引物，并在引物的______（填“3′端””或“5′端”）添加特定的序列，使扩增后的启动子DNA片段首末两端分别含有______酶识别序列及切割位点；以便vtg基因启动子能够定向插入原始质粒的正确位置。

(3)获得的重组质粒可通过______方法导入到斑马鱼的______细胞中；为鉴定是否成功导入，应检测细胞中是否含有______（填“vtg”或“EGFP”）基因。

(4)为检测某水样M中EEs的污染情况；研究小组进行了如下实验操作：

①选取成功导入重组质粒的斑马鱼幼鱼若干尾随机均分为A、B、C三组，B组培养环境为含较低浓度EEs的培养液，A组和C组的培养环境分别是______；

②一段时间后观察并统计各组斑马鱼的绿色荧光强度，结果如下。组别ABC绿色荧光强度无+++++

注：“+”数量越多表示荧光强度越高。

实验结论：________________________。29、DDX5基因在细胞周期调控、肿瘤发生等方面发挥重要作用。研究人员运用CRISPR-Cas9基因编辑技术对口蹄疫病毒易感的PK-15细胞株中的DDX5基因进行敲除，为后续研究DDX5基因在病毒感染中的作用提供基础。请据图回答下列问题。

(1)图1中，Ori是_______（酶）首先结合的核苷酸序列。构建CRISPR-Cas9表达载体时使用的工具酶主要有______。结合对图2中CRISPR-Cas9技术原理的理解，图1表达载体中需要插入两种sgRNA基因，原因是_____。

(2)研究中先将CRISPR-Cas9表达载体导入大肠杆菌DH5a，再将菌液利用________法接种到加有________的细菌培养基上，待菌落长成后，直接挑取菌落加入到PCR反应系统中进行基因鉴定。PCR过程中不需要先提取细菌DNA的原因是______。

(3)研究中采用培养转化的大肠杆菌对CRISPR-Cas9表达载体进行扩增。与PCR相比，利用大肠杆菌进行目的基因扩增的优点有________、____________。

(4)取转化的PK15细胞悬液进行有限稀释，再接种到6孔培莽板上，一段时间后对各孔内的细胞株进行DDX5蛋白检测，结果如图（其中B-actin是真核细胞骨架蛋白）。对细胞悬液有限稀释法的目的是________，细胞培养时CO2培养箱中充入的气体应是_______。根据检测结果，敲除DDX5基因的细

胞株编号有___________。

参考答案一、选择题(共5题，共10分)1、D【分析】【分析】

1；体外受精主要包括：卵母细胞的采集和培养、精子的采集和获能、受精。（1）卵母细胞的采集和培养①主要方法是：用促性腺激素处理；使其超数排卵，然后，从输卵管中冲取卵子。②第二种方法：从已屠宰母畜的卵巢中采集卵母细胞或直接从活体动物的卵巢中吸取卵母细胞。（2）精子的采集和获能①收集精子的方法：假阴道法、手握法和电刺激法。②对精子进行获能处理：包括培养法和化学诱导法。（3）受精：在获能溶液或专用的受精溶液中完成受精过程。

2；胚胎移植的基本程序主要包括：①对供、受体的选择和处理（选择遗传特性和生产性能优秀的供体；有健康的体质和正常繁殖能力的受体。用激素进行同期发情处理，用促性腺激素对供体母牛做超数排卵处理）；②配种或人工授精；③对胚胎的收集、检查、培养或保存（对胚胎进行质量检查，此时的胚胎应发育到桑椹或胚囊胚阶段）；④对胚胎进行移植；⑤移植后的检查。

【详解】

A；题图中选用的雌性杜泊羊为供体；应具有优良遗传特性，对受体的选择需要有健康的体质和正常繁殖能力，A错误；

B；雌性动物的减数第一次分裂在排卵前后完成；从卵巢中采集的卵母细胞多数处于减数第一次分裂，未完成减数分裂Ⅱ，B错误；

C；动物的子宫为免疫特赦区；代孕绵羊对植入胚胎不会产生排斥反应，C错误；

D；采集的精子不能直接进行受精作用；需要进行获能处理才行，D正确。

故选D。

【点睛】2、C【分析】【分析】

1；动物细胞核移植技术是将动物的细胞核移入一个去核卵母细胞中；并使重组细胞发育成新胚胎，继而发育成动物个体的技术。

2；分析图示可知；①为将纤维细胞注射到去核的卵母细胞中，②为对重组细胞进行体外培养，发育成新胚胎，再进行③胚胎移植过程，最终获得克隆猴。

【详解】

A；该过程没有经过精卵的结合；属于无性繁殖过程，重组细胞能发育成完整个体说明动物细胞核具有全能性，A正确；

B；图中的卵子实际上是处于减数第二次分裂时期的次级卵母细胞；B正确；

C；③过程是动物胚胎移植过程；②过程是动物胚胎的体外培养过程，C错误；

D；中中、华华是由重组细胞发育而来；其细胞核内的遗传物质来自纤维细胞，因此性别由纤维细胞的遗传物质决定，D正确。

故选C。3、B【分析】【分析】

分析题图可知：①是将目的基因导入受体动物细胞；②是干细胞培养过程中的增殖分化，③是诱导动物细胞融合，④是培养杂交细胞生产单克隆抗体。

【详解】

A；分析题图可知；图中过程①导入的诱导基因使成纤维母细胞发生基因重组，A错误；

B；丙细胞由能无限增殖的甲细胞和能分泌特定抗体的乙细胞融合而成；因此丙细胞既能持续分裂，又能分泌单一的抗体，B正确；

C；细胞全能性是指已高度分化的细胞仍然具有发育成完整个体的潜能；过程②为干细胞的增殖分化过程，没有实现动物细胞的全能性，C错误；

D；过程③所用的培养基中含有聚乙二醇；过程④所用的培养基中不需要聚乙二醇，D错误。

故选B。4、B【分析】【分析】

DNA粗提取和鉴定的原理：（1）DNA的溶解性：DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度NaCl溶液中溶解度不同；DNA不溶于酒精溶液；但细胞中的某些蛋白质溶于酒精；DNA对酶；高温和洗涤剂的耐受性。（2）DNA的鉴定：在沸水浴的条件下，DNA遇二苯胺会被染成蓝色。

【详解】

A；实验用到的研磨液中往往需要加入DNA酶抑制剂；降低DNA酶的活性，减少DNA的水解，A正确；

B；洋葱研磨液用两层纱布过滤；以保证提取的DNA量，B错误；

C；将白色丝状物溶解在NaCl溶液中；加入二苯胺试剂后振荡摇匀并沸水浴呈蓝色，C正确；

D；若提取的丝状物为黄色；说明提取的DNA纯度不高，可能含有蛋白质等杂质成分，D正确。

故选B。5、C【分析】【分析】

微生物常见的接种的方法：

①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板；接种，划线，在恒温箱里培养。在划线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。

②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后；均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。

菌种保藏的原理：是为了达到长期保持菌种的优良特性；核心问题是必须降低菌种变异率，而菌种的变异主要发生于微生物旺盛生长；繁殖过程，因此必须创造一种环境，使微生物处于新陈代谢最低水平，生长繁殖不活跃状态；常用的方法有临时保存法和甘油管藏法。

【详解】

A；平板划线法的接种工具是接种环；稀释涂布平板法的接种工具是涂布器，A错误；

B；若液体培养基需震荡培养；其目的是增加培养液的溶氧，为微生物呼吸作用提供充足的氧气，B错误；

C；长期保存的菌种；采用甘油管藏的方法，需放在-20℃的冷冻箱中保存，C正确；

D；斜面培养基保存菌种的方式是临时保存的；菌种容易发生突变，所以不能长期保存菌种，D错误。

故选C。

【点睛】二、多选题(共9题，共18分)6、A:B:D【分析】【分析】

分析图解：图中过程①表示利用PCR技术扩增目的基因；过程②表示基因表达载体的构建，过程③表示将重组质粒导入根瘤农杆菌，过程④表示目的基因的检测和鉴定。

【详解】

A；步骤①中；利用PCR技术扩增干扰素基因时，设计引物序列的主要依据是干扰素基因两端的部分核苷酸序列，A正确；

B；由于需要用EcoRⅠ、BamHⅠ两种限制酶切割目的基因和质粒；因此科研人员还在两种引物的一端分别加上了GAATTC和GGATCC序列，以便于后续的剪切和连接，B正确；

C；在过程③将重组质粒导入根瘤农杆菌；而根瘤农杆菌在侵染人参愈伤组织细胞时，T-DNA才整合到受体细胞的染色体DNA上，C错误；

D；干扰素基因未能导入人参愈伤组织细胞或导入人参愈伤组织细胞的干扰素基因未能转录；这会导致通过该方法不能检测出干扰素基因，D正确。

故选ABD。7、A:B:C:D【分析】【分析】

干细胞：在个体发育过程中；通常把那些具有自我复制能力，并能在一定条件下分化形成一种以上类型的细胞的多潜能细胞称为干细胞。

（1）全能干细胞：如胚胎干细胞；

（2）多能干细胞：如造血干细胞；

（3）专能干细胞：如骨髓瘤细胞；皮肤生发层干细胞。

【详解】

A；由细胞形态判断；①为精细胞，③为肌肉细胞，④为神经细胞，这3种细胞都是高度分化的细胞，所以推测图示4种细胞中细胞②分化程度最低，最可能连续分裂，A正确；

B；胚胎干细胞分化为各种细胞的实质是基因的选择性表达；B正确；

C；分化得到的各种细胞；功能不同的主要差异是特定蛋白不同，C正确；

D；定向诱导胚胎干细胞分化形成的组织或器官；进行自体移植可避免免疫排斥反应，D正确。

故选ABCD。

【点睛】8、B:C:D【分析】【分析】

PCR技术：1；概念：PCR全称为聚合酶链式反应；是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术。2、原理：DNA复制。3、前提条件：要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一对引物。4、条件：模板DNA、四种脱氧核苷酸、一对引物、热稳定DNA聚合酶（Taq酶）。5、过程：①高温变性：DNA解旋过程；②低温复性：引物结合到互补链DNA上；③中温延伸：合成子链。PCR扩增中双链DNA解开不需要解旋酶，高温条件下氢键可自动解开。

【详解】

A；DNA连接酶催化DNA片段连接；Taq酶催化脱氧核苷酸连接，故PCR扩增不需要DNA连接酶，A错误；

B；PCR技术的原理是碱基互补配对和DNA半保留复制；其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物，因此需设计一对与MT-like基因两端序列互补的引物，B正确；

C；为避免引物自连；设计引物时要避免引物之间形成互补碱基对，C正确；

D；因G-C碱基对之间的氢键多于A-T碱基对之间的氢键；GC碱基对含量高的双链的稳定性更高，故GC碱基对含量高的引物需要更高的退火温度，D正确。

故选BCD。

【点睛】9、A:B:C【分析】【分析】

受精包括受精前的准备阶段和受精阶段：准备阶段1-精子获能；刚刚排出的精子，不能立即与卵子受精，必须在雌性动物生殖道发生相应的生理变化后，才能获得受精能力；准备阶段2-卵子的准备，动物排出的可能是初级卵母细胞也可能是次级卵母细胞，都要在输卵管内进一步成熟，达到减数第二次分裂中期时，才具备与精子受精的能力。卵细胞形成过程，其中减数第一次分裂是在雌性动物排卵前后完成的，场所在卵巢；减数第二次分裂是在受精过程中完成的，场所在输卵管中。受精作用完成的标志：在卵黄膜和透明带之间的间隙可以观察到两个极体（一个是第一极体，还有一个是第二极体）

【详解】

A；采集到的精子必需经过获能处理；卵细胞必需发育到减数第二次分裂的中期才具有受精能力，A错误；

B；排卵就是卵细胞从卵泡中排出；可能是初级卵母细胞或次级卵母细胞，B错误；

C；卵细胞形成时的分裂过程在卵巢和输卵管中完成；C错误；

D；在卵黄膜和透明带之间观察到两个极体；说明卵细胞已经完成了受精，这是判断卵细胞是否受精的重要标志，D正确。

故选ABC。

【点睛】10、A:C【分析】【分析】

将浆细胞和骨髓瘤细胞融合；经筛选获得能产生特异性抗体的杂交瘤细胞进行体内或体外培养，获得大量的特异性抗体的技术，称为单克隆抗体的制备。

【详解】

A；注射E2蛋白后；从小鼠脾脏中获得的B淋巴细胞有多种，不一定能产生E2蛋白抗体，A错误；

B；过程②可使用PEG融合法或灭活病毒诱导法；得到的③可能是杂交瘤细胞，或者是融合的B细胞或是融合的骨髓瘤细胞，B正确；

C；细胞③要进行克隆化培养和抗体检测；经过多次筛选，才可获得足量多的能产生E2蛋白抗体的杂交瘤细胞，C错误；

D；猪瘟病毒（CSFV）的检测采用抗原-抗体杂交技术；抗CSFV的单克隆抗体能与猪瘟病毒（CSFV）蛋白质外壳上的E2蛋白结合，故此过程生产的单克隆抗体可用于CSFV的检测，D正确。

故选AC。11、A:C【分析】据图分析；①过程表示获取B淋巴细胞和骨髓瘤细胞；②过程促进细胞融合，采用离心；电刺激、聚乙二醇、灭活病毒等试剂诱导，筛选出杂交瘤细胞；④过程通过专一抗体检验阳性，筛选出能够产生特异性抗体的细胞群；⑥过程表示动物细胞培养。

【详解】

A；B淋巴细胞是从小鼠的脾脏中提取的；骨髓瘤细胞不是，A错误；

B；④中筛选能产生特定抗体的杂交瘤细胞；可以通过检测抗原、抗体反应，如果有反应说明表达了抗体，B正确；

C；④中的筛选是为了获得能产生一种抗体的杂交瘤细胞；C错误；

D；⑤可以无限增殖；也能产生特异性抗体，D正确。

故选AC。12、A:B:D【分析】【分析】

植物组织培养中植物激素使用：物组织培养中关键性激素是生长素和细胞分裂素；同时使用生长素和细胞分裂素时；两者用量的比例影响植物细胞的发育方向；先使用细胞分裂素，后使用生长素，细胞既分裂又分化。

【详解】

A；Ⅰ阶段为脱分化；II阶段和Ⅲ阶段为再分化，Ⅰ、II、Ⅲ阶段中会发生基因的选择性表达，A错误；

B；实验至少配制了3种不同的培养基；即形成愈伤组织的培养基、生根培养基和生芽培养基，B错误；

C、由于参照品种B的激素配比（a2＞2.0），以0.5μmol/L为梯度，设计5个浓度水平的实验，则细胞分裂素浓度依次为a2-1.0μmol/L、a2-0.5μmol/L、a2μmol/L、a2+0.5μmol/L、a2+1.0μmol/L，可见细胞分裂素的最高浓度M应设为a2+1.0μmol/L；C错误；

D；生长素和细胞分裂素的配比是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键因素；D正确。

故选ABD。13、B:C【分析】【分析】

胚胎移植的基本程序主要包括:

①对供；受体的选择和处理（选择遗传特性和生产性能优秀的供体；有健康的体质和正常繁殖能力的受体）。用激素进行同期发情处理，用促性腺激素对供体母牛做超数排卵处理。

②配种或人工授精。

③对胚胎的收集；检查、培养或保存（对胚胎进行质量检查；此时的胚胎应发育到桑甚胚或胚囊胚阶段。④对胚胎进行移植。

⑤移植后的检查。

【详解】

A；采集到的良种公羊的精子；在体外受精前要进行获能处理，A正确；

B；对本地母羊注射促性腺激素可促使其超数排卵；进而获得更多卵母细胞，B错误；

C；受体母羊对移入子宫的外来胚胎基本上不发生免疫排斥反应；不需要注射免疫抑制剂，C错误；

D；采用胚胎分割技术可提高已有胚胎的利用率；D正确。

故选BC。14、A:C:D【分析】【分析】

1；单倍体：体细胞中具有本物种配子染色体数的个体；个体发育的起点是配子。获取方法是花药离体培养。单倍体育种的方法：花药离体培养和用秋水仙素处理幼苗。

2；基因工程的步骤：获取目的基因、构建基因表达载体、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与鉴定。

【详解】

A；目的基因导入受体细胞不一定能表达；A错误；

B；该品种的培育利用了基因工程、杂交育种、单倍体育种技术；B正确；

C；该品种的培育涉及基因工程、杂交育种、单倍体育种等操作；培育过程利用了基因重组、染色体变异等原理，没有利用基因突变，C错误；

D；该新品种依然是二倍体；没有证据表明其是一个新物种，D错误。

故选ACD。

【点睛】三、填空题(共7题，共14分)15、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】复合酶C1酶CX酶葡萄糖苷酶纤维二糖葡萄糖水解16、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】限制酶蛋白质核苷酸序列特定的切点DNA连接酶缺口磷酸-脱氧核糖外源基因受体细胞质粒噬菌体动植物病毒细菌酵母菌细胞核自主复制DNA分子17、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】直接分离人工合成反转录法化学合成法18、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】3，5，DNA聚合酶不能从头开始合成，而只能从3，端延伸DNA子链的5，端向3，端19、略

【分析】【分析】

1；动物核移植的概念：将动物的一个细胞的细胞核移入一个去掉细胞核的卵母细胞中；使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育为动物个体，核移植得到的动物称克隆动物；

2；早期胚胎培养的培养液成分；除无机盐和有机盐外，还需要添加维生素、激素、氨基酸、核苷酸等营养成分，并需添加动物血清等天然成分。

【详解】

（1）转基因动物；试管动物和克隆动物分别在体外得到早期胚胎后；都要通过胚胎移植获得新个体。

（2）核移植包括体细胞核移植和胚胎细胞核移植；其中后者更易成功，原因是胚胎细胞分化程度低，恢复全能性相对容易，而体细胞分化程度高，全能性不易表达；核移植常用的减数第二次分裂中期的去核卵母细胞作为受体细胞，其中去核的目的是避免原细胞核中遗传物质对克隆动物的影响，保证克隆动物的核遗传物质来自供体细胞。

（3）促性腺激素处理可促使雌性个体超数排卵；即使良种母牛一次排出多枚卵母细胞。精子需要经过获能处理才能受精；防止多精入卵的两道屏障依次为透明带反应；卵细胞膜反应。

（4）要考虑环境承载力；处理好生物与环境的协调与平衡，这体现了生态工程的协调与平衡原理。

【点睛】

本题考查细胞工程、胚胎工程和生态工程的有关知识，意在考查考生理解能力、获取信息的能力和综合运用能力。【解析】胚胎移植（或胚胎的早期培养和胚胎移植）胚胎细胞分化程度低，恢复全能性相对容易MⅡ中期去核卵母细胞促性腺激素获能透明带反应协调与平衡20、略

【分析】【详解】

蛋白质形成二硫键，使蛋白质的结构更加稳定，因此T4溶菌酶的热稳定性会提高。这项技术属于蛋白质工程技术，其步骤为从预期的蛋白质功能出发→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到并改变相对应的脱氧核苷酸序列（基因）或合成新的基因→获得所需的蛋白质。【解析】会提高T4溶菌酶的耐热性。这项技术属于蛋白质工程技术，该技术的要点是从预期的蛋白质功能出发→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到并改变相对应的脱氧核苷酸序列（基因）或合成新的基因→获得所需的蛋白质。21、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】蛋白质蛋白质抗体抗原－抗体杂交四、判断题(共2题，共6分)22、A【分析】【详解】

蛋白质工程是在分子水平上通过基因修饰或基因合成来完成的，是在基因工程的基础上延伸出来的第二代基因工程。故该说法正确。23、A【分析】【详解】

蛋白质工程是指以蛋白质分子的结构规律及其生物功能的关系作为基础；通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活的需求。蛋白质工程的基本思路是：从预期的蛋白质功能出发→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到并改变相对应的脱氧核苷酸序列（基因）或合成新的基因→获得所需要的蛋白质。

故正确。五、实验题(共3题，共9分)24、略

【分析】【分析】

1；中心法则：（1）遗传信息可以从DNA流向DNA；即DNA的复制；（2）遗传信息可以从DNA流向RNA，进而流向蛋白质，即遗传信息的转录和翻译；（3）中心法则补充法则：遗传信息从RNA流向RNA以及从RNA流向DNA。基因表达是指将来自基因的遗传信息合成功能性基因产物的过程。

2、PCR：（1）聚合酶链式反应（PCR）是利用DNA在体外摄氏95°高温时变性会变成单链，低温（经常是60°C左右）时引物与单链按碱基互补配对的原则结合，再调温度至DNA聚合酶最适反应温度（72°C左右），DNA聚合酶沿着磷酸到五碳糖(5'-3')的方向合成互补链，即变性→退火→延伸。（2）参与PCR的主要物质：引物、酶、原料（dNTP）、模板和缓冲液（其中需要Mg2+）等。

【详解】

（1）新冠病毒为RNA病毒；需要从样本中提取出RNA，然后逆转录为DNA，PCR扩增后，用含有目的基因的单链DNA（或基因探针）来检测。根据中心法则，RNA可以逆转录为DNA。RNA逆转录为DNA需要用到逆转录酶。PCR技术需要DNA作为模板；脱氧核苷酸为原料，还需要两种不同的引物以及耐热的DNA聚合酶，因此PCR需在样本中再加入引物，原料（dNTP），酶（Taq酶），一般要经历30多次循环，每次循环可以分为：变性、退火、延伸。

（2）基因工程疫苗需要使用到病毒基因的一段无毒序列构建疫苗的目的基因；构建基因表达载体。构建表达载体时，需要将目的基因插入到载体的启动子和终止子之间，便于表达。构建基因表达载体的目的就是使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传给后代，同时使目的基因能够表达和发挥作用。

【点睛】

本题旨在考查学生理解PCR的实质和主要参与的物质，学会应用基因工程的方法去解决实际问题。同时考察把握知识的内在联系并应用相关知识综合解决问题的能力。【解析】①.含目的基因的单链DNA（或基因探针）②.逆转录③.引物，原料（dNTP），酶（Taq酶）④.变性、退火、延伸⑤.病毒基因⑥.启动子和终止子⑦.使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传给后代，同时使目的基因能够表达和发挥作用25、略

【分析】【分析】

1.体液免疫的具体过程：

(1)感应阶段：除少数抗原可以直接刺激B细胞外；大多数抗原被吞噬细胞摄取和处理，并暴露出其抗原决定簇；吞噬细胞将抗原呈递给T细胞，再由T细胞呈递给B细胞；

(2)反应阶段：B细胞接受抗原刺激后；开始进行一系列的增殖；分化，形成记忆细胞和浆细胞；

(3)效应阶段：浆细胞分泌抗体与相应的抗原特异性结合；发挥免疫效应。

2.单克隆抗体的制备：

(1)细胞来源：B淋巴细胞：能产生特异性抗体；在体外不能无限繁殖；骨髓瘤细胞：不产生专一性抗体，体外能无限繁殖。

(2)杂交瘤细胞的特点：既能大量增殖；又能产生特异性抗体。

(3)两次次筛选：①筛选得到杂交瘤细胞（去掉未杂交细胞以及自身融合的细胞）；②筛选出能够产生特异性抗体的细胞群。

(4)两次抗体检测：专一抗体检验阳性。

(5)提取单克隆抗体：从培养液或小鼠腹水中提取。

(6)单克隆抗体的优点：特异性强；灵敏度高；并可能大量制备。

【详解】

（1）图为单克隆抗体的制备的流程；图中细胞a是免疫后小鼠体内的B细胞（或浆细胞），该细胞是高度分化的细胞，不能进行分裂。

（2）与植物原生质体融合相比；动物细胞融合特有的诱导因素是灭活的病毒。若只存在细胞的两两融合，融合体系中除未融合的细胞外，还有两两融合的细胞，由于细胞的融合是随机的，两两融合的细胞包括杂交瘤细胞和同种细胞融合成的细胞。筛选时，需用特定的选择性培养基才能从中筛选出杂交瘤细胞。

（3）要想获得足够数量的能分泌特异性抗体的细胞；在筛选过程中需进行克隆化培养和抗体检测，该过程是将霍山石斛的某种多糖与牛血清蛋白偶联制作成抗原；并生产出单克隆抗体，因此还需用（霍山石斛）多糖与牛血清蛋白偶联物作为检测特异性抗体的物质。

（4）若将筛选出的细胞注射到小鼠腹腔内；则可从小鼠腹水中提取单克隆抗体。

（5）科研小组用霍山石斛多糖给小鼠灌胃后；取出小肠；肝、脾、肾和肺进行抗原-抗体杂交实验，发现除肠腔外其他组织均未检测到霍山石斛多糖。霍山石斛多糖可降解产生小分子片段，该实验不能证明具有免疫调节效应的物质是多糖还是降解后的小分子片段，因此该实验不能说明引起免疫调节效应的是大分子霍山石斛多糖。

【点睛】

本题考查免疫调节、单克隆抗体的制备等知识，意在考查考生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系，形成知识网络的能力以及获取信息、分析问题的能力。【解析】B细胞（或浆细胞）该细胞是高度分化的细胞，不能进行分裂灭活的病毒杂交瘤细胞同种细胞融合成的细胞选择性克隆化培养抗体检测（霍山石斛）多糖与牛血清蛋白偶联物腹水不能霍山石斛多糖在肠腔中被降解，产生的多糖小分子片段可能具有免疫调节效应（或该实验不能证明具有免疫调节效应的物质是多糖还是降解后的小分子片段）26、略

【分析】【分析】

1；稀释涂布平板法：将待测样品制成均匀的系列稀释液；尽量使样品中的微生物细胞分散开，使成单个细胞存在，再取一定稀释度、一定量的稀释液接种到平板中，使其均匀分布于平板中的培养基内。2、平板划线法：把混杂在一起的微生物或同一微生物群体中的不同细胞，用接种环在平板表面上作多次由点到线的划线稀释而获得较多独立分布的单个细胞，并让其成长为单菌落的方法。

【详解】

（1）A；B、C中的菌落分布较均匀；是通过稀释涂布平板法获得的，而D是通过平板划线法获得的，划线平板法是从上一次划线的末端开始划线。故选ABC。

（2）①从整个实验过程可以看出；实验通过对皮肤渗出物稀释培养形成的菌落进行扩大培养后，利用噬菌体的作用检测其中是否含有炭疽芽孢杆菌。②对照组中加入的液体不应含有噬菌体，因此应加入等量的生理盐水；在进行微生物培养时为防止杂菌的混入，消毒和灭菌工作是关键，主要包括对操作的空间；操作者的衣着和手进行清洁和消毒；将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等进行灭菌；实验操作在酒精灯火焰附近进行；操作过程中避免已经灭菌的材料用具与周围物品相接触等。③若实验组液体培养基的浑浊度低于对照组，说明实验组中的炭疽芽孢杆菌被噬菌体侵染与破坏，即该疑似患者感染了炭疽芽孢杆菌。④炭疽芽孢杆菌属于细菌，能寄生在人和动物体内，说明它是异养型生物，培养时需要借助摇床振荡培养，说明它是需氧型生物；振荡培养的目的是增加培养液中的氧气含量，使细菌与营养物质充分接触，有利于炭疽芽孢杆菌的大量繁殖；培养液变浑浊表明炭疽芽孢杆菌大量繁殖。

（3）分析表中数据可知，只有稀释度为10-5时菌落数在30~300之间，适合用于计数。【解析】(1)ABC

(2)检验皮肤炭疽病疑似患者的皮肤渗出物中是否含有炭疽芽孢杆菌与实验组等量的生理盐水对操作的空间；操作者的衣着和手进行清洁和消毒；将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等进行灭菌；实验操作在酒精灯火焰附近进行；操作过程中避免已经灭菌的材料用具与周围物品相接触实验组液体培养基的浑浊度比对照组低（异养）需氧型增加培养液中的氧气含量；使细菌与营养物质充分接触炭疽芽孢杆菌大量繁殖。

(3)10-5稀释度为10-5时菌落数在30~300之间六、综合题(共3题，共21分)27、略

【分析】【分析】

基因工程是指按照人类的愿望；将不同生物的遗传物质在体外人工剪切并和载体重组后转入细胞内进行扩增，并表达产生所需蛋白质的技术。操作的对象是基因。

【详解】

（1）金黄色葡萄球菌肠毒素（SEs）是一类可溶性小分子蛋白质；是由SEs基因控制形成的蛋白质，基因工程操作的是基因，因此为了用基因工程制备SEs纯品，科研人员首先需要获取SEs基因；若采用PCR技术进行这一阶段的操作，前提条件是要有一段已知目的基因的核苷酸序列，以便合成引物。

（2）基因工程操作的核心步骤是基因表达载体的构建。若选择SacI对目的基因和质粒进行酶切，由于切割后的两端黏性末端相同，因此会出现目的基因的自身环化和反向连接，因此缺点是不能避免目的基因的自身环化和反向连接；据图可知，若选择XbaI、SacI对质粒进行酶切，会产生一个段片段（1900bp）和一个含有两种抗生素抗性基因的长片段，因此若选择XbaI、SacI对目的基因和质粒进行酶切，形成的重组DNA中以及空质粒中都会含有两种抗性基因，无法通过抗生素的抗性筛选重组DNA，故缺点是无法筛选空质粒和重组质粒。用SacI和HindIII切割会产生相同的黏性末端，因此最好选用XbaI、HindIII对目的基因和质粒进行酶切。操作成功后的结构（M）长13603-2246+680=12037bp。

（3）若以大肠杆菌为受体细胞，导入M前需在大肠杆菌的培养液中加入适量的Ca2+