2025年湘师大新版选择性必修3生物下册阶段测试试卷

…………○…………内…………○…………装…………○…………内…………○…………装…………○…………订…………○…………线…………○…………※※请※※不※※要※※在※※装※※订※※线※※内※※答※※题※※…………○…………外…………○…………装…………○…………订…………○…………线…………○…………第=page22页，总=sectionpages22页第=page11页，总=sectionpages11页2025年湘师大新版选择性必修3生物下册阶段测试试卷80考试试卷考试范围：全部知识点；考试时间：120分钟学校：______姓名：______班级：______考号：______总分栏题号一二三四五六总分得分评卷人得分一、选择题(共9题，共18分)1、1978年，科学家将人体内能够产生胰岛素的基因与大肠杆菌的DNA分子重组，并在大肠杆菌内获得成功表达。按照该方法生产的胰岛素已广泛用于市场。下列叙述正确的是（）A.人的胰岛素基因可与大肠杆菌DNA重组的基础是两者具有相似的物质组成和分子结构B.人的胰岛素基因只存在于胰岛组织细胞中，故只能从胰岛组织细胞中获取胰岛素基因C.人的胰岛素基因在大肠杆菌中表达出的肽链，需经大肠杆菌的内质网和高尔基体加工才能降血糖D.人的胰岛素基因中的遗传信息在大肠杆菌中的传递过程只有DNA→RNRNA→蛋白质2、为了防止转基因作物的目的基因通过花粉转移到自然界中其他植物体内，科学家设法将目的基因整合到受体细胞的叶绿体基因组中，其原因是（）A.这种操作方法更容易成功B.植物杂交的后代不会出现一定的性状分离比C.转基因植物中的细胞质基因与其他植物间不能通过花粉发生基因交流D.转基因植物与其他植物间不能通过花粉发生基因交流3、在细菌的连续培养过程中；要以一定速度不断添加新的培养基，同时以同样速度放出老的培养基。下图表示培养基的稀释率（培养基的更新速率）与培养容器中营养物质浓度；细菌代时（细菌数目增加一倍所需的时间）、细菌密度的关系。下列相关叙述不正确的是（）

A.在稀释率很低的情况下，稀释率的增加会导致细菌密度增加B.稀释率从a到b的变化过程中，细菌生长速度不断提高C.稀释率超过b点后，营养物质浓度过高导致细菌死亡率增大，细菌密度降低D.为持续高效地获得发酵产品，应将稀释率控制在b点附近4、天津独流老醋历史悠久；独具风味；其生产工艺流程如下图。据图说法错误的是（）

A.糖化阶段可添加淀粉酶等酶制剂处理原料B.在酒精发酵阶段，发酵罐需先通气后密闭C.醋酸发酵阶段所需温度低于酒精发酵阶段D.氧气、营养物质等因素会影响醋酸菌数量5、下表是关于对四种生物能源、碳源、氮源的来源和新陈代谢类型的描述，其中正确的一组是（）。硝化细菌乳酸菌根瘤菌衣藻能源NH3乳酸N2光能碳源CO2糖类糖类CO2氮源NH3N2N2NO3-

代谢类型自养需氧型异养厌氧型自养需氧型自养需氧型A.硝化细菌与乳酸菌B.乳酸菌与根瘤菌C.根瘤菌与衣藻D.硝化细菌与衣藻6、转基因抗虫植物含有Bt毒蛋白，对人体无毒，但是鳞翅目昆虫幼虫的肠道细胞含有Bt蛋白的受体，Bt蛋白与受体结合导致肠道壁穿孔，使幼虫死亡。下列叙述错误的是（）A.促进Bt蛋白的合成有助于提高植物的抗虫效果B.通过DNA分子杂交技术可以检测Bt蛋白基因是否表达C.将Bt蛋白基因导入植物细胞的方法可以使用花粉管通道法或农杆菌转化法D.将植物材料和农杆菌共同培养之前，需要对植物材料进行消毒处理7、在分离、纯化细菌的实验中，划线接种（甲）、培养结果（乙）如下图，a、b、c、d是划线的四个区域。下列叙述错误的是（）

A.划线前后都要对接种环灼烧灭菌B.甲图中的a区域为划线的起始区域C.蘸取菌液和划线要在酒精灯火焰旁进行D.连续划线的目的是获得单个细菌形成的菌落8、下列关于乳酸菌种的选育的叙述，不正确的是（）A.自然选育该菌种费时且盲目性大B.该菌能发生染色体变异C.采用基因工程的方法可构建工程菌D.诱变育种原理的基础是基因突变9、羊在畜牧生产和生物医学模型方面都具有重要价值，因此与羊相关的基础生物学研究也格外受到关注。科学家通过胚胎工程的方法繁育肉羊。下列相关叙述错误的是（）A.从雌性肉羊卵巢内取出的卵母细胞不可直接进行体外受精B.可用普通雌性羊作为受体进行胚胎移植但需生理状态相同C.可以通过胚胎分割技术，得到更多遗传性状相同的肉羊后代D.在胚胎移植前，需要对体外培养的原肠胚进行质量筛查评卷人得分二、多选题(共5题，共10分)10、下列关于试管婴儿技术的叙述，正确的是（）A.在采集卵母细胞之前，需要给供卵者注射适量的促性腺激素，促进排卵B.从卵巢中吸取的卵母细胞，必须经体外培养获能处理后才能用于受精C.受精过程中，卵母细胞会发生透明带反应和卵细胞膜反应，阻止多精入卵D.设计试管婴儿技术，有利于生育健康的下一代，不会造成社会危害11、下图1表示的是某DNA分子上的一些限制性内切酶的酶切位点。用XhoI和SalI两种限制酶分别处理该DNA分子；经电泳分离结果如图2。以下叙述正确的是（）

A.所用两种限制性核酸内切酶识别的核苷酸序列可能相同B.限制酶通过作用于磷酸二酯键和氢键得到相应产物C.根据泳道②电泳示意图可知使用的限制性内切酶为XhoID.用两种限制酶同时处理后进行电泳，条带可多于6条12、RNA经逆转录后再进行PCR扩增的技术称为RT－PCR，过程如图所示。下列相关叙述正确的是（）

A.过程①需要RN逆转录酶、引物、核糖核苷酸等条件B.真核细胞的mRNA经过程①②获得的DNA无内含子片段C.过程③PCR扩增时引物中的CG含量会影响退火温度D.RT－PCR技术可应用于新冠病毒（RNA病毒）的核酸检测13、克隆动物常用的核移植方法主要有细胞质内注射法和透明带下注射法两种。前者是用微型注射针将供体细胞的细胞核吸出注入去核卵母细胞质内；后者是直接将供体细胞注入去核卵母细胞透明带内，然后促使两个细胞融合。世界首例体细胞克隆北极狼的供体细胞来自哈尔滨极地公园的一只野生北极狼的皮肤样本，卵母细胞来自一只处于发情期的母犬，代孕母体则是一只比格犬。下列叙述错误的是（）A.克隆北极狼的性状由野生北极狼、发情期的母犬和比格犬的基因共同决定B.相比之下，透明带下注射法对供体细胞核和卵母细胞的损伤更小C.供体细胞注入卵母细胞透明带内后，就可自行进入卵母细胞D.细胞分裂、分化形成克隆胚胎的过程中发生了基因重组14、利用基因工程技术可使大肠杆菌生产人的胰岛素原。下列相关叙述中，错误的是（）A.人和大肠杆菌在合成胰岛素原时，转录和翻译的场所是相同的B.DNA连接酶能催化磷酸与脱氧核糖形成化学键C.通过检测发现大肠杆菌中没有胰岛素原产生，则可判断重组质粒未导入受体菌D.人胰岛素原基因在大肠杆菌中表达的胰岛素原有较高的生物活性评卷人得分三、填空题(共9题，共18分)15、体细胞核移植技术存在的问题：

克隆动物存在着健康问题、表现出______缺陷等。16、酶是细胞合成的生物催化剂。随着生物科学技术的发展；酶已经走出实验室，走进人们的生产和生活。请回答下面有关酶的问题：

（1）在腐乳制作的过程中；利用毛霉等微生物产生的蛋白酶将豆腐中的蛋白质分解成________，____________将脂肪水解为甘油和脂肪酸。加酶洗衣粉里添加的酶制剂中，应用最广泛；效果最明显的是____________。

（2）果胶酶包括_____________________________；生产中如果要固定果胶酶；最好采用______________________________________法固定化。

（3）酶提取和分离原理：需要用__________法去除相对分子质量大的杂质蛋白，以纯化酶；利用_________________________法对酶进行纯度鉴定。17、在____________的温度范围内，DNA的双螺旋结构解体，双链分开，这过程成为__________。18、___________（简称PCR）是一种____________迅速_______________的技术，它能以极少数的DNA为模板，在几个小时内复制出上百万份的DNA拷贝。19、DNA粗提取与鉴定实验中，二苯胺要___________。20、应用：______（微型繁殖、作物脱毒、神奇的人工种子）、______、细胞产物的工厂化生产。21、植物繁殖的新途径。

微型繁殖：可以高效快速地实现种苗的大量繁殖。

作物脱毒：采用______组织培养来除去病毒（因为植物分生区附近的病毒______）

人工种子：以植物组织培养得到的______、不定芽、顶芽和腋芽等为材料，经_____包装得到的种子。优点：完全保持优良品种的遗传特性，______；方便储藏和运输。

人工种子的结构包括：______、_____和______。22、近年来，克隆技术的发展取得了巨大突破｡在日常生活中，我们遇到过与克隆技术有关的问题吗？_____。23、基因表达载体的组成及其作用。

一个基因表达载体的组成，除了______________、_______________外，还必须有__________、______________等(如图所示)。

①______________②______________③______________

④______________⑤______________⑥______________

⑦______________评卷人得分四、判断题(共3题，共24分)24、植物细胞培养的原理是植物细胞的全能性。()A.正确B.错误25、胚胎发育至囊胚期时，细胞逐渐分化。()A.正确B.错误26、如果转基因植物的外源基因源于自然界，则不会存在安全性问题。()A.正确B.错误评卷人得分五、实验题(共4题，共20分)27、研究表明生物制剂W对不同种类动物细胞的分裂均有促进作用。有同学设计相关实验来验证这个观点。请根据以下提供的实验材料；完善该实验步骤，并预测实验结果。

实验材料：培养液；正常肝组织、肝癌组织、W、胰蛋白酶。

（要求与说明：答题时不考虑加入W后的体积变化等误差。提供的细胞均具有分裂能力；只进行原代培养且培养条件适宜）

（1）实验步骤：

①用_________分别处理正常肝组织和肝癌组织获得分散的细胞。将两种分散的细胞加入培养液中制成两种细胞悬液。培养液需要中加入__________等营养物质和__________用以灭菌。

②在显微镜下用_____________直接计数两种细胞悬液中细胞的数量；并进行记录。

③取灭菌后的培养瓶若干个均分为A、B两组，A组加入正常肝细胞悬液；B组加入_________。从A、B组中各取出一半培养瓶作为C、D组，分别加入_________。放入动物细胞培养箱在适宜条件下培养。

④各组样品在培养箱中培养一段合适的时间后，每组取部分样品，加入_____________后摇匀；在显微镜下计数并记录细胞数量。

⑤重复④若干次。

⑥统计并分析所得数据。

（2）预测实验结果（用坐标系和曲线示意图表示）_____________28、β-苯乙醇是具有令人愉悦的玫瑰香味的高级芳香醇；广泛用于食品和日化用品等生产领域。化学合成β-苯乙醇会产生多种杂质，而植物萃取则周期长；成本高，因此采用微生物合成天然β-苯乙醇是工业化新趋势。研究小组从玉米胚芽粕和玉米皮等淀粉加工下脚料及其肥料堆放的土壤中筛选可耐受高浓度β-苯乙醇的酵母菌株（YDF-1），实验过程如图所示。回答下列问题：

(1)该实验需制作多种培养基，这些培养基的配方不同，但一般都含有水、无机盐、__________等物质，培养基制作后需使用__________法进行灭菌，灭菌后的培养基再添加相应浓度的β-苯乙醇。由实验目的可知，初筛、复筛及再次复筛的培养基中，添加的β-苯乙醇的浓度应__________（填“保持不变”或“逐渐增大”或“逐渐降低”），理由是__________。

(2)若取稀释倍数为104的0．1mL稀释液涂布到含2g/L的YEPD培养基后培养至菌落稳定，计算得出每毫升菌悬液中含4．5×106个菌体，则在该稀释倍数下平板上的平均菌落数是__________个。将初筛获得的菌株进行液体培养，其目的是________。

(3)若选用葡萄糖作为碳源，为确定YDF-1增殖的最佳浓度，请设计一个较为简便的实验进行探究，实验设计思路是__________。29、面对新冠疫情；我国一直坚持严格防控措施，“零容忍”彰显人民立场制度优势。坚持中高风险地区的大面积核酸检测；适龄人群接种疫苗构建免疫屏障是严格防控的主要措施。新冠病毒核酸检测常采用RT﹣PCR检测法，技术流程如下图，①②③④⑤表示相关步骤。

回答下列问题：

(1)步骤①需要的酶是________，步骤④需要的酶是________，引物A和引物B是根据________序列合成的。

(2)步骤③的目的是________，如果该步骤出现失误，对检测结果的影响是________。

(3)新冠病毒抗体检测可作为核酸检测的补充，抗体检测的原理是________。对某人进行检测时发现，其核酸检测为阴性，抗体检测呈阳性，原因可能是________。30、T-2毒素是一种由霉菌分泌的脂溶性小分子；可通过污染饲料引起畜禽中毒反应。CYP3A是猪体内降解T-2毒素的关键酶，T-2毒素可诱导CYP3A基因表达水平升高。

(1)T-2毒素是霉菌的_____（选填“初级”或“次级”）代谢产物，主要以_____方式进入猪细胞。

(2)B1和B2是CYP3A基因启动子上游的两个调控序列，为研究T-2毒素诱导CYP3A基因表达的机理，研究者首先将不同调控序列分别和CYP3A基因启动子及荧光素酶基因（LUC基因）连接构建表达载体，再分别导入猪肝细胞，然后向各组猪肝细胞培养液中加入_____，适宜条件下进行培养；24h后检测LUC酶活性，计算启动子活性相对值，结果如图1所示。据图可知，B1和B2调控序列是CYP3A基因响应T-2毒素的核心元件，理由是_____。

(3)研究表明NF-Y和Sp1两种蛋白均参与T-2毒素对CYP3A的诱导；B2是Spl的结合位点。研究者推测，NF-Y通过与B1结合，与Sp1共同调控CYP3A基因的表达。

①为证明Bl是NF-Y的结合位点，研究者依据B1序列制备了野生型和突变型探针，分别与猪肝细胞核蛋白提取物混合，实验分组及结果如图2．据实验结果推测，第4组出现阻滞带的原因是_____，进而推测第5组结果产生的原因是_____。

②研究者设计实验进一步证明了NF-Y和Spl通过互作共同发挥调控功能，实验设计思路是：增大或缩小B1和B2两者之间的距离，检测CYP3A基因的启动子活性。据此分析，实验假设是_____。评卷人得分六、综合题(共3题，共30分)31、甜瓣子是豆瓣酱的重要成分之一；其生产工艺如下图所示：

回答下面相关问题：

(1)制曲过程中，加入的蚕豆主要为米曲霉的生长提供___________营养物质。加入的蚕豆需经沸水漂烫约4min，过滤、冷却后使用，沸水漂烫和冷却的目的分别是___________。

(2)制曲时将米曲霉与蚕豆瓣混合相当于微生物培养的___________技术，主要目的是使米曲霉充分生长繁殖，并大量产生和积蓄所需要的酶。在统计米曲霉的数量以了解制曲进程时，可在显微镜下用___________直接计数；若要测定其活菌数量，可选用___________法进行计数。在制曲容器内，上层的米曲霉数量比底层的多，说明米曲霉的代谢类型是___________。

(3)待米曲霉达到一定数量后，向豆瓣曲中加入一定量盐水，开始制作酱醅，盐水的作用主要是___________（答出1点即可）。

(4)将酱醅转入发酵池进行发酵，该过程米曲霉可将蚕豆中的葡萄糖代谢为丙酮酸，在有氧条件下，丙酮酸可为该菌的生长提供___________和___________；大量分泌的蛋白酶可将蚕豆中的蛋白质分解成___________，这些因素都影响着甜瓣子的品质，从而形成独特的色香味和风味。32、竹芋科植物果实中含有一种甜蛋白；其甜度为蔗糖的三千倍，是理想的甜味剂。某研究小组试图把甜蛋白基因（目的基因）导入黄瓜中，以改良这种黄瓜的品质。获得转基因黄瓜植株的流程图如下图，请回答：

(1)通过步骤①和②可人工合成目的基因。在步骤②中先以RNA为模板在____酶的作用下合成DNA，然后通过一系列实验从中筛选出_____基因。还可以根据甜蛋白的氨基酸序列推测出___序列；再用化学方法合成。

(2)可以通过____技术获得大量目的基因，利用该技术的前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列。以便根据这一序列合成_____。

(3)导入了目的基因的叶片组织细胞经过步骤③____和④_____后形成了完整的植株，说明_____。

(4)可以通过_____技术检测黄瓜植株中是否含有甜蛋白。33、径柳匙叶草是一种泌盐植物。科研工作者将径柳匙叶草的TaNHX2基因转移到棉花细胞内；获得了转基因耐盐棉花新品种。图1是获取的含有目的基因的DNA片段，图中箭头所指为Sau3AI；EcoRI、BamHI三种限制酶的切点；图2是三种限制酶的识别序列与酶切位点示意图；图3是农杆菌中用于携带目的基因的Ti质粒结构示意图，请分析回答问题：

(1)基因工程的核心步骤是______________________________。

(2)将含有径柳匙叶草不同基因的DNA片段导入受体菌的群体中储存，再根据TaNHX2基因的特定核苷酸序列从中提取图1的片段，此法为从____________获取目的基因。此外也可利用PCR技术扩增TaNHX2基因，需要加入的酶是_____________________，反应的温度和时间需根据具体情况进行设定，55～60℃有利于______________结合到互补DNA链上。

(3)若用BamHI切割图1所示的DNA片段，获得目的基因，则需选用限制酶__________切割图3所示质粒，该方案的缺陷是_______________________________（答出一点即可）。

(4)目的基因是否成功转录出了mRNA，常用____________的方法进行检测，为了检测技术成果，科研工作者将转基因棉花种植在盐碱地，观察其生长状况，这属于____________水平的检测。参考答案一、选择题(共9题，共18分)1、A【分析】【分析】

基因工程技术的基本步骤：

（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取；利用PCR技术扩增和人工合成。

（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤；基因表达载体包括目的基因；启动子、终止子和标记基因等。

（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同；导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法；基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。

（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术。个体水平上的鉴定：抗虫鉴定；抗病鉴定、活性鉴定等。

【详解】

A；人的胰岛素基因是DNA上的某一片段；与大肠杆菌DNA的分子组成和结构相同，这是两者能重组的基础，A正确；

B；人的不同细胞是由同一个受精卵分裂、分化形成的；所含有的基因相同，故胰岛素基因广泛存在于各种组织细胞中，B错误；

C；大肠杆菌属于原核生物；无内质网和高尔基体，C错误；

D；胰岛素基因导入大肠杆菌后；会跟随大肠杆菌的DNA进行复制、转录、翻译，故其遗传信息传递过程还应有DNA→DNA，D错误。

故选A。

【点睛】2、C【分析】【分析】

1；根据题干分析；将目的基因整合到受体细胞的细胞核中，形成的生殖细胞中含有目的基因，可能通过花粉传播而进入杂草；如将将目的基因整合到受体细胞的叶绿体中，形成的精子几乎不含细胞质，则不能通过花粉传播，避免基因污染。

2；细胞质遗传后代具有母系遗传特点；后代不会出现一定比例的性状分离比。

【详解】

A；一般而言；受精卵的全能性最高，故将目的基因整合到受体细胞的受精卵中比导入叶绿体基因组更容易成功，A错误；

B；转基因植物一般是杂合子；则植物杂交的后代会出现3：1的性状分离比，B错误；

C；花粉中含有精子；其几乎不含细胞质，而受精卵中的细胞质几乎全部来自卵细胞，所以科学家设法将目的基因整合到受体细胞的叶绿体基因组中后，就不会通过花粉转移到自然界中的其他植物，C正确；

D；转基因植物与其他植物间没有生殖隔离；能通过花粉发生基因交流，D错误。

故选C。3、C【分析】【详解】

A；在稀释率很低的情况下；稀释率的增加，也就是培养基的更新速率增加，会导致细菌密度增加，A正确；

B、稀释率从a到b的变化过程中；细菌的代时越来越小，所以细菌生长速度不断提高，B正确；

C；从图象上看；随稀释率的增加，营养物质的浓度提高，细菌代时缩短，数目减少，这是由于培养基更替太快，带走了大量的细菌，营养充足，细菌繁殖快，代时缩短，并不是死亡率增大所致，C错误。

D、在b是一个临界点，b点后，细菌的密度减小，代谢产物也会减少，要持续高效获得发酵产品，应控制在b点附近；D正确。

故选C。4、C5、D【分析】硝化细菌是化能自养型微生物，其代谢类型为自养需氧型；乳酸菌为异养厌氧型生物；根瘤菌能固定N2；其代谢类型为异养需氧型；衣藻是光能自养型生物，其代谢类型为自养需氧型。

【详解】

（1）硝化细菌能将NH3氧化成亚硝酸和硝酸，并利用该过程释放的化学能，将二氧化碳和水合成为有机物，属于自养需氧型生物，其氮源和能源都是NH3；碳源是二氧化碳，正确；

（2）乳酸菌是异养厌氧型生物；不能直接利用氮气，氮源是硝酸根离子等，碳源和能源为糖类，错误；

（3）根瘤菌是能固氮的异养需氧型生物，进行生命活动所需要的能量来自糖类等有机物的氧化分解，氮源是N2；碳源和能源是糖类，错误；

（4）衣藻是低等植物；能利用光能进行光合作用制造有机物，属于自养需氧型生物，其能源是光能，碳源是二氧化碳，氮源是硝酸根离子等，正确。

所以描述正确的一组生物是硝化细菌和衣藻；ABC错误，D正确。

故选D。6、B【分析】【分析】

基因工程技术的基本步骤：（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取；利用PCR技术扩增和人工合成。（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤；基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术。个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。

【详解】

A；Bt蛋白与受体结合导致肠道壁穿孔；使幼虫死亡，因此促进Bt蛋白的合成有助于提高植物的抗虫效果，A正确；

B；可通过DNA分子杂交技术检测Bt蛋白基因是否插入受体细胞染色体DNA上；而检测目的基因是否表达应该采用抗原-抗体杂交技术，B错误；

C；将Bt蛋白基因导入植物细胞的方法可使用农杆菌转化法、基因枪法或花粉管通道法；C正确；

D；将植物材料和农杆菌共同培养之前；植物材料需要消毒处理，D正确。

故选B。

【点睛】7、B【分析】【分析】

平板划线法是将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板；接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。

【详解】

A；划线前后都要对接种环灼烧灭菌；避免杂菌污染，划线后为避免污染环境，也要照烧灭菌，A正确；

B；由乙图菌株分布图分析可知；甲图中的d区域菌落数目最多，故为划线的起始区域，B错误；

C；蘸取菌液和划线要在酒精灯火焰旁进行；以防止杂菌污染，C正确；

D；在线的开始部分；微生物往往连在一起生长，随着连续划线，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落，D正确。

故选B。8、B【分析】【分析】

自然选育的菌种来源于自然界；菌种保藏机构或生产过程；从自然界中选育菌种的过程较为复杂，而从生产过程或菌种保藏机构得到菌种的自然选育过程较为简单；此外也可通过诱变育种和基因工程育种获得。

【详解】

A；自然选育菌种要到相应的环境从众多的微生物中进行筛选；所以费时且盲目性大，A正确；

B；乳酸菌属于原核生物；原核生物无染色体，B错误；

C；基因工程是以基因重组为原理；能够实现定向改造基因的技术，可采用基因工程的方法可构建工程菌，C正确；

D；菌种的选育可以采用诱变育种的方法；其原理是基因突变，D正确。

故选B。9、D【分析】【分析】

试管动物技术是指通过人工操作使卵子和精子在体外条件下成熟和受精并通过培养发育为早期胚胎后；再经移植后产生后代的技术，可见试管婴儿技术主要包括体外受精；早期胚胎培养和胚胎移植技术。

【详解】

A；从卵巢内取出卵母细胞不可直接进行体外受精；需要培养到MII中期，A正确；

B；胚胎移植需要受体的生理状态满足胚胎的发育；B正确；

C；可以通过胚胎分割技术获得遗传性状相同的多个子代；C正确；

D；早期胚胎培养到桑基胚或囊胚阶段进行移植；D错误。

故选D。二、多选题(共5题，共10分)10、A:C【分析】【分析】

1；试管婴儿技术是指通过人工操作使卵子和精子在体外条件下成熟和受精；并通过培养发育为早期胚胎后，再经移植后产生后代的技术。

2；设计试管婴儿技术是通过体外受精获得许多胚胎；然后从中选择符合要求的胚胎，再经移植后产生后代的技术。

【详解】

A；在采集卵母细胞之前；需要给供卵者注射适量的促性腺激素，促进超数排卵，A正确；

B；从卵巢中吸取的卵母细胞；必须经体外培养成熟后才能与获能的精子受精，B错误；

C；受精过程中；卵母细胞会发生透明带反应和卵细胞膜反应，这是防止多精入卵的两道屏障，C正确；

D；以治疗为目的的设计试管婴儿技术；是救治患者最好、最快捷的办法之一，不是有利于生育健康的下一代，并存在伦理问题，D错误。

故选AC。

【点睛】11、C:D【分析】【分析】

题图分析：限制酶SalⅠ有三处切割位点；切割后产生4个DNA片段，泳道①中是用SalⅠ处理得到的酶切产物；限制酶XhoⅠ有2处切割位点，切割后产生3个DNA片段，泳道②中是用XhoⅠ处理得到的酶切产物。

【详解】

A；酶具有专一性；不同的限制酶识别并切割不同的核苷酸序列，A错误；

B；限制酶通过作用于磷酸二酯键得到相应产物；B错误；

C；分析图1；限制酶XhoⅠ有2处切割位点，切割后产生3个DNA片段，泳道②中是用XhoⅠ处理得到的酶切产物，C正确；

D；用两种限制酶同时处理后进行电泳；若某些位点未被切割，则条带可多于6条，D正确。

故选CD。12、B:C:D【分析】【分析】

PCR技术：1；概念：PCR全称为聚合酶链式反应；是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术。2、原理：DNA复制。3、前提条件：要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一对引物。4、条件：模板DNA、四种脱氧核苷酸、一对引物、热稳定DNA聚合酶（Taq酶）5、过程：①高温变性：DNA解旋过程（PCR扩增中双链DNA解开不需要解旋酶，高温条件下氢键可自动解开）；低温复性：引物结合到互补链DNA上；③中温延伸：合成子链。

【详解】

A；过程①是由mRNA形成单链DNA的过程；表示逆转录，需要RNA、逆转录酶、引物、脱氧核苷酸等条件，A错误；

B；真核细胞中DNA的外显子部分转录的RNA拼接形成mRNA；因此真核细胞的mRNA经过程①②逆转录过程获得的DNA无内含子片段，B正确；

C；CG含量越高；氢键越多，结构越稳定，因此过程③PCR扩增时引物中的CG含量会影响退火温度，C正确；

D；新冠病毒遗传物质是RNA；RT-PCR技术可应用于新冠病毒的核酸检测，D正确。

故选BCD。

【点睛】13、A:C:D【分析】【分析】

动物核移植是指将动物的一个细胞的细胞核；移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育成为动物个体。

【详解】

A；克隆北极狼的供体细胞来自野生北极狼；卵母细胞来自发情期的母犬，因此性状由野生北极狼、发情期的母犬的基因共同决定，比格犬只是代孕母体，不提供遗传物质，A错误；

B；透明带下注射法不抽取供体细胞的细胞核；操作简单且对供体细胞核损伤小，同时注射的位置是卵母细胞外的透明带，然后诱导两个细胞融合，对卵母细胞的损伤小，B正确；

C；供体细胞注入卵母细胞透明带内后；还需要电融合法等诱导才能使供体细胞进入卵母细胞形成重构胚，C错误；

D；细胞分裂、分化形成克隆胚胎的过程是有丝分裂过程；而基因重组发生在减数分裂过程，D错误。

故选ACD。14、A:C:D【分析】【分析】

大肠杆菌是原核生物；原核细胞与真核细胞相比，最大的区别是原核细胞没有被核膜包被的成形的细胞核（没有核膜；核仁和染色体）；原核细胞只有核糖体一种细胞器；原核细胞中，转录和翻译在相同时空中进行，而真核生物的转录和翻译过程在不同时间和空间进行。

【详解】

A；人体胰岛细胞是真核细胞；在合成胰岛素原时，转录在细胞核中进行，翻译在细胞质的核糖体上进行，原核细胞没有细胞核，A错误；

B；DNA连接酶能在两个相同黏性末端配对后的磷酸与脱氧核糖之间形成化学键（磷酸二酯键）；B正确；

C；通过检测；大肠杆菌中没有胰岛素原产生，不能判断重组质粒未导入受体菌，也可能是导入后没有表达，C错误；

D；大肠杆菌是原核生物；没有内质网和高尔基体，不能对胰岛素原进行加工，因此人胰岛素原基因在大肠杆菌中表达的胰岛素原没有生物活性，D错误。

故选ACD。三、填空题(共9题，共18分)15、略

【解析】遗传和生理16、略

【分析】【分析】

1；腐乳制作过程中多种微生物参与了发酵；其中起主要作用的是毛霉，毛霉等微生物产生蛋白酶能将豆腐中的蛋白质转化成小分子肽和氨基酸，脂肪酶将脂肪转化成甘油和脂肪酸。

2；果胶酶能够分解果胶；瓦解植物的细胞壁及胞间层，使榨取果汁变得容易，而果胶分解成可溶性的半乳糖醛酸，也使得浑浊的果汁变得澄清。果胶酶并不特指某一种酶，而是分解果胶的一类酶的总称，包括多聚半乳糖醛酸酶、果胶分解酶和果胶酯酶。

【详解】

（1）在腐乳制作的过程中；利用毛霉等微生物产生的蛋白酶将豆腐中的蛋白质分解成小分子肽和氨基酸，脂肪酶将脂肪水解为甘油和脂肪酸；加酶洗衣粉里添加的酶制剂中，应用最广泛；效果最明显的是碱性蛋白酶和碱性脂肪酶。

（2）果胶酶并不特指某一种酶；而是分解果胶的一类酶的总称，包括多聚半乳糖醛酸酶；果胶分解酶和果胶酯酶；在果汁生产过程中如果要固定果胶酶，最好采用化学结合和物理吸附法固定化，这是因为酶分子小，体积小的酶容易从包埋材料中漏出。

（3）酶提取和分离原理：需要用凝胶色谱法去除相对分子质量大的杂质蛋白；以纯化酶；利用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法对酶进行纯度鉴定。

【点睛】

本题考查腐乳制作和酶提取等知识，对于此类试题，需要考生注意的细节较多，如实验的原理、实验步骤、实验采用的试剂及试剂的作用等，需要考生在平时的学习过程中注意积累。【解析】小分子肽和氨基酸脂肪酶碱性蛋白酶和碱性脂肪酶半乳糖醛酸酶、果胶分解酶、果胶酯酶化学结合法和物理吸附凝胶色谱（分配色谱）聚丙烯酰胺凝胶电泳17、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】80—100℃变性18、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】多聚酶链式反应体外扩增DNA片段19、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】现配现用20、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】植物繁殖的新途径作物新品种的培育（单倍体育种、突变体利用）21、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】茎尖极少或没有）胚状体人工薄膜不受季节的限制人工种皮；胚状体和人工胚乳。

（2）22、略

【分析】【详解】

在日常生活中；我们遇到过的与克隆技术有关的问题有：

①濒临灭绝动物的克隆：克隆可以拯救濒危的国家保护动物以及植物；我们可运用克隆，复制濒临灭绝的生物，让其不至于在我们的生活中消失；

②农业克隆：应用于农业等领域；通过转基因的方式，增加粮食的亩产量，提高土地的单位出产量；

③细胞克隆替代或者修复人体细胞问题；比如胚胎干细胞；

④畜牧业克隆：应用于畜牧业，提升优良品种群体基数，缩短畜牧育种年限。【解析】有，比如：①濒临灭绝动物的克隆；②农业克隆：应用于农业等领域，通过转基因的方式，增加粮食的亩产量，提高土地的单位出产量；③细胞克隆替代或者修复人体细胞问题，比如胚胎干细胞；④畜牧业克隆：应用于畜牧业，提升优良品种群体基数，缩短畜牧育种年限。23、略

【分析】略【解析】目的基因标记基因启动子终止子启动子上游RNA聚合酶终止子下游转录标记四、判断题(共3题，共24分)24、B【分析】【详解】

植物组织培养是指将离体的植物器官、组织或细胞等，培养在人工配制的培养基上，给予适宜的培养条件，诱导其形成完整植株的技术，最终获得了完整的植株，体现了植物细胞的全能性，而植物细胞培养的目的使获得大量的植物细胞，从而获得次生代谢物，利用的原理是细胞增殖，故错误。25、A【分析】【分析】

早期胚胎发育从受精卵开始；当卵裂分裂到16-32个细胞时，卵裂产生的子细胞逐渐形成致密的细胞团，形似桑葚时，这时的胚胎称为桑葚胚，这一阶段及之前的每一个细胞都具有发育成完整胚胎的潜能，属于全能细胞。胚胎进一步发育，细胞开始出现分化，形成内细胞团；滋养层；随着胚胎进一步发育，胚胎内部出现了含有液体的囊腔—囊胚腔，这个时期的胚胎叫做囊胚。胚胎发育至囊胚期时，细胞逐渐分化。

【详解】

囊胚时期聚集在胚胎一端的细胞形成内细胞团，将来发育成胚胎的各种组织，即发育成完整的胚胎，而沿透明带内壁拓展和排列的细胞，称为滋养层细胞，它们将来发育成胎膜和胎盘，为胚胎的发育提供营养，故“胚胎发育至囊胚期时，细胞逐渐分化表述”正确。26、B【分析】【详解】

来源于自然界的目的基因导入植物体后，可能破坏原有的基因结构，具有不确定性，外源基因也可能通过花粉传播，使其他植物成为“超级植物"等，所以如果转基因植物的外源基因来源于自然界，也可能存在安全性问题。本说法错误。五、实验题(共4题，共20分)27、略

【分析】【分析】

1；动物细胞培养的条件：

（1）无菌；无毒的环境：①消毒、灭菌；②添加一定量的抗生素；③定期更换培养液；以清除代谢废物；

（2）营养物质：糖；氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等；还需加入血清、血浆等天然物质；

（3）适宜的温度和pH；

（4）气体环境：95%空气（细胞代谢必需的）和5%的CO2（维持培养液的pH）。

2；实验操作步骤的安排一般如下：第一步：取材随机均分为几组；编号；第二步：不同组自变量的处理；第三步：把上述各组放在无关变量相同且适宜等条件下处理一段时间；第四步：观察并记录比较相应的因变量。根据题意可知，本实验的目的是验证生物制剂W对动物不同细胞的分裂具有促进作用，则该实验的自变量是细胞的种类及是否加入生物制剂W，因变量是细胞悬液中细胞的数目，对细胞直接计数可以采用血球板计数法。

【详解】

（1）①动物细胞培养前需要用胰蛋白酶或胶原蛋白酶分别处理正常肝组织和肝癌组织获得分散的细胞。将两种分散的细胞加入培养液中制成两种细胞悬液。动物细胞的培养液中需要加入葡萄糖；氨基酸、无机盐、维生素、动物血清；为了保证无菌的条件，一般在培养液中加入一定量的抗生素。

②在显微镜下可以采用血球计数板直接计数两种细胞悬液中细胞的数量；并进行记录。

③本实验的目的是验证生物制剂W对动物不同细胞的分裂具有促进作用；根据题干所给实验材料可知，不同细胞是指正常肝细胞和癌细胞，因此该实验应该设置四组，变量为细胞的种类及是否加入生物制剂W，具体如下：

A组：培养液中加入正常肝细胞悬液；B组：培养液中加入与之等量癌细胞悬液；从A；B组中各取出一半培养瓶作为C、D组；C、D两组：培养液中加入等量的生物制剂W。放入动物细胞培养箱在适宜条件下培养。

④该实验的因变量是计数细胞悬液中细胞的数量；因此各组样品在培养箱中培养一段合适的时间后，每组取部分样品，加入胰蛋白酶或胶原蛋白酶摇匀，将细胞分散成单个，然后在显微镜下计数。

（2）预测实验结果；若较长时间培养，因为正常细胞的增殖次数有限，故A组中细胞数量最少，由于W促进细胞增殖的作用，因此C组细胞数量多于A组；而癌细胞可以无限增殖，且由于其细胞膜上的糖蛋白减少，易于扩散和转移，同时失去接触抑制，可大量培养增殖，故B；D两组中细胞数量明显更多，且由于W的促进作用，D组多于B组；由于此实验是验证实验，所以实验结果是加入生物制剂W的实验组比对照组细胞数多，同时癌细胞分裂能力比正常细胞高，故绘制坐标曲线具体如下:

【点睛】

本题考查验证实验，要求学生明确实验的目的，正确区分实验的变量，能够根据题意判断自变量和因变量，然后根据设计实验的单一变量和等量原则，同时结合题干所给的实验材料完善实验设计，并能预测实验结果和绘制相关曲线图表示实验的结果。【解析】胰蛋白酶（胶原蛋白酶）葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、动物血清抗生素血球计数板等量肝癌细胞悬液等量生物制剂W胰蛋白酶（胶原蛋白酶）28、略

【分析】【分析】

培养基是指供给微生物；植物或动物（或组织）生长繁殖的；由不同营养物质组合配制而成的营养基质。一般都含有碳水化合物、含氮物质、无机盐（包括微量元素）、维生素和水等几大类物质。培养基既是提供细胞营养和促使细胞增殖的基础物质，也是细胞生长和繁殖的生存环境。培养基种类很多，根据配制原料的来源可分为自然培养基、合成培养基、半合成培养基；根据物理状态可分为固体培养基、液体培养基、半固体培养基；根据培养功能可分为基础培养基、选择培养基、加富培养基、鉴别培养基等；根据使用范围可分为细菌培养基、放线菌培养基、酵母菌培养基、真菌培养基等。

【详解】

（1）培养基一般都含有水；无机盐、碳源和氮源等物质；以满足生物生长的需求；培养基制作后需使用高压蒸汽灭菌法进行灭菌；由于本实验的目的是获得可耐受高浓度β-苯乙醇的酵母菌株，因此实验初筛、复筛和再次复筛时培养基中添加的β-苯乙醇浓度要逐渐升高。

（2）根据计算公式：（平均菌落数）÷涂布体积×稀释倍数=每毫升菌液中的菌体数，可知：（平均菌落数）÷0．1mL×104=4．5×106个；所以平板上的平均菌落数是45个；液体培养是指将微生物直接接种于液体培养基中，并不断振荡或搅拌，可以迅速得到大量繁殖体。

（3）由实验目的可知，该实验的自变量是葡萄糖溶液的浓度，因变量是YDF-1的增殖情况，可通过显微镜直接计数这一简便的方法来确定其增殖情况，因此实验的设计思路是设置一系列浓度梯度的葡萄糖溶液，再向其中分别接种等量的YDF-1，每天定时用血细胞计数板统计溶液中的菌体数量，增殖效果最佳的葡萄糖溶液即为YDF-1增殖的最佳浓度。【解析】(1)碳源；氮源高压蒸汽灭菌逐渐增大只有将培养基中β-苯乙醇的浓度逐渐增大；才能筛选得到可耐受高浓度β-苯乙醇的酵母菌株。

(2)45增加目的菌株浓度。

(3)设置一系列浓度梯度的葡萄糖溶液，再向其中分别接种等量的YDF-1，每天定时用血细胞计数板统计溶液中的菌体数量，增殖效果最佳的葡萄糖溶液即为YDF-1增殖的最佳浓度29、略

【分析】【分析】

PCR扩增目的基因可分为以下几步：①模板DNA的变性：模板DNA经加热至90℃以上一定时间后；使模板DNA双链或经PCR扩增形成的双链DNA解离，使之成为单链，以便它与引物结合，为下轮反应作准备；②模板DNA与引物的复性：模板DNA经加热变性成单链后，温度降至50℃左右，引物与模板DNA单链的互补序列配对结合；③引物的延伸：当温度上升到72℃左右时，DNA模板--引物结合物在热稳定DNA聚合酶的作用下，以dNTP为反应原料，靶序列为模板，按碱基配对与半保留复制原理，合成一条新的与模板DNA链互补的半保留复制链。

(1)

步骤①从病毒RNA到病毒cDNA的过称为逆转录；需要的酶是逆转录酶；步骤④为延伸过程，需要的酶是热稳定DNA聚合酶；利用PCR技术扩增目的基因的前提，是要有一段已知目的基因的核苷酸序列，以便根据这一序列合成引物，所以引物A和引物B是根据一段已知新冠病毒基因的核苷酸序列合成的。

(2)

步骤③是复性；复性指当温度下降到50℃左右时，两种引物通过碱基互补配对与两条单链DNA结合，所以目的是使引物A；引物B、基因探针与病毒cDNA的目的片段结合，如果该步骤出现失误，由图可知结合的荧光染料不能被仪器检测到荧光，游离的荧光染料能被仪器检测到荧光对检测结果的影响是不能降解探针，导致存在病毒cDNA但无法用仪器检测到荧光。

(3)

新冠病毒抗体检测可作为核酸检测的补充；抗体检测的原理是抗原抗体特异性结合；对某人进行检测时发现，其核酸检测为阴性说明此人体内没有检测出新冠病毒，抗体检测呈阳性说明此人体内有相应抗体，原因可能是此人曾感染新冠病毒并已康复（或此人已注射新冠疫苗）。

【点睛】

本题考查PCR相关知识，并结合了热点问题新冠病毒，理论联系实际，加深了学生的理解。【解析】(1)逆转录酶热稳定DNA聚合酶一段已知新冠病毒基因的核苷酸。

(2)使引物A；引物B、基因探针与病毒cDNA的目的片段结合不能降解探针；导致存在病毒cDNA但无法用仪器检测到荧光。

(3)抗原抗体特异性结合此人曾感染新冠病毒并已康复（或此人已注射新冠疫苗）30、略

【分析】【分析】

图1可知：T-2毒素是一种常见的菌素；CYP3A是降解T-2毒素的关键酶，T-2毒素可诱导其表达水平升高，当用两种调控序列同时连接启动子，启动子的活性最高。

图2可知：野生型探针能与NF-Y结合；突变型探针不能与NF-Y结合，NF-Y抗体一定能与NF-Y结合。

【详解】

（1）初级代谢产物一般是霉菌生命活动所必需的，大多存在于细胞内。次级代谢产物不是霉菌生命活动必需的，并且分泌到体外，故T-2毒素是霉菌的次级代谢产物。T-2毒素是一种由霉菌分泌的脂溶性小分子，脂溶性小分子以自由扩散的方式进入细胞。

（2）实验的自变量是有无调控序列；根据单一变量原则，对照组的目的是为了排除无光变量的影响，除了没有调控序列，其他处理和实验组相同，所以对照组和实验组猪肝细胞均导入含CYP3A基因启动子及LUC基因的表达载体，然后向各组猪肝细胞培养液中加入加入等量T-2毒素，适宜条件下进行培养。从图中信息可知，缺失两个调控序列和对照组活性一致，缺失一个比对照组活性略强，两个都存在活性最高，说明这两个调控序列是CYP3A基因响应T-2毒素的核心元件。故缺失两个调控序列或其中任一个，T-2毒素都不能诱导启动子活性明显增强。

（3）①实验的目的是要验证NF-Y能与B1结合；根据第2组和第3组结果，依据B1序列制备的NF-Y结合位点野生型探针能与NF-Y结合，根据第4组结果，突变型探针不能与NF-Y结合。第5组加入了NF-Y抗体，一定能与NF-Y结合。故可以解释为：结合位点突变的探针不能结合核蛋白中的NF-Y，也不会竞争NF-Y与标记探针的结合，所以第4组与第2组同样位置出现阻滞带。第5组，NF-Y的抗体结合NF-Y，因此第5组中出现标记探针；NF-Y和NF-Y抗体的结合物，结合物分子量大，阻滞带的位置更靠后。

②假设NF-Y和Sp1通过互作共同发挥调控功能，它们之间的距离是发挥作用的最佳距离，故增大或缩小B1和B2两者之间的距离都会降低CYP3A基因的启动子的活性。【解析】(1)次级自由扩散。

(2)等量的T-2毒素缺失两个调控序列或其中任一个；T-2毒素都不能诱导启动子活性增强。

(3)结合位点突变的探针不能结合核蛋白中的NF-Y，也不会竞争NF-Y与标记探针的结合，所以第4组与第2组同样位置出现阻滞带。NF-Y的抗体结合NF-Y，因此第5组中出现标记探针、NF-Y和NF-Y抗体的结合物，结合物分子量大，阻滞带的位置更靠后。NF-Y和Sp1通过互作共同发挥调控功能，它们之间的距离是发挥作用的最佳距离。六、综合题(共3题，共30分)31、略

【分析】【分析】

实验原理：1；在多种微生物的协同作用下进行；其中起主要作用的是毛霉，它是一种丝状真菌，新陈代谢类型是异养需氧型。2、毛霉等微生物产生的蛋白酶可以将蚕豆中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可以将脂肪水解成甘油和脂肪酸。

(1)

蚕豆中含有大量蛋白质；主要为微生物的生长提供碳源（提供碳元素）和氮源（提供氮元素）类营养物质；加入的蚕豆经沸水漂烫约4min冷却后使用，这样既可以对蚕豆进行消毒，消灭蚕豆表面的杂菌，又能防止蚕豆温度过高导致接种的微生物死亡。

(2)