2025年人教A版选择性必修3生物下册阶段测试试卷

…………○…………内…………○…………装…………○…………内…………○…………装…………○…………订…………○…………线…………○…………※※请※※不※※要※※在※※装※※订※※线※※内※※答※※题※※…………○…………外…………○…………装…………○…………订…………○…………线…………○…………第=page22页，总=sectionpages22页第=page11页，总=sectionpages11页2025年人教A版选择性必修3生物下册阶段测试试卷383考试试卷考试范围：全部知识点；考试时间：120分钟学校：______姓名：______班级：______考号：______总分栏题号一二三四总分得分评卷人得分一、选择题(共6题，共12分)1、下列关于蛋白质工程应用的叙述，不正确的是（）A.通过蛋白质工程生产更符合人类需要的产品B.通过蛋白质工程可以改变蛋白质的活性C.通过蛋白质工程制成体积小、耗电少、效率高的电子元件D.利用蛋白质工程可以在大肠杆菌细胞中得到人干扰素2、下列是对四种微生物的能源；碳源、氮源、新陈代谢类型的描述；正确的一组是（）

。微生物种类乳酸菌根瘤菌硝化细菌衣藻A能源糖类光能NH3光能B碳源糖类CO2CO2CO2C氮源NO3N2NH3NO3D代谢类型异养厌氧型自养需养型自养需养型自养需养型A.AB.BC.CD.D3、某同学用带盖玻璃瓶制作果酒和果醋，以下做法中不正确的是（）A.果酒发酵利用了酵母菌的无氧呼吸原理B.果酒发酵进程中应适时拧松瓶盖放气C.由果酒发酵转入果醋发酵时适当调低温度D.果醋发酵过程中pH值会下降4、在家畜优良品种培育过程中常涉及胚胎工程的相关技术。下列叙述错误的是（）A.经获能处理的精子才能用于体外受精B.受精卵经体外培养可获得早期胚胎C.胚胎分割技术提高了移植胚胎的成活率D.胚胎移植前需对受体进行选择和处理5、某研究小组应用生物技术得到克隆牛（甲）、试管牛（乙）、转基因牛（丙），下列叙述正确的是（）A.甲、乙、丙的培育过程均需对受体母牛进行超数排卵处理B.甲和丙都是由受精卵发育而来的C.在乙和丙的培育过程中，都要经过分子水平的筛选D.培育甲和乙的技术，都可加快优质牛的繁殖速度6、如图所示为利用奶牛乳汁生产人血清白蛋白的过程，下列叙述正确的是（）

A.血清白蛋白基因需要与乳腺蛋白的启动子等重组在一起才能特异性表达B.图中卵母细胞需体外培养到MⅡ期再利用显微注射法进行去核处理C.重构胚④通过电融合法激活发育到囊胚期后进行胚胎分割D.胚胎移植前需用内细胞团的细胞进行性别鉴定评卷人得分二、多选题(共6题，共12分)7、下列关于高产奶牛克隆过程的叙述，错误的是（）A.供体牛体细胞在进行体外培养时，不可能发生细胞贴壁和接触抑制的现象B.培养至MⅡ中期的卵母细胞的细胞质中含有能促进细胞核全能性表达的物质C.通过电刺激促进供体与去核受体细胞两两融合，供体核进入卵母细胞D.胚胎移植时，应将重组细胞直接移入代孕母牛的子宫8、下列关于传统发酵技术的叙述，错误的是（）A.较高温度和密闭环境有利于果醋的发酵B.盐的用量、酒的种类和用量、温度等均会影响腐乳风味C.果酒、果醋和腐乳制作的微生物细胞呼吸产生CO2的场所都是细胞质基质D.与自然发酵相比，人工接种菌种不易被杂菌污染9、下图为某个基因的部分片段，关于该结构的叙述，错误的是（）

A.①所圈定的部位是腺嘌呤B.DNA连接酶作用于②处C.限制酶作用于③处D.解旋酶作用于④处10、青蒿素主要用于恶性疟疾的症状控制以及耐氯喹虫株的治疗。为了快速检测青蒿素；科研人员利用细胞工程技术制备了抗青蒿素的单克隆抗体，其基本操作过程如下图。以下相关叙述正确的是（）

A.过程②体现了细胞膜的流动性，过程⑤若在体内进行则操作更简单B.过程③常使用选择培养基，过程④常使用抗原-抗体杂交技术C.若细胞乙均由细胞两两融合而成，则细胞乙、丙、丁的染色体组数一定相同D.骨髓瘤细胞通常是从小鼠脾脏中提取的，其表面糖蛋白减少，培养时失去接触抑制11、为了获得抗蚜虫棉花新品种，研究人员将雪花莲凝集素基因（GNA）和尾穗苋凝集素基因（ACA）与载体（pBI121）结合，然后导入棉花细胞（如下图所示）。下列操作与实验目的相符的是（）

A.用限制酶BsaBⅠ和DNA连接酶处理两种基因可获得GNA-ACA融合基因B.用KpnⅠ和XhoⅠ两种酶处理融合基因和载体可保证基因转录方向正确C.将棉花细胞接种在含氨苄青霉素的培养基上可筛选出转基因细胞D.用PCR技术可检测GNA和ACA基因是否导入棉花细胞中12、利用枯草芽孢杆菌的发酵可以生产亮氨酸脱氢酶。在启动子和亮氨酸脱氢酶基因之间插入信号肽（SPN）基因并将重组质粒导人枯草芽孢杆菌构建工程菌，可提高亮氨酸脱氢酶的生产水平。重组质粒的构建如图所示，KmR为卡那霉素抗性基因，ApR为氨苄青霉素抗性基因，图中各限制酶切割产生的黏性末端不同。下列叙述正确的是（）

A.重组质粒pMA5-SPN-leudh除图中标注外还应具有终止子、复制原点等结构B.构建重组质粒用NdeI和BamHI两种酶有助于正确插入目的基因C.图中KmR和ApR存在于质粒中的作用是便于重组DNA分子的筛选D.图中各限制酶切开的是氢键和磷酸二酯键，切下的DNA片段拼接需依靠DNA连接酶评卷人得分三、填空题(共8题，共16分)13、平板划线法是通过____________在_______________培养基表面______________的操作，将__________的菌种______________分散到培养基的表面。在数次划线后培养，可以分离到由____________繁殖而来的肉眼可见的_______________，这就是_______________________。稀释涂布平板法则是将菌液进行一系列的______________，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到_____________培养基的表面，进行培养。在稀释度足够高的菌液里，聚集在一起的微生物将被分散成____________，从而能在培养基表面形成___________________。14、最常用的载体是______，它是一种裸露的、结构简单的、独立于细菌染色体之外，并具有______能力的_____。15、原核基因采取______获得，真核基因是______。人工合成目的基因的常用方法有______和______。16、DNA粗提取与鉴定实验中，二苯胺要___________。17、_______mol/L浓度下，DNA溶解度最大。18、干细胞的应用：有着_____能力及_____的干细胞，与组织、器官的发育、_____和_____等密切相关。19、最后检测目的基因是否翻译成______，方法是从转基因生物中提取______，用相应的______进行______。20、某种微生物合成的一种蛋白酶与人体消化液中某种蛋白酶的结构和功能很相似，只是前者热稳定性较差，进入人体后容易失效。尝试根据本节课所学知识提出改造该种微生物蛋白酶的思路_________。评卷人得分四、综合题(共2题，共12分)21、阅读以下材料，回答（1）〜（5）。

基因魔剪：CRISPR/Cas系统。

要揭示生命的运作原理；常需要对基因进行编辑。在过去，这一步异常艰难。但随着CRISPR/Cas技术的出现，科学家已能在极短时间内就更改生命密码。

CRISPR/Cas9系统由Cas9蛋白和人工设计的gRNA构成。在gRNA引导下；Cas9与靶序列结合并将DNA双链切断。随后细胞通过自身的DNA损伤修复机制，将断裂上下游两端的序列连接起来，但通常会在断裂处造成少量核苷酸的插入或缺失。当DNA双链断裂后，如果细胞中有DNA修复模板（由需要插入的目的基因和靶序列上下游的同源序列组成），断裂部分可依据修复模板进行精确修复，从而将目的基因描入到指定位点。

通过在Cas9基因中引入突变，获得了只有切割一条链活性的nCas9。将nCas9与胞嘧啶脱氨酶或腺嘌呤脱氨酶融合，科学家开发出了单碱基编辑技术（图2)，能够对靶位点进行精准的碱基编辑，最终可以分别实现C→T(G→A)或A→G(T→C)的减基替换。

对CRISPR/Cas系统的不断改造；使其在基因编辑外，还可用于激活或抑制基因的转录等。虽然目前CRISPR/Cas技术还存在一些不足，如脱靶问题等，但作为一种革命性的技术，其应用前景广阔。

（1）利用CRISPR/Cas9技术进行基因编辑，需构建含gRNA基因和Cas基因的___________，并导入受体细胞。gRNA依据___________原则与靶序列特异性结合；引导Cas9蛋白进行切割。

（2）有些遗传病是由于基因中一个碱基对的改变引起的，如果要修正此基因突变，图示的三种途径中，哪种更为合适？__________请判断并说明理由__________。

（3）如果要利用CRISPR/Cas9技术将一个基因从基因组序列中删除，设计gRNA的思路是___________。

（4）将CRISPR/Cas9技术用于抑制基因转录时（不改变基因结构），需对CRISPR/Cas9系统进行改造和设计，请写出基本思路__________。

（5）将CRISPR/Cas技术应用于人类基因的编辑时，特别要注意___________方面的问题。22、四环素是放线菌产生的一种广谱抗生素；既可以用来进行动物疾病的治疗，还可以作为饲料的添加剂促进动物生长。然而，四环素的化学结构稳定，在动物体内并不能被完全吸收转化，大部分以原尿形式排出体外，易在环境中积累，造成污染。研究人员从养鸡场粪便堆肥中筛选获得两株对四环素具有一定降解能力的菌株，并探究其对四环素降解的最佳条件，为修复及治理被四环素污染的环境提供菌种资源和理论依据。回答下列问题：

(1)为筛选出四环素降解菌，从饲料中添加_______的养鸡场粪便中取5g样品，加入无菌水制成悬液接种至适宜的液体培养基中，置于30℃、160t/min摇床恒温振荡培养，此操作的目的是________________。

(2)培养结束后对培养液进行梯度稀释，从不同稀释倍数的稀释液中各吸取100µL稀释液，涂布于含有“一定浓度四环素的选择培养基上。待长出单菌落，挑选菌落形态外观不同的单菌落直接用______法进一步分离纯化。若要临时保藏菌种，可将其接种到试管的______上；待长成菌落后再置于4℃冰箱中保藏，以备后续实验。

(3)分离得到两种对四环素具有降解能力的菌种A和B。为研究不同碳源和氮源时；两种菌对四环素降解能力的影响，在含适宜浓度的四环素的无机盐培养基中分别加入1%不同碳源和氮源作为实验组，不加碳源或氮源的作为对照组，6d后测定四环素残留量结果如下图所示：

①四环素可为能降解四环素的微生物提供碳源，碳源可为微生物的生长提供__________（答出两点）；分析可知，在碳源和氮源分别为_________________时，A菌降解四环素的能力最高；添加蔗糖对B菌降解四环素具有______________作用。

②为保证实验的严谨性，本实验还需要再添加一组对照实验，该对照实验的设置为_______________。参考答案一、选择题(共6题，共12分)1、D【分析】【分析】

蛋白质工程指以蛋白质的结构规律及其与生物功能的关系作为基础；通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行基因改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活的需要。蛋白质工程是在基因工程的基础上，延伸出来的第二代基因工程。

【详解】

A；根据蛋白质工程的概念可知；通过蛋白质工程可生产更符合人类需要的产品，A正确；

B；通过蛋白质工程可以改变蛋白质的活性；B正确；

C；利用蛋白质工程可制成体积小、耗电少、效率高的电子元件；C正确；

D；利用基因工程可以在大肠杆菌细胞中得到人干扰素；D错误。

故选D。

【点睛】2、C【分析】【分析】

【详解】

根据题意和图表分析可知：乳酸菌的氮源应该是NH4+；根瘤菌能固氮，但不能自己制造有机物，它的碳源不是CO2，其代谢类型是异养需氧型；衣藻能利用光能进行光合作用，但其氮源应该是NH4+；所以ABD都不正确；选C。

【点睛】3、C【分析】【分析】

果酒和果醋制作过程中的相关实验操作：

（1）材料的选择与处理：选择新鲜的葡萄；榨汁前先将葡萄进行冲洗，除去枝梗。

（2）灭菌：①榨汁机要清洗干净；并晾干。②发酵装置要清洗干净，并用70%的酒精消毒。

（3）榨汁：将冲洗除枝梗的葡萄放入榨汁机榨取葡萄汁。

（4）发酵：①将葡萄汁装人发酵瓶；要留要大约1/3的空间，并封闭充气口。

②制葡萄酒的过程中；将温度严格控制在18℃~25℃，时间控制在10~12d左右，可通过出料口对发酵的情况进行。及时的监测。

③制葡萄醋的过程中；将温度严格控制在30℃~35℃，时间控制在前7~8d左右，并注意适时通过充气口充气。

【详解】

A；酵母菌进行无氧呼吸产生酒精和二氧化碳；果酒发酵的菌种是酵母菌，该过程利用了酵母菌的无氧呼吸原理，A正确；

B；酵母菌进行无氧呼吸产生酒精和二氧化碳；在发酵过程中密闭，但需要根据发酵进程适时拧松瓶盖放气，B正确；

C；果酒发酵的适宜温度在18℃~25℃；果醋发酵的适宜温度在30℃~35℃，所以由果酒发酵转入果醋发酵时需要适当调高温度，C错误；

D；果醋发酵过程中的产物是醋酸；随着醋酸的积累，pH值会下降，D正确。

故选C。

【点睛】4、C【分析】【分析】

胚胎移植的基本程序主要包括：①对供；受体的选择和处理（选择遗传特性和生产性能优秀的供体；有健康的体质和正常繁殖能力的受体，用激素进行同期发情处理，用促性腺激素对供体母牛做超数排卵处理）；②配种或人工授精；③对胚胎的收集、检查、培养或保存（对胚胎进行质量检查，此时的胚胎应发育到桑椹或胚囊胚阶段）；④对胚胎进行移植；⑤移植后的检查。

【详解】

A；精子需要经过获能处理才具有受精能力；A正确；

B；受精卵经体外培养可获得早期胚胎；B正确；

C；胚胎分割可以获得多个胚胎；与移植胚胎成活率无关，C错误；

D；胚胎移植前；需选择健康体质和正常繁殖能力的受体且进行同期发情处理，D正确。

故选C。5、D【分析】【分析】

1；受精前的准备阶段（1）准备阶段1-精子获能．刚刚排出的精子；不能立即与卵子受精，必须在雌性动物生殖道发生相应的生理变化后，才能获得受精能力。（2）准备阶段2-卵子的准备，动物排出的可能是初级卵母细胞也可能是次级卵母细胞，都要在输卵管内进一步成熟，达到减数第二次分裂中期时，才具备与精子受精的能力。

2；用促性腺激素处理；使其超数排卵，然后，从输卵管中冲取卵子，直接与获能的精子体外受精。

3；胚胎移植的意义：（1）加速育种工作和品种改良；（2）大量节省购买种畜的费用；（3）一胎多产；（4）保存品种资源和濒危物种；（5）可充分发挥优秀个体的繁殖潜力。

【详解】

A；甲、乙、丙的培育过程均需对供体母牛进行超数排卵处理；A错误；

B；甲是无性繁殖；不是由受精卵发育而来的，B错误；

C；试管牛（乙）不需要进行分子水平的筛选；转基因牛丙是否培育成功，可以通过抗原-抗体杂交技术从分子水平进行检测，C错误；

D；试管牛（乙）采用体外受精、早期胚胎培养和胚胎移植技术；产生的试管牛属于有性生殖的产物，体外受精和早期胚胎发育、胚胎移植等技术可以缩短繁殖周期，加快优质牛繁殖速度；克隆牛（甲）是采用体细胞核移植、早期胚胎培养和胚胎移植技术，产生的克隆牛属于无性生殖的产物，克隆技术用于动物繁殖具有控制性别、加快繁殖速度、保持优良性状等优点，D正确。

故选D。6、A【分析】【分析】

分析题图：①～③是动物细胞培养过程；需要先用胰蛋白酶将细胞分散成单个细胞；①是目的基因（血清白蛋白基因）；②～③表示采用转基因技术，将目的基因（血清白蛋白基因）导入受体细胞的过程；④是重组细胞；⑤是胚胎；⑤～⑥采用了胚胎分割技术，对囊胚进行胚胎分割时，要将内细胞团均等分割；⑥～⑦表示胚胎移植过程；⑧是转基因生物（乳腺生物反应器）。

【详解】

A；RNA聚合酶的识别位点是DNA的启动子；血清白蛋白基因需要与乳腺蛋白的启动子等重组在一起才能特异性表达，A正确；

B；图中卵母细胞需体外培养到MⅡ中期；再利用显微注射法进行去核处理，B错误；

C；重构胚④通过电融合法激活培养至桑葚胚或囊胚阶段进行胚胎移植；对囊胚进行胚胎分割时，要将内细胞团均等分割，C错误；

D；胚胎移植前需用滋养层的细胞进行性别鉴定；D错误。

故选A。二、多选题(共6题，共12分)7、A:D【分析】【分析】

动物核移植是指将动物的一个细胞的细胞核移入一个去掉细胞核的卵母细胞中；使其重组并发育成一个新的胚胎。这个新的胚胎最终发育为动物个体。核移植得到的动物称克隆动物，克隆动物的核基因完全来自供体动物，而细胞质基因来自受体细胞。

【详解】

A；供体牛体细胞在进行体外培养时；当贴壁细胞分裂生长到细胞表面相互接触时，细胞会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的接触性抑制，A错误；

B；核移植用MⅡ中期的卵母细胞做受体细胞原因有卵母细胞体积大；便于操作；含有促使细胞核表达全能性的物质；营养物质丰富，B正确；

C；去核的卵母细胞与供体细胞通过电击后融合；供体核进入受体卵母细胞，构建成重组胚胎，C正确；

D；胚胎移植时；应先将重组细胞培养成早期胚胎，再把早期胚胎移入代孕母牛的子宫，D错误。

故选AD。8、A:C【分析】【分析】

1；在利用酵母菌发酵时最好是先通入足够的无菌空气在有氧环境下一段时间使其繁殖；再隔绝氧气进行发酵；酒精发酵的最佳温度是在18℃～25℃，pH最好是弱酸性。

2；醋酸菌是好氧性细菌；当缺少糖源时和有氧条件下，可将乙醇（酒精）氧化成醋酸；当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸；醋酸菌生长的最佳温度是在30℃～35℃。

3；豆腐的主要营养成分是蛋白质和脂肪；都是大分子有机化合物，难以消化、吸收，毛霉、酵母菌等多种微生物分泌的蛋白酶，能将蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸，脂肪酶可将脂肪分解成甘油和脂肪酸，在多种微生物的协同下，豆腐转变成腐乳。

【详解】

A；果醋制作的菌种是醋酸菌；属于好氧菌，故密闭环境不利于果醋的发酵，A错误；

B；腐乳制作过程中；盐的用量、酒的种类和用量、温度等均会影响腐乳风味，B正确；

C、参与果酒制作的酵母菌是兼性厌氧型真核生物，参与果醋制作的醋酸菌是需氧型原核生物，参与腐乳制作的毛霉是需氧型真核生物，所以果酒制作的微生物细胞呼吸产生CO2的场所是细胞质基质或线粒体、果醋制作的微生物细胞呼吸产生CO2的场所是细胞质基质，而腐乳制作的微生物细胞呼吸产生CO2的场所是线粒体；C错误；

D；与自然发酵相比；人工接种过程中利用了严格的灭菌措施，可以防止其它杂菌污染，且发酵获得的产品品质更好，D正确。

故选AC。

【点睛】9、A:C:D【分析】【分析】

题图分析：该图为某个基因的部分片段；①不但包括腺嘌呤．还包括侧链上的磷酸的脱氧核糖，为腺嘌呤脱氧核苷酸；②是磷酸和脱氧核糖之间的磷酸二酯键；③是碱基之间的氢键；④是含氮碱基和脱氧核糖之间的化学键。

【详解】

A；图示为DNA结构模式图；图中①所圈定的部位是腺嘌呤脱氧核苷酸，A错误；

B；DNA连接酶能使两个脱氧核苷酸之间的化学键②磷酸二酯键形成；B正确；

C；删去；图中没有⑤，限制酶作用于磷酸二酯键。

D；解旋酶作用于碱基对之间的氢键③处；使氢键断开，D错误。

故选ACD。

【点睛】10、A:B:C【分析】【分析】

题图分析：过程①为注射抗原；诱导小鼠产生具有免疫能力的B细胞；过程②为将具有免疫能力的B细胞和骨髓瘤细胞融合；过程③用选择性培养基筛选杂交瘤细胞；过程④用抗体检测和克隆培养得到能产生特定抗体的杂交瘤细胞；过程⑤为提取单克隆抗体。

【详解】

A；过程②为将具有免疫能力的B细胞和骨髓瘤细胞融合；体现了细胞膜的流动性；过程⑤为提取单克隆抗体，若在体内进行（可从小鼠腹水中提取），则操作更简单，A正确；

B；过程③是筛选杂交瘤细胞；常使用选择培养基（未融合的细胞，融合的具有相同核的细胞均死亡，杂交瘤细胞能正常生存）；过程④用抗体检测和克隆培养得到能产生特定抗体的杂交瘤细胞，常使用抗原—抗体杂交技术，B正确；

C；因细胞甲和细胞乙均来源于小鼠；若细胞乙均由细胞两两融合而成，则细胞乙和经筛选后的丙、丁的染色体组数一定相同，C正确；

D；骨髓瘤细胞是从小鼠的骨髓中提取的；脾脏中无骨髓瘤细胞，D错误。

故选ABC。11、A:D【分析】【分析】

基因工程技术的基本步骤：（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样．将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是Ca2+处理法。（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因；②检测目的基因是否转录出了mRNA；③检测目的基因是否翻译成蛋白质：抗原-抗体杂交技术。个体水平上的鉴定：抗虫鉴定；抗病鉴定、活性鉴定等。

【详解】

A；两个基因中都有限制酶BsaBⅠ的一个识别位点；用该限制酶切割后再用DNA连接酶可拼接成GNA-ACA融合基因，A正确；

B；GNA-ACA融合基因的两端有限制酶KpnⅠ和XhoⅠ的切割位点；而质粒上也有限制酶KpnⅠ和XhoⅠ的切割位点，但方向不一致，用两酶切割，正好是反向连接目的基因和运载体，B错误；

C；运载体上带有卡那霉素的抗性基因；没有氨苄青霉素的抗性基因，转基因细胞在含有氨苄青霉素的培养基上不能存活，C错误；

D；用PCR技术扩增GNA和ACA基因后；再通过分子杂交或电泳的方式，可检测是否导入棉花细胞中，D正确。

故选AD。12、A:B:C【分析】【分析】

限制酶能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列；并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂，形成黏性末端和平末端两种。

【详解】

A；重组质粒pM5-SPN-leudh中除图中标注外；还应该具有终止子，复制原点等结构，A正确；

B；NdeI和BamHI两种酶切割形成的黏性末端不同；构建重组质粒用NdeI和BamHI两种酶切有助于目的基因正确插入，B正确；

C；KmR和A_pR为标记基因；图中KmR和A_pR存在于质粒中的作用是便于重组DNA分子的筛选，C正确；

D；限制酶和DNA连接酶的作用部位为磷酸二酯键；D错误。

故选ABC。三、填空题(共8题，共16分)13、略

【解析】①.接种环②.琼脂固体③.连续划线④.聚集⑤.逐步稀释⑥.一个细胞⑦.子细胞群体⑧.菌落⑨.梯度稀释⑩.琼脂固体⑪.单个细胞⑫.单个的菌落14、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】质粒自我复制双链环状DNA分子15、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】直接分离人工合成反转录法化学合成法16、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】现配现用17、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】0．1418、略

【分析】略【解析】自我更新分化潜能再生修复19、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】蛋白质蛋白质抗体抗原－抗体杂交20、略

【分析】【详解】

要提高酶的热稳定性，可采用蛋白质工程技术替换少数氨基酸，改善其功能，需要从改造控制该酶合成的基因着手，具体做法为从预期的蛋白质功能出发→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到并改变相对应的脱氧核苷酸序列→获得所需的蛋白质。【解析】采用蛋白质工程技术替换少数氨基酸，提高该酶的热稳定性，从改造控制该酶合成的基因着手，具体做法为从预期的蛋白质功能出发→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到并改变相对应的脱氧核苷酸序列→获得所需的蛋白质。四、综合题(共2题，共12分)21、略

【分析】【分析】

根据题干信息“在gRNA引导下；Cas9与靶序列结合并将DNA双链切断”，指出了该系统的作用机理；

而图中显示出了该系统的结果；方法一是造成碱基对的改变，即发生基因突变，方法二是插入目的基因，方法三是使碱基对发生了替换。

【详解】

（1）利用CRISPR/Cas9技术进行基因编辑；需构建含gRNA基因和Cas基因的重组DNA分子，gRNA是一段RNA序列，和DNA序列结合是依据碱基互补配对的原则进行的。

（2）图中第①条途径将基因剪切后；可能造成突变，第二条途径是剪切后插入了新的基因，第三条途径是实现碱基对的替换，所以如果修复由于基因中一个碱基对的改变引起的，需要替换该基因，第③种更合适。

（3）如果要将一个基因从基因组序列中删除；由于基因是两条链，而gRNA与一条链结合，所以可以设计两条2条gRNA，使其从基因的5’和3’端同时结合，并在相应的酶的作用下，将目的基因切除。

（4）CRISPR/Cas9技术利用gRNA与DNA互补；Cas9与靶序列结合并将DNA双链切断，所以可以通过一些技术让酶Cas9蛋白的基因发生突变，使其失去切割活性，在gRNA的引导下与基因启动子结合，从而使RNA聚合酶失去结合位点，抑制靶基因的转录。

（5）将CRISPR/Cas技术应用于人类基因的编辑时；特别要注意生物技术的伦理问题，例如：对健康胚胎进行基因编辑是不理智的，违反伦理的；基因编辑后她们的全身基因组可能造成突变。

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