2025年外研衔接版选择性必修3生物上册月考试卷含答案

…………○…………内…………○…………装…………○…………内…………○…………装…………○…………订…………○…………线…………○…………※※请※※不※※要※※在※※装※※订※※线※※内※※答※※题※※…………○…………外…………○…………装…………○…………订…………○…………线…………○…………第=page22页，总=sectionpages22页第=page11页，总=sectionpages11页2025年外研衔接版选择性必修3生物上册月考试卷含答案考试试卷考试范围：全部知识点；考试时间：120分钟学校：______姓名：______班级：______考号：______总分栏题号一二三四五总分得分评卷人得分一、选择题(共9题，共18分)1、北极比目鱼中有抗冻基因；其编码的抗冻蛋白具有11个氨基酸的重复序列，该序列重复次数越多，抗冻能力越强，下图是获取转基因抗冻番茄植株的过程示意图，有关叙述正确的是（）

A.过程①获取的目的基因，可用于基因工程和比目鱼基因组测序B.将多个抗冻基因编码区依次相连成能表达的新基因，不能得到抗冻性增强的抗冻蛋白C.过程②构成的重组质粒缺乏标记基因，需要转入农杆菌才能进行筛选D.应用DNA分子杂交技术，可以检测转基因抗冻番茄植株中目的基因的存在及其完全表达2、为有效防范由各类生物因子、生物技术误用滥用等引起的生物性危害，生物安全已纳入国家安全体系。以下选项中会给我国带来生物安全风险的是（）A.将新冠患者的血浆采集后注射到危重患者体内B.试管婴儿通过基因筛查技术阻断遗传疾病的遗传C.利用生物技术改造的工程菌获得大量的抗生素D.克隆技术可应用到器官移植但不能进行人体克隆3、下图表示pBR322质粒和人生长激素基因所在片段的结构信息，将二者构建的重组质粒导入受体菌并进行筛选。下列叙述错误的是（）

A.应选择的限制酶组合是酶F和酶GB.所选用的受体菌不能含有Apr和Tcr基因C.用含氨苄青霉素的培养基筛选出含重组质粒的受体菌D.同时用三种限制酶处理图中质粒，电泳后可得到4个条带4、杜泊羊以其生长速度快；肉质好等优点；被称为“钻石级”肉用绵羊。科研工作者通过胚胎工程快速繁殖杜泊羊的流程如下图所示，相关叙述正确的是（）

A.选用的雌性杜泊羊只要有健康的体质和正常繁殖能力就行B.从卵巢中采集的卵母细胞都已完成减数分裂ⅡC.为避免代孕锦羊对植入胚胎产生排斥反应，应注射免疫抑制剂D.采集的精子需要进行获能处理5、为了增加菊花的花色类型；研究者从某植物中克隆出花色基因C（图1），拟将其与质粒（图2）重组，再借助农杆菌导入菊花中。

下列操作与实验目的不符的是（）A.构建此重组质粒只能用限制酶EcoRⅠ切割目的基因和质粒B.用含C基因的农杆菌侵染菊花的愈伤组织，将C基因导入细胞C.在培养基中添加青霉素，筛选被转化的菊花细胞D.用分子杂交方法检测C基因是否在菊花细胞中成功转录6、下列有关“DNA粗提取与鉴定实验”的叙述，正确的是（）A.菜花和哺乳动物成熟的红细胞均可作为提取DNA的材料B.提取细胞中的DNA必须用蒸馏水涨破细胞C.将提取的丝状物溶解后，加入二苯胺试剂沸水浴，冷却后呈蓝色D.在切碎的菜花中加入一定量的沐浴液有利于去除细胞壁7、实时荧光定量PCR可用于对样品中特定DNA序列进行定量分析。将荧光标记的Taqman探针与待测样本DNA混合，当探针完整时，不产生荧光。在PCR过程中，与目的基因结合的探针被TaqDNA聚合酶水解，R与Q分离后，在特定光的激发下R发出荧光，随着循环次数的增加，荧光信号强度增加，通过实时检测荧光信号强度，可得Ct值(达到荧光阈值所经历的循环次数)。下列相关叙述正确的是（）

A.荧光基因R连接在探针的3’端B.该反应体系中并未加入ATP，所以新链的合成不需要消耗能量C.TaqDNA聚合酶在该反应中的作用是合成磷酸二酯键D.Ct值越小，说明样品中特定DNA序列的含量越多8、“白菜—甘蓝”是用细胞工程的方法培育出来的蔬菜新品种，它具有生长期短、耐热性强和易于储藏等优点。下图是“白菜—甘蓝”杂种植株的培育过程。以下说法不正确的是（）

A.用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁时，酶溶液的渗透压略大于细胞液B.“白菜—甘蓝”培养过程中，要用到不同浓度的细胞分裂素和生长素C.“白菜—甘蓝”相对于白菜、甘蓝，发生了染色体变异，不具有可育性D.植物体细胞杂交打破了不同种生物之间的生殖隔离9、下图为早期胚胎发育过程中的某一时期示意图。下列有关叙述不正确的是（）

A.图中①②③依次为透明带、滋养层、内细胞团B.高等哺乳动物胚胎发育中的细胞分化开始于图示时期，终止于生命结束C.胚胎从①中伸展出来的过程叫做孵化D.②将来发育成胎儿，③将来发育成胎盘和胎膜评卷人得分二、多选题(共6题，共12分)10、良种试管牛的繁殖过程是用激素促进甲牛多排卵，然后把卵母细胞在体外与人工采集的乙牛的精子进行受精，在特定培养基上培育成胚胎，再把胚胎送入经过激素处理的丙牛的子宫内，孕育成试管牛。下列相关叙述正确的是（）A.“用激素促进甲牛多排卵”的激素是孕激素B.产生试管牛的生殖方式属于有性生殖C.甲牛、乙牛对试管牛核基因的贡献相同D.该技术可应用于加速优良种畜的繁殖11、科学家将4个关键基因移植入已分化的肌肉细胞中并表达；使这个细胞成为多能干细胞（iPS细胞），下图为该实验示意图。下列有关叙述错误的是（）

A.应用该技术可缓解器官移植时器官供应不足的问题B.iPS细胞所携带的遗传信息与肌肉细胞相同C.关键基因表达使细胞功能趋向专门化，降低了细胞的分化程度D.病人的iPS细胞分化而来的细胞移植回体内后，可以避免免疫排斥12、生长图形法是一种测定微生物营养需求的简便方法。为探究某嗜热菌所需生长因子的种类，研究小组把该菌的悬浮液与不含任何生长因子但含有其他必需营养物质的培养基混合后倒成平板，然后在平板上划分数区，将甲、乙、丙三种生长因子分别添加到不同区域，培养结果如图所示，下列说法正确的是（）

A.倒成平板后直接培养可判断有无污染B.倒成平板后需要进行灭菌处理C.图示结果表明该菌需要生长因子乙和丙D.生长图形法还可用于某些菌种的筛选13、为对某样品中噬菌体计数，工作人员将0.1mL稀释倍的噬菌体样品与敏感细菌混合后平铺在平板上培养一段时间，长满细菌的平板因部分细菌被噬菌体裂解而形成圆形透明斑，即噬菌斑（1个噬菌斑为1个pfu），噬菌体效价可用每毫升样品中含有的pfu数表示。下列叙述正确的是（）

A.透明的平板培养一段时间后变为不透明状态，是由细菌大量繁殖造成的B.噬菌体样品应有足够的稀释度，以保证初期一个细菌最多被一个噬菌体吸附C.若平均每个平板的噬菌斑数量为150，则该样品的噬菌体效价为1.5×108pfu/mLD.若有少数活噬菌体末能侵染细菌，噬菌斑计数结果比样品中实际活噬菌体数偏低14、为了获得抗蚜虫棉花新品种，研究人员将雪花莲凝集素基因（GNA）和尾穗苋凝集素基因（ACA）与载体（pBI121）结合，然后导入棉花细胞（如下图所示）。下列操作与实验目的相符的是（）

A.用限制酶BsaBⅠ和DNA连接酶处理两种基因可获得GNA-ACA融合基因B.用KpnⅠ和XhoⅠ两种酶处理融合基因和载体可保证基因转录方向正确C.将棉花细胞接种在含氨苄青霉素的培养基上可筛选出转基因细胞D.用PCR技术可检测GNA和ACA基因是否导入棉花细胞中15、胚胎干细胞体外培养时，要最大程度地抑制其分化、维持全能性，细胞为圆形或扁圆形，结构相对简单；细胞核大，细胞质少，核质比高。输卵管上皮细胞能合成、分泌细胞生长因子和细胞分化抑制因子。科学家通过病毒介导或者其他的方式，将四种与多能性相关的转录因子导入宿主细胞，使其重新编程为iPS细胞，iPS细胞特性与胚胎干细胞极为相似。下列叙述正确的是（）A.培养iPS细胞时可加入输卵管上皮细胞，以维持iPS细胞的未分化状态和全能性B.介导转录因子导入皮肤细胞时，应用灭活的病毒，以防止皮肤细胞被感染C.重编程为iPS细胞时，关闭了体细胞特异性表达的基因，开启了使细胞全能性分化的基因D.可以通过观察细胞形态，初步鉴定iPS细胞是否诱导成功评卷人得分三、填空题(共9题，共18分)16、虽然各种培养基的具体配方不同，但一般都含有_____________、___________________(提供碳元素的物质)、_________________(提供氮元素的物质)和__________________。17、______——“分子手术刀”18、获取目的基因的方法______、______、______19、结果：经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式：______和______。20、95%的______________以使DNA析出，用玻璃棒沿一个方向搅拌，卷起的丝状物的颜色是____________。获取的丝状物后加入到质量浓度为______________mol/L浓度的NaCL溶液的试管中，使丝状物重新溶解。21、去除DNA中的杂质，可以在滤液中加入2mol/L浓度的NaCL溶液，目的是____去除__________________；再调节NaCL溶液浓度为0．14mol/L，目的是_______________，_______________去除_______________；最后用浓度为2mol/L的NaCL溶液重新溶解________________22、对于DNA的粗提取而言，就是利用DNA与RNA、蛋白质和脂质等在__________方面的差异，提取DNA，去除杂质。（人教P54）23、概念：动物细胞培养就是从动物机体中取出相关的______，将它分散成______，然后放在适宜的______中，让这些细胞______。24、随着现代科技的发展，有些新的致病微生物被发现，它们的危害可能更大。通过互联网或图书馆搜集近年发现的致病微生物的相关资料，分析和归纳这些资料__________。评卷人得分四、实验题(共4题，共8分)25、厨余垃圾废液中的淀粉；蛋白质、脂肪等微溶性物质可以被微生物分解并利用；但由于初期有益微生物数量相对较少，存在发酵周期长、效率低等缺点，极易对环境造成污染。

（1）为探究圆褐固氮菌和巨大芽孢杆菌处理某厨余垃圾废液的最佳接种量比；用于制备微生物菌剂，研究者做了如下实验：

①将两种菌液进行不同配比分组处理；如下表所示：

。编号R0R1R2R3圆褐固氮菌∶巨大芽孢杆菌1∶00∶11∶12∶1将等量上表菌液分别接种于100mL_____中进行震荡培养。本实验中对照组的处理应为_____。

②培养3天后测定活菌数。取各组菌液采用_____法接种于基本培养基中，培养一段时间后选取菌落数在_____范围内的平板进行计数；并依据菌落的形态特征对两种菌进行区分，实验结果见图。

由实验结果可知，两种菌混合接种时有效菌落数均大于单独接种，从代谢产物角度分析，原因可能是______________。接种量比例为_____________时；废液中两菌的有效活菌数最多。

（2）为进一步探究菌种比例对该厨余垃圾废液中蛋白质；脂肪等有机物的降解效果；测得15天内废液中蛋白质、脂肪的含量变化如下图所示：

由实验结果可知，对该厨余垃圾废液中蛋白质、脂肪的降解效果最好的两种菌接种比分别为_____、_____。

（3）固态厨余垃圾因富含粗纤维、蛋白质、淀粉等物质，可以通过蒸发、碾磨、干燥等方式进行加工，使加工后的产物在微生物的作用下形成有机复合肥等肥料；收集微生物处理后的厨余垃圾残渣，经晾晒干后制成蛋白饲料；通过以上处理可实现_____（选填选项前的符号）。

A．物质循环再生B．能量多级利用C．提高能量传递效率26、豆豉是中国传统特色发酵豆制品调味料。豆豉以黑豆或黄豆为主要原料；利用毛霉；曲霉等微生物产生的蛋白酶的作用，经复杂工序制作而成。程序如下：黑豆→筛选→洗涤→浸泡→沥干→蒸煮→冷却→接种→制曲→洗豉→浸→拌盐→发酵→晾干→成品（干豆豉）。请回答下列问题：

（1）蒸煮目的是_________，冷却后再接种的原因是_____________。

（2）观察发现发酵容器中上层豆类的发酵效果比底层的好，说明该菌是________。

（3）制作过程中要加入适量的盐，盐能______________；避免变质。

（4）从黑豆到豆豉。它的成分会发生一定的变化。其中最显著的变化是________。

（5）豆豉制作过程中用到的菌种与课本上_________________________制作的菌种最接近，从细胞结构看，它们属于___________生物。27、柑橘溃疡病是由地毯草黄单胞杆菌引起的；发生在柑橘的一种病害；植株受害后会发生落叶、落果，严重时叶片落光，整株枯死。利用基因工程将来自水稻的Xa27基因导入柑橘可获得抗柑橘溃疡病的植株，利用植物组织离体培养技术则可培育无病毒植株。回答下列问题：

(1)为了获得脱毒苗，通常可以选取植株______附近的组织进行离体培养，选取该部位组织的原因是______。

(2)如图1表示科研人员利用柑橘幼苗获得抗病转基因植株的过程：

①基因表达载体必需的结构除复制原点、启动子、终止子、目的基因外，还有______。

②共培养时，Ti质粒的作用是______。

③共培养后，要利用选择培养基进行培养，目的是______。

④再分化过程中，诱导愈伤组织生根、生芽的先后顺序为______。

⑤从个体生物学水平鉴定柑橘再生植株时可采用______（填具体操作）的方法。经鉴定有几棵植株没有抗病的能力，分别提取这几棵植株的DNA，依据______的特异性碱基序列设计引物，扩增后利用______进行检测；结果如图2。

据图2分析，植株A、E、F不具有抗病能力的原因可能是______，植株B、C不具有抗病能力的原因可能是______。28、我国有近一亿公顷的盐碱地，大部分植物无法在此生存，而耐盐植物藜麦却能生长。通过研究藜麦叶片结构后发现，其表皮有许多盐泡细胞，该细胞体积是普通表皮细胞的100倍以上，里面没有叶绿体，Na+和Cl-在盐泡细胞的转运如下图所示。请回答问题。

（1）据图推测，藜麦的耐盐作用机制是通过_________的方式，将Na+和Cl-运送到表皮盐泡细胞的________（细胞器）中储存起来；从而避免高盐对其他细胞的影响。

（2）下表为藜麦盐泡细胞和其他几种普通植物的叶肉细胞膜中部分蛋白的相对表达量。其中______（填下列选项字母）更可能是藜麦，理由是_______________________。

。

ABCDNa+载体蛋白812511Cl-载体蛋白2646葡萄糖转运蛋白38286668（3）藜麦根系从土壤中吸收盐分是主动运输还是被动运输？有同学设计实验进行了探究。

①实验步骤：

a．取甲、乙两组生长发育基本相同的藜麦幼苗植株，放入适宜浓度的含有Na+、Cl-的溶液中。

b．甲组给予正常的细胞呼吸条件，乙组加入______________。

c．一段时间后测定两组植株根系对Na+、Cl-的吸收速率。

②预测实验结果及结论：若乙组_______________；说明藜麦从土壤中吸收盐分的方式是主动运输。

（4）研究人员尝试将藜麦中的耐盐基因转移到其他植物体内，从而培育新型耐盐植物。若要从分子水平上检测耐盐基因是否成功转入受体细胞，请写出两种常用的检测方法_________、___________。从经济价值和生态价值角度考虑，培育耐盐植物的主要意义是_______________（写出两条）。评卷人得分五、综合题(共4题，共16分)29、甲；乙是染色体数目相同的两种二倍体药用植物；甲含有效成分A，乙含有效成分B。某研究小组拟培育同时含有A和B的新型药用植物。请回答下列问题：

（1）为了培育该新型药用植物；可取甲和乙的叶片，先用_____酶和_____酶去除细胞壁，获得具有活力的_____，再用化学诱导剂诱导二者融合。形成的融合细胞进一步培养形成_____组织，然后经过_____形成完整的杂种植株。这种培育技术称为_____。

（2）上述杂种植株属于多倍体，多倍体是指_____。假设甲与乙有性杂交的后代是不育的，而上述杂种植株是可育的，造成这种差异的原因是_____。30、径柳匙叶草是一种泌盐植物。科研工作者将径柳匙叶草的TaNHX2基因转移到棉花细胞内；获得了转基因耐盐棉花新品种。图1是获取的含有目的基因的DNA片段，图中箭头所指为Sau3AI；EcoRI、BamHI三种限制酶的切点；图2是三种限制酶的识别序列与酶切位点示意图；图3是农杆菌中用于携带目的基因的Ti质粒结构示意图，请分析回答问题：

(1)基因工程的核心步骤是______________________________。

(2)将含有径柳匙叶草不同基因的DNA片段导入受体菌的群体中储存，再根据TaNHX2基因的特定核苷酸序列从中提取图1的片段，此法为从____________获取目的基因。此外也可利用PCR技术扩增TaNHX2基因，需要加入的酶是_____________________，反应的温度和时间需根据具体情况进行设定，55～60℃有利于______________结合到互补DNA链上。

(3)若用BamHI切割图1所示的DNA片段，获得目的基因，则需选用限制酶__________切割图3所示质粒，该方案的缺陷是_______________________________（答出一点即可）。

(4)目的基因是否成功转录出了mRNA，常用____________的方法进行检测，为了检测技术成果，科研工作者将转基因棉花种植在盐碱地，观察其生长状况，这属于____________水平的检测。31、农业上常用一定浓度的除草剂除去单子叶农作物中的双子叶杂草。农业科研人员将抗除草剂基因转入大豆；培育出抗除草剂大豆，培育过程中使用的质粒如图1所示，使用的含抗除草剂基因的DNA片段如图2所示，使用含抗除草剂基因的农杆菌对大豆细胞进行转化，并将该细胞培养成抗除草剂大豆幼苗的过程如图3所示。已知限制性内切核酸酶BamHⅠ；BclⅠ、Sau3AⅠ、HindⅢ识别的碱基序列和酶切位点分别为G↓GATCC、T↓GATCA、↓GATC、A↓AGCTT。请回答下列问题：

(1)质粒是独立于_____之外，具有自我复制能力的环状双链DNA分子。构建基因表达载体时，可以用限制酶_____（只写一种限制酶）切割质粒，用限制酶_____（只写一种限制酶）切割含目的基因的DNA片段，这样切割的缺陷是_____。

(2)将上述切开的质粒与抗除草剂基因混合，加入DNA连接酶连接后，导入大豆受体细胞（不考虑基因突变）。若将大豆受体细胞分别在含青霉素、四环素的培养基上培养，这些大豆受体细胞会出现都能生长，_____，_____三种情况。

(3)从个体生物学水平上，鉴定图3中转抗除草剂基因大豆幼苗是否抗除草剂的方法是_____。32、重症联合免疫缺陷（SCID）是一种罕见的遗传病；该病可能为腺苷脱氨酶ADA缺陷所致，ADA活性下降将使淋巴细胞损伤或死亡，导致细胞；体液免疫缺陷。ADA活性缺陷性疾病为常染色体隐性遗传病。请回答：

(1)某医疗小组利用一种经过修饰的腺病毒作为运载体，将治疗SCID的正常基因导入取自病人体内的造血干细胞内，然后移植给病人，这些造血干细胞再经____________形成淋巴细胞，可正常发挥免疫功能。这种对SCID患者进行治疗的方法称为____________。

(2)有一对正常的夫妇生了一个患SCID的儿子，他们希望通过设计试管婴儿再生一个不携带致病基因的健康的孩子。设计试管婴儿的基本程序：首先为女性注射______________，进行促排卵，然后从卵巢中吸取卵母细胞，培养到MⅡ期；再将成熟的卵子与获能的精子经______________形成受精卵，然后继续培养受精卵获得早期胚胎；从早期胚胎中取出______________细胞进行______________；选择无致病基因的胚胎进行移植。

(3)这对夫妇用该试管婴儿的脐带血救治患病孩子。大多数人认为，用设计试管婴儿的办法救治自己的孩子是符合伦理道德的，理由是____________________________。参考答案一、选择题(共9题，共18分)1、B【分析】【分析】

图中①表示反转录法获取目的基因的过程；②表示基因表达载体的构建过程；之后采用农杆菌转化法；将目的基因导入番茄组织块；最后采用植物组织培养技术，将导入目的基因的番茄组织细胞培养成抗冻番茄植株。

【详解】

A；图中①是获取目的基因的过程；获取的目的基因，可用于基因工程，但不能用于比目鱼基因组测序，A错误；

B；将多个抗冻基因编码区相连形成的能表达的新基因不再是抗冻基因；所以得不到抗冻性增强的抗冻蛋白，B正确；

C；②是基因表达载体的构建过程；基因表达载体通常由启动子、目的基因、终止子和标记基因构成，其中标记基因的作用是筛选重组质粒，利用农杆菌转化法只能将质粒导入受体细胞，不能对重组质粒进行筛选，C错误；

D；应用DNA分子杂交技术只能检测目的基因是否导入；但不能检测目的基因是否完全表达，翻译形成蛋白质，D错误。

故选B。2、A【分析】【分析】

1.转基因生物的安全性问题：食物安全（滞后效应；过敏源、营养成分改变）、生物安全（对生物多样性的影响）、环境安全（对生态系统稳定性的影响）。对待转基因技术的利弊；正确的做法应该是趋利避害，不能因噎废食。

2.试管婴儿技术是指通过人工操作使卵子和精子在体外条件下成熟和受精；并通过培养发育为早期胚胎后，再经移植后产生后代的技术。

【详解】

A；新冠患者的血浆中可能含有病毒；采集后是不可以直接输入到任何人身体里的，输入到危重患者身体里存在安全隐患，与题意相符，A正确。

B；试管婴儿可以通过基因筛选技术来阻断遗传疾病的遗传；因此经过一定的技术手段可以避免安全风险，与题意不符，B错误；

C；利用生物技术改造的工程菌获得大量的抗生素已经投入生产；一般不会带来生物安全风险，与题意不符，C错误；

D；克隆技术可以克隆器官；但是不可以进行人体克隆，这样可以避免影响伦理道德，与题意不符，D错误。

故选A。

【点睛】3、C【分析】【分析】

分析图可知；切割目的基因和质粒最好用酶F和酶G，这样既避免切割后DNA片段的自身环化，又保留质粒上的标记基因，于是可知构建基因表达载体破坏了四环素抗性基因，保留了氨苄青霉素抗性基因。

【详解】

A；为避免切割后DNA片段的自身环化；又保留质粒上的标记基因切割时应选择的限制酶组合是酶F和酶G，A正确；

B、所选用的受体菌不能含有Apr和Tcr基因；以便于对含有目的基因的受体菌的选择，B正确；

C；用含氨苄青霉素的培养基筛选出的有导入重组质粒的受体菌和导入原质粒的受体菌；C错误；

D；据图可知同时用三种限制酶处理图中质粒；因酶E有两个作用位点，故将质粒切割成了4个DNA片段，电泳后可得到4个条带，D正确。

故选C。4、D【分析】【分析】

1；体外受精主要包括：卵母细胞的采集和培养、精子的采集和获能、受精。（1）卵母细胞的采集和培养①主要方法是：用促性腺激素处理；使其超数排卵，然后，从输卵管中冲取卵子。②第二种方法：从已屠宰母畜的卵巢中采集卵母细胞或直接从活体动物的卵巢中吸取卵母细胞。（2）精子的采集和获能①收集精子的方法：假阴道法、手握法和电刺激法。②对精子进行获能处理：包括培养法和化学诱导法。（3）受精：在获能溶液或专用的受精溶液中完成受精过程。

2；胚胎移植的基本程序主要包括：①对供、受体的选择和处理（选择遗传特性和生产性能优秀的供体；有健康的体质和正常繁殖能力的受体。用激素进行同期发情处理，用促性腺激素对供体母牛做超数排卵处理）；②配种或人工授精；③对胚胎的收集、检查、培养或保存（对胚胎进行质量检查，此时的胚胎应发育到桑椹或胚囊胚阶段）；④对胚胎进行移植；⑤移植后的检查。

【详解】

A；题图中选用的雌性杜泊羊为供体；应具有优良遗传特性，对受体的选择需要有健康的体质和正常繁殖能力，A错误；

B；雌性动物的减数第一次分裂在排卵前后完成；从卵巢中采集的卵母细胞多数处于减数第一次分裂，未完成减数分裂Ⅱ，B错误；

C；动物的子宫为免疫特赦区；代孕绵羊对植入胚胎不会产生排斥反应，C错误；

D；采集的精子不能直接进行受精作用；需要进行获能处理才行，D正确。

故选D。

【点睛】5、C【分析】【分析】

1；基因工程的基本工具：分子手术刀”是指限制性核酸内切酶（限制酶）、“分子缝合针”是指DNA连接酶、“分子运输车”是指载体。

2；基因工程的基本操作程序有四步：①目的基因的获取；②基因表达载体的构建，③将目的基因导入受体细胞，④目的基因的检测与鉴定。

【详解】

A；用限制性核酸内切酶EcoRI处理目的基因和质粒；可以使目的基因两侧和质粒产生相同的黏性末端，再用连接酶把切口连起来就能构建成重组质粒，A正确；

B；农杆菌转化法适用于双子叶植物或裸子植物；菊花属于双子叶植物，故可用含C基因的农杆菌侵染菊花愈伤组织，将C基因导入细胞，B正确；

C；质粒中只有潮霉素抗性基因；被转化的菊花细胞只对潮霉素具有抗性，在培养基中添加青霉素，不能筛选被转化的菊花细胞，C错误；

D；转录的产物是RNA；检测C基因是否在菊花细胞中成功转录可采用DNA分子杂交技术，若出现杂交带可证明转录成功，D正确。

故选C。6、C【分析】【分析】

1.DNA粗提取和鉴定的原理：（1）DNA的溶解性：DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度NaCl溶液中溶解度不同；DNA不溶于酒精溶液；但细胞中的某些蛋白质溶于酒精；DNA对酶；高温和洗涤剂的耐受性。（2）DNA的鉴定：在沸水浴的条件下，DNA遇二苯胺会被染成蓝色。

2.DNA的鉴定：取两支20ml的试管；各加入物质的量浓度为2mol/L的NaCl溶液5ml，将丝状物放入其中一支试管中，用玻璃棒搅拌，使丝状物溶解。然后，向两支试管中各加入4ml的二苯胺试剂。混合均匀后，将试管置于沸水中加热5min，待试管冷却后，比较两支试管溶液颜色的变化，看看溶解有DNA的溶液是否变蓝。

【详解】

A；哺乳动物成熟的红细胞没有细胞核和细胞器；不含DNA，不能作为提取DNA的材料，A错误；

B；提取动物细胞中的DNA须用蒸馏水涨破细胞；而提取植物细胞中的DNA则需要用通过研磨法破坏细胞壁，用洗涤剂瓦解细胞膜，B错误；

C；将提取的丝状物溶解后；加入二苯胺试剂进行鉴定，沸水浴冷却后呈蓝色，即可证明DNA的存在，C正确；

D；在切碎的菜花中加入一定量的洗涤剂有利于去除细胞壁；D错误。

故选C。7、D【分析】【分析】

实时荧光定量PCR技术中；TaqDNA聚合酶有两个作用，一是形成子链的磷酸二酯键，二是水解探针，破坏磷酸二酯键；破坏探针导致荧光出现，Ct值越大，即是荧光强度越大，说明样品中特定DNA序列的含量越多。

【详解】

A；因为引物的作用是使DNA聚合酶能够从引物的3'端开始连接脱氧核苷酸；从图中引物1的方向可以分析出，R端是5'端，A错误；

B；该反应体系中并未加入ATP；但新链的合成需要消耗能量，解旋的能量来自于高温，聚合的能量来自于原料，B错误；

C；在该反应中TaqDNA聚合酶有两个作用；一是形成子链的磷酸二酯键，二是水解探针，破坏磷酸二酯键，C错误；

D；Ct值越小；即是荧光强度越小，说明样品中特定DNA序列的含量越少，D错误。

故选D。8、C【分析】【分析】

题图分析：利用植物体细胞杂交技术培育杂种植物细胞；具体过程包括诱导植物细胞融合成杂种细胞和植物组织培养技术培育成杂种植株两过程，该过程的原理是细胞膜的流动性和植物细胞的全能性。

【详解】

A；植物体细胞杂交的去壁过程；需要将植物组织置于含纤维素酶和果胶酶的等渗溶液中，或略大于细胞液渗透压，否则原生质体可能吸水涨破，A正确；

B；杂种细胞组织培养形成杂种植物；需用不同浓度的细胞分裂素和生长素诱导，如诱导生根的过程中需要培养基中含有较多的生长素，而在诱导生芽的过程中需要在培养基中加入较多的细胞分裂素，B正确；

C；“白菜—甘蓝”相对于白菜、甘蓝；发生了染色体数目变异，属于异源四倍体，可育，C错误；

D；有性杂交不能突破生殖隔离；需在同一物种的雌雄个体之间进行，而植物体细胞杂交打破了这个障碍，D正确。

故选C。9、D【分析】【分析】

分析题图：图示为胚胎发育过程某一时期示意图；该时期为囊胚期，其中①为透明层；②为滋养层，将来发育成胎盘或胎膜；③为内细胞团，将来发育成胎儿的各种组织。

【详解】

AD；该时期为囊胚期；其中①为透明层；②为滋养层，将来发育成胎盘或胎膜；③为内细胞团，将来发育成胎儿的各种组织，A正确，D错误；

B；高等哺乳动物胚胎发育中的细胞分化开始于囊胚期；终止于生命结束，B正确；

C；孵化发生在囊胚后期；早期胚胎从①透明带中伸展出来的现象称为“孵化”，C正确。

故选D。二、多选题(共6题，共12分)10、B:C:D【分析】【分析】

良种试管牛的繁殖过程：对供体和受体的选择和处理（同期发情处理；超数排卵处理）；配种或进行人工授精、对胚胎的收集检查培养或保存、进行胚胎移植。

【详解】

A；处理供体甲牛的激素可能是促性腺激素；使其超数排卵，A错误；

B；产生试管牛的过程中经过了两性生殖细胞的融合过程；因此试管牛产生的生殖方式属于有性生殖，B正确；

C；母本甲牛提供卵细胞、父本乙牛提供精子；试管牛细胞核中基因一半来源于父方，一半来源于母方，C正确；

D；体外受精和早期胚胎发育、胚胎移植等技术可以缩短繁殖周期；增加一生繁殖的后代数量，即该技术可充分发挥优良雌性个体的繁殖潜力，D正确。

故选BCD。

【点睛】11、B:C【分析】【分析】

分析题图：图中表示将4个关键基因移植入已分化的肌肉细中并表达；使这个细胞成为多能干细胞（iPS细胞）以及多能干细胞的分化过程，即图中①②③表示细胞分化。

【详解】

A；用iPS细胞诱导分化成需要的器官后进行自体移植；没有免疫排斥反应，可缓解器官移植时器官供应不足的问题，A正确；

B；将4个关键基因移植入已分化的肌肉细中并表达；使这个细胞成为多能干细胞（iPS细胞），可见iPS细胞所带遗传信息与肌肉细胞不同，B错误；

C；图中关键基因表达形成iPS细胞；没有使细胞功能趋向专门化，C错误；

D；用患者自己的体细胞通过体外诱导成iPS细胞；所以将iPS细胞增殖分化出的不同细胞移植回病人体内，理论上可以避免免疫排斥反应，D正确。

故选BC。12、A:C:D【分析】【分析】

本题考查微生物的培养及鉴定。据图分析；菌落主要分布于添加了乙和丙的区域的交界处，说明该嗜热菌所需的生长因子是乙和丙。

【详解】

A；倒平板后不接种任何菌种直接进行培养观察有无菌落的出现；可以判断培养基有无污染，A正确；

B；在制作培养基的过程中；需要先进行灭菌再倒平板，B错误；

C；分析题图可知；嗜热菌在添加了乙、丙生长因子的区域生长，故该菌需要的生长因子是乙和丙，C正确；

D；不同的菌种所需的生长因子不同；利用生长图形法可用于某些菌种的筛选，某菌种只会在提供其需要的生长因子区域生长，D正确。

故选：ACD。13、A:B:D【分析】【分析】

病毒：是一种个体微小结构简单；只含一种核酸(DNA或RNA)和蛋白质组成的，必须在活细胞内寄生并以复制方式增殖的非细胞结构生物。

【详解】

A；噬菌体在细菌细胞中；没有裂解细菌，细菌繁殖导致透明的平板培养一段时间后变为不透明状态，A正确；

B；噬菌体样品应有足够的稀释度；以保证初期一个细菌最多被一个噬菌体吸附，如果稀释度不够，会出现两个或多个噬菌体吸附同一个细菌，从而导致噬菌斑数量减少，噬菌斑计数结果比样品中实际活噬菌体数偏低，B正确；

C、若平均每个平板的噬菌斑数量为150，则该样品的噬菌体效价为：150÷0.1×106=1.5×109pfu/mL；C错误；

D；若有少数活噬菌体末能侵染细菌；会导致形成噬菌斑数量减少，从而导致噬菌斑计数结果比样品中实际活噬菌体数偏低，D正确。

故选ABD。14、A:D【分析】【分析】

基因工程技术的基本步骤：（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样．将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是Ca2+处理法。（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因；②检测目的基因是否转录出了mRNA；③检测目的基因是否翻译成蛋白质：抗原-抗体杂交技术。个体水平上的鉴定：抗虫鉴定；抗病鉴定、活性鉴定等。

【详解】

A；两个基因中都有限制酶BsaBⅠ的一个识别位点；用该限制酶切割后再用DNA连接酶可拼接成GNA-ACA融合基因，A正确；

B；GNA-ACA融合基因的两端有限制酶KpnⅠ和XhoⅠ的切割位点；而质粒上也有限制酶KpnⅠ和XhoⅠ的切割位点，但方向不一致，用两酶切割，正好是反向连接目的基因和运载体，B错误；

C；运载体上带有卡那霉素的抗性基因；没有氨苄青霉素的抗性基因，转基因细胞在含有氨苄青霉素的培养基上不能存活，C错误；

D；用PCR技术扩增GNA和ACA基因后；再通过分子杂交或电泳的方式，可检测是否导入棉花细胞中，D正确。

故选AD。15、A:C:D【分析】【分析】

科学家通过体外诱导小鼠成纤维细胞；获得了类似胚胎干细胞的一种细胞，将它称之为诱导多能干细胞，简称iPS细胞。因为诱导过程无须破坏胚胎，而且iPS细胞可来源于病人自身的体细胞，将它移植回病人体内，理论上可以避免免疫排斥反应，因此iPS细胞的应用前景优于胚胎干细胞。

【详解】

A；由题干可知；输卵管上皮细胞能合成、分泌细胞分化抑制因子，为了维持iPS细胞的未分化状态和全能性，培养iPS细胞时可加入输卵管上皮细胞，A正确；

B；通过病毒介导或者其他的方式将转录因子导入皮肤细胞；应用有活性的病毒，灭活病毒不能将外源DNA片段带入宿主细胞，B错误；

C；体细胞重编程为iPS细胞时；关闭了体细胞特异性的表达的基因，同时开启了使细胞全能性分化的基因，可以维持iPS细胞的未分化状态和全能性，C正确；

D；由题干可知；iPS细胞特性与胚胎干细胞极为相似，胚胎干细胞为圆形或扁圆形，因此可以通过观察细胞形态，初步鉴定iPS细胞是否诱导成功，D正确。

故选ACD。三、填空题(共9题，共18分)16、略

【解析】①.水②.碳源③.氮源④.无机盐17、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】限制性核酸内切酶（限制酶18、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】基因文库人工合成PCR技术19、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】黏性末端平末端。20、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】冷酒精白色221、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】不容的杂质析出DNA过滤溶液中的杂质DNA22、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】物理和化学性23、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】组织单个细胞培养基生长和繁殖24、略

【分析】【详解】

致病微生物是指可以侵犯人体，引起感染甚至传染病的微生物，包括病毒、细菌、真菌、原生动物和蠕虫等，其中以细菌和病毒的危害性最大。致病微生物可以通过空气、体液、食品、水等传播途径，从一个宿主转移到另一个宿主，致病微生物由于看不见、摸不着，难于防范，且存在传染性，因而危害极大。同时近年来由于温室效应加剧，也会使致病微生物的繁殖周期变短，可能会使危害性更大，因此我们需要积极开展科学研究，掌握防范的措施和防范，实现最好的防护，目前对致病微生物最好的防护措施还是疫苗的研究和使用。【解析】致病微生物是指可以侵犯人体，引起感染甚至传染病的微生物，包括病毒、细菌、真菌、原生动物和蠕虫等，其中以细菌和病毒的危害性最大。致病微生物可以通过空气、体液、食品、水等传播途径，致病微生物由于看不见、摸不着，难于防范，且存在传染性，因而危害极大。目前对致病微生物最好的防护措施还是疫苗的研究和使用。四、实验题(共4题，共8分)25、略

【分析】【分析】

常用的接种方法：平板划线法和稀释涂布平板法。在统计菌落数目时；为了保证结果准确，一般选择菌落数在30-300的平板进行计数。

【详解】

（1）①要探究圆褐固氨菌和巨大芽孢杆菌处理某餐厨垃圾废液的最佳接种量比；故需要将不同配比的菌液接种在100mL某餐厨垃圾废液中，为了保证氧气供应及目的菌与培养液充分接触，需要进行振荡培养。另外为了减小误差，还需要设置对照组，接种等量无菌水，在相同的条件下培养。

②测定活菌数；需要利用稀释涂布平板法，接种时故需要取一定量菌液进行梯度稀释，然后分别取0.1mL的菌液采用涂布法接种于基本培养基中培养。可以根据菌落的形态区分两种菌，为了保证结果准确，一般选择菌落数在30-300的平板进行计数，根据实验数据可知，两种菌混合接种时有效菌落数均大于单独接种，从代谢产物角度分析，原因可能是两种菌可以相互利用对方的代谢产物作为营养物质。当两菌种接种量比例为1：1时，废液中两种菌种的有效活菌数能够实现同步最大化。

（2）由实验数据可知，R3接种组随着时间的延长，蛋白质的含量下降最明显；R1接种组随着处理时间的延长；脂肪的含量下降最明显，即脂肪的降解效果最好。

（3）固态厨余垃圾因富含粗纤维；蛋白质、淀粉等物质；可加工形成有机复合肥、蛋白饲料等，利用了物质循环再生、能量多级利用的生态工程的原理，AB正确。故选AB。

【点睛】

本题结合图形和表格，主要考查微生物的分离和培养的相关知识，要求考生掌握稀释涂布平板法的操作流程，识记微生物计数的方法，能结合所学知识和图形信息准确答题。【解析】某厨余垃圾废液加入等量无菌水稀释涂布平板法30~300两种菌可以相互利用对方的代谢产物作为营养物质（一种菌的代谢产物是另一种菌的营养物质）1:1R3（或2:1）R1（或0:1）AB26、略

【分析】豆豉的制作原理与腐乳的制作类似：起主要作用的是真菌中的毛霉；适宜温度为15℃～18℃；毛霉能够产生蛋白酶和脂肪酶，将蛋白质和脂肪分别水解成小分子的肽和氨基酸；甘油和脂肪酸。

【详解】

（1）黄豆煮熟的目的主要破坏黄豆内部结构；使蛋白质变性，淀粉达到糊化程度，易于水解，同时可起到灭菌的作用，冷却后再接种的原因是防止高温杀死菌种；

（2）发酵装置的上层含氧量比较高；发酵装置内上层黄豆的发酵效果比底层好，说明该发酵菌是需氧菌，其新陈代谢类型是异养需氧型；

（3）盐能抑制微生物生长所以制作豆豉过程中要加入适量的盐；避免变质；

（4）大豆到豆豉的过程中；主要利用毛霉；曲霉等微生物产生的蛋白酶的作用，所以其中最显著的变化是蛋白质被蛋白酶分解成小分子肽和氨基酸；

（5）腐乳的制作过程也是利用了毛霉；曲霉等微生物产生的蛋白酶的作用；毛霉、曲霉等微生物都是真核生物。

【点睛】

本题考查了豆豉制作的相关知识，要求考生能够识记豆豉制作的原理；能够利用酶的专一性解答蛋白酶和脂肪酶作用的产物是解答本题的关键。【解析】破坏大豆内部分子结构，使蛋白质适度变性，淀粉达到糊化程度，易于水解，同时可起到灭菌的作用防止高温杀死菌种好氧菌抑制微生物生长蛋白质转变成氨基酸和肽。腐乳真核27、略

【分析】【分析】

1；基因工程的基本操作步骤：①目的基因的获取和筛选；②基因表达载体的构建；③将目的基因导入受体细胞；④目的基因的检测与鉴定；

2；植物顶端分生区附近(如茎尖)的病毒极少；甚至无病毒，切取一定大小的茎尖进行组织培养，再生的植株就有可能不带病毒，从而获得脱毒苗。

【详解】

（1）为了获得脱毒苗；通常选取植株茎尖（或顶端分生区附近的组织）进行离体培养，选取该组织的原因是此处病毒极少甚至无病毒。

（2）①基因表达载体上除有复制原点；启动子、终止子、目的基因外；还有标记基因（便于筛选目的基因）；

②农杆菌Ti质粒上的T-DNA片段可以携带目的基因并整合至植物细胞的染色体DNA上；

③选择培养的目的是筛选出含有目的基因的柑橘细胞；

④先诱导生芽有利于生根；故再分化阶段，需要先诱导愈伤组织生芽，待长出芽后，再将其转接到诱导生根的培养基上，进一步诱导形成试管苗；

⑤在个体生物学水平可用接种地毯草黄单胞杆菌（或喷施地毯草黄单胞杆菌菌液）的方法，观察植株是否患有柑橘溃疡病来直接鉴定再生植株；分析再生植株没有抗病能力的原因，可以提取各植株的DNA，依据Xa27基因（目的基因）的特异性碱基序列设计引物，扩增后用（凝胶）电泳分离PCR产物进行检测；植株B、C没有出现条带，则可能是因为没有导入目的基因；植株A、E、F出现条带但不具有抗病能力，则可能是因为导入植物细胞的目的基因不能转录或转录后未翻译或翻译出的蛋白质没有活性等。【解析】(1)茎尖（或顶端分生区）此处病毒极少甚至无病毒。

(2)标记基因携带目的基因并整合至植物细胞的染色体DNA上筛选出含有目的基因的植物细胞先诱导生芽，再诱导生根接种地毯草黄单胞杆菌（或喷施地毯草黄单胞杆菌菌液）Xa27基因（凝胶）电泳导入植物细胞的目的基因不能表达（或不能转录，转录后不能翻译，翻译出的蛋白质没有活性等，合理即可）没有导入目的基因28、略

【分析】【分析】

物质跨膜运输的方式包括自由扩散；协助扩散、主动运输；自由扩散不需要载体和能量；协助扩散需要载体，但不需要能量；主动运输需要载体，也需要能量；自由扩散和协助扩散是由高浓度向低浓度运输，是被动运输。

【详解】

（1）由图中信息可知Na+和Cl-的运输需要借助载体蛋白；同时逆浓度梯度运输，为主动运输。钠离子和氯离子进入表皮细胞后储存在液泡中，从而避免高盐对其它细胞的影响。

（2）由题干信息可知盐泡表皮细胞吸收钠离子和氯离子；同时细胞内无叶绿体，则细胞膜表面钠离子和离子载体蛋白含里较多，由于细胞不能产生有机物供能，故所需能量只能通过其他细胞转运的葡萄糖分解提供，故葡萄糖转运蛋白含量也较多(细胞内无叶绿体，营养依靠外部细胞），所以D更可能是藜麦的盐泡细胞。

（3）①主动运输和被动运输的区别在于是否需要ATP；故ATP为自变量（细胞呼吸条件），所以甲组应给予正常呼吸条件，乙组应完全抑制其细胞呼吸；

②一段时间后观察两组植株对钠离子和氯离子的吸收速率；若乙组植株根系对钠离子；氯离子的吸收速率明显小于甲组吸收速率或基本不吸收，则说明其吸收盐分的方式为主动运输。

（4）可用DNA分子杂交技术检测目的基因是否成功转入受体细胞；如可用耐盐基因制作成的探针进行DNA分子杂交（或用该探针进行RNA分子杂交），或用基因测序法进行检测。通过大面积种植多种耐盐植物，可提高土地利用率；减缓土壤盐碱化程度；改善盐碱地的生态环境、减少温室气体的释放、提高生物多样性。

【点睛】

本题主要考查物质运输的方式，意在考查考生对各种运输方式的区分和实验的设计分析能力。【解析】主动运输液泡D三种载体蛋白的含量均相对较高。盐泡细胞从表皮细胞通过主动运输吸收大量Na+、Cl-，需要较多两种离子的载体蛋白。盐泡细胞中没有叶绿体，不能生产有机物供能，细胞所需能量只能通过其他细胞转运的葡萄糖分解提供，因此葡萄糖转运蛋白需要量也较高细胞呼吸抑制剂（或阻断ATP产生的物质）吸收速率明显小于甲组吸收速率或基本不吸收用耐盐基因制作成的探针进行DNA分子杂交（或用该探针进行RNA分子杂交）基因测序、PCR等通过大面积种植多种耐盐植物，提高土地利用率；减缓土壤盐碱化程度、改善盐碱地的生态环境、减少温室气体的释放、提高生物多样性。五、综合题(共4题，共16分)29、略

【分析】【分析】

1；植物体细胞杂交的具体过程：

2；过程分析：

（1）诱导融合的方法：物理法包括离心；振动、电刺激等；化学法一般是用聚乙二醇（PEG）作为诱导剂。

（2）细胞融合完成的标志是新的细胞壁的生成。

（3）植物体细胞杂交的终点是培育成杂种植株；而不是形成杂种细胞就结束。

（4）杂种植株的特征：具备两种植物的遗传特征；原因是杂种植株中含有两种植物的遗传物质。

【详解】

（1）该新型药用植物是通过植物体细胞杂交技术获得的；只有获得有活力的原生质体才能进行体细胞杂交。细胞壁的成分为纤维素和果胶，因此首先用纤维素酶和果胶酶去掉植物的细胞壁，然后用PEG化学诱导剂（物理方法：离心；振动等）诱导二者的原生质体融合，形成融合细胞，然后采用植物组织培养技术获得杂种植株。植物组织培养的主要过程是：先脱分化形成愈伤组织，然后再分化形成植物体。

（2）多倍体是指由受精卵发育而成；且体细胞中含有三个或三个以上染色体组的个体。甲；乙均为二倍体，二者不能通过有性杂交产生可育后代，原因是甲、乙有性杂交所产生的后代没有同源染色体，在减数分裂过程中同源染色体联会异常，也就是存在着生殖隔离。但二者通过植物体细胞杂交技术产生的后代却是可育的，因为在减数分裂过程中同源染色体能完成正常的联会，产生正常的配子。

【点睛】

本题综合考查植物细胞工程的植物体细胞染交技术及相关应用，要求考生识记植物体细胞杂交的具体过程及优点；识记植物组织培养技术的原理及过程，同时，从侧面考查了必修教材中的染色体数目变异以及减数分裂相关知识等相关知识。【解析】纤维素果胶原生质体愈伤再分化植物体细胞杂交技术由受精卵发育而成，且体细胞中含有三个或三个以上染色体组的个体在减数分裂过程中，前者染色体联会异常，而后者染色体联会正常30、略

【分析】【分析】

基因工程技术的基本步骤：

1；目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。

2；基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤；基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基。

3；将目的基因导入受体细胞:根据受体细胞不同；导入的方法也不一样.将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法;将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法;将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。

4；目的基因的检测与鉴定:(1)分子水平上的检测:①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA—分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质-抗原-抗体杂交技术。(2)个体水平上的鉴定:抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。

【详解】

（1）构建基因表达载体是基因工程的核心步骤；基因表达载体包