2025年中图版选择性必修3生物下册阶段测试试卷

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A.利用植物组织培养技术快速繁殖红豆杉植株可以保持其优良的遗传特性B.以红豆杉茎尖分生组织为材料通过组织培养获得的脱毒苗具有抗病毒的特点C.紫杉醇的工厂化生产主要是利用植物细胞培养技术使细胞增殖以获得更多的紫杉醇D.欲获得既能产生紫杉醇又能产生物质X的植株，可利用植物体细胞杂交技术获得“红豆杉—植物甲”杂种植株5、植物组织培养技术可以实现优良品种的快速繁殖，下列有关叙述正确的是（）A.用药剂对外植体消毒时，要兼顾消毒效果和植物的耐受性B.以同一植株不同部位细胞为材料培育出的植株基因型相同C.植物组织培养时使用的MS培养基中都需添加植物激素D.利用组织培养技术培育脱毒苗，获得具有抗病毒的新品种6、“中中”和“华华”是两只在我国出生的克隆猕猴，它们也是国际上首例利用体细胞克隆技术获得的非人灵长类动物。如图表示培育“中中”和“华华”的流程。下列相关叙述正确的是（）

A.图示过程中利用的技术有核移植和干细胞移植技术等B.这两只克隆猕猴是由同一受精卵发育而成的双胞胎C.融合细胞的培养过程需要无菌、无毒的环境和营养等条件D.利用A猴的胚胎干细胞核移植获得克隆猕猴的难度更大些7、下列有关哺乳动物早期胚胎发育的叙述错误的是（）A.在桑葚胚阶段胚胎的内部开始出现含有液体的腔B.胚胎干细胞是一类未分化的细胞，可以从早期胚胎中分离获得C.桑葚胚之前细胞一般都具有全能性，囊胚的细胞逐渐分化D.受精卵早期分裂时，胚胎中细胞数目不断增加，但胚胎的总体积并不增加8、为初步探究某动物PHB2蛋白抑制人宫颈癌细胞增殖的原因，研究者从基因数据库中获取了该蛋白的基因编码序列（简称phb2基因），大小为0.9kb（1kb=1000碱基对），利用大肠杆菌表达该蛋白。图1为所用载体图谱示意图，图中限制酶的识别序列及切割位点见下表，phb2基因序列不含图1中限制酶的识别序列。转化后的大肠杆菌提取质粒，再用选中的两种限制酶进行酶切，酶切产物经电泳分离，结果如图2．下列叙述错误的是（）

相关限制酶的识别序列及切割位点（注：箭头表示切割位点）。名称识别序列及切割位点名称识别序列及切割位点HindⅢA↓AGCTTTTCGA↑AEcoRIG↓AATTCCTTAA↑GPvitⅡCAG↓CTGGTC↑GACPstIGA↑CGTCGA↑CGTCKpnⅠG↓GATCCCCATG↑GBamHIG↓GATCCCCTAG↑G

A.需设计特异性的引物通过PCR技术扩增phb2基因B.为使phb2基因与载体正确连接，在扩增的phb2基因两端分别引入KpnⅠ和EcoRⅠ两种不同限制酶的识别序列C.经过两种限制酶酶切的phb2基因与载体进行连接时，可选用T4DNA连接酶D.图2中3号的质粒很可能是含目的基因的重组质粒评卷人得分二、多选题(共5题，共10分)9、下列关于单克隆抗体的叙述中，正确的是（）A.制备单克隆抗体是动物细胞融合技术最重要的应用B.单克隆抗体特异性强、纯度高、产量大、灵敏度高C.工业化制备单克隆抗体一般通过体内培养获得D.单克隆抗体是由骨髓瘤细胞和效应T细胞形成的杂交瘤细胞产生的10、下列有关动物细胞培养和植物组织培养的叙述，正确的是（）A.动物细胞培养和植物组织培养所用培养基中的成分不同B.动物细胞培养和植物组织培养过程中都要用到胰蛋白酶C.动物细胞培养可用于检测有毒物质，茎尖组织培养可获得脱毒植株D.烟草叶片离体培养能产生新个体，小鼠杂交瘤细胞培养能得到细胞代谢产物11、玉米秸秆转化为绿色能源酒精是解决能源危机的措施之一，具体的工艺流程如图所示。下列叙述正确的是（）

A.用酸或碱预处理有利于酶与底物充分接触，提高催化效率B.步骤③中，酵母菌在发酵初期更多分布在发酵液的上层C.随培养次数的增加，分离出的菌落类型越少表示纯度越高，其遗传基因型越稳定D.发酵过程中酒精浓度升高会抑制酵母菌代谢活动，同时使发酵液pH降低，发酵停止12、下列有关动物细胞培养的表述错误的是（）A.培养环境中需要O2，不需要CO2B.细胞要经过脱分化形成愈伤组织C.培养液通常含有糖类，氨基酸，无机盐，维生素和动物血清D.培养瓶中的细胞培养到一定阶段后分瓶后才能继续增殖13、下列关于微生物发酵的叙述，错误的是（）A.制备培养基过程中，需要在灭菌后进行pH的调节B.制作果酒时适当加大接种量可以提高发酵速率，抑制杂菌生长C.现代发酵工程选育出性状优良的菌种后即可进行发酵罐内的发酵D.醋酸菌能将乙醇变成乙醛而后变为乙酸，故夏天开瓶后的红酒容易变酸评卷人得分三、填空题(共5题，共10分)14、选用去核______的原因：卵（母）细胞______；卵（母）细胞______。15、禁止生物武器公约。

（1）1972年4月10日，苏联、美国、英国分别在其首都签署了《禁止试制、生产和储存并销毁细菌（生物）和毒剂武器公约》（简称_____）；并于1975年3月26日生效。1984年11月15日，我国也加入了这一公约。

（2）我国在任何情况下_____、_____、_____生物武器，并反对生物武器及其技术和设备的扩散。16、本课题对分解纤维素的微生物进行了初步的筛选。但是，这只是分离纯化的第一步。为确定得到的是纤维素分解菌，还需要进行发酵产纤维素酶的实验，纤维素酶的发酵方法有___________和___________发酵两种。纤维素酶的测定方法，一般是采用对纤维素酶分解滤纸等纤维素后所产生的__________进行________的测定。17、我国中科院神经科学研究所团队率先攻克了体细胞克隆灵长类动物这一世界难题｡他们首次成功培育出体细胞克隆猴，分别叫中中和华华（下图）｡猴子与人类同属灵长类，此前克隆灵长类动物在技术上存在着不可逾越的障碍｡克隆猴的诞生打破了这个障碍，也再次引起人们对于克隆人的担忧和猜测｡

从1997年宣布克隆羊多莉（上图）的出生，到2018年克隆猴中中､华华的诞生，这期间一些科学家试图克隆人｡举例说出克隆人面临哪些伦理问题｡_____18、首先要检测转基因生物的染色体DNA上是否插入了______，方法是采用______。评卷人得分四、实验题(共4题，共20分)19、［生物——选修1生物技术实践］

某小组同学为了调查湖水中细菌的污染情况而进行了实验。实验包括制备培养基；灭菌、接种及培养、菌落观察与计数。请回答与此实验相关的问题。

（1）培养基中含有的蛋白胨、淀粉分别为细菌培养提供了___________________和___________________。除此之外，培养基还必须含有基本成分是___________________和___________________。

（2）对培养基进行灭菌，应该采用的方法是___________________。

（3）为了尽快观察到细菌培养的实验结果，应将接种了湖水样品的平板置于___________________中培养，培养的温度设定在37℃。要使该实验所得结果可靠，还应该同时在另一平板上接种___________________作为对照进行实验。

（4）培养20小时后，观察到平板上有形态和颜色不同的菌落，这说明湖水样品中有___________________种细菌。一般说来，菌落总数越多，湖水遭受细菌污染的程度越___________________。

（5）如果提高培养基中NaCl的浓度，可以用于筛选耐___________________细菌，这种培养基被称为___________________。20、苹果树腐烂病是由黑腐皮壳菌引起的；是限制苹果产量的重要因素之一。生产上主要以化学药剂防治该病。为开发生物防治途径，科研人员拟从土壤中分离筛选出能抑制黑腐皮壳菌生长的枯草芽孢杆菌，实验流程图如图1：

（1）①中木糖和硝酸钾的作用分别是______________。

（2）②→③中梯度稀释的目的是_____________________________________________。

（3）制作的平板需要倒置的目的除了防止培养基中水分过快蒸发之外，还有______________。

（4）现有经纯化后获得的4个枯草芽孢杆菌品系，为探究哪个品系对黑腐皮壳菌的抑制效果更好，科研人员在如图2平板中的A处接种黑腐皮壳菌，在距离A处等距离的B1～B4处分别接种等量的4个枯草芽孢杆菌品系，在适宜条件下培养3﹣5天后，通过观察_________________________筛选出抑菌更好的枯草芽孢杆菌菌株。

图2

（5）在利用稀释涂布平板法统计土样中活菌的数目时，为了保证结果准确，一般选择菌落数在______________的平板进行计数。该方法所得结果往往比实际细菌的数目要少，原因是__________________________________。21、科学家的发现给人类的生活带来了无限的想象；他们采集了某深海海域的沉积物样品，分离；鉴定得到其中的深海放线菌，以期获得具有前景的抗生素替代品。据此回答下列问题：

(1)研究人员欲筛选出深海放线菌进行研究，取1g沉积物样品接种在液体培养基中摇瓶培养，稀释后取菌液通过_______________法接种到高氏一号（加数滴质量分数为10%的酚）培养基表面以获得单菌落。

(2)通过PCR技术扩增分离得到的放线菌的16SrRNA基因可进行菌株的种属鉴定。PCR技术中起关键作用的酶是_____________。该技术能在放线菌总的DNA中专一性扩增出16SrRNA基因的原因是______________。PCR产物一般可通过_________________鉴定。

(3)科学家还将Oct3/4、Sox2、c-Mc和KIf4基因通过逆转录病毒转入小鼠成纤维细胞中。2~3周后，这些细胞显示出ES细胞的形态、具有活跃的分裂能力，它们就是iPS细胞。在这个实验过程中，逆转录病毒的作用是_______________如何证明iPS细胞的产生不是由于培养基的作用？请写出实验设计思路______________22、微生物因具有体积小；易培养，繁殖快，且自身遗传物质结构简单，经人工处理或自然突变可获得新性状等特点，在发酵工程中应用广泛。回答下列问题：

(1)大肠杆菌是发酵工程中应用较为广泛的菌种之一。培养大肠杆菌时，需要将培养基的pH调至____性，再利用_________________法灭菌后进行接种。

(2)在发酵工程中，常常需要对菌种数目进行统计。相对真菌来说，细菌的体积较小，因此对细菌数目进行统计时，适合使用_________________（填“细菌计数板”或“血细胞计数板”）进行计数，且统计的细菌数目往往比实际活菌数目_________________（填“多”或“少”）。

(3)人工处理或自然突变往往会使菌种成为营养缺陷型菌株；现欲设计实验证明野生型大肠杆菌经紫外线照射后，可获得组氨酸缺陷型突变菌株，请简单描述实验思路并预计实验结果：

实验思路：_____________________________；

实验结果：_____________________________。评卷人得分五、综合题(共4题，共28分)23、科学家通过转基因技术获得了含有人生长激素基因的奶牛；要加速转基因奶牛的繁育，可以对此转基因奶牛进行克隆（如下图），请结合图示回答下列问题：

(1)通常用幼龄或早期胚胎进行动物细胞培养，原因是____________；在进行细胞培养时，要对取自转基因奶牛的组织细胞进行分散处理，形成单个细胞，这个过程中需要利用____________酶处理。

(2)在对转基因奶牛细胞进行性别鉴定时最有效的方法是SRY-PCR法，该方法用牛Y染色体上的性别决定基因SRY作为特异性探针来检测PCR扩增产物，检测方法为____________技术，此过程需要设计引物，引物的作用是____________。

(3)将重组细胞在培养液中培养成的重组胚胎移入受体母牛后，该母牛生出的犊牛与供体奶牛相比并不是100%的复制，原因可能是____________。

(4)上述转基因奶牛的克隆成功，说明了动物____________具有全能性。24、腌制的成鱼是一种风味独特的传统水产品；但腌制食品中普遍存在生物胺。生物胺在人体内积累过量会使人出现诸如头痛；恶心等一系列中毒症状。某实验小组从腌制的咸鱼中分离筛选出具有生物胺降解活性的微生物，并分析其降解特性，实验步骤如下。请回答下列问题：

①取咸鱼背部肌肉10g，剪碎后放入90mL无菌水中，并逐步稀释102、103、104倍；取0.1mL上述不同的稀释液分别涂布到灭菌的MRS肉汤培养基中。

②将接种后的培养基置于30℃恒温箱中培养48h；挑选单菌落多次纯化。

③选取两个含有生物胺的肉汤培养基；编号为甲；乙，甲组接种纯化后的单菌落，乙组不接种微生物，48h后，取样测定培养基中生物胺的含量。

(1)培养基中除了要有碳源和氮源外，还应加入_______________________等营养物质。步骤①中对MRS肉汤培养基灭菌的一般方法是_________________________________。

(2)步骤②中纯化获得单菌落的常用方法有______________________，实验室可以根据___________________（至少答出三点）等特征判断菌落的种类。

(3)步骤③中设置培养乙组的目的是__________________________________；若取样测得培养基甲和乙中的生物胺的含量依次为W1和W2，则48h内生物胺的降解率可表为_________________。

(4)Lr、Lp、Pp三种生物胺降解菌的相互关系如下表，若要从中选取两种降解菌组合来降解成鱼中的生物胺，则应选择的两种降解菌是_____________________，理由是______________________。菌株LrLpPpLr－NYLpN－YPpYY－

注：Y表示有拮抗作用，N表示无拮抗作用。25、请根据有关生物工程方面的知识回答下列问题：

(1)基因工程的核心是_____，从分子水平上看，基因工程得以实现的遗传学物质基础是：_____，_____。（写出两点）。

(2)我国科学家独创的将目的基因导入植物细胞的方法是_____，农杆菌转化法的原理是利用其菌体中质粒的T-DNA片段可_____的特点；将目的基因导入微生物细胞最有效的方法是_____。

(3)动物细胞工程中_____技术是其他动物细胞工程技术的基础。动物细胞工程的一项重要应用是制备单克隆抗体，该过程形成的杂交瘤细胞中发生的遗传信息流动有DNA→DNA、_____。

(4)胚胎工程中，胚胎移植选择受体的条件是_____的个体，受体对移入子宫的外来胚胎基本不发生_____，这为胚胎在受体内的存活提供了可能。为了获得产奶量高的奶牛，需取囊胚期_____细胞做性别鉴定。若对囊胚进行胚胎分割，要注意_____，否则影响分割后胚胎的恢复和进一步发育。26、以下是科学家采用不同方法培育良种牛的过程；a～h为操作过程，请据图回答有关问题：

（1）获取外源基因的方法包括：①从基因文库中获取目的基因，②利用________扩增目的基因，③用____________直接人工合成目的基因。

（2）在构建含有外源基因的载体时需要的工具有____________、____________和载体。

（3）过程h常用的方法是________。为了能确定目的基因已经导入到受精卵，相应的载体需要有________以便于进行检测。

（4）“试管牛”技术的操作流程是______________________（填字母）。

（5）图中数字标号代表的结构名称是①___________；②___________；③____________。

（6）d操作的名称是________；受体子宫内胚胎发育的过程中，细胞不断分裂。

（7）图中用到的激素是________；其目的是获得更多的卵母细胞，经受精后可得到早期胚胎。

（8）若要获得遗传物质完全相同的两个新个体，可对发育到________________阶段的早期胚胎进行________处理，再植入到受体内。若要对早期胚胎进行长期保存，应将其置于________条件下保存。参考答案一、选择题(共8题，共16分)1、B【分析】【详解】

细胞的数目增多；有机物含量由于消耗而减少，A错误；在卵裂过程中，细胞的总体积基本不变，但细胞的数目增加，总面积也会增加，因此细胞的总面积与总体积的比值逐渐增大，B正确；每个细胞的DNA含量不变，C错误；卵裂期不会出原肠腔，原肠胚才会出现原肠腔，并有胚层的分化，D错误。

【点睛】解答B选项，关键能记住卵裂过程中，细胞体积大小几乎不变，但细胞数目在增加，从而总面积增大，才能判断出该选项。2、A【分析】【分析】

1；动物细胞培养技术的原理是细胞增殖（有丝分裂）；传代培养时需要用胰蛋白酶处理贴壁生长的细胞；然后分瓶继续培养，让细胞继续增殖；癌细胞失去接触抑制，所以癌细胞在培养瓶中不会出现接触抑制现象；

2；启动子是一段有特殊结构的DNA片段；它是RNA聚合酶识别和结合的部位，转录形成信使RNA；

3；囊胚的特点：细胞开始出现分化（该时期细胞的全能性仍比较高）．聚集在胚胎一端个体较大的细胞称为内细胞团；将来发育成胎儿的各种组织．中间的空腔称为囊胚腔。

【详解】

A；启动子是一段有特殊结构的DNA片段；它是RNA聚合酶识别和结合的部位，转录形成信使RNA，A错误；

B；传代培养时需要用胰蛋白酶处理贴壁生长的细胞；将其分散成单个细胞，然后分瓶继续培养，让细胞继续增殖，B正确；

C；癌细胞失去接触抑制；所以癌细胞在培养瓶中不会出现接触抑制现象，C正确；

D；在胚胎发育过程中；囊胚期细胞出现了细胞分化，形成滋养层和内细胞团，D正确。

故选A。

【点睛】3、D【分析】【分析】

关于限制酶；考生可以从以下几方面把握：

（1）来源：主要从原核生物中分离纯化出来。

（2）特异性：能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列；并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂。

（3）结果：形成黏性末端或平末端。

【详解】

A；酶具有专一性；不同的限制酶有不同的识别序列和切割位点，A正确；

B；限制酶2和3识别的序列分别是CCGCGG和GGATCC；均为6个碱基对，B正确；

C；限制酶1和3剪出的黏性末端相同；均为-GATC，C正确；

D；限制酶只能识别和切割DNA分子内一小段核苷酸序列；D错误。

故选D。4、B【分析】【分析】

由图分析可知；红豆杉茎尖分生组织通过脱分化过程形成愈伤组织，一方面愈伤组织通过再分化形成胚状体，进而培养成红豆杉植株；另一方面，愈伤组织培养增殖产生更多的愈伤组织细胞，从愈伤组织细胞中提取紫杉醇。

【详解】

A；利用植物组织培养技术快速繁殖红豆杉植株属于无性生殖；因此可保持其优良的遗传特性，A正确；

B；常用茎尖分生组织进行组织培养获得脱毒苗是因为茎尖含毒很少；可能不含病毒，但获得的脱毒苗不一定具有抗病毒的特点，B错误；

C；图中获得紫杉醇的过程只要培养到愈伤组织；不需要形成完整植株，利用了细胞增殖的原理，即紫杉醇的工厂化生产主要是利用植物细胞培养技术使细胞增殖以获得更多的紫杉醇，C正确；

D；植物甲和红豆杉是不同的物种；自然状态下存在生殖隔离，欲获得既能产生紫杉醇又能产生物质X的植株，可利用植物体细胞杂交技术获得“红豆杉一植物甲”杂种植株，D正确。

故选B。5、A【分析】【分析】

植物组织培养的原理是植物细胞具有全能性；其过程为：离体的植物组织，器官或细胞经过脱分化过程形成愈伤组织，愈伤组织经过再分化过程形成胚状体，进一步发育成为植株。

【详解】

A；通常使用酒精和次氯酸钠溶液对外植体进行消毒处理；要兼顾消毒效果和植物的耐受性，避免过度消毒对外植体造成损伤，A正确；

B；同一植株不同细胞经培养获得的植株的基因型不一定相同；如花粉细胞培养形成的植株的基因只有体细胞培养形成的植株的一半，B错误；

C；植物组织培养常用的MS培养基是固体培养基；并不都需添加植物激素，如菊花茎段自身内源激素可调节其生长，其组织培养时不必添加植物激素，C错误；

D；因为分生组织的病毒极少；甚至没有病毒，所以将分生组织（如根尖、茎尖）进行离体培养能获得脱毒植株，但不能获得抗病毒植株，D错误。

故选A。6、C【分析】【分析】

动物细胞核移植技术是将动物一个细胞的细胞核移入去核的卵母细胞中；使这个重新组合的细胞发育成新胚胎，继而发育成动物个体的技术。

【详解】

A；图示过程包括核移植和动物细胞培养等技术；没有干细胞移植技术，A错误；

B；这两只克隆猕猴是通过核移植、胚胎移植产生的；没有用到受精卵，B错误；

C；融合细胞的培养过程需要无菌、无毒的环境和营养等条件；C正确；

D；动物胚胎细胞分化程度低；表现全能性相对容易，而动物体细胞分化程度高，表现全能性十分困难，因此动物体细胞核移植的难度明显高于胚胎细胞核移植，所以利用A猴的胚胎干细胞核移植获得克隆猕猴的难度更小些，D错误。

故选C。7、A【分析】【分析】

胚胎发育过程：

（1）卵裂期：细胞进行有丝分裂；数量增加，胚胎总体积不增加；

（2）桑葚胚：32个细胞左右的胚胎；之前所有细胞都能发育成完整胚胎的潜能属全能细胞；

（3）囊胚：细胞开始分化；其中个体较大的细胞叫内细胞团将来发育成胎儿的各种组织；而滋养层细胞将来发育成胎膜和胎盘；胚胎内部逐渐出现囊胚腔。注：囊胚的扩大会导致透明带的破裂，胚胎伸展出来，这一过程叫孵化；

（4）原肠胚：内细胞团表层形成外胚层；下方细胞形成内胚层，由内胚层包围的囊腔叫原肠腔。

【详解】

A；在桑葚胚阶段；32个细胞左右的胚胎，胚胎的内部无含有液体的腔，A错误；

B；胚胎干细胞是一类未分化的细胞；可以从早期胚胎或原始性腺中分离获得，B正确；

C；桑葚胚的细胞一般都具有全能性；囊胚的细胞逐渐分化，C正确；

D；受精卵早期分裂时；胚胎中细胞数目不断增加，但胚胎的总体积并不增加，甚至略微缩小，D正确。

故选A。8、B【分析】【分析】

图1为所用载体图谱示意图，目的基因要插在启动子和终止子之间，可用EcoRⅠ和PvitⅡ两种不同限制酶切割，KpnⅠ在启动子和终止子之外还有切割位点，所以不用KpnⅠ切割；由图3可知，EcoRⅠ切割得到黏性末端，PvitⅡ切割可得到平末端，由于目的基因不含图1中限制酶的识别序列，所以要在目的基因两端分别加上EcoRⅠ和PvitⅡ切割后的序列末端，再用T4DNA连接酶将目的基因连接到载体上；完成基因表达载体的构建。

【详解】

A、通过PCR技术扩增phb2基因时需设计根据phb2基因特异性的引物；A正确；

B；目的基因应导入启动子和终止子之间；两者之间存在三种限制酶切点，但是由于KpnⅠ在质粒上不止一个酶切位点，所以应该选择EcoRⅠ和PvitⅡ两种不同限制酶的识别序列，B错误；

C、T4DNA连接酶既可以“缝合”双链DNA片段互补的黏性末端；又可以“缝合”双链DNA片段的平末端，但连接平末端的效率相对比较低，可以用T4DNA连接酶连接，C正确；

D、题干显示，目的基因大小约0.9kb，图2中3号的质粒酶切后得到约6kb片段和约1kb片段，约1kb片段很可能是目的基因；D正确。

故选B。二、多选题(共5题，共10分)9、A:B【分析】【分析】

单克隆抗体的制备过程是：对小动物注射抗原；从该动物的脾脏中获取效应B细胞，将效应B细胞与骨髓瘤细胞融合，筛选出能产生单一抗体的杂交瘤细胞，克隆化培养杂交瘤细胞（体内培养和体外培养），最后获取单克隆抗体。

【详解】

A；制备单克隆抗体是动物细胞融合技术最重要的应用；融合后形成的杂交瘤细胞既能无限增殖，又能产生单克隆抗体，A正确；

B；单克隆抗体具有特异性强、纯度高、灵敏度高；并可能大量制备的特点，B正确；

C；体内诱生法制备的单克隆抗体需要注入到小鼠的体内；最后从小鼠的腹腔中提取腹水，此方法比较麻烦，而且抗体的量也较少，因此对于工业上需求较多的抗体而言，通常是采用体外培养法，C错误；

D；单克隆抗体是由骨髓瘤细胞和效应B细胞形成的杂交瘤细胞产生的；D错误。

故选AB。10、A:C:D【分析】【分析】

植物组织培养和动物细胞培养的比较。比较项目植物组织培养动物细胞培养原理细胞的全能性细胞增殖培养基性质固体培养基液体培养基培养基成分营养物质（蔗糖）、植物激素等营养物质（葡萄糖）、动物血清等培养结果植物体细胞株、细胞系培养目的快速繁殖、培育无毒苗等获得细胞或细胞产物分散处理无有脱分化有无

【详解】

A；动物细胞培养和植物组织培养所用培养基中的成分不同；如动物细胞培养需要加血清，植物细胞培养不需要添加血清，A正确；

B；植物组织培养不需要胰蛋白酶；B错误；

C；动物细胞培养可用于检测有毒物质；茎尖组织培养可获得脱毒植株，C正确；

D；烟草叶片离体培养能产生新个体；小鼠杂交瘤细胞培养能得到细胞代谢产物，D正确。

故选ACD。11、A:B:C【分析】【分析】

用玉米秸秆生产燃料酒精是利用微生物进行生物发酵的过程；所利用的微生物为酵母菌，通过酒精发酵将葡萄糖转化为酒精，玉米秸秆中含有的糖类主要是纤维素，因此需要先将纤维素水解成葡萄糖，再进行发酵。

【详解】

A；由于纤维素组成成分复杂、结构稳定；生物降解时难以迅速进行，常用酸或碱进行预处理，初步打断纤维素内部的化学键，降低聚合度，利于酶与底物充分接触，提高催化效率，A正确；

B；在有氧的条件下酵母菌进行出芽生殖；上层培养液与空气接触部位氧气较多，短时间内酵母菌更多分布在发酵液的上层，B正确；

C；在选择培养基中经多次培养；分离出的菌落类型越少表示纯度越高，其遗传基因型越稳定，C正确；

D、发酵液pH下降是因为产生了CO2；D错误。

故选ABC。12、A:B【分析】【分析】

动物细胞培养需要满足以下条件：①无菌、无毒的环境：培养液应进行无菌处理。通常还要在培养液中添加一定量的抗生素，以防培养过程中的污染。此外，应定期更换培养液，防止代谢产物积累对细胞自身造成危害。②营养：合成培养基成分：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等。通常需加入血清、血浆等天然成分。③温度：适宜温度。④气体环境：95%空气+5%CO2。

【详解】

A、动物细胞培养中，培养环境中需要O2，也需要CO2（用来维持培养液的pH）；A错误；

B；动物细胞培养不需要脱分化；植物细胞要经过脱分化才形成愈伤组织，B错误；

C；动物细胞培养中常用含糖类、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清的液体培养基；C正确；

D；动物细胞培养过程中会出现接触抑制现象而停止分裂增殖；故培养瓶中的细胞培养到一定阶段后要用胰蛋白酶处理，分瓶后才能继续增殖，D正确。

故选AB。13、A:C【分析】【分析】

果酒的制作利用酵母菌的无氧呼吸产生酒精；醋酸菌在糖源；氧气充足时；直接将葡萄糖氧化为醋酸；在糖源不足、氧气充足时，可利用酒精，即乙醇作为呼吸底物，先将乙醇变成乙醛而后变为乙酸（醋酸）。

【详解】

A；制备培养基过程中；pH的调节应在灭菌前进行，A错误；

B；制作果酒时适当加大接种量；酵母菌菌体的基数增大，可使其快速形成优势菌群，抑制杂菌生长，提高发酵速率，B正确；

C；现代发酵工程选育出性状优良的菌种后；为满足发酵过程的需要，还要对菌种进行扩大培养，之后才可进行发酵罐内的发酵，C错误；

D；醋酸菌能够氧化酒精产生醋酸；造成葡萄酒的败坏。首先，乙醇被氧化生成乙醛，然后乙醛再被氧化生成醋酸（乙酸），故夏天开瓶后的红酒容易变酸，D正确。

故选AC。三、填空题(共5题，共10分)14、略

【解析】①.卵（母）细胞②.比较大，容易操作③.细胞质多，营养丰富。15、略

【分析】【详解】

为最大程度的保障人类权益；签署了禁止生物武器公约：

（1）《禁止试制；生产和储存并销毁细菌（生物）和毒剂武器公约》；简称《禁止生物武器公约》。

（2）我国对于生物武器的态度是在任何情况下不发展、不生产、不储存生物武器，并反对生物武器及其技术和设备的扩散。【解析】①.《禁止生物武器公约》②.不发展③.不生产④.不储存16、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】液体发酵固体发酵葡萄糖定量17、略

【分析】【详解】

①克隆人是对人权和人的尊严的挑战：

人不仅是自然人；在生物进化中人自从脱离了动物界，还成为有价值观念的社会的人，因此人是具有双重属性的，是生物；心理和社会的集合体。克隆人也就是人工无性生殖的人，只在遗传性状上与原型人一致，而人的心理、行为、社会特征和特定人格是不能克隆的，因此克隆人是不完整的人，是一个丧失自我的人，严重违反了人权，危害人类尊严；

②克隆人冲击了现有的婚姻家庭和两性关系等传统的伦理道德观念：

克隆人的出现将彻底搅乱代际关系和家庭伦理定位；克隆人过程中可以出现体细胞核供者；卵细胞供者以及孕育者三位生物学父母，以及抚养者的社会学父母的多种选择，被克隆者只是生物学上复制，人类世代的传承也将被打破，家庭伦理关系含混不清；

③克隆人是制造在心理上和社会地位上都不健全的人；

④克隆人违反生物进化的自然发展规律：

人类所以发展到如此高的进化文明程度，是由其自然发展规律形成的。而克隆人要把有性生殖倒退到无性生殖，这种行为如不加阻止，必将给人类种下无穷的灾难。【解析】①克隆人是对人权和人的尊严的挑战；②克隆人冲击了现有的婚姻家庭和两性关系等传统的伦理道德观念；③克隆人是制造在心理上和社会地位上都不健全的人；④克隆人违反生物进化的自然发展规律等。18、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】目的基因DNA分子杂交技术。四、实验题(共4题，共20分)19、略

【分析】【详解】

微生物生长繁殖过程中需要氮源、碳源、水分、无机盐等营养物质，有些微生物还需要生长因子；培养基的灭菌一般采用高压蒸汽灭菌，该过程一般在高压蒸汽灭菌锅中进行；影响微生物生长繁殖的因素主要是营养和温度，因此培养微生物时除提供适宜的营养外，还要提供合适的温度；为排除无关变量的影响，该实验要设立空白对照，可以用蒸馏水代替样品来进行对照；在培养基中加入食盐可以选择耐盐菌，如金黄色葡萄球菌等，这种培养基叫做选择培养基。【解析】氮源（碳源不作要求）碳源无机盐水高压蒸汽灭菌恒温培养箱无菌水多高盐（或NaCl）选择性培养基20、略

【分析】【分析】

微生物的分离：①利用该分离对象对某一营养物质的“嗜好”；专门在培养基中加入该营养物质，使该微生物大量增殖。这些物质主要是一些特殊的碳源；氮源，如纤维素可用来富集纤维素分解微生物，尿素可用来富集尿素分解微生物。②利用该分离对象对某种抑制物质的抗性，在混合培养物中加入该抑制物质，经培养后，由于原来占优势的它种微生物的生长受到抑制，而分离对象却可趁机大量增殖，使之在数量上占优势。如筛选酵母菌和霉菌，在培养基中加入青霉素，因青霉素可抑制细菌和放线菌的细胞壁的合成，从而抑制两类微生物的生长，而酵母菌和霉菌正常生长增殖。

【详解】

（1）微生物的生长需要碳源；氮源、水和无机盐；①中木糖含有C、H、O元素，故能提供碳源，硝酸钾中含有N元素，可以提供氮源和无机盐。

（2）分离筛选枯草芽孢杆菌需要得到单菌落；②→③中梯度稀释的目的是将聚集在一起的微生物分散成单个细胞，从而能在固体培养基表面形成单个菌落。

（3）制作的平板需要倒置的目的除了防止培养基中水分过快蒸发之外；还可以防止冷凝水落入培养基造成污染。

（4）分析题意可知，A处接种黑腐皮壳菌，在距离A处等距离的B1~B4处分别接种等量的4个枯草芽孢杆菌品系；在适宜条件下培养3－5天，由于枯草芽孢杆菌能抑制黑腐皮壳菌生长，通过观测黑腐皮壳菌菌落的形状（黑腐皮壳菌菌落边缘与4个枯草芽孢杆菌菌落的距离），就能筛选出抑菌更好的枯草芽孢杆菌菌株。

（5）在利用稀释涂布平板法统计土样中活菌的数目时；为了保证结果准确，一般选择菌落数在30~300的平板进行计数。当两个或多个细菌连在一起时平板上观察到的只是一个菌落，故该方法所得结果往往比实际细菌的数目要少。

【点睛】

本题考查微生物的分离和计数的相关知识，意在考查考生利用所学知识解决实际问题的能力，难度中等。【解析】提供碳源，提供氮源和无机盐将聚集在一起的微生物分散成单个细胞，从而能在固体培养基表面形成单个菌落防止冷凝水落入培养基造成污染观测黑腐皮壳菌菌落的形状（黑腐皮壳菌菌落边缘与4个枯草芽孢杆菌菌落的距离）30～300当两个或多个细菌连在一起时平板上观察到的只是一个菌落21、略

【分析】【分析】

PCR原理：在解旋酶作用下；打开DNA双链，每条DNA单链作为母链，以4种游离脱氧核苷酸为原料，合成子链，在引物作用下，DNA聚合酶从引物3'端开始延伸DNA链，即DNA的合成方向是从子链的5'端自3'端延伸的。实际上就是在体外模拟细胞内DNA的复制过程。DNA的复制需要引物，其主要原因是DNA聚合酶只能从3′端延伸DNA链。

【详解】

（1）分析题意可知；研究人员取1g沉积物样品接种在液体培养基中摇瓶培养，稀释后可通过稀释涂布平板法接种到培养基表面以获得单菌落。

（2）PCR技术是一项通过体外控制温度扩增DNA的技术，该技术中由于温度较高，起关键作用的酶是耐高温DNA聚合酶；PCR扩增的前提是要有一段目的基因的核苷酸片段，分析题意，该技术能在放线菌总的DNA中专一性扩增出16SrRNA基因的原因是：引物是根据16SrRNA基因的一段已知核苷酸序列设计合成的；PCR产物一般可通过琼脂糖凝胶电泳来鉴定：凝胶中的DNA分子通过染色；可以在波长为300nm的紫外灯下被检测出来。

（3）分析题意，科学家将Oct3/4、Sox2、c-Mc和KIf4基因通过逆转录病毒转入小鼠成纤维细胞中，该过程中逆转录病毒是载体，能将外源基因ct3/4、Sox2、c-Mc和KIf4送入小鼠成纤维细胞；分析题意，实验目的是iPS细胞的产生不是由于培养基的作用，故实验的自变量是外源基因的有无，因变量是IPS细胞的产生情况，实验设计应遵循对照与单一变量原则，故可设计实验如下：将转入外源基因的细胞和没有转入外源基因的细胞分别培养在相同的培养基中，在相同且适宜的条件下，如果只有转入外源基因的细胞转化成了iPS细胞，则可以证明iPS细胞的产生不是由于培养基的作用。【解析】(1)稀释涂布平板法##涂布平板法

(2)耐高温DNA聚合酶引物能与16SrRNA基因特异性结合（引物是根据16SrRNA基因的一段已知核苷酸序列设计合成的）琼脂糖凝胶电泳。

(3)逆转录病毒是载体，能将外源基因ct3/4、Sox2、c-Mc和KIf4送入小鼠成纤维细胞。将转入外源基因的细胞和没有转入外源基因的细胞分别培养在相同的培养基中，在相同且适宜的条件下，如果只有转入外源基因的细胞转化成了iPS细胞，则可以证明iPS细胞的产生不是由于培养基的作用22、略

【分析】【分析】

1；利用显微镜进行直接计数；也是一种常用的、快速直观的测定微生物数量的方法。该方法利用特定的细菌计数板或血细胞计数板，在显微镜下观察、计数，然后再计算一定体积的样品中微生物的数量，统计的结果一般是活菌数和死菌数的总和。细菌计数板和血细胞计数板的计数原理相同。血细胞计数板比细菌计数板厚，常用于相对较大的酵母菌细胞、霉菌孢子等的计数。用细菌计数板可对细菌等较小的细胞进行观察和计数。

2；灭菌则是指使用强烈的理化方法杀死物体内外所有的微生物；包括芽孢和孢子。湿热灭菌：高压蒸汽灭菌（压力为100kPa、温度为121℃、15~30min）；干热灭菌：160~170℃热空气维持2~3h。耐高温的和需要保持干燥的物品，如玻璃器皿、金属用具等；灼烧灭菌：接种工具。接种过程中，试管口、瓶口等容易被污染的部位。

【详解】

（1）大肠杆菌是细菌；培养培养大肠杆菌时，需要将培养基的pH调至中性或弱碱性，对培养基一般采用高压蒸汽灭菌法进行灭菌。

（2）细菌计数板和血细胞计数板的计数原理相同。血细胞计数板比细菌计数板厚；常用于相对较大的酵母菌细胞；霉菌孢子等的计数。用细菌计数板可对细菌等较小的细胞进行观察和计数。该方法统计的结果一般是活菌数和死菌数的总和，所以统计的细菌数目往往比实际活菌数目多。

（3）本实验为了证明野生型大肠杆菌经紫外线照射后；可获得组氨酸缺陷型突变菌株，可将野生型大肠杆菌经紫外线照射后接种于不含组氨酸的完全培养基上，适宜条件下培养一段时间后观察大肠杆菌是否生长，如果在培养基上无大肠杆菌生长，说明野生型大肠杆菌经紫外线照射后，获得了组氨酸缺陷型突变菌株。具体实验思路及结果如下：

实验思路：使用稀释涂布平板法将紫外线照射后的大肠杆菌接种于不含组氨酸的完全培养基上；标记为甲组；使用稀释涂布平板法将等量的野生型大肠杆菌接种于不含组氨酸的完全培养基上，标记为乙组；将未接种的不含组氨酸的完全培养基标记为丙组；将甲；乙、丙组培养基放于相同且适宜的环境中培养，一段时间后观察并统计培养基上的菌落数。

实验结果：乙组培养基出现较多菌落；甲组培养基没有出现菌落或出现菌落、但菌落数少于乙组；丙组培养基无菌落。【解析】(1)中性或弱碱高压蒸汽灭菌（或湿热灭菌）

(2)细菌计数板多。

(3)使用稀释涂布平板法将紫外线照射后的大肠杆菌接种于不含组氨酸的完全培养基上，标记为甲组；使用稀释涂布平板法将等量的野生型大肠杆菌接种于不含组氨酸的完全培养基上，标记为乙组；将未接种的不含组氨酸的完全培养基标记为丙组；将甲、乙、丙组培养基放于相同且适宜的环境中培养，一段时间后观察并统计培养基上的菌落数乙组培养基出现较多菌落；甲组培养基没有出现菌落或出现菌落、但菌落数少于乙组；丙组培养基无菌落五、综合题(共4题，共28分)23、略

【分析】【分析】

分析题图：图示为转基因克隆奶牛的培育过程；该过程采用了动物细胞培养技术；动物体核移植技术、早期胚胎培养技术、胚胎移植技术。

(1)

通常用幼龄或早期胚胎进行动物细胞培养；原因是这类细胞的分化程度低，分裂能力强；将组织细胞分散成单个细胞，要利用胰蛋白酶处理。

(2)

因为“该方法用牛Y染色体上的性别决定基因SRY作为特异性探针来检测PCR扩增产物”；可知是通过碱基互补配对来检测有无相应的杂交带，检测方法为DNA分子杂交技术，此过程需要设计引物，引物的作用是为热稳定性DNA聚合酶提供结合位点。

(3)

由于生物的性状受细胞核基因和细胞质基因共同控制以及生物的性状还受环境因素的影响；所以重组胚胎移入受体母牛后，该母牛就会生出与供体奶牛遗传物质相同的犊牛，但也不是100%的复制。

(4)

转基因奶牛的克隆成功；说明了动物体细胞的细胞核具有全能性。

【点睛】

本题结合转基因克隆奶牛的培育过程图解，考查动物细胞培养、PCR、胚胎移植的相关知识，要求考生识记动物细胞培养的过程；识记胚胎移植的基本程序的应用，能结合所学的知识答题【解析】(1)细胞分裂能力强胰蛋白##或胶原蛋白

(2)DNA分子杂交为热稳定性DNA聚合酶提供结合位点。

(3)生物性状受细胞核基因和质基因的共同控制；生物的性状还受环境因素的影响。

(4)体细胞的细胞核24、略

【分析】【分析】

本课题的目的是“科研人员欲从咸鱼中筛选出能够高效降解生物胺的菌株”；所以是相关选择培养基的配制及原理考查。选择培养基：根据某种微生物的特殊营养要求或其对某化学；物理因素的抗性而设计的培养基，可以使混合菌样中的劣势菌变成优势菌，从而提高该菌的筛选率。

(1)

培养基的基本营养物质包括水；无机盐、碳源和氮源。培养基常用的灭菌方法是高压蒸汽灭菌。

(2)

微生物纯化常用的方法有稀释涂布平板法和平板划线法。菌落的特征包括形状；大小、颜色和隆起程度等。

(3)

乙组不接种微生物，目的是作空白对照，以排除非测试因素对实验结果的影响。甲和乙生物胺的差值表示微生物降解的量，则48h内生物胺的降解率可表为（W2－W1）/W2×100%。

(4)

若要从中选取两种降解菌组合来降解成鱼中的生物胺，则两种生物胺降