2025年沪科版选择性必修3生物上册阶段测试试卷

…………○…………内…………○…………装…………○…………内…………○…………装…………○…………订…………○…………线…………○…………※※请※※不※※要※※在※※装※※订※※线※※内※※答※※题※※…………○…………外…………○…………装…………○…………订…………○…………线…………○…………第=page22页，总=sectionpages22页第=page11页，总=sectionpages11页2025年沪科版选择性必修3生物上册阶段测试试卷673考试试卷考试范围：全部知识点；考试时间：120分钟学校：______姓名：______班级：______考号：______总分栏题号一二三四五总分得分评卷人得分一、选择题(共7题，共14分)1、下列有关“微生物的分离与培养”实验的叙述正确的是（）A.高压蒸汽灭菌锅加盖时应按顺时针方向依次旋紧每一个螺旋B.选择培养基可以鉴定某种微生物的种类C.对培养皿进行编号或对菌种进行标注时，应使用记号笔在皿底标记D.利用平板划线法可对微生物进行接种、纯化、分离和计数2、紫草素具有抗菌、消炎效果。在工业化生产中，取紫草植株部分组织诱导形成紫草愈伤组织，再转入紫草素形成培养基，然后再将细胞破碎后提取出紫草素。下列相关叙述中，不正确的是（）A.工业化生产过程包括细胞的脱分化和再分化B.愈伤组织是具有再分化能力的薄壁细胞C.紫草素在细胞内合成后被分泌到细胞外D.紫草的愈伤组织细胞在低渗溶液中一般不会涨破3、下图为某动物克隆流程图；下列说法错误的是（）

A.同一个体的体细胞都能经过该流程得到新个体B.②过程操作前常对离体体细胞进行营养限制性培养C.①过程可以使用紫外线破坏细胞核D.③过程刚开始时细胞核中的基因没有表达4、烟薯-25是一种甜度大、抗病力强、产量高的红薯。它是通过无性繁殖的作物，多代繁殖后病毒会在体内积累，导致含糖量不足，产量下降。大面积栽培时，一般都用脱毒苗。下列有关脱毒苗培育过程的叙述，错误的是（）A.脱毒苗培育过程的原理是高度分化的植物细胞具有全能性B.脱毒苗培育过程需经历脱分化和再分化两个阶段C.脱分化和再分化的培养基成分是相同的，但两个阶段光照条件不同D.培育脱毒苗应将组织块进行消毒处理，接种过程应进行无菌操作5、某课题组为得到青蒿素产量高的新品系，通过一定的技术，使青蒿素合成过程的某一关键酶基因fps在野生青蒿中得到了过量表达，其过程如图所示。下列叙述错误的是（）

A.PCR过程中，温度需要控制在90C以上的目的是破坏氢键B.构建重组质粒过程中，目的基因需插入Ti质粒的T-DNA上C.农杆菌的作用是感染植物、并将目的基因转移到受体细胞中D.用荧光标记的fps基因作为探针可以检测目的基因是否表达6、下列与果酒、果醋和腐乳制作相关的叙述,正确的是（）（）A.B.使用的菌种分别是酵母菌、醋酸菌、乳酸菌C.果醋发酵包括无氧发酵和有氧发酵D.腐乳制作所需要的适宜温度最高使用的菌种都具有细胞壁、核糖体、DNA和RNA7、人体内的t-PA蛋白能高效降解由纤维蛋白凝聚而成的血栓，是心梗和脑血栓的急救药，改造后的t-PA蛋白能显著降低出血副作用。下图表示构建含t-PA改良基因重组质粒的过程示意图。相关说法错误的是（）

A.构建重组质粒时，选用的限制酶是XmaⅠ和BglⅡB.需要DNA聚合酶将t-PA改良基因与质粒连接C.新霉素抗性基因的作用是便于将导入质粒的大肠杆菌筛选出来D.在加入新霉素的培养基中选择呈白色的菌落选育工程菌株评卷人得分二、多选题(共7题，共14分)8、下图表示形成cDNA并进行PCR扩增的过程。据图分析；下列叙述错误的是（）

A.①过程所需的原料是脱氧核苷酸B.②过程所需的酶必须耐高温C.③过程需要解旋酶破坏氢键D.④过程的引物对之间不能互补配对9、下列有关“DNA粗提取与鉴定”实验的叙述，不正确的是（）A.用蒸馏水使家兔的红细胞吸水涨破，可获取富含DNA的滤液B.植物材料需先用洗涤剂破坏细胞壁再吸水胀破，释放DNAC.DNA不溶于95%的冷酒精，但可溶于2mol/L的NaCl溶液D.鉴定DNA时，将丝状物加入二苯胺试剂中并进行沸水浴，冷却后观察现象10、为探究某物种的等位基因“CST1”与“cst1E81K”的功能，科研人员将表达CST1和cst1E81K的质粒分别导入无法吸收葡萄糖的酵母菌（以麦芽糖为碳源），经处理后再将其接种在含不同碳源的培养基上，结果如下图所示，下列说法正确的是（）

A.上述酵母菌在接种前的处理是对其进行等浓度梯度的稀释B.在含葡萄糖类似物的培养基上，导入CST1的酵母菌存活率最高C.据图推测，CST1的功能可能是转运葡萄糖进入细胞D.导入cst1E81K的酵母菌葡萄糖吸收速率大于导入CST1的酵母菌11、甲品种青花菜具有由核基因控制的多种优良性状；但属于胞质雄性不育品种。通过体细胞杂交，成功地将乙品种细胞质中的可育基因引入甲中，下图为该操作示意图。下列相关叙述正确的是（）

A.人工诱导原生质体融合可使用离心法B.融合的原生质体再生出细胞壁后再进行组织培养C.杂种细胞经过一定激素和营养的诱导，发育成为杂种植株D.筛选出的杂种植株含有控制甲青花菜优良性状的基因，但只能通过母本进行传递12、下图是将人的生长激素基因导入细菌B细胞内制造“工程菌”的示意图。已知细菌B细胞内不含质粒A，也不含质粒A上的基因。下列说法正确的是（）

A.若能在细菌B中检测到人的生长激素基因，则说明该基因工程项目获得成功B.将完成导入过程后的细菌涂布在含有氨苄青霉素的培养基上，能生长的就是导入了重组质粒的细菌C.将人的生长激素基因与质粒A结合的过程共形成了4个磷酸二酯键D.将重组质粒导入细菌B之前，可以用Ca2+处理细菌B13、2019年12月以来，新型冠状病毒导致的肺炎在世界范围爆发，造成多人死亡。科学工作者经研究，发现了数种快速检验新冠肺炎病原体的方法，以正确诊断。下列与新型冠状病毒研究、诊断有关的说法中正确的是（）A.镜检法：在光学显微镜下直接观察病人的痰液或血液，以发现病原体B.PCR技术：体外基因复制技术，可把病原体的基因逆转录后在几十分钟内扩增到数百万倍C.抗原—抗体法：用特殊制备的病原体蛋白质与病人血清中的相关抗体特异性结合，发现病原体D.DNA探针技术：用放射性同位素、荧光因子等标记的DNA分子做探针，利用DNA分子杂交原理来检测病原体14、某对美国夫妇将用他们精子、卵子形成的胚胎冷藏在澳大利亚墨尔本一家不孕症治疗中心。在一次外出时，他们因飞机失事而去世。于是有亲人提出，可以将该夫妇冷藏的胚胎植入某个受体母亲子宫，生下一个孩子来继承遗产。下列相关叙述正确的是（）A.用精子、卵子形成胚胎需要借助人工授精技术B.若实施胚胎移植，需要受体母亲处于合适的生理状态C.受体母亲与胚胎的主要HLA的相似程度要大于50%D.该件事反映了“胚胎冷藏”技术可能带来伦理问题评卷人得分三、填空题(共6题，共12分)15、一般包括______、______等技术16、回答下列问题。

（1）目前人类对基因________及基因间的________________尚缺乏足够的认识，要想通过基因检测达到预防疾病的目的是困难的；况且人类的____________病，既与基因有关，又与环境和________________有关。

（2）生物武器种类包括__________、________、__________，以及经过___________的致病菌等。

（3）1998年6月27日，中美两国元首在关于《禁止生物武器公约》议定书的联合声明中，重申了在任何情况下_____________、_____________、______________生物武器，并反对生物武器及其技术和设备的扩散。17、重组DNA或重组质粒导入受体细胞后，筛选______的依据是______。18、利用DNA和蛋白质等其它成分在___________中的溶解度不同，选择适当的盐浓度就能使_______充分溶解，而使___________沉淀，或相反。19、在我国市场上究竟有多少种转基因产品呢？一位同学带着这样的问题，进行了调查并将结果归纳成下图｡

对该同学的调查和归纳结果，有人表示认同，有人提出质疑｡质疑者认为：目前我国市场上根本没有大豆､玉米或甜菜的转基因产品｡我们的观点是什么_____？20、科学家采用定点诱变的方法构建T4溶菌酶的新蛋白质，发现其中一种新蛋白质的第9和第164位氨基酸残基被转换为半胱氨酸残基，并形成一个二硫键。这种新蛋白质的热稳定性会有什么变化？这项技术的要点是什么？_________评卷人得分四、实验题(共4题，共32分)21、如图为果酒与果醋发酵装置示意图；请据图回答：

（1）酿造葡萄酒时；在葡萄榨汁前，葡萄要先进行________再除去枝梗，可以避免除去枝梗时引起葡萄破损，增加被杂菌污染的机会。

（2）将发酵装置放在18～25℃环境中，每天拧开气阀b多次；排出发酵过程产生的大量________。装置中d处设计成弯曲形状的目的是____________________________________________。

（3）10天之后；利用酸性条件下的________对从出料口c取样的物质进行检验，若样液变为________色，说明产生了酒精。

（4）产生酒精后，若在发酵液中加入醋酸菌，然后将装置放在________环境中，适时打开______向发酵液中充气，原因是______________________________________________。22、《本草纲目》记载；“蝉花可治疗惊痫，夜啼心悸，功同蝉蜕”。蝉花是蝉拟青霉寄生于蝉若虫后形成的虫菌复合体，内含虫草多糖；甘露醇和必需氨基酸等活性成分。研究人员从天然蝉花中分离纯化蝉拟青霉菌株进行人工培养。

(1)制备培养基：

①该实验选择马铃薯葡萄糖琼脂（PDA）培养基，配方如下：马铃薯200g，葡萄糖20g，KH2PO42g，MgSO40.5g，琼脂20g，用蒸馏水定容至1000mL，自然pH，培养基中的马铃薯可为蝉拟青霉生长提供_____等营养成分（至少写出2种），该培养基的自然pH为______性范围。

②为了便于筛选蝉拟青霉菌株，培养基中还应加入氯霉素等抗生素以抑制_____的生长。该培养基从功能上分类属于______培养基。

③配制的培养基必须进行灭菌处理，目的是_______。检测固体培养基灭菌效果的常用方法是_____。

(2)蝉拟青霉的分离纯化：取新鲜蝉花，挑取虫体胸腔中的少量菌丝采用_______法接种至PDA培养基上进行培养。

(3)发酵生产：发酵生产中常用液体培养基扩大培养。下表为发酵菌丝体和天然蝉花的主要成分及含量的测定结果，据表判断_______（填“能”或“不能”）用发酵菌丝体替代天然蝉花，判断的理由是_______。粗蛋白（%）粗纤维（%）灰份（%）水分（%）虫草多糖（mg/g）甘露醇（mg/g）发酵菌丝体25．388．327．878．9233．278．9天然蝉花19．653．127．849．8128．553．623、科学家的发现给人类的生活带来了无限的想象；他们采集了某深海海域的沉积物样品，分离；鉴定得到其中的深海放线菌，以期获得具有前景的抗生素替代品。据此回答下列问题：

(1)研究人员欲筛选出深海放线菌进行研究，取1g沉积物样品接种在液体培养基中摇瓶培养，稀释后取菌液通过_______________法接种到高氏一号（加数滴质量分数为10%的酚）培养基表面以获得单菌落。

(2)通过PCR技术扩增分离得到的放线菌的16SrRNA基因可进行菌株的种属鉴定。PCR技术中起关键作用的酶是_____________。该技术能在放线菌总的DNA中专一性扩增出16SrRNA基因的原因是______________。PCR产物一般可通过_________________鉴定。

(3)科学家还将Oct3/4、Sox2、c-Mc和KIf4基因通过逆转录病毒转入小鼠成纤维细胞中。2~3周后，这些细胞显示出ES细胞的形态、具有活跃的分裂能力，它们就是iPS细胞。在这个实验过程中，逆转录病毒的作用是_______________如何证明iPS细胞的产生不是由于培养基的作用？请写出实验设计思路______________24、番茄果实在成熟的过程中；多聚半乳糖醛酸酶（PG）合成显著增加，以降解果胶使细胞壁破损，从而使果实变红变软，但不利于保鲜。科学家利用基因工程得到转基因番茄，大大延长果实保质期。操作流程如下，回答下列问题：

（1）利用RT—PCR技术即逆转录—多聚酶链式反应制备PG基因，最好从番茄的_____细胞中提取mRNA，此技术所需要的酶主要有_____。

（2）据图可知，转基因番茄主要通过抑制PG基因的_____过程；使PG合成量减少，从而延长果实保质期。

（3）图中的农杆菌。能够在含_____的培养基中生存，而在含_____的培养基中不能生存的即为已转化的所需农杆菌。

（4）图中将反向连接PC基因导入番茄细胞的方法称为_____。要检测感染农杆菌后的番茄细胞染色体DNA上是否插入了反向连接PC基因，_____（填“能”或“不能”）用标记的PG基因的单链作为探针进行检测，理由是_____。

（5）在将转化的番茄细胞通过植物组织培养技术形成番茄幼苗过程中，培养基_____（填“要”或“不要”）添加有机营养物质，原因是_____。评卷人得分五、综合题(共4题，共32分)25、生物技术已经渗入到了我们生活的方方面面；比如：

（1）目前临床用的胰岛素生效较慢，科学家将胰岛素B链的第28和29个氨基酸调换顺序，成功获得了速效胰岛素。生产速效胰岛素，需要对_______（胰岛素/胰岛素mRNA/胰岛素基因/胰岛）进行定向改造。

（2）许多不孕不育的夫妇受益于试管婴儿技术，在体外受精前，要对采集到的精子进行_____处理，才能与卵子受精。受精后形成的受精卵要移入发育培养液中继续培养一段时间再移植到母亲体内，早期胚胎发育到________阶段的某一时刻，会冲破透明带，称之为“_______”。

（3）生态工程是实现________经济最重要的手段之一。在进行林业工程建设时，一方面要号召农民种树，保护环境。另一方面要考虑贫困地区农民的生活问题，如粮食、烧柴以及收入等问题，其主要体现的生态工程的基本原理是_________________（只填一个）。连年种植单一品种造成病虫害增加主要违反了原理________________。

（4）一般来说，生态工程的主要任务是对已破坏的生态系统进行修复，对造成环境污染和破坏的生产方式进行改善，并提高生态系统的生产力。与传统的工程相比，生态工程具有少消耗、多效益、_________等特点。26、新型冠状病毒的检测方法很多；实时荧光RT-PCR（逆转录聚合酶链式反应）法是目前核酸检测的主要方法，操作流程：采集样本→提取RNA→逆转录成cDNA→PCR扩增→结果分析。下图是RT-PCR两步法的过程图，在PCR扩增时加入能与目的基因（新冠病毒的核壳蛋白N基因）结合的荧光探针。目的基因合成越多，荧光信号越强，回答下列问题。

(1)构建cDNA文库时，会利用_____酶，将cDNA断开并与载体结合，然后把各个片段_____到一个受体菌群中储存。cDNA文库构建的意义有_____（回答1点）。

(2)在配置PCR扩增液时，加入的荧光探针序列：5′-TTGCTAGATT-3′，如果模板中存在N基因序列，与探针结合的序列应该是5′_____3′。如果某人没有感染新冠病毒，则PCR时DNA实时荧光信号强度_____（增强/减弱/不变）。

(3)我国前不久推出新冠病毒抗原检测的方法，相较核酸检测，方便简单，出结果较快，其原理是_____，目前国家推广“抗原筛查，核酸诊断”的监测模式，如果取样中所含病原体数量较少时，核酸检测的优点是_____。27、许多大肠杆菌的质粒上含有lacZ基因；其编码的产物β—半乳糖苷酶在X-gal和IPTG存在下，可以产生蓝色沉淀，使菌落呈现蓝色，否则菌落呈现白色。基因工程中常利用该原理从受体细胞中筛选出导入重组质粒的细胞，过程如图所示。请据图回答：

(1)基因工程中，基因表达载体的组成包括复制原点、启动子、终止子、_________、_________。

(2)限制酶EcoRI的识别序列和切割位点是Sma_I的识别序列和切割位点是图中目的的基因被切割下来和质粒连接之前，需在目的基因的右侧连接相应的末端，连接的末端序列是_________，连接过程中需要的基本工具是_________。

(3)转化过程中，大肠杆菌应先用Ca2+处理，使其处于能吸收周围_________的状态。

(4)菌落颜色为白色的是_________，原因是_________。

(5)检测菌落③中的目的基因是否表达，可采用的方法是_________。28、烟青虫是一种对烟草危害极大的昆虫；现要将一段抗烟青虫基因通过农杆菌转入烟草细胞，再通过组织培养技术得到抗烟青虫的转基因烟草。

（1）在构建表达载体的过程中，要先用两种不同的______分别切割目的基因和质粒，原因是防止，质粒自身环化，并保证______之后用连接酶连接形成______

（2）在以上重组质粒中，目的基因和抗卡那霉素抗性基因，都应该位于质粒的______片段内，原因是______

（3）用______处理农杆菌，可使重组的质粒更容易转入农杆菌，然后将得到的农杆菌和烟草细胞愈伤组织共同培养一段时间后，将愈伤组织置于含有______（抗生素）的培养基上进行组织培养，通过调整______（植物激素）的比例使其脱分化、再分化形成转基因植株，再用烟青虫进行进一步选择。参考答案一、选择题(共7题，共14分)1、C【分析】【分析】

培养基按功能分：选择培养基（根据某种微生物的特殊营养要求或其对某化学；物理因素的抗性而设计的培养基使混合菌样中的劣势菌变成优势菌；从而提高该菌的筛选率）和鉴别培养基（依据微生物产生的某种代谢产物与培养基中特定试剂或化学药品反应，产生明显的特征变化而设计）。微生物常见的接种的方法：①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养．在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。

【详解】

A；高压蒸汽灭菌锅加盖时；将盖上的排气软管插入内层灭菌桶的排气槽内，再以两两对称的方式同时旋紧相对的两个螺栓，使螺栓松紧一致，勿使漏气，A错误；

B；鉴别培养基可以鉴定某种微生物的种类；B错误；

C；对培养皿进行编号或对菌种进行标注时；应使用记号笔在皿底标记，C正确；

D；统计样品中活菌数量时；接种方法可采用稀释涂布平板法，D错误。

故选C。2、C【分析】【分析】

植物组织培养技术：

1；过程：离体的植物组织；器官或细胞（外植体）→愈伤组织→胚状体→植株（新植体）。

2；原理：植物细胞的全能性。

3；条件：（1）细胞离体和适宜的外界条件（如适宜温度、适时的光照、pH和无菌环境等）；（2）一定的营养（无机、有机成分）和植物激素（生长素和细胞分裂素）。

4；植物细胞工程技术的应用：植物繁殖的新途径（包括微型繁殖；作物脱毒、人工种子等）、作物新品种的培育（单倍体育种、突变体的利用）、细胞产物的工厂化生产。

【详解】

A；工业化生产过程包括细胞的脱分化和再分化；脱分化和再分化的关键激素是生长素和细胞分裂素，A正确；

B；愈伤组织的细胞排列疏松而无规则；是一种高度液泡化的呈无定形状态的薄壁细胞，愈伤组织在形成培养基中发生了一定程度的分化，B正确；

C；根据题干中“将细胞破碎后提取出紫草素”可知；紫草素在细胞内合成后不能分泌到细胞外，C错误；

D；紫草的愈伤组织细胞有细胞壁；在低渗溶液中一般不会胀破，D正确。

故选C。3、A【分析】【分析】

将动物的一个细胞的细胞核移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中；使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育成动物个体。用核移植的方法得到的动物称为克隆动物。原理：动物细胞核的全能性。

【详解】

A；不同部位的体细胞提供的细胞核全能性不同；会导致重组细胞的发育出现差异，A错误；

B、核移植操作前需对供体细胞进行营养限制性培养，以利于细胞核的一系列变化和基因表达分子的开关的启动，B正确；

C；紫外线可以破坏细胞结构；包括破坏细胞核，可用紫外线破坏未受精卵细胞的细胞核，从而获得去核卵细胞，C正确；

D；核移植的重组细胞可以理解为是类似于受精卵的细胞；这样的细胞刚开始的三次有丝分裂被称为卵裂，这个过程中，细胞核基因并没有表达，D正确。

故选A。4、C【分析】植物组织培养过程是：离体的植物器官；组织或细胞脱分化形成愈伤组织；然后再分化生成根、芽，最终形成植物体。植物组织培养依据的原理是植物细胞的全能性。

【详解】

A；脱毒苗的培育采用了植物组织技术；而该技术的原理是植物细胞具有全能性，A正确；

B；脱毒苗培育经过脱分化和再分化两个阶段；且需要添加植物生长素、细胞分裂素等植物生长调节物质，B正确；

C；植物组织培养中脱分化和再分化的培养基中激素的成分和含量不同；C错误；

D；培育脱毒苗应将茎尖进行消毒处理；接种过程应进行无菌操作，避免微生物污染，D正确。

故选C。5、D【分析】【分析】

基因工程技术的基本步骤:

(1)目的基因的获取:方法有从基因文库中获取；利用PCR技术扩增和人工合成。

(2)基因表达载体的构建:是基因工程的核心步骤；基因表达载体包括目的基因；启动子、终止子和标记基因等。

(3)将目的基因导入受体细胞:根据受体细胞不同；导入的方法也不一样。

(4)目的基因的检测与鉴定。

【详解】

A；利用PCR技术扩增目的基因时；使反应体系中的模板DNA解旋为单链的条件是加热至90℃以上，目的是破坏DNA分子中的氢键，A正确；

B；构建重组Ti质粒的过程中；需将目的基因插入Ti质粒的T-DNA上，B正确；

C；将目的基因导入植物细胞常用的方法是农杆菌转化法；由图可知，农杆菌的作用是感染植物，将目的基因转移到受体细胞中，C正确；

D；检验目的基因是否格合到青蒿基因组中；可用DNA分子杂交法，即将fps基因制成基因探针，与青萵基因组DNA杂交，而检测目的基因是否表达，常用抗原-抗体杂交法，D错误。

故选D。6、D【分析】【分析】

参与果酒制作的微生物是酵母菌，其新陈代谢类型为异养兼性厌氧型；果酒制作的原理：（1）在有氧条件下，反应式如下：C6H12O6+6H2O+6O26CO2+12H2O+能量；（2）在无氧条件下，反应式如下：C6H12O62CO2+2C2H5OH+能量。参与果醋制作的微生物是醋酸菌；其新陈代谢类型是异养需氧型；果醋制作的原理：当氧气；糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的果糖分解成醋酸；当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。参与腐乳制作的微生物主要是毛霉，其新陈代谢类型是异养需氧型。

【详解】

参与果酒、果醋和腐乳制作的菌种分别是酵母菌、醋酸菌、毛霉，A错误；醋酸菌是嗜氧菌，只能进行有氧发酵，B错误；不同微生物适宜生存的温度不同，果酒、果醋和腐乳在发酵过程中的温度分别为18～25℃、30～35℃、15-18℃，所以果醋制作所需的适宜温度最高，C错误；酵母菌、醋酸菌、毛霉都是有细胞结构的生物，它们的细胞都具有细胞壁、核糖体、DNA和RNA等，D正确。7、B【分析】【分析】

基因工程技术的基本步骤：（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取；利用PCR技术扩增和人工合成。（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤；基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子、复制原点和标记基因等。载体具备的条件：①能在受体细胞中复制并稳定保存，②具有一至多个限制酶切点，供外源DNA片段插入，③具有标记基因，供重组DNA的鉴定和选择。（3）将目的基因导入受体细胞：将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术；个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。

【详解】

A；根据图中目的基因两端的黏性未端以及各种限制酶的的切制位点可知；在构建重组质粒时，选用限制酶Xmal和BglⅡ切割质粒，才能与目的基因t-PA改良基因高效连接，A正确；

B；将t-PA改良基因与质粒连接的酶是DNA连接酶；不是DNA聚合酶，B错误；

C；在构建重组质粒时；其中的新霉素抗性基因没有被破坏，因此可以根据对新霉素的抗性将成功导入质粒的大肠杆菌筛选出来，即该基因的作用是便于将成功导入质粒的大肠杆菌筛选出来，C正确；

D；重组质粒已经破坏了mlacZ基因；其不会表达产物，即细胞呈白色。所以，在加入新霉素的培养基中选择呈白色的菌落选育工程菌株，D正确。

故选B。二、多选题(共7题，共14分)8、B:C【分析】【分析】

PCR技术的基本原理类似于DNA的天然复制过程；其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物。

PCR由变性--退火--延伸三个基本反应步骤构成：

①模板DNA的变性：模板DNA经加热至93℃左右一定时间后；使模板DNA双链或经PCR扩增形成的双链DNA解离，使之成为单链，以便它与引物结合，为下轮反应作准备；

②模板DNA与引物的退火（复性）：模板DNA经加热变性成单链后；温度降至55℃左右，引物与模板DNA单链的互补序列配对结合；

③引物的延伸：DNA模板--引物结合物在72℃；DNA聚合酶（如TaqDNA聚合酶）的作用下；以dNTP为反应原料，靶序列为模板，按碱基互补配对与半保留复制原理，合成一条新的与模板DNA链互补的半保留复制链，重复循环变性--退火--延伸三过程就可获得更多的“半保留复制链”，而且这种新链又可成为下次循环的模板。每完成一个循环需2～4分钟，2～3小时就能将待扩目的基因扩增放大几百万倍。

【详解】

A；①过程为逆转录；所需的原料是脱氧核苷酸，A正确；

B；②过程由DNA单链合成DNA双链过程所需要的DNA聚合酶不需要耐高温；B错误；

C；③过程为变性；温度上升到90℃以上时，双链DNA解聚为单链，不需要DNA解旋酶破坏氢键，C错误；

D；④过程为复性；温度降到50℃左右时，两种引物通过碱基互补配对与两条DNA单链结合，但引物对之间不能互补配对，D正确。

故选BC。9、A:B:D【分析】【分析】

1；DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同（0.14mol/L溶解度最低）；

2；DNA不溶于酒精溶液；但是细胞中的某些蛋白质则溶于酒精；

3；DNA的鉴定：在沸水浴条件下；DNA遇二苯胺会被染成蓝色，因此二苯胺可以作为鉴定DNA的试剂。

【详解】

A；兔属于哺乳动物；哺乳动物成熟的红细胞中没有细胞核，吸水涨破，得不到含DNA的滤液，A错误；

B；植物材料需先用洗涤剂溶解细胞膜；B错误；

C；DNA不溶于95%的冷酒精和0.14mol/L的NaCl溶液；而溶于2mol/L的NaCl溶液，C正确；

D；将丝状物溶于2mol/L的NaCL溶液后加入二苯胺试剂；沸水浴冷却后呈蓝色，D错误。

故选ABD。

【点睛】10、A:C【分析】【分析】

从左图看出；在添加麦芽糖的培养基中空质粒组；导入CST1和导入cst1E81K的酵母菌的酵母菌菌落数目相差不大，但在麦芽糖+葡萄糖类似物组中，导入CST1的酵母菌菌落数目最少，说明吸收葡萄糖类似物最多。

【详解】

A；从图中可以看出；后一稀释浓度是前一稀释浓度的5倍，所以是进行等浓度梯度的稀释，A错误；

B；在含葡萄糖类似物的培养基上；导入CST1的酵母菌菌落颜色最浅，说明存活率最低，B错误；

C；导入CST1的酵母菌在葡萄糖类似物的培养基上菌落数目降低；由于葡萄糖类似物被吸收后可以杀死酵母菌，因此可以推测CST1能转运葡萄糖类似物进入酵母菌，所以其功能可能是转运葡萄糖进入细胞，C正确；

D、在麦芽糖+葡萄糖类似物的培养基中，导入cst1E81K的酵母菌菌落数目多，说明其存活率更高，由于葡萄糖类似物被吸收后可以杀死酵母菌，因此可以推测导入cst1E81K的酵母菌葡萄糖吸收速率小于导入CST1的酵母菌；D错误。

故选C。11、A:B:C【分析】【分析】

题图分析：该图为体细胞杂交过程；其中A为去除细胞壁，制备原生质体，可以用酶解法，B为诱导原生质体融合，可以用聚乙二醇处理，融合的杂种细胞应该具备乙品种细胞质中的可育基因，甲品种的控制多种优良性状的核基因，该过程的原理是细胞膜的流动性和植物细胞的全能性。

【详解】

A；人工诱导原生质体融合的方法有化学法（聚乙二醇）和物理法（离心、振动、电刺激等）两大类；A正确；

B；杂种细胞再生出细胞壁是细胞融合成功的标志；融合成功之后再进行组织培养，B正确；

C；杂种细胞经过外源生长素和细胞分裂素的诱导；脱分化形成愈伤组织，再分化形成胚状体，进一步成为杂种植株，C正确；

D；甲品种青花菜具有由核基因控制的多种优良性状；杂种植株细胞核内含有控制甲青花菜优良性状的基因，具备乙品种细胞质中的可育基因，因此精子中具备一半核基因，并可通过父本（精子）进行传递，D错误。

故选ABC。12、C:D【分析】【分析】

基因工程技术的基本步骤：

（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取；利用PCR技术扩增和人工合成；

（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤；基因表达载体包括目的基因；启动子、终止子和标记基因等；

（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同；导入的方法也不一样．将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法；基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法；

（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术．个体水平上的鉴定：抗虫鉴定；抗病鉴定、活性鉴定等。

【详解】

A；检测到细菌B合成人的生长激素才能说明获得成功；A错误；

B；根据题意；细菌B不含有质粒A及其上的基因，即没有抗氨苄青霉素基因；质粒含抗四环素基因和抗氨苄青霉素基因，基因发生重组时抗四环素基因被破坏，抗氨苄青霉素基因被保留，故在含氨苄青霉素的培养基上能生长的是导入了普通质粒或者重组质粒的细菌，B错误；

C；将人的生长激素基因与质粒A结合的过程连接两个切口；该过程共形成4个磷酸二酯键，C正确；

D、将目的基因导入细菌时，需要用Ca2+处理细菌；使其处于易于吸收周围环境中DNA分子的生理状态，D正确。

故选CD。

【点睛】13、B:C:D【分析】【分析】

1；PCR全称为聚合酶链式反应；是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术；原理：DNA复制。前提条件：要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一对引物；条件：模板DNA、四种脱氧核苷酸、一对引物、热稳定DNA聚合酶（Taq酶）；过程：①高温变性：DNA解旋过程；②低温复性：引物结合到互补链DNA上；③中温延伸：合成子链；

2；基因工程的基本操作步骤主要包括四步：①目的基因的获取；②基因表达载体的构建；③将目的基因导入受体细胞；④目的基因的检测与鉴定。

【详解】

A；镜检法：在电子显微镜下直接观察病人的痰液或血液；以发现病原体，但光学显微镜不能观察到新冠病毒，A错误；

B；PCR技术：体外基因复制技术；可在几十分钟内把病原体的基因扩增到数百万倍，再经过电泳与病毒样本进行对比，便能知道是否感染病毒，B正确；

C；病毒进入人体后会刺激机体产生特异性免疫反应；产生相应抗体，由于抗体与抗原结合具有特异性，因此抗原通过用特殊制备的病原体蛋白质与病人血清中的相关抗体特异性结合以发现病原体，C正确；

D；DNA探针技术：用放射性同位素、荧光因子等标记的DNA分子做探针；利用核酸分子杂交原理来检测病原体，鉴定被检测标本上的遗传信息，达到检测是否感染病毒的目的，D正确。

故选BCD。14、B:D【分析】【分析】

胚胎移植的生理学基础：①动物发情排卵后；同种动物的供；受体生殖器官的生理变化是相同的，这就为供体的胚胎移入受体提供了相同的生理环境。②早期胚胎在一定时间内处于游离状态，这就为胚胎的收集提供了可能。③受体对移入子宫的外来胚胎不发生免疫排斥反应，这为胚胎在受体的存活提供了可能。④供体胚胎可与受体子宫建立正常的生理和组织联系，但供体胚胎的遗传特性在孕育过程中不受影响。

【详解】

A；人工授精技术是辅助生殖技术；在临床上利用工具把精液放置进入子宫内，合成受精卵，用精子、卵子形成胚胎需要借助的是体外受精技术，不是人工授精技术，A错误；

B；若实施胚胎移植；需要受体母亲处于受孕状态，即处于合适的生理状态，B正确；

C；子宫对外来胚胎一般不发生免疫排斥反应；因此不需要受体母亲与胚胎的主要HLA相似，C错误；

D；“胚胎冷藏”技术所引起的这些争论；实质是冷冻胚胎的道德与法律地位的争论，即带来的伦理问题，D正确。

故选BD。三、填空题(共6题，共12分)15、略

【解析】①.动物细胞培养和核移植技术、②.动物细胞融合与单克隆抗体16、略

【分析】【分析】

【详解】

（1）人类对基因的结构；基因间的相互作用尚缺乏足够的认识；人类的多基因病，既与基因有关，又与环境和生活习惯有关。

（2）生物武器种类包括致病菌；病毒、生化毒剂、以及经过基因重组的致病菌。

（3）1998年6月27日，中美两国元首在关于《禁止生物武器公约》议定书的联合声明中，重申了在任何情况下不发展、不生产、不储存生物武器。【解析】①.结构②.相互作用③.多基因④.生活习惯⑤.致病菌⑥.病毒⑦.生化毒剂⑧.基因重组⑨.不发展⑩.不生产⑪.不储存17、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】含有基因表达载体受体细胞标记基因是否表达。18、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】不同浓度的NaCL溶液DNA杂质19、略

【分析】【详解】

目前我国市场上的转基因食品，从原料来源看，进口的主要有大豆、油菜籽和玉米及相关产品，国内生产的有棉籽油和番木瓜，故我国市场上有大豆等的转基因产品。【解析】目前我国市场上的转基因食品，从原料来源看，进口的主要有大豆、油菜籽和玉米及相关产品，国内生产的有棉籽油和番木瓜。20、略

【分析】【详解】

蛋白质形成二硫键，使蛋白质的结构更加稳定，因此T4溶菌酶的热稳定性会提高。这项技术属于蛋白质工程技术，其步骤为从预期的蛋白质功能出发→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到并改变相对应的脱氧核苷酸序列（基因）或合成新的基因→获得所需的蛋白质。【解析】会提高T4溶菌酶的耐热性。这项技术属于蛋白质工程技术，该技术的要点是从预期的蛋白质功能出发→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到并改变相对应的脱氧核苷酸序列（基因）或合成新的基因→获得所需的蛋白质。四、实验题(共4题，共32分)21、略

【分析】【分析】

1；果酒制作过程中的相关实验操作：

（1）材料的选择与处理：选择新鲜的葡萄；榨汁前先将葡萄进行冲洗，除去枝梗。

（2）灭菌：①榨汁机要清洗干净；并晾干；②发酵装置要清洗干净，并用70%的酒精消毒。

（3）榨汁：将冲洗除枝梗的葡萄放入榨汁机榨取葡萄汁。

（4）发酵：①将葡萄汁装人发酵瓶；要留要大约1/3的空间，并封闭充气口；②制葡萄酒的过程中，将温度严格控制在18℃～25℃，时间控制在10～12d左右，可通过出料口对发酵的情况进行，及时的监测。③制葡萄醋的过程中，将温度严格控制在30℃～35℃，时间控制在前7～8d左右，并注意适时通过充气口充气。

2；参与果醋制作的微生物是醋酸菌；其新陈代谢类型是异养需氧型，果醋制作的原理：当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的果糖分解成醋酸；当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。

【详解】

（1）酿造葡萄酒时；在葡萄榨汁前，葡萄要先进行进行冲洗，然后再除去枝梗，可以避免除去枝梗时引起葡萄破损，增加被杂菌污染的机会。

（2）榨汁机要清洗干净，并晾干，发酵装置要清洗干净，并用70%的酒精消毒，再装入葡萄汁，将发酵装置放在18～23℃环境中，发酵过程中由于酵母菌呼吸作用会产生二氧化碳，因此每天拧开气阀b多次；排出发酵过程产生的大量二氧化碳。装置中d处设计成弯曲形状利用了巴斯德的鹅颈瓶的原理，即为了防止排气时空气中微生物的污染。

（3）酵母菌发酵的产物中会产生酒精；利用橙色的重铬酸钾可以检测酒精的存在，酒精遇到橙色的重铬酸钾会变为灰绿色，从而鉴定酒精的存在。

（4）温度是酵母菌生长和发酵的重要条件；20℃左右最适合酵母菌繁殖，因此需要将温度控制在其最适温度范围内。而醋酸菌是嗜温菌，最适生长温度为30℃～35℃，因此要将温度控制在30℃～35℃。醋酸菌是好氧菌，在将酒精变为醋酸时需要氧的参与，因此要适时向发酵装置中充气，需要打开a阀通入空气。

【点睛】

本题考查果酒和果醋的制作过程的知识点，要求学生掌握果酒的制作的原理、过程以及发酵过程中的注意事项是该题的重点，识记果酒的制作过程是解决重点的关键。理解并识记果醋的发酵过程和原理是解决第（4）问的关键。【解析】冲洗CO2防止排气时空气中微生物的污染重铬酸钾灰绿30～35℃气阀a醋酸菌是好氧细菌，酒精转变为醋酸需要氧气才能进行22、略

【分析】【分析】

为了杀灭培养基中的微生物；实验所配制的培养基必须进行灭菌处理；可将灭菌后的固体培养基放置在适宜的温度下培养一段时间，以检测培养基的灭菌效果，若培养基中无菌落长出，说明培养基的灭菌是合格的；在固体培养基上接种微生物的方法有平板划线法或稀释涂布平板法。

【详解】

（1）①马铃薯中含有淀粉；蛋白质和无机盐等物质；故培养基中的马铃薯可为蝉拟青霉生长提供碳源、氮源、无机盐等营养成分；

培养霉菌时需将培养基的pH调至酸性；培养细菌时需将pH调至中性或微碱性，即培养蝉拟青霉的培养基的自然pH为酸性范围。

②氯霉素等抗生素可以通过抑制肽聚糖（细菌细胞壁的主要成分）的合成来抑制细菌的生长；而对真菌的生长无影响。为了便于筛选蝉拟青霉（真菌）菌株，培养基中还应加入氯霉素等抗生素以抑制细菌的生长，该培养基从功能上分类属于选择培养基。

③为了杀灭培养基中的微生物；配制的培养基必须进行灭菌处理；将灭菌后的固体培养基放置在适宜的温度下培养一段时间，若培养基中无菌落长出，说明固体培养基的灭菌是合格的。

（2）蝉拟青霉的分离纯化：由（1）的题干信息可知；PDA为固体培养基，在固体培养基上接种微生物的方法有平板划线法或稀释涂布平板法。

（3）根据题意“蝉花是蝉拟青霉寄生于蝉若虫后形成的虫菌复合体，内含虫草多糖、甘露醇和必需氨基酸等活性成分”，并结合表格信息可知，发酵菌丝体中各种活性成分的含量明显高于天然蝉花，故能用发酵菌丝体来替代天然蝉花。【解析】(1)碳源；氮源、无机盐酸细菌选择杀灭培养基中的微生物将灭菌的固体培养基放置在适宜的温度下培养一段时间；观察是否长出菌落。

(2)平板划线（稀释涂布平板）

(3)能发酵菌丝体活性成分的含量明显高于天然蝉花23、略

【分析】【分析】

PCR原理：在解旋酶作用下；打开DNA双链，每条DNA单链作为母链，以4种游离脱氧核苷酸为原料，合成子链，在引物作用下，DNA聚合酶从引物3'端开始延伸DNA链，即DNA的合成方向是从子链的5'端自3'端延伸的。实际上就是在体外模拟细胞内DNA的复制过程。DNA的复制需要引物，其主要原因是DNA聚合酶只能从3′端延伸DNA链。

【详解】

（1）分析题意可知；研究人员取1g沉积物样品接种在液体培养基中摇瓶培养，稀释后可通过稀释涂布平板法接种到培养基表面以获得单菌落。

（2）PCR技术是一项通过体外控制温度扩增DNA的技术，该技术中由于温度较高，起关键作用的酶是耐高温DNA聚合酶；PCR扩增的前提是要有一段目的基因的核苷酸片段，分析题意，该技术能在放线菌总的DNA中专一性扩增出16SrRNA基因的原因是：引物是根据16SrRNA基因的一段已知核苷酸序列设计合成的；PCR产物一般可通过琼脂糖凝胶电泳来鉴定：凝胶中的DNA分子通过染色；可以在波长为300nm的紫外灯下被检测出来。

（3）分析题意，科学家将Oct3/4、Sox2、c-Mc和KIf4基因通过逆转录病毒转入小鼠成纤维细胞中，该过程中逆转录病毒是载体，能将外源基因ct3/4、Sox2、c-Mc和KIf4送入小鼠成纤维细胞；分析题意，实验目的是iPS细胞的产生不是由于培养基的作用，故实验的自变量是外源基因的有无，因变量是IPS细胞的产生情况，实验设计应遵循对照与单一变量原则，故可设计实验如下：将转入外源基因的细胞和没有转入外源基因的细胞分别培养在相同的培养基中，在相同且适宜的条件下，如果只有转入外源基因的细胞转化成了iPS细胞，则可以证明iPS细胞的产生不是由于培养基的作用。【解析】(1)稀释涂布平板法##涂布平板法

(2)耐高温DNA聚合酶引物能与16SrRNA基因特异性结合（引物是根据16SrRNA基因的一段已知核苷酸序列设计合成的）琼脂糖凝胶电泳。

(3)逆转录病毒是载体，能将外源基因ct3/4、Sox2、c-Mc和KIf4送入小鼠成纤维细胞。将转入外源基因的细胞和没有转入外源基因的细胞分别培养在相同的培养基中，在相同且适宜的条件下，如果只有转入外源基因的细胞转化成了iPS细胞，则可以证明iPS细胞的产生不是由于培养基的作用24、略

【分析】【分析】

基因工程技术的基本步骤：

（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取；利用PCR技术扩增和人工合成。

（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤；基因表达载体包括目的基因；启动子、终止子和标记基因等。

（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同；导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法；基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。

（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因−−DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA−−分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术。个体水平上的鉴定：抗虫鉴定；抗病鉴定、活性鉴定等。

【详解】

（1）利用RT—PCR技术即逆转录—多聚酶链式反应制备PG基因；由于多聚半乳糖醛酸酶（PG）可降解果胶使细胞壁破损，从而使果实变红变软，说明PG基因在果肉中表达量较高，所以最好从番茄的果肉细胞中提取mRNA，此技术所需要的酶主要有逆转录酶和Taq酶（或热稳定DNA聚合酶）；

（2）据图可知；转基因番茄PG基因与反向连接PG基因的转录产物mRNA1和mRNA2相结合形成双链，从而抑制PG基因的翻译过程，使PG合成量减少，从而延长果实保质期；

（3）分析表达载体的构建过程图可知；目的基因插入到图中农杆菌的四环素抗性基因上，导致农杆菌失去了四环素的抗性，所以图中农杆菌能够在含卡那霉素的培养基中生存，而在含四环素的培养基中不能生存的即为已转化的所需农杆菌；

（4）图中是利用农杆菌将反向连接PC基因导入番茄细胞的；此方法称为农杆菌转化法。不能用标记的PG基因的单链作为探针进行检测番茄细胞染色体DNA上是否插入了反向连接PC基因，理由是番茄细胞内原有的天然PG基因和插入的反向连接PG基因，均会与该探针形成杂交带；

（5）将转化的番茄细胞通过植物组织培养技术形成番茄幼苗过程中；需要在培养基中添加有机营养物质，原因是该培养过程中植物细胞不能进行光合作用（或光合作用很弱）。

【点睛】

本题结合图解，考查基因工程和植物组织培养的相关知识，要求考生识记基因工程的原理及操作步骤；识记植物组织培养的过程及应用，能结合图中信息准确答题。【解析】果肉逆转录酶和Taq酶（或热稳定DNA聚合酶）翻译卡那霉素四环素农杆菌转化法不能番茄细胞内原有的天然PG基因和插入的反向连接PG基因，均会与该探针形成杂交带要该培养过程中植物细胞不能进行光合作用（或光合作用很弱）五、综合题(共4题，共32分)25、略

【分析】【分析】

1；蛋白质工程--指以蛋白质的结构规律及其与生物功能的关系作为基础；通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行基因改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活的需要。蛋白质工程是在基因工程的基础上，延伸出来的第二代基因工程。

2；生态工程的基本原理：（1）物质循环再生原理：物质能在生态系统中循环往复；分层分级利用；（2）物种多样性原理：物种繁多复杂的生态系统具有较高的抵抗力稳定性；（3）协调与平衡原理：生态系统的生物数量不能超过环境承载力（环境容纳量）的限度；（4）整体性原理：生态系统建设要考虑自然、经济、社会的整体影响；（5）系统学和工程学原理：系统的结构决定功能原理：要通过改善和优化系统结构改善功能；系统整体性原理：系统各组分间要有适当的比例关系，使得能量、物质、信息等的转换和流通顺利完成，并实现总体功能大于各部分之和的效果，即“1+1＞2”。

【详解】

（1）将胰岛素B链的第28和29个氨基酸调换顺序后可获得速效胰岛素。因此；要生产速效胰岛素，可采用蛋白质工程技术，这就需要对胰岛素基因进行定向改造。

（2）体外受精前；要对采集到的精子进行获能处理，才能与卵子受精。受精后形成的受精卵要移入发育培养液中继续培养到4细胞阶段再移植到母亲体内。早期胚胎发育到囊胚阶段的某一时刻，会冲破透明带，称之为“孵化”。

（3）生态工程是实现循环经济最重要的手段之一。在进行林业工程建设时；一方面要号召农民种树，保护环境。另一方面要考虑贫困地区农民的生活问题，如粮食；烧柴以及收入等问题，即生态系统建设要考虑自然、经济、社会的整体影响，其主要体现的生态工程的基本原理是整体性原理。连年种植单一品种造成病虫害增加主要违反了物种多样性原理。

（4）与传统的工程相比；生态工程具有少消耗；多效益、可持续等特点，它是实现循环经济最重要的手段之一。

【点睛】

本题考查蛋白质工程、胚胎工程和生态工程等知识，要求考生识记相关知识点，形成知识网络并能结合所学的知识准确答题。【解析】胰岛素基因获能囊胚孵化循环整体性原理物种多样性可持续26、略

【分析】【分析】

cDNA文库与基因组DNA文库不同；它是由组织细胞提取分离的mRNA经逆转录酶作用获得的互补DNA（cDNA）构建的。某种意义上，cDNA文库可看是表达基因的文库，它所包含的cDNA片段代表了该特定组织细胞中正在表达甚因的外显子部分。因而由发育进程和组织细胞种类不同，基因组中表达功能的其因存在差异，所建的cDNA文库就不同。这就成为研究不同发育分化的正常细胞与肿瘤细胞等进行差异显示的理论基础。cDNA文库特异地反映某种组织或细胞中，在特定发育阶段表达的蛋白质的编码基因，因此cDNA文库具有组织或细胞特异性。

(1)

cDNA是RNA逆转录得到的DNA；用限制性核酸内切酶可以将cDNA切成不同的片段；再分别把各小段与载体结合，导入到一个受体菌群中，检测相应的菌落特征及菌株特性，建立cDNA文库；cDNA文库在研究具体某类特定细胞中基因组的表达状态及表达基因的功能鉴定方便具有特殊的优势，从而使它在个体发育；细胞分化、细胞周期调控、细胞衰老和死亡调控等生命现象的研究中具有更为广泛的应用价值，是研究工作中最常使用到的基因文库。

(2)

RT-PCR是先将新型冠状病毒的RNA逆转录成cDNA；然后再进行PCR（体外DNA复制），探针能与N基因序列特异性结合，由于D