2025年沪教新版选择性必修3生物下册阶段测试试卷含答案

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A.PCR产物的分子大小在250至500bp之间B.3号样品植株导入的目的基因一定能成功表达C.9号样品对应植株不是所需的转基因植株D.10号的电泳结果能确定反应体系等对实验结果没有干扰2、以下是制定并研究设计的“试管牛”工厂化生产技术流程；其中正确的顺序应是（）

①卵母细胞的采集和培养②精子的采集和获能③画出“试管牛”工厂化生产技术流程图④受精⑤胚胎的早期培养A.①②③④⑤B.①②④⑤③C.③①②④⑤D.①②⑤④③3、下图为人工种子的示意图；有关叙述不正确的是（）

A.与常规种子繁殖方法相比，人工种子具有繁殖速度快的优点B.人工种皮应具有透气性，保证胚状体呼吸作用的正常进行C.胚状体是经过脱分化形成的，此时细胞处于未分化状态D.人工胚乳中应含有植物激素、糖类、水和无机盐等营养物质4、某实验室做了如图所示的实验研究；下列与实验相关的叙述正确的是（）

A.过程①导入的诱导基因使成纤维母细胞发生基因突变B.丙细胞既能持续分裂，又能分泌单一的抗体C.过程②的培养过程中实现了动物细胞的全能性D.过程③④所用的培养基中都含有聚乙二醇5、玉米是一种重要的农作物；为了提高玉米的产量，科学家在玉米育种中和栽培中作了大量的研究。如下图是关于玉米培养的过程，据图判断下列说法中错误的是（）

A.从繁殖原理上分析，A→D属于无性生殖B.植株D和G中的染色体组数不同C.E→G不能体现细胞的全能性D.E→F过程中获得的植株一般没有直接的使用价值6、下列关于PCR技术的叙述，正确的是（）A.PCR反应体系中需要添加耐高温的解旋酶和DNA聚合酶B.PCR过程中在引物的3'端添加脱氧核苷酸实现子链延伸C.利用PCR对目的基因进行扩增时需要基因序列全部已知D.在设计两种引物时，需要让引物和引物之间的碱基序列互补7、下列有关基因工程和胚胎工程的叙述中，正确的是（）A.为了快速繁殖良种牛，可对受精卵进行分割移植B.进行胚胎移植时，选用的胚胎可以通过体内受精或体外受精得到C.体外受精过程中，需要给获得的精子提供ATP使其达到获能状态D.培育转基因水稻时，可通过大肠杆菌的侵染将目的基因导入水稻细胞中8、多发性骨髓瘤（MM）是一种恶性浆细胞型血液肿瘤；CD38是一种糖蛋白，在MM细胞中呈现过表达的状态。目前，抗CD38单克隆抗体免疫疗法已成为治疗MM的重要途径，NK细胞是该途径中的主要效应细胞，能释放穿孔素；颗粒酶等细胞毒性物质杀死MM细胞，作用机理如图所示。下列说法错误的是（）

A.MM细胞通过有丝分裂的方式进行增殖B.单克隆抗体、穿孔素和颗粒酶属于细胞因子C.由NK细胞介导的MM细胞死亡的过程属于细胞调亡D.抗CD38单克隆抗体可以与FcyR与CD38两种受体相结合评卷人得分二、多选题(共6题，共12分)9、如图为苹果酒的发酵装置示意图；下列叙述错误的是（）

A.发酵过程中酒精的产生速率越来越快B.集气管中的气体是酵母菌无氧呼吸产生的CO2C.发酵过程中酵母种群呈“J”型增长D.若发酵液表面出现菌膜，最可能原因是发酵瓶漏气10、利用基因工程技术生产羧酸酯酶（CarE）制剂的流程如图所示；下列叙述正确的是（）

A.过程①需使用逆转录酶B.过程②需使用解旋酶和PCR获取目的基因C.过程③使用的感受态细胞可用NaCl溶液制备D.过程④可利用DNA分子杂交鉴定目的基因是否已导入受体细胞11、利用PCR技术扩增目的基因的过程中两种引物分别为A和B，其原理与细胞内DNA复制类似。下列叙述正确的是（）A.从理论上推测，第二轮循环产物中含有引物A的DNA片段占3/4B.在第二轮循环产物中开始出现两条脱氧核苷酸链等长的DNA片段C.引物之间或引物自身发生碱基互补配对则不能扩增目的基因D.耐热的DNA聚合酶总将游离的脱氧核苷酸连接到3’端12、利用枯草芽孢杆菌的发酵可以生产亮氨酸脱氢酶。在启动子和亮氨酸脱氢酶基因之间插入信号肽（SPN）基因并将重组质粒导人枯草芽孢杆菌构建工程菌，可提高亮氨酸脱氢酶的生产水平。重组质粒的构建如图所示，KmR为卡那霉素抗性基因，ApR为氨苄青霉素抗性基因，图中各限制酶切割产生的黏性末端不同。下列叙述正确的是（）

A.重组质粒pMA5-SPN-leudh除图中标注外还应具有终止子、复制原点等结构B.构建重组质粒用NdeI和BamHI两种酶有助于正确插入目的基因C.图中KmR和ApR存在于质粒中的作用是便于重组DNA分子的筛选D.图中各限制酶切开的是氢键和磷酸二酯键，切下的DNA片段拼接需依靠DNA连接酶13、克隆动物常用的核移植方法主要有细胞质内注射法和透明带下注射法两种。前者是用微型注射针将供体细胞的细胞核吸出注入去核卵母细胞质内；后者是直接将供体细胞注入去核卵母细胞透明带内，然后促使两个细胞融合。世界首例体细胞克隆北极狼的供体细胞来自哈尔滨极地公园的一只野生北极狼的皮肤样本，卵母细胞来自一只处于发情期的母犬，代孕母体则是一只比格犬。下列叙述错误的是（）A.克隆北极狼的性状由野生北极狼、发情期的母犬和比格犬的基因共同决定B.相比之下，透明带下注射法对供体细胞核和卵母细胞的损伤更小C.供体细胞注入卵母细胞透明带内后，就可自行进入卵母细胞D.细胞分裂、分化形成克隆胚胎的过程中发生了基因重组14、DNA分子的糖-磷酸骨架中磷酸基团呈离子状态，不同相对分子质量DNA进行琼脂糖凝胶电泳时可分开成不同条带，相同分子量的为一条带。用某种限制性核酸内切酶完全酶切质粒后，电泳后出现3条带。下列叙述正确的是（）A.该质粒上只有3个酶切位点B.琼脂糖凝胶电泳可以用来分离DNAC.外加电场时，DNA向正极泳动D.琼脂糖带负电荷，有利于DNA的泳动评卷人得分三、填空题(共7题，共14分)15、平板划线法是通过____________在_______________培养基表面______________的操作，将__________的菌种______________分散到培养基的表面。在数次划线后培养，可以分离到由____________繁殖而来的肉眼可见的_______________，这就是_______________________。稀释涂布平板法则是将菌液进行一系列的______________，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到_____________培养基的表面，进行培养。在稀释度足够高的菌液里，聚集在一起的微生物将被分散成____________，从而能在培养基表面形成___________________。16、DNA连接酶与DNA聚合酶作用的异同:

DNA聚合酶只能将______加到已有的核苷酸片段的末端，形成磷酸二酯键。DNA连接酶是连接_____的末端，形成磷酸二酯键。17、两种DNA连接酶（E·coliDNA连接酶和T4DNA连接酶）的比较：

①相同点：都缝合______键。

②区别：E·coliDNA连接酶来源于T4噬菌体，只能将双链DNA片段互补的黏性末端之间的磷酸二酯键连接起来；而T4DNA连接酶能缝合两种末端，但连接平末端的之间的效率较低。18、DNA的粗提取实验中，如果实验材料是非哺乳动物如鸡血细胞，需要在鸡血细胞中加入一定量的____________，如果实验材料是植物细胞，需要先使用_______________溶解细胞膜。19、DNA粗提取与鉴定实验中，二苯胺要___________。20、在日常生活中，我们还遇到哪些有关生物技术安全与伦理问题？我们能基于所学生物学知识参与这些问题的讨论吗？尝试举一个实例加以说明______。21、有时还需进行______的鉴定。如转基因抗虫植物是否出现______。评卷人得分四、判断题(共3题，共27分)22、蛋白质工程是在基因工程的基础上，延伸出来的第二代基因工程。()A.正确B.错误23、要对蛋白质的结构进行设计改造，最终必须通过改造氨基酸序列来完成。()A.正确B.错误24、生物武器包括致病菌类、病毒类和生化毒剂类等。()A.正确B.错误评卷人得分五、实验题(共4题，共24分)25、多发性硬化症是一种由纤维蛋白渗入大脑引发的神经系统疾病。科研人员欲应用生物工程技术治疗该病。请回答下面有关问题。

（1）研究人员将纤维蛋白作为_________注射到小鼠体内，激活了小鼠的________免疫，进而制备出抗纤维蛋白的单克隆抗体（5B8）。该项技术属于_______范畴（填写下面正确选项）。

A．基因工程B．细胞工程C．胚胎工程D．蛋白质工程。

（2）制备5B8的基本流程如下：从注射了纤维蛋白的小鼠脾脏中获取________，与小鼠的骨髓瘤细胞进行融合。然后用特定的__________筛选符合要求的杂交瘤细胞后；再通过克隆；检测、筛选、培养等环节，最终从小鼠腹水中提取到5B8。

（3）活性氧（ROS）是氧分子正常代谢的副产物；当吞噬细胞中大量产生ROS并释放时，会毒害周围神经元。NADPH氧化酶是催化细胞内产生ROS的主要酶。为研究5B8的作用机制，研究者检测了经5B8处理后吞噬细胞中NADPH氧化酶和ROS的含量，结果如图一；图二。

①作为标准参照的GADPH蛋白表达量稳定且含量丰富，可排除_________对实验结果的影响。

②综合两幅图的检测结果，通过对比_______组可知，纤维蛋白可以______________，使其对神经元产生毒害；而通过对比______组结果发现:5B8能_________。

③经临床实验证实，单克隆抗体5B8确实对多发性硬化症有明显疗效。请根据上述结果分析其具有疗效的原因____________________。26、随着游泳运动的普及；游泳池水质安全问题越来越受到人们的重视。在游泳池池水净化中，常用的方法是用氯或含有效氯化合物进行氯化消毒。氯化消毒后池水中的游离性余氯可保证持续消毒效果，但游离性余氯含量过高会影响人体健康。国家标准规定的人工游泳池水质指标卫生标准包括游离性余氯0.3~1.0mg/L；菌落形成单位不得超过200个/mL等指标。研究人员对某地学校、酒店、健身会所、社区等场所游泳池水进行抽样监测，其中，对游泳池水活细菌总数进行检测的实验步骤如下：

①采样瓶的预处理：在采样瓶中加入适量的Na2S2O3溶液后对采样瓶进行灭菌处理。

②采样：在客流高峰时段进行采样。采集位置在水下30cm左右；取水500mL。

③接种：用灭菌吸管吸取水样1mL；注入灭菌培养皿中。将熔化并冷却至45℃的营养琼脂培养基倒入培养皿内，每皿15mL。立即旋摇培养皿，使水样和培养基充分混匀。平行重复若干实验组。

④计数：待琼脂凝固后翻转培养皿；置于37℃恒温箱中培养一段时间，统计各组平板上菌落数，并求平均值。

回答下列问题：

(1)检测游泳池活细菌总数时，不宜用细菌计数板在显微镜下直接计数，原因是_____________

(2)Na2S2O3具有还原性，可消除水样中的残余氯。据此分析步骤①中在采样瓶中添加Na2S2O3溶液，对检测的意义是_____________。

(3)步骤③中，将培养基倒入培养皿时，应在____________附近进行。为使实验数据更准确，应至少设置____________个实验组。步骤③中还应增加对照组，下列不宜作为对照组的是______________。

a．15mL营养琼脂培养基。

b．1m无菌水+15mL营养琼脂培养基。

c．1mL蒸馏水+15mL营养琼脂培养基。

(4)步骤④中，统计的菌落数往往比活菌的实际数目少，这是因为_____________。若观察到培养后的培养皿中的菌落连成一片，则该培养皿不宜计数。出现成片的菌落的原因可能步骤③中_____________操作不妥当造成的。

(5)不同季度微生物检测结果如下表所示，第三季度合格率下降的可能原因包括____________。

a．气温升高b．客流量增加。

c．检测的场馆数多d．泳池氯化时间过长。季度检测场馆数合格场馆数合格率（%）一3434100.0二403895.0三39932982.5四3636100.0

根据检测结果，要进一步加强第三季度的场馆管理。下列属于提升游泳池水质安全性的合理建议有____________。

a．强制要求个人淋浴后入池b．增加游泳池水质监测的频次。

c．游泳池装设水循环过滤装置d．每日在临近开馆前氯化消毒27、下图是某同学设计的传统发酵装置示意图。比较传统发酵技术与现代发酵工程；回答下列问题：

(1)传统发酵酿酒与现代工业发酵酿酒的原理是______。请设计简单的实验验证发酵过程中产生了酒精（不考虑发酵液中葡萄糖的影响），写出实验思路并预期实验结果与结论______。

(2)传统发酵技术一般以天然存在的______发酵，品质不一，现代工业发酵一般为单一菌种发酵，品质较高。自制的果酒并非商品意义上的产品，在实际生产中还需要经过______装瓶等过程才能获得成品酒。

(3)若要测定发酵罐中酵母菌的种群密度，取10mL发酵液稀释1000倍，利用25×16的血细胞计数板，观察并统计到中方格中的酵母菌平均数为9个，则每毫升发酵液中酵母菌数量约是______个。

(4)利用上图中装置酿酒与酿醋时，操作上的最主要的区别是______。28、面对新冠疫情；我国一直坚持严格防控措施，“零容忍”彰显人民立场制度优势。坚持中高风险地区的大面积核酸检测；适龄人群接种疫苗构建免疫屏障是严格防控的主要措施。新冠病毒核酸检测常采用RT﹣PCR检测法，技术流程如下图，①②③④⑤表示相关步骤。

回答下列问题：

(1)步骤①需要的酶是________，步骤④需要的酶是________，引物A和引物B是根据________序列合成的。

(2)步骤③的目的是________，如果该步骤出现失误，对检测结果的影响是________。

(3)新冠病毒抗体检测可作为核酸检测的补充，抗体检测的原理是________。对某人进行检测时发现，其核酸检测为阴性，抗体检测呈阳性，原因可能是________。参考答案一、选择题(共8题，共16分)1、B【分析】【分析】

PCR过程中，可以通过设计特定的引物来扩增特定的DNA片段。3～9号是转基因植株，理论上应包含目的基因。9号PCR结果不包含250～500bp片段；所以不是所需转基因植株。

【详解】

A、PCR过程中，可以通过设计特定的引物来扩增特定的DNA片段。3～9号是转基因植株，理论上应包含目的基因，结合2号野生型和10号蒸馏水组的结果，推测包含目的基因的片段大小应为250～500bp；A不符合题意；

B、3号PCR结果包含250～500bp片段；包含目的基因，但导入的目的基因不一定能成功表达，B符合题意；

C、9号PCR结果不包含250～500bp片段；所以不是所需转基因植株，C不符合题意；

D；10号放入蒸馏水；可排除反应体系等对结果的干扰，D不符合题意。

故选B。

【点睛】2、B【分析】【分析】

试管动物技术是指通过人工操作使卵子和精子在体外条件下成熟和受精并通过培养发育为早期胚胎后；再经移植后产生后代的技术，可见试管动物技术主要包括体外受精；早期胚胎培养和胚胎移植技术。

【详解】

“试管牛”培育的一般流程是卵母细胞的采集和培养；精子的采集和获能、受精、胚胎的早期培养和胚胎移植、画出“试管牛”工厂化生产的技术流程图；即B正确。

故选B。

【点睛】3、C【分析】【分析】

人工种子是以植物组织培养得到的胚状体；不定芽、顶芽和腋芽等为材料；经过人工薄膜包装得到的种子。

【详解】

A；与常规种子繁殖相比；人工种子能够保持植物本身的遗传特性，且繁殖速度较快，A正确；

B；人工种皮具有透气性；需要保证胚状体可以获得足够的氧气，B正确；

C；胚状体是再分化得来的；此时的细胞是已分化的细胞，C错误；

D；人工胚乳中含有植物激素、糖类、无机盐等营养物质；可以保证种子正常的生命活动，D正确。

故选C。

【点睛】4、B【分析】【分析】

分析题图可知：①是将目的基因导入受体动物细胞；②是干细胞培养过程中的增殖分化，③是诱导动物细胞融合，④是培养杂交细胞生产单克隆抗体。

【详解】

A；分析题图可知；图中过程①导入的诱导基因使成纤维母细胞发生基因重组，A错误；

B；丙细胞由能无限增殖的甲细胞和能分泌特定抗体的乙细胞融合而成；因此丙细胞既能持续分裂，又能分泌单一的抗体，B正确；

C；细胞全能性是指已高度分化的细胞仍然具有发育成完整个体的潜能；过程②为干细胞的增殖分化过程，没有实现动物细胞的全能性，C错误；

D；过程③所用的培养基中含有聚乙二醇；过程④所用的培养基中不需要聚乙二醇，D错误。

故选B。5、C【分析】【分析】

分析题图：图示表示玉米培养过程；其中A→D表示玉米茎尖组织培养过程，E→F表示玉米花药离体培养形成单倍体幼苗的过程。A→B表示脱分化；B→C表示再分化、E→F也经历了脱分化和再分化过程。D是正常的二倍体植株，而G是单倍体幼苗。

【详解】

A；A→D是植物组织培养过程；从繁殖原理上分析，属于无性生殖，A正确；

B；D是正常的二倍体植株；而G是单倍体幼苗，两者的染色体数目不同，B正确；

C；E→G表示花药离体培养形成单倍体幼苗的过程；该过程体现了植物生殖细胞的全能性，C错误；

D；E→F过程中获得的植株是单倍体植株；高度不育，一般没有直接的使用价值，D正确。

故选C。

【点睛】6、B【分析】【分析】

基因工程技术的基本步骤：

（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取；利用PCR技术扩增和人工合成。

（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤；基因表达载体包括目的基因；启动子、终止子和标记基因等。

（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同；导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法；基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。

（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术。个体水平上的鉴定：抗虫鉴定；抗病鉴定、活性鉴定等。

【详解】

A；PCR反应体系中需要添加耐高温DNA聚合酶；不需要解旋酶，A错误；

B；脱氧核苷酸链是有方向的；一端为5'端，另一端为3'端，合成子链时，引物的小段核苷酸链先与模板链配对结合，然后在引物的3'端进行子链延伸，B正确；

C；利用PCR对目的基因进行扩增时只需要知道目的基因两端的序列即可；C错误；

D；在设计两种引物时；两个引物之间的碱基序列不能配对，D错误。

故选B。7、B【分析】【分析】

将目的基因导入到受体细胞的方法可以分为农杆菌转化法；基因枪法、显微注射法和感受态细胞制备法等；其中导入到植物细胞的方法主要是农杆菌转化法。供体胚胎可以来源于动物体内的早期胚胎，或通过体外受精得到的胚胎，或通过胚胎分割获得的胚胎。

【详解】

A；对早期胚胎中的桑椹胚或囊胚进行分割移植；可加快良种家畜的繁殖，A错误；

B；供体胚胎可以来源于动物体内的早期胚胎；或通过体外受精得到的胚胎，或通过胚胎分割获得的胚胎，B正确；

C；体外采集的精子需要放到培养液中以达到获能状态；C错误；

D；一般将目的基因导入到植物细胞中的方法常常用农杆菌转化法；使用农杆菌侵染水稻将目的基因导入水到细胞中，D错误；

故选B。8、B【分析】【分析】

细胞凋亡是由基因决定的细胞编程序死亡的过程。细胞凋亡是生物体正常的生命历程；对生物体是有利的，而且细胞凋亡贯穿于整个生命历程。细胞凋亡是生物体正常发育的基础，能维持组织细胞数目的相对稳定，是机体的一种自我保护机制。在成熟的生物体内，细胞的自然更新；被病原体感染的细胞的清除，是通过细胞凋亡完成的。

【详解】

A；MM细胞是真核细胞；其是通过有丝分裂的方式进行增殖，A正确；

B；穿孔素和颗粒酶属于细胞因子；其本质是蛋白质，单克隆抗体不是细胞因子，B错误；

C；分析题图可知；NK细胞与MM细胞密切接触，导致MM细胞裂解死亡的过程属于细胞调亡，C正确；

D；分析题图可知；抗CD38单克隆抗体可以与FcyR与CD38两种受体相结合，D正确。

故选B。二、多选题(共6题，共12分)9、A:B:C【分析】【分析】

【详解】

A；酵母菌首先进行有氧呼吸；而后进行无氧呼吸，发酵过程中由于营养物质的减少、有害代谢产物的积累，pH的改变，酒精的产生速率逐渐减慢，A错误；

B、集气管中的气体是酵母菌有氧呼吸和无氧呼吸产生的CO2；B错误；

C；发酵过程中酵母种群呈“S”型增长；而后减少，C错误；

D；若酵液表面出现菌膜；属于醋酸菌，需氧型微生物，可能是发酵瓶漏气引起的，D正确。

故选ABC。

【点睛】10、A:D【分析】【分析】

过程①是以mRNA为模板合成DNA的过程；即逆转录过程；过程②表示利用PCR扩增目的基因；过程③表示将重组质粒导入大肠杆菌；过程④培养并筛选转基因大肠杆菌，级工程菌。

【详解】

A；过程①是以mRNA为模板合成DNA的过程；即逆转录过程，需要逆转录酶的催化，故A正确；

B；过程②表示利用PCR扩增目的基因；在PCR过程中，不需要解旋酶，是通过控制温度来达到解旋的目的，故B错；

C；利用氯化钙处理大肠杆菌；使之成为感受态细胞，故C错；

D；检测目的基因是否成功导入受体细胞的染色体DNA中；可以采用DNA分子杂交技术，故D正确。

故选AD。

【点睛】11、A:C:D【分析】【分析】

PCR全称为聚合酶链式反应；是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术，所利用的原理为DNA分子的复制，因此PCR技术一般用于基因扩增。

【详解】

A；基因扩增中引物通常是一小段DNA或RNA片段；每一次循环后DNA分子数量增加一倍，从理论上推测，第二轮后只有一个DNA片段只有引物B，含引物A的比例为3/4，A正确；

B；引物A和引物B均不在该片段的端点；因此第一轮循环后，得到的两DNA片段中两条脱氧核苷酸链都不等长，通过绘图可推知，第二轮中也不会出现等长的引物，所以在第二轮循环产物中不会出现两条脱氧核苷酸链等长的DNA片段，B错误；

C；引物A和引物B必须与目的基因配对；如果引物之间或引物自身发生碱基互补配对，则不能扩增目的基因，C正确；

D；由于复制过程子链的合成方向是从子链的5’端向3’端延伸；所以耐热的DNA聚合酶总将游离的脱氧核苷酸连接到3’端，D正确。

故选ACD。12、A:B:C【分析】【分析】

限制酶能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列；并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂，形成黏性末端和平末端两种。

【详解】

A；重组质粒pM5-SPN-leudh中除图中标注外；还应该具有终止子，复制原点等结构，A正确；

B；NdeI和BamHI两种酶切割形成的黏性末端不同；构建重组质粒用NdeI和BamHI两种酶切有助于目的基因正确插入，B正确；

C；KmR和A_pR为标记基因；图中KmR和A_pR存在于质粒中的作用是便于重组DNA分子的筛选，C正确；

D；限制酶和DNA连接酶的作用部位为磷酸二酯键；D错误。

故选ABC。13、A:C:D【分析】【分析】

动物核移植是指将动物的一个细胞的细胞核；移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育成为动物个体。

【详解】

A；克隆北极狼的供体细胞来自野生北极狼；卵母细胞来自发情期的母犬，因此性状由野生北极狼、发情期的母犬的基因共同决定，比格犬只是代孕母体，不提供遗传物质，A错误；

B；透明带下注射法不抽取供体细胞的细胞核；操作简单且对供体细胞核损伤小，同时注射的位置是卵母细胞外的透明带，然后诱导两个细胞融合，对卵母细胞的损伤小，B正确；

C；供体细胞注入卵母细胞透明带内后；还需要电融合法等诱导才能使供体细胞进入卵母细胞形成重构胚，C错误；

D；细胞分裂、分化形成克隆胚胎的过程是有丝分裂过程；而基因重组发生在减数分裂过程，D错误。

故选ACD。14、B:C:D【分析】【分析】

分析题干：质粒上的DNA分子为环状；某种限制性内切酶完全酶切环状质粒后，出现3条带（相同分子量的为一条带），即3种不同分子量DNA（至少被切割成3条DNA片段），因此环状质粒上至少有3个酶切位点。

【详解】

A；由分析可知；该质粒上至少含有3个酶切位点，A错误；

B；DNA分子的糖-磷酸骨架中磷酸基团呈离子状态；带负电，DNA在一定的电场力作用下，在凝胶中向正极泳动，DNA分子越大，泳动越慢，因此琼脂糖凝胶电泳可以用来分离DNA，B正确；

C；DNA分子的糖-磷酸骨架中磷酸基团呈离子状态；带负电，因此外加电场时，DNA向正极泳动，C正确；

D；DNA分子的糖-磷酸骨架中磷酸基团呈离子状态；带负电，若琼脂糖带负电荷，使得电场力增强，有利于DNA向正极泳动，D正确。

故选BCD。三、填空题(共7题，共14分)15、略

【解析】①.接种环②.琼脂固体③.连续划线④.聚集⑤.逐步稀释⑥.一个细胞⑦.子细胞群体⑧.菌落⑨.梯度稀释⑩.琼脂固体⑪.单个细胞⑫.单个的菌落16、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】单个核苷酸两个DNA片段17、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】磷酸二酯18、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】蒸馏水洗涤剂和食盐19、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】现配现用20、略

【分析】【详解】

在日常生活中；我们遇到的有关生物技术安全与伦理问题有：生殖性克隆人伦理问题；试管婴儿与设计试管婴儿伦理问题、转基因产品的安全性与伦理问题和生物武器的安全性等。

例如转基因产品的安全性：转基因技术的安全性的争议；主要集中在两个方面，一是对人是否安全，二是对环境的影响。

对人的安全方面；支持转基因技术的人认为投放市场的转基因作物都是经过充分实验的，被改变的基因仅限于增加作物的抗病；抗灾害能力，并且在北美地区转基因食品已经使用的很多年，可以说现在美国加拿大20岁左右的年轻人从小就是吃转基因食品长大的；反对转基因技术的人认为转基因食品有害，他们的证据主要是一位科学家的实验证明，用转基因食品喂养的小白鼠癌症发病率明显升高，但问题是这个实验只成功过一次，后来别的科学家在相同的条件下都没能再现这个实验结果。

在环境方面对转基因技术的争议是最大的；也是欧洲人反对转基因技术的重要依据，反对人持有的观点是，通过改良基因创造出抵抗病虫害和其他灾害的植物，这种技术如果失去控制可能会把农作物改造成适应性极强的超级植物，自然平衡使任何生物都不可能占绝对优势地位，但转基因技术产生的超级植物可能会打破自然平衡而泛滥成灾。

伦理问题：由于转基因技术创新打破了物种界限,使不同物种间的基因可以进行前所未有的新组合,其可能造成的危害难以预见,这就使转基因技术创新呈现前所未有的复杂性,并不可避免地会引发很多全新的社会伦理问题,引出种种有关生物科学家的道德责任和学术自由的哲学争论。在转基因植物技术创新中,功利主义的预设和学术自由的主张必须以人类的价值、尊严和社会公正为前提条件。相关领域的科学家必须担当起必要的道德责任,把握好伦理横杆,以促使转基因植物技术创新沿着科学的轨道健康发展。【解析】在日常生活中；我们遇到的有关生物技术安全与伦理问题有：生殖性克隆人伦理问题；试管婴儿与设计试管婴儿伦理问题、转基因产品的安全性与伦理问题和生物武器的安全性等。

例如转基因产品的安全性：转基因技术的安全性的争议；主要集中在两个方面，一是对人是否安全，二是对环境的影响。

对人的安全方面；支持转基因技术的人认为投放市场的转基因作物都是经过充分实验的，被改变的基因仅限于增加作物的抗病；抗灾害能力，并且在北美地区转基因食品已经使用的很多年，可以说现在美国加拿大20岁左右的年轻人从小就是吃转基因食品长大的；反对转基因技术的人认为转基因食品有害，他们的证据主要是一位科学家的实验证明，用转基因食品喂养的小白鼠癌症发病率明显升高，但问题是这个实验只成功过一次，后来别的科学家在相同的条件下都没能再现这个实验结果。

在环境方面对转基因技术的争议是最大的；也是欧洲人反对转基因技术的重要依据，反对人持有的观点是，通过改良基因创造出抵抗病虫害和其他灾害的植物，这种技术如果失去控制可能会把农作物改造成适应性极强的超级植物，自然平衡使任何生物都不可能占绝对优势地位，但转基因技术产生的超级植物可能会打破自然平衡而泛滥成灾。

伦理问题：由于转基因技术创新打破了物种界限,使不同物种间的基因可以进行前所未有的新组合,其可能造成的危害难以预见,这就使转基因技术创新呈现前所未有的复杂性,并不可避免地会引发很多全新的社会伦理问题,引出种种有关生物科学家的道德责任和学术自由的哲学争论。在转基因植物技术创新中,功利主义的预设和学术自由的主张必须以人类的价值、尊严和社会公正为前提条件。相关领域的科学家必须担当起必要的道德责任,把握好伦理横杆,以促使转基因植物技术创新沿着科学的轨道健康发展。21、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】个体生物学水平抗虫性状。四、判断题(共3题，共27分)22、A【分析】【详解】

蛋白质工程是在分子水平上通过基因修饰或基因合成来完成的，是在基因工程的基础上延伸出来的第二代基因工程。故该说法正确。23、B【分析】【详解】

要对蛋白质的结构进行设计改造；最终必须通过改造基因中的碱基序列来完成，因为基因能指导蛋白质的生物合成。

故错误。24、A【分析】【详解】

生物武器是利用生物战剂杀伤人员、牲畜、毁坏植物的武器。生物武器种类包括致病菌、病毒、生化毒剂以及经过基因重组的致病菌等，故正确。五、实验题(共4题，共24分)25、略

【分析】【分析】

单克隆抗体的制备：（1）制备产生特异性抗体的B淋巴细胞：向免疫小鼠体内注射特定的抗原；然后从小鼠脾内获得相应的B淋巴细胞。（2）获得杂交瘤细胞。①将鼠的骨髓瘤细胞与脾细胞中形成的B淋巴细胞融合；②用特定的选择培养基筛选出杂交瘤细胞，该杂种细胞既能够增殖又能产生抗体。（3）克隆化培养和抗体检测。（4）将杂交瘤细胞在体外培养或注射到小鼠腹腔内增殖。（5）提取单克隆抗体：从细胞培养液或小鼠的腹水中提取。（6）单克隆抗体的优点：特异性强，灵敏度高，能大量制备。

【详解】

（1）抗体参与体液免疫；科研人员将纤维蛋白作为抗原注射到小鼠体内，激活体液免疫过程，制备出抗纤维蛋白的单克隆抗体（5B8）。该项技术为单克隆抗体的制备，属于细胞工程范畴，即B正确，ACD错误。

故选B。

（2）制备抗纤维蛋白的单克隆抗体5B8的基本技术流程为：先从注射了纤维蛋白的小鼠脾脏中获取的相应的B细胞（能产生特定的抗体）与小鼠的骨髓瘤细胞融合获得杂交细胞；用特定的选择培养基进行筛选；获得杂交瘤细胞；对杂交瘤细胞进行克隆和抗体检测，获得能产生特定抗体的杂交瘤细胞；获得的杂交瘤细胞在体外环境或小鼠腹腔内培养；然后从细胞培养液或小鼠腹水中提取单克隆抗体5B8。

（3）①活性氧（ROS）是氧分子正常代谢的副产物；NADPH氧化酶是催化细胞内产生ROS的主要酶。由于细胞中GAPDH蛋白表达量稳定且含量丰富，在实验中可作为标准参照，排除实验操作等无关变量对结果的影响。

②对比1和2组检测结果；细胞中NADPH氧化酶和ROS的含量升高，说明纤维蛋白提高了吞噬细胞中NADPH氧化酶和ROS的含量，使其对神经元产生毒害。通过对比1；2、3组结果发现，经5B8处理后，NADPH氧化酶和ROS的含量会下降，说明5B8能减轻纤维蛋白对NADPH氧化酶和ROS的含量的影响，使两种物质含量下降。

③由第②题可知；经5B8处理后，NADPH氧化酶和ROS的含量会下降，说明单克隆抗体588与纤维蛋白结合，可以降低吞噬细胞NADPH氧化酶的量，进而降低ROS产量，从而减小对神经元的伤害，因此单克隆抗体5B8对多发性硬化症有明显疗效。

【点睛】

本题考查单克隆抗体的制备过程和抗纤维蛋白的单克隆抗体（5B8）的作用机理，意在考查考生对所学知识的理解和应用能力。【解析】抗原体液B相应的B淋巴细胞；选择培养基无关变量（如实验操作等）1和2提高吞噬细胞中NADPH氧化酶和ROS的含量1、2、3组（2、3组）减轻纤维蛋白对NADPH氧化酶和ROS含量的影响，使两种物质含量下降单克隆抗体5B8与纤维蛋白结合，可以降低吞噬细胞NADPH氧化酶的量，进而降低ROS产量，从而减小对神经元的伤害，起到治疗多发性硬化症的作用。26、略

【分析】【分析】

统计菌落数目的方法：（1）显微镜直接计数法①原理：利用特定细菌计数板或血细胞计数板；在显微镜下计算一定容积的样品中微生物数量；②方法：用计数板计数；③缺点：不能区分死菌与活菌。（2）间接计数法（活菌计数法）①原理：当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌。

（1）

测定培养液中游泳池活细菌总数可以使用稀释涂布平板法进行计数；而显微镜直接计数获得的结果包含活菌和死菌的总数。

（2）

氯化消毒后池水中的游离性余氯可保证持续消毒效果，Na2S2O3具有还原性，可消除水样中的残余氯，对游泳池水活细菌总数进行检测，步骤①中在采样瓶中添加Na2S2O3溶液；可以避免残留氯杀菌。

（3）

微生物培养时应注意无菌操作；故步骤③中，将培养基倒入培养皿时，应在酒精灯火焰附近进行；为使实验数据更准确，应至少设置3个实验组；微生物培养时应注意避免杂菌污染，由于蒸馏水中含有较多的杂质和微生物，故不宜用作对照组，故选c。

（4）

步骤④中；用稀释涂布平板法统计的菌落数往往比活菌的实际数目少，这是因为当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落；出现成片的菌落的原因可能是水样与培养基没有混匀，是步骤③中旋摇操作不充分造成的。

（5）

a；气温升高会导致微生物繁殖加快；导致合格率降低，a正确；

b、客流量增加，携带的微生物增多，导致合格率降低，b正确；

c；由于不同场馆分别计数；故检测的场馆数多不是导致合格率降低的原因，c错误；

d；泳池氯化时间过长会杀灭更多的微生物；不是导致合格率降低的原因，d错误。

故选ab。

根据检测结果，要进一步加强第三季度的场馆管理，可增加游泳池水质监测的频次、游泳池装设水循环过滤装置，强制要求个人淋浴后入池不现实，每日在临近开馆前氯化消毒，余氯含量过高会影响人体健康，故选bc。【解析】(1)显微镜直接计数获得的结果包含活菌和死菌的总数。

(2)避免余氯杀菌。

(3)酒精灯火焰3c

(4)当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落旋摇

(5)abbc

27、略

【分析】【分析】

参与果酒的制作的微生物主要是酵母菌；其新陈代谢的类型为异养兼性厌氧型，较适宜的发酵温度为18~30℃。在无氧的环境中酵母菌把糖类分解为酒精和二氧化碳。在果酒制作过程中检测发酵液是否含有酒精，取样后滴加适量酸性重铬酸钾溶液并振荡，若观察到溶