2024年沪教版选择性必修3生物下册阶段测试试卷

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A.两种限制酶在M上识别的核苷酸序列相同B.二苯胺试剂也可用于DNA的鉴定，但无法检测DNA分子的大小和种类C.凝胶中的DNA分子经染色后，可在波长为300nm的紫外灯下被检测出来D.限制酶R1与R2都能切断磷酸二酯键5、某兴趣小组就“泡菜腌制过程中亚硝酸盐含量变化”开展了研究；操作如下:2021年1月4日下午选取1；2、3号三只相同的泡菜坛，在每个坛中加入洗净的新鲜莲花菜，再分别倒入相同量的煮沸并冷却的盐水，将坛密封，置于同一环境中。封坛前进行第一次取样测定亚硝酸盐含量，后来定时测定，结果如图。

下列对该实验的分析错误的是（）A.泡菜制作过程中盐水需煮沸的目的是为了杀灭杂菌，冷却后再用是为了防止温度过高杀死所需菌种B.在腌制过程中泡菜坛中的溶液会增加，这是由于盐水浓度大于细胞液浓度，植物细胞会通过渗透作用失水C.腌制泡菜的过程中，起主要作用的微生物是乳酸菌，乳酸菌是兼性厌氧菌，用水封坛的目的是为乳酸菌提供无氧环境D.由题图知，该小组对每个坛中的数据分别画出曲线，这是不科学的，设置三个泡菜坛目的是进行平行重复实验，取平均值，使实验数据更真实6、研究人员将大麦细胞的LTP1基因导入酵母中，让酵母产生LTP1蛋白。下图为该实验过程的部分流程。下列说法正确的是（）

A.运用PCR扩增LTP1基因时，应选择左图的A和D作为引物B.为方便构建重组质粒，可在引物5’端添加限制酶的识别序列C.如图中为了筛选导入重组质粒的啤酒酵母，只需配制含青霉素的培养基D.为了让大麦的基因在酵母中表达，需要在目的基因两侧添加大麦的启动子和终止子评卷人得分二、多选题(共8题，共16分)7、下列关于生物技术与伦理问题的正确观点是（）A.利用体外受精技术筛选早期胚胎性别，设计试管婴儿B.基于科学和理性讨论转基因作物的安全性问题C.当今社会的普遍观点是禁止克隆人的实验，但不反对治疗性克隆D.大量引入国外转基因作物与本地近缘作物品种杂交8、下列关于发酵工程的应用，叙述正确的是（）A.柠檬酸是一种广泛应用的食品酸度调节剂，可以通过黑曲霉发酵制得B.可以将乙型肝炎病毒的抗原基因转入酵母菌通过发酵工程制备乙型肝炎疫苗C.利用发酵工程生产的白僵菌特异性强，只能用来防治一种农林害虫D.一种真菌通过发酵工程产生的井冈霉素可以用来防治水稻枯纹病9、为探究某物种的等位基因“CST1”与“cst1E81K”的功能，科研人员将表达CST1和cst1E81K的质粒分别导入无法吸收葡萄糖的酵母菌（以麦芽糖为碳源），经处理后再将其接种在含不同碳源的培养基上，结果如下图所示，下列说法正确的是（）

A.上述酵母菌在接种前的处理是对其进行等浓度梯度的稀释B.在含葡萄糖类似物的培养基上，导入CST1的酵母菌存活率最高C.据图推测，CST1的功能可能是转运葡萄糖进入细胞D.导入cst1E81K的酵母菌葡萄糖吸收速率大于导入CST1的酵母菌10、甲品种青花菜具有由核基因控制的多种优良性状；但属于胞质雄性不育品种。通过体细胞杂交，成功地将乙品种细胞质中的可育基因引入甲中，下图为该操作示意图。下列相关叙述正确的是（）

A.人工诱导原生质体融合可使用离心法B.融合的原生质体再生出细胞壁后再进行组织培养C.杂种细胞经过一定激素和营养的诱导，发育成为杂种植株D.筛选出的杂种植株含有控制甲青花菜优良性状的基因，但只能通过母本进行传递11、在进行拟矮牵牛和矮牵牛的种间原生质体融合时，利用亲本材料对药物抗性的差异来选择杂种细胞的过程如图所示。下列说法错误的是（）

A.只有杂种细胞能在含放线菌素D的MS培养基上正常生长B.同一株植物的不同细胞经离体培养获得的再生苗基因型可能不相同C.②中的融合过程一定要在无菌水中进行，防止杂菌污染D.通过③得到的愈伤组织等材料用人工薄膜包装后可得到人工种子12、下列有关动物细胞工程操作的叙述，错误的是（）A.动物细胞培养是动物细胞工程的基础，在进行细胞培养时，培养基中除了加入细胞所需的各种营养物质外，还需要加入琼脂B.动物细胞融合与植物体细胞杂交都能形成杂种个体C.干细胞存在于早期胚胎、骨髓和脐带血等多种组织和器官中，包括胚胎干细胞和成体干细胞等，有着自我更新能力及分化潜能D.动物体细胞核移植的难度明显高于胚胎细胞核移植13、免疫PCR是对微量抗原的一种检测方法。下图是利用该技术检测牛乳中微量抗生素的流程图：首先将抗体1固定在微板上，冲洗后加入待检的牛乳，再加入DNA标记的抗体2，进行PCR扩增，最后进行电泳检测，相关叙述正确的是（）

A.图示中的DNA可以是非牛乳基因中的DNA片段B.如果第三次冲洗不充分则有可能出现假阳性现象C.电泳检测结果只能判断阳性与否，无法判断牛乳中抗生素的含量D.微量抗原抗体反应通过PCR技术间接扩增放大，从而达到可检测的水平14、传统发酵食品的制作需要各种各样的微生物。下列相关叙述正确的是（）A.腌制泡菜利用了乳酸菌的乳酸发酵B.制作腐乳利用了微生物产生的蛋白酶C.制作果酒利用了酵母菌在无氧条件下产生酒精D.制作果醋利用了醋酸菌在无氧条件下产生乙酸评卷人得分三、填空题(共7题，共14分)15、人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质一一培养基。其中，配制成的_______________的基质称为液体培养基，配制成的固体状态的基质称为________________________。在液体培养基中加入凝固剂_______________________后，制成琼脂固体培养基，它是实验室中最常用的培养基之一。微生物在_________________培养基表面生长，可以形成肉眼可见的菌落。（琼脂是一种从红藻中提取的____________________。琼脂在98℃以上熔化，在44℃以下凝固，在常规培养条件下呈现固态。）16、最常用的载体是______，它是一种裸露的、结构简单的、独立于细菌染色体之外，并具有______能力的_____。17、回答下列问题。

（1）果酒的制作离不开酵母菌，温度是酵母菌生长和发酵的重要条件，酒精发酵时一般将温度控制在_________，醋酸菌是一种________细菌，它的最适生长温度为_______________，乳酸菌是________细菌，在无氧的情况下，将葡萄糖分解成___________。

（2）微生物的接种方法很多，最常用的是_____________和__________________，稀释涂布平板法统计的菌落数往往比活菌的实际数目___________，这是因为______________________________。

（3）饮用水中大肠杆菌的数目可以通过滤膜法来测定，将滤膜放在____________培养基上培养，大肠杆菌的菌落呈现___________；从而计算出水样中大肠杆菌的数目。

（4）固定化酶和固定化细胞技术是利用物理或化学方法将酶或细胞固定在一定空间内的技术，包括化学结合法、____________和物理吸附法。酶更适合采用__________和___________固定化，而细胞多采用___________固定化。18、目的基因是指：______19、植物基因工程：______。20、_______mol/L浓度下，DNA溶解度最大。21、随着现代科技的发展，有些新的致病微生物被发现，它们的危害可能更大。通过互联网或图书馆搜集近年发现的致病微生物的相关资料，分析和归纳这些资料__________。评卷人得分四、实验题(共4题，共8分)22、氧化硫硫杆菌（T．t）通过将单质硫与还原态硫氧化为硫酸以获得能量进行化能合成作用。科学家欲通过实验探究硫酸锌对T．t产酸量的影响。

实验材料：氧化硫硫杆菌（T．t）菌液；蒸馏水；100mg/L和1000mg/L的硫酸锌溶液，配制好的氧化硫硫杆菌（T．t）液体培养基(含单质硫)，恒温摇床等。

请分析并回答以下问题：

（1）氧化硫硫杆菌的代谢类型为______________，培养氧化硫硫杆菌（T．t）的液体培养基中的碳源是___________，该培养基从功能上属于______________培养基。

（2）实验前，科学家发现氧化硫硫杆菌（T．t）菌液已被杂菌污染，于是在配制好的氧化硫硫杆菌（T．t）液体培养基中加入____________，用______________法接种并进行纯化培养；得到了氧化硫硫杆菌菌落。

（3）实验步骤：

第一步：对配制好的培养基再次进行______________灭菌处理；以防止杂菌污染影响实验结果。

第二步：取三个锥形瓶（编号A、B、C）分别加入等量培养基后，再依次分别加入____________________________；

第三步：往A、B、C三组中接种______________后放入恒温摇床中培养7天。

第四步：每天测定并记录各组的硫酸含量。

（4）实验结果：如图所示；据图分析实验结论：

实验结论：________________________________________________________。23、被称为“水中小白鼠”的斑马鱼是一种体长4厘米左右的热带淡水鱼；与人类基因同源性高达87%，并有相似的器官；生理功能和信号通路。由于发育周期短、费用低、体外受精、透明等优点，斑马鱼现在越来越广泛地应用于毒性检测、疾病模型创制、药物筛选等领域中。

研究人员欲通过使胰岛素基因表达受阻从而构建糖尿病模型斑马鱼。吗啉反义寡核苷酸是一种RNA剪接抑制剂；通过将其注入斑马鱼受精卵可阻碍相关基因的表达。针对其作用原理，现有两种假说：

假说1：吗啉反义寡核苷酸导致RNA前体上内含子2的对应序列不能被剪切。

假说2：吗啉反义寡核苷酸导致RNA前体上内含子2和外显子3的对应序列同时被剪切。

为了验证上述假说；研究人员进行了如下实验：

(1)从受精卵发育了3天的实验组和对照组的细胞中提取总RNA，再通过逆转录获得cDNA。若假说1成立，选择上图所示引物2和引物3进行PCR后的结果为______（填字母）。A．实验组有杂交带B．实验组无杂交带C．对照组有杂交带D．对照组无杂交带(2)若要证明假说2成立，进行PCR时，需要选择上图所示引物有____________。

(3)采用PCR技术扩增DNA需要引物的原因是__________________。

(4)为了获取大量斑马鱼胚胎干细胞用于药物筛选，可加入__________________，用于分散斑马鱼囊胚中的__________________。再取分散细胞作为初始材料进行______培养，然后分瓶继续培养。培养瓶中添加输卵管上皮细胞作为______细胞，以提高斑马鱼胚胎干细胞的数量。24、两只克隆小猴“中中”和“华华”是世界首例非人灵长类动物的体细胞克隆猴；这是我国的研究成果。一年后5只世界首例生物节律紊乱的体细胞克隆猴诞生。下图为培育克隆猴的流程，回答下列问题：

(1)在“中中”“华华”之前，科学家已培育了胚胎细胞克隆猴，胚胎细胞核移植难度明显低于体细胞核移植的原因是_____。

(2)科学家首先将采集的卵母细胞培养至____期，然后去核，这里的“去核”实际上是指去除____。核移植过程中用灭活的仙台病毒进行了短暂处理，其目的是_____。形成的重构胚具有_____的能力。体外培养重构胚时，需提供适宜的营养及环境条件，推测环境条件包括_____（答出2点）。

(3)我国科研团队采集一只睡眠紊乱最明显的BMAL1基因敲除的猕猴的体细胞，通过核移植技术获得了5只克隆猴，理论上这5只克隆猴之间的细胞核基因型_____（填“相同”“不相同”或“不一定相同”）。为验证上述5只基因敲除猕猴存在昼夜节律紊乱问题，科学家用检测设备监测实验猴，通过行为学分析检测其是否明显表现出睡眠紊乱的症状，对照组的设置应为_____。在研究人类疾病致病机制、研发人类新药时，选用“模型猴”更优于“模型鼠”的原因是_____。25、科学家的发现给人类的生活带来了无限的想象；他们采集了某深海海域的沉积物样品，分离；鉴定得到其中的深海放线菌，以期获得具有前景的抗生素替代品。据此回答下列问题：

(1)研究人员欲筛选出深海放线菌进行研究，取1g沉积物样品接种在液体培养基中摇瓶培养，稀释后取菌液通过_______________法接种到高氏一号（加数滴质量分数为10%的酚）培养基表面以获得单菌落。

(2)通过PCR技术扩增分离得到的放线菌的16SrRNA基因可进行菌株的种属鉴定。PCR技术中起关键作用的酶是_____________。该技术能在放线菌总的DNA中专一性扩增出16SrRNA基因的原因是______________。PCR产物一般可通过_________________鉴定。

(3)科学家还将Oct3/4、Sox2、c-Mc和KIf4基因通过逆转录病毒转入小鼠成纤维细胞中。2~3周后，这些细胞显示出ES细胞的形态、具有活跃的分裂能力，它们就是iPS细胞。在这个实验过程中，逆转录病毒的作用是_______________如何证明iPS细胞的产生不是由于培养基的作用？请写出实验设计思路______________评卷人得分五、综合题(共2题，共6分)26、M蛋白在人体神经发育过程中起重要作用；M基因发生突变或表达异常可导致神经发育紊乱性疾病，如Rett综合征和MDS等。

(1)M蛋白可识别并结合甲基化DNA，进而调控靶基因的_____。

(2)对一位Rett综合征患者进行检测发现；其M基因发生了一个碱基对的替换，细胞内只有截短的M蛋白。

①一个碱基对的替换导致M基因的mRNA_____；翻译后合成了截短的M蛋白。

②研究者提出，可通过改造tRNA使患者细胞能够合成正常长度的M蛋白。请简述利用该技术治疗此类Rett综合征的基本原理。_____

(3)图1为一个MDS患者的家系图。采集全部家系成员外周血进行检测；核型分析未发现染色体数目异常，测序发现其M基因均为野生型，M基因表达的检测结果如图2，M基因拷贝数如下表。

检测对象M基因拷贝数Ⅰ11Ⅰ23Ⅱ13Ⅱ22正常男性1正常女性2

①根据以上信息推测Ⅱ2患病的原因。_____

②女性体细胞中有一条X染色体是失活的，失活X染色体上绝大多数基因被沉默。用限制酶HpaⅡ剪切Ⅰ2基因组DNA；然后进行PCR扩增及电泳，结果如图3。

图3中引物组合应为_____。

③Ⅰ2的M基因拷贝数高于正常女性，但表型正常，请结合以上研究提出合理解释。_____27、HIV侵入感染T细胞时；需要先与T细胞膜上的CCR5受体结合才能进入T细胞，该受体由CCR5基因编码。科学家预想：将造血干细胞中的CCR5基因人为敲除，这样形成的T细胞膜上将不会出现该受体，HIV就无法进入细胞内，将敲除了CCR5基因的造血干细胞回输患者体内，有望治疗艾滋病。回答下列问题：

(1)与选取别人的造血干细胞相比，选取患者自己的造血干细胞进行基因敲除的优点是___________。将造血干细胞培养成T细胞，从本质上是__________的结果。

(2)为精准敲除掉CCR5基因，科研人员设想利用CRISPR/Cas9基因编辑技术敲除CCR5基因，过程如图所示：合成一段与CCR5基因互补的单链引导RNA序列；通过__________法将单链引导RNA序列和Cas9蛋白导入患者的造血干细胞，单链引导RNA序列上的碱基与CCR5基因上的碱基序列进行识别并配对的原则是__________；Cas9蛋白与单链引导RNA的组合本质上与基因工程的__________酶功能类似，可引导Cas9蛋白切割CCR5基因相邻脱氧核苷酸之间的__________键；从而敲除CCR5基因。

(3)上述操作过程已在克隆猴实验中获得成功，与不同供体克隆猴相比，使用同一供体克隆猴进行实验的优势是____________。培育体细胞克隆猴，涉及的胚胎工程技术主要有__________（答出2项即可）。参考答案一、选择题(共6题，共12分)1、B【分析】【分析】

基因工程技术的基本步骤：（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取；利用PCR技术扩增和人工合成。（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤；基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样．将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术．个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。

【详解】

A；基因工程是在生物体外将DNA进行重组形成重组DNA分子；然后导入受体细胞，赋予生物新的遗传特性，A错误；

B；将人的干扰素基因重组到质粒后导入大肠杆菌；获得能产生人干扰素的菌株，这是基因工程技术的应用，B正确；

C；用紫外线照射青霉菌；使其DNA发生改变，通过筛选获得青霉素高产菌株，这是诱变育种，与基因工程无关，C错误；

D；基因工程是按照人们的意愿；对生物进行的定向改造，而自然界中天然存在的噬菌体自行感染细菌后其DNA整合到细菌DNA上不符合基因工程的概念，D错误。

故选B。

【点睛】2、B【分析】【分析】

醋酸菌好氧性细菌；当缺少糖源时和有氧条件下，可将乙醇（酒精）氧化成醋酸。当氧气；糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸。醋酸菌生长的最佳温度是在30℃～35℃。

【详解】

A；醋的制作需用醋酸菌；醋酸菌是一种好氧菌，所以在制作过程中需适时通氧气，A正确；

B；醋酸菌是一种嗜温菌；温度要求较高，一般在30-35℃左右，B错误；

C；醋酸菌能在氧气充足；糖源不足的条件下将果酒转变为乙醛，在生成醋酸，因此可以制作果醋，C正确；

D；当氧气、糖源充足时；醋酸菌可将葡萄中的糖分解成醋酸，D正确。

故选B。3、B【分析】【分析】

转基因动物的受体细胞是受精卵；所以含有转基因的受精卵在形成个体时，所有细胞都会含有转入的基因，“提高基因的表达水平”是指设法使牛的乳腺细胞表达出更多的人白蛋白，而不是含有更多的白蛋白基因。只在转基因牛乳汁中才能获取人白蛋白，因为人白蛋白基因只在牛乳腺细胞才表达。

【详解】

A；转基因牛的培育过程涉及基因工程、动物细胞培养、胚胎移植等技术以及配套工程的相关技术；A错误；

B；由题意“使转基因动物乳汁中的药物蛋白含量提高了30多倍”可知：该培育过程一般需要用到乳腺蛋白基因的启动子等调控组件使目的基因在乳腺细胞内表达；B正确；

C；提高基因表达水平是指设法使牛的乳腺细胞中含有的人白蛋白基因指导合成更多的人白蛋白；C错误；

D；人们只能在转基因牛的乳汁中获取到人白蛋白；是因为此基因只在乳腺细胞中表达，D错误。

故选B。4、A【分析】【分析】

用琼脂糖凝胶电泳方法检测DNA分子；在同一电场；同一凝胶中，DNA分子在电场中的迁移速度主要与DNA分子的大小有关，DNA分子越大，迁移速率越慢，反之则越快。

【详解】

A；据图可知；两种限制酶处理M后，得到一种大小的DNA片段，说明M为环状DNA分子，两种限制酶在M上均只有一个识别、切割位点，但二者识别的核苷酸序列不应相同，A错误；

B；二苯胺试剂与DNA共热；可产生蓝色物质，此方法可用于DNA的鉴定，但无法检测DNA分子的大小和种类，B正确；

C；凝胶中的DNA分子经染色后；对波长为300nm的紫外光吸收性强，可在波长为300nm的紫外灯下被检测出来，C正确；

D、限制酶R1与R2可识别特定的脱氧核苷酸序列；并在特定位点切断磷酸二酯键，D正确。

故选A。

【点睛】5、C【分析】【分析】

分析题图：在1；2、3号坛中；亚硝酸盐的含量变化都表现为先增加后下降的趋势，其中在1月7日亚硝酸盐含量最高，到1月14日亚硝酸盐的含量下降到最低水平，之后亚硝酸盐的含量基本保持不变。在泡菜腌制的初期，坛内环境有利于硝酸盐还原菌的繁殖，这些细菌可以促进硝酸盐还原为亚硝酸盐，但随着腌制时间的增加，乳酸菌也大量繁殖，对硝酸盐还原菌产生一定的抑制作用，使其生长繁殖受影响，造成泡菜中亚硝酸盐含量又有所下降。

【详解】

A；泡菜制作过程中需要消毒；盐水需煮沸的目的是为了杀灭杂菌，冷却后再用是为了防止温度过高杀死所需菌种，A正确；

B；在腌制过程中由于加入盐水；由于盐水浓度大于细胞液浓度，植物细胞会通过渗透作用失水，泡菜坛中的溶液会增加，B正确；

C；腌制泡菜的过程中；起主要作用的微生物是乳酸菌，乳酸菌是厌氧菌，C错误；

D；由题图知；每个坛亚硝酸盐含量测定间隔时间不同，该小组对每个坛中的数据分别画出曲线，这是不科学的，设置三个泡菜坛目的是进行平行重复实验，取平均值，使实验数据更真实，D正确。

故选C。

【点睛】6、B【分析】【分析】

图示表示将使啤酒产生丰富泡沫的LTPI基因植入啤酒酵母菌中；使其产生LTP1蛋白，酸出泡沫丰富的啤酒的过程，图中A为获取目的基因的过程，B为质粒，C为基因表达体。

【详解】

A；结合题意可知；DNA复制只能从5’到3’，而DNA聚合酶只能从引物的3’端延伸DNA链，因此构建前利用PCR技术扩增目的基因时，A、B、C、D四种单链DNA片段中应选取B和C作为引物，A错误；

B；为构建重组质粒(即将目的基因和质粒整合到一起)；在引物5’端需要适当增加限制酶识别序列B正确；

C；由图可知；构建基因表达载体时，四环素抗性基因被破坏，而青霉素抗性基因没有被破坏，因此将导入C的酵母菌分别在含有青霉素和四坏素的两种选择培养基上培养，则在含有青霉素的培养基上能存活，但在含有四环素的培养基上不能存活，才能筛选导入重组质粒的啤酒酵母，C错误；

D；为了让大麦的基因在酵母中表达；需要在目的基因两侧添加酵母的启动子和终止子，D错误。

故选B。二、多选题(共8题，共16分)7、B:C【分析】【分析】

转基因生物的安全性问题：食物安全（滞后效应；过敏源、营养成分改变）、生物安全（对生物多样性的影响）、环境安全（对生态系统稳定性的影响）。

我国反对以克隆人为目的任何实验和举动；主要是基于以下四方面的伦理考虑：

1；克隆人是对人权和人的尊严的挑战；

2；克隆人违反生物进化的自然发展规律；

3；克隆人将扰乱社会家庭的正常伦理定位；

4；克隆人的安全性在伦理上也难以确认。

【详解】

A；设计试管婴儿性别会引起性别比例失调；违背伦理道德，我国不允许利用体外受精技术筛选早期胚胎性别，A错误；

B；基于科学和理性讨论转基因作物的安全性问题；B正确；

C；当今社会的普遍观点是禁止克隆人的实验；但不反对治疗性克隆，C正确；

D；大量引入国外转基因作物与本地近缘作物品种杂交；可能造成基因污染和环境安全，D错误。

故选BC。8、A:B【分析】【分析】

发酵工程是指采用现代工程技术手段；利用微生物的某些特定功能，为人类生产有用的产品，或直接把微生物应用于工业生产过程的一种技术。发酵工程的内容包括菌种选育；培养基的配制、灭菌、种子扩大培养和接种、发酵过程和产品的分离提纯（生物分离工程）等方面。

【详解】

A；柠檬酸是一种广泛应用的食品酸度调节剂；可以通过黑曲霉发酵制得，A正确；

B；可以将乙型肝炎病毒的抗原基因转入酵母菌通过发酵工程制备乙型肝炎疫苗；B正确；

C；利用发酵工程生产的白僵菌可以用来防治80多种农林害虫；C错误；

D；一种放线菌通过发酵工程产生的井冈霉素可以用来防治水稻枯纹病；D错误。

故选AB。

【点睛】9、A:C【分析】【分析】

从左图看出；在添加麦芽糖的培养基中空质粒组；导入CST1和导入cst1E81K的酵母菌的酵母菌菌落数目相差不大，但在麦芽糖+葡萄糖类似物组中，导入CST1的酵母菌菌落数目最少，说明吸收葡萄糖类似物最多。

【详解】

A；从图中可以看出；后一稀释浓度是前一稀释浓度的5倍，所以是进行等浓度梯度的稀释，A错误；

B；在含葡萄糖类似物的培养基上；导入CST1的酵母菌菌落颜色最浅，说明存活率最低，B错误；

C；导入CST1的酵母菌在葡萄糖类似物的培养基上菌落数目降低；由于葡萄糖类似物被吸收后可以杀死酵母菌，因此可以推测CST1能转运葡萄糖类似物进入酵母菌，所以其功能可能是转运葡萄糖进入细胞，C正确；

D、在麦芽糖+葡萄糖类似物的培养基中，导入cst1E81K的酵母菌菌落数目多，说明其存活率更高，由于葡萄糖类似物被吸收后可以杀死酵母菌，因此可以推测导入cst1E81K的酵母菌葡萄糖吸收速率小于导入CST1的酵母菌；D错误。

故选C。10、A:B:C【分析】【分析】

题图分析：该图为体细胞杂交过程；其中A为去除细胞壁，制备原生质体，可以用酶解法，B为诱导原生质体融合，可以用聚乙二醇处理，融合的杂种细胞应该具备乙品种细胞质中的可育基因，甲品种的控制多种优良性状的核基因，该过程的原理是细胞膜的流动性和植物细胞的全能性。

【详解】

A；人工诱导原生质体融合的方法有化学法（聚乙二醇）和物理法（离心、振动、电刺激等）两大类；A正确；

B；杂种细胞再生出细胞壁是细胞融合成功的标志；融合成功之后再进行组织培养，B正确；

C；杂种细胞经过外源生长素和细胞分裂素的诱导；脱分化形成愈伤组织，再分化形成胚状体，进一步成为杂种植株，C正确；

D；甲品种青花菜具有由核基因控制的多种优良性状；杂种植株细胞核内含有控制甲青花菜优良性状的基因，具备乙品种细胞质中的可育基因，因此精子中具备一半核基因，并可通过父本（精子）进行传递，D错误。

故选ABC。11、C:D【分析】【分析】

人工种子是以植物组织培养的胚状体；不定芽、顶芽和腋芽为原料,用人工薄膜包装而成的种子。

【详解】

A；由图可知；只有杂种细胞能在含放线菌素D的MS培养基上正常生长得到杂种植物，A正确；

B；同一株植物的不同细胞的基因型可能不同；比如：配子的基因型与体细胞的基因型不同，离体培养获得的再生苗基因型可能不相同，B正确；

C；②是原生质体的融合过程；原生质体放入无菌水中可能会吸水涨破，C错误；

D；通过③得到的胚状体、不定芽、顶芽和腋芽等材料用人工薄膜包装后可得到人工种子；D错误。

故选CD。12、A:B【分析】【分析】

动物细胞工程技术包括动物细胞培养；动物细胞融合、核移植技术等技术；其中动物细胞培养是动物细胞工程的基础。在进行细胞培养时，培养基中除了加入细胞所需的各种营养物质外，还需要加入血清等天然成分。干细胞包括胚胎干细胞和成体干细胞等，存在于早期胚胎、骨髓和脐带血等多种组织和器官中，有着自我更新能力及分化潜能。

【详解】

A；在进行动物细胞培养时；培养基中除了加入细胞所需的各种营养物质外，还需要加入血清等天然成分，A错误；

B；动物细胞融合不能形成杂种个体；形成的是杂种细胞，而植物体细胞杂交能形成杂种个体，两者都能形成杂种细胞，B错误；

C；干细胞包括胚胎干细胞和成体干细胞等；存在于早期胚胎、骨髓和脐带血等多种组织和器官中，有着自我更新能力及分化潜能，C正确；

D；动物体细胞分化程度较高；全能性较低，因此动物体细胞核移植的难度明显高于胚胎细胞核移植，D正确。

故选AB。13、A:B:D【分析】【分析】

免疫PCR是一种抗原检测系统；将一段已知序列的DNA片段标记到抗体2上，通过抗原抗体的特异性识别并结合，抗体2会和固定抗体1；抗生素形成复合物“固定抗体1—抗生素—抗体2”，再用PCR方法将这段DNA进行扩增，通过检测PCR产物的量，即可推知固定抗体1上吸附的抗生素的量。

【详解】

A；免疫PCR中所用的DNA不选用受检样品（牛乳）中可能存在的DNA。待检测的牛乳中可能含有牛乳腺细胞的DNA（其上含有牛乳基因的DNA片段）；若图示中的DNA用牛乳基因中的DNA片段，经过PCR扩增后的产物中，不仅有抗体2上的DNA扩增产物，还可能有牛乳中本身含有的牛乳基因片段的扩增产物，使检测结果偏大，A正确；

B；如果第三次冲洗不充分；可能使残留的、呈游离状态的抗体2上的DNA也作为PCR的模板参与扩增，会出现假阳性现象，B正确；

CD；微量抗原抗体反应；是通过PCR技术扩增抗体2上连接的DNA，最后通过检测扩增产物—DNA的量来确定抗生素的量的方法。因此，PCR扩增产物的量与牛乳中抗生素的量呈正相关，抗原、抗体的数量可通过PCR技术间接扩增放大，C错误，D正确。

故选ABD。14、A:B:C【分析】【分析】

1；参与果酒制作的微生物是酵母菌；其新陈代谢类型为异养兼性厌氧型。

2；参与果醋制作的微生物是醋酸菌；其新陈代谢类型是异养需氧型。果醋制作的原理：当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸。当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。

3；参与腐乳制作的微生物主要是毛霉；其新陈代谢类型是异养需氧型。腐乳制作的原理：毛霉等微生物产生的蛋白酶能将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可将脂肪分解成甘油和脂肪酸。

4；泡菜的制作原理：泡菜的制作离不开乳酸菌。在无氧条件下；乳酸菌将葡萄糖分解成乳酸。

【详解】

A；在无氧条件下；乳酸菌能将葡萄糖分解成乳酸，腌制泡菜利用了乳酸菌的乳酸发酵，A正确；

B；参与腐乳制作的微生物主要是毛霉；制作腐乳利用了毛霉等微生物产生的蛋白酶能将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可将脂肪分解成甘油和脂肪酸，B正确；

C；酵母菌在无氧条件下；可通过无氧呼吸产生酒精和二氧化碳，制作果酒利用了酵母菌在无氧条件下产生酒精，C正确；

D；醋酸菌是好氧型生物；制作果醋利用了醋酸菌在有氧条件下产生醋酸，D错误。

故选ABC。三、填空题(共7题，共14分)15、略

【解析】①.液体状态②.固体培养基③.琼脂④.固体⑤.多糖16、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】质粒自我复制双链环状DNA分子17、略

【分析】【分析】

果酒制作菌种是酵母菌；来源于葡萄皮上野生型酵母菌或者菌种保藏中心，条件是无氧；温度是18～25℃，pH值呈酸性．果醋制备的菌种是醋酸菌，条件是发酵过程中充入无菌氧气，温度为30～35℃。

【详解】

（1）酒精发酵时一般将温度控制在18～25℃；醋酸菌是一种好氧细菌，它的最适生长温度为30～35℃。乳酸菌是厌氧细菌，在无氧的情况下，将葡萄糖分解成乳酸。

（2）微生物的接种方法很多；最常用的是平板划线法和稀释涂布平板法，稀释涂布平板法统计的菌落数往往比活菌的实际数目低，这是因为当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落。

（3）饮用水中大肠杆菌的数目可以通过滤膜法来测定；将滤膜放在伊红美蓝培养基上培养，大肠杆菌的菌落呈现黑色，从而计算出水样中大肠杆菌的数目。

（4）固定化技术一般包括化学结合法；包埋法和物理吸附法。酶更适合采用化学结合法和物理吸附法固定化；而细胞多采用包埋法固定化。

【点睛】

本题考查果酒和果醋制备原理，意在考查学生理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系，形成知识的网络结构，属识记内容。【解析】18－25℃好氧30－35℃厌氧乳酸平板划线法稀释涂布平板法低当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落伊红美蓝黑色包埋法化学结合法物理吸附法包埋法18、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】是人们所需要转移或改造的基因19、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】抗虫、抗病、抗逆转基因植物，利用转基因改良植物的品质20、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】0．1421、略

【分析】【详解】

致病微生物是指可以侵犯人体，引起感染甚至传染病的微生物，包括病毒、细菌、真菌、原生动物和蠕虫等，其中以细菌和病毒的危害性最大。致病微生物可以通过空气、体液、食品、水等传播途径，从一个宿主转移到另一个宿主，致病微生物由于看不见、摸不着，难于防范，且存在传染性，因而危害极大。同时近年来由于温室效应加剧，也会使致病微生物的繁殖周期变短，可能会使危害性更大，因此我们需要积极开展科学研究，掌握防范的措施和防范，实现最好的防护，目前对致病微生物最好的防护措施还是疫苗的研究和使用。【解析】致病微生物是指可以侵犯人体，引起感染甚至传染病的微生物，包括病毒、细菌、真菌、原生动物和蠕虫等，其中以细菌和病毒的危害性最大。致病微生物可以通过空气、体液、食品、水等传播途径，致病微生物由于看不见、摸不着，难于防范，且存在传染性，因而危害极大。目前对致病微生物最好的防护措施还是疫苗的研究和使用。四、实验题(共4题，共8分)22、略

【分析】【分析】

微生物接种常用的两种方法：①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板；接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。

（1）

结合题意“氧化硫硫杆菌通过将单质硫与还原态硫氧化为硫酸以获得能量进行化能合成作用”可知，氧化硫硫杆菌的代谢类型为自养需氧型；由于该菌可以进行化能合成作用，可以利用液体培养基中的无机碳或CO2；可以其作为液体培养基中的碳源；该培养基中含有单质硫，对生长的菌类具有选择作用，在功能上属于选择培养基。

（2）

培养微生物应用固体培养基进行培养；故应在配置好的液体培养基中加入琼脂；对微生物进行纯化培养的方法有平板划线法或稀释涂布平板法。

（3）

第一步；对培养基的灭菌方法为高压蒸汽灭菌；

第二步；由于本实验的目的是通过实验探究硫酸锌对T．t产酸量的影响，则实验的自变量为硫酸锌的有无及其含量，实验应遵循对照与单一变量原则，故本步骤应在三个锥形瓶中分别加入等量的蒸馏水；100mg/L和1000mg/L的硫酸锌溶液；

第三步；遵循无关变量一致原则，故往A；B、C三组中接种等量的氧化硫硫杆菌（T．t）后放入恒温摇床中培养7天。

（4）

据图分析；与对照（蒸馏水组）相比，低浓度硫酸锌对氧化硫硫杆菌（T．t）产酸无明显作用，高浓度硫酸锌对氧化硫硫杆菌（T．t）产酸起抑制作用。

【点睛】

本题主要考查培养基的制作和微生物的接种方法，意在强化学生对实验室的微生物的培养的相关知识的理解与掌握。熟记相关知识并能结合术语分析作答是解题关键。【解析】（1）自养需氧型无机碳或CO2选择培养基。

（2）琼脂平板划线法或稀释涂布平板法。

（3）高压蒸汽等量的蒸馏水；100mg/L和1000mg/L的硫酸锌溶液等量的氧化硫硫杆菌（T．t）

（4）低浓度硫酸锌对氧化硫硫杆菌（T．t）产酸无明显作用，高浓度硫酸锌对氧化硫硫杆菌（T．t）产酸起抑制作用23、略

【分析】【分析】

根据题干信息分析；糖尿病模型斑马鱼的构建的原理是使胰岛素基因表达受阻，而使胰岛素基因表达受阻是通过给斑马鱼受精卵注射吗啉反义寡核苷酸实线的；吗啉反义寡核苷酸是一种RNA剪接抑制剂，其作用的机理有两种假说：可能是导致RNA前体上内含子2的对应序列不能被剪切，也可能是导致RNA前体上内含子2和外显子3的对应序列同时被剪切。

(1)

根据引物2和引物3在胰岛素基因片段上的位置；通过PCR扩增能得到内含子2的序列，若假说1成立，即吗啉反义寡核苷酸导致RNA前体上内含子2的对应序列不能被剪切，故实验组中应含有内含子2的序列，而对照组的该片段被切除了，因此用引物2和引|物3进行PCR反应，其结果为实验组中有杂交带，而对照组中无杂交带。

故选AD。

(2)

若要证明假说2成立；即RNA前体上内含子2和外显子3的对应序列同时被剪切下去，则可以选择图示引物5和引物2；引物5和引物6进行PCR，观察是否有杂交带出现。

(3)

由于DNA聚合酶不能从头合成DNA；而只能从引物3′端延伸DNA链，因此DNA复制需要引物。

(4)

用胰蛋白酶处理斑马鱼囊胚中的内细胞团；可以获得分散的斑马鱼胚胎干细胞，然后对其进行原代培养，接着分瓶继续培养。培养瓶中添加输卵管上皮细胞作为饲养层细胞，以提高斑马鱼胚胎干细胞的数量。

【点睛】

解答本题的关键是掌握基因的表达的相关知识点，明确基因转录出来的mRNA是要经过加工成为成熟的mRNA才能作为翻译的模板的，并能够根据题干提取有效信息进行答题。【解析】(1)AD

(2)5、65；2

(3)DNA聚合酶不能从头合成DNA；只能从3′端延伸DNA链，因此DNA复制需要引物。（得分点：“只能从3′端延伸DNA链”）

(4)胰蛋白酶内细胞团原代饲养层24、略

【分析】【分析】

1；克隆动物概念：将动物的一个细胞的细胞核移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中；使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育成动物个体。用核移植的方法得到的动物称为克隆动物。

2；原理：动物细胞核的全能性。

3；动物细胞核移植可分为胚胎细胞核移植和体细胞核移植。体细胞核移植的难度明显高于胚胎细胞核移植。原因：动物胚胎细胞分化程度低；恢复其全能性相对容易，动物体细胞分化程度高，恢复其全能性十分困难。

【详解】

（1）体细胞分化程度高；表现全能性困难，而胚胎细胞分化程度低，表现全能性容易，因此动物体细胞核移植的难度明显高于胚胎细胞核移植。

（2）去核前应保证采集的卵母细胞在体外培养至减数分裂II中期；去核是指去除纺锤体—染色体复合物；核移植前需用灭活的仙台病毒对体细胞进行短暂处理，在此过程中，灭活的仙台病毒的作用是诱导体细胞与去核卵母细胞融合。目前动物细胞核移植技术普遍使用的去核方法是显微操作法，核移植的具体操作是将体细胞注入去核卵母细胞，从而得到重构胚，使其具有发育成完整个体的能力；体外培养重构胚时，培养液中除应含有细胞所需要的各种营养物质外，通常需要加入动物血清等一些天然成分，并将其置于含有95%空气和5%CO2混合气体的CO2培养箱中培养；培养过程中需要定期更换培养基，并创造无菌；无毒环境。胚胎移植前还需对代孕母猴进行同期发情处理，这样可以使移植的胚胎获得相同的生理环境，以保证胚胎能够继续发育。

（3）通过核移植技术获得了5只克隆猴，理论上这5只克隆猴之间的细胞核基因型相同，细胞质基因来源于受体细胞；为了验证这5只基因敲除猕猴是否存在昼夜节律紊乱问题，该实验的自变量是BMAL1基因是否敲除，因变量是是否出现睡眠紊乱症状。所以对照组的设置应为与克隆猕猴生理状态相同的正常的猕猴个体(或不存在BMAL1缺失）。在研究人类疾病致病机制、研发人类新药时，因为猴与人的亲缘关系更近，故选用“模型猴”更优于“模型鼠”。【解析】(1)胚胎细胞分化程度低；表现全能性相对容易。

(2)MⅡ纺锤体-染色体复合物诱导细胞融合发育成完整个体无菌；无毒的环境；温度、pH、渗透压，气体环境。

(3)相同与克隆猴生理状态相同的正常个体（或不存在BMAL基因缺失个体）猴与人的亲缘关系更近25、略

【分析】【分析】

PCR原理：在解旋酶作用下；打开DNA双链，每条DNA单链作为母链，以4种游离脱氧核苷酸为原料，合成子链，在引物作用下，DNA聚合酶从引物3'端开始延伸DNA链，即DNA的合成方向是从子链的5'端自3'端延伸的。实际上就是在体外模拟细胞内DNA的复制过程。DNA的复制需要引物，其主要原因是DNA聚合酶只能从3′端延伸DNA链。

【详解】

（1）分析题意可知；研究人员取1g沉积物样品接种在液体培养基中摇瓶培养，稀释后可通过稀释涂布平板法接种到培养基表面以获得单菌落。

（2）PCR技术是一项通过体外控制温度扩增DNA的技术，该技术中由于温度较高，起关键作用的酶是耐高温DNA聚合酶；PCR扩增的前提是要有一段目的基因的核苷酸片段，分析题意，该技术能在放线菌总的DNA中专一性扩增出16SrRNA基因的原因是：引物是根据16SrRNA基因的一段已知核苷酸序列设计合成的；PCR产物一般可通过琼脂糖凝胶电泳来鉴定：凝胶中的DNA分子通过染色；可以在波长为300nm的紫外灯下被检测出来。

（3）分析题意，科学家将Oct3/4、Sox2、c-Mc和KIf4基因通过逆转录病毒转入小鼠成纤维细胞中，该过程中逆转录病毒是载体，能