2025年北师大版选修1生物下册阶段测试试卷含答案

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A.过程①是对菌液进行稀释，过程②的接种方法是平板划线法B.1号培养基属于选择培养基，以淀粉作为唯一碳源C.1号、II号培养基的配制和灭菌时，应先进行灭菌再调节pHD.应从1号培养基挑出透明圈大的菌落，接种到II号培养基上10、黄粉虫可以吞食；降解塑料；利用黄粉虫肠道微生物对白色污染进行生物降解，是一种绿色环保的处理工艺。下图是从黄粉虫肠道中分离、纯化目的微生物的过程，相关叙述正确的是（）

A.富集培养基中含有酵母膏、蛋白胨、琼脂等，蛋白胨能提供所需的碳源、氮源和维生素B.分离、纯化目的微生物的选择培养基中需加入PVC塑料膜作为唯一碳源C.将转接至固体斜面培养基上的不同菌落置于4℃的冰箱长期保存D.与传统填埋、焚烧相比，黄粉虫肠道微生物对白色污染的降解不会造成二次污染11、为探究不同糖源（蜂蜜、黄冰糖）对蓝莓酒发酵产物的影响，某研究小组研发出如下的蓝莓酒发酵工艺，其中“主发酵”时酵母菌会繁殖、大部分糖的分解和代谢物会生成，“后发酵”是在低温、密闭的环境下蓝莓酒会成熟。下列叙述错误的是（）

A.菌种甲在产生CO2的同时会产生酒精B.切片后需对发酵液进行消毒然后再分组C.倒罐均需保留空间以促进菌种有氧呼吸D.主发酵要控制无氧，后发酵要控制有氧12、某同学设计了如图所示的果酒和果醋发酵装置；下列有关叙述正确的是。

A.进行果醋和果酒发酵的最适温度相同B.该装置既可阻止空气进入，也便于发酵产生的气体排出C.去除弯管中的水，该装置即可满足果醋发酵时底层发酵液中大量醋酸菌的呼吸D.发酵过程中，发酵液的pH逐渐降低，密度逐渐下降评卷人得分三、填空题(共6题，共12分)13、蛋白质的提取和分离一般分为四步：________、粗分离、______和________。14、当_________________通过凝胶时，相对分子质量较小的蛋白质_______________进入凝胶内部的通道，路程_________________，移动速度__________________；而相对分子质量较大的蛋白质_________________进入凝胶内部的通道，只能在凝胶外部移动，路程_________________，移动速度_______________________。15、蛋白质是生命活动不可缺少的物质。随着人类基因组计划的进展以及多种生物基因组测序工作的完成；人类跨入了后基因组和蛋白质组时代。血红蛋白是人和其他脊椎动物红细胞的主要组成成分，负责血液中氧气和二氧化碳的运输。

（1）分离血红蛋白的方法是_____，其原理是根据_____来分离蛋白质。

（2）蛋白质的提取和分离一般分为四步：样品处理、粗分离、_____和纯度鉴定。

（3）血红蛋白因含有_____而呈现红色，采集血液时需要预先加入柠檬酸钠，目的是_____。在血红蛋白样品处理和粗分离中需要用到很多试剂，如在红细跑的洗涤中需要用到生理盐水直至上清液不再呈现黄色；在血红蛋白的释放过程中需用到蒸馏水和40%体积的_____，目的是使红细胞破裂释放血红蛋白；在透析过程中需要将透析袋放入20mmol/L的_____中。

（4）本实验用的是交联葡聚糖凝胶（SephadexG-75），其中“G”表示_____，“75”表示凝胶得水值，即每克凝胶膨胀时吸收水分7.5g。在装填凝胶时色谱柱内不能出现气泡的原因是_____，给色谱柱添加样品的具体操作是_____。

（5）判断纯化的蛋白质是否达到要求，选用的检测方法是_____。16、以____________的速度缓慢地将注射器中的溶液滴加到配制好的________中，观察液滴在CaCl2溶液中形成凝胶珠的情形。17、防止_____________入侵，获得_________________的培养物，是研究和应用微生物的前提。在实验室培养微生物，一方面需要为培养的微生物提供合适的___________________条件，另一方面需要确保无处不在的其他微生物无法混入。18、（1）________混合物上柱。

（2）洗脱开始；______________的蛋白质______进入凝胶颗粒内；相对分子质量______的蛋白质则被排阻于凝胶颗粒之外。

（3）________________的蛋白质被滞留；__________________的蛋白质向下移动。

（4）相对分子质量不同的分子完全分开。

（5）____________的蛋白质行程较短，已从________中洗脱出来，________________的蛋白质还在行进中。评卷人得分四、实验题(共1题，共10分)19、火龙果味道清甜；口感嫩滑；具有极高的营养价值、经济价值，深受广大消费者的青睐。多年来，火龙果采摘后腐烂的问题一直是影响其生产发展的重大问题，被侵染的部位主要是火龙果的茎，严重时就会侵染到果实。某实验小组欲对火龙果致腐微生物菌株进行分离与纯化，步骤如下，回答下列问题：

（1）火龙果致腐微生物菌株分离与纯化。

称取25g自然条件下完全腐烂的红心火龙果，置于225mL无菌生理盐水中，振荡30min，取1mL稀释6个梯度（101~106倍稀释），分别涂布于固体平板上，该接种方法称为_____________，再将平板置于28℃条件下培养1～7d，挑取不同形态的单菌落分别在试管中培养，置于_____________临时保存。

（2）致腐菌回接火龙果实验。

用酒精擦拭火龙果表面，其目的是_____________。将不同的致腐菌依次制成菌液，将其回接到新鲜无腐烂红心火龙果上，同时以__________________________为对照组；晾干后置于室温条件下储藏，每隔3d进行观察和记录，最终选取致腐能力强的致腐菌，且培养成菌落。

（3）致腐菌鉴定。

对筛选得到的致腐菌的菌落初步从_____________（答出2点）等方面进行形态学鉴定，之后利用分子生物学、生物信息学等分析方法进行鉴定后，发现一类是青霉属中的扩展青霉，另一类是附球属中的黑附球菌。扩展青霉和黑附球菌细胞结构的显著区别在于_____________。

（4）拮抗实验：研究发现，解淀粉芽孢杆菌上清液对青霉菌株有一定的拮抗抑制作用，为探究最佳拮抗浓度，请写出实验思路：_________________。评卷人得分五、综合题(共3题，共6分)20、中国是食醋酿造大国；有几千年的酿醋历史。但目前中国常用的醋酸杆菌菌株AS1.41产酸能力；酒精耐受性均有待提高。拟从醋醅中筛选高产酸、高耐酒精的醋酸菌，其中醋酸能溶解培养基中的碳酸钙形成透明圈，过程如图1所示。

(1)试验中所用培养基均含有水、葡萄糖、酵母浸膏和酒精，其中葡萄糖可为醋酸菌的生长提供___________。配制分离培养基时，除营养物质外，还需要添加2%的___________；以便观察醋酸与之反应后菌落周围形成的透明圈。

(2)分离醋酸菌时，需将富集的醋酸菌培养液进行梯度稀释，采用___________法接种到分离平板上。30℃培养72h后，挑取透明圈___________的单菌落进行划线分离。分离出的单菌落接种到斜面培养基（含3%酒精）上并于___________（温度）保藏。

(3)取保藏的三个菌株分别接种于发酵培养液（含5%酒精）中，30℃培养5d后测产酸量，筛选出高产酸的醋酸杆菌J2菌株。将J2与AS1.41分别接种到含不同浓度酒精的培养液中，30℃培养24h后测定活菌数量，结果如图2。由图2可知，酒精可___________醋酸菌的生长。与AS1.41相比，J2菌株对酒精的耐受性___________。

(4)获得J2菌株后，还可以采取___________育种措施；进一步提高其酒精耐受性。

(5)筛选出J2菌株后，其高产酸特性的遗传是否稳定还需检测，具体操作是___________，观察并比较产生的透明圈大小。若实验结果为___________，说明其高产酸特性能稳定遗传。21、石油对土壤的污染不仅给周边生态环境带来严重的损害；还严重影响居民的健康生活，且污染物含量越多。降解难度越大。为解决石油污染问题。某科研小组用了将近1年的时间，从大庆油田中被石油污染最严重的土壤中分离出了高效分解石油的细菌。如图所示。回答下列问题：

（1）配制好的培养基通常可以使用________________法灭菌。步骤③的培养基成分与普通液体培养基相比；最大的区别是步骤③培养基中以石油为唯一碳源。

（2）进行过程④之前，通常需要随机取若干灭菌后的平板倒置于恒温箱中培养24h，观察是否有菌落出现。上述操作的目的是_____________________________________。

（3）常采用____________________法对石油分解菌进行分离和计数。某同学用该法进行了过程④的操作：将1mL样品稀释100倍，在3个平板上分别接种0.1mL稀释液；经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为46、58和52，据此可得出每升该样品中的活菌数为_____________个。

（4）对于筛选出的细菌，可接种到试管的___________________上进行临时保藏。22、如图为某工厂设计的芦柑加工工艺流程；请分析回答：

（1）为提高出汁率过程②使用果胶酶处理；该酶包括果胶分解酶；果胶酯酶、____酶，为提高该酶的利用率常采用________技术，固定化酶的优点有________________（写两点）。过程③接种的菌种是______。

（2）芦柑果皮可用来提取香精油；过程④最好采用的方法是____法。为提高出油率，材料需经过________处理，然后漂洗。

（3）芦柑皮压榨后先经过________收集液体，再加入相当于芦柑皮质量0．25%的NaHCO3和5%Na2SO4，导致液体________，然后就可以吸取精油了。参考答案一、选择题(共7题，共14分)1、B【分析】【分析】

1；果胶：

（1）作用：果胶是植物细胞壁及胞间层的主要组成成分之一。

（2）成分：由半乳糖醛酸聚合而成的一种高分子化合物。

（3）特点：不溶于水；在果汁加工中，会影响果汁的出汁率，还会使果汁浑浊。

2；果胶酶：

（1）作用：能够分解果胶；瓦解植物的细胞壁及胞间层，使榨取果汁变得更容易；果胶分解成可溶性的半乳糖醛酸，使得浑浊的果汁变得澄清。

（2）组成：不是特指某一种酶；而是分解果胶的一类酶的总称，包括多聚半乳糖醛酸酶；果胶分解酶和果胶酯酶等。

【详解】

A；果胶酶可以提高出汁率；但容易使浑浊的果汁变得澄清，A错误；

B；果胶酶应在低温下保存；最好在最适温度下使用，B正确；

C；产生果胶酶的生物有植物、霉菌、酵母菌和细菌等；动物不能产生果胶酶，C错误；

D；果胶酶特指分解果胶的一类酶的总称；包括多聚半乳糖醛酸酶、果胶分解酶和果胶酯酶等，D错误。

故选B。2、C【分析】【分析】

酶是活细胞产生的具有生物催化能力的有机物；大多数是蛋白质，少数是RNA；酶的催化具有高效性（酶的催化效率远远高于无机催化剂）；专一性（一种酶只能催化一种或一类化学反应的进行）、需要适宜的温度和pH值（在最适条件下，酶的催化活性是最高的，低温可以抑制酶的活性，随着温度升高，酶的活性可以逐渐恢复；高温、过酸、过碱可以使酶的空间结构发生改变，使酶永久性的失活），据此分析解答。

【详解】

酶的催化需要适宜的温度；在最适温度，酶的催化活性是最高的，低于最适温度或高于最适温度，酶的催化活性都较低，温度过高，酶会变性失活。由于该实验是在一支试管中进行的，横坐标是温度，纵坐标是果汁体积。开始时，在使酶变性失活的高温以下的温度条件下，随温度升高，果胶酶有催化作用，能催化果胶分解，故试管中果汁体积逐渐增加。当温度升高到一定程度时，果胶酶变性失活，不能再催化果胶分解，果汁体积达到最大后不再变化。综上所述，ABD错误，C正确。

故选C。3、C【分析】【分析】

海藻酸钠溶液固定酵母细胞的注意事项：

①配制海藻酸钠溶液：小火；间断加热、定容；如果加热太快，海藻酸钠会发生焦糊。

②海藻酸钠溶液与酶母细胞混合：冷却后再混合；注意混合均匀，不要进入气泡。

③制备固定化酵母细胞：高度适宜；并匀速滴入。

④刚溶化的海藻酸钠应冷却后再与酵母菌混合；否则温度过高会导致酵母菌死亡。

【详解】

A；固定化酶应用时；要控制好pH、温度，但不需要控制好溶解氧，A错误；

B；固定化酵母细胞时；适合采用包埋法，B错误；

C；固定化细胞相比固定化酶；对反应物的分子大小有限制，反应物是大分子是不适用固定化细胞，C正确；

D、向CaCl2溶液中滴加海藻酸钠与酵母细胞混合液时要匀速滴入；不能过快，防止凝胶珠拖尾现象的产生，D错误。

故选C。4、B【分析】【详解】

A；酵母菌是异养型生物；不能直接利用光能。A错误；

B；制作果酒过程中给发酵装置适时排气是为了放出产生的二氧化碳；维持装置内气压的平衡。B正确；

C；果酒的制作原理是利用酵母菌无氧呼吸产生酒精与二氧化碳。要想得到酒精；不能向发酵装置内通入空气。C错误；

D；适宜的温度是酵母菌生长和繁殖的重要条件；温度为20℃左右时，最适合酵母菌生长、繁殖。D错误。

故选B。5、C【分析】【分析】

血红蛋白的提取与分离的实验步骤主要有：（1）样品处理：①红细胞的洗涤；洗涤红细胞的目的是去除杂蛋白，采集的血样要及时采用低速短时间离心分离红细胞，然后用胶头吸管吸出上层透明的黄色血浆，将下层暗红色的红细胞液体倒入烧杯，再加入五倍体积的生理盐水，缓慢搅拌10min，低速短时间离心，如此重复洗涤三次，直至上清液中没有黄色，表明红细胞已洗涤干净。②血红蛋白的释放，在蒸馏水和甲苯作用下，红细胞破裂释放出血红蛋白，加蒸馏水至原血液的体积。加入甲苯的目的是溶解细胞膜，有利于血红蛋白的释放和分离。（2）粗分离：①分离血红蛋白溶液，将搅拌好的混合溶液离心后，试管中的溶液分为4层。第一层为无色透明的甲苯层，第2层为白色薄层固体，是脂溶性物质的沉淀层，第3层是红色透明液体，这是血红蛋白的水溶液，第4层是其他杂质的暗红色沉淀物。将试管中的液体用滤纸过滤，除去脂溶性沉淀层，于分液漏斗中静置片刻后，分出下层的红色透明液体。②透析，透析可以去除样品中分子量较小的杂质；（3）纯化：调节缓冲液面→加入蛋白质样品→调节缓冲液面→洗脱→收集分装蛋白质；（4）纯度鉴定：SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳。

【详解】

A.红细胞洗涤过程中要加入5倍体积的生理盐水；重复洗涤三次，A正确；

B.将透析袋放入盛有300mL的20mmol/L的磷酸缓冲液中；透析12h，可以去除样品中分子量较小的杂质，B正确；

C.在蒸馏水和甲苯作用下，红细胞破裂释放出血红蛋白，将搅拌好的混合溶液置于离心管中，以2000r/min的转速离心10min后分层；获得血红蛋白溶液，C错误；

D.在对样品处理时，采集的血样要及时采用低速短时间离心分离红细胞，D正确。6、A【分析】【分析】

1；果胶酶：

（1）作用：能够分解果胶；瓦解植物的细胞壁及胞间层，使榨取果汁变得更容易；果胶分解成可溶性的半乳糖醛酸，使得浑浊的果汁变得澄清；

（2）组成：果胶酶是一类酶；其中包括果胶酯酶，果胶分解酶，多聚半乳糖醛酸酶等酶。果胶酯酶可以脱去果胶中的酯，发生脱酯反应；果胶分解酶可以将果胶分解为半乳糖醛酸；多聚半乳糖醛酸酶可以聚合多个半乳糖醛酸酶。在果汁中加入果胶酶可以使果汁变澄清。

2；在最适宜的温度或pH值条件下；酶的活性最高，温度和pH偏高或偏低，酶的活性都会明显降低，过酸或过碱、温度过高都会使酶的空间结构遭到破坏，使酶失活。而低温只是使酶的活性降低，酶分子结构未遭到破坏，温度升高可恢复酶活性。

【详解】

A；影响果胶酶活性的外界因素有酸碱度、温度等；探究pH对果胶酶活性的影响，可用体积分数为0.1％的NaOH溶液和盐酸进行pH调节，A正确；

B；可通过单位体积的果泥在单位时间内的出汁量、以及等量的果泥在相同时间内的澄清度来作为果胶酶活性的检测指标；B错误；

C；果胶酶不是特指某一种酶；而是分解果胶的一类酶的总称，包括多聚半乳糖醛酸酶、果胶分解酶和果胶酯酶等。C错误；

D；高温、过酸、过碱都会破坏酶的空间结构使酶失活；酶的抑制剂也能影响果胶酶的活性，而酶和底物的浓度影响的是酶促反应速率，不影响酶的活性，D错误。

故选A。7、B【分析】【分析】

发酵工程生产的产品有两类：一类是代谢产物；另一类是菌体本身。产品不同，分离提纯的方法一般不同：如果产品是菌体，可采用过滤，沉淀等方法将菌体从培养液中分离出来；如果产品是代谢产物，可用萃取；蒸馏、离子交换等方法进行提取。

【详解】

用发酵工程生产单细胞蛋白时；采取的方法通常是过滤；沉淀。B符合题意。

故选B。二、多选题(共5题，共10分)8、A:D【分析】【分析】

微生物发酵指的是利用微生物；在适宜的条件下，将原料经过特定的代谢途径转化为人类所需要的产物的过程。

【详解】

A；用于发酵的菌种可以从自然界中筛选；也可以通过诱变育种或基因工程育种获得，A正确；

B；发酵罐培养的环境条件会影响代谢的途径从而影响产物的形成；例如谷氨酸发酵过程中，发酵罐中碳氮比（碳元素与氮元素的比值）为4∶1时，菌体大量繁殖而产生的谷氨酸少；当碳氮比为3∶1时，菌体繁殖受抑制，但谷氨酸的合成量大增，B错误；

C；发酵工程的中心环节是发酵过程；C错误；

D；发酵工程生产的各种各样的食品添加剂可以增加食品营养；改善食品口味、色泽和品质，D正确。

故选AD。

【点睛】9、A:C【分析】【分析】

据图分析：①过程是梯度稀释；②过程是稀释涂布平板法接种，目的是筛选单菌落。从功能上看，Ⅰ号培养基属于选择培养基，从物理状态上来说属于固体培养基；Ⅱ号培养基属于固体培养基；采用的接种方法有稀释涂布平板法和平板划线法；常用的灭菌方法有高压蒸汽灭菌；灼烧灭菌和干热灭菌。

【详解】

A；据图可知；过程②为释涂布平板法接种，A错误；

B；1号培养基为选择培养基；目的是选出能高效生产高温淀粉酶的嗜热菌，故培养基应以淀粉作为唯一碳源，B正确；

C；培养基配制和灭菌时；先调节pH，后灭菌，C错误；

D；嗜热菌生长时可释放淀粉酶分解培养基中的淀粉；形成大小不同的透明圈，透明圈越大，说明细菌释放淀粉酶越多，要挑出接种到II号培养基进行培养，D正确。

故选AC。10、B:D【分析】【分析】

1；分离菌株的思路:

(1)自然界中目的菌株的筛选:

①依据：根据它对生存环境的要求；到相应的环境中去寻找。

②实例：PCR技术过程中用到的耐高温的TaqDNA聚合酶；就是从热泉中筛选出来的Taq细菌中提取出来的。

(2)实验室中目的菌株的筛选:

①原理：人为提供有利于目的菌株生长的条件（包括营养；温度、pH等）；同时抑制或阻止其他微生物生长。

2；统计菌落数目的方法：

(1)稀释涂布平板法（间接）：

①当样品的稀释庋足够高时；培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。

②通过统计平板上的菌落数来推测样品中大约含有的活菌数。

(2)利用显微镜直接计数。

【详解】

A；富集培养基为液体培养基；不应含有琼脂，A错误；

B；分离、纯化能降解PVC塑料膜的微生物的选择培养基中需加入PVC塑料膜作为唯一碳源；B正确；

C；转接至固体斜面培养基上的不同菌落置于4℃的冰箱临时保存；对于需要长期保存的菌种，可用甘油管藏的方法，C错误；

D；如果对白色污染进行传统填埋、焚烧容易造成二次污染；黄粉虫肠道微生物对白色污染的降解不会，D正确。

故选BD。11、A:C:D【分析】【分析】

酵母菌是一类单细胞真菌；能以多种糖类作为营养物质和能量的来源，因此在一些含糖量较高的水果；蔬菜表面经常可以发现酵母菌的存在。酵母菌是兼性厌氧微生物，在无氧条件下能进行酒精发酵，可用于酿酒、制作馒头和面包等。温度是影响酵母菌生长的重要因素，酿酒酵母的最适生长温度约为28℃。

【详解】

A、发酵产生果酒的菌种是酵母菌，酵母菌在有氧呼吸产生CO2；但不产生酒精，A错误；

B；切片后对发酵液进行消毒；防止杂菌污染，再进行分组，B正确；

C；压榨倒罐用于主发酵需保留空间以促进酵母菌的有氧呼吸；二次倒罐时菌种是进行无氧呼吸，C错误；

D；主发酵先有氧促进酵母菌大量繁殖；后无氧进行酒精发酵，后发酵要控制无氧，D错误。

故选ACD。12、B:D【分析】【分析】

果酒制作的原理：先通气；酵母菌进行有氧呼吸而大量繁殖，后密封，酵母菌进行无氧呼吸产生酒精。果醋制作的原理：醋酸菌是嗜温菌，也是嗜氧菌，因此其进行果醋发酵时需要不间断的供氧。

【详解】

A；果酒发酵的最适温度是18～25℃；果醋发酵的最适温度是30～35℃，错误；

B；果酒发酵需要无氧环境；该装置鹅颈中的水可以隔绝空气，创造无氧环境，果酒发酵中产生的气体是二氧化碳，该装置便于二氧化碳的排除，正确。

C；醋酸菌是嗜氧菌；即使去除弯管中的水，该装置也不能满足果醋发酵时底层发酵液中大量醋酸菌呼吸所需的氧气，错误；

D；果酒发酵过程中；葡萄糖分解变成酒精，因此发酵液密度会逐渐减小；同时pH会逐渐降低，呈酸性，正确。

故选BD。三、填空题(共6题，共12分)13、略

【分析】【详解】

血红蛋白提取和分离的程序可分为四大步，包括：样品处理、粗分离、纯化和纯度鉴定。首先通过洗涤红细胞、血红蛋白的释放、离心等操作收集到血红蛋白溶液，即样品的处理；再经过透析去除分子量较小的杂质，即样品的粗分离；然后通过凝胶色谱法将相对分子质量大的杂质蛋白除去，即样品的纯化；最后经聚丙烯酰胺凝胶电泳进行纯度鉴定。【解析】样品处理纯化纯度鉴定14、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】相对分子质量不同的蛋白质容易较长较慢无法路程较短较快15、略

【分析】【分析】

血红蛋白存在于红细胞内；由四条肽链构成，两条α肽和两条β肽链，每条肽链围绕一个亚铁血红素基团，一个血红素基团可携带一分子氧或一分子二氧化碳。

【详解】

（1）分离血红蛋白的方法是凝胶色谱法（又叫分配色谱法）；是根据相对分子质量的大小来分离蛋白质，相对分子质量大的蛋白质分子直接穿过凝胶颗粒间的空隙，路径短，移动速度快，优先可收集到；相对分子质量小的蛋白质分子进入凝胶珠的内部，路径长，移动速度慢，可在后收集。

（2）蛋白质的提取和分离一般分为四步：样品处理；粗分离、纯化和纯度鉴定。

（3）血红蛋白因含有亚铁血红素基团而呈现红色；采集血液时需要预先加入柠檬酸钠防止血液凝固。在血红蛋白样品处理和粗分离中需要用到很多试剂，如在红细跑的洗涤中需要用到生理盐水直至上清液不再呈现黄色；在血红蛋白的释放过程中需用到蒸馏水和40%体积的甲苯，破坏细胞膜，释放血红蛋白；在透析过程中需要将透析袋放入20mmol/L磷酸缓冲液，除去无机盐和小分子蛋白质。

（4）纯度鉴定中；用的是交联葡聚糖凝胶，其中“G”表示凝胶的交联程度；膨胀程度和分离范围。在装填凝胶时色谱柱内不能出现气泡，气泡会搅乱蛋白质的洗脱次序，降低分离效果。给色谱柱添加样品的具体操作是吸管吸1mL样品加到色谱柱的顶端，滴加样品时，吸管管壁贴着管壁环绕移动加样，同时注意不要破坏凝胶面。

（5）经过凝胶色谱法获得的蛋白质；为了确定其是否达要求，可用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法进行检测。

【点睛】

本题考查血红蛋白的提取和分离方法、凝胶色普的操作、异常原因分析，要求考生熟记课本相关知识，并理解运用。【解析】凝胶色谱法（又叫分配色谱法）相对分子质量的大小纯化亚铁血红素基团防止血液凝固甲苯磷酸缓冲液凝胶的交联程度、膨胀程度及分离范围气泡会搅乱蛋白质的洗脱次序，降低分离效果吸管吸1mL样品加到色谱柱的顶端，滴加样品时，吸管管壁贴着管壁环绕移动加样，同时注意不要破坏凝胶面。SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳16、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】恒定CaCl2溶液17、略

【解析】①.杂菌②.纯净③.营养和环境条件18、略

【分析】【详解】

凝胶色谱法纯化蛋白质的原理是相对分子质量不同的蛋白质通过凝胶柱时移动的速度不同；相对分子质量较大的蛋白质无法进入凝胶内部的通道，只能在凝胶外移动，路程短，移动速度快，先被洗脱出来，相对分子质量较小的蛋白质扩散进入凝胶内部的通道，通过凝胶柱的路程长，移动速度慢，洗脱的次序靠后。

（1）蛋白质混合物上柱。

（2）洗脱开始；相对分子质量较小的蛋白质扩散进入凝胶颗粒内；相对分子质量较大的蛋白质则被排阻于凝胶颗粒之外。

（3）相对分子质量较小的蛋白质被滞留；相对分子质量较大的蛋白质向下移动。

（4）相对分子质量不同的分子完全分开。

（5）相对分子质量较大的蛋白质行程较短，已从层析柱中洗脱出来，相对分子质量较小的蛋白质还在行进中。【解析】蛋白质相对分子质量较小扩散较大相对分子质量较小相对分子质量较大相对分子质量较大层析柱相对分子质量较小四、实验题(共1题，共10分)19、略

【分析】【分析】

1；培养基的营养构成：各种培养基一般都含有水、碳源、氮源、无机盐；此外还要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。例如，培养乳酸杆菌时需要在培养基中添加维生素，培养霉菌时需将培养基的pH调至酸性，培养细菌时需将pH调至中性或微碱性，培养厌氧微生物时则需要提供无氧的条件。

2；微生物常见的接种的方法：（1）平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板；接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。（2）稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。

（1）

稀释涂布平板法是将待分离的菌液经过大量稀释后；均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。由题干可知，该题得到单菌落的接种方法为稀释涂布平板法；若要临时保藏菌种，可放入4℃的冰箱中。

（2）

消毒指的是用较为温和的物理或化学方法杀死物体表面或内部的一部分微生物；故用酒精依次擦拭火龙果表面，目的是消毒；将致腐菌制成菌液，将其回接到新鲜无腐烂红心火龙果上，同时以将同量无菌水回接到火龙果上为对照组，晾干后置于室温条件下储藏，每隔3d进行观察和记录，最终选取致腐能力最强的致腐菌。

（3）

菌落特征包括菌落的形状；大小、隆起程度和颜色等；常作为区分菌落种类的依据；故对筛选得到的致腐菌的菌落初步从形状，大小，隆起程度和颜色等方面进行形态学鉴定。扩展青霉属于真核生物，而黑附球菌属于原核生物，因此扩展青霉和黑附球菌的区别在于扩展青霉是真核生物，存在细胞核；黑附球菌是原核生物，无细胞核。

（4）

为探究解淀粉芽孢杆菌上清液对青霉菌株的最佳拮抗浓度；可通过取等量系列浓度梯度的解淀粉芽孢杆菌上清液分别覆盖到含青霉菌的固体培养基中，观察抑菌圈的大小（抑制青霉菌生长的情况）来探究。

【点睛】

本题主要考查微生物的分离纯化，考查考生的理解能力，获取信息的能力和综合运用能力。【解析】（1）稀释涂布平板法4℃的冰箱中。

（2）消毒将等量无菌水回接到火龙果上。

（3）形状；大小，隆起程度和颜色扩展青霉是真核生物，存在细胞核；黑附球菌是原核生物，无细胞核。

（4）取等量系列浓度梯度的解淀粉芽孢杆菌上清液分别覆盖到含青霉菌的固体培养基中，观察抑菌圈的大小（抑制青霉菌生长的情况）五、综合题(共3题，共6分)20、略

【分析】【分析】

1.培养基的营养构成：各种培养基一般都含有水；碳源、氮源、无机盐；此外还要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。

2.微生物常见的接种的方法①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板；接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。

曲线图分析：酒精可抑制醋酸菌的生长；且酒精浓度越高，抑制作用越强。与AS1.41相比，J2菌株的活菌数量相对值较高，说明J2菌株对酒精的耐受性更高。

【详解】

（1）试验中所用培养基均含有水；葡萄糖、酵母浸膏和酒精；其中葡萄糖可为醋酸菌生长的碳源。配制分离培养基时，除营养物质外，还需要添加2%的碳酸钙，以便观察醋酸与之反应后菌落周围形成的透明圈，从而可以鉴定醋酸菌的产酸能力。

（2）分离醋酸菌时；需将富集的醋酸菌培养液进行梯度稀释，采用稀释涂布平板法接种到分离平板上。透明圈越大，说明产酸能力越强，因此30℃培养72h后，挑取透明圈大的单菌落进行划线分离。分离出的单菌落接种到斜面培养基（含3%酒精）上并置于4℃条件下保藏。

（3）取保藏的三个菌株分别接种于发酵培养液（含5%酒精）中；30℃培养5d后测产酸量，筛选出高产酸的醋酸杆菌J2菌株。将J2与AS1.41分别接种到含不同浓度酒精的培养液中，30℃培养24h后测定活菌数量，结果如图2。根据图2结果可知，酒精可抑制醋酸菌的生长。与AS1.41相比，J2菌株菌体数量较高，因而说明该菌株对酒精的耐受性更高。

（4）要改良生物的性