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干货如何诱导巨噬细胞极化关键词：巨噬细胞极化，M1极化，M2极化，细胞因子，IL-4,IFN-γ巨噬细胞是机体内非常重要的一类免疫细胞，也一直是科研工作者们的研究热点，尤其是巨噬细胞的极化，本期我们将重点讲述如何诱导巨噬细胞极化。当机体内环境稳态遭到破坏时，巨噬细胞通过吞噬、释放炎症因子等作用清除外源微生物，以恢复机体动态平衡，这个过程称为活化。伴随着活化，在细胞因子的作用下，巨噬细胞改变其表型，以增强应对微环境变化的能力，该过程为巨噬细胞的极化。极化使得巨噬细胞向不同的方向分化，呈现出不同的表型，发挥不同的功能。目前巨噬细胞的极化包括两个极端，即经典活化的M1型巨噬细胞和替代性活化的M2型巨噬细胞。巨噬细胞的极化对防御病原体、调节炎症、修复组织和维持体内平衡的稳定有着十分重要的作用。诱导巨噬细胞向M1型极化所需诱导因子：IFN-γ、LPS、GM-CSF等诱导巨噬细胞向M2型极化所需诱导因子：IL-4、IL-13、IL-10、M-CSF、TGF-β等以人外周血向巨噬细胞的极化为例单核细胞样本准备从外周血中分离PBMCs，可使用人淋巴细胞分离液进行此步；从PBMCs中分离单核细胞，可使用CD14单核细胞磁珠分选试剂盒进行此步。获得成熟巨噬细胞调整单核细胞浓度为1-2×10^6/ml（可参考文献），在RPMI1640培养基（含20%FBS）中添加M-CSF（100ng/ml）诱导单核细胞向巨噬细胞的成熟。7天左右分化成熟为巨噬细胞（贴壁），可选择CD68+表达作为鉴定巨噬细胞成熟的标志蛋白。图1.诱导单核细胞向巨噬细胞的成熟诱导向不同方向的极化将成熟的巨噬细胞消化下来，重新铺板，诱导48h实现向M1、M2的极化：M1极化因子：LPS（100ng/ml）+IFN-γ（20ng/ml）M2极化因子：IL-4或IL-10或IL-13（20ng/ml）图2.诱导成熟巨噬细胞向M1、M2的极化极化的鉴定刺激48小时后，用流式的方法检测极化后M1、M2标志蛋白的表达。M1巨噬细胞上调表达CD86、MHCⅡ、CD80、CD274等，M2巨噬细胞上调表达CD206、CD163等。参考文献Blood.2013Dec12;122(25):4054-67.doi:10.1182/blood-2013-05-501494.Epub2013Oct30产品推荐产品编号产品名称规格PRP1137MouseIL-4protein5μg/20μg/100μg/1mgPRP1055HumanIL-10protein5μg/20μg/100μg/1mgPRP1051HumanIL-13protein5μg/20μg/100μg/1mgPRP1050HumanIFN-γprotein20μg/100μg/500μg/1mgPRP1936HumanM-CSFProtein,Histag(Animal-Free)5μg/20μg/100μg/1mgPRP1016HumanGM-CSFprotein5μg/20μg/100μg/1mgPRP1136MouseM-CSFprotein5μg/20μg/100μg/1mgPRP1048HumanTGF-βprotein5μg/20μg/100μg/1mgPRP1151RecombinantGM-CSF，Mouse，AF5μg/20μg/100μg/1mgPRP3001Ulp1(SUMOProtease/Ulp1peptidase)500U/1000U/5000UPRP3002TerminalDeoxynucleotidylTransferase(TdT)40μg/100μgPRP3003HumanAnnexinV/ANXA5protein100μg/1mg/10mgPRP3004Luciferasefirefly5mg/25mgPRP1068HumanFGF-2（154aa）protein20μg/100μg/500μg/1mgPRP1138MouseIFN-γ20μg/100μg/500μg/1mgPRP1085HumanIL-4Protein,Histag(Animal-Free)5μg/20μg/100μg/1mgPRP1049HumanEGFprotein100μg/500μg/1mg/10mgPRP1158MouseIL-1betaProtein,Histag(Animal-Free)5μg/20μg/100μg/1mgPRP1114MouseRANKLprotein2μg/10μg/100μg/1mgPRP1171Mouse/RatTGFbeta1,Histag(Animal-Free)5μg/20μg/100μg/1mgPRP1113MouseTNF-αprotein5μg/20μg/100μg/1mgPRP1087HumanIL-6Protein,Histag(Animal-Free)5μg/20μg/100μg/1mgPRP1060RecombinantIL-1beta，Human，AF5μg/20μg/100μg/1mgPRP1056HuamnRANKLprotein5μg/20μg/100μg/1mgPRP1054HumanVEGF165protein5μg/20μg/100μg/1mg欢迎广大“蝌蚪”们多多关注Abbkine公众号，还会有更多科研惊喜等着大家哟。同时，Abbkine的技术专家为了给广大读者提供学习生物知识的平台，经过不懈努力，将多种高端生物实验的干