专题18-克隆动物-从动物细胞培养中溯源(原卷版)

专题18克隆动物，从动物细胞培养中溯源考向一动物细胞工程【母题来源】2022年江苏卷【母题题文】下图表示利用细胞融合技术进行基因定位的过程，在人-鼠杂种细胞中人的染色体会以随机方式丢失，通过分析基因产物进行基因定位。现检测细胞Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ中人的4种酶活性，只有Ⅱ具有芳烃羟化酶活性，只有Ⅲ具有胸苷激酶活性，Ⅰ、Ⅲ都有磷酸甘油酸激酶活性，Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ均有乳酸脱氢酶活性。下列相关叙述正确的有(

)A．加入灭活仙台病毒的作用是促进细胞融合B．细胞Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ分别为人-人、人-鼠、鼠-鼠融合细胞C．芳烃羟化酶基因位于2号染色体上，乳酸脱氢酶基因位于11号染色上D．胸苷激酶基因位于17号染色体上，磷酸甘油酸激酶基因位于X染色体上【试题解析】分析题干信息：Ⅰ保留X、11号染色体，Ⅱ保留2、11号染色体，具有芳烃羟化酶活性，Ⅲ，保留X、11、17号染色体具有胸苷激酶活性，Ⅰ、Ⅲ都有磷酸甘油酸激酶活性，Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ均有乳酸脱氢酶活性，所以支配芳烃羟化酶合成的基因位于2号染色体上，支配胸苷激酶合成的基因位于17号染色体上；支配磷酸甘油酸激合成的基因位于X号染色体上；支配乳酸脱氢酶合成的基因位于11号染色体上。[解析]A、动物细胞融合过程中，可以利用灭活的仙台病毒或聚乙二醇作诱导剂促进细胞融合，A正确；B、细胞Ⅲ中保留了人的X、11、17号染色体，故不会是鼠-鼠融合细胞，B错误；CD、根据分析可知，芳烃羟化酶基因位于2号染色体上，乳酸脱氢酶基因位于11号染色上，胸苷激酶基因位于17号染色体上，磷酸甘油酸激酶基因位于X染色体上，CD正确。故选ACD。【命题意图】本部分内容在全国卷中常以选考的形式出现，2道选考题，考生任选1道做答，对试题能力的考查主要是识记和理解，难度不大。考查的重点知识为动物细胞工程中的动物细胞融合技术。主要是动物细胞融合在生产生活中的应用。【命题方向】在对选修3的考查中，动物细胞工程是重要考点之一，考查的内容为：动物细胞培养，动物细胞融合与单克隆抗体的制备。其中单克隆抗体的制备是考查的热点知识。展望2023年高考生物试题呈现会结合科技前沿考查动物细胞工程的相关知识，也可能结合后面的胚胎工程一起。考查学生的信息获取能力和知识的综合运用能力的考查为主。【得分要点】1．动物细胞培养(1)概念：从动物机体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后，放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖。(2)原理：细胞的增殖。(3)操作流程①选用幼龄动物组织或胚胎进行细胞培养的原因：幼龄动物组织或胚胎的细胞分化程度低，增殖能力很强，更易于培养。②不选用胃蛋白酶分散细胞的原因：多数动物细胞培养的适宜pH为7.2~7.4，此环境下胃蛋白酶(适宜pH为1.5左右)没有活性，而胰蛋白酶(pH为7.2~8.4)活性较高。③正常细胞有接触抑制现象，癌变细胞会失去接触抑制现象。④目前使用或冷冻保存的通常都是10代以内的细胞，目的是保持细胞正常的二倍体核型。⑤无论是原代培养还是传代培养，培养瓶都要放在二氧化碳培养箱中，目的是调节pH。(4)培养条件①无菌、无毒的环境：培养液和培养用具进行无菌处理；培养液中添加一定量的抗生素；定期更换培养液，以清除细胞代谢产物。②营养：主要有糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等。在使用含有上述成分的合成培养基时，通常需加入血清、血浆等天然成分。③温度和pH：培养哺乳动物细胞的温度多以36.5±0.5℃为宜，多数细胞生存的适宜pH为7.2~7.4。④气体环境：95%空气+5%CO2，O2是细胞代谢所必需的，CO2的主要作用是维持培养液的pH。(5)动物细胞培养技术的应用①生产病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体等。②为基因工程提供受体细胞。③用于检测有毒物质，判断某种物质的毒性。④用于生理、病理、药理等方面的研究。2．动物体细胞核移植技术和克隆动物(1)概念：将动物的一个细胞的细胞核移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育为动物个体。(2)原理：动物细胞核的全能性。(3)分类：胚胎细胞核移植(容易)、体细胞核移植(困难，原因是动物体细胞分化程度高，全能性很难恢复)。(4)操作流程(5)用到的技术手段：动物细胞培养、动物细胞融合、早期胚胎培养和胚胎移植。(6)体细胞核移植技术的应用前景：加速家畜遗传改良进程，促进优良畜群繁育；保护濒危物种；转基因克隆动物可以作为生物反应器；为器官移植提供供体；为胚胎发育及衰老过程的研究提供证据；用克隆动物作疾病模型。(7)存在的问题：成活率低；克隆动物的健康问题；克隆动物食品的安全性问题等。知识拓展：选卵细胞作为受体细胞的原因：①卵细胞体积大，易于操作；②卵黄多，营养丰富，能为发育提供充足的营养；③能激发重组细胞分裂分化用物理或化学方法（如电脉冲、钙离子载体，乙醇、蛋白酶合成抑制剂等）激活受体细胞，使其完成细胞分裂和发育进程目前核移植技术中普遍使用的去核方法是显微操作去核法。还有人采用其他方法，如梯度离心、紫外光短时间照射、化学物质处理等。这些方法是在没有刺破透明带或卵母细胞质膜的情况下，去除细胞核或使卵细胞核DNA变性，从而达到去核目的。(8)生物技术中的伦理问题：不赞成、不允许、不支持、不接受任何生殖性克隆人的实验，不反对治疗性克隆。3．动物细胞融合：两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程，又称细胞杂交。(2)原理：细胞膜的流动性。(3)方法：灭活的病毒、聚乙二醇、电激等。(4)意义：突破有性杂交方法的局限，使远缘杂交成为可能；成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生物新品种培育等的重要手段；制备单克隆抗体。4．单克隆抗体的制备(1)血清抗体与单克隆抗体名称产生特点血清抗体由浆细胞分泌一般从血清中分离，产量低，纯度低，特异性差单克隆抗体由杂交瘤细胞分泌特异性强，灵敏度高，能大量制备(2)单克隆抗体：克隆单一的杂交瘤细胞所产生的大量的单一抗体。(3)生产过程(4)特点：特异性强、灵敏度高，并可大量制备。(5)用途：①作为诊断试剂：能准确识别各种抗原物质的细微差异，并与一定抗原发生特异性结合，具有准确、高效、简易、快速的优点。②用于治疗疾病和运载药物：可制成“生物导弹”，主要用于治疗癌症，也有少量用于治疗其他疾病。(6)制备单克隆抗体过程中的两次筛选筛选的对象方法第一次筛选杂交瘤细胞利用特定的选择培养基：在该培养基中只有杂交瘤细胞存活，其他细胞(未融合的B细胞和瘤细胞、融合后的B—B细胞和瘤—瘤细胞)均不能存活第二次筛选能产生特异性抗体的杂交瘤细胞利用特定抗原通过抗原—抗体杂交技术确认抗体性质1．(2022·广东·华南师大附中模拟预测)抗体药物偶联物(ADC)是采用特定技术将具有生物活性的小分子药物连接到单克隆抗体上，实现对肿瘤细胞精准的选择性杀伤。ADC的结构及其发挥作用的机理如下图，有关叙述不正确的是(

)A．ADC实现精准杀伤肿瘤细胞的基础是抗体与抗原特异性结合B．该肿瘤细胞死亡是在ADC诱导下细胞自动死亡的过程C．将特定抗原注射到小鼠体内，可以从小鼠血清中获得单克隆抗体D．对特定抗原筛选出的杂交瘤细胞进行克隆化培养可获得单克隆抗体2．(2022·江苏·高邮市第一中学模拟预测)甘草酸是中药甘草中的主要活性成分。为了快速检测甘草酸，科研人员利用细胞工程技术制备了抗甘草酸的单克隆抗体，其基本操作过程如下图。下列相关叙述正确的是()A．细胞甲是浆细胞，需多次注射相应抗原后从小鼠血液中提取B．过程②诱导细胞融合，利用了细胞膜的选择透过性C．过程③筛选得到的细胞是能够产生抗甘草酸抗体的杂交瘤细胞D．过程③④的筛选方法不同，细胞丙、丁核酸不一定相同3．(2022·湖北·模拟预测)我国科学家首次培育出灵长类动物克隆猴“中中”和“华华”，其克隆的基本过程是：取甲猴的体细胞核，移入到乙猴的去核卵母细胞，得到重组细胞并体外培育成早期胚胎，植入丙猴的子宫，最终分娩出小猴“中中”和“华华”。下列有关叙述错误的是(

)A．对乙猴注射促性腺激素，对丙猴注射孕激素B．对乙猴卵母细胞去核操作通常采用显微操作法C．“中中”和“华华”的性别及遗传物质只与甲猴有关D．克隆猴的成功培育为人类重大疾病的研究、干预和治疗可能有积极意义4．(2022·福建·三明一中模拟预测)新冠变异毒株“奥密克戎”表面的刺突蛋白(S蛋白)存在30多处改变，使其与细胞膜上的受体结合更紧密，逃避抗体结合的能力增强。下列说法错误的是(

)A．核酸检测时样本采集后应低温保存，尽快检测B．生产灭活病毒疫苗需先培养病毒宿主细胞C．毒株“奥密克戎”抗原检测需要设计多种引物D．若用小鼠制备抗S蛋白单克隆抗体需先注射S蛋白5．(2022·湖北·华中师大一附中模拟预测)使用高效的细胞毒素进行化疗可有效杀伤肿瘤细胞，但没有特异性，在杀伤肿瘤细胞的同时还会对健康细胞造成伤害。下图是ADC(抗体-药物偶联物)特异性杀死肿瘤细胞的过程，图中抗体是利用单克隆抗体技术制备的。下列叙述正确的是(

)A．单克隆抗体制备过程中不需要使用肿瘤细胞膜上的糖蛋白B．抗体与细胞毒素结合增加了细胞毒素的杀伤力C．细胞毒素具有与肿瘤细胞膜上的糖蛋白发生特异性结合的能力D．溶酶体破裂导致其中的蛋白酶及其它水解酶释放，加速了肿瘤细胞凋亡6．(2022·上海松江·二模)图为科研人员培育克隆猴“中中”的流程图。下列有关叙述正确的是(

)A．“中中”不受卵子b的基因控制B．图中利用了干细胞技术C．d为胚胎发育提供遗传物质和其他适宜条件D．“中中”的染色体数目与a细胞相同7．(2022·山东师范大学附中模拟预测)CD47是一种跨膜糖蛋白，可与巨噬细胞表面的信号调节蛋白结合，从而抑制巨噬细胞的吞噬作用。肺癌、结肠癌等多种肿瘤细胞表面的CD47含量比正常细胞高1.6～5倍，导致巨噬细胞对肿瘤细胞的清除效果减弱。为证明抗CD47的单克隆抗体可以解除CD47对巨噬细胞的抑制作用，科学家按照如下流程进行了实验，下列叙述正确的是(

)A．肺癌、结肠癌等肿瘤细胞有发达的内质网和高尔基体，参与细胞膜上大量糖蛋白的形成B．灭活的病毒会使骨髓瘤细胞细胞膜上的蛋白质分子和脂质分子重新排布C．对照组应设置为：巨噬细胞+正常细胞共培养体系+单克隆抗体D．癌细胞贴壁生长时，不会发生接触抑制现象，所以不需要对其进行分瓶培养8．(2022·辽宁实验中学模拟预测)由磷脂分子为主构成的脂质体可以作为药物的运载体，将其送到特定的细胞发挥作用。下列叙述错误的是(

)A．药物A是能在水中结晶的药物，包在脂质体的核心部位；药物B是脂溶性的药物，包在两层磷脂分子之间B．口服胰岛素属于药物A，脂质体表面的抗体最好是用胰岛B细胞膜上的特有的蛋白质做抗原，制备的单克隆抗体(抗体经技术处理，不会被消化液破坏)C．脂质体将药物送入细胞可能的方式是与细胞膜融合或胞吞，依赖细胞膜的流动性D．使用糖衣或胶囊(成分是淀粉)包装的药物，不必采用脂质体这种方法9．(2022·山东省实验中学模拟预测)我国科研人员利用大鼠、小鼠两个远缘物种创造出世界首例异种杂合二倍体ES细胞(AdESCs)，具体流程见下图。下列叙述错误的是(

)A．单倍体囊胚2的获得用到了核移植、早期胚胎培养等技术B．动物细胞融合技术克服了小鼠和大鼠的精卵融合后无法发育的生殖隔离障碍C．图中的单倍体ES细胞应取自囊胚的内细胞团D．AdESCs的染色体组数与大鼠—小鼠体细胞融合的杂种细胞相同10．(2022·山东日照·三模)IRTI基因被称为长寿基因，SIRT1蛋白对于延缓内皮细胞衰老，改善因衰老而引起的内皮细胞功能障碍方面具有重要作用。科学家研究白藜芦醇对人内皮细胞衰老凋亡、SIRTI基因的影响的部分实验结果如下图，其中P1~P35是指体外培养的人内皮细胞的传代次数。下列叙述正确的是()A．人内皮细胞传代培养时，需使用胃蛋白酶处理贴壁生长的内皮细胞B．随着传代次数增加，人内皮细胞内端粒变短，SIRT1表达水平降低C．对照组应使用等量清水处理人内皮细胞，温度等与实验组保持一致D．适宜浓度的白藜芦醇可以提高体外培养的内皮细胞的凋亡率11．(2022·北京·人大附中三模)假设世界上最后一头野驴刚死亡，以下使它“复生”的方案中最可行的是(

)A．将野驴的每个基因逐个导入家驴的受精卵中，培育出新个体B．将野驴的体细胞与家驴的去核卵母细胞融合，经孕育培育出新个体C．将野驴的体细胞与骨髓瘤细胞融合，经动物细胞培养培育出新个体D．将野驴的胚胎干细胞取出，通过胚胎移植等技术培育出新个体12．(2022·山东·日照一中模拟预测)HEK293细胞是人工改造后的人胚肾细胞，为细胞系细胞，具有贴壁生长的特性。分瓶时，一瓶细胞可分到几瓶中培养，这个瓶数称为分瓶比，分瓶数越多，分瓶比越大。下列关于HEK293细胞培养的叙述，错误的是(

)A．在HEK293细胞培养液中加入血清可补充蛋白质和生长因子B．HEK293细胞的培养需要95%空气和5%CO2的气体环境C．分瓶前应用胰蛋白酶处理贴壁生长的HEK293细胞D．分瓶比越大，HEK293细胞分瓶换液的周期越短13．(2022·辽宁·东北育才双语学校模拟预测)1975年，英国科学家米尔斯坦和德国科学家科勒在前人工作的基础上，充分发挥想象力，设计了一个极富创造性的实验方案—得到了单克隆抗体，并因此于1984年获得了诺贝尔生理学或医学奖。下列关于单克隆抗体的说法中错误的是(

)A．在单克隆抗体的制备过程中，采用了动物细胞培养、动物细胞融合等技术B．将单克隆抗体与细胞毒素结合，可实现对肿瘤细胞的选择性杀伤C．诱导原生质体融合的方法也可用于诱导骨髓瘤细胞和B淋巴细胞的融合D．单克隆抗体可进入细胞内，与病原体特异性结合，从而到达治疗疾病的目的14．(2022·山东淄博·三模)利用某种病毒的S蛋白可制备S蛋白的单克隆抗体，下列说法错误的是(

)A．将S蛋白注射小鼠后，S蛋白会激发小鼠产生免疫应答B．聚乙二醇或电激可促进骨髓瘤细胞和已免疫B细胞融合C．可用荧光物质标记的S蛋白抗体对A细胞进行专一性抗体检测D．可以利用S蛋白单克隆抗体检测人体内是否含有该病毒15．(2022·山东烟台·三模)新冠病毒表面的刺突蛋白可特异性结合宿主细胞上的受体CD147，从而介导新冠病毒入侵宿主细胞。单克隆抗体可结合刺突蛋白，阻断刺突蛋白与CD147结合，阻止病毒继续感染新的细胞。下列叙述错误的是(

)A．单克隆抗体的制备过程至少需要两次筛选，筛选的方法不同、目的相同B．克隆化培养用刺突蛋白筛选出的杂交瘤细胞可获得单克隆抗体C．给重症新冠肺炎患者注射针对刺突蛋白的单克隆抗体是一种有效的治疗手段D．参与构成抗体-药物偶联物的单克隆抗体可特异性识别抗原起导向作用16．(2022·辽宁沈阳·二模)目前已有多种抗肿瘤单克隆抗体药物在我国上市，抗肿瘤单克隆抗体以其显著的疗效和良好的耐受性在临床上得到广泛应用，很多恶性肿瘤患者已从中获益。下列有关单克隆抗体制备过程的描述错误的是(

)A．单克隆抗体制备过程需要应用选择培养基B．单克隆抗体的制备过程包括动物细胞融合和动物细胞培养两个过程C．杂交瘤细胞需具备大量增殖和分泌多种抗体的能力D．单克隆抗体除应用于抗肿瘤药物方面，还可应用于肿瘤诊断17．(2022·山东·三模)人乳头瘤病毒(HPV)感染是诱发宫颈癌的重要因素。HPV具有多种类型，其中的HPV16和HPV18属于高危型，可引起宫颈癌及宫颈上皮内高度病变。现对某就诊者的取样细胞进行培养，来进行确诊。下列说法不正确的是(

)A．分散取样的细胞只能采用胰蛋白酶、胶原蛋白酶等处理B．培养取样细胞时，需要为这些细胞提供充足的营养条件、稳定的内环境等C．让取样细胞进行贴壁生长，若产生了接触抑制现象，则不属于HPV高危型D．无论是原代培养还是传代培养，都需将培养瓶放在CO2培养箱中培养18．(2022·山东·烟台二中模拟预测)许多研究表明肿瘤细胞具有高度的可塑性，它可通过调控自身的基因表达来逃避靶向药物的攻击。进一步的研究表明，细胞膜上过表达CLDN6基因可显著增强肿瘤细胞的成瘤性。CLDN6(蛋白)可诱导某些转录调节因子进入细胞核，进而激活下游相关信号转导通路。CLDN6基因在大多数正常组织中不表达。下列说法正确的是(

)A．肿瘤细胞的成因是原癌基因和抑癌基因发生重新组合B．转录调节因子通过核孔进入细胞核，促进DNA聚合酶与启动子结合C．大多数正常组织中CLDN6基因发生突变，故而不表达D．可制备针对CLDN6的单克隆抗体携带药物靶向杀伤肿瘤细胞19．(2022·江苏常州·模拟预测)如图为单克隆抗体制备的基本流程，①～⑤分别代表不同的操作过程。下列相关叙述错误的是(

)A．小鼠受抗原刺激后能从小鼠脾脏中获得已免疫的多种B淋巴细胞B．图示①过程可采用电激、离心、振动等物理方法促进动物细胞融合C．②③过程筛选并获得产特定抗体的杂交瘤细胞的过程中无需克隆化培养D．⑤过程培养液中的细胞不会出现细胞贴壁和接触抑制的现象20．(2022·湖北武汉·模拟预测)我国科学家将小鼠孤雌单倍体胚胎干细胞和大鼠孤雄单倍体胚胎干细胞进行融合，获得异种杂合二倍体胚胎干细胞(AdESCs)，并通过胚胎移植产生全为雌性个体的子代，技术路线如下图。下列分析正确的是(

)A．单倍体胚胎干细胞可来自于单倍体囊胚中的任何一个细胞B．体外培养AdESCs时需在培养液中添加动物血清和干扰素等C．子代全为雌性的原因可能是含Y染色体的胚胎干细胞致死D．实验结果说明了小鼠与大鼠之间不存在生殖隔离21．(2022·湖北·模拟预测)人绒毛膜促性腺激素(HCG)是女性怀孕后胎盘滋养层细胞分泌的一种糖蛋白，制备抗HCG单克隆抗体可用于早孕的诊断。下图是抗HCG单克隆抗体制备流程示意图，下列叙述错误的是(

)A．制备抗HCG单克隆抗体的动物细胞工程技术有动物细胞培养和动物细胞融合B．将纯化HCG注入小鼠是为了从产生免疫反应小鼠的脾脏中获得相应的B淋巴细胞C．图中利用HAT培养液具有选择作用，让能合成抗HCG抗体的细胞大量增殖D．腹水中制备抗HCG单克隆抗体时，需要注射免疫抑制剂，使小鼠易于接纳杂交瘤细胞22．(2022·辽宁·模拟预测)Vero细胞是从非洲绿猴肾脏上皮细胞分离而来，能连续分裂，因基因缺陷，不能产生干扰素，易于病毒感染，常用于病毒疫苗制备中病毒的扩增培养。如图是某种病毒疫苗的制备流程。下列相关叙述中错误的是(

)A．培养Vero细胞的培养箱中需要充入95%的空气和5%的CO2B．培养Vero细胞的合成培养基中需要加入血清等天然成分C．过程①传代培养时，可用胰蛋白酶处理贴壁生长的细胞D．过程②中Vero细胞为病毒的复制提供模板和原材料23．(2022·山东·模拟预测)为制备抗犬冠状病毒(CCV，RNA病毒)特异性单克隆抗体，以灭活的CCV为抗原免疫小鼠4次，将提取的小鼠B淋巴细胞与骨髓瘤细胞用聚乙二醇诱导细胞融合，通过两次筛选获得抗体阳性的杂交瘤细胞，经克隆化培养，获得稳定分泌抗CCV单克隆抗体的杂交瘤细胞。下列叙述正确的是(

)A．免疫小鼠4次的目的是增加小鼠体内的单克隆抗体的量B．实验中使用的B淋巴细胞和骨髓瘤细胞在单独培养时均会出现接触抑制现象C．诱导后需进行两次筛选，第一次筛选的目的是筛选出既能无限增殖又能产生所需抗体的杂交瘤细胞D．利用CCV对杂交瘤细胞进行抗体检测可获得分泌特定抗体的杂交瘤细胞24．(2022·浙江绍兴·二模)为研制抗冠状病毒A的单克隆抗体，研究人员以小鼠甲为实验材料设计了以下实验流程。下列有关叙述中正确的是(

)A．须通过鼻喷冠状病毒A诱导小鼠甲产生相应的效应B细胞B．制备单细胞悬液必须使用胰酶消化小鼠甲的脾组织C．B淋巴细胞与骨髓瘤细胞的融合不可采用聚乙二醇介导的方法D．筛选2依据了抗原与抗体的特异性反应原理，需要进行多次25．(2022·山东·肥城市教学研究中心模拟预测)肺癌、结肠癌等多种肿瘤细胞表面的CD47含量比正常细胞高1.6~5倍，导致巨噬细胞对肿瘤细胞的清除效果减弱。CD47作为一种跨膜糖蛋白。它可与巨噬细胞表面的信号调节蛋白结合，从而抑制巨噬细胞的吞噬作用。为证明抗CD47的单克隆抗体可以解除CD47对巨噬细胞的抑制作用，科学家按照如下流程进行了实验。下列叙述不正确的是(

)A．多次进行步骤①的目的是获得更多分泌抗CD47抗体的浆细胞B．步骤②中可以利用聚乙二醇或灭活的病毒诱导完成细胞融合C．对照组应在巨噬细胞＋正常细胞共培养体系中加入单克隆抗体D．经筛选可得到既能产生抗CD47的抗体又能无限增殖的杂交瘤细胞26．(2022·江苏泰州·三模)我省研究人员利用体细胞核移植技术成功培育出苏淮猪“龙凤胎”，主要步骤如下。相关叙述错误的是(

)步骤①：分离培养一对苏淮猪的耳组织体细胞，低温保存。步骤②：从其他品种母猪卵巢中获取卵母细胞并培养。步骤④：将不同性别的多个胚胎移植到代孕母猪体内。步骤⑤：孕育出苏淮小猪“龙凤胎”。A．步骤①分离获取苏淮猪耳组织体细胞时需要使用胰蛋白酶、动物细胞培养液等B．步骤②培养卵母细胞时，应一直培养到卵母细胞外出现1个极体C．步骤③可将步骤①获得的体细胞直接显微注射到培养成熟的卵母细胞中D．步骤④移植胚胎的性别可依据步骤①提供体细胞个体的性别确定27．(2022·山东菏泽·二模)如图是科研人员将药物与单克隆抗体连接形成的抗体—药物偶联物(ADC)的示意图，它由抗体、接头和小分子药物三部分组成，能实现对肿瘤细胞的选择性杀伤。例如用于治疗乳腺癌的Kadcyla是由阿多曲妥珠单抗和药物美坦新偶联的ADC。下列叙述正确的是(

)A．Kadcyla的制备过程需要使用Taq酶B．单克隆抗体由免疫过的B淋巴细胞以胞吐方式释放C．药物美坦新识别并杀伤乳腺癌细胞体现了抗原—抗体的特异性结合D．ADC中接头稳定性偏低会导致药物分子容易脱落对正常细胞造成损伤28．(2022·四川·攀枝花教科所一模)2020年5月，中国科研团队发现了可有效阻断新冠病毒(SARS–CoV–2)感染的单克隆抗体，可用于抗新冠药物和疫苗的研发。该单克隆抗体如注射进入人体，将抢先与新冠病毒的刺突蛋白(S蛋白)结合，使病毒无法感染人体细胞，从而被免疫系统清除。如图是单克隆抗体制备过程示意图，1–6代表相关过程，a–e代表相关细胞。请据图回答下列问题：(1)生产单克隆抗体一般不宜直接培养免疫过的B淋巴细胞，主要原因是_______；通过过程5或6生产的单克隆抗体的优点是_______。(2)过程1是_______，目的是刺激小鼠产生能分泌相应抗体的B淋巴细胞，过程2的培养基中除具有图示三种细胞外，还应该有_______。(3)e细胞是_______，其优点是_______。(4)与动物细胞融合相比，植物细胞在融合前需用_______处理掉细胞壁，融合完成的标志是_______。29．(2022·青海·海东市第一中学模拟预测)研究发现，新冠病毒外壳中的S蛋白是关键抗原，可利用其制备单克隆抗体，制备流程如下图。请回答有关问题：(1)单克隆抗体技术是建立在________________技术和________________技术的基础之上的。(2)③和⑤过程，需要用到的工具酶是________________________。(3)体外培养细胞Y时，首先应保证其处于____________的环境，其次还要适宜的温度、pH、营养和气体环境，这里的气体环境是指____________________________________。(4)prG能激发细胞不断分裂，通过基因工程导入prG可制备单克隆抗体。受体细胞X是__________________，细胞Y具有_________________________的特点。(5)单克隆抗体可用于诊断人体是否携带新冠病毒，其诊断原理是____________________。30．(2022·广东·深圳市光明区高级中学模拟预测)2021年12月，我国首个抗新型冠状病毒特效药——安巴韦单抗／罗米司韦单抗联合疗法特效药获得中国药监局的上市批准，这标志着中国拥有的首个全自主研发并证明有效的抗新型冠状病毒特效药正式问世。安巴韦单抗／罗米司韦单抗联合疗法，主要作用以治疗为主，临床实验数据显示，该特效药能够显著降低高风险新型冠状病毒门诊患者的住院率和死亡率，这为新冠患者提供了更长的治疗窗口期。回答下列相关问题：(1)安巴韦单抗／罗米司韦单抗联合疗法特效药可以直接与新型冠状病毒结合，从而抑制___________，使患者快速恢复。(2)目前我国各地在推行第三针加强针的新冠疫苗接种工作，接种加强针能够更有效预防新型冠状病毒的感染，其原因是___________________。(3)利用小鼠制备的单克隆抗体药物在临床上不能直接用于人体，还需要对抗体进行人源化，即对鼠源单克隆抗体进行改造，使其大部分氨基酸序列为人源序列所替代，这样做的原因是_____________________。(4)科学家从某些无限增殖细胞的细胞质中分离出无限增殖调控基因(prG)，该基因能激发动物细胞分裂，这为单克隆抗体的制备提供了更多的思路。除利用细胞融合技术外，请简要写出另外两个制备单克隆抗体的思路：_____________________。[答案](1)病毒的繁殖和对人体细胞的黏附##病毒的繁殖(2)接种加强针后人体内可以产生更多的抗体和记忆(B)细胞(3)鼠源单克隆抗体对人而言可能是异种抗原，经人源化后能保留抗体的特异性，降低其异源性(4)思路1：通过基因工程将prG基因导入B淋巴细胞(浆细胞)中思路2：通过细胞核移植技术将B淋巴细胞(浆细胞)的细胞核移植到去核的能无限增殖的细胞中31．(2022·上海金山·二模)科学家发现T淋巴细胞中存在PD-1基因，所表达的PD-1蛋白分布于T淋巴细胞表面，能抑制T淋巴细胞增殖，促进T细胞凋亡；PD-L1蛋白分布于吞噬细胞表面，对T淋巴细胞增殖有影响。以小鼠为实验对象，实验结果如图9所示(图中PD-1-/-表示PD-1基因缺失小鼠；PD-1+/+表示携带该基因的正常小鼠；非特异性蛋白表示与PD-1不能结合的蛋白质)。(1)据图实验结果所示，对小鼠T淋巴细胞增殖能力有明显影响的实验组是___________(A/B/C/D)，该实验组的实验变量分别是___________。(2)图中CD组对照表明：___________；AB组对照表明：___________。进一步研究发现，肿瘤细胞表面也表达PD-L1蛋白，且能与Ⅰ淋巴细胞表面PD-1特异性结合。为研究肿瘤细胞逃脱免疫监视的机制，研究者将肿瘤细胞分别注射给具有PD-1基因的正常小鼠(WT)和PD-1基因缺失小鼠(PD-1-/-)，待小鼠长出肿瘤后切除、称重并计数，实验结果如图10(a)(b)所示。(3)据图可知，WT组的小鼠肝脏肿瘤细胞个数较PD-1基因缺失小鼠显著_____________(增多/减少)，而T淋巴细胞数目显著_____________(升高/下降)；根据2次实验推测肿瘤细胞表面的PD-L1与T淋巴细胞表面的PD-1特异性结合，_____________(抑制/促进)T淋巴细胞的增殖，从而逃脱被T淋巴细胞的“追杀”。(4)理论上，利用单克隆抗体特异性强的优势，阻断肿瘤细胞对T淋巴细胞的抑制作用，可通过制备___________抗体在临床上应用。A．PD-L1 B．PD-1 C．PD-1+/+ D．PD-1-/-32．(2022·天津·耀华中学二模)新冠病毒(SARS-CoV-2)是一种RNA病毒，病毒的刺突蛋白S是决定病毒入侵易感细胞的关键蛋白(图1)，可与宿主细胞的病毒受体结合。快速准确的病毒检测对疫情防控起着至关重要的作用。(1)由图可知，新冠病毒通过_____方式入侵宿主细胞。(2)制备病毒灭活疫苗时，先培养能表达_____的细胞，再接入新冠病毒培养，对病毒进行灭活处理后制备疫苗。(3)目前检测新冠病毒的方法主要有核酸检测、抗原检测和抗体检测三大类。①核酸检测：能够早诊断、早隔离、早治疗，防扩散。核酸检测用鼻(咽)拭子采样后，马上将拭子投入病毒运送培养液中(含_____酶抑制剂，以保护样本)。新冠病毒的核酸不能直接作为模板进行PCR扩增，必须先经过_____过程成为DNA。②抗原检测：该方法的免疫学原理是_____，需要借助动物细胞融合技术制备高特异性的_____。抗原检测可在非实验室的环境中较快完成，但灵敏度比核酸检测差，是对现有核酸检测方法的一种补充。③抗体检测：该方法的原理如图2所示。将稀释的血样滴加到试纸条的样品垫上。结合垫上喷涂了胶体金(一种指示剂，聚集后呈红色)标记的新冠病毒抗原，若血清样本中含新冠病毒抗体，则二者形成复合物后继续向前移动，被固定在检测线(T线)上的鼠抗人IgG抗体拦截(注：IgG为血浆中的主要抗体类型)，进而聚集在T线上，产生红色条带；结合垫上喷涂的胶体金标记鼠IgG随液体移动，被固定在质控线(C线)上的羊抗鼠IgG抗体拦截，呈现红色条带，表明本次检测有效。若待测血样中含有新冠病毒抗体，即结果为阳性，则此过程中共发生了_____