2025年上外版选择性必修3生物上册月考试卷含答案

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①限制酶②连接酶③解旋酶④还原酶A.①②B.③④C.①④D.②③2、下列关于限制酶的说法不正确的是（）A.一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列，体现了酶的专一性B.限制酶在特定的位点上切割DNA分子C.限制酶可以断开两条DNA链之间的氢键D.在基因工程的操作中，一般选用同一限制酶切割目的基因与运载体，以获得相同的黏性末端3、樱桃果实富含糖、蛋白质、维生素等多种物质，但不易储存，人们常利用其酿制成果酒、果醋。下列相关叙述正确的是（）A.制作果酒时的温度要比制作果醋时的温度低B.制作果酒时，需要对樱桃和发酵装置进行消毒C.发酵过程中，醋酸菌与酵母菌的呼吸方式相同D.醋酸菌在糖源充足、有氧条件下利用乙醇进行发酵4、米酒、酸奶、泡菜等都属于传统发酵制品，相关叙述正确的是（）A.制作米酒时添加“酵头”的目的是接种酿酒酵母B.米酒发酵液中冒出的“气泡”都来源于酵母菌无氧呼吸C.酸奶和泡菜制作中均需要及时通氧，保证乳酸菌的有氧呼吸D.为降低杂菌污染，发酵前需要对器具、原料等进行灭菌5、图甲、乙中的箭头表示三种限制性内切核酸酶的酶切位点，ampt表示氨苄青霉素抗性基因；neo表示新霉素抗性基因。下列叙述正确的是（）

A.图甲中的质粒用BamHI切割后，含有4个游离的磷酸基团B.在构建重组质粒时，可用PstI和BamHI切割质粒和外源DNAC.用PstI和HindⅢ切割，可以保证重组DNA序列的唯一性D.导入目的基因的大肠杆菌可在含氨苄青霉素的培养基中生长6、《书经》中的“若作酒醴，尔惟曲孽”提到酿酒必须要用酒曲。酒曲是以谷物为原料，破碎加水压制而成的。酒曲富含酵母菌和霉菌等多种微生物，经水浸泡活化后投入蒸熟的米即可用于酿酒。下列叙述错误的是（）A.酒曲中霉菌分泌的蛋白酶可将蛋白质分解为小分子肽和氨基酸B.夏季气温升高，需用煮沸的水浸泡酒曲以防杂菌污染C.酒曲经水浸泡活化有利于提高酶的活性和酵母菌的代谢D.酿酒过程中，待蒸熟的米冷却后才能加入酒曲7、生物技术的安全性和伦理问题是社会关注的热点。下列叙述属于理性看待生物技术的是（）A.某些转基因食品会引起过敏反应，要禁止转基因技术的应用B.克隆技术与社会伦理有冲突，要禁止治疗性克隆技术的应用C.严格选择转基因植物的目的基因，避免产生对人类有害的物质D.利用基因编辑技术来制造新型的致病菌，可用来生产生物武器评卷人得分二、多选题(共6题，共12分)8、下列有关生殖细胞的发生和受精过程的叙述正确的是（）A.雄原核形成的同时，卵子完成减数第二次分裂B.透明带反应是防止多精入卵的第一道屏障C.精子与卵细胞膜相互融合，精子入卵D.卵子是从动物的初情期开始，经过MⅠ和MⅡ两次连续分裂形成的9、良种试管牛的繁殖过程是用激素促进甲牛多排卵，然后把卵母细胞在体外与人工采集的乙牛的精子进行受精，在特定培养基上培育成胚胎，再把胚胎送入经过激素处理的丙牛的子宫内，孕育成试管牛。下列相关叙述正确的是（）A.“用激素促进甲牛多排卵”的激素是孕激素B.产生试管牛的生殖方式属于有性生殖C.甲牛、乙牛对试管牛核基因的贡献相同D.该技术可应用于加速优良种畜的繁殖10、下列关于DNA粗提取与鉴定、DNA片段的扩增及电泳鉴定的原理的叙述正确的是（）A.利用DNA不溶于酒精，但蛋白质均溶于酒精的原理，可分离DNA与蛋白质B.利用在一定温度下DNA遇二苯胺试剂会呈现蓝色的原理对粗提取的DNA进行鉴定C.PCR技术利用了DNA的热变性原理，通过调节温度来控制DNA双链的解聚与结合D.电泳鉴定DNA利用了DNA在电场中会向着它所带电荷相反的电极移动的原理11、以纯化鉴定后的重组大肠杆菌RecQ解旋酶免疫小鼠（2n=40），融合免疫小鼠的脾细胞及骨髓瘤细胞（2n=62-68），筛选杂交瘤细胞，制备抗RecQ解旋酶单克隆抗体（mAb），相关检测结果如图A、B所示。有关说法正确的是（）

图A杂交瘤细胞染色体数目图B不同浓度mAb对RecQ蛋白结合DNA活性的影响A.重组大肠杆菌RecQ解旋酶可刺激相应B淋巴细胞增殖分化B.单克隆抗体的制备过程中需要进行2次筛选和2次抗原检测C.杂交瘤细胞在融合的过程中可能会发生染色体数目的丢失D.该mAb能特异性与RecQ解旋酶结合，在稀释度为1/800时可显著抑制RecQ解旋酶与DNA的结合12、下列关于微生物发酵的叙述，错误的是（）A.制备培养基过程中，需要在灭菌后进行pH的调节B.制作果酒时适当加大接种量可以提高发酵速率，抑制杂菌生长C.现代发酵工程选育出性状优良的菌种后即可进行发酵罐内的发酵D.醋酸菌能将乙醇变成乙醛而后变为乙酸，故夏天开瓶后的红酒容易变酸13、利用枯草芽孢杆菌的发酵可以生产亮氨酸脱氢酶。在启动子和亮氨酸脱氢酶基因之间插入信号肽（SPN）基因并将重组质粒导人枯草芽孢杆菌构建工程菌，可提高亮氨酸脱氢酶的生产水平。重组质粒的构建如图所示，KmR为卡那霉素抗性基因，ApR为氨苄青霉素抗性基因，图中各限制酶切割产生的黏性末端不同。下列叙述正确的是（）

A.重组质粒pMA5-SPN-leudh除图中标注外还应具有终止子、复制原点等结构B.构建重组质粒用NdeI和BamHI两种酶有助于正确插入目的基因C.图中KmR和ApR存在于质粒中的作用是便于重组DNA分子的筛选D.图中各限制酶切开的是氢键和磷酸二酯键，切下的DNA片段拼接需依靠DNA连接酶评卷人得分三、填空题(共5题，共10分)14、通过统计平板上的________________，就能推测出样品中大约含有多少活菌。为了保证结果准确，一般选择菌落数在_________________________的平板进行计数。15、基因进入受体细胞的______——“分子运输车”16、基因工程取得了突飞猛进的发展。_____、_____等技术的应用不仅使生命科学的研究发生了前所未有的变化，而且在实际应用领域，如____、_____、_____、______等方面也展示出美好的应用前景。抗虫棉中的抗虫基因来自_____，抗虫基因作物的使用，不仅减少了_____，降低了____，而且还减少了_____。17、纯化DNA，去除杂质有________________个方案。18、蛋白质工程是指以______作为基础，通过______，对现有蛋白质进行_____，或制造一种______，以满足人类的生产和生活的需求。（基因工程在原则上只能生产______的蛋白质）

评卷人得分四、判断题(共2题，共16分)19、目前，种植的转基因作物中以水稻和小麦最多，其次是转基因棉花和油菜（______）A.正确B.错误20、通过体细胞核移植技术已经获得了多种克隆动物，该技术的成功率已经很高。（选择性必修3P54）()A.正确B.错误评卷人得分五、实验题(共2题，共10分)21、【生物技术实践】

科学家发现家蝇体内存在一种抗菌活性蛋白；这种蛋白质具有极强的抗菌能力，受到研究者重视。

（1）分离该抗菌蛋白可用电泳法，其原理是根据蛋白质分子的______________、大小及形状不同，在电场中的________不同而实现分离。

（2）可用金黄色葡萄球菌来检验该蛋白的抗菌特性。抗菌实验中所用培养基中的牛肉膏和蛋白胨主要为细菌生长提供_________和_______________。

（3）分别在加入和未加入该抗菌蛋白的培养基中接种等量菌液。培养一定时间后，比较两种培养基中菌落的_____________；确定该蛋白质的抗菌效果。

（4）细菌培养常用的接种方法有_______和___________。实验结束后，对使用过的培养基应进行_____________处理。22、某些老陈醋会出现产气现象；原因是老陈醋中含有产气细菌。产气细菌是一类能产生过氧化氢酶的细菌，产气菌产生的气体积累会引起胀瓶，影响产品安全。实验小组以瓶装变质老陈醋（胀瓶）；未变质老陈醋为实验材料，筛选出导致老陈醋产气的细菌。回答下列问题：

(1)为了筛选产气细菌，实验人员设置了甲、乙、丙三组培养基，甲作为空白对照组，乙接种未变质的老陈醋，丙接种__________。阐述如何从上述培养基中初步筛选疑似产气细菌的菌株：__________。

(2)实验小组初步筛选出了A1；A2和A3三株疑似的产气细菌；筛选过程如下图所示。

①过程a的接种方法是__________，判断依据是__________。

②统计菌落种类和数量时要每隔24h观察统计一次，直到各类菌落数目稳定，以防止培养时间不足导致__________，或培养时间太长导致__________。

③现有5%的过氧化氢溶液，A1、A2和A3菌株，必要的培养基等实验器材。写出判断A1、A2和A3三种菌株是否为产气细菌的实验思路：__________。

(3)分别用三组平板培养A1、A2、A3三种菌株，然后在培养基上分别加入等量一定浓度的青霉素溶液，培养一段时间后可以观察到一圈清晰区（抑菌圈），这是细菌生长被抑制所致。测量清晰区的直径，数据如下表所示：。细菌不同浓度青霉素条件下清晰区直径/mm5/（μg·mL-1）7.5/（μg·mL-1）10/（μg·mL-1）15/（μg·mL-1）20/（μg·mL-1）20/（μg·mL-1）A10.2281317A2710121516A356566

该实验的目的是__________。从表中数据可以看出，5μg·mL-1青霉素和20μg·mL-1青霉素在抑制A1和A3菌株上的区别是__________、__________。评卷人得分六、综合题(共3题，共24分)23、治疗性克隆有望解决供体器官的短缺和器官移植出现的排斥反应；如图表示治疗性克隆的过程：

请根据材料回答下列问题：

（1）为治疗遗传性糖尿病，需要进行基因改造。构建胰岛素基因表达载体，需要用到的工具酶为限制性核酸内切酶和___________质粒载体作为基因工程的工具，应具备的基本条件有_____________（答出一点即可）

（2）科学家常选用卵母细胞作为受体细胞。目前核移植技术中普遍使用的去核方法是___________法还有人采用梯度离心，紫外光短时间照射、化学物质处理等方法。这些方法是在没有刺破透明带或卵母细胞质膜的情况下，去除细胞核或使卵细胞核DNA__________；从而达到去核的目的。

（3）在合适的条件下，进行C过程细胞学基础是细胞的增殖和_______，使其发育成为人体的任何一个器官，包括大脑肌肉血液和神经，这些器官组织将用于医疗究其本质原因是基因_______的结果。

（4）我国禁止生殖性克隆，但不反对治疗性克隆的研究，请你谈谈为什么要反对克隆人了（至少写出两条理由）。________________24、肠道病毒EV71是RNA病毒；其表面蛋白为VP1～VP4，分别由V1～V4基因控制。为研究VP1～VP4的抗原性，从中筛选出EV71的疫苗抗原，研究人员利用基因工程技术生产了上述4种蛋白质。如图是制备V1基因表达载体的过程示意图，请回答下列问题：

gus：控制合成的酶使β-葡萄糖苷酸水解为蓝色物质。

Kan：卡那霉素抗性基因。

（1）以RNA为模板，通过4组RT-PCR可分别获取V1～V4基因（DNA）。RT-PCR所需要的酶有_____，该过程中子链延伸时所需的能量较为特殊，一般来自_____。

（2）为方便目的基因与质粒的连接，通常将限制酶的切点设计在引物上。引物一般为单链DNA，新合成子链的延伸方向为5’→3’。PCR获取V1基因时，10引物中限制酶切点的碱基序列应设计为上游引物3’_____5’，下游引物3’_____5’。

（3）用相关限制酶处理质粒和V1基因后，再与_____酶混合，加入大肠杆菌温育。一段时间后，将菌液涂布在含有_____和_____的平板上，经培养，在平板上长出白色和蓝色两种菌落，其中_____菌落含有V1基因表达载体，判断依据是_____。25、糖化酶是将淀粉转化为葡萄糖的酶，大部分野生酵母菌因缺乏糖化酶基因而不能直接利用淀粉。研究人员将经诱变处理后获取的黑曲霉菌高产糖化酶基因导入毕赤酵母CS115（对氨苄青霉素不敏感）中，构建能直接利用淀粉的工程菌，该过程所用质粒（仅示部分结构）如图1所示。质粒的外侧链为a链，内侧链为b链。基因Ampr转录的模板链属于b链的片段。三种限制酶的识别序列及切割位点见下表。请回答下列问题。限制酶BamHIPstIXbaI识别序列和切割位点（5′→3′）G↓GATCCC↓TGCAGT↓CTAGA

(1)为获得糖化酶高产菌株，研究人员将经诱变处理后的黑曲霉菌接种到___________含量高的培养基上，恒温培养适宜时间后滴加碘液，挑选出透明圈（不产生蓝色）直径___________的菌株；再进行复筛以及稳定性遗传实验。

(2)质粒复制的模板链是___________（选填“a”、“b”、“a和b”、“a或b”）链。高产糖化酶基因插入质粒后，其转录的模板链属于___________链的片段。

(3)构建高产糖化酶基因表达载体时，使用限制酶切割pPIC9K，37℃，15min后需将温度升高至65℃并保温20min，目的是使___________，从而终止酶切反应。图2是高产糖化酶基因示意图（仅示部分碱基），为使其能定向插入表达载体并成功表达，则PCR扩增时引物的碱基序列为___________。

①5′-TCTAGATCTGTTGAAT-3′②5′-TCTAGAAGACAACTTA-3′

③5′-CTGCAGCTTGGATGAT-3′④5′-GGATCCCTTGGATGAT-3′

⑤5′-GGATCCGAACCTACTA-3′⑥5′-CTCGAGTCTGTTGAAT-3′

(4)毕赤酵母GS115是一种组氨酸营养缺陷型微生物，自身不能合成生长必需的组氨酸，因此可利用________的基础培养基（不含淀粉）初步筛选导入高产糖化酶基因表达载体的毕赤酵母GS115，再将筛选出的细胞转接至含甲醇的培养液中进行发酵产酶性能测定。参考答案一、选择题(共7题，共14分)1、A【分析】【分析】

基因工程的工具：（1）限制酶：能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列；并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂；（2）DNA连接酶：连接的是两个核苷酸之间的磷酸二酯键；（3）运载体：常用的运载体：质粒；噬菌体的衍生物、动植物病毒。

【详解】

在基因工程的操作中；首先用限制酶进行切割目的基因和运载体，使二者产生相同的黏性末端，再用DNA连接酶使目的基因与对应的运载体连接，以便得到重组DNA，因此要使目的基因与对应的载体重组，所需的两种酶是①②。A正确。

故选A。

【点睛】2、C【分析】【分析】

关于限制酶；考生可以从以下几方面把握：（1）来源：主要从原核生物中分离纯化出来。（2）特异性：能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂。（3）结果：形成黏性末端或平末端。

【详解】

ABC；一种限制酶只能识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列；并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂，可见，限制酶在特定的位点上切割DNA分子，体现了酶的特异性，A、B正确，C错误；

D；在基因工程的操作中；一般选用同一限制酶切割目的基因与运载体，以获得相同的黏性末端，D正确。

故选C。3、A【分析】【分析】

1、参与果酒制作的微生物是酵母菌，其新陈代谢类型为异养兼性厌氧型，果酒制作的原理：（1）在有氧条件下，反应式如下：C6H12O6+6H2O+6O26CO2+12H2O+能量；（2）在无氧条件下，反应式如下：C6H12O62CO2+2C2H5OH+能量。

2；参与果醋制作的微生物是醋酸菌；其新陈代谢类型是异养需氧型。果醋制作的原理：当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将果汁中的果糖分解成醋酸；当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。

【详解】

A；制果酒的温度（18～25℃）要比制果醋的温度（30～35℃）低；A正确；

B；利用樱桃制作果酒时；需要对发酵瓶进行消毒处理，但不需要对樱桃进行消毒处理，否则会杀死樱桃果子上的菌种酵母菌，B错误；

C；酵母菌是兼性厌氧微生物；可以进行有氧呼吸，在发酵过程中，酵母菌进行无氧呼吸；醋酸菌是需氧微生物，只能进行有氧呼吸，C错误；

D；当氧气、糖源都充足时；醋酸菌将果汁中的果糖分解成醋酸；当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸，D错误。

故选A。

【点睛】4、A【分析】【分析】

1；参与果酒制作的微生物是酵母菌；其新陈代谢类型为异养兼性厌氧型。果酒制作的原理：(1)在有氧条件下，酵母菌进行有氧呼吸大量繁殖；(2)在无氧条件下，酵母菌进行无氧呼吸产生酒精和二氧化碳。

2；泡菜的制作原理：泡菜的制作离不开乳酸菌。在无氧条件下；乳酸菌将葡萄糖分解成乳酸。

【详解】

A；利用酵母菌的无氧呼吸可制作米酒；制作米酒时添加“酵头”的目的是接种酿酒酵母，A正确；

B；米酒发酵液中冒出的“气泡”既来源于酵母菌无氧呼吸；也来源于酵母菌的有氧呼吸，B错误；

C；酸奶和泡菜的制作利用的微生物是乳酸菌；而乳酸菌是厌氧菌，因此酸奶和泡菜制作中不需要通氧，要保证乳酸菌的无氧呼吸，C错误；

D；发酵前不能对原料进行灭菌；否则把原料中的发酵菌种都杀死了，D错误。

故选A。5、C【分析】【分析】

根据题意和图示分析可知：质粒和外源DNA分子都含有三种限制酶切点，即限制酶BamHⅠ、PstⅠ和HindIII，其中BamHⅠ切割位点在目的基因上，所以不能用该酶切割外源DNA了，用PstⅠ和HindIII酶切质粒切成两个片段，用PstⅠ和HindIII酶能将外源DNA切成三段，只有含目的基因的片段通过DNA连接酶与质粒连接形成的重组质粒符合要求，而另一个重组质粒无目的基因，不符合要求．导入目的基因的大肠杆菌，其重组质粒是用PstⅠ和HindIII酶切割的，其中的Ampr（氨苄青霉素抗性基因）已被破坏；不能抗氨苄青霉素。

【详解】

A；图甲中的质粒用BamHI切割后；获得一个DNA片段，其只含有2个游离的磷酸基团，A错误；

B；在构建重组质粒时；不能使用BamHI切割外源DNA，因为用BamHI切割会破坏目的基因的结构，但可以用PstI和HindⅢ切割质粒和外源DNA，B错误；

C；用PstI和HindⅢ切割质粒会得到2个DNA片段；再加入DNA连接酶，切开的质粒由于黏性末端不同，不会自身连接，从而保证只能得到一种符合要求的重组质粒，即含有目的基因和标记基因neo的重组质粒，保证了重组DNA序列的唯一性，C正确；

D；由于用PstI切割质粒后；其中的氨苄青霉素抗性基因会被破坏，所以导入目的基因的大肠杆菌不能在含氨苄青霉素的培养基中生长，D错误。

故选C。

【点睛】6、B【分析】【分析】

家庭制作米酒利用的是酵母菌发酵原理；酵母菌在有氧和无氧的条件下都能生活，有氧条件下，酵母菌把葡萄糖分解成二氧化碳和水，释放出较多的能量；无氧条件下，酵母菌则把葡萄糖分解成二氧化碳和酒精，释放出较少的能量。

酵母菌是异养兼性厌氧型微生物，酵母菌进行酒精发酵的反应式是C6H12O6→2C2H5OH+2CO2+能量。

【详解】

A；酒曲中霉菌可以分泌蛋白酶；分泌的蛋白酶可将蛋白质分解为小分子肽和氨基酸，A正确；

B；酵母菌的生活需要适宜的温度；用煮沸的水浸泡酒曲会将酒曲内的微生物杀死，B错误；

C；酒曲浸水后酵母菌得到更多的水分；新陈代谢增强，有利于提高酶的活性和酵母菌的代谢，产生大量能量使酵母菌进行繁殖，C正确；

D；刚蒸熟的糯米温度很高；如果不冷却直接加入酒曲，高温会破坏或杀死酒曲中的酵母菌，达不到制作米酒的目的，D正确。

故选B。7、C【分析】【分析】

转基因生物的安全性问题：食物安全（滞后效应；过敏源、营养成分改变）、生物安全（对生物多样性的影响）、环境安全（对生态系统稳定性的影响）。转基因食品、产品上都要标注原料来自转基因生物；如“转基因××”“转基因××加工品（制成品）”“加工原料为转基因××”“本产品为转基因××加工制成”。对于转基因食物潜在隐患要进行开展风险评估、预警跟踪等措施多环节、严谨的安全性评价，保障了现代生物技术的安全性。

【详解】

A；转基因等技术是把双刃剑；要发展有利的一面，限制有危害的一面，不能因噎废食，A错误；

B；治疗性克隆有助于疾病的治疗；较少涉及伦理道德问题，当今社会的普遍观点是禁止克隆人的实验，但不反对治疗性克隆，B错误；

C；严格选择转基因植物的目的基因；可避免产生对人类有害的物质，减少人们对转基因食物安全的担忧，属于理性看待生物技术的，C正确；

D；利用转基因技术制造新型致病菌用于医学研究；禁止生产生物武器，D错误。

故选C。二、多选题(共6题，共12分)8、A:B:C【分析】【分析】

在受精作用过程中；精子头部的顶体首先释放顶体酶，发生顶体反应；然后精子穿越放射冠和透明带，此时透明带发生透明带反应，这是防止多精入卵的第一道屏障；接着精子进入卵黄膜，此时会发生卵黄膜封闭作用；此时卵细胞才真正完成减数分裂，并释放第二极体；精子的细胞核和卵细胞的细胞核分别形成雄原核和雌原核，即雌；雄原核的形成；最后核膜消失，雌、雄原核融合，标志着受精作用的完成。

【详解】

A；雄原核形成与卵子完成减数第二次分裂是同时进行的；A正确；

B；精子触及卵黄膜的瞬间；发生透明带反应，阻止其他精子进入，是防止多精入卵受精的第一道屏障，B正确；

C；精子的细胞膜与卵黄膜融合后；精子入卵，C正确；

D；卵子的发生开始于胎儿期性别分化之后；减数第一次分裂和减数第二次分裂是不连续的，D错误。

故选ABC。

【点睛】9、B:C:D【分析】【分析】

良种试管牛的繁殖过程：对供体和受体的选择和处理（同期发情处理；超数排卵处理）；配种或进行人工授精、对胚胎的收集检查培养或保存、进行胚胎移植。

【详解】

A；处理供体甲牛的激素可能是促性腺激素；使其超数排卵，A错误；

B；产生试管牛的过程中经过了两性生殖细胞的融合过程；因此试管牛产生的生殖方式属于有性生殖，B正确；

C；母本甲牛提供卵细胞、父本乙牛提供精子；试管牛细胞核中基因一半来源于父方，一半来源于母方，C正确；

D；体外受精和早期胚胎发育、胚胎移植等技术可以缩短繁殖周期；增加一生繁殖的后代数量，即该技术可充分发挥优良雌性个体的繁殖潜力，D正确。

故选BCD。

【点睛】10、B:C:D【分析】【分析】

DNA粗提取和鉴定的原理：

（1）DNA的溶解性：DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度NaCl溶液中溶解度不同；DNA不溶于酒精溶液；但细胞中的某些蛋白质溶于酒精；DNA对酶；高温和洗涤剂的耐受性。

（2）DNA的鉴定：在沸水浴的条件下；DNA遇二苯胺会被染成蓝色。

【详解】

A；DNA不溶于酒精溶液；但细胞中的某些蛋白质溶于酒精，可将DNA与蛋白质分离，A错误；

B；在沸水浴的条件下；DNA遇二苯胺会被染成蓝色，B正确；

C；PCR是一种体外扩增DNA片段的技术；利用了DNA热变性原理，通过调节温度来控制DNA双链的解聚与结合，包括：高温变性（解链）→低温复性→中温延伸三个步骤，C正确；

D；由于同性相斥、异性相吸；带电分子会向着与其所带电荷相反的电极移动，电泳鉴定DNA利用了DNA在电场中会向着它所带电荷相反的电极移动的原理，D正确。

故选BCD。11、A:C:D【分析】【分析】

单克隆抗体的制备过程是：对小动物注射抗原；从该动物的脾脏中获取效应B细胞，将效应B细胞与骨髓瘤细胞融合，筛选出能产生单一抗体的杂交瘤细胞，克隆化培养杂交瘤细胞(体内培养和体外培养)，最后获取单克隆抗体。

【详解】

A；重组大肠杆菌RecQ解旋酶相当于抗原；能刺激机体产生相应的体液免疫应答，则在人体内可刺激B细胞增殖分化为浆细胞和记忆B细胞，A正确；

B；单克隆抗体的制备过程中需要进行2次筛选和1次抗原检测；第一次是用选择性培养基筛选出杂交瘤细胞；第二次是通过克隆化培养和抗体检测，进一步筛选出能产生人们所需要抗体的杂交瘤细胞，B错误；

C；据图1分析；染色体数目有为80-93的细胞，免疫小鼠中B淋巴细胞染色体数目为40，骨髓瘤细胞染色体数目为62-68，两者之和大于80-93，故杂交瘤细胞在融合的过程中可能会发生染色体数目的丢失，C正确；

D、据图2分析，单抗稀释度为1/800时RecQ解旋酶结合DNA活性最低，可知mAb能特异性与RecQ解旋酶结合可显著抑制RecQ解旋酶与DNA的结合；D正确。

故选ACD。12、A:C【分析】【分析】

果酒的制作利用酵母菌的无氧呼吸产生酒精；醋酸菌在糖源；氧气充足时；直接将葡萄糖氧化为醋酸；在糖源不足、氧气充足时，可利用酒精，即乙醇作为呼吸底物，先将乙醇变成乙醛而后变为乙酸（醋酸）。

【详解】

A；制备培养基过程中；pH的调节应在灭菌前进行，A错误；

B；制作果酒时适当加大接种量；酵母菌菌体的基数增大，可使其快速形成优势菌群，抑制杂菌生长，提高发酵速率，B正确；

C；现代发酵工程选育出性状优良的菌种后；为满足发酵过程的需要，还要对菌种进行扩大培养，之后才可进行发酵罐内的发酵，C错误；

D；醋酸菌能够氧化酒精产生醋酸；造成葡萄酒的败坏。首先，乙醇被氧化生成乙醛，然后乙醛再被氧化生成醋酸（乙酸），故夏天开瓶后的红酒容易变酸，D正确。

故选AC。13、A:B:C【分析】【分析】

限制酶能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列；并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂，形成黏性末端和平末端两种。

【详解】

A；重组质粒pM5-SPN-leudh中除图中标注外；还应该具有终止子，复制原点等结构，A正确；

B；NdeI和BamHI两种酶切割形成的黏性末端不同；构建重组质粒用NdeI和BamHI两种酶切有助于目的基因正确插入，B正确；

C；KmR和A_pR为标记基因；图中KmR和A_pR存在于质粒中的作用是便于重组DNA分子的筛选，C正确；

D；限制酶和DNA连接酶的作用部位为磷酸二酯键；D错误。

故选ABC。三、填空题(共5题，共10分)14、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】菌落数30～30015、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】载体16、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】基因转移基因扩增医药卫生农牧业、食品工业环境保护苏云金杆菌农药的用量生产成本农药对环境的污染。17、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】318、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】蛋白质分子的结构规律及其生物功能的关系基因修饰或基因合成改造新的蛋白质自然界已存在四、判断题(共2题，共16分)19、B【分析】【详解】

目前，种植的转基因作物中以大豆和玉米最多，其次是转基因棉花和油菜，所以错误。20、B【分析】【详解】

目前；用体细胞核移植技术得到克隆动物的成功率还很低。

故错误。五、实验题(共2题，共10分)21、略

【分析】【详解】

（1）电泳法分离蛋白质；是根据蛋白质分子的电荷；大小及形状不同，在电场中的迁移速度不同而实现分离。

（2）牛肉膏和蛋白胨中蛋白质较多；可作为碳源和氮源。

（3）加入抗菌蛋白的培养基中；金黄色葡萄球菌应该不能生长或生长很少，未加入抗菌蛋白的培养基中金黄色葡萄球菌应该能生长，菌落较多。

（4）平板划线法、稀释涂布平板法都能使接种的菌种在固体培养上充分分散，对使用过的培养基应进行灭菌处理，是为了防止细菌扩散污染。【解析】①.电荷（带电情况）②.迁移速度③.碳源④.氮源⑤.数量⑥.平板划线法⑦.稀释涂布平板法（稀释混合平板法）⑧.灭菌22、略

【分析】【分析】

题中用瓶装变质老陈醋（胀瓶）；未变质老陈醋为实验材料；经过分离、纯化、并初步筛选出A1、A2和A3三株疑似的产气细菌，进一步探究了不同浓度青霉素对A1、A2、A3菌株的抑制作用，表中数据所示的清晰区直径（抑菌圈）越大，代表该菌种生长受到的抑制作用越强。

【详解】

（1）为了筛选产气细菌；实验人员设置了甲；乙、丙三组培养基，甲作为空白对照组，乙接种未变质的老陈醋，丙接种等量的变质老陈醋，对比乙和丙培养基上的菌落形态，从丙培养基上分离出和乙培养基形态不同的菌落，可以从上述培养基中初步筛选疑似产气细菌的菌株。

（2）①过程a所得待测培养基中菌落的分布较为均匀；据此判断，该过程所采用的接种方法为稀释涂布平板法。

②区分菌落种类的依据是菌落的形态；大小、隆起程度和颜色等特征；统计菌落种类和数量时要每隔24h观察统计一次，直到各类菌落数目稳定，能有效防止因培养时间不足而导致遗漏菌落的种类和数目；或培养时间太长导致菌落粘连影响计数、培养基表面干燥脱水影响菌落数目的统计。

③因为老陈醋中的产气细菌是一类能产生过氧化氢酶的细菌；若有5%的过氧化氢溶液，A1；A2和A3菌株，必要的培养基等实验器材，可以将A1、A2和A3菌株分别接种到滴有5%的过氧化氢溶液的培养基上，观察是否产生气泡，若产生气泡则为产气细菌。

（3）根据题意和表格信息分析可知，该实验的目的是探究不同浓度青霉素对A1、A2、A3菌株的抑制作用。在抑制A1方面，5μg·mL-1的青霉素抑菌效果较差，20μg·mL-1的青霉素抑菌效果好；在抑制A3方面，5μg·mL-1和20μg·mL-1青霉素的抑菌效果相差不大。【解析】(1)等量的变质老陈醋对比乙和丙培养基上的菌落形态；从丙培养基上分离出和乙培养基形态不同的菌落。

(2)稀释涂布平板法培养基中长出的菌落是均匀分布的遗漏菌落的种类和数目菌落粘连影响计数（或培养基表面干燥脱水）将A1；A2和A3菌株分别接种到滴有5%的过氧化氢溶液的培养基上；若产生气泡则为产气细菌。

(3)探究不同浓度青霉素对A1、A2、A3菌株的抑制作用在抑制A1方面，5μg·mL-1的青霉素抑菌效果较差，20μg·mL-1的青霉素抑菌效果好在抑制A3方面，5μg·mL-1和20μg·mL-1青霉素的抑菌效果相差不大六、综合题(共3题，共24分)23、略

【分析】【分析】

1.治疗性克隆涉及到许多生物技术：细胞核移植；动物细胞培养、胚胎培养等。

2.细胞全能性指高度分化的细胞离体后能发育成完整的生物个体的潜能。

3.胚胎干细胞；在功能上，具有发育的全能性，可分化为成年动物任何一种组织细胞。另一方面，在体外培养条件下，胚胎干细胞可不断增殖而不发生分化，可进行冷冻保存，也可以进行某些遗传改造。

【详解】

（1）为治疗遗传性糖尿病；需要进行基因改造。构建胰岛素基因表达载体，需要用到的工具酶为限制性核酸内切酶和DNA连接酶。质粒能在宿主细胞内自我复制，其上带有特殊的标记基因，而且还具有一个至多个限制核酸内切酶点，因此质粒可以作为基因的运载体。

（2）科学家常选用卵母细胞作为受体细胞。核移植前需要使用显微直接去除的方法把细胞核去除；还有人采用梯度离心，紫外光短时间照射；化学物质处理等方法去除细胞核。这些方法都是在没有刺破透明带或卵母细胞质膜的情况下实现细胞核的去除或使卵细胞核DNA变性，从而达到去核的目的。

（3）在合适的条件下；C过程是早期胚胎培养过程，该过程的细胞学基础是细胞的增殖和分化，通过该过程重组细胞可以发育成为人体的任何一个器官，包括大脑肌肉血液和神经，这些器官组织能用于医疗究的本质原因是这些组织器官是在遗传物质不变的情况下进行基因选择性表达的结果。

（4）我国禁止生殖性克隆；主要有以下几个原因：①严重违反了人类伦理道德；②冲击了现有的婚姻；家庭和两性关系等传统的伦理道德观念；③是在人为地制造心理上和社会地位上都不健全的人；④克隆技术尚不成熟，可能克隆出有严重生理缺陷的孩子，但利用克隆技术可以用于医疗和弥补器官移植的不足，因此我国并不反对治疗性克隆。

【点睛】

熟知克隆技术的操作流程及其原理是解答本题的关键，能正确辨析图中的各个环节是解答本题前提。基因工程的应用也是本题的考查点。【解析】DNA连接酶①自我复制；②带有特殊的标记基因③具有一个至多个限制核酸内切酶点显微直接去除变性分化基因选择性表达①严重违反了人类伦理道德；②冲击了现有的婚姻、家庭和两性关系等传统的伦理道德观念；③是在人为地制造心理上和社会地位上都不健全的人；④克隆技术尚不成熟，可能克隆出有严重生理缺陷的孩子24、略

【分析】【分析】

1；PCR原理：在解旋酶作用下；打开DNA双链，每条DNA单链作为母链，以游离脱氧核苷酸为原料，合成子链，在引物作用下，DNA聚合酶从引物3'端开始延伸DNA链，即DNA的合成方向是从子链的5'端自3'端延伸的，PCR实际上就是在体外模拟细胞内DNA的复制过程。

2；基因工程的基本操作步骤主要包括四步：目的基因的获取；基因表达载体的构建；