2025年牛津译林版选择性必修3生物上册阶段测试试卷

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A.生产腐乳发挥主要作用的微生物是酵母菌B.影响腐乳中氨基酸含量的最重要因素是时间C.氦基酸含量上升是由于蛋白质在酶催化下分解D.高浓度食盐能抑制微生物生长，对制作腐乳更加有利2、研究发现；因餐厨垃圾水分和有机物含量丰富；极易腐败、发臭，包括大肠杆菌在内的细菌会大量繁殖，严重影响城市环境及资源利用。研究人员研究了不同保存方式对抑菌效果的影响，测定了各组大肠杆菌数量随保存时间的变化，具体结果如图所示（CFU/ml是每毫升检样所生长出来的细菌菌落总数）。下列说法正确的是（）

A.大肠杆菌属于化能自养型生物，具有核糖体和细胞壁B.据图分析，直接厌氧保存组的保存方式抑菌效果最好C.乳酸菌的代谢产物可对大肠杆菌起到一定的抑制作用D.餐厨垃圾中大肠杆菌的数量是通过平板划线法测得的3、下列有关“分解纤维素的微生物的分离”实验的叙述中，错误的是（）A.植物的枝干、叶片能在土壤中完全腐烂，一定有分解纤维素的微生物起作用B.纤维素分解菌往往无法分解人工合成的化学纤维C.配置培养基分离土壤中分解纤维素的微生物时，只能以纤维素作为唯一碳源D.纤维素被微生物最终分解成葡萄糖后加以利用4、动物细胞培养是动物克隆的基础，如下图所示，a、b、c表示现代生物工程技术，①、②、③分别表示其结果，请据图回答，下列说法正确的是（）

A.a如果是核移植技术，则①体现了动物细胞的全能性B.b如果是体外受精技术，②的产生属于有性生殖，该技术为良种家畜快速大量繁殖提供了可能C.c如果是胚胎分割技术，③中个体的基因型和表型一定相同D.①②③中的受体（代孕母体）均需经过一定的激素处理，以达到超数排卵和同期发情的目的5、将土壤稀释液涂布于选择培养基上，若要判断选择培养基是否起到了选择作用，还需要设置的对照是（）A.未接种的选择培养基B.未接种的牛肉膏蛋白脉培养基C.相同条件下接种了的牛肉膏蛋白胨培养基D.相同条件下接种了的选择培养基6、将正常的干细胞移植到病人体内，恢复病人的造血和免疫功能，已成为治疗白血病及一些恶性肿瘤放疗或化疗后引起的造血系统、免疫系统功能障碍等疾病的一种重要手段。下列关于干细胞的叙述，正确的是（）A.成体干细胞具有组织特异性，能发育成完整个体B.诱导多能干细胞是病人体内自然产生的一类治疗性干细胞C.胚胎干细胞存在于早期胚胎中，只能在体内分化成心肌细胞D.白血病的治疗主要利用造血干细胞，其主要存在于成体的骨髓、外周血和脐带血中7、下列关于“DNA片段的扩增及电泳鉴定”的实验，说法错误的是（）A.PCR利用了DNA的热变性原理，通过调节温度来控制B.PCR的产物一般要通过琼脂糖凝胶电泳来鉴定C.凝胶中DNA分子的迁移速率只与DNA分子的大小有关D.为避免外源DNA等因素的污染，PCR实验中使用的工具也需要灭菌处理评卷人得分二、多选题(共9题，共18分)8、下列有关生物技术安全性和伦理问题的做法中，错误的是（）A.对转基因生物产品进行标注，供消费者自主选择B.为挽救患病的孩子取用婴儿的造血干细胞或器官C.在动物克隆技术发展初期进行生殖性克隆人的研究D.全面禁止转基因微生物研究以免用于制造生物武器9、嵌合体是指由两个或两个以上具有不同遗传物质的细胞系形成的聚合胚胎发育而成的个体嵌合体的制备是研究干细胞体内分化能力的有效方法之一，有望在未来为解决器官移植供体短缺等医学难题开辟新的方向。研究人员将小鼠诱导性胚胎干细胞（ES）注入到猪的囊胚期胚胎后获得猪一鼠嵌合体。下列相关叙述正确的是（）A.培育嵌合体与克隆动物的生物学原理不相同，前者运用的是细胞的增殖与分化后者是动物细胞核的全能性B.胚胎干细胞具有分化为成年动物体内的任何一种类型的细胞的潜能C.将胚胎干细胞注入猪囊胚的滋养层处才能获得猪—鼠嵌合体D.若培育出“人—兽嵌合体”将会面临与克隆人一样的伦理问题10、重叠延伸PCR技术是一种通过寡聚核苷酸链之间重叠的部分互相搭桥；互为模板；经过多次PCR扩增。从而获得目的基因的方法。该技术在扩增较长片段的DNA、不同来源的DNA片段拼接、基因的定点诱变等方而具有广泛的应用前景，下图表示利用重叠延伸PCR技术扩增某目的基因的过程。下列叙述正确的是（）

A.引物中G＋C的含量越高，引物与模板DNA结合的稳定性越高B.在第一阶段由于引物2和引物3发生碱基互补配对，因此两者置于不同反应系统中C.引物1、2组成的反应系统和引物3、4组成的反应系统中均进行一次复制，共产生4种双链DNA分子D.在引物1、2组成的反应系统中，经第一阶段要形成图示双链DNA，至少要经过3次复制11、将单克隆抗体与前体药物的专一性活化酶藕联（简称抗体导向酶偶联）是特异性治疗肿瘤并减少对正常细胞伤害的最新研究方向。碱性磷酸酶是抗肿瘤药物多柔比星前体的专一性活化酶，医学研究中利用抗体导向酶偶联机理将碱性磷酸酶与单克隆抗体制成“生物导弹”，通过活化多柔比星使其对DNA造成损伤，进而抑制以DNA为模板进行的生理活动，达到治疗肿瘤的目的。下列说法正确的是（）A.为获得单克隆抗体应首先给小白鼠注射肿瘤细胞表面抗原，得到能产生特定抗体的B淋巴细胞B.制备单克隆抗体的过程中至少要经过两次原理和目的均不同的筛选过程C.生物导弹综合利用了碱性磷酸酶的定向制导作用和单克隆抗体的特异性杀伤能力D.多柔比星只作用于有增殖能力的细胞12、理垃圾的有效方法之一是用微生物对其进行降解，下图表示筛选高效降解淀粉菌种的过程。下列叙述错误的是（）

A.图中培养基应以淀粉为唯一碳源，将菌液接种到培养基应使用平板划线法B.菌落①与②周围透明圈的大小不同原因可能是两个菌群对碘液分解能力不同C.若菌落①与②分属细菌和真菌，则二者结构上最主要区别是有无核膜包被的细胞核D.实验结束后，为防止造成环境污染，使用过的培养基应灭菌处理后再倒掉13、在新冠病毒的核酸检测过程中采用的逆转录PCR（RT—PCR），是聚合酶链式反应（PCR）的广泛应用。在RT-PCR中，一条RNA链被逆转录成互补DNA，再以此为模板通过PCR进行DNA扩增，进而获得检测的目的基因S。下列关于RT-PCR的叙述错误的是（）A.RT-PCR所用的酶包括逆转录酶和热稳定RNA聚合酶B.RT-PCR所用的两引物序列不同，两者间可进行互补配对C.RT-PCR过程中需添加ATP，反应过程中会有磷酸键断裂D.至少经过2次循环，方可获取与目的基因等长的DNA单链14、农杆菌Ti质粒上的T-DNA可以转移并随机插入到被侵染植物的染色体DNA中。研究者将下图中被侵染植物的DNA片段连接成环；并以此环为模板，利用PCR技术扩增出T-DNA插入位置两侧的未知序列，以此可确定T-DNA插入的具体位置。下列说法正确的是（）

A.进行PCR扩增的依据是DNA分子双链复制的原理B.进行PCR扩增需要的酶有解旋酶和热稳定DNA聚合酶C.利用图中的引物②、③组合可扩增出两侧的未知序列D.通过与受体细胞的基因组序列比对，可确定T-DNA的插入位置15、2020年5月22日，在世界权威医学期刊《柳叶刀》杂志在线刊登了中国陈薇团队研发的重组腺病毒疫苗I期人体（108位志愿者）试验临床数据结果：安全、能诱导免疫反应。重组腺病毒疫苗是一种重组的基因工程产品，用不会使人体致病的腺病毒作为载体，把克隆出来的编码新冠病毒S蛋白（介导新冠病毒感染细胞的成分）基因装入载体腺病毒，注入人体，进入人体细胞，表达出S蛋白，刺激人体产生针对新冠病毒的免疫应答。相关叙述正确的是（）A.重组腺病毒疫苗包括S蛋白基因、启动子、终止子和标记基因等B.重组腺病毒疫苗只能使人体产生体液免疫C.重组腺病毒疫苗引发的体液免疫中有吞噬细胞、T细胞的参与D.重组腺病毒疫苗引起免疫反应后相应淋巴细胞增多，细胞周期将变长16、下列关于试管婴儿和克隆猴的叙述，错误的是（）A.受精过程中，透明带和卵细胞膜的反应保证了受精卵染色体数目的正常B.克隆猴的性状表现与细胞核供体的一模一样，体现了动物细胞核具有全能性C.试管婴儿的生殖方式属于无性生殖，克隆猴的生殖方式属于有性生殖D.“设计试管婴儿”与“试管婴儿”在操作上唯一的区别是前者需要进行遗传学诊断评卷人得分三、填空题(共7题，共14分)17、一般包括______、______等技术18、载体具备的条件：①_____。②具有一至多个限制酶切点，供外源DNA片段插入。③______。19、重组DNA或重组质粒导入受体细胞后，筛选______的依据是______。20、转化的概念：是______进入受体细胞内，并且在受体细胞内维持______的过程。21、植物繁殖的新途径。

微型繁殖：可以高效快速地实现种苗的大量繁殖。

作物脱毒：采用______组织培养来除去病毒（因为植物分生区附近的病毒______）

人工种子：以植物组织培养得到的______、不定芽、顶芽和腋芽等为材料，经_____包装得到的种子。优点：完全保持优良品种的遗传特性，______；方便储藏和运输。

人工种子的结构包括：______、_____和______。22、在我国市场上究竟有多少种转基因产品呢？一位同学带着这样的问题，进行了调查并将结果归纳成下图｡

对该同学的调查和归纳结果，有人表示认同，有人提出质疑｡质疑者认为：目前我国市场上根本没有大豆､玉米或甜菜的转基因产品｡我们的观点是什么_____？23、研究表明，转基因抗虫棉的大面积种植有效遏制了棉铃虫害，也显著地降低了化学农药的使用量｡但是，科研人员也发现，棉田中一种体型很小的盲蝽蟓却容易爆发成灾｡有人认为这与大面积种植转基因抗虫棉有关｡我们应如何看待这种观点_____？如果回答问题有困难，可以请教老师或通过互联网寻找答案。评卷人得分四、判断题(共4题，共32分)24、转基因生物可能会破坏生态平衡（______）A.正确B.错误25、雄性动物刚刚排出的精子并不具有受精能力，必须获能后才具备受精能力()A.正确B.错误26、基因工程技术已被广泛用于改良动植物品种、提高作物和畜产品的产量等方面。（选择性必修3P87）()A.正确B.错误27、生物武器包括致病菌类、病毒类和生化毒剂类等。（选择性必修3P111）()A.正确B.错误评卷人得分五、实验题(共4题，共32分)28、如图为“DNA的粗提取与鉴定”实验过程中的一些重要操作示意图；请分析回答有关问题：

（1）正确的操作顺序是_______________________（用字母和箭头表示）。

（2）图中C、E步骤都加入了蒸馏水，但其目的不同，分别是_______________________和_______________________。

（3）为鉴定图中A步骤中所得到的丝状物的主要成分为DNA，可将其溶解后，滴加________________试剂后沸水浴加热，如果出现___________________；则证明该丝状物的主要成分为DNA。

（4）图中A步骤的目的是_________________________________________。29、某研究者用抗原（A）分别免疫3只同种小鼠（X；Y和Z）；每只小鼠免疫5次，每次免疫一周后测定各小鼠血清抗体的效价（能检测出抗原抗体反应的血清最大稀释倍数），结果如下图所示。

若要制备杂交瘤细胞；需取免疫后小鼠的B淋巴细胞（染色体数目为40条），并将该细胞与体外培养的小鼠骨髓瘤细胞（染色体数目为60条）按一定比例加入试管中，再加入聚乙二醇诱导细胞融合，经筛选培养及抗体检测，得到不断分泌抗A抗体的杂交瘤细胞。

回答下列问题：

（1）制备融合所需的B淋巴细胞时，所用免疫小鼠的血清抗体效价需达到16000以上，则小鼠最少需要经过___________次免疫后才能有符合要求的。达到要求的X、Y、Z这3只免疫小鼠中，最适合用于制备B淋巴细胞的是___________小鼠，理由是______________。

（2）细胞融合实验完成后，融合体系中除含有未融合的细胞和杂交廇细胞外，可能还有________，体系中出现多种类型细胞的原因是________________。

（3）杂交瘤细胞中有______个细胞核，染色体数目最多是_________条。

（4）未融合的B淋巴细胞经过多次传代培养后都不能存活，原因是_____________________。30、黏多糖贮积症是由IDUA基因突变导致的遗传病。科研人员对此病的治疗进行相关研究。

(1)黏多糖贮积症患者细胞中IDUA基因由于碱基对___________造成突变，转录出的mRNA长度不变但提前出现终止密码子，最终导致合成的IDUA酶分子量___________；与正常IDUA酶的空间结构差异显著而失去活性，积累过多的黏多糖无法及时清除，造成人体多系统功能障碍。

(2)抑制性tRNA（sup-tRNA）与普通tRNA的结构、功能相同，但它的反密码子可以与终止密码子配对。在上述这一类突变基因的翻译过程中，加入sup-tRNA可以发挥的作用是___________；从而诱导通读获得有功能的全长蛋白。

(3)不同的sup-tRNA可以携带不同氨基酸；为比较它们的通读效果，科研人员进行了相关研究，实验结果如图。

注：“-”代表未加入。

据图分析，实验组将___________基因导入受体细胞，并采用___________技术检测导入基因的表达情况。据结果分析，携带酪氨酸的sup-tRNA能___________。

(4)科研人员利用携带酪氨酸的sup-tRNA对IDUA突变基因纯合小鼠及IDUA基因敲除小鼠进行治疗，检测肝脏细胞IDUA酶活性和组织黏多糖的积累量，与不治疗的小鼠相比较，实验结果为_____________，表明携带酪氨酸的sup-tRNA可以治疗黏多糖贮积症。31、下图是某同学设计的传统发酵装置示意图。比较传统发酵技术与现代发酵工程；回答下列问题：

(1)传统发酵酿酒与现代工业发酵酿酒的原理是______。请设计简单的实验验证发酵过程中产生了酒精（不考虑发酵液中葡萄糖的影响），写出实验思路并预期实验结果与结论______。

(2)传统发酵技术一般以天然存在的______发酵，品质不一，现代工业发酵一般为单一菌种发酵，品质较高。自制的果酒并非商品意义上的产品，在实际生产中还需要经过______装瓶等过程才能获得成品酒。

(3)若要测定发酵罐中酵母菌的种群密度，取10mL发酵液稀释1000倍，利用25×16的血细胞计数板，观察并统计到中方格中的酵母菌平均数为9个，则每毫升发酵液中酵母菌数量约是______个。

(4)利用上图中装置酿酒与酿醋时，操作上的最主要的区别是______。评卷人得分六、综合题(共3题，共6分)32、报告基因是指一类易于检测且实验材料本身不具备的基因。阿尔茨海默病（AD）是由淀粉样前体蛋白（APP）过量表达导致的神经系统退变性疾病；用增强型绿色荧光蛋白（EGFP）基因作为报告基因，将ECGFP基因与AIPP基因融合，可方便；经济、快速地筛选出促进人APPmRNA降解的药物。研究表明，EGFP与APP基因融合后，虽能全部转录但仅有EGFP蛋白得到表达。ECFP基因与AP基因融合过程如图所示。

（1）APP751；EGFP基因的cDNA是以其mRNA为模板经______________过程形成的；将其储存于细菌质粒中，属于构建______________。

（2）据图分析，Klenow酶的作用是______________。切割pcDNA3．1质粒获得APP751基因时，研究人员没有选择直接用HindⅢ、XbaⅠ同时切割；而是历经①→②→③的复杂过程，原因是_______________。

（3）COS-7是来源于非洲绿猴生成纤维细胞，培养这类细胞时，为保证细胞生长和避免污染，应分别在合成培养基中添加____________，传代培养不宜超过10代，原因是______________。33、世界卫生组织定义克隆为“遗传同一机体或细胞系（株）的无性繁殖”。相对于植物克隆；动物尤其是高等动物的克隆比较困难，下图表示哺乳动物克隆的几种方法的主要步骤，据图回答下列问题。

（1）方法2获得的小牛的遗传物质来源于____________，方法3中得到的胚①、②发育成的小牛的遗传物质是否完全相同？__________________________。

（2）细胞B取自囊胚的____________细胞，具有全能性；细胞C应取自供体3的______细胞。

（3）细胞A、B、C在进行D过程之前需要进行细胞体外培养，培养时需要满足_____。34、人胰岛素基因表达的最初产物是一条肽链构成的前胰岛素原；经加工后形成两条肽链（A链和B链）的有生物活性的胰岛素。此后科学家又提出了利用基因工程改造大肠杆菌生产人胰岛素的两种方法：“AB”法是根据胰岛素A；B两条肽链的氨基酸序列人工合成两种DNA片段，利用工程菌分别合成两条肽链后将其混合自然形成胰岛素;“BCA”法是利用人体某细胞中的mRNA得到胰岛素基因，表达出胰岛素原后再用特定酶切掉C肽段。这两种方法使用同一种质粒作为载体。请据下图分析并回答下列问题：

(1)由于_________，“AB”法中人工合成的两种DNA片段均有多种可能的序列。“BCA”法是利用人体________细胞中的mRNA，再由mRNA经_________得到的胰岛素基因，_________（填“AB”；“BCA”或“AB和BCA”)法获取的目的基因中不含人胰岛素基因启动子。

(2)如图是利用基因工程生产人胰岛素过程中使用的质粒及目的基因的部分结构。为使目的基因与载体正确连接，在设计PCR引物时可添加限制酶_________的识别序列，PCR引物应该添加在识别序列的_________（填“3’或5’）端。通过上述方法获得人的胰岛素基因后，需要通过PCR技术进行扩增，若计划用1个胰岛素基因为模板获得m（m大于2)个胰岛素基因，则消耗的引物总量是_________个。引物序列中的的GC含量越高，对PCR过程中的_________步骤〔写出具体过程)影响最大，越_________（填“有利于”或“不利于”)目标DNA的扩增。

(3)PCR扩增的产物一般通过琼脂糖凝胶电泳来鉴定，下列叙述中正确的有____。A．PCR反应体系中需加入耐高温的DNA聚合酶，该酶主要在退火过程起作用B．待测样品中DNA分子的大小和构象、凝胶的浓度等都会影响DNA在电泳中的迁移速率C．进行电泳时，带电分子会向着与其所带电荷相反的电极移动D．琼脂糖溶液中加入的核酸染料利于DNA在紫外灯下被检测(4)β-半乳糖苷酶可以分解无色的X-gal产生蓝色物质使菌落呈现蓝色，否则菌落为白色。经_________（处理方法）大肠杆菌后，与重组质粒混合培养一段时间，将大肠杆茵接种到添加了_________和X-gal的培养基上筛选出_________色的菌落即为工程菌种。

(5)科学家利用蛋白质工程技术，研制出了易吸收、起效快的赖脯胰岛素，获得赖脯胰岛素基因的途径是：从预期的蛋白质功能出发→_________→推测应有的氨基酸序列→找到相对应的脱氧核苷酸序列。参考答案一、选择题(共7题，共14分)1、C【分析】【分析】

腐乳制作中有多种微生物参与；如青霉；酵母、曲霉、毛霉等，其中起主要作用的是毛霉。毛霉等微生物产生的蛋白酶能将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可以将脂肪水解成甘油和脂肪酸。腐乳制作的过程：1、让豆腐长出毛霉；2、加盐腌制；3、加卤汤装瓶；4、密封腌制。操作中要注意控制好食盐的用量。食盐用量过低不足以抑制微生物的生长，可能会导致豆腐腐乳变质；食盐浓度过高，会影响腐乳的口味。卤汤中酒的含量要控制在12%左右。酒精含量过高，腐乳成熟时间会延长；酒精含量过低，不足以抑制微生物的生长，会导致腐乳腐败变质。

【详解】

A；腐乳制作中有多种微生物参与；如青霉、酵母、曲霉、毛霉等，其中其主要作用的是毛霉，A错误；

B；分析图中曲线图；可知本题研究探讨了腐乳制作过程中食盐浓度对氨基酸含量的影响，在45d左右时，食盐浓度为5%时氨基酸的含量最高。影响腐乳中氨基酸含量的最重要因素是食盐浓度，B错误；

C；腐乳制作过程中毛霉等微生物产生的蛋白酶能将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸。氦基酸含量上升是由于蛋白质在酶催化下分解；C正确；

D；食盐浓度不是越高越好；如果浓度过高会影响腐乳的风味，D错误。

故选C。

【点睛】

本题结合曲线图考查腐乳的制作。重点知识是制作过程中影响腐乳风味和制作效果的因素，比如食盐用量、酒精用量、腌制时间等。2、C【分析】【分析】

由图可知：灭菌+乳酸菌厌氧保存组大肠杆菌数为0；加入乳酸菌后厌氧保存对大肠杆菌起到一定的抑制作用；但不如直接厌氧保存组显著；与自然保存相比，直接厌氧保存可以有效抑制大肠杆菌的生长增殖。

【详解】

A；大肠杆菌属于原核生物；细胞结构中具有核糖体和细胞壁，由题干“因餐厨垃圾水分和有机物含量丰富、极易腐败、发臭，包括大肠杆菌在内的细菌会大量繁殖”，说明大肠杆菌的营养类型属于化能异养型生物，A错误；

B；据图分析；与灭菌+乳酸菌厌氧保存组大肠杆菌数为0效果最好的应为灭菌+乳酸菌，即厌氧保存组，B错误；

C；与自然保存相比；加入乳酸菌后厌氧保存对大肠杆菌起到一定的抑制作用，大肠杆菌数量减少，C正确；

D；平板划线法不能统计大肠杆菌数量；D错误。

故选C。3、C【分析】【分析】

纤维素分解菌的筛选实验流程为：土壤取样；选择培养、梯度稀释、将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上、挑选产生透明圈的菌落。

【详解】

A；植物的枝干、叶片能在土壤中完全腐烂是能够分解纤维素的微生物的作用的结果；A正确；

B；人工合成的化学纤维的本质不是纤维素；故纤维素分解菌往往无法分解人工合成的化学纤维，B正确；

C；分离能分解纤维素的细菌；要以纤维素或植物秸秆为唯一的碳源的选择培养基，观察是否有透明圈产生，C错误；

D；纤维素属于多糖；在培养基中需要被纤维素分解菌分解为成葡萄糖后加以利用，D正确。

故选C。4、B【分析】【分析】

动物细胞核移植技术表面动物细胞核具有全能性；体外受精包括精子的采集和获能；卵母细胞的采集和培养、体外受精；该技术产生的动物称为试管动物；胚胎分割的特点：来自同一胚胎的后代具有相同的遗传物质，胚胎分割可以看做动物无性繁殖或克隆的方法之一。

【详解】

A；a如果是核移植技术；则①体现了动物细胞核的全能性，A错误；

B、b如果是体外受精技术；②的产生属于有性生殖，该过程可获得大量的胚胎，因而可为良种家畜快速大量繁殖提供了可能，B正确；

C；胚胎分割技术所得个体的基因型完全相同；但表现型不一定完全相同，因为表现型还受环境的影响，即c如果是胚胎分割技术，③中个体的基因型相同，但表型不一定相同，C错误；

D；①②③过程中均需要胚胎移植技术；其中的受体均需注射性激素，以达到同期发情的目的，为移入的胚胎提供几乎相同的环境，D错误。

故选B。5、C【分析】【分析】

对照实验是指除所控因素外其他条件对与被对照组实验完全对等的实验；判断选择培养基是否起到选择作用，则接种了的选择培养基为实验组，而接种了的牛肉膏蛋白胨培养基为对照组。

【详解】

对照实验是指除所控因素外其他条件对与被对照组实验完全对等的实验；判断选择培养基是否起到选择作用，则接种了的选择培养基为实验组，而接种了的牛肉膏蛋白胨培养基为对照组，将菌液稀释相同的倍数，在相同培养条件下，在牛肉膏蛋白胨培养基上生长的菌落数目应明显多于选择培养基上的菌落数目。因此，应设置相同条件下接种了的牛肉膏蛋白胨培养基作为对照，C正确；

故选C。6、D【分析】【分析】

一般认为；成体干细胞具有组织特异性，只能分化成特定的细胞或组织，不能发育成完整个体。

【详解】

A；成体干细胞具有组织特异性；只能分化成特定的细胞或组织，不能发育成完整个体，A错误；

B；诱导多能干细胞由病人自身的体细胞进行体外诱导获得；B错误；

C；胚胎干细胞存在于早期胚胎中；可以在体外分化成心肌细胞、神经元和造血干细胞等，C错误；

D；将正常的造血干细胞移植到病人体内；恢复病人的造血和免疫功能，已经称为治疗白血病及一些恶性肿瘤放疗或化疗后引起的造血系统、免疫系统功能障碍等疾病的一种重要手段，造血干细胞主要存在于成体的骨髓、外周血和脐带血中，D正确。

故选D。7、C【分析】【分析】

DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度NaCl溶液中溶解度不同；DNA不溶于酒精溶液；但细胞中的某些蛋白质溶于酒精；DNA对酶；高温和洗涤剂的耐受性。

【详解】

A；PCR技术利用了DNA的热变性原理；通过调节该变性-复性-延伸步骤中不同温度来控制DNA双链的解聚与结合，A正确；

B；对PCR扩增后的产物；一般需要通过琼脂糖凝胶电泳来鉴定，凝胶中的DNA分子需要染色，以便使电泳结果更直观，B正确；

C；在凝胶中DNA分子的迁移速率与DNA分子的大小和构象、凝胶的浓度有关；C错误；

D；为避免外源DNA等因素的污染；PCR实验中使用的微量离心管、枪头、蒸馏水等在使用前都必须进行高压灭菌处理，D正确。

故选C。二、多选题(共9题，共18分)8、B:C:D【分析】【分析】

1；转基因生物的安全性问题：食物安全（滞后效应、过敏源、营养成分改变）、生物安全（对生物多样性的影响）、环境安全（对生态系统稳定性的影响）。对待转基因技术的正确做法是趋利避害；不能因噎废食。

2；对生物技术中的伦理问题的争论；中国政府的态度：禁止生殖性克隆人，坚持四不原则（不赞成、不允许、不支持、不接受任何生殖性克隆人实验），不反对治疗性克隆人。

【详解】

A；2002年；我国农业部颁布了《农业转基因生物标识管理办法》，要求对转基因生物产品及其加工品加贴标注，供消费者自主选择，A正确；

B；不能用婴儿的造血干细胞或器官来挽救患病的孩子；B错误；

C；我国政府的态度是禁止生殖性克隆人的研究；C错误；

D；对待转基因技术的正确做法是趋利避害；不能因噎废食，D错误。

故选BCD。9、A:B:D【分析】【分析】

1；胚胎移植的基本程序主要包括：①对供、受体的选择和处理。选择遗传特性和生产性能优秀的供体；有健康的体质和正常繁殖能力的受体，供体和受体是同一物种。并用激素进行同期发情处理，用促性腺激素对供体母牛做超数排卵处理。②配种或人工授精。③对胚胎的收集、检查、培养或保存。配种或输精后第7天，用特制的冲卵装置，把供体母牛子宫内的胚胎冲洗出来（也叫冲卵）。对胚胎进行质量检查，此时的胚胎应发育到桑椹胚或囊胚阶段。直接向受体移植或放入-196℃的液氮中保存。④对胚胎进行移植。⑤移植后的检查。对受体母牛进行是否妊娠的检查。

2；胚胎移植的生理学基础：①动物发情排卵后；同种动物的供、受体生殖器官的生理变化是相同的。这就为供体的胚胎移入受体提供了相同的生理环境。②早期胚胎在一定时间内处于游离状态。这就为胚胎的收集提供了可能。③受体对移入子宫的外来胚胎不发生免疫排斥反应。这为胚胎在受体内的存活提供了可能。④供体胚胎可与受体子宫建立正常的生理和组织联系，但供体胚胎的遗传特性在孕育过程中不受影响。

【详解】

A；培育嵌合体的生物学原理是细胞的增殖和分化；克隆动物的生物学原理是动物细胞核具有全能性，两者的原理不相同，操作方法有差别，A正确；

B；由题干信息“将小鼠诱导性胚胎干细胞（ES）注入到猪的囊胚期胚胎后获得猪一鼠嵌合体”可知；胚胎干细胞分化程度低，具有分化为成年动物体内的任何一种类型的细胞的潜能，B正确；

C；滋养层细胞将来发育成胎膜、胎盘；内细胞团将来发育为胚胎的各种组织、器官，故应将胚胎干细胞注入猪囊胚的内细胞团处才能获得猪—鼠嵌合体，C错误；

D；若培育出“人—兽嵌合体”将会面临与克隆人一样的伦理问题；是不道德的，D正确。

故选ABD。

【点睛】10、A:B【分析】【分析】

PCR扩增运用DNA分子复制的原理；经过变性；复性、延伸，最终获得大量DNA的过程。

【详解】

A；引物中G＋C的含量越高；C和G之间是三个氢键连接，因此引物与模板DNA结合的稳定性越高，A正确；

B；图中可知；引物2和引物3分别作用同一段DNA的两条链，会发生碱基互补配对，因此两者置于不同反应系统中，B正确；

C；引物1、2组成的反应系统和引物3、4组成的反应系统中均进行一次复制；共产生2种双链DNA分子，C错误；

D；在引物1、2组成的反应系统中；经第一阶段要形成图示双链DNA，至少要经过2次复制，D错误。

故选AB。11、A:B【分析】【分析】

单克隆抗体的制备。

（1）制备产生特异性抗体的B淋巴细胞：向免疫小鼠体内注射特定的抗原；然后从小鼠脾内获得相应的B淋巴细胞。

（2）获得杂交瘤细胞。①将鼠的骨髓瘤细胞与脾细胞中形成的B淋巴细胞融合。②用特定的选择培养基筛选出杂交瘤细胞；该杂种细胞既能够增殖又能产生抗体。

（3）克隆化培养和抗体检测。

（4）将杂交瘤细胞在体外培养或注射到小鼠腹腔内增殖。

（5）提取单克隆抗体：从细胞培养液或小鼠的腹水中提取。

【详解】

A；单克隆抗体制备过程中；需要给小白鼠注射肿瘤细胞表面抗原，刺激小鼠产生体液免疫，才能得到能产生特定抗体的B淋巴细胞，A正确；

B；制备单克隆抗体的过程中至少要经过两次原理和目的均不同的筛选过程；第一次筛选杂交瘤细胞，第二次筛选能产生特异性抗体的杂交瘤细胞，B正确；

C；生物导弹综合利用了单克隆抗体的定向制导作用和碱性磷酸酶的特异性杀伤能力；C错误；

D；根据题干信息“通过活化多柔比星使其对DNA造成损伤；进而抑制以DNA为模板进行的生理活动”，说明多柔比星还可以抑制细胞的转录过程，而不增殖的细胞也具有转录过程，D错误。

故选AB。12、A:B【分析】【分析】

1.微生物接种常用的两种方法：

①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板；接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。

②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过足够稀释后；均匀涂布在培养皿表面，经培养后，可形成单菌落。

2.选择培养基中培养基中加入某种化学成分；根据某种微生物的特殊营养要求或其对某化学；物理因素的抗性而设计的培养基使混合菌样中的劣势菌变成优势菌，从而提高该菌的筛选率。

【详解】

A；筛选高效降解淀粉的菌种；则选择培养基中的碳源应为淀粉，根据图示可知，图中菌株采用稀释涂布平板法进行接种，目的是使菌落分布较均匀，然后放在相同且适宜条件下培养，A错误；

B；高效降解淀粉的菌种可以产生淀粉酶将培养基中的淀粉水解；因此可以用碘液鉴定培养基中淀粉的分解情况，菌落形成后加入碘液染色，比较菌株菌落周围透明圈的大小。产生的淀粉酶活性越高，淀粉分解量越多，培养基中筛选菌落周围透明圈越大，因此图中菌落①与菌落②周围透明圈的大小不同，说明分泌的淀粉酶活性不同，B错误；

C；①②分别属于真菌和细菌；真菌属于真核生物，有以核膜为界限的细胞核，细菌属于原核生物，没有以核膜为界限的细胞核，只有拟核，C正确；

D；实验结束后；对使用过的培养基要灭菌处理后再倒掉，以防止杂菌污染环境，D正确。

故选AB。13、A:B:C【分析】【分析】

分析题干信息；在RT—PCR中，一条RNA链被逆转录成为互补DNA，再以此为模板通过PCR进行DNA扩增，由此可知该过程需要逆转录酶和热稳定DNA聚合酶的催化。DNA解旋过程不需要解旋酶参与，反应过程中高温即可解旋。

【详解】

A；RT-PCR过程需要逆转录酶和耐高温的DNA聚合酶；A错误；

B；引物之间不能相互配对；否则不能正常发挥作用，B错误；

C；RT-PCR过程中需添加的原料是dNTP；不需添加ATP，反应过程中会有特殊化学键断裂，C错误；

D；至少经过2次循环；方可获取与目的基因等长的DNA单链，D正确。

故选ABC。14、A:D【分析】【分析】

PCR技术：

1；概念：PCR全称为聚合酶链式反应；是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术。

2；原理：DNA复制。

3；前提条件：要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一对引物。

4；条件：模板DNA、四种脱氧核苷酸、一对引物、热稳定DNA聚合酶（Taq酶）。

5；过程：①高温变性：DNA解旋过程（PCR扩增中双链DNA解开不需要解旋酶；高温条件下氢键可自动解开）；低温复性：引物结合到互补链DNA上；③中温延伸：合成子链。

【详解】

A；PCR扩增依据的是DNA分子双链复制的原理；A正确；

B；进行PCR扩增需要热稳定DNA聚合酶（TaqDNA聚合酶）；但不需要解旋酶，B错误；

C；DNA的两条链反向平行；子链从引物的3′端开始延伸，则利用图中的引物①、④组合可扩增出两侧的未知序列，C错误；

D；通过与受体细胞的基因组序列比对；即可确定T-DNA的插入位置，D正确。

故选AD。

【点睛】15、A:C【分析】【分析】

编码新冠病毒的S蛋白不具有感染性；但可以引起机体产生特异性免疫，腺病毒不会使人致病，可将克隆出来的编码新冠病毒S蛋白（介导新冠病毒感染细胞的成分）基因装入载体腺病毒，注入人体，进入人体细胞，表达出S蛋白，刺激人体产生针对新冠病毒的免疫应答。

【详解】

A；基因表达载体的构建是基因工程的核心；一个完整的基因表达载体至少包括目的基因（S蛋白基因）、启动子、终止子和标记基因等，A正确；

B；由于病毒需要寄生在细胞内；且S蛋白是在细胞内合成的，所以重组腺病毒疫苗能使人体产生体液免疫和细胞免疫，B错误；

C；重组腺病毒疫苗引发的体液免疫中有吞噬细胞（处理抗原）、T细胞（释放淋巴因子）的参与；C正确；

D；重组腺病毒疫苗引起免疫反应后相应淋巴细胞增多；细胞周期将变短，D错误。

故选AC。

【点睛】16、B:C:D【分析】【分析】

1；“试管婴儿”是利用体外授精和胚胎移植的方法；解决不孕夫妇的生育问题。

2；设计试管婴儿概念：是指体外受精形成的胚胎在植入母体孕育前；根据人们的需要，将胚胎的一个细胞取出，进行某些设计，当检测结果符合人们需要时，再把胚胎植入母体孕育。

【详解】

A；透明带和卵细胞膜的反应可以防止多精入卵；从而保证受精卵染色体数目的正常，A正确；

B；由于细胞质中也存在基因控制生物性状；所以克隆猴的性状不完全与细胞核供体的相同，B错误；

C；试管婴儿技术与正常的生殖过程相比仅仅是受精和早期胚胎发育的场所不同；实质没有变化，属于有性生殖；而克隆猴是将动物体细胞的细胞核移植到去核的卵细胞后发育成的新个体，属于无性生殖的范畴，C错误；

D；设计试管婴儿与试管婴儿的主要区别是前者在胚胎植入前需进行遗传学诊断；设计试管婴儿有时除体外受精、胚胎培养和胚胎移植外还需要借助其它技术，D错误。

故选BCD。三、填空题(共7题，共14分)17、略

【解析】①.动物细胞培养和核移植技术、②.动物细胞融合与单克隆抗体18、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】能在受体细胞中复制并稳定保存具有标记基因，供重组DNA的鉴定和选择19、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】含有基因表达载体受体细胞标记基因是否表达。20、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】目的基因稳定和表达21、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】茎尖极少或没有）胚状体人工薄膜不受季节的限制人工种皮；胚状体和人工胚乳。

（2）22、略

【分析】【详解】

目前我国市场上的转基因食品，从原料来源看，进口的主要有大豆、油菜籽和玉米及相关产品，国内生产的有棉籽油和番木瓜，故我国市场上有大豆等的转基因产品。【解析】目前我国市场上的转基因食品，从原料来源看，进口的主要有大豆、油菜籽和玉米及相关产品，国内生产的有棉籽油和番木瓜。23、略

【分析】【详解】

生物之间存在（种间）竞争多关系，该区域的棉铃虫与盲蝽蟓之间共同以棉花为食，种植转基因抗虫棉后，棉铃虫不能存活，盲蝽蟓的食物等资源充足，故大量繁殖，爆发成灾。【解析】该区域的棉铃虫与盲蝽蟓之间存在竞争关系，种植转基因抗虫棉后，棉铃虫不能存活，盲蝽蟓大量繁殖四、判断题(共4题，共32分)24、A【分析】【详解】

转基因生物可能会破坏生态平衡，特别是对生物多样性的影响。大自然经过亿万年的演化，各种生物相对处于一种和谐的生态平衡状态。但是，如果我们用转基因技术把某种生物人为地变得更加“强悍”，那其他物种就会衰败以至灭绝，故本题正确。25、A【分析】【详解】

雄性动物刚刚排出的精子并不具有受精能力，必须获能后才具备受精能力，精子获能的过程不是获得能量的过程，是获得受精能力的过程，可在获能液或受精液中完成，故正确。26、A【分析】【详解】

目前，基因工程技术已被广泛用于改良动植物品种、提高作物和畜产品的产量等方面，例如转基因抗虫植物；将植物花青素代谢相关的基因导入牵牛花中，使其呈现自然界没有的颜色，提高了观赏价值；将外源生长素基因导入鲤鱼体内，转基因鲤鱼生长速率加快等，所以正确。27、A【分析】【详解】

生物武器是利用生物战剂杀伤人员、牲畜、毁坏植物的武器。生物武器种类包括致病菌、病毒、生化毒剂以及经过基因重组的致病菌等。故该说法正确。五、实验题(共4题，共32分)28、略

【分析】【分析】

1；利用动物细胞进行DNA的粗提取与鉴定的实验原理：①DNA在氯化钠溶液中的溶解度；是随着氯化钠的浓度变化而改变的．当氯化钠的物质的量浓度为0.14mol/L时，DNA的溶解度最低．利用这一原理，可以使溶解在氯化钠溶液中的DNA析出；②DNA不溶于酒精溶液，但是细胞中的某些物质则可以溶于酒精溶液．利用这一原理，可以进一步提取出含杂质较少的DNA；②DNA遇二苯胺（沸水浴）会染成蓝色，因此，二苯胺可以作为鉴定DNA的试剂。

2；利用动物细胞进行DNA的粗提取与鉴定的实验步骤是：①制备鸡血细胞液；②提取鸡血细胞和物质，③细胞核物质中DNA的溶解，④析出含有DNA的粘稠物，⑤过滤获取纱布上的粘稠物，⑥DNA的再溶解，⑦加冷却酒精使DNA析出，⑧二苯胺鉴定DNA分子。

【详解】

（1）DNA的粗提取和鉴定步骤是：加入蒸馏水；破碎细胞→过滤，获取含DNA的滤液→去除滤液中杂质→DNA的析出→鉴定．所以正确的操作顺序是C→B→E→D→A。

（2）C加入蒸馏水的目的是使鸡血细胞吸水涨破；释放细胞核物质；E步骤甲蒸馏水是降低NaCl溶液的浓度，使DNA析出。

（3）鉴定A中所得到的丝状物的主要成分为DNA；可滴加二苯胺试剂，在沸水浴加热的条件下如果出现蓝色则该丝状物的主要成分为DNA。

（4）图中A步骤的目的是获取含杂质较少（或较纯净）的DNA。

【点睛】

本题结合图解，考查DNA的粗提取和鉴定，要求考生识记DNA粗提取和鉴定的原理、操作步骤、实验中采用的试剂及试剂的作用等，再结合所学的知识准确答题，难度适中。【解析】C→B→E→D→A使鸡血细胞吸水涨破，释放出细胞核物质降低NaCl溶液的浓度，使DNA析出二苯胺蓝色提取含杂质较少（或较纯净）的DNA29、略

【分析】【详解】

本题以杂交瘤细胞为背景；考查了动物细胞融合；细胞分裂和细胞分化。

（1）在第四次免疫后；Y的血清抗体效价大于16000，所以最少需要经过四次免疫.由图可知，血清抗体效价均达到16000以上时，Y的效价最大，最适合用于制备B淋巴细胞。

（2）B细胞与骨髓瘤细胞在一起融合时；可能发生B细胞与骨髓瘤细胞融合，B细胞之间的融合，骨髓瘤细胞之间的融合和B细胞与骨髓瘤细胞融合。由于细胞细胞融合是随机的，且融合率达不到100%，故体系中会出现多种类型的细胞。

（3）由于核膜也具有流动性；故小鼠的免疫B淋巴细胞核与其骨髓瘤细胞核会融合形成一个杂交的细胞核。B细胞有40条染色体，骨髓瘤细胞有60条染色体，融合后的杂交瘤细胞有100条染色体。

（4）未融合的B淋巴细胞是已分化的细胞；不能无限增殖，所以多次培养后不能存活。

【点睛】

本题考查动物细胞工程，意在考查考生识记所列知识点，并能运用所学知识做出合理的判断或得出正确的结论的能力。【解析】4YY小鼠的血清抗体效价最高B淋巴细胞相互融合形成的细胞、骨髓瘤细胞相互融合形成的细胞细胞融合是随机的，且融合率达不到100%1100不能无限增殖30、略

【分析】【分析】

基因突变是指DNA分子中发生碱基对的替换；增添和缺失；而引起的基因结构的改变。翻译是指在核糖体上，以mRNA为模板、以氨基酸为原料合成蛋白质的过程，该过程还需要tRNA来运转氨基酸。

密码子由位于mRNA上决定一个氨基酸的三个相邻的碱基组成。终止密码子的作用是终止翻译过程。

基因工程中检测目的基因在受体细胞内是否成功表达可以用抗原-抗体杂交技术。

【详解】

（1）由题干信息可知；黏多糖贮积症患者细胞中IDUA基因突变后，转录出的mRNA长度不变，说明其没有发生碱基对的增添和缺失，因为这两者改变会导致转录出的mRNA长度改变，因此推测其基因突变是由于碱基对替换。由于终止密码子提前出现，导致翻译提前终止，肽链变短，IDUA酶分子量变小，空间结构改变而失活。

（2）由题干可知；抑制性tRNA（sup-tRNA）可以最终诱导核糖体通读mRNA上的遗传信息合成具有功能的全长蛋白，并且抑制性tRNA（sup-tRNA）与普通tRNA的结构；功能相同，据此推测该抑制性tRNA可以携带氨基酸至核糖体并与终止密码子碱基配对使翻译过程继续。

（3）本实验目的是比较携带不同氨基酸的sup-tRNA的通读效果；需要保证实验组细胞含有突变IDUA基因，即其不能合成具有正常功能的IDUA酶（防止正常IDUA酶对实验结果产生干扰），同时保证在不同的实验组细胞中可以转录出携带不同中氨基酸的sup-tRNA，因此实验组中受体细胞中应该含有导入携带不同氨基酸的sup-tRNA基因和突变IDUA基因。若要判断各个实验组细胞中携带不同氨基酸的sup-tRNA是否成功诱导了具有功能的IDUA酶，可以采用该酶的特异性抗体对其进行检测，即进行抗原-抗体杂交。分析题图可知，与对照组（含正常IDUA基因的组）相比，含携带酪氨酸的sup-tRNA的受体细胞中表达的全长IDUA蛋白量比其他实验组都多，说明其能有效恢复细胞中全长IDUA蛋白的合成，且效果最好。

（4）由以上实验可知，携带酪氨酸的sup-tRNA能有效诱导核糖体对突变IDUA基因转录出的mRNA进行通读，进而产生具有正常功能的IDUA酶，因此利用携带酪氨酸的sup-tRNA对IDUA突变基因纯合小鼠进行治疗，与不进行治疗的IDUA突变基因纯合小鼠相比，治疗组小鼠的IDUA酶活性高，组织黏多糖积累量少；同时，利用携带酪氨酸的sup-tRNA对IDUA基因敲除小鼠进行治疗，与不进行治疗的IDUA基因敲除小鼠相比，由于二者都不含有IDUA基因，则其细胞内都没有相应mRNA，因此携带酪氨酸的sup-tRNA无法发挥作用，最终导致治疗组与不治疗组的IDUA酶活性与组织黏多糖积累量无明显差异。【解析】(1)替换减少。

(2)识别终止密码子并携带氨基酸至核糖体使翻译过程继续。

(3)携带不同氨基酸的suptRNA基因和变IDUA抗原一抗体杂交恢复细胞中全长IDUA蛋白的合成；且效果最好。

(4)IDUA突变基因纯合小鼠IDUA酶活性高，组织黏多糖积累量少；IDUA基因敲除小鼠IDUA酶活性与组织黏多糖积累量无明显差异31、略

【分析】【分析】

参与果酒的制作的微生物主要是酵母菌；其新陈代谢的类型为异养兼性厌氧型，较适宜的发酵温度为18~30℃。在无氧的环境中酵母菌把糖类分解为酒精和二氧化碳。在果酒制作过程中检测发酵液是否含有酒精，取样后滴加适量酸性重铬酸钾溶液并振荡，若观察到溶液颜色的变化是橙色变成灰绿色，则说明发酵液中含有酒精。

【详解】

（1）传统发酵酿酒与现代工业发酵酿酒都是利用了酵母菌的无氧呼吸。酵母菌属于真核生物；其代谢类型是兼性厌氧型，在有氧条件下进行大量增殖，在无氧条件下将葡萄糖分解为酒精。

橙色的重铬酸钾溶液在酸性条件下与乙醇（即酒精）发生化学反应；变成灰绿色，该实验目的是验证发酵过程中产生了酒精，因此实验自变量是是否加入发酵液，因变量为溶液颜色变化。对照组中应加入酒精作为阳性对照。实验过程中应遵循等量原则；单一变量原则等，因此实验思路是：取两支试管分别标号A、B，A试管中各加入2ml发酵液，作为实验组，B试管中各加入2ml酒精，作为对照组，两试管中都加入适量酸性重铬酸钾，振荡后观察试管中颜色变化，AB两试管都变为灰绿色，即可验证发酵过程中产生了酒精。

（2）传统发酵技术一般不进行严格灭菌操作；因此其发酵菌种为天然的混合菌种。现代工业发酵酿制果酒不同于自制果酒，需要经过沉淀；过滤、灭菌、装瓶等过程才能获得成品酒。

（3）25×16型的血细胞计数板计算公式：酵母细胞个数/1mL=1个中方格中酵母菌数×25×10000×稀释倍数，因此该实验中每毫升发酵液中酵母菌数量=9×25×10000×1000=2.25×109。

（4）酿酒利用酵母菌的无氧呼吸，需要关闭充气口，酿醋利用醋酸菌，醋酸菌是需氧型微生物，因此需向充气孔中充入无菌空气。【解析】(1)酵母菌是兼性厌氧微生物；在无氧条件下将葡萄糖分解为酒精实验思路：取两支试管分别标号A；B，向A试管中各加入2ml发酵液，向B试管中各加入2ml酒精，向AB两试管各滴加0．5ml溶有0．1g重铬酸钾的浓硫酸溶液（或酸性重铬酸钾），并轻轻震荡，观察试管中溶液颜色变化。

(2)混合菌种沉淀；过滤、灭菌。

(3)2.25×109

(4)酿酒时需关闭充气口，酿醋时则需向充气孔中充入无菌空气六、综合题(共3题，共6分)32、略

【分析】【分析】

基因工程技术的基本步骤：

（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取；利用PCR技术扩增和人工合成。

（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤；基因表达载体包括目的基因；启动子、终止子和标记基因等。

（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同；导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法；基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。

（4）目的基因的检测与鉴定：

分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术；

个体水平上的鉴定：抗虫鉴定；抗病鉴定、活性鉴定等。

【详解】

（1）以RNA为模板获得DNA的过程称为逆转录；将cDNA片段导入到受体菌的群体中储存，这样能获得部分基因文库或cDNA文库。

（2）由图分析可得，①是用限制酶XbaⅠ来切割；得到两个黏性末端，而Klenow酶将XhaⅠ切割获得的黏性末端催化产生平末端，③是用限制酶HindⅢ切割，得到含黏性末端的目的基因，可与④切割后的C1质粒构建成基因表达载体。若直接用HindⅢ；XhaⅠ同时切割，产物两端都是黏性末端，而经过①→②→③可使目的基因两端分别为平末端和黏性末端，才能与被SmaⅠ与HindⅢ打开的载体连接。

（3）细胞体外培养所需营养物质与体内基本相同；例如，需要有糖；氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等。将细胞所需的上述营养物质按其种类和所需数量严格配制而成的培养基，称为合成培养基。为保证细胞生长，应在合成培养基中添加血清、血浆等天然成分，为避免污染，应在合成培养基中添加抗生素。细胞在传至10代后，增减减缓乃至停止，部分细胞的细胞核型可能发生变化，故传代培养不宜超过10代。

【点睛】

本题结合图解，考查基因工程的相关知识，要求考生识