2025年鲁科五四新版选修1生物上册阶段测试试卷

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A.此培养基属于液体培养基，其中的碳源是(CH2O)B.配制培养基时，溶化后分装前，必须要进行的是调整pH和灭菌C.接种时应在酒精灯火焰附近操作D.若用该培养液选择培养纤维素分解菌，应除去青霉素，加入的是纤维素粉3、成熟的紫皮百香果果皮中富含花色苷，果汁色泽金黄、香气馥郁、酸甜可口，富含多酚、类胡萝卜素等活性成分，有“果汁之王”的美称。以紫皮百香果全果和果汁为原料发酵，所得百香果酒的香气深受消费者的喜爱。以下说法正确的是（）A.百香果酒制作过程中酵母菌始终进行无氧呼吸B.从酿酒残渣中筛选培养醋酸菌时，在缺少糖的液体培养基中可加入乙醇作为碳源C.可利用酸性的重铬酸钾遇酒精变黄的特点，检测发酵液是否开始进行酒精发酵D.家庭制作百香果酒时，要每隔12小时打开瓶盖使多余的二氧化碳排出4、目前市场上的果蔬汁发酵产品所利用的菌种主要为乳酸菌，而利用酵母菌、醋酸菌、乳酸菌等多种益生菌混合发酵果蔬汁风味更协调、营养更丰富。相关叙述正确的是（）A.乳酸菌、醋酸菌和酵母菌均属于原核生物B.果蔬汁中的糖类物质可为益生菌提供碳源和氮源C.果蔬汁发酵过程中需要防止杂菌污染D.混菌发酵是把所有益生菌混合并在相同条件下发酵5、啤酒生产的简要流程如图所示；制麦时用赤霉素溶液浸泡大麦种子，糖化主要将麦芽中的淀粉等有机物水解为小分子。下列说法错误的是（）

A.在整个发酵过程中，要始终保持严格的无菌、厌氧环境B.用赤霉素溶液浸泡大麦种子，目的是促进α-淀粉酶合成C.在接种酵母菌前进行冷却处理，是为了避免杀死酵母菌种D.包装后放置的啤酒变酸且产生表面菌膜，一般可从菌膜中分离得到醋酸菌6、下列关于果酒和果醋的制作原理、发酵过程的叙述中，错误的是（）A.果酒和果醋的制作可用同一装置，但需控制不同发酵条件B.制作果酒和果醋时都应用体积分数为70%的酒精对发酵瓶消毒C.变酸果酒的表面观察到的菌膜可能是醋酸菌的菌落D.果酒和果醋的发酵菌种不同，但代谢类型相同7、研究人员以苹果为原料，先接种酵母菌，发酵96小时再接种老陈醋的醋醅（含醋酸菌）进行发酵，酿造苹果醋。如图为发酵液中酒精含量和总酸含量随发酵时间变化的曲线。下列相关分析不正确的是（）

A.发酵0～24小时酵母菌进行了有氧呼吸B.24小时后随着发酵时间延长pH逐渐下降C.96小时后发酵温度应适度升高调整D.发酵过程中有机物的能量全部留在发酵产品中8、下列有关血红蛋白的提取和分离，叙述正确的是（）A.SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分离蛋白质时的迁移速率主要取决于分子净电荷多少B.洗涤红细胞时要进行低速短时间离心以防止杂蛋白沉淀C.透析时可以除去样品中分子质量较大的杂质D.洗脱中凝胶表面露出后用300mL、20mmol/L的磷酸缓冲液洗涤评卷人得分二、多选题(共8题，共16分)9、张厨师的工作服上沾了一些血渍和油渍，清洗此工作服时，选用的加酶洗衣粉应含有（）A.淀粉酶B.脂肪酶C.RNA聚合酶D.蛋白酶10、在制作发酵食品的学生实践中，控制发酵条件至关重要。下列相关叙述错误的有（）A.泡菜发酵后期，尽管乳酸菌占优势，但仍有产气菌繁殖，需开盖放气B.制作果酒的葡萄汁不宜超过发酵瓶体积的2/3，制作泡菜的盐水要淹没全部菜料C.葡萄果皮上有酵母菌和醋酸菌，制作好葡萄酒后，可直接通入无菌空气制作葡萄醋D.果酒与果醋发酵时温度宜控制在18-25℃，泡菜发酵时温度宜控制在30-35℃11、当培养基中同时含有葡萄糖和乳糖时；通常情况下，大肠杆菌利用糖的顺序及生长曲线如右图所示。相关分析正确的是（）

A.葡萄糖和乳糖都可作为大肠杆菌的碳源B.大肠杆菌优先利用葡萄糖的根本原因是它能进行有氧呼吸C.5小时左右生长停滞可能与细胞中缺乏乳糖分解酶有关D.大肠杆菌由利用葡萄糖转变为利用乳糖的原因是乳糖诱导发生了基因突变12、关于实验室培养和纯化酵母菌过程中的部分操作，下列说法错误的是（）A.配制培养基、倒平板、接种需要在酒精灯火焰旁进行B.倒平板时，打开培养皿盖，倒放于超净实验台上，将锥形瓶中的培养基倒入培养皿C.倒入培养基后立即将平板倒置，防止培养基污染D.用平板划线法划完线后，要在培养皿皿底上做好标记13、有细胞结构的微生物基本上都可以分解尿素“如细菌、真菌（酵母菌）、放线菌等”。下列关于能分解尿素的微生物的叙述正确的是（）A.酵母菌能利用尿素做氮源，根本原因是其含有合成脲酶的基因B.尿素中的氮元素可用于合成细菌的蛋白质C.在资源和空间不受限制的阶段，若最初接种M个细菌，繁殖n代后细菌的数量是2n×M个D.可以利用人工诱变、转基因、多倍体育种等方法培育高效分解尿素的细菌14、某些土壤细菌可将尿素分解成CO2和NH3，供植物吸收和利用。下列关于土壤中分解尿素的细菌分离和计数的相关叙述，错误的是（）A.分解尿素的细菌是以尿素的分解产物CO2作为碳源的B.倒平板时应将打开的培养皿盖放到一边，以免培养基溅到皿盖上C.培养基中KH2PO4等的作用之一是作为缓冲剂保持pH稳定D.若实验组菌落平均数为37个/平板，空白对照平板上有3个菌落，则本组菌落数的平均值为34个/平板15、桑葚与草莓营养价值极高，口味调和。草莓中含量较高的维生素C有助于延缓桑葚天然色素的氧化；桑葚独有的花青素、白藜芦醇等物质能显著增强复合果酒的功效。下图为桑葚草莓复合果酒的工厂化制备流程，下列说法正确的是（）

桑葚和草莓原料的挑选和清洗→混合搅拌→添加偏重亚硫酸钾→榨汁→调糖和调酸→灭菌→接种发酵A.在生产复合果酒的过程中，要防止桑葚天然色素被氧化B.果酒发酵初期通入氧气能促进酵母菌繁殖，有利于加快果酒发酵C.复合果酒的制备过程中对发酵设备要进行灭菌处理D.变酸的果酒表面会形成一层菌膜，这层菌膜是由乳酸菌形成的16、下列关于血红蛋白提取和分离的过程及原理的叙述，错误的是（）A.为了防止血液凝固，应在采血器中预先加入抗凝血剂柠檬酸钠B.SDS能使蛋白质完全变性，使电泳迁移率完全取决于电荷的性质和多少C.利用0.9%的NaCl对血红蛋白溶液透析12小时，可以去除小分子杂质D.在凝胶柱中加入蛋白样品后即可连接缓冲溶液洗脱瓶进行洗脱和收集样品评卷人得分三、填空题(共8题，共16分)17、纯化——凝胶色谱操作。

处理后的样品还含有其他种类的蛋白质分子（如呼吸酶等）；因此要将杂蛋白与血红蛋白进行分离。

第一步要制作__________。第二步要__________________，因为____的凝胶和用________平衡好的凝胶的体积差别很大，所以装柱前需要根据色谱柱的内体积计算所需要的凝胶量。在装填凝胶柱时，不能有______存在。第三步是样品的______和______。18、红细胞的洗涤。

①目的：去除________。

②方法：采用________离心，如500r·min－1离心2min，然后用胶头吸管吸出上层透明的黄色______，将下层______的红细胞液体倒入______，再加入五倍体积的________，缓慢搅拌________，低速短时间离心，如此重复洗涤三次，直至上清液中没有______，表明红细胞已洗涤干净。19、加酶洗衣粉是指含有___________的洗衣粉，目前常用的酶制剂有四类：______、_____、________和___。其中，应用最广泛、效果最明显的是_________和__________。20、酶的活性是指酶催化一定化学反应的能力。酶的活性高低可以用在一定条件下，酶所催化的某一化学反应的________________来表示。酶反应速度用单位时间内、单位体积中______________或______________________来表示。21、判断纯化的蛋白质是否达标，需要进行____________的鉴定，使用最多的是__________________22、用做溶剂的有机溶剂分为水溶性和_____________两种。乙醇和丙酮能够与水混溶，是____________有机溶剂；石油醚、乙酸乙酯、乙醚、苯、________________等不能与水混溶，称为水不溶性有机溶剂。23、从橘皮中提取的橘皮油，无色透明，具有诱人的橘香味，主要成分是________________。橘皮精油主要贮藏在橘皮部分，由于橘皮精油的有效成分在用水蒸气蒸馏时会发生部___________________，使用_______________________蒸馏法又会发生原料___________的问题，所以一般采用_______________法。24、分离血红蛋白溶液：将搅拌好的混合液离心后可观察到试管中溶液分为4层（从上往下）：

第1层：________的甲苯层。

第2层：脂溶性物质的沉淀层——______薄层固体。

第3层：________的水溶液——红色透明液体。

第4层：其他杂质的________沉淀物。

将液体用______过滤，除去________________，于分液漏斗中静置片刻后，分出下层的________液体。评卷人得分四、实验题(共4题，共36分)25、金黄色葡萄球菌是一种具有高度耐盐性的微生物；可引起人类肺炎；肠炎等疾病。金黄色葡萄球菌在血平板(培养基中添加适量血液)上生长时，可破坏菌落周围的红细胞，使其褪色。如图为定性检测鲜牛奶中是否存在金黄色葡萄球菌的操作流程，请回答相关问题。

(1)按细胞结构分类，金黄色葡萄球菌属于________生物，从培养过程分析，金黄色葡萄球菌可进行________呼吸。

(2)7.5％NaCl肉汤培养基可为微生物提供的营养成分包括___________________，用该培养基进行选择培养的主要目的是_______________________。

(3)操作中在血平板上的接种方法是________，接种操作前后需要对接种工具进行________灭菌。

(4)在制备血平板时需将pH调节至________(“微酸性”或“微碱性”)后灭菌，待培养基________后，再加入适量血液。按培养基功能分类，血平板属于________培养基。

(5)经多次规范操作、重复实验，血平板上均出现________________的菌落，初步证明鲜牛奶中存在金黄色葡萄球菌，但鲜牛奶供应商仍认为此菌并非鲜牛奶所携带，因此，要对本操作进行完善，完善的方案是_________________________。26、果胶酶能分解果胶等物质；澄清果蔬饮料，在食品加工业中有着广泛的应用。

（一）回答下列有关果胶；果汁和果胶酶等问题。

（1）果胶是植物细胞壁的主要成分，起着将植物细胞_______在一起的作用。制作果汁时可加入果胶酶和__________以分解果胶；提高果汁出汁率和澄清度。

（2）果胶酶可以通过黑曲霉等微生物来生产，__________是筛选高表达菌株的最简便方法之一。分离和筛选能产生果胶酶的微生物，使用的培养基应以__________为唯一碳源；

（3）若需要对所得菌种进行分离计数，应采用__________法进行接种。若需要对所得菌种进行扩大培养，需要利用__________培养基。下列适于黑曲霉扩大培养的培养基是__________（。A．蛋白胨和酵母提取物培养基B．尿素固培养基C．MS培养基D．以添加蔗糖的豆芽汁培养基）。（4）由于果胶酶溶于水，不利于重复使用，可通过物理或化学方法将果胶酶固定在某种介质上，使之成为不溶于水而又有__________的制剂，这种技术被称为__________。

（二）某兴趣小组同学利用上述技术制得了三种不同品牌的果胶酶制剂（制剂中果胶酶浓度相同）；并进行了探究，其实验设计及实验结果如下表所示。

（注：“＋”越多表示果汁越浑浊。）

（5）表中X所代表的数值应为_____________________，Y的果汁浑浊程度应表示为________（用若干个“＋”表示）。

（6）除了观察果汁浑浊程度外，还可以通过检测_____________________的变化量来判断不同品牌果胶酶制剂的效果。若使用该方法，相关物质变化量最大的是____________组。

（7）该兴趣小组进一步探究了一定浓度的果胶酶制剂乙在不同浓度果汁下的作用；实验结果如下图曲线，请在图中画出同等条件下果胶酶制剂丙的作用曲线。

_________27、(十二)分析有关科学探究的资料；回答问题。

豆科作物的根瘤菌能够固氮；而禾本科植物不能。所以在农业实践中，将豆科植物和禾本科植物间作以提高禾本科植物的产量。研究发现产量提高与土壤中吸收氢气的细菌有直接关系，为探究其中的具体机制，进行以下三个实验。

[实验一]:豆科植物固氮反应能产生氢气；且氢气被土壤吸收。

供选材料：豆科植物苜蓿苗；禾本科植物小麦苗；灭菌的沙子，普通土壤。

供选仪器：收集氢气的设备。

实验方案：

71.若假设成立，完成右表___________________________。

植物名称

种植的基质

实验结果（有无氢气）

实验组

土壤

无

土壤

无

对照组

实验结果：实验组土壤中无法测得氢气；其余见上表。

[实验二]为探究氢气通过何种途径被土壤吸收；进行如下假设。

假设：氢气被土壤中的细菌吸收。

供选材料：苜蓿苗；普通土壤，抗生素（根瘤菌不敏感），杀真菌剂，2，4-D，萃乙酸。

供选仪器：收集氢气的设备。

实验方案：

72.针对假设在实验中除了选择________和________分别对土壤进行处理后栽培苜蓿苗，还需使用________的土壤栽培苜蓿苗作为对照。

73.若假设成立，针对实验方案描述实验结果：________________________________。

[实验三]土壤中吸收氢气的细菌（氢氧化细菌）是否有促进植物生长的作用；继续探究。

假设：氢氧化细菌可以促进植物生长。

供选材料：1.2m×2m的实验田；小麦种子，氢氧化细菌菌株A1，B1，C1，D1，E1;非氧化细菌菌株A2，B2，C2，D2，E2；大肠杆菌。

实验方案：用不同的菌株分别拌种；种植在实验田中，一段时间后记录小麦初生菌的相数据。

实验结果：平均胚根长度（mm）；根相对生长（％）。

A1：平均胚根长度13；根相对生长163;E2：平均胚根长度8，根相对生长100;

D2：平均胚根长度8；根相对生长100;B1：平均胚根长度30，根相对生长375;

C2：平均胚根长度8；根相对生长100;C1：平均胚根长度12，根相对生长150;

D1：平均胚根长度33；根相对生长4.63;E1：平均胚根长度20，根相对生长250;

A2：平均胚根长度8；根相对生长100;B2：平均胚根长度3，根相对生长38;

大肠杆菌：平均胚根长度8；根相对生长100。

74.针对假设对上述数据进行统计处理，用合适的表格表达。_____________________

结论：综合以上三个实验的结果可见，土壤中的氢氧化细菌在促进植物生长中起重要作用。28、回答下列(一)；(二)小题：

(一)下面是有关食醋制作的实验；请回答：

(1)若以大米为原料经三步发酵可以制作食醋：

第一步：大米经蒸熟、冷却后加入淀粉酶，将原料中的淀粉分解成________(填中间产物)，然后进一步水解成葡萄糖，这一过程可用________(填淀粉指示剂)来检测；因为该试剂遇淀粉呈蓝色，遇上述中间产物呈红色。

第二步：用酵母菌将葡萄糖转化成乙醇，这一发酵过程中，玻璃发酵瓶不应完全密闭的主要原因是_____________________________________________________。

第三步：用________菌将乙醇转化成乙酸，这一过程是否需要氧气：________。

(2)若以葡萄为原料；将葡萄榨成汁后装入相应的发酵瓶中，在温度等适宜的条件下进行发酵，如下图所示。

则图中实验操作的错误之处是____________________________________________________。

(3)借助显微镜对酵母菌进行计数，下列不会影响计数准确性的操作是________。

A．压在方格线上的细胞只计左线和上线上的酵母菌数。

B．用滴管取1滴培养液到血细胞计数板的方格区；盖上盖玻片，进行计数。

C．如果酵母菌有芽体；因没有分离成两个子体，要以一个计数。

D．方格内酵母菌总数量应不少于300个。

(二)人组织纤溶酶原激活物(htPA)是一种重要的药用蛋白；可在转htPA基因母羊的羊乳中获得。流程如下：

请回答：

(1)htPA基因与质粒通常用同种__________________切割，再通过__________酶连接构建重组质粒。

(2)为获取更多的卵(母)细胞，通常对供体母羊进行____________处理。卵(母)细胞在体外培养成熟，再与经过____________处理的精子完成受精作用。体外受精卵还需经过____________培养，然后再移植，代孕产仔。最后检测筛选，下列检测结果中，作为培育成功标志的是________。

A．体细胞中检测到htPA基因。

B．体细胞中检测到htPA基因的mRNA

C．羊奶中检测到htPA

D．羊奶中检测到蛋白质含量明显增加。

(3)若快速繁殖转htPA基因羊，下列胚胎工程技术中没有直接涉及的是________。

A．胚胎体外培养

B．胚胎移植。

C．胚胎分割

D．胚胎干细胞培养评卷人得分五、非选择题(共3题，共21分)29、回答下列(一)；(二)小题：

(一)已知某细菌的两种突变类型细菌Ⅰ和细菌Ⅱ的营养条件和菌落特征都相同；但细菌Ⅰ能分解有机物A而不能分解有机物B，细菌Ⅱ能分解有机物B而不能分解有机物A。现有这两种类型细菌的混合液样品，要将其分离，有人设计了一种方案，部分操作步骤如下图。

(1)步骤一使用的是________培养基；其中含有细菌生长所需的水；无机盐、碳源和氮源等营养物质，此外还必须加入________，以利于对不同菌种进行分离操作。

(2)步骤一采用________法接种；此接种法可使接种细菌逐渐稀释，经适宜条件培养，可形成单个；独立的________，最终可能得到纯种的细菌；要进行上述接种操作，必须在________及酒精灯火焰附近进行，以避免杂菌污染。

(3)步骤三中；若对其中某瓶培养液中A；B两种有机物含量进行测定，当培养液中检测出如下的实验结果，其中能说明培养液只有细菌Ⅰ的是________。

A．化合物A与B含量都明显下降。

B．化合物A含量明显下降；B含量基本不变。

C．化合物A含量基本不变；B含量明显下降。

D．化合物A；B含量都基本不变。

(二)绿色城市的重要标志之一是实现垃圾的“减量化；资源化和无害化”。下图是垃圾资源化、无害化处理的一种方案：

(1)该生态系统中属于分解者的生物有______________。该生态工程主要利用了________________的原理。

(2)从资源与环境的角度来看；④；⑤途径优于③途径的主要原因是__________________和减少环境污染等。

(3)该生态系统中能利用发酵技术产生沼气开发生物能；从该角度看，应属于________的生态工程。

A．物质循环利用。

B．清洁及可再生能源系统组合利用。

C．山区小流域综合治理与开发。

D．节水和废水处理与利用。

(4)种植业和________是人类食物生产系统的两大支柱，两者结合的优化设计需要按照__________________规律进行综合优化，使系统从总体上获得最佳的经济效益、生态效益和社会效益。30、酵母菌是对青霉素不敏感的异养型生物。回答下列问题：

（1）传统发酵酿造葡萄酒的菌种来自___________。在工业发酵时，培养酵母菌的培养基中添加了丰富的_________等物质和青霉素，青霉素的作用是_____。

（2）酵母菌生长需要适宜的pH，因此在培养基配制过程中需要添加_____，原因是酵母菌培养过程中__________。

（3）使用液体培养基培养酵母菌时，为弄清酵母菌种群数量增长情况，对培养液中的酵母菌逐个计数非常困难，因此可采用_______的方法。

（4）白假丝酵母菌会通过人体的感染部位进入血液，感染部位需要保持干燥和清洁，血液中血糖浓度不能太高，其依据是_________。31、酸菜是经乳酸菌发酵而成的一种发酵食品；制作过程中极易积累亚硝酸盐。一些乳酸菌能合成亚硝酸盐还原酶，能够显著降低亚硝酸盐含量。请回答相关问题。

（1）为获得高产亚硝酸盐还原酶的乳酸菌；某研究组以东北传统自然发酵酸菜为材料进行分离。

①在进行乳酸菌分离纯化时；科研人员将酸菜发酵液稀释后涂布在含溴甲酚绿（遇酸变色）的__________（“选择”或“鉴别”）培养基上，___________（“需氧”或“厌氧”）培养一段时间后，挑取周围变色的_________临时保存。

②在进行高产亚硝酸盐还原酶菌株筛选时；将临时保存的各菌种分别接种到含______的液体培养基中培养一段时间，离心收集上清液，在________酸化条件下，依次加入对氨基苯磺酸；N-1-萘基乙二胺盐酸盐进行反应，筛选反应显色较_____的菌株。

（2）利用筛选得到的菌种进行酸菜腌制；测定亚硝酸盐含量（单位：mg/kg），结果如下表所示：

据表分析，亚硝酸盐含量最高时的腌制条件是________________________。为避免细菌大量繁殖，产生大量的亚硝酸盐，除控制好表中涉及的腌制条件外，还需控制好腌制的____________。评卷人得分六、综合题(共4题，共8分)32、乳酸菌数量是评价活性乳酸菌制品质量的重要指标。研究小组用具有乳酸菌筛选功能的MRS培养基对某品牌酸奶中乳酸菌数进行研究。将乳酸菌专用MRS培养基倒平板；每个平板接人0．1mL酸奶样品的稀释菌液，涂布均匀。回答下列问题：

（l）为防止杂菌污染需要对培养基进行高压蒸汽灭菌；灭菌是指____。

（2）梯度稀释时；应用____对酸奶进行稀释。若要将样品稀释10倍，可用无菌移液管吸取5mL酸奶样品加入盛有____mL稀释液的三角瓶中充分混匀。

（3）为统计乳酸菌数量；宜采用____法接种。在实验中还要设置未接种的对照组，这样做的目的是____。

（4）平板接种后需对培养皿进行处理，再放置在培养箱中37℃恒温培养。该小组设计三种不同的处理方案：①将培养皿置于点燃蜡烛的密闭容器内，待蜡烛熄灭后将密闭容器放人培养箱；（萤将培养皿直接置于密闭容器内后放置在培养箱中；③培养皿不做处理直接放置在培养箱中。为能更真实反映样品中的乳酸菌数量，应选择的处理方案是____（填序号），理由是____。33、我国水果生产发展迅速；水果的加工包括果汁；果酒果醋等。请回答下列问题：

（1）制作果汁时常加入果胶酶；果胶酶通过分解果胶来提高果汁的_____（答出2点）。为了降低成本，使溶液中果胶酶能被再次利用，一般采用_____（答出1种即可）法将其固定。

（2）在葡萄酒的自然发酵过程中；起主要作用的菌种是_____，此时一般将温度控制在_____。

（3）在葡萄酒发酵过程中；发酵液一般无需经过严格的灭菌处理，这是因为_____。

（4）利用果酒制作果醋时需要醋酸菌，在醋酸发酵前，需要改变两个条件，具体措施是_____。在变酸的酒表面观察到的菌膜形成的原因是_____。34、回答下列有关传统发酵技术的相关问题：

（1）果酒的制作离不开____________菌，温度是菌种生长和发酵的重要条件，酒精发酵时一般将温度控制在__________℃。

（2）利用果酒制作果醋的过程中，根据醋酸菌的呼吸类型，该过程需要在_____条件下进行。

（3）果酒、果酷的发酵装置排气口为什么连接一个长而弯曲的胶管?_________________。

（4）腐乳制作的流程是：让豆腐上长出毛霉→_______→加卤汤装瓶→密封施制。

（5）在泡菜腌制过程中，要注意控制腌制的时间、温度、_____等因素；这些因素会影响亚硝酸盐含量。

（6）测定亚硝酸盐含量的原理是：在盐酸酸化条件下，亚硝酸盐与_______发生重氮反应后，与N-1-蔡基乙二胺盐酸盐结合形成_____________色染料。35、生物技术实践与人们的生产生活实际密切相关；请回答下列问题。

（1）制作腐乳的过程中起主要作用的微生物是________。将长满毛霉的豆腐块分层整齐地摆放在瓶中，同时逐层加盐，加盐的目的是________________________。通过发酵，豆腐中营养物质的种类________（填“增多”或“减少”）；且更易于消化和吸收。

（2）在腌制泡菜的过程中，要注意控制______________和食盐的用量，若控制不好容易造成__________________。为了缩短制作时间，有人还会在冷却后的盐水中加入少量陈泡菜液，加入陈泡菜液的作用是________________。

（3）蔬菜在腌制过程中，会产生亚硝酸盐．在_____条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生_____反应后，与N-1-萘基乙二胺盐酸盐结合形成_____色染料将显色反应后的样品与已知浓度的标准液进行目测比较，估算出的亚硝酸盐含量如图曲线所示，据图可以得出的结论是：_____

参考答案一、选择题(共8题，共16分)1、D【分析】【分析】

1；在微生物培养过程中；培养基中加入链霉素，目的是抑制细菌等原核生物的生长，筛选出真菌。培养基按功能可分为选择培养基和鉴别培养基等，加入链霉素的培养基属于选择培养基。

2；培养基中一般都含有水、碳源、氮源、无机盐、生长因子等。生物体内的生物大分子主要有多糖、核酸、蛋白质等；其中含有氮元素的生物大分子有核酸(DNA和RNA）和蛋白质等。

【详解】

A；链霉素能抑制细菌的生长；因此在培养基中加入链霉素后可以筛选真菌，A正确；

B；各种培养基中一般都含有水、碳源、氮源、无机盐；因此培养基中的马铃薯浸汁除了为微生物生长提供碳源外，还可提供的营养物质有氮源和无机盐，B正确；

C；磷脂和核苷酸中都含有N元素；因此氮源进入细胞后，可参与合成磷脂、核苷酸等物质，C正确；

D；淀粉遇碘-­碘化钾溶液显蓝色；产淀粉酶的菌落周围淀粉被水解，所以形成透明圈，D错误。

故选D。2、D【分析】【分析】

培养基为微生物提供生长；繁殖和积累代谢产物的营养物质．营养物质归纳为碳源、氮源、生长因子、无机盐和水。培养基根据化学成分可分为合成培养基、天然培养基等。根据用途分选择培养基、鉴别培养基。根据性质分为液体、半固体和固体培养基。

【详解】

A、据表分析，该培养基配方中没有加琼脂，所以应该为液体培养基，碳源是（CH2O）；A正确；

B；不论何种培养基；在各成分都溶化后分装前，要先进行PH调整，然后再进行灭菌，B正确；

C；酒精灯火焰附近存在一个无菌区；为避免杂菌污染，接种时应在酒精灯火焰附近操作，C正确；

D、纤维素分解菌对青霉素敏感，若用该培养基选择培养纤维素分解菌，应除去青霉素和(CH2O)；同时加入的纤维素粉作为唯一碳源，D错误。

故选D。

【点睛】

本题综合微生物的培养及实验设计和分析能力，意在考查考生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能力；能运用所学知识与观点，对某些生物学问题进行解释、推理，做出合理的判断或得出正确的结论的能力；对实验现象和结果进行解释、分析、处理，能对一些简单的实验方案做出设计的能力．3、B【分析】【分析】

1；参与果酒制作的微生物是酵母菌；其新陈代谢类型为异养兼性厌氧型。

2；参与果醋制作的微生物是醋酸菌；其新陈代谢类型是异养需氧型，果醋制作的原理：当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将糖分解成醋酸。当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。

【详解】

A；在制作酒时；开始先通入一段时间的空气，目的是让酵母菌先进行有氧呼吸，快速增加酵母菌的数量，此时不产生酒精，因为在有氧呼吸的情况下酵母菌将有机物分解为二氧化碳和水；只有氧气耗完后，进行无氧呼吸，才将有机物分解为酒精和水，A错误；

B；从酿酒残渣中筛选培养醋酸菌时；醋酸菌可以将乙醇直接转化为乙醛，再将乙醛变为乙酸，故可以加入乙醇作为碳源，B正确；

C；在酸性条件下；重铬酸钾与酒精反应呈现灰绿色，检测发酵液是否开始进行酒精发酵，C错误；

D；家庭制作百香果酒时；要每隔12小时拧松瓶盖使多余的二氧化碳排出，不是打开，D错误。

故选B。4、C【分析】【分析】

原核生物没有以核膜为界限的细胞核；只有拟核；原核生物除了支原体都具有细胞壁，成分主要是肽聚糖；原核生物具有细胞膜；细胞质和核糖体；原核生物遗传物质是DNA，DNA为环状裸露的，不构成染色体。

【详解】

A；酵母菌属于真核生物；A错误；

B；糖类不含氮元素；果蔬汁中的糖类物质可为益生菌提供碳源，B错误；

C；果蔬汁发酵过程中需要防止杂菌污染；杂菌污染不但影响口味，还可能产生有害物质，C正确；

D；发酵需要根据不同菌种的适宜生活条件调节发酵条件；D错误。

故选C。5、A【分析】【分析】

大麦种子萌发时；其贮存的大分子物质淀粉；蛋白质分解为小分子，为种子萌发提供物质和能量。赤霉素主要是由未成熟的种子、幼芽和幼根合成，能够促进细胞伸长、促进种子萌发和果实发育。在实际应用中可以促进植物茎秆伸长，解除种子和其他部位休眠，提早用来播种。

【详解】

A；酵母菌是兼性厌氧微生物；在整个发酵过程中，要先通气使酵母菌大量繁殖，然后保持严格的无菌、厌氧环境，使其无氧呼吸进行发酵，A错误；

B；用赤霉素溶液浸泡大麦种子；可以让大麦种子无需发芽便能产生更多的α-淀粉酶，降低生产成本，B正确；

C；在接种酵母菌前进行冷却处理；是为了避免杀死酵母菌种，C正确；

D；包装后放置的啤酒变酸且产生表面菌膜；一般可从菌膜中分离得到醋酸菌，D正确。

故选A。6、D【分析】【分析】

果酒制作的菌种是酵母菌；代谢类型是兼性厌氧型真菌，属于真核细胞，条件是18～25℃；前期需氧，后期不需氧；果醋制作的菌种是醋酸菌，代谢类型是需氧型细菌，属于原核细胞，条件是30～35℃、一直需氧。

【详解】

A；果酒和果醋的制作可用同一装置；但需控制不同发酵条件，果酒制作需要无氧环境，适宜温度为18～25℃，而果醋制作需要有氧环境，适宜温度为30～35℃，A正确；

B；制作果酒和果醋时均需要对发酵瓶消毒；均可用体积分数为70%的酒精进行消毒，B正确；

C；醋酸菌是好氧菌；在变酸果酒的表面观察到的菌膜可能是醋酸菌在液面大量繁殖而形成的，C正确；

D；果酒发酵的菌种是酵母菌；其代谢类型为异养兼性厌氧型，而果醋发酵的菌种是醋酸菌，其代谢类型是异养需氧型，D错误。

故选D。7、D【分析】【分析】

1、依图可知，接种酵母菌前24h无酒精产生，酿母菌进行有氧呼吸增加其数量。酿酒过程中，酵母菌进行无氧呼吸产生酒精和CO2。

2；后期接种醋酸菌进行醋酸发酵；醋酸菌进行有氧呼吸产生醋酸。

【详解】

A；发酵0～24小时没有酒精产生；说明酵母菌进行了有氧呼吸，A正确；

B；24小时后随着发酵时间延长；总酸含量逐渐上升，pH逐渐下降，B正确；

C；醋酸发酵的最适温度是30℃～35℃；酒精发酵的最适温度18℃～25℃，故由产酒到产醋应适度升高温度，C正确；

D；发酵过程中有机物作为呼吸底物释放的能量；部分以热能散失，部分转化为ATP中活跃的化学能，还有部分留在发酵产品中，D错误。

故选D。8、B【分析】【分析】

1；聚丙烯酰胺凝胶电泳：蛋白质在聚丙烯酰胺凝胶中的迁移率取决于它所带净电荷的多少及分子的大小等因素。为了消除净电荷对迁移率的影响；可以在凝胶中加入SDS；

2；蛋白质提取和分离一般分为四步：样品处理、粗分离、纯化和纯度鉴定；

3；样品处理及粗分离：红细胞的洗涤、血红蛋白的释放、分离血红蛋白溶液和透析。

【详解】

A；SDS能与各种蛋白质形成蛋白质－SDS复合物；SDS所带负电荷的量大大超过了蛋白质分子原有的电荷量，因而掩盖了不同种蛋白质间的电荷差别，使电泳迁移率完全取决于分子的大小，A错误；

B；离心速度过高和时间过长会使白细胞等一同沉淀；达不到分离的效果，所以低速短时间离心以防止杂蛋白沉淀，B正确；

C；透析袋能使小分子自由进出；而将大分子保留在袋内，透析的目的是除去样品中相对分子质量较小的杂质，C错误；

D；洗脱中不能让凝胶表面露出后；防止产生气泡，影响洗脱次序，影响分离效果，D错误。

故选B。二、多选题(共8题，共16分)9、B:D【分析】【分析】

加酶洗衣粉是指含有酶制剂的洗衣粉；目前常用的酶制剂有四类：蛋白酶；脂肪酶、淀粉酶和纤维素酶，其中，应用最广泛、效果最明显的是碱性蛋白酶和碱性脂肪酶。碱性蛋白酶能将血渍、奶渍等含有的大分子蛋白质水解成可溶性的氨基酸或小分子的肽，使污迹从衣物上脱落。脂肪酶、淀粉酶和纤维素酶也能分别将大分子的脂肪、淀粉和纤维素水解为小分子物质，使洗衣粉具有更好的去污能力。

【详解】

A；血渍和油渍的主要成分是蛋白质和脂肪；没有淀粉，选用的加酶洗衣粉可以不含淀粉酶，A错误；

B；血渍和油渍的主要成分是蛋白质和脂肪；选用的加酶洗衣粉应含有脂肪酶，B正确；

C；RNA聚合酶催化DNA转录合成RNA；血渍和油渍的主要成分是蛋白质和脂肪，选用的加酶洗衣粉不含有RNA聚合酶，C错误；

D；血渍和油渍的主要成分是蛋白质和脂肪；选用的加酶洗衣粉应含有蛋白酶，D正确。

故选BD。10、A:C:D【分析】【分析】

参与果酒制作的微生物是酵母菌；其新陈代谢类型为异养兼性厌氧型。参与果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陈代谢类型是异养需氧型。

【详解】

A；乳酸菌属于厌氧菌；开盖放气会影响乳酸菌发酵，因此不能开盖放气，A错误；

B；制作果酒的葡萄汁不宜超过发酵瓶体积的2/3；是为了发酵初期让酵母菌进行有氧呼吸大量繁殖，同时为了防止发酵过程中发酵液溢出，制作泡菜的盐水要淹没全部菜料，以保证乳酸菌进行无氧呼吸，B正确；

C；醋酸菌为需氧菌；且发酵温度高于果酒的发酵温度，因此制作好葡萄酒后，除通入无菌空气，还需要适当提高发酵装置的温度，C错误；

D；果酒与果醋发酵时温度宜控制在18-25℃；果醋发酵时温度宜控制在30-35℃，泡菜的制作温度低于30-35℃，D错误。

故选ACD。11、A:C【分析】【分析】

据图分析可知；培养基中同时含有葡萄糖和乳糖时，大肠杆菌先利用葡萄糖再利用乳糖，大肠杆菌最开始只利用葡萄糖，葡萄糖消耗完后，由于环境中存在乳糖，大肠杆菌会产生半乳糖苷酶继续分解乳糖。

【详解】

A；据图可知；大肠杆菌既能利用葡萄糖也能利用乳糖作为生长过程中的碳源，A正确；

B；由图可知；前5小时左右大肠杆菌利用葡萄糖，后5小时利用乳糖进行生长繁殖，优先利用葡萄糖的根本原因是基因的选择性表达，B错误；

C；大肠杆菌在正常条件下无利用乳糖的酶；5小时左右时生长停滞与此相关，C正确；

D；大肠杆菌在代谢中利用乳糖做碳源时；由于环境诱导基因表达，会产生分解乳糖的半乳糖苷酶，而非基因突变的作用，D错误。

故选AC。12、A:B:C【分析】【分析】

制备牛肉膏蛋白胨固体培养基：（1）计算：依据是培养基配方的比例。（2）称量：牛肉膏比较黏稠；可同称量纸一块称取。牛肉膏和蛋白胨易吸潮，称取时动作要迅速，称后及时盖上瓶盖。（3）溶化：牛肉膏和称量纸+水加热取出称量纸→加蛋白胨和氯化钠→加琼脂（注意：要不断用玻璃棒搅拌，防止琼脂糊底而导致烧杯破裂）→补加蒸馏水至100mL。（4）调pH。（5）灭菌：培养基采用高压蒸汽灭菌，培养皿采用干热灭菌。（6）倒平板。

【详解】

A；倒平板、接种需要在酒精灯火焰旁进行；而配培养基不需要在酒精灯的火焰旁进行，A错误；

B；倒平板时；打开培养皿盖，将锥形瓶中的培养基倒入培养皿，然后倒放于超净实验台上，B错误；

C；倒入培养基后立即盖上培养皿；冷却后将平板倒过来放置，C错误；

D；用平板划线法划完线后；要在培养皿皿底上做好标记，D正确。

故选ABC。13、A:B:C【分析】【分析】

绝大多数微生物都能利用葡萄糖；但是只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素，利用尿素为唯一氮源的选择培养基，可以从土壤中分离出分解尿素的微生物。

【详解】

A；脲酶能够将尿素降解成氨和二氧化碳；因此酵母菌能利用尿素做氮源，根本原因是其含有合成脲酶的基因，A正确；

B；蛋白质组成元素包括N；因此尿素中的氮元素可用于合成细菌的蛋白质，B正确；

C、在资源和空间不受限制的阶段，细菌为“J”形增长，其分裂方式为二分裂生殖，因此最初接种M个细菌，繁殖n代后细菌的数量是2n×M个；C正确；

D；细菌为原核生物；没有染色体，因此不能用多倍体育种等方法培育高效分解尿素的细菌，D错误。

故选ABC。14、A:B:D【分析】【分析】

土壤中分解尿素的细菌的分离与计数实验中；需要使用以尿素为唯一氮源的选择培养基，计数的关键是经梯度稀释后的倍数要合适，计数时通常选择菌落数在30−300之间的实验组平板进行计数。

【详解】

A、分解尿素的细菌是异养型，不能以CO2作为碳源；A错误；

B；倒平板时；不能将打开的培养皿盖放到一边，以免微生物污染，正确的做法是：用左手将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙，右手将锥形瓶中的培养基（约10～20mL）倒入培养皿，左手立即盖上培养皿的皿盖，B错误；

C、无机盐可以作为缓冲剂保持细胞生长过程中pH稳定，所以培养基中KH2PO4等的作用之一是作为缓冲剂保持pH稳定；C正确；

D；在完全正确的操作情况下；空白对照组中不应出现菌落。若空白对照组出现菌落，说明操作过程中存在微生物污染，属于实验失误，所有实验数据均不应采用，D错误。

故选ABD。

【点睛】

本题主要考查微生物的培养和计数，要求学识记分解尿素的细菌分离和计数的过程，识记无菌操作技术，难度不大。15、A:B:C【分析】【分析】

在利用酵母菌发酵时最好是先通入足够的无菌空气在有氧环境下一段时间使其繁殖；再隔绝氧气进行发酵；酒精发酵的最佳温度是在18℃～30℃，pH最好是弱酸性。

【详解】

A；桑葚独有的花青素等能显著增强复合果酒的功效；所以在生产复合果酒的过程中，要防止桑葚天然色素被氧化，增强功效，A正确；

B；酵母菌在有氧条件下进行快速的增殖；所以果酒发酵初期通入氧气能促进酵母菌繁殖，有利于加快果酒发酵，B正确；

C；为了防止杂菌污染；复合果酒的制备过程中对发酵设备要进行灭菌处理，C正确；

D；变酸的果酒表面会形成一层菌膜；这层菌膜是由醋酸菌形成的，D错误。

故选ABC。16、B:C:D【分析】【分析】

血红蛋白的提取与分离的实验步骤主要有：样品处理：①红细胞的洗涤；②血红蛋白的释放，③分离血红蛋白溶液。粗分离：①分离血红蛋白溶液，②透析。纯化：调节缓冲液面→加入蛋白质样品→调节缓冲液面→洗脱→收集分装蛋白质。纯度鉴定--SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳。

【详解】

A；为了防止血液凝固；应在采血器中预先加入抗凝血剂柠檬酸钠，A正确；

B；在一定pH下；使蛋白质基团带上正电或负电；加入带负电荷多的SDS，形成“蛋白质-SDS复合物”，使蛋白质迁移速率仅取决于分子大小，B错误；

C；利用磷酸缓冲液对血红蛋白溶液的透析12小时；可以去除小分子杂质，C错误；

D；在凝胶柱中加入蛋白样品后；等样品完全进入凝胶层后才能连接缓冲溶液洗脱瓶进行洗脱和收集样品，D错误。

故选BCD。三、填空题(共8题，共16分)17、略

【分析】【详解】

第一步要制作凝胶色谱柱。

第二步要装填凝胶色谱柱；因为干凝胶和用缓冲液平衡好的凝胶的体积差别很大，所以装柱前需要根据色谱柱的内体积计算所需要的凝胶量。在装填凝胶柱时，不能有气泡存在。

第三步是样品的加入和洗脱。【解析】凝胶色谱柱装填凝胶色谱柱干缓冲液气泡加入洗脱18、略

【分析】【详解】

①红细胞含有大量血红蛋白；故红细胞的洗涤需要去除杂蛋白。

②方法：采用低速短时间离心，如500r·min－1离心2min，然后用胶头吸管吸出上层透明的黄色血浆，将下层暗红色的红细胞液体倒入烧杯，再加入五倍体积的生理盐水，缓慢搅拌10min，低速短时间离心，如此重复洗涤三次，直至上清液中没有黄色，表明红细胞已洗涤干净。【解析】杂蛋白低速短时间血浆暗红色烧杯生理盐水10min黄色19、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】酶制剂蛋白酶脂肪酶淀粉酶纤维素酶碱性蛋白酶碱性脂肪酶20、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】反应速度反应物的减少量产物的增加量21、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】蛋白质纯度SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳22、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】水不溶性水溶性四氯化碳23、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】柠檬烯水解水中焦糊压榨24、略

【分析】【分析】

【详解】

分离血红蛋白溶液：将搅拌好的混合液离心后可观察到试管中溶液分为4层（从上往下）：

第1层：甲苯密度最小；故最上层为无色透明的甲苯层。

第2层：脂溶性物质的沉淀层——白色薄层固体。

第3层：血红蛋白的水溶液——红色透明液体。

第4层：其他杂质的暗红色沉淀物。

将液体用滤纸过滤；除去溶性沉淀层，于分液漏斗中静置片刻后，分出下层的红色透明的液体即为血红蛋白溶液。

【点睛】【解析】无色透明白色血红蛋白暗红色滤纸脂溶性沉淀层红色透明四、实验题(共4题，共36分)25、略

【分析】【分析】

微生物的营养物质有5类；分别是水；无机盐、碳源、氮源及生长因子。培养基按功能分为选择培养基和鉴别培养基：①选择培养基：培养基中加入某种化学物质，以抑制不需要的不需要的微生物的生长，促进所需要的微生物生长，培养、分离出特定的微生物（如培养酵母菌和霉菌，可在培养基中加入青霉素；培养金黄色葡萄球菌，可在培养基中加入高浓度的食盐）；②鉴别培养基：根据微生物的代谢特点，在培养基中加入某种指示剂或化学药品，鉴别不同种类的微生物，如可用伊红-美蓝培养基鉴别饮用水或乳制品中是否有大肠杆菌（若有，菌落呈深紫色，并带有金属光泽）。在含有纤维素的培养基中加入刚果红时，刚果红能与培养基中的纤维素形成红色复合物。当纤维素被纤维素酶分解后，刚果红-纤维素的复合物就无法形成，培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈。

【详解】

（1）如何判断细菌：带“菌”字的生物中；“菌”字前有“杆”“球”“弧”“螺旋”等表示形态的字的都是细菌，如大肠杆菌；肺炎双球菌、葡萄球菌、霍乱弧菌等都是细菌，葡萄球菌属于细菌，属于原核生物；在培养的过程中由于没有密闭培养，所以葡萄球菌属于有氧呼吸的菌种。

（2）7.5%NaCl肉汤培养基中含有蛋白质；所以可以提供氮源和碳源，又含有水分和氯化钠，所以提供的营养物质为碳源；氮源、水和无机盐；高浓度的盐溶液可以对微生物进行选择，而葡萄球菌可以生存在高浓度的盐溶液中。

（3）题图中的接种过程使用接种环进行接种；此接种方法是平板划线法；操作前后对接种环的灭菌方式是灼烧灭菌。

（4）血液是微碱性的；为维持红细胞的正常形态，在制备血平板时需将pH调节至微碱性后灭菌，为防止高温破坏血细胞，灭菌后的培养基应在冷却后，再加入适量血液；由于该培养基能够鉴别是否含有葡萄球菌，所以属于鉴别培养基。

（5）由题干“金黄色葡萄球菌在血平板（培养基中添加适量血液）上生长时；可破坏菌落周围的红细胞，使其褪色”，所以如果经多次规范操作；重复实验，血平板上均出现透明圈的菌落，说明初步证明鲜牛奶中存在金黄色葡萄球菌；要进一步证明金黄色葡萄球菌来自鲜牛奶，需要对本实验进行完善，即需要设计对照实验，对照组实验的设计是在培养基中不加鲜牛奶而其它操作均相同。

【点睛】

解答本题的关键是分析题图，明确图中过程使用接种环接种，从而确定接种的方法是什么。【解析】原核有氧碳源、氮源、水和无机盐增加金黄色葡萄球菌的数量平板划线法灼烧微碱性冷却鉴别周围存在透明圈设置不加鲜牛奶其他操作均相同的对照组26、略

【分析】【分析】

果胶酶：

（1）作用：果胶→果胶酶可溶性半乳糖醛酸；

（2）组成：果胶酶是分解果胶的一类酶总称；包括半乳糖醛酸酶；果胶分解酶、果胶酯酶；

果胶酶能分解果胶等物质；澄清果蔬饮料，在食品加工业中有着广泛的应用。果胶酶是一类酶的总称，包括多聚半乳糖醛酸酶；果胶分解酶和果胶酯酶等。其本质都是蛋白质，可以用蛋白质的凝胶电泳进行分离提纯。

【详解】

（1）果胶是植物细胞壁的主要成分；以原果胶；果胶、果胶酸的形态广泛存在于植物的果实、根、茎、叶中，它们伴随纤维素而存在，构成相邻细胞中间层粘结物，使植物组织细胞紧紧黏结在一起。在制作果汁时可加入果胶酶和果胶甲酯酶分解果胶，提高果汁出汁率和澄清度；

（2）单菌落分离是筛选高表达菌株的最简便方法之一。分离和筛选能产生果胶酶的微生物；使用的培养基应以果胶为唯一碳源；

（3）若需要对所得菌种进行分离计数；应采用稀释涂平板法进行接种；若需要对所得菌种进行扩大培养，需要利用液体培养基；由于黑曲霉中含有果胶酶，所以适于黑曲霉扩大培养的培养基是含有糖的培养基，以利于分解糖类获取更多的能量，应该是D添加蔗糖的豆芽汁培养基；

（4）由于果胶酶溶于水；不利于重复使用，可通过物理或化学方法将果胶酶固定在某种介质上，使之成为不溶于水而又有酶活性的酶制剂，这种技术叫固定化酶技术；

（5）在本实验中；1；2、3组为实验组，各加入了2ml果胶酶制剂，4组作为空白对照，为了保证各组总体积相等，4组需要加入4ml蒸馏水。由于果胶酶制剂能够澄清果汁，4组未加入果胶酶制剂，因此其浑浊程度应大于另外三组，可用++++表示其浑浊程度。

（6）果胶酶能分解果胶等物质；所以还可以通过检测果胶（反应物）的变化量来判断不同品牌果胶酶制剂的效果。根据本实验的结果，1组的浑浊程度最低，表明甲的效果最好。果胶的变化量越大，说明果胶被分解得越完全，所以，若用该方法进行检测，果胶变化量最大的是1组。

（7）由表格可知；丙制剂分解果胶的效果比乙更好，若探究同样条件下，同浓度的果胶酶制剂乙和丙在不同浓度果汁下的作用，则在一定果汁浓度范围内，加入丙的果汁浑浊程度将小于乙，但当果汁浓度达到一定浓度之后，果汁中的底物（果胶）浓度过高，乙和丙制剂分解果胶的效果不明显，故果汁浑浊程度基本一致。

【点睛】

果胶酶是一类酶的总称，包括多聚半乳糖醛酸酶、果胶分解酶和果胶酯酶等。其本质都是蛋白质，可以用蛋白质的凝胶电泳进行分离提纯。【解析】粘合果胶甲酯酶单菌落分离果胶稀释涂布平板液体D酶活性固定化酶技术4++++反应物（或“果胶”、“生产物”、“半乳糖醛酸”、“产物”）127、略

【分析】【详解】

71.要探究豆科植物固氮反应能产生氢气，且氢气被土壤吸收，实验的自变量应该是植物的种类和基质的种类，因变量是有无氢气产生。豆科植物苜蓿苗可以固氮产生氢气，若基质为土壤，氢气被土壤吸收，实验结果无氢气，若基质为沙子，氢气不被吸收，实验结果为有氢气；禾本科植物小麦苗不能固氮，不能产生氢气，所以无论基质是土壤还是沙子，均无氢气。如图所示：。

植物名称

种植的基质

实验结果（有无氢气）

实验组

苜蓿苗

沙子

有

对照组

小麦苗

沙子

无

土壤

无

土壤

无

72.为验证氢气是否被土壤中的细菌吸收；实验的自变量是土壤中是否含有细菌，故实验组可以用抗生素和杀真菌剂分别处理，对照组土壤不处理。

73.若用抗生素处理的土壤种植苜蓿苗可以收集到氢气；用杀真菌剂和不予处理的土壤种植苜蓿苗均无法收集到氢气，说明氢气被土壤中的细菌吸收。

74.根据氢氧化细菌菌株A1，B1，C1，D1，E1;非氧化细菌菌株A2，B2，C2，D2，E2的实验数据可知，表格如下：。菌株类型

平均胚根长度（mm）

根相对生长（％）

范围

均值

范围

均值

均值

大肠杆菌

8.0

100.0

非氢氧化细菌菌株

3-8

7.0

38-100

87.6

氢氧化细菌菌株

12-33

21.6

150-413

270.2

综合以上三个实验的结果可见，土壤中的氢氧化细菌在促进植物生长中起重要作用。【解析】①.。

植物名称

种植的基质

实验结果（有无氢气）

实验组

苜蓿苗

沙子

有

对照组

小麦苗

沙子

无

土壤

无

土壤

无

②.抗生素（杀真菌剂）③.杀真菌剂（抗生素）④.不予处理⑤.用抗生素处理的土壤种植苜蓿苗可以收集到氢气，用杀真菌剂和不予处理的土壤种植苜蓿苗均无法收集到氢气⑥.。菌株类型

平均胚根长度（mm）

根相对生长（％）

范围

均值

范围

均值

均值

大肠杆菌

8.0

100.0

非氢氧化细菌菌株

3-8

7.0

38-100

87.6

氢氧化细菌菌株

12-33

21.6

150-413

270.2

28、略

【分析】【详解】

试题分析：本题结合转htPA基因母羊的培育过程图，考查基因工程的相关知识，要求考生识记基因工程的原理、操作工具及操作步骤，掌握各步骤中的相关细节，能结合所学的知识准确答题。

（一）(1)第一步：大米经蒸熟、冷却后加入淀粉酶，将原料中的淀粉分解成中间产物糊精，然后进一步分解成葡萄糖，这一过程可用KI­I2来检测，因为该试剂遇淀粉呈蓝色，遇上述中间产物呈红色。第二步：用酵母菌将葡萄糖转化成乙醇，这一发酵过程中，该过程中除了产生酒精，还会产生大量的CO来检测，因为该试剂遇淀粉呈蓝色，遇上述中间产物呈红色。第二步：用酵母菌将葡萄糖转化成乙醇，这一发酵过程中，该过程中除了产生酒精，还会产生大量的CO2

，使瓶内压力升高，使瓶内压力升高而可能引起爆裂，因此操作玻璃发酵瓶不应完全密闭。

第三步：用醋酸菌将乙醇转化成乙酸，由于醋酸菌是嗜氧菌，因此该过程需要消耗氧气。

（2）果酒发酵时需要无氧环境，因此甲图中的错误是未夹住发酵瓶的进气管。（3）用血细胞计数板进行计数时，压在方格边上的酵母菌，只能计数相邻两边及其顶角的个体数，否则会产生误差，A错误；对酵母菌计数时，应该先振荡均匀，滴于盖玻片边缘，让培养液自行渗入，多余培养液用滤纸吸去，而不能直接将培养液滴到血细胞计数板的方格区，盖上盖玻片，进行计数，B错误；用血球计数板计数酵母菌数量时酵母菌的芽体也作为个体计数，会使实验所得到数值比实际数值偏大，因此酵母菌有芽体，没有分离成两个子体，要以一个计数，C正确；

方格内酵母菌总数量大于300个，数量太多，细胞叠加在一起，会是读数带来误差，D错误。（二）（1）目的基因和运载体需用同种限制性核酸内切酶（或同种限制酶）切割，产生相同的粘性末端，通过DNA连接酶连接，以构建重组表达载体

。（2）为获取更多的卵（母）细胞，要对供体母羊注射促性腺激素，使其超数排卵．采集的精子需要经过获能（处理），才具备受精能力。体外受精卵还需经过胚胎体外培养，然后再移植，代孕产仔。基因表达成功时可获得目的基因的产物，既在转htPA基因母羊的羊乳中检测到htPA

（或人组织纤溶酶原激活物），说明目的基因成功表达，故选C。(3)由于胚胎干细胞具有发育的全能性，因此可以利用胚胎干细胞快速培养繁殖转htPA基因羊，故选D。【解析】糊精KI­I2发酵过程会产生大量的二氧化碳，使瓶内压力升高，若完全密闭，可能引起爆裂醋化醋杆是未夹住发酵瓶的进气管C限制性核酸内切酶DNA连接超数排卵获能(早期)胚胎体外CD五、非选择题(共3题，共21分)29、略

【分析】(一)分析图示细菌分离的操作步骤：第一步是应用LB固体培养基；采用平板划线法分离菌种，使混合的不同菌种在平板上分散开来，单独地生长成菌落。第二步是挑取平板画线末端的菌落接种在含A；B有机物的液体培养基中，经过一段时间的培养，通过检测培养液中A、B两种有机物的含量，确定接种的菌种。如果培养液中A有机物含量明显减少，而B有机物基本不变，说明接种的是菌种Ⅰ；若培养液中B有机物含量明显减少，而A有机物基本不变，说明接种的是菌种Ⅱ。根据分析，结合题意，依次作答。

（1）步骤一使用的是LB固体培养基；其中含有细菌生长所需的水；无机盐、碳源和氮源等营养物质。由于需要配置固体培养基，素养还必须加入凝固剂——琼脂，以利于对不同菌种进行分离操作。

（2）步骤一采用平板划线法接种；此接种法可使接种细菌逐渐稀释，经适宜条件培养，可形成单个；独立的菌落，最终可能得到纯种的细菌；为了避免杂菌污染，必须在超净台及酒精灯火焰附近进行。

（3）当培养液中检测出化合物A含量明显下降；B含量基本不变，才能说明培养液只有细菌Ⅰ，应为细菌Ⅰ只能分解利用有机物A不能利用有机物B。

（二）结合图示垃圾处理过程和方法；分析试题，依次作答：

（1）该生态系统中属于分解者的生物有蚯蚓；苍蝇、细菌等。该生态工程主要利用了物质循环利用的原理；尽可能让废物资源化。

（2）从资源与环境的角度来看；④；⑤途径优于③途径的主要原因是可以充分地利用垃圾中的物质且减少了对环境污染等。

（3）该生态系统中能利用发酵技术产生沼气幵发生物能；从该角度看，应属于清洁及可再生能源系统组合利用的生态工程。

（4）种植业和畜牧业是人类食物生产系统的两大支柱，两者结合需要按照生态和经济规律进行综合优化设计，使系统从总体上获得最佳效益。【解析】LB固体琼脂划线（单）菌落超净台B蚯蚓、苍蝇、细菌(微生物）物质循环利用可以充分地利用垃圾中的物质(或对物质的良性循环和多途径利用）B畜牧业生态和经济30、略

【分析】【分析】

酵母菌是一种真核生物；既能进行有氧呼吸，又能进行无氧呼吸，有氧呼吸和无氧呼吸过程中均会产生二氧化碳。酵母菌可以进行酒精发酵，产生酒精。酵母菌一般用液体培养基培养，对培养液中逐个计数非常困难，可以用血球计数板进行计数。

【详解】

（1）在葡萄酒的自然发酵过程中；起主要作用的是附着在葡萄皮上的野生型酵母菌。在工业发酵时,培养酵母菌的培养基中添加了丰富的碳源和氮源等物质和青霉素,青霉素是一种抗生素，其作用是抑制细茵和放线菌的生长,将酵母菌从微生物群体中分离出来。

（2）酵母菌在培养过程中；无论是进行有氧呼吸，还是进行无氧呼吸，都会生成二氧化碳，导致培养液中的pH下降，但酵母菌的生长需要适宜的pH,因此在培养基配制过程中需要添加pH缓冲剂。

（3）据分析可知；使用液体培养基培养酵母菌时,为弄清酵母菌种群数量增长情况,对培养液中的酵母菌逐个计数非常困难,因此可采用抽样检测的方法。

（4）酵母菌适宜在温暖潮湿且含糖较多的环境中生长；白假丝酵母菌会通过人体的感染部位进入血液,感染部位需要保持干燥和清洁,因此，血液中血糖浓度不能太高。

【点睛】

解答本题的关键是：明确酵母菌的呼吸类型，以及酵母菌在果酒制作方面的应用和计数的方法，再根据题意作答。【解析】葡萄皮碳源和氮源抑制细菌和放线菌的生长,将酵母菌从微生物群体中分离出来pH缓冲剂营养物质的分解利用和代谢产物的形成、积累会导致培养基中pH下降抽样检测酵母菌适宜在温暖潮湿且含糖较多的环境中生长31、略

【分析】【分析】

在微生物学中；将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基属于选择培养基；使用选择培养基的目的是从众多微生物中分离所需要的微生物。依据微生物产生的某种代谢产物与培养基中特定试剂或化学药品反应，产生明显的特征变化而设计的培养基属于鉴别培养基，其用途为：鉴别和区分菌落相似的微生物，如伊红和美蓝培养基可以鉴别大肠杆菌。

【详解】

（1）①由于溴甲酚绿遇酸变色；故培养基中的微生物若能产生酸性物质，可出现一定的颜色变化，可据此判断培养基中是否含有乳酸菌等能产生酸性物质的菌体，故含溴甲酚绿（遇酸变色）的培养基属于鉴别培养基。由于一个菌落可由一个菌体繁殖产生，故厌氧培养一段时间后，为保证菌体的纯度，可挑取周围变色的（单个）菌落临时保存。

②亚硝酸盐还原酶可将亚硝酸盐还原，故能够高产亚硝酸盐还原酶的菌株能将培养液中的亚硝酸盐大量还原，使培养液中亚硝酸盐含量下降。对亚硝酸盐含量测定的原理是：亚硝酸盐与对氨基苯磺酸的反应产物能与N-1-萘基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰红色染料。所以在进行高产亚硝酸盐还原酶菌株筛选时，将临时保存的各菌种分别接种到含亚硝酸盐（或NaNO2）的液体培养基中培养一段时间；离心收集上清液，在盐酸酸化条件下，依次加入对氨基苯磺酸；N-1-萘基乙二胺盐酸盐进行反应，筛选反应显色较浅的菌株。

（2）据表分析；亚硝酸盐含量最高时的腌制条件是食盐用量5%，腌制7天。为避免细菌大量繁殖，产生大量的亚硝酸盐，除控制好表中涉及的腌制条件外，还需控制好腌制的温度。

【点睛】

本题考查泡菜制作相关知识，意在考查考生理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能力。考生通过分析作答。【解析】鉴别厌氧（单个）菌落亚硝酸盐（或NaNO2）盐酸浅食盐用量5%，腌制7天温度六、综合题(共4题，共8分)32、略

【分析】【分析】

1；配制乳酸菌分离培养基的步骤是：计算→称量→溶化→灭菌→倒平板。该培养基的化学成分包括碳源、氮源、水、无机盐四类营养成分；在培养该细菌的培养基中还需要添加维生素。培养基常用的灭菌方法是高压蒸汽灭菌法。

2；分离微生物常用的方法：

①平板划线法：通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作；将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基表面。

②稀释涂布平板法：将菌液进行一系列的梯度稀释；然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。其中，稀释涂布平板法还可以用于对微生物进行计数。

【详解】

（1）培养基制作完成后；需要进行灭菌，常用高压蒸汽灭菌锅进行高压蒸汽灭菌法灭菌。灭菌是指利用强烈的理化因素杀