第八章肝胆疾病的生物化学诊断课件

第八章肝胆疾病的生物化学诊断第九章肝胆疾病的生物化学诊断第八章肝胆疾病的生物化学诊断本章内容概要：第三节胆红素与胆汁酸代谢及其异常第一节肝脏的解剖结构特点及其生物化学功能第五节肝胆疾病的肝功能实验室检查第二节肝脏的生物转化作用第四节肝病的生物化学代谢紊乱第六节肝功能检验项目选择原则与评价第八章肝胆疾病的生物化学诊断掌握:生物转化的概念、类型及其临床意义；胆红素的种类及相互的区别、黄疸的分类及其实验室鉴别试验；胆汁酸的组成及其检测的临床意义；肝硬化、肝昏迷及肝癌的临床生物化学检测。熟悉:胆红素代谢过程，胆汁酸的代谢与功能，肝细胞损伤时的代谢改变；乙醇性肝损伤、胆石症的生物化学机制；肝功能的生物化学检测项目选择及应用。了解：肝硬化、肝昏迷及肝癌的生物化学机制。本章教学要求：第八章肝胆疾病的生物化学诊断第一节肝脏的解剖结构特点及其生物化学功能肝脏的解剖结构特点肝脏的生物化学代谢肝细胞损伤时的代谢改变第八章肝胆疾病的生物化学诊断一、肝脏（Liver）解剖结构特点双重血液供应腹主动脉的分技肝动脉氧门静脉营养双重输出管道肝静脉代谢降解物

下腔静脉胆道系统脂溶性物质及其代谢产物体外第八章肝胆疾病的生物化学诊断肝门脉系统第八章肝胆疾病的生物化学诊断肝脏的组织结构特点细胞表面丰富的微绒毛细胞膜通透性高丰富的线粒体丰富的内质网、高尔基体核糖体丰富的酶类物质运输基础物质交换基础能量保证合成蛋白质、酶类物质代谢、生物转化基础特有的酶：OCT(鸟氨酸氨甲酰基转移酶)第八章肝胆疾病的生物化学诊断1.代谢功能：2.生物转化作用：3.合成功能：4.造血功能：肝脏在胚胎第8～12周。5.参与激素的灭活：6.其他：免疫、解毒、凝血等功能。二、肝脏生物化学功能第八章肝胆疾病的生物化学诊断三、肝脏生物化学代谢（一）蛋白质代谢变化1.蛋白质的合成：合成除γ-球蛋白以外的几乎所有血浆蛋白。合成：①自身蛋白②血浆蛋白清蛋白凝血因子肝功能受损：清蛋白水肿、A/G

凝血因子凝血障碍胞质、线粒体内酶

血

血液中多种酶活性

第八章肝胆疾病的生物化学诊断2.氨基酸分解代谢转氨基、脱氨基、转甲基、脱羧基肝细胞内转氨酶含量高：ALT急性肝炎：ALT

第八章肝胆疾病的生物化学诊断（3）解除氨毒氨尿素肾排肝功能受损：血氨支/芳胺类（假神经递质）肝性脑病第八章肝胆疾病的生物化学诊断（二）糖代谢维持血糖浓度的恒定糖原合成糖原分解糖异生肝功能受损：饥饿时易发生低血糖。糖耐量曲线异常。第八章肝胆疾病的生物化学诊断（三）脂代谢1.消化、吸收:胆固醇胆汁酸

肝功能受损：“脂肪泻”2.合成、运输：（1）合成：TG、ChE/Ch、PL、LCAT、酮体（2）运输：VLDL、HDL

肝功能受损：PL“脂肪肝”

LCAT血ChE/Ch第八章肝胆疾病的生物化学诊断（四）维生素代谢（1）吸收：胆汁酸------脂溶性维生素（2）转化：辅酶合成维生素A原维生素A

维生素D325-OH-D3胆道阻塞：Vk

出血倾向肝功能受损:肝性佝偻病第八章肝胆疾病的生物化学诊断（五）激素代谢激素的灭活作用肝功能受损：皮肤蜘蛛痣肝掌面部色素沉着低血糖第八章肝胆疾病的生物化学诊断第二节肝脏的生物转化作用生物转化的概述致癌物质的生物转化药物的生物转化第八章肝胆疾病的生物化学诊断【定义】既不能构成组织细胞的成分，又不能氧化供能的物质。

环境中摄入：药物、毒物、致癌物、食品添加剂、环境污染物等；

体内代谢生成：激素、神经递质、氨、胆红素、胺类化合物等。【性质】

多是有机物，水溶性低，难于排出。

非营养物质≠代谢废物非营养物质一、生物转化的概述（一）概念第八章肝胆疾病的生物化学诊断机体将一些内源性或外源性非营养物质进行化学转变，增加其极性（或水溶性），使其易随胆汁或尿液排出，这种体内变化过程称为生物转化（biotransformation）。部位：肝、肾、肺、胃肠道、皮肤、神经及胎盘等组织。亚细胞定位：微粒体、线粒体、胞液。第八章肝胆疾病的生物化学诊断某些物质经过第一相反应即可顺利排出体外。某些物质即使经过第一相反应后，极性改变仍不大，还必须与某些极性更强的物质结合,即进行第二相反应，才能最终排出。（二）生物转化的类型类型氧化还原水解第一相反应（改变某些基团）

第二相反应—结合反应（增加极性基团）第八章肝胆疾病的生物化学诊断(1)氧化反应(oxidationreaction)RH+O2+NADPH+H+

ROH+NADP++H2O

加单氧酶系加单氧酶系组成：CytP450、NADPH+H+、NADPH-细胞色素P450还原酶。a.加单氧酶系：依赖P450

又称混合功能氧化酶/羟化酶，能直接激活氧分子，其中一个氧原子加入底物分子中，另一氧原子被还原为水。产物：羟化物或环氧化物(水溶性↑)。1.第一相反应（mixedfunctionoxidase）第八章肝胆疾病的生物化学诊断举例：苯胺对氨基苯酚NH2NH2HOb.醇脱氢酶与醛脱氢酶系（胞液）

醇脱氢酶-2H醛脱氢酶+H2O,–2HCH3CH2OHCH3CHOCH3COOH乙醇乙醛乙酸alcoholdehydrogenase,ADHaldehydedehydrogenase,ALDH第八章肝胆疾病的生物化学诊断(2)还原反应(reductionreaction)：硝基还原酶类(nitroreductase)偶氮还原酶类(azoreductase)

二者均为黄素蛋白酶类，由NADPH供氢，还原产物为相应胺类。第八章肝胆疾病的生物化学诊断OCOCH3COOH乙酰水杨酸(阿司匹林)COOHOHCH3COOH乙酸+水杨酸(失活)H2O(3)水解反应(hydrolysisreaction)：

酯酶催化水解反应的酶酰胺酶

（胞液、微粒体）糖苷酶如普鲁卡因、阿司匹林在体内水解失活。第八章肝胆疾病的生物化学诊断结合对象：凡含有羟基、羧基或氨基的药物、毒物或激素均可发生结合反应。结合基团：葡萄糖醛酸、硫酸、谷胱甘肽、甘氨酸、乙酰基、甲基、水等物质或基团。场所：微粒体、胞液和线粒体内。酶：转移酶（如：葡萄糖醛酸基转移酶，UDP-glucuronyltransferases，UGT）。重要结合基团的直接供体：

UDPGA（尿苷二磷酸葡萄糖醛酸）

PAPS（3’-磷酸腺苷-5’-磷酸硫酸）

2.第二相反应---结合反应（conjugation

reaction)第八章肝胆疾病的生物化学诊断第八章肝胆疾病的生物化学诊断(1)葡糖醛酸结合反应：（此类反应最普遍）葡糖醛酸供体：UDPGA(尿苷二磷酸-葡糖醛酸)

糖醛酸途径UDPG脱氢酶UDPG+H2O+2NAD+

UDPGA+2NADH+2H+OOHOHHHOHUDPHHCH2OH

尿苷二磷酸葡萄糖(UDPG)OOHOHHHOHHHCOOH尿苷二磷酸葡萄糖醛酸(UDPGA)UDP第八章肝胆疾病的生物化学诊断

2、硫酸结合反应：（1）反应部位：肝（胞液）（2）硫酸供体：PAPS（3

磷酸腺苷-5

磷酸硫酸)（3）结合物质：醇、酚、芳香族胺类（4）结合方式：生成硫酸酯化合物

例：雌激素的灭活

雌酮+PAPS

雌酮硫酸酯+PAP硫酸转移酶第八章肝胆疾病的生物化学诊断OHOH5

OH2PO3NH2NNHN3

OHOHO3S—O—P—CH2OHOO雌酮OHO3SO雌酮硫酸酯3

磷酸腺苷-5

磷酸硫酸（PAPS）

雌酮+PAPS

雌酮硫酸酯+PAP硫酸转移酶第八章肝胆疾病的生物化学诊断（三）生物转化的特点连续性多样性解毒和致毒的双重性第八章肝胆疾病的生物化学诊断二、致癌物质的生物转化致癌物质1.人工合成:芳香类化合物：苯并芘(烃类)，二甲基氨基偶氮苯(偶氮类，奶油黄)。杂环化合物：1-氧-4-硝基喹啉脂肪族化合物：芥子气有机卤化物及无机物：666及砷化物亚硝基化合物：二乙基亚硝胺及亚硝酸盐类第八章肝胆疾病的生物化学诊断2.微生物产生：黄曲霉素B1最强(真菌毒素)

3.植物中：苏铁苷、香樟素

4.食物加热中产生：谷氨酸加热

Glu-p-2

5.肠道菌作用产生：如胺类与亚硝酸盐亚硝胺类

第八章肝胆疾病的生物化学诊断代谢转变：许多致癌物在体内需经过转化而转变为活化型的致癌物（含亲电子基团），再以DNA、RNA和蛋白质（含亲核基团）为靶分子，使基因产生突变、基因表达紊乱，表型异常，细胞形态及生物活性改变，导致细胞癌变。第八章肝胆疾病的生物化学诊断致癌物质活化产物致癌作用灭活反应多环芳烃7，8-二氢二醇-9，10皮肤癌、肺癌经重排，水解、结合环氧苯并芘芳香胺类硫酸乙酰氨基芴膀胱癌、肝癌、乳腺癌被其他亲核基团结合二甲基氨基氮苯N-SO3-O-甲基氨基偶氮苯大鼠肝癌经脱甲基、羟化反应、结合黄曲霉毒素B1环氧化黄曲霉毒素B1肝癌生成黄曲霉毒素醇类、结合返回某些致癌物的生物转化及致癌作用第八章肝胆疾病的生物化学诊断药物（毒物）在人体内的分布情况区域总量的%70kg人的体液（L）给1g化合物后血浆浓度（mg/L）血浆4.53

333总细胞外液201471总体液553826组织结合------0～25三、药物的生物转化第八章肝胆疾病的生物化学诊断1.

药物代谢的部位肝脏：微粒体滑面内质网线粒体

肝外部位：肠、肾、脑

等第八章肝胆疾病的生物化学诊断2.药物在体内转化的两个步骤：

I相反应II相反应药物代谢物结合物（氧化、水解、还原等）（结合）药物经生物转化的结局：①药理活性消失；②药理活性不变；③代谢活化或毒性化，产生毒性代谢物。第八章肝胆疾病的生物化学诊断变化类型举例作用药理活性丧失苯巴比妥------羟基苯巴比妥(羟化)催眠作用消失氯环嗪-------N-氧化氯环嗪(氧化)抗组织胺作用消失代谢活化偶氮磺胺------磺胺(还原)抗菌作用去氧安定------去氢皮质醇(氧化)镇痛作用药理活性改变异丙基异菸肼-----异菸肼(N-脱烷基化)抗结核作用(抗抑郁作用)可待因-------吗啡(O-脱甲基)镇痛作用(镇咳作用)药理活性不变甲基安非他明------安非他明(N-脱甲基)觉醒作用(苏醒作用)丙咪嗪--------去甲丙咪嗪(N-脱甲基)抗抑郁毒性化扑热息痛经N-羟化、还原后与DNA、RNA等分子结合肝细胞坏死药物经生物转化引起药理活性的变化第八章肝胆疾病的生物化学诊断药物引起肝损伤的类型肝损伤类型典型药物或毒物肝细胞死亡对乙酰氨基酚、二甲基甲酰胺、乙醇脂肪肝四氯化碳、乙醇、丙戊酸钠胆汁淤积氯丙嗪、环孢素A、乙醇胆道损伤阿莫西林、二苯氨基甲烷肝硬化乙醇、双苄基异喹啉类生物碱、维生素A血管损伤双苄基异喹啉类生物碱肿瘤雄激素、黄曲霉素第八章肝胆疾病的生物化学诊断第三节胆红素与胆汁酸代谢及其异常

胆红素代谢及其异常胆汁酸代谢及其异常主要内容：第八章肝胆疾病的生物化学诊断1.胆红素的来源（一）胆红素(bilirubin)的生成与转运胆红素(bilirubin)

1）衰老红细胞破坏、降解

2）无效红细胞生成3）其他含血红素辅基的蛋白质分解分流胆红素（20%）主流胆红素（80%）第八章肝胆疾病的生物化学诊断红细胞

血红蛋白Hb

氨基酸代谢

血红素

珠蛋白

网状内皮系统第八章肝胆疾病的生物化学诊断2.胆红素的生成

场所：网状内皮系统

血红素

胆绿素（蓝）

血红素加氧酶系（微粒体）COFe2+胆绿素还原酶（胞液）NADPH+H+NADP+

胆红素（橙红）

(bilirubin)

（红）胆红素的性质

胆红素为橙红色，

脂溶性强，极性弱，极易自由透过生物膜，

毒性较高。第八章肝胆疾病的生物化学诊断

竞争结合剂

意义

如磺胺药，水杨酸，胆汁酸等

运输形式

胆红素－α1-球蛋白胆红素－清蛋白复合体增加胆红素在血浆中的溶解度，有利于运输限制胆红素自由通过生物膜产生毒性作用未结合胆红素(UCB）间接胆红素Indirectbilirubin

3.

胆红素的运输第八章肝胆疾病的生物化学诊断4.胆红素在肝细胞中的代谢

过程：摄取、结合转化排泄（1）摄取、结合清蛋白载体蛋白胆红素-Y蛋白

胆红素-Z蛋白胆红素-清蛋白受体蛋白胆红素摄取的有效性取决于肝细胞膜上特异的受体蛋白肝细胞内载体蛋白第八章肝胆疾病的生物化学诊断（次要）（2）转化（滑面内质网）UDPGAUDPUGT葡萄糖醛酸胆红素胆红素bilirubin结合胆红素（CB）直接胆红素Directbilirubin意义：即起到解毒作用，又可使其从胆汁中排出。第八章肝胆疾病的生物化学诊断第八章肝胆疾病的生物化学诊断（3）排泄

结合胆红素胆汁肠道（CB）（毛细胆管）第八章肝胆疾病的生物化学诊断5.胆红素在肠中的变化及胆素原的肠肝循环80～90%

胆素（粪排）10～20%门V肝体循环

肾（尿胆素原）

尿胆素（尿排）胆汁5%结合胆红素（CB）细菌β-葡萄糖醛酸苷酶GA未结合胆红素

（UCB）细菌（还原）中胆素原粪胆素原尿胆素原肠道95%第八章肝胆疾病的生物化学诊断胆红素代谢第八章肝胆疾病的生物化学诊断结合胆红素与未结合胆红素的定义未结合胆红素（Unconjugatedbilirubin,UCB）即间接胆红素未经肝细胞转化处理的胆红素，包括：游离胆红素、血中与蛋白质结合的胆红素、δ-胆红素；具亲脂疏水的性质。结合胆红素（

Conjugatedbilirubin,CB）

即直接胆红素在肝细胞内经过生物转化与葡萄糖醛酸、硫酸结合而形成的胆红素；具亲水疏脂的性质。胆汁中的胆红素绝大多数为结合胆红素血液中的胆红素绝大多数为未结合胆红素第八章肝胆疾病的生物化学诊断结合胆红素与未结合胆红素的区别未结合胆红素结合胆红素别名间接胆红素直接胆红素与葡萄糖醛酸结合未结合结合与重氮试剂反应慢或间接反应迅速、直接反应溶解度小大经肾随尿排出不能能细胞毒作用大无第八章肝胆疾病的生物化学诊断（二）胆红素代谢紊乱与黄疸（jaundice）正常血清：总胆红素（TB）=未结合胆红素（UCB）+少量结合胆红素（CB）正常值TB：1.71～17.1μmol/LDB：0～3.42μmol/L

尿液：胆红素

阴性胆素原

阳性粪便：棕黄色第八章肝胆疾病的生物化学诊断隐性黄疸

TB：17.1～34.2μmol/L显性黄疸

TB：>34.2μmol/L

1.黄疸的定义

黄疸（jaundice）指由于胆红素代谢障碍，血浆中胆红素含量增高，胆红素进入组织，引起皮肤、巩膜、黏膜等组织黄染的一种病理变化和临床表现。第八章肝胆疾病的生物化学诊断肉眼可否见到黄染现象分为：------显性黄疸和隐性黄疸发病原因可分为：------溶血性、肝细胞性和梗阻性黄疸。病变部位可分为：------肝前性、肝性和肝后性黄疸。血中升高的胆红素的类型分为：------高未结合胆红素性黄疸及高结合胆红素性黄疸。2.黄疸的分类第八章肝胆疾病的生物化学诊断胆红素形成过多：血中以未结合胆红素的升高为主。肝细胞处理胆红素的能力下降：两种胆红素均可升高。胆红素在肝外的排泄障碍，逆流入血：血中以结合胆红素的升高为主。（三）黄疸的成因与发生机制第八章肝胆疾病的生物化学诊断

新生儿生理性黄疸判断标准：新生儿的血清TB<86umol/L。原因：（1）新生儿红细胞溶解过多

（2）肝细胞内UDP-葡萄糖醛酸基转移酶活性不高

（3）新生儿肝细胞内缺乏Y蛋白

（4）母乳中含有孕二醇，对UDP-葡萄糖醛酸基转移酶有抑制作用

（5）无效造血生成的血红素等

第八章肝胆疾病的生物化学诊断

与葡萄糖醛酸结合

结合胆红素血红蛋白未结合胆红素血液循环红细胞尿胆素原尿胆素胆素原粪胆素单核-巨噬细胞系统肾实验室检查（1）血液UDB高度增加DB正常或微增（2）尿液胆原显著增加胆红素阴性（3）粪便胆原增加第八章肝胆疾病的生物化学诊断与葡萄糖醛酸结合

结合胆红素血红蛋白非结合胆红素循环血液红细胞尿胆原尿胆素粪胆原粪胆素单核-巨噬细胞系统肾尿胆红素实验室检查

1.血液DB与UDB均升高2.尿液胆红素阳性胆素原不定3.粪便粪胆原减少变浅颜色4.肝功能异常5.肝炎标志物阳性第八章肝胆疾病的生物化学诊断与葡萄糖醛酸结合

结合胆红素血红蛋白非结合胆红素循环血液红细胞结合胆红素肾实验室检查：1.血液

DB增加总胆固醇增高碱性磷酸酶增高2.尿液胆红素试验（+）胆原减少或消失3.粪便胆原减少或消失变浅或白陶土色第八章肝胆疾病的生物化学诊断三种类型黄疸的实验室鉴别诊断表8-5第八章肝胆疾病的生物化学诊断2.血清酶学检查（1）丙氨酸氨基转移酶（ALT）（2）碱性磷酸酶（ALP）与γ－谷氨酰基转移酶（γ－GT）（3）凝血酶原时间

3.血脂分析4.血液学检查第八章肝胆疾病的生物化学诊断肝细胞性黄疸和梗阻性黄疸的实验室鉴别诊断

项目肝细胞性黄疸梗阻性黄疸血清蛋白电泳图谱Alb减少，γ—球蛋白↑球蛋白明显↑脂蛋白—X多为阴性明显↑血清酶学

ALT肝炎急性期↑正常或增高

ALP正常或轻度增高明显升高

LAP可增高明显升高

γ-GT可增高明显升高其他方面凝血酶原时间延长，VitK不能纠正延长，VitK可以纠正胆固醇降低，尤其CHE明显降低增高

CA/CDCA﹤1﹥1表8-6第八章肝胆疾病的生物化学诊断二、胆汁酸代谢及其异常胆汁酸的类型胆汁酸代谢胆汁酸代谢异常第八章肝胆疾病的生物化学诊断（一）胆汁酸（bileacids）的类型胆汁酸：胆汁中存在的一类胆烷酸的总称。初级胆汁酸脱去7--OH即为次级胆汁酸。胆汁中的胆汁酸以结合型为主，以钠盐或钾盐形式存在。

胆汁酸的分类：按来源、结构及结合与否牛磺(甘氨)胆酸甘氨(牛磺)鹅脱氧胆酸次级游离型(脱氧胆酸、石胆酸)次级胆汁酸（肠道）次级结合型甘氨(牛磺)脱氧胆酸甘氨(牛磺)石胆酸初级游离型(胆酸、鹅脱氧胆酸)初级胆汁酸（肝脏）

初级结合型胆汁酸第八章肝胆疾病的生物化学诊断例：胆酸例：鹅脱氧胆酸

游离胆汁酸

HCOOHHOOHOH312724COOHHHO3712OH第八章肝胆疾病的生物化学诊断1.初级胆汁酸的生成（1）初级胆汁酸（primarybileacid）：正常人合成胆固醇约1~1.5g/日，其中2/5（0.4~0.6g）在肝内转化为胆汁酸。（二）胆汁酸代谢

（2）合成原料：胆固醇（3）合成部位：肝（微粒体和胞液）（4）限速酶：胆固醇7-羟化酶。（5）合成过程：以羟化作用最为重要。第八章肝胆疾病的生物化学诊断

还原、侧链修饰

胆酸（3α，7α，12α

三羟胆固烷酸，CA）脱氧胆酸（3α，7α二羟胆固烷酸，CDCA）7α，12α二羟

4胆固烯3酮

7α羟4胆固烯3酮

7α羟胆固醇

胆固醇

12α羟化酶氧化异构

7α羟化酶第八章肝胆疾病的生物化学诊断2.次级胆汁酸（secondarybileacid）的生成（1）原料：

初级胆汁酸（2）生成部位：肠道（肠道细菌）（3）生成过程:

脱羟基结合型初级胆汁酸

游离胆汁酸

次级胆汁酸水解7-a-脱羟酶

牛磺胆酸甘氨鹅脱氧胆酸

脱氧胆酸石胆酸牛磺酸甘氨酸

胆酸鹅脱氧胆酸

肠道①促进脂类消化吸收。②抑制胆固醇从胆汁中析出、沉淀。

3.胆汁酸的功能：第八章肝胆疾病的生物化学诊断次级胆汁酸形成初级胆汁酸次级胆汁酸7α-羟基酶胆酸脱氧胆酸HCOOHOHOHOH3127HCOOHOHOH3127第八章肝胆疾病的生物化学诊断初级胆汁酸次级胆汁酸鹅脱氧胆酸石胆酸7α-羟基酶HCOOHOHOH3127HCOOHOH3127第八章肝胆疾病的生物化学诊断意义：使有限的胆汁酸能最大限度的反复利用，促进脂类物质消化吸收。胆汁酸随胆汁排入肠腔后，通过重吸收经门静脉又回到肝，在肝内转变为结合型胆汁，经胆道再次排入肠腔的过程。胆汁酸肝肠循环第八章肝胆疾病的生物化学诊断（三）胆汁酸代谢异常1.胆汁酸合成缺陷------遗传性疾病2.肝脏疾病时胆汁酸代谢异常急慢性肝病胆汁酸淤积3.肠道疾病时胆汁酸代谢异常4.胆汁酸代谢与高脂血症血清TBA（总胆汁酸）参考范围：血清TBA<10

mol/L（2ug/mL），CA值：<4.6

mol/L，CDCA0.46~5.9

mol/L，CA/CDCA：0.34~1.22第八章肝胆疾病的生物化学诊断（1）TBA检测可用来区别高胆红素血症和胆汁淤积。（2）CA/CDCA比值可作为胆道梗阻性病变和肝实质细胞性病变的鉴别指标。比值＞１，见于胆道梗阻性病变；比值<１，见于肝实质细胞性病变。肝胆疾病与TBA第八章肝胆疾病的生物化学诊断第四节肝脏疾病的临床生物化学肝硬化的临床生物化学乙醇性肝脏损害的生物化学肝昏迷的临床生物化学肝石症的临床生物化学肝癌的临床生物化学第八章肝胆疾病的生物化学诊断（一）肝硬化的生物化学机制1.缺氧和炎症刺激，导致胶原纤维合成增强。以I型及Ⅲ型为主。2.机体免疫机能不足，肝细胞反复遭受HBV破坏，以及肝细胞结节状再生，纤维组织不断增生，导致肝硬化。3.跟Kuffer细胞分泌多种细胞因子及胶原酶等生物活性物质以及储脂细胞产生胶原等有关。一、肝硬化的临床生物化学第八章肝胆疾病的生物化学诊断（二）肝硬化的生物化学诊断临床常用肝活检来确诊肝硬化及观察疗效。1.肝功能实验：ALBGLBA/GTB、CHO、AST、ALT，但AST增高>ALT。2.特殊检查：（1）透明质酸（HA）（2）粘蛋白（LN）（3）Ⅲ型胶原前肽（4）Ⅳ型胶原纤维蛋白第八章肝胆疾病的生物化学诊断二、乙醇性肝脏损害的生物化学（一）乙醇在机体内的代谢部位：肝脏（90%～98%），2%～10%随尿及呼气而排泄乙醇在肝脏的代谢途径有：1.乙醇脱氢酶（ADH）氧化体系

CH3CH2OH+NAD+

ADH

CH3CHO+NADH+H+CH3CHOCH3COOHCH3COCoA三羧酸循环2.微粒体乙醇氧化体系（MEOS）CH3CH2OH+NADPH+H++O2

MEOS

CH3CHO+NADP++2H2O第八章肝胆疾病的生物化学诊断3.NADPH氧化酶-过氧化氢酶体系

NADPH+H++O2

NADPH氧化酶

NADP++H2O2

H2O2+CH3CH2OH

过氧化氢酶

2H2O+CH3CHO4.黄嘌呤氧化酶-过氧化氢酶体系次黄嘌呤+H2O+O2

黄嘌呤氧化酶

黄嘌呤+H2O2

H2O2+CH3CH2OH

过氧化氢酶

2H2O+CH3CHO第八章肝胆疾病的生物化学诊断（二）乙醇代谢对机体的影响1.乙醛的毒性效应2.NADH/NAD+比值变化乙醇乙醛乙酸

（1）肝脏乳酸利用降低；（2）丙酮酸还原成乳酸增多，易导致乳酸性酸中毒，进而引起肾排泄尿酸障碍，发生高尿酸血症痛风。

CH3COCOOH+NADH+H+

CH3CHOHCOOH+NAD+第八章肝胆疾病的生物化学诊断3.乙醇摄取对糖、氨基酸、水盐、维生素D及药物代谢的影响

———酒后血糖有降低倾向

———有负氮平衡倾向

———水电解质紊乱倾向

———血清中25-（OH）-VitD降低倾向

———影响或改变药物的效果第八章肝胆疾病的生物化学诊断（三）乙醇性肝损伤与胎儿性乙醇综合征

1.乙醇性脂肪肝原因：大量摄取乙醇。形成机制：1）脂肪动员增强，同时伴有高脂血症的发生。2）NADH/NAD＋比值↑，肝细胞内脂肪合成↑，脂肪酸氧化↓3）脂蛋白的合成与分泌减少等。可见，脂肪增加和氧化减少可能是慢性乙醇摄取致脂肪肝的病因。

第八章肝胆疾病的生物化学诊断2.乙醇性肝炎机制：

1）肝内蛋白质分泌障碍及贮留、肝内脂肪增加。

2）乙醇和乙醛可造成线粒体损伤，导致肝细胞坏死。

3）代谢亢进→使耗氧量↑，进一步加重肝细胞坏死。

4）乙醇在微粒体氧化时→氧自由基增加→细胞膜或亚细胞结构膜上的脂质过氧化，引起肝损伤。

5）有IgA↑，白细胞粘附力降低等免疫功能异常。3.胎儿乙醇综合征(1)智力障碍；(2)发育障碍；(3)畸形胎儿。第八章肝胆疾病的生物化学诊断（四）乙醇性肝病的生物化学检测缺乏高度敏感和特异的诊断标志物。1.酶学检测：

AST/ALT比值增高，通常大于2

ALP活性增高，约为正常参考范围的2～4倍γ-GT显著上升2.

转铁蛋白异质体（90%）3.肾功：UA

4.血脂：TG、CHO均呈不同程度

第八章肝胆疾病的生物化学诊断（五）血液乙醇浓度的测定1.酶法测定：原理：乙醇＋NAD+

乙醇脱氢酶乙醛+NADH

340nm处测定NADH的生成量，再求出乙醇的含量。2.呼气法则定：原理：经呼吸道呼出的乙醇气体，可使重铬酸离子(Cr2O72-)还原成绿色的铬离子(Cr3+)。

属乙醇测试筛选法，主要用于交通违规者。3.气相层析法：标准参考方法。第八章肝胆疾病的生物化学诊断三、肝昏迷的临床生物化学（一）肝昏迷的生物化学机制肝昏迷又称肝性脑病，是由于严重肝脏疾病引起的以代谢紊乱为基础的中枢神经系统综合征，临床以意识障碍和昏迷为主要表现。

第八章肝胆疾病的生物化学诊断

1.氨中毒学说：正常情况下，氨在肝细胞内合成尿素，以清除氨的毒性。一般血氨浓度<59umol/l。当肝功能严重受损时，肝清除氨的能力下降，血氨浓度，增高的血氨通过血脑屏障进入脑组织中，引起脑功能的障碍。第八章肝胆疾病的生物化学诊断生化机制----干扰能量代谢（1）氨可抑制丙酮酸和α-酮戊二酸脱氢酶系的活性→乙酰辅酶A和ATP生成↓。（2）氨与α-酮戊二酸结合形成谷氨酸。（3）氨和谷氨酸合成谷氨酰胺。（4）氨可激活神经细胞膜上的Na+-k+-ATP酶。第八章肝胆疾病的生物化学诊断（二）肝昏迷的生物化学诊断

1.肝功能：TBALBAST和ALP由高值转为低值血氨

2.血脂：CHO

3.肾功能：BUN、GLU4.凝血指标：PT和Fib

5.血气分析：pH、PCO2

第八章肝胆疾病的生物化学诊断四、胆石症的临床生物化学胆石症：胆结石，主要成份及形成机制不同分为：胆固醇结石胆色素结石混合性结石第八章肝胆疾病的生物化学诊断（一）CHO结石形成的机制①胆汁中CHO↑胆汁酸盐量↓→由于CHO代谢失调使二者的比例失衡；②胆汁酸组成改变：UDCA减低，③磷脂/CHO=6.6，结石为2.3，胆固醇析出。④电位↓微团电荷少，稳定性降低易聚集成团块。⑤其他（二）胆色素胆石形成机制胆汁中游离胆红素含量，与Ca2+结合形成结石第八章肝胆疾病的生物化学诊断

胆汁中β-葡萄糖苷酸酶活性低：此酶可水解葡萄糖醛酸胆红素。葡萄糖二酸-1,4-内酯的抑制：为β-葡萄糖苷酸酶的抑制物。正常胆汁中的葡萄糖醛酸胆红素不易被水解，而处于良好的溶解状态。1.平衡机制：第八章肝胆疾病的生物化学诊断①胆红素负荷增加是胆色素结石形成的基础。②胆道感染引起胆汁中细菌性β-葡萄糖醛酸酶活性增高，分解结合型葡萄糖醛酸胆红素，生成游离胆红素。③胆汁中抑制β-葡萄糖醛酸酶的葡萄糖二酸-1，4-内酯含量明显降低。④胆汁微胶粒δ电位降低。这是胆红素融合集结的条件。⑤虫卵（体）及其他异物的存在构成结石核心等。

2.形成机制：第八章肝胆疾病的生物化学诊断肝C原癌基因物理、化学生物性等致癌因素点突变,基因易位基因扩增肝C内基因表达失控C癌变激活激活此过程还伴有抑癌基因的缺失或失活癌基因产物(癌蛋白)↑五、肝癌的临床生物化学

(一)肝癌的致病机制

第八章肝胆疾病的生物化学诊断(二)肝癌时机体代谢的变化1.糖代谢糖异生关键酶活性↓，与恶性程度负相关。糖酵解酶系活性↑，与恶性程度正相关。2.蛋白质及氨基酸代谢3.脂类代谢的影响肝细胞内的7-羟化酶活性降低，高脂血症。4.其他变化癌细胞膜上的Na+-K+-ATP酶活性增高。第八章肝胆疾病的生物化学诊断(三)肝癌的生物化学诊断

常规标志物有AFP、AFP异质体、异常凝血酶原、岩藻糖苷酶、γ-GT及同工酶、5’-核苷酸二酯酶同功酶Ⅴ，M2型及丙酮酸激酶等。原发性肝细胞肝癌的诊断标准：

AFP成人10～30µg/L>400µg/L作为肝癌诊断标准第八章肝胆疾病的生物化学诊断AFP及肝癌特异性蛋白（AFP异质体）,并可对原发性肝癌进行鉴别诊断，阳性率在70％～80％。AFU：原发性肝癌的诊断标志，与AFP联合检测可使阳性率达90％左右。γ-GT及其同工酶可诊断肝癌。第八章肝胆疾病的生物化学诊断第五节肝胆疾病的肝功能实验室检查肝脏分泌与排泄功能实验代谢性肝功能实验肝胆疾病的临床酶学肝脏疾病的特殊检查第八章肝胆疾病的生物化学诊断一、肝脏分泌与排泄功能实验1.内源性物质的分泌与排泄

如：胆红素、胆汁酸检测等。2.外源性物质的清除能力检测

通过血管内注射染料并观察其在血清中的滞留情况来检测肝脏的分泌与排泄功能。

如：磺、溴酚钠（BSP）、吲哚绿（ICG）氨基比林和利多卡因清除试验等。

第八章肝胆疾病的生物化学诊断1.蛋白质代谢功能检查

血浆白蛋白、

α1、

α2及β球蛋白由肝脏合成，几乎所有的凝血因子在肝脏制造。TP－严重肝炎或肝硬化↓

A/G－肝硬化时↓蛋白电泳：急性肝炎ALB和

2-球↓ 肝硬化ALB和

2-球↓，-球↑免疫球蛋白：肝硬化IgG、IgA、IgM↑AFP：原发肝癌↑↑血氨：严重肝损伤、肝硬化、肝昏迷↑↑

二、代谢性肝功能实验第八章肝胆疾病的生物化学诊断2.糖代谢空腹血糖：肝功不全时↓葡萄糖耐量：肝病时异常血丙酮酸：肝昏迷时↑血乳酸：反映肝清除能力，肝细胞损伤时清除能力下降。第八章肝胆疾病的生物化学诊断3.脂类代谢血清CHO：阻塞性黄疸时↑严重肝损伤↓血清CHO酯：慢性肝C损伤↓血磷脂:胆道阻塞和胆汁淤积性肝硬化时↑，肝实质损害↓血清TG:脂肪肝及胆道阻塞↑脂蛋白电泳α-脂蛋白:重症肝炎，阻黄↓β-脂蛋白:慢性脂肪肝及肝炎↑前β-脂蛋白：急性脂肪肝及肝炎时↑脂蛋白-X阻塞性黄疸时出现载脂蛋白APOA1、2：急性肝炎↓↓阻黄时↓↓APOB：阻黄时↑APOE：原发性胆汁性肝硬化↑↑↑肝炎↑↑血胆汁酸（CA，UDCA）：肝炎，肝硬化，肝细胞癌↑第八章肝胆疾病的生物化学诊断三、肝胆疾病的临床酶学丙氨酸氨基转移酶（ALT）天门冬氨酸氨基转移酶（AST）

乳酸脱氢酶（LDH）γ-谷氨酰转移酶（γ-GT）

碱性磷酸酶（ALP）5’-NT

等。ALT测定反应肝细胞损伤的灵敏度高于AST第八章肝胆疾病的生物化学诊断1.反映肝实质细胞损伤为主的酶类：AST、ALT、LDH等。2.反应胆汁郁积为主的酶类：γ-GT、ALP、5’-NT等。

3.反应肝纤维化为主的酶类：单胺氧化酶（MAO）、-脯氨酸羟化酶（-PH）等。4.反应肝合成功能的酶：

假性胆碱酯酶（ChE）卵磷脂胆固醇酰基转移酶（LCAT）第八章肝胆疾病的生物化学诊断

ALPALTγ-GT5’-NTASTβ-PHMAO急性肝炎↑↑↑↑↑↑↑↑酒精性肝炎N,↑↑↑↑↑↑↑慢性肝细胞疾病N,↑↑N,↑N,↑↑N,↑N,↑肝硬化N,↑N,↑N,↑N,↑N,↑↑肝肿瘤↑↑