2025年牛津译林版选择性必修3生物下册阶段测试试卷含答案

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A.该测定过程需要借助PCR技术完成B.图中①②处分别为ddTTP和ddATPC.据图可知，本次测序凝胶电泳的方向为从上往下D.终止DNA合成的原因是底物类似物不能与下一个脱氧核苷酸形成磷酸二酯键5、从土壤中筛选产脲酶细菌的过程如图所示，表中记录了在适宜条件下培养一段时间后的实验结果，下列有关说法错误的是（）

稀释度（倍）106107108平板123123123平板菌落数（个）432421445786774968

注：表中各平板上均接种稀释土壤样品溶液0.1mLA.取土样时用的铁铲和取样纸袋在使用前都需要灭菌B.进行逐级稀释操作时不需要在无菌环境中进行C.培养基①②的作用分别是筛选和鉴定D.应选择稀释度为107倍的平板估算土壤样品中细菌数6、如下图所示，a表示现代生物工程技术，b表示其结果；下面说法正确的是（）

A.如果a是核移植技术，b的产生说明了动物细胞具有全能性B.如果a是体外受精技术，则形成的b属于克隆动物C.如果a是胚胎分割技术，b中个体的基因型和表型一定相同D.如果a是基因工程，b是乳腺生物反应器，则需对移植的胚胎进行性别选择7、科学家体外诱导小鼠的成纤维细胞，使其具有很高的全能性，并称为诱导多能干细胞（简称iPS细胞）。下列有关说法错误的是（）A.iPS细胞类似于胚胎干细胞，具有分化成各种组织或器官的潜能B.iPS细胞若来源于病人自身的细胞，将其移植回病人体内可避免免疫排斥反应C.iPS细胞的应用前景优于胚胎干细胞且安全无风险D.已分化的T细胞、B细胞等也能被诱导为iPS细胞评卷人得分二、多选题(共7题，共14分)8、科学家运用基因工程技术，将人凝血因子基因导入山羊的受精卵中，培育出山羊乳腺生物反应器，使山羊乳汁中含有人凝血因子。以下有关叙述错误的是（）A.可用显微注射技术将含有人凝血因子基因的重组DNA分子导入山羊的受精卵B.在该转基因羊中，人凝血因子存在于乳腺细胞，而不存在于其他细胞C.人凝血因子基因开始转录后，DNA聚合酶以DNA分子的一条链为模板合成mRNAD.科学家将人凝血因子基因与乳腺蛋白基因重组在一起，从而使人凝血因子基因只在乳腺细胞中特异表达9、哺乳动物的造血干细胞具有以下哪些性质？（）A.分化为骨骼肌细胞B.分化为红细胞C.分化为嗜中性粒细胞D.分化为神经细胞10、近年来；全人源化单克隆抗体技术发展迅速，利用转基因鼠技术进行全人源化单克隆抗体的制备流程如图所示，下列说法正确的是（）

A.该技术能降低单克隆抗体药物的免疫排斥反应B.过程①②采用核移植技术，体现了动物细胞核的全能性C.过程⑧要经过选择培养基筛选、克隆化培养和抗体检测等过程D.体外培养B细胞也可以大量获得针对该抗原的单克隆抗体11、人群中有部分人体内缺乏乳糖分解酶,饮用鲜牛奶后会导致肠胃不适；消化不良。“低乳糖奶牛”的诞生,有望给患有“乳糖不耐症”的人群提供“放心奶”。如图是“低乳糖奶牛”的培育过程,相关叙述不正确的是（）

A.犊牛的性状和黑白花奶牛的性状完全一致B.卵母细胞需在体外培养到MⅡ期然后用离心法去核C.犊牛的出生体现了动物细胞核的全能性D.体细胞核移植技术可用于人类组织器官的移植和保护濒危动物12、利用基因编辑技术将病毒外壳蛋白基因导入猪细胞中，然后通过核移植技术培育基因编辑猪，可用于生产基因工程疫苗。如图为基因编辑猪培育流程，下列叙述不正确的是（）

A.对1号猪使用促性腺激素处理，可使其超数排卵B.采集到的卵母细胞需在体外培养到MⅡ期才能用于核移植C.产出的基因编辑猪的性染色体来自2号与3号猪D.为检测病毒外壳蛋白基因是否被导入4号猪并正常表达，可采用DNA测序的方法13、科学家在蛙的核移植实验中发现，肠上皮核移植实验中有1％～2％能形成蝌蚪，囊胚核移植实验中有50％能形成蝌蚪或成蛙。下列叙述错误的是（）A.核移植得到的重组细胞须立即移植到蛙体内B.由于科技的进步，用猴进行体细胞核移植实验的成功率与用蛙的相当C.该实验说明胚胎细胞分化程度较低，全能性的表达更容易D.核移植得到的克隆蛙的遗传性状与供核蛙的完全相同14、下图为科学家培育克隆猴的基本步骤，下列相关叙述正确的是（）

A.动物细胞核移植技术，体现了动物细胞的全能性B.对A猴卵母细胞去核是为了保证克隆猴的核遗传物质都来自B猴C.必须将重组细胞培育到一定程度后才能植入代孕动物体内D.A猴的卵母细胞的细胞质中含有促进B猴体细胞核全能性表达的物质评卷人得分三、填空题(共5题，共10分)15、动物细胞融合的意义：克服了______，成为研究_____、_____、肿瘤和生物新品种培育的重要手段。16、载体具备的条件：①_____。②具有一至多个限制酶切点，供外源DNA片段插入。③______。17、现代的腐乳生产是在严格的____________条件下，将优良__________菌种直接接种在豆腐上，这样可以避免__________________的污染，保证产品的质量。18、细胞贴壁和接触抑制：悬液中分散的细胞很快就______，称为______。细胞数目不断增多，当贴壁细胞分裂生长到表面______时，细胞就会_____，这种现象称为______。19、蛋白质工程在生物制药上有广泛的应用。如果已经确认某种新蛋白质可能具有特殊的抗癌功能，其氨基酸序列也已经确认，如何通过蛋白质工程生产这种新药？如果回答有困难，可以向老师请教或通过互联网查找答案。_____评卷人得分四、判断题(共3题，共12分)20、胚胎发育至囊胚期时，细胞逐渐分化。（选择性必修3P58）()A.正确B.错误21、如果转基因植物的外源基因源于自然界，则不会存在安全性问题。()A.正确B.错误22、中国政府禁止生殖性克隆，但不反对治疗性克隆。()A.正确B.错误评卷人得分五、实验题(共2题，共16分)23、普通酵母菌直接利用淀粉的能力很弱；有人将地衣芽孢杆菌的a-淀粉酶基因转入酵母菌中，经筛选得到了可高效利用淀粉的工程酵母菌菌种（过程如图甲所示）。请据图回答：

（1）图甲中为达到筛选目的，平板内的固体培养基应以______________作为唯一碳源。②③过程需重复几次，目的是______________。

（2）某同学尝试过程③的操作，其中一个平板经培养后的菌落分布如图乙所示。该同学的接种方法是_____________；推测该同学接种时可能的操作失误是___________________________。

（3）以淀粉为原料，用等量的工程酵母菌和普通酵母菌在相同的适宜条件下密闭发酵一段时间，接种_____________菌的发酵罐需要先排气，其原因是______________。

（4）用凝胶色谱法分离a-淀粉酶时，在色谱柱中移动速度较慢的蛋白质，相对分子质量较_____________。24、如图为“DNA的粗提取与鉴定”实验过程中的一些重要操作示意图；请分析回答有关问题：

（1）正确的操作顺序是_______________________（用字母和箭头表示）。

（2）图中C、E步骤都加入了蒸馏水，但其目的不同，分别是_______________________和_______________________。

（3）为鉴定图中A步骤中所得到的丝状物的主要成分为DNA，可将其溶解后，滴加________________试剂后沸水浴加热，如果出现___________________；则证明该丝状物的主要成分为DNA。

（4）图中A步骤的目的是_________________________________________。评卷人得分六、综合题(共4题，共20分)25、2020年诺贝尔化学奖授予了两位开发出CRISPR/Cas9基因编辑技术的科学家；该技术在实体瘤研究中得到广泛应用。

（1）Cas9是一种来自细菌的核酸内切酶；由相关基因指导在_____上合成，它与sgRNA构成的复合体能与DNA分子特定碱基序列结合，如图1.作用原理是sgRNA与DNA单链进行_____，并在PAM序列（几乎存在于所有基因中）上游切断DNA双链的_____键。

（2）结直肠癌是常见的消化道恶性肿瘤；研究发现APC基因发生突变引起的结肠和直肠腺瘤性息肉与结直肠癌密切相关。将_____基因及靶向小鼠APC基因的16号外显子的双链sgRNA拼接后形成_____与慢病毒载体结合，导入小鼠结肠细胞，获得APC基因缺失的结肠细胞，通过粘膜注射，将APC基因缺失结肠细胞原位移植入免疫缺陷小鼠，生成腺瘤，获得结直肠癌小鼠模型，请写出该模型的一种应用_____。

（3）CRISPR/Cas9技术还可用于结直肠癌相关基因功能的研究。研究人员通过CRISPR/Cas9技术在人结肠癌细胞HRT18中敲除产促红细胞生成素人干细胞A1受体基因（EPHA1基因）；进行细胞划痕实验。

注：细胞在新更换的培养基中无法增殖。

补充图中步骤①_____；②_____，③_____。

由图可知；与另外两组相比，48h后c组细胞划痕的宽度较_____，说明_____。

（4）请写出CRISPR/Cas9基因编辑技术其他可能的一项应用_____。26、科学家通过基因工程；培育出能抗棉铃虫的植株——抗虫棉，其过程大致如下图所示：

（1）上述基因工程的目的基因是________，细菌的基因之所以能在棉花细胞内表达，其原因是所有生物共用__________________________。

（2）上述基因工程中的核心步骤是__________________，其目的是使目的基因在受体细胞中稳定存在，该过程完成需要的两种酶是_____________________。

（3）上述过程中，将目的基因导入棉花细胞内常用的方法是__________。目的基因能否在棉株体内稳定维持和表达其遗传特性的关键是目的基因是否插入到受体细胞____________上，这需要通过检测才能知道，检测采用的方法是__________，若要检测目的基因是否表达，用的方法是________________________。

（4）棉株细胞到抗虫棉幼苗必须有的两个过程是____________和____________。

（5）转基因食品带来的安全问题有_________________________________________。27、科学家利用RNA干扰原理发展出了寄主诱导的基因沉默（HIGS）技术；通过在植物细胞中产生小干扰RNA（siRNA）进而靶向沉默病原菌的关键基因。当病原菌侵染寄主植物时；植物寄主能将siRNA转入病原菌细胞内使其与靶基因的mRNA结合，并将后者进行特异性的降解。由稻瘟菌引起的稻瘟病是水稻上危害最严重的病害之一，科研人员选取稻瘟菌的SEC11为靶基因（图1），查找SEC11基因中最佳的干扰序列，并将该序列导入质粒构建SEC11基因的HIGS表达载体（图2），然后将该载体导入水稻，检测到转基因水稻植株对稻瘟病菌的抗性水平显著升高。相应的限制酶识别序列及切点见图3，请回答下列问题：

(1)siRNA转入病原菌细胞内可阻止目标基因的__________过程。

(2)构建基因表达载体时通常选用双酶切，其好处是__________（至少答出两点）。据图可知，应最好选择__________切割质粒，同时将两种限制酶的识别序列分别加在引物1和引物2的__________端，经过________次扩增；在PCR体系中即可出现两端带上酶切序列的干扰序列。

(3)据图可知，应选SECl1基因中的__________区段作为干扰序列，原因是__________。

(4)通过农杆菌转化法可将SECl1基因的HIGS表达载体导入水稻的愈伤组织，并用含有__________的培养基进行筛选，由于__________，因此筛选出的愈伤组织不一定具有SEC11基因的干扰序列。28、科学家将CRISPR/Cas9基因编辑系统导入农杆菌Ti质粒并进行改造；通过同源重组实现目的基因的精确插入，利用该方法已培育出了耐寒的玉米新品种(转入CXE-20耐寒基因)。下图1表示构建转基因耐寒玉米重组质粒的过程，其中Cas9-gRNA是CRISPR/Cas9基因编辑系统基因，HRA是抗除草剂基因，HR1和HR2是同源重组序列，图2表示重组质粒与受体细胞核DNA重组的过程。请回答问题：

(1)过程①的原料是_______，需要_______催化。

(2)限制酶BamHⅠ、SacⅠ、HindⅢ、EcoRⅠ的识别序列分别是GGATCC、GAGC.AAGCTT、GAATTC，过程①所用引物如下，则过程②使用的限制酶是_______和_______。

5′-CGCGAGCTCATGAGAAAGGGCCCGTGG-3′

5′-CGGAATTCCTATCCCCAGAGAGGTAGCGA-3′

(3)如图表示Cas9-gRNA复合体切割DNA的示意图，其靶序列是5′-CGAAAGCGTATCAGTATGCGTACGT-3′，根据图中靶序列设计的gRNA中相应序列是5′-_______-3′，Cas9-gRNA复合体切割DNA的_______键使其断裂。

(4)用重组质粒转化玉米幼胚后，在培养基中加入_______筛选出导入目的基因幼胚。提取培养后的植株DNA，设计引物进行PCR、电泳，基因长度及结果如下图。设计引物的依据是_______，其中_______号玉米中成功插入了外源基因，研究人员认为这些植株自交后会发生性状分离，其判断依据是_______。

参考答案一、选择题(共7题，共14分)1、B【分析】【分析】

遗传密码的特性：

一；连续性。

编码蛋白质氨基酸序列的各个三联体密码连续阅读；密码间既无间断也无交叉。

二；简并性。

遗传密码中；除色氨酸和甲硫氨酸仅有一个密码子外，其余氨基酸有2；3、4个或多至6个三联体为其编码。

三；通用性。

蛋白质生物合成的整套密码；从原核生物到人类都通用。已发现少数例外，如动物细胞的线粒体；植物细胞的叶绿体。密码的通用性进一步证明各种生物进化自同一祖先。

四；摆动性。

转运氨基酸的tRNA的反密码需要通过碱基互补与mRNA上的遗传密码反向配对结合；但反密码与密码间不严格遵守常见的碱基配对规律，称为摆动配对。

五；方向性。

起始密码总位于编码区5′末端；而终止密码位于3′末端，每个密码的三个核苷酸也是5′至3′方向阅读，不能倒读。

【详解】

A；人与猴的亲缘关系较近；我国成功培育的克隆猴适合用作研究人类疾病的模型动物，A正确；

B；细胞全能性是指细胞经分裂和分化后仍具有形成完整有机体的潜能或特性。体外成功培养神经元不能为动物细胞全能性提供了证据支持；B错误；

C；蛋白质生物合成的整套密码；从原核生物到人类都通用密码子的通用性是转基因得以实现的理论基础之一，C正确；

D、pcr技术原理：DNA的半保留复制是生物进化和传代的重要途径。双链DNA在多种酶的作用下可以变性解旋成单链；在DNA聚合酶的参与下，根据碱基互补配对原则复制成同样的两分子拷贝，D正确。

故选B。2、A【分析】【分析】

克隆原意是指以幼苗或嫩枝插条；以无性繁殖或营养繁殖的方式培育植物，如扦插和嫁接；克隆是指生物体通过体细胞进行的无性繁殖，以及由无性繁殖形成的基因型完全相同的后代个体组成的种群，通常是利用生物技术由无性生殖产生与原个体有完全相同基因组织后代的过程。

【详解】

A；来自同一胚胎的后代具有相同的遗传物质；因此胚胎分割可以看作动物的无性繁殖或克隆，A正确；

B；将人抗病毒基因嫁接到烟草DNA分子上；采用了转基因技术，其原理是基因重组，不属于克隆，B错误；

C；将鼠骨髓瘤细胞与经过免疫的脾细胞融合成杂交瘤细胞；杂交瘤细胞具备两个细胞的遗传物质，不属于克隆，C错误；

D；“试管婴儿”是体外受精和胚胎移植形成的；属于有性生殖，不是克隆，D错误。

故选A。

【点睛】3、C【分析】【分析】

生物武器种类：包括致病菌；病毒、生化毒剂；以及经过基因重组的致病菌等．把这些病原体直接或者通过食物、生活必需品等散布到敌方，可以对军队和平民造成大规模杀伤后果．

生物武器的特点：1；单位面积效应大；2、有特定的伤害对象；3、具有传染性；4、危害时间久；5、不易被发现和鉴定；6、使用者本身易受伤害；7、生物武器造价低；技术难度不大，隐秘性强，可以在任何地方研制和生产．

生物武器的局限性：1；生物武器主要指病原微生物；所以它们的生存、繁殖、死亡易受环境条件（如温度）的影响．2、还受地形、风向等多种条件影响．3、生物武器使用时不易控制，使用不当可危害本方安全．

【详解】

根据分析A；B、D都正确；

C；生物武器造价低；技术难度不大，隐秘性强，可以在任何地方研制和生产，C错误。

故选C。4、B【分析】【分析】

基因检测是指通过检测生物体中的DNA序列，以了解生物体基因状况的技术手段。Sanger双脱氧链终止法是DNA测序的基本方法；其原理是：核酸模板在核酸聚合酶；带有3′-OH末端的单链核苷酸引物、四种dNTP存在的条件下复制或转录时，如果在反应系统中分别引人单一种类的ddNTP（即2、3双脱氧核苷三磷酸，在脱氧核糖的3′位置缺少一个羟基，故不能同后续的dNTP形成磷酸二酯键），只要ddNTP掺入链端，该链就停止延长，链端掺入dNTP的片段可继续延长。

【详解】

A；该过程需要借助DNA扩增的技术和原理；故需要借助PCR技术完成，A正确；

B；结合题意“组按一定比例加入一种底物类似物；它能随机掺入合成的DNA链，一旦掺入后DNA合成立即终止”，且据图可知，ddCTP会在C位点终止，ddGTP会在G位点终止，故①对应的终止字母为A，故①为ddATP，同理②为ddTTP，B错误；

C、Sanger法测序中；通过电泳将不同长度的片段分开，DNA片段越小，距离起点越远，故据图可知，本次测序凝胶电泳的方向为从上往下，C正确；

D；终止DNA合成的原因是底物类似物的碳上不是羟基；不能与下一个脱氧核苷酸的磷酸形成磷酸二酯键，D正确。

故选B。5、B【分析】【分析】

稀释涂布平板法统计菌落数目的操作：a、设置重复组，增强实验的说服力与准确性。b；为了保证结果准确；一般选择菌落数在30~300的平板进行计数。③计算公式：每克样品中的菌株数=(c÷V)×M，其中c代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数，V代表涂布平板时所用的稀释液的体积(mL)，M代表稀释倍数。

【详解】

A；为了防止杂菌污染；取土样时用的铁铲和取样纸袋在使用前都需要灭菌，A正确；

B；逐级稀释操作应在无菌环境中进行；以防止杂菌污染，B错误；

C；据图可知培养基①为选择培养基；初步筛选的产脲酶细菌还应该进行鉴定，培养基②的作用是鉴定，C正确；

D、计数时，应选择菌落数为30~300的平板进行计数，因此应选择稀释度为107倍的平板估算土壤样品中细菌数；D正确。

故选B。6、D【分析】【分析】

体细胞核移植的大致过程是：将供体体细胞核导入受体去核卵母细胞；形成重组细胞，用电脉冲刺激形成早期胚胎，导入代孕母羊的子宫，妊娠；出生后即克隆动物。胚胎移植概念：是指将雌性动物的早期胚胎，或者通过体外受精及其他方式得到的胚胎，移植到同种的、生理状态相同的其他雌性动物的体内，使之继续发育为新个体的技术。其中提供胚胎的个体叫供体（遗传特性和生产性能优秀），接受胚胎的个体叫受体（有健康的体质和正常繁殖能力）。

【详解】

A、如果a是核移植技术，b的产生说明了动物细胞的细胞核具有全能性；A错误；

B、如果a是体外受精技术，则形成的b属于有性生殖产生的动物；B错误；

C、如果a是胚胎分割技术，b中个体的基因型一定相同；表型由于受到环境影响不一定相同，C错误；

D、如果a是基因工程，b是乳腺生物反应器；目的基因表达的产物在雌性动物的乳汁中提取，则需对移植的胚胎进行性别选择，D正确。

故选D。7、C【分析】【分析】

科学家已尝试采用多种方法来制备iPS细胞；包括借助载体将特定基因导入细胞中，直接将特定蛋白导入细胞中或者用小分子化合物等来诱导形成iPS细胞。iPS细胞最初是由成纤维细胞转化而来的，后来发现已分化的T细胞；B细胞等也能被诱导为iPS细胞。

【详解】

A；iPS细胞全称为诱导性多能干细胞；是由体细胞诱导而成的干细胞，具有和胚胎干细胞类似的发育的全能性，具有分化成各种组织或器官的潜能，A正确；

B；iPS细胞可以来源于病人自身的体细胞；将它移植回病人体内后，理论上可以避免免疫排斥反应，B正确；

C；诱导多能干细胞（简称iPS细胞）优势：诱导过程无须破坏胚胎；应用前景优于胚胎干细胞，但也存在一些安全性问题，C错误；

D；iPS细胞最初是由成纤维细胞转化而来的；后来发现已分化的T细胞、B细胞等也能被诱导为iPS细胞，D正确。

故选C。二、多选题(共7题，共14分)8、B:C:D【分析】【分析】

转基因动物生产药物：

(1)基因来源：药用蛋白基因+乳腺组织特异性表达的启动子(原理：基因的选择性表达)。

(2)成果：乳腺生物反应器。

(3)过程：将药物蛋白基因与乳腺蛋白基因的启动子等调控组件重组在一起；导入哺乳动物的受精卵中，最终培育的转基因动物进入泌乳期后，可以通过分泌的乳汁生产所需要的药物。(只有在产下雌性动物个体中，转入的基因才能表达)。

【详解】

A；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；因此可用显微注射技术将含有人凝血因子基因的重组DNA分子导入羊的受精卵，A正确；

B；在该转基因羊中；人凝血因子存在于所有细胞中，但只在乳腺细胞中表达，B错误；

C；人凝血因子基因开始转录后；RNA聚合酶以DNA分子一条链为模板合成mRNA，C错误；

D；科学家将人凝血因子基因与乳腺蛋白基因的启动子等调控组件重组在一起；从而使人凝血因子基因只在乳腺细胞中特异表达，D错误。

故选BCD。9、B:C【分析】【分析】

该题主要考察了细胞的分化；干细胞是一类仍然保留有分裂和分化能力的细胞，其可以分为全能干细胞；多能干细胞和专能干细胞，其中造血干细胞属于多能干细胞。

【详解】

造血干细胞属于多能干细胞；其可以分化为血液中的多种细胞，例如红细胞；血小板和白细胞，白细胞包括嗜中性粒细胞，B、C正确；骨骼肌细胞不是造血干细胞分化来的，神经细胞是由神经干细胞分化而来，A、D错误；

故选BC。10、A:C【分析】【分析】

单克隆抗体的制备过程是：对小动物注射抗原；从该动物的脾脏中获取B淋巴细胞，将B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合，筛选出能产生单一抗体的杂交瘤细胞，克隆化培养杂交瘤细胞，最后获取单克隆抗体。

【详解】

A；利用转基因鼠技术进行全人源化单克隆抗体；能降低单克隆抗体药物的免疫排斥反应，A正确；

B；过程①②利用的是转基因技术；B错误；

C；融合后的细胞需要用选择培养基筛选获得杂交瘤细胞；还要经过克隆化培养、（专一性）抗体检测等，C正确；

D；B细胞在体外培养条件下不能无限增殖；体外培养B细胞不能获得大量的单克隆抗体，D错误。

故选AC。11、A:B【分析】分析题图：图示为“低乳糖奶牛”的培育过程；首先采用基因工程技术将“乳糖分解酶基因”导入受体细胞，再采用核移植技术；早期胚胎培养技术和胚胎移植技术获得转基因克隆动物。

【详解】

A；犊牛的细胞核基因来自黑白花奶牛；但其细胞质基因来自卵母细胞，因此其性状与黑白花奶牛的性状不完全一致，A错误；

B；核移植的受体细胞一般选用MⅡ期卵母细胞；进行去核时，通过显微操作去除卵母细胞中的核，用微型吸管可一并吸出细胞核与第一极体，B错误；

C；犊牛的出生属于细胞核移植技术的应用；体现了动物细胞的细胞核具有全能性，C正确；

D；体细胞核移植技术可用于人类组织器官的移植和保护濒危动物；D正确。

故选AB。

【点睛】12、C:D【分析】【分析】

据图分析；图示基因编辑猪培育过程涉及的技术手段有转基因技术；核移植技术、早期胚胎培养技术和胚胎移植技术等，利用转基因技术将病毒外壳蛋白基因（目的基因）导入2号猪的体细胞核中，然后将2号猪的体细胞核移植到1号猪的去核卵母细胞中，再将重组细胞培养到囊胚并移植到3号猪的子宫中去，最后分娩产生了4号转基因克隆猪。

【详解】

A；对供体母猪使用促性腺激素处理；使其超数排卵，A正确；

B；获得的卵母细胞去核后；需要培养到减数第二次分裂中期才能进行核移植，B正确；

C；染色体位于细胞核；则产出的基因编辑猪的性染色体来自于2号猪，C错误；

D；为检测病毒外壳蛋白基因是否正常表达；可采用的方法是抗原-抗体杂交，D错误。

故选CD。13、A:B:D【分析】【分析】

1.细胞核移植技术；是指将一个动物细胞的细胞核移植至去核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育为动物个体。

2.高度分化的植物细胞具有全能性；已分化的动物体细胞的细胞核具有全能性。

【详解】

A；蛙是体外受精；生殖发育过程都是在体外完成的，所以实验中用到核移植技术得到的重组细胞，不用移植到蛙体内，A错误；

B；蛙是体外受精；生殖发育过程都是在体外完成的，猴子是体内受精、体内发育的，用猴进行体细胞核移植实验的成功率与用蛙无可比性，B错误；

C；题意显示；肠上皮核移植实验中有1%～2%能形成蝌蚪，囊胚核移植实验中有50%能形成蝌蚪或成蛙，该实验说明胚胎细胞分化程度较低，全能性的表达更容易，C正确；

D；蛙的性状有些是核基因控制；有些是质基因控制，核移植得到的克隆蛙的遗传性状与供核蛙的不完全相同，D错误。

故选ABD。14、B:C:D【分析】【分析】

动物核移植是指将动物的一个细胞的细胞核移入一个去掉细胞核的卵母细胞中；使其重组并发育成一个新的胚胎。这个新的胚胎最终发育为动物个体。核移植得到的动物称克隆动物，克隆动物的核基因完全来自供体动物，而细胞质基因来自受体细胞。核移植包括体细胞核移植和胚胎细胞核移植，其中体细胞核移植的难度明显高于胚胎细胞核移植，因为体细胞的全能性低于胚胎细胞。

【详解】

A；动物细胞核移植技术；不能体现动物细胞的全能性，而是体现动动物细胞核的全能性，A错误；

B；去除A猴卵母细胞的细胞核；目的是排除A猴核遗传物质的干扰，保证克隆猴的核遗传物质都来自B猴，B正确；

C；必须将重组细胞培育到桑椹胚或囊胚阶段后才能植入代孕动物体内；才可正常继续发育，C正确；

D；卵母细胞的细胞质中含有促进细胞核全能性表达的物质；故体细胞的细胞核需移植到去核卵母细胞后才能表现出全能性，D正确。

故选BCD。三、填空题(共5题，共10分)15、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】远缘杂交的不亲和性细胞遗传细胞免疫、16、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】能在受体细胞中复制并稳定保存具有标记基因，供重组DNA的鉴定和选择17、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】无菌毛霉其他菌种18、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】贴附在瓶壁上细胞贴壁相互抑制停止分裂增殖细胞的接触抑制。19、略

【分析】【详解】

蛋白质工程的基本途径：从预期的蛋白质功能出发，设计预期的蛋白质结构，推测应有的氨基酸序列，找到相对应的脱氧核苷酸序列，以下按照基因工程的一般步骤进行。该蛋白质的氨基酸序列已知，因此通过蛋白质工程，生产该蛋白质新药的基本过程为：根据已知的氨基酸序列→找到相对应的脱氧核苷酸序列→合成该蛋白质新药基因→将获得的目的基因与质粒构建形成基因表达载体→将重组质粒导入受体菌→获得工程菌→生产该蛋白质新药。【解析】根据已知的氨基酸序列→找到相对应的脱氧核苷酸序列→合成该蛋白质新药基因→将获得的目的基因与质粒构建形成基因表达载体→将重组质粒导入受体菌→获得工程菌→生产该蛋白质新药四、判断题(共3题，共12分)20、A【分析】【详解】

胚胎发育至囊胚期时，细胞逐渐分化。聚集在胚胎一端的细胞形成内细胞团，将来发育成胚胎的各种组织，即发育成完整的胚胎，而沿透明带内壁拓展和排列的细胞，称为滋养层细胞，它们将来发育成胎膜和胎盘，为胚胎的发育提供营养，故该表述正确。21、B【分析】【详解】

来源于自然界的目的基因导入植物体后，可能破坏原有的基因结构，具有不确定性，外源基因也可能通过花粉传播，使其他植物成为“超级植物"等，所以如果转基因植物的外源基因来源于自然界，也可能存在安全性问题。本说法错误。22、A【分析】【分析】

转基因生物的安全性问题：食物安全（滞后效应；过敏源、营养成分改变）、生物安全（对生物多样性的影响）、环境安全（对生态系统稳定性的影响）。治疗性克隆：指利用克隆技术产生特定细胞和组织（皮肤、神经或肌肉等）用于治疗性移植。生殖性克隆：指将克隆技术用于生育目的；即用于产生人类个体。中国政府：禁止生殖性克隆人，坚持四不原则（不赞成、不允许、不支持、不接受任何生殖性克隆人实验），不反对治疗性克隆人。

【详解】

据分析可知；中国政府禁止生殖性克隆，但不反对治疗性克隆。

故正确。五、实验题(共2题，共16分)23、略

【分析】【分析】

据图分析；图甲为可高效利用淀粉的工程酵母菌菌种的培育过程，其中①表示基因表达载体的构建过程，是基因工程的关键步骤；②③表示分离纯化工程酵母菌菌种。乙图为稀释涂布平板法得到的菌落，但是其菌落没有均匀分布，说明其涂布是不均匀的。

【详解】

（1）该实验的目的是获得可高效利用淀粉的工程酵母菌菌种；因此其培养基应该以淀粉为唯一碳源；②；③过程为分离纯化工程酵母菌菌种，多次重复筛选可以提高分解淀粉能力强的工程酵母菌菌种的纯度。

（2）图乙显示平板培养后；形成了多个菌落，因此该同学的接种方法是稀释涂布平板法；但是菌落分布不均匀，集中分布在一定区域，说明是涂布不均匀导致的。

（3）与普通酵母菌相比；在以淀粉为原料的培养条件下，工程酵母菌更能够高效地利用淀粉，其分解淀粉产生葡萄糖的能力更强，呼吸作用产生二氧化碳速率更快，所以需要先排气。

（4）凝胶色谱法分离的原理是相对分子质量较大的蛋白质分子；不能进入凝胶颗粒内部，只能分布在颗粒之间，通过的路程较短，移动的速度较快；相对分子质量较小的蛋白质分子比较容易进入凝胶内部的通道，通过的路程较长，移动的速度较慢。因此，在色谱柱中移动速度较慢的蛋白质，相对分子质量较小。

【点睛】

解答本题的关键是掌握基因工程的基本步骤、微生物的培养和分离、蛋白质的分离等相关知识，能够根据实验目的分析培养基成分，并能够根据工程菌的特点分析其代谢情况。【解析】淀粉进一步筛选纯化获得分解淀粉能力强的酵母菌（或高效利用利用淀粉的工程酵母菌）稀释涂布平板法涂布不均匀工程酵母工程菌分解淀粉产生葡萄糖的能力强，工程菌呼吸强度大，产生CO2多小24、略

【分析】【分析】

1；利用动物细胞进行DNA的粗提取与鉴定的实验原理：①DNA在氯化钠溶液中的溶解度；是随着氯化钠的浓度变化而改变的．当氯化钠的物质的量浓度为0.14mol/L时，DNA的溶解度最低．利用这一原理，可以使溶解在氯化钠溶液中的DNA析出；②DNA不溶于酒精溶液，但是细胞中的某些物质则可以溶于酒精溶液．利用这一原理，可以进一步提取出含杂质较少的DNA；②DNA遇二苯胺（沸水浴）会染成蓝色，因此，二苯胺可以作为鉴定DNA的试剂。

2；利用动物细胞进行DNA的粗提取与鉴定的实验步骤是：①制备鸡血细胞液；②提取鸡血细胞和物质，③细胞核物质中DNA的溶解，④析出含有DNA的粘稠物，⑤过滤获取纱布上的粘稠物，⑥DNA的再溶解，⑦加冷却酒精使DNA析出，⑧二苯胺鉴定DNA分子。

【详解】

（1）DNA的粗提取和鉴定步骤是：加入蒸馏水；破碎细胞→过滤，获取含DNA的滤液→去除滤液中杂质→DNA的析出→鉴定．所以正确的操作顺序是C→B→E→D→A。

（2）C加入蒸馏水的目的是使鸡血细胞吸水涨破；释放细胞核物质；E步骤甲蒸馏水是降低NaCl溶液的浓度，使DNA析出。

（3）鉴定A中所得到的丝状物的主要成分为DNA；可滴加二苯胺试剂，在沸水浴加热的条件下如果出现蓝色则该丝状物的主要成分为DNA。

（4）图中A步骤的目的是获取含杂质较少（或较纯净）的DNA。

【点睛】

本题结合图解，考查DNA的粗提取和鉴定，要求考生识记DNA粗提取和鉴定的原理、操作步骤、实验中采用的试剂及试剂的作用等，再结合所学的知识准确答题，难度适中。【解析】C→B→E→D→A使鸡血细胞吸水涨破，释放出细胞核物质降低NaCl溶液的浓度，使DNA析出二苯胺蓝色提取含杂质较少（或较纯净）的DNA六、综合题(共4题，共20分)25、略

【分析】【分析】

基因工程技术的基本步骤：

（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取；利用PCR技术扩增和人工合成；

（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤；基因表达载体包括目的基因；启动子、终止子和标记基因等；

（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同；导入的方法也不一样．将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法；基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法；

（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术．个体水平上的鉴定：抗虫鉴定；抗病鉴定、活性鉴定等。

【详解】

（1）Cas9是一种来自细菌的核酸内切酶；其成分是蛋白质，由相关基因指导在核糖体上合成的。作用原理是sgRNA与DNA单链进行碱基互补配对，并在PAM序列（几乎存在于所有基因中）上游切断DNA双链的磷酸二酯键。

（2）研究发现APC基因发生突变引起的结肠和直肠腺瘤性息肉与结直肠癌密切相关；通过基因工程获得结直肠癌小鼠模型的过程：将Cas9基因及靶向小鼠APC基因的16号外显子的双链sgRNA拼接后形成目的基因与慢病毒载体结合；导入小鼠结肠细胞，获得APC基因缺失的结肠细胞，通过粘膜注射，将APC基因缺失结肠细胞原位移植入免疫缺陷小鼠，生成腺瘤，获得结直肠癌小鼠模型。利用该模型小鼠可研究药物对结直肠癌小鼠的治疗效果，研究结直肠癌发病机理。

（3）根据图2细胞划痕实验流程；图中①表示空质粒；②表示胰蛋白酶、③表示贴壁。由图3细胞划痕实验结果可知，与另外两组相比，48h后c组细胞划痕的宽度较小，说明EPHA1基因可抑制人结肠癌细胞扩散转移。

（4）CRISPR/Cas9基因编辑技术还可用于基因治疗；动植物品种改良等方面。

【点睛】

熟知基因工程的相关知识及其应用是解答本题的关键，本题主要考查考生识图能力和理解所学知识的要点并能灵活援用把握知识间的内在联系的能力。【解析】核糖体碱基互补配对磷酸二酯Cas9目的基因研究药物对结直肠癌小鼠的治疗效果，研究结直肠癌发病机理空质粒胰蛋白酶贴壁小EPHA1基因可抑制人结肠癌细胞扩散转移基因治疗、动植物品种改良26、略

【分析】【分析】

1；农杆菌转化法：

①农杆菌特点：易感染双子叶植物和裸子植物；对单子叶植物没有感染力；Ti质粒的T-DNA可转移至受体细胞，并整合到受体细胞的染色体上。

②转化：目的基因插人Ti质粒的T-DNA上导入农杆菌→导入植物细胞→目的基因整合↓到植物细胞染色体上→目的基因的遗传特性得以稳定维持和表达。

2；目的基因的检测和表达：

首先要检测转基因生物的染色体DNA上是否插入了目的基因；方法是采用DNA分子杂交(DNA-DNA)技术。

其次还要检测目的基因是否转录出mRNA；方法是采用分子杂交(DNA-RNA)技术。

最后检测目的基因是否翻译成蛋白质；方法是采用抗原-抗体杂交技术。

有时还需进行个体生物学水平的鉴定。如生物抗虫或抗病的鉴定等。

（1）

分析图可知Bt毒蛋白基因是目的基因；细菌的基因之所以能在棉花细胞内表达，其原因是所有生物共用一套密码子。

（2）

在基因工程中最核心步骤是基因表达载体的构建；目的是使目的基因在受体细胞中稳定存在，该过程完成需要的两种酶分别是限制性核酸内内切酶；DNA连接酶。

（3）

由图示可知；将目的基因导入棉花细胞内常用的方法是农杆菌转化法，这种导入方法经济有效。目的基因能否在棉株体内稳定维持和表达其遗传特性的关键是目的基因是否插入到受体细胞内的染色体上的DNA上，通过DNA分子杂交技术进行检测，就可知道目的基因是否插入到受体细胞内的染色体上的DNA上。若要检测目的基因是否表达，采用抗原-抗体杂交技术。

（4）

由棉株细胞发育成为抗虫棉幼苗个体；需要用到植物组织培养技术，其中必须经过脱分化和再分化两个过程。

（5）

转基因食品带来的安全问题有：转基因植物的DNA经过重组后；有可能合成出对人体有直接毒性或潜在毒性的蛋白质；转基因农作物所表达的某些蛋白质，可能会潜移默化地影响人的免疫系统，从而对人体健康造成隐形的伤害，食用者在过了若干年或者一两代，问