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文档简介

免疫学检测原理

及临床应用一、基于抗原抗体反应的检测方法

㈠抗原抗体结合反应的特点

1.高度特异性

2.抗原抗体结合的带现象与可见性

3.可逆性

㈡影响抗原抗体反应的因素

1.电解质

2.酸碱度

3.温度

4.抗原和抗体的性质前带现象后带现象㈢抗原抗体反应的基本检测方法

1凝集反应

颗粒性抗原（如细菌、细胞）与相应抗体，在适当电解质存在的条件下，经过一定时间后出现肉眼可见凝集块，称为凝集反应

凝集反应种类

⑴直接凝集反应

⑵间接凝集反应

是将可溶性抗原或抗体吸附于与免疫无关的

载体上，使之成为致敏载体颗粒，然后与相

应抗体或抗原作用，在电解质参与下出现的

凝集反应

⑶间接凝集抑制反应

将可溶性抗原与相应抗体预先作用，然后再

加入致敏载体悬液，由于抗体已被可溶性抗原

结合，因而致敏颗粒不发生凝集现象，称为

间接凝集抑制试验2沉淀反应

可溶性抗原（如细菌浸出液，组织浸出

液和动物血清等）与相应抗体结合后，

在电解质存在条件下，经过一定时间作

用后，可出现肉眼可见的沉淀物，称为

沉淀反应

⑴单向扩散试验

是一种定量试验，使抗原在含有抗体的琼脂

介质中扩散，经一定时间后即可见抗原孔周

围出现由抗原抗体复合物形成的沉淀环。沉

淀环的直径与抗原浓度成正比。故试验前应

用已知不同浓度标准抗原制成标准曲线（纵

座标为沉淀环直径，横座标为抗原浓度），

可根据沉淀环直径的大小从标准曲线中查出

待检样品中抗原的含量。临床上常用于测定

IgG、IgM、IgA的含量⑵双向扩散试验

抗原与抗体在琼脂介质中相互扩散，如抗原

抗体相应且浓度比例适当，则在抗原抗体之

间可出现白色沉淀线。一对相应的抗原抗体

只能形成一条沉淀线；多种抗原抗体系统，

测可形成多条沉淀线

⑶免疫电泳

⑷免疫比浊

3补体参与的反应

补体结合试验、溶血空斑试验

4免疫标记技术

免疫标记技术是指用荧光素、酶、同位素或电

子致密物质等标记抗体或抗原所进行的抗原抗

体反应

优点：特异、敏感、快速、能定性、定量甚

至定位，且易于观察⑴免疫荧光法

⑵酶免疫测定

酶免疫技术是通过适当的酶促化学反应和免

疫反应，使抗体（或抗原）与酶蛋白分子结

合，形成酶标抗体（或抗原），该结合物保

留免疫学活性和酶活性，因而既有抗原抗体

反应特异性，又有酶促反应的特异性。酶分

解底物后的显色深浅可反映标本中抗原或抗

体的含量

常用酶

辣根过氧物酶、碱性磷酸酶

*酶联免疫吸附试验（ELISA）

间接法

用于测抗体

包被抗原→加待测标本→加酶标抗体→加底物

→终止反应→测OD值

双抗体夹心法

用于测抗原

包被抗体→加待测标本→加酶标抗体→加底物

→终止反应→测OD值

*酶联免疫斑点试验

*BSA-ELISA

⑶免疫组化技术

⑷放射免疫测定法

⑸化学发光免疫分析

⑹免疫印迹法二免疫细胞检测

㈠免疫细胞及其亚类计数

㈡淋巴细胞功能测定

1体外试验

⑴淋巴细胞增殖试验

⑵细胞毒试验

⑶

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