2024年华东师大版选择性必修3生物上册月考试卷

…………○…………内…………○…………装…………○…………内…………○…………装…………○…………订…………○…………线…………○…………※※请※※不※※要※※在※※装※※订※※线※※内※※答※※题※※…………○…………外…………○…………装…………○…………订…………○…………线…………○…………第=page22页，总=sectionpages22页第=page11页，总=sectionpages11页2024年华东师大版选择性必修3生物上册月考试卷170考试试卷考试范围：全部知识点；考试时间：120分钟学校：______姓名：______班级：______考号：______总分栏题号一二三四五六总分得分评卷人得分一、选择题(共8题，共16分)1、要将能分解纤维素的细菌从土壤中分离出来，应将它们接种在（）A.只含纤维素粉而无其他碳源的选择培养基上B.含有蛋白胨和牛肉膏的固体培养基上C.加入指示剂的鉴别培养基上D.含四大营养要素的培养基上2、如图是我国科学家首次用体细胞核移植技术克隆出两只猕猴的简单流程，叙述错误的是（）

A.体外培养供体体细胞时，为防止污染需将培养皿密闭培养在二氧化碳培养箱中B.用于注射的体细胞传代次数不能过多是为了保持细胞正常的二倍体核型C.利用去核卵母细胞作为受体细胞的原因是细胞质中含有激发全能性的物质D.克隆的胚胎在体外培养时，不同的发育时期需更换不同的培养液3、如果已知一小段DNA的序列；可采用PCR的方法，简捷地分析出已知序列两侧的序列。

已知的DNA序列为：

设计的一些PCR引物为：①5′-AACTATGCGCTCATGA-3′②5′-GCAATGCGTAGCCTCT-3′③5′-AGAGGCTACGCATTGC-3′④5′-TCATGAGCGCATAGTT-3′

扩增过程选用的引物是（）A.①和④B.②和③C.②和④D.①和③4、下列有关微生物培养基及其配制的叙述，正确的是（）A.对培养基常用的灭菌方法有干热灭菌、灼烧灭菌和煮沸灭菌等B.若需要调节pH，则应该在对培养基进行湿热灭菌后进行调节C.家庭制作腐乳时，豆腐块就是毛霉、曲霉、酵母等的培养基D.固体培养基一般都含有碳源、氮源、水、无机盐、琼脂等营养物质5、下列关于人体造血干细胞的叙述，错误的是（）A.造血干细胞比胚胎干细胞的分化程度高B.造血干细胞属于成体干细胞，但不具有组织特异性C.造血干细胞可不断增殖和分化，适当捐献造血干细胞不影响人体健康D.造血干细胞移植是治疗白血病的有效手段6、下列关于转基因生物与安全性的叙述，正确的是（）A.转基因培育的植物，理论上目的基因只存在于特定的组织中B.将目的基因导入农作物的叶绿体基因组可有效防止基因污染C.转基因技术与植物体细胞杂交技术均可打破生殖隔离，培育出新物种D.种植转基因抗虫棉时，常间行种植普通棉花供害虫取食，其主要目的是保护物种多样性7、为利用乳腺生物反应器进行制药，需先对胚胎的性别进行筛选后再进行移植。已知牛的雄性胚胎中存在特异性H－Y抗原，可与H－Y单克隆抗体发生特异性结合。下列叙述正确的是（）A.H－Y单克隆抗体是由B淋巴细胞分泌的B.H－Y单克隆抗体检测呈阳性的胚胎应剔除C.可对筛选出的桑葚胚内细胞团进行均等分割D.胚胎移植前要对受体母牛进行超数排卵处理8、噬菌体DNA可以和大肠杆菌DNA的特定位点发生互换，在此基础上发展起来的Gateway克隆技术是一种快速、高效构建基因表达载体的方法。该技术依靠载体上存在的特定重组位，点和克隆酶，通过BP反应将目的基因连接到质粒1上，获得克隆质粒2，再通过LR反应将目的基因连接到载体质粒3上，获得表达载体，如图所示。下列有关叙述正确的是（）

A.利用PCR技术扩增目的基因时需在引物的3'端添加attB1和attB2序列B.目的基因的获取是基因工程的核心，图中未标出的结构有启动子、终止子等C.为了从反应体系中筛选出质粒2，应在培养基上添加青霉素和卡那霉素D.可用Ca2+处理大肠杆菌以促进其对环境中质粒4的吸收评卷人得分二、多选题(共9题，共18分)9、下列关于“转基因”的叙述，错误的是（）A.转入的外源基因不会使作物的其他基因的表达受到影响B.被转移的基因是功能已知的基因，人们对它们研究得已经相当透彻，绝对不会引起安全性问题C.在“转基因”的过程中，必须用到工具酶D.转基因技术成果已进入人类的生产和生活，特别是在医药和农业生产上发挥了极大的作用10、良种试管牛的繁殖过程是用激素促进甲牛多排卵，然后把卵母细胞在体外与人工采集的乙牛的精子进行受精，在特定培养基上培育成胚胎，再把胚胎送入经过激素处理的丙牛的子宫内，孕育成试管牛。下列相关叙述正确的是（）A.“用激素促进甲牛多排卵”的激素是孕激素B.产生试管牛的生殖方式属于有性生殖C.甲牛、乙牛对试管牛核基因的贡献相同D.该技术可应用于加速优良种畜的繁殖11、下图为利用PCR技术扩增特定DNA片段的部分示意图；图中引物为单链DNA片段，它是子链合成延伸的基础。下列有关描述错误的是（）

A.利用PCR技术扩增目的基因时不需要解旋酶而需要耐高温的DNA聚合酶B.引物是子链合成延伸基础，子链沿着模板链的3’→5’方向延伸C.从理论上推测，第四轮循环产物中只含有引物A的DNA片段所占的比例为15/16D.在第三轮循环产物中才开始出现两条脱氧核苷酸链等长的DNA片段且占1/212、下列关于发酵工程的应用，叙述正确的是（）A.柠檬酸是一种广泛应用的食品酸度调节剂，可以通过黑曲霉发酵制得B.可以将乙型肝炎病毒的抗原基因转入酵母菌通过发酵工程制备乙型肝炎疫苗C.利用发酵工程生产的白僵菌特异性强，只能用来防治一种农林害虫D.一种真菌通过发酵工程产生的井冈霉素可以用来防治水稻枯纹病13、为探究某物种的等位基因“CST1”与“cst1E81K”的功能，科研人员将表达CST1和cst1E81K的质粒分别导入无法吸收葡萄糖的酵母菌（以麦芽糖为碳源），经处理后再将其接种在含不同碳源的培养基上，结果如下图所示，下列说法正确的是（）

A.上述酵母菌在接种前的处理是对其进行等浓度梯度的稀释B.在含葡萄糖类似物的培养基上，导入CST1的酵母菌存活率最高C.据图推测，CST1的功能可能是转运葡萄糖进入细胞D.导入cst1E81K的酵母菌葡萄糖吸收速率大于导入CST1的酵母菌14、下列关于土壤中纤维素分解菌的分离与计数，叙述正确的是（）A.可从富含腐殖质的林下土壤中筛选产纤维素酶菌B.培养基中应含大量的葡萄糖或蔗糖提供生长营养C.培养微生物的试剂和器具都要进行高压蒸汽灭菌D.菌种分离和菌落计数都可以使用固体培养基15、为保障公共健康；需要定期对公共饮用水进行卫生检测。饮用水的卫生标准是100mL不得检出大肠杆菌或者1000mL不超过3个大肠杆菌。若要确定饮用水是否合格，可采用膜过滤法检测，过程如下图所示。下列相关叙述错误的是（）

A.检测前一般需要对水样收集瓶、培养皿、镊子等进行干热灭菌B.完成过滤后需将滤膜置于固体培养基上，在25℃下培养观察C.为减少实验误差，应按照上述实验步骤多次取样重复进行检测D.可用血细胞计数板直接计数法替代膜过滤法检测饮用水中的大肠杆菌数量16、我国科研人员在实验室中通过构建多种酶催化体系的方法，首次实现了在细胞外从二氧化碳固定到合成淀粉的过程。下列有关叙述正确的是（）A.可从不同物种的基因中扩增得到多酶催化体系中的目标酶基因B.在多酶催化体系中，可能会因为酶的最适反应条件不同而使反应中断C.该方法可在分子水平上直接改变氨基酸的序列，实现对酶特性的改造和优化D.若该科研成果成熟后推广应用有助于摆脱耕地和自然环境限制，解决粮食危机17、治疗性克隆的做法是先从需要救治的患者身上提取细胞，然后将该细胞的遗传物质植入一个去除了细胞核的卵细胞中，该卵细胞开始自行分裂，直至形成一个早期胚胎，从早期胚胎中提取胚胎干细胞后将其培养成人们所需要的各种人体器官。下列有关说法正确的是（）A.可采用开放式培养的方式，置于CO2培养箱中培养胚胎干细胞B.该早期胚胎发育始于受精卵，胚胎是由囊胚内部的细胞团不断增殖分化而来C.治疗性克隆中运用胚胎移植技术，一般不选择原肠胚进行胚胎移植D.我国不赞成、不允许、不支持、不接受任何克隆性实验评卷人得分三、填空题(共8题，共16分)18、虽然各种培养基的具体配方不同，但一般都含有_____________、___________________(提供碳元素的物质)、_________________(提供氮元素的物质)和__________________。19、1.基因检测引发的伦理问题。

（1）基因身份证：基因身份证指把个人的_____和_____检测出来；记录在磁卡上，而做成的个人基因身份证。

（2）基因检测引发的争论①_____②_____③_____④_____⑤_____⑥_____

。项目。

反对。

支持。

技术方面。

目前人类对①及基因间的相互作用尚缺乏足够的认识；通过基因检测达到②的目的是很困难的；基因检测结果会给受检者带来巨大的③。

通过基因检测可以对遗传性疾病及早采取④；适时进行治疗，达到挽救患者生命的目的。

道德方面。

基因资讯的泄露造成⑤；如个人婚姻困难；人际关系疏远，更明显的是造成一支遗传性失业大军。

对于基因歧视现象；可以通过正确的科学知识传播；⑥教育和立法得以解决。

2.试管婴儿与设计试管婴儿的比较①_____②_____③_____④_____

。项目。

设计试管婴儿。

试管婴儿。

技术手段。

胚胎移植前①（填“需要”或“不需要”）进行遗传学诊断这一环节。

②（填“需要”或‘不需要”）进行遗传学诊断。

实践应用。

用于白血病；贫血病等遗传性疾病的预测。

解决不孕不育问题。

联系。

二者都是③受精；体外进行早期胚胎发育，再进行胚胎移植，从生殖方式上都为④

20、通过统计平板上的________________，就能推测出样品中大约含有多少活菌。为了保证结果准确，一般选择菌落数在_________________________的平板进行计数。21、来源：主要是从______中分离纯化出来的。22、在____________的温度范围内，DNA的双螺旋结构解体，双链分开，这过程成为__________。23、研究表明，转基因抗虫棉的大面积种植有效遏制了棉铃虫害，也显著地降低了化学农药的使用量｡但是，科研人员也发现，棉田中一种体型很小的盲蝽蟓却容易爆发成灾｡有人认为这与大面积种植转基因抗虫棉有关｡我们应如何看待这种观点_____？如果回答问题有困难，可以请教老师或通过互联网寻找答案。24、科学家采用定点诱变的方法构建T4溶菌酶的新蛋白质，发现其中一种新蛋白质的第9和第164位氨基酸残基被转换为半胱氨酸残基，并形成一个二硫键。这种新蛋白质的热稳定性会有什么变化？这项技术的要点是什么？_________25、某种微生物合成的一种蛋白酶与人体消化液中某种蛋白酶的结构和功能很相似，只是前者热稳定性较差，进入人体后容易失效。尝试根据本节课所学知识提出改造该种微生物蛋白酶的思路_________。评卷人得分四、判断题(共2题，共10分)26、蛋白质工程的基本思路是：从预期的蛋白质功能出发→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到并改变相对应的脱氧核苷酸序列（基因）或合成新的基因→获得所需要的蛋白质。（选择性必修3P94）()A.正确B.错误27、生殖性克隆和治疗性克隆两者有着本质的区别。()A.正确B.错误评卷人得分五、实验题(共2题，共14分)28、“掌心对掌心；手心压手背，十指交叉摩，手握关节搓，拇指围轴转，指尖掌心揉，手腕别放过。”七步洗手法可以清除手部的污物和微生物，是预防新冠病毒感染的有效措施之一。某生物实验小组设计了“比较洗手前后手上细菌分布情况”的探究活动：各小组成员分别将拇指在甲组培养基上轻轻按一下，然后用肥皂将该手洗干净，再将洗净后的拇指在乙组培养基上轻轻按一下。将这两组培养基放入恒温培养箱中，在适宜温度下培养24小时后，统计两组培养基中菌落数目。

（1）该实验中用到的培养基中加入了牛肉膏、蛋白胨、NaCl和水，蛋白胨可以为微生物的生长提供__________________________等营养物质，为了使配制的溶液呈固体状态，还需要加入__________。为了防止外来杂菌的入侵，可以将培养基放入盛有适量_________的高压灭菌锅内灭菌15－30min。

（2）实验中“将拇指在培养基上轻轻按一下”相当于微生物培养操作中的_______，该操作应该在酒精灯火焰附近进行，原因是__________________________。

（3）统计甲乙两组培养皿中的菌落，乙组中菌落数比甲少得多，实验结果说明肥皂洗手不能彻底清除手上的微生物。为避免手上微生物在无菌操作中污染培养基，洗过的手还应进行________________________等方法处理（答出1种即可）。

（4）有同学认为乙中也有菌落产生，是因为培养过程受到杂菌污染，请你在本实验的基础上设计一个简单的方案验证他的猜想是否正确，并预期结果和结论。________________________________。29、研究发现柚皮精油和乳酸菌素（小分子蛋白质）均有抑菌作用；两者的提取及应用如图所示。

（1）柚皮易焦糊，宜采用____________法提取柚皮精油，该过程得到的糊状液体可通过___________除去其中的固体杂质。

（2）筛选乳酸菌A时可选用平板划线法或____________接种。对新配制的培养基灭菌时所用的设备是_______________。实验前需对超净工作台进行____________处理。

（3）培养基中的尿素可为乳酸菌A生长提供______________。电泳法纯化乳酸菌素时，若分离带电荷相同的蛋白质，则其分子量越大，电泳速度___________。

（4）抑菌实验时，在长满致病菌的平板上，会出现以抑菌物质为中心的透明圈。可通过测定透明圈的______________来比较柚皮精油和乳酸菌素的抑菌效果评卷人得分六、综合题(共4题，共16分)30、土壤盐渍化影响水稻生长发育。科研人员将水稻耐盐基因导入不耐盐碱水稻品种吉更88中，培育出了4株耐盐碱水稻新品种。其操作流程及相关限制酶识别序列和切割位点如下图，图中I~III为限制酶的酶切位点，bar为抗除草剂基因，为卡那霉素抗性基因。请回答：

（1）过程①需要__________的催化。过程③需要用_________处理根瘤农杆菌；使其成为感受态细胞。

（2）过程①所用引物如下，则过程②使用的限制酶是____________和_____________。

（3）花椰菜病毒启动子含有________的核苷酸序列，本研究中设计两个相同启动子分别连接bar和目的基因，其目的是____________________。

（4）科研人员采用特定的方法大量提取成功转化的4株植株叶片的基因组DNA（目的基因中不含AAGCTT），用HindIII完全消化，消化产物经电泳、转膜后与目的基因的探针杂交，其杂交结果如图所示（图中数字标号代表转化成功的植株）。下列有关分析正确的有_____________。

①还有不含目的基因的DNA条带在图中没有显示。

②杂交带位置不同说明HindIII消化形成的DNA片段长度不同。

③相同位置上杂交带对应DNA片段的脱氧核苷酸序列相同。

④目的基因插入到受体细胞核DNA的位置和数量都是随机的31、科学家研发出抗HPV的单克隆抗体可高效准确检测出HPV；从而及时监控宫颈癌的发生。回答下列问题：

(1)单克隆抗体具有的主要优点是_____。单克隆抗体制备过程中涉及的细胞工程技术有_____、_____。

(2)将B淋巴细胞和骨髓瘤细胞进行融合时，融合体系中除含有未融合的细胞和杂交瘤细胞外（只考虑两两融合），可能还有_____、_____，诱导动物细胞融合时，常用的诱导因素有_____、_____等。

(3)要获得产生单克隆抗体的杂交瘤细胞需至少经过_____次筛选。32、2021年，中国科学家在预印本网站bioRxiv发表了一篇研究报告。研究人员选择了Lewis大鼠作为研究对象以降低两只小鼠组合在一起后的免疫排斥反应；通过子宫移植和异种共生手术将一只被阉割的雄性大鼠和一只雌性大鼠连接在一起，使雄性小鼠能够通过血液交换获得一个雌性微环境，成功让得到子宫移植的雄性小鼠孕育胚胎并诞下幼崽。请回答下列问题：

（1）科研人员将选择______时期的胚胎移植到两只共生小鼠的子宫中。

（2）早期胚胎获取可从供体的______中冲取，完成此操作的生理学基础是______。

（3）该项研究中将雄性大鼠和雌性大鼠共生的目的是______。

（4）若通过基因编辑技术切除所得受精卵中的BMALI基因（生物节律核心基因）；可培育出BMALI基因敲除的小鼠。基因编辑工具是经改造的CRISPR/Cas9系统。该系统由向导RNA（sgRNA）和Cas9蛋白组成，由sgRNA引导Cas9蛋白在特定的基因位点进行切割来完成基因的编辑过程，其工作原理如下图所示。请回答：

①图中Cas9-sgRNA复合体通常用______方法注入受体细胞；基因编辑工具中对基因进行剪切的是______。

②sgRNA能与靶DNA分子特异性识别、结合的原理是______。

③若BMALI基因敲除成功，从个体水平鉴定，小鼠表现为______。33、2019年末；一场突如其来的新冠肺炎疫情打乱了人们正常的生活节奏。2020年1月6日，中国疾控中心分离出第一株新冠病毒；1月7日完成对该病毒的全部基因组测序；1月24日首个针对新冠病毒的核酸检测试剂盒通过审核，为新冠肺炎的诊断提供了有力的保障。新冠病毒是一种单股正链RNA病毒，外面包裹着衣壳蛋白和囊膜，囊膜上存在刺突蛋白，能特异性识别细胞膜上的ACE2受体从而感染细胞。新冠病毒进入细胞后，首先以正链RNA为模板翻译出RNA聚合酶，然后在该酶的作用下合成负链RNA，再以负链RNA为模板合成大量的正链RNA或结构蛋白mRNA。

（1）核酸检测多数采用实时荧光RT﹣PCR法。由于新冠病毒的遗传物质为RNA，在进行PCR之前，应该将样本中的病毒RNA提取出来，在__________酶的作用下合成互补的DNA单链（该过程称为RT）。PCR过程需要加入引物，原因是______________________________。2020年1月24日，中国疾控中心公布了针对新冠病毒核酸不同序列设计的引物，其中针对衣壳蛋白基因的一段引物Ⅰ为GGGGAACTTCTCCTGCTAGAAT，能否依据此序列设计出另一段引物Ⅱ的序列？__________，理由是______________________________。与传统PCR相比，荧光RT﹣PCR过程中加入了荧光探针，可通过荧光信号对PCR进程实时检测，PCR产物越多，荧光越强。如果待测样本中没有检测出荧光，初步断定样本中__________（填“含有”或“不含有”）新冠病毒。

（2）由于核酸检测比较费时费力，现已开发出多款针对新冠病毒的抗原或抗体检测试剂盒，可在更短时间内得出检测结果。其中一种试剂盒的生产思路是：将新冠病毒的刺突蛋白基因整合到载体上，利用基因工程获得大量的刺突蛋白，并做成检测试剂盒，这种试剂盒是用来检测_____________。

（3）在对新冠病毒检测的过程中，偶尔会出现核酸检测阳性而抗体检测阴性的现象，假如这两种试剂盒的质量及检测方法都没有问题，试从免疫角度分析造成这种现象可能的原因__________________________________________________。

（4）2020年2月15日，法维拉韦正式获得国家药监局批准上市，成为我国第一个针对新冠肺炎具有潜在疗效的药物，该药物能够专一抑制新冠病毒RNA聚合酶，由于人体细胞内也存在RNA聚合酶，有人担心该药物的安全性，请分析他的担心有无道理？__________，理由是____________________________________________________________。参考答案一、选择题(共8题，共16分)1、A【分析】【分析】

土壤中存在着大量纤维素分解酶；包括真菌；细菌和放线菌等，它们可以产生纤维素酶。纤维素酶是一种复合酶，可以把纤维素分解为纤维二糖，进一步分解为葡萄糖使微生物加以利用，故在用纤维素作为唯一碳源的培养基中，纤维素分解菌能够很好地生长，其他微生物则不能生长。在培养基中加入刚果红，可与培养基中的纤维素形成红色复合物，当纤维素被分解后，红色复合物不能形成，培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈，从而可筛选纤维素分解菌。

【详解】

A；只有纤维素粉而无其他碳源的选择培养基上纤维素是唯一的碳源；只有纤维素分解菌能够生存，其他微生物不能生存，可以筛选纤维素分解菌，A正确；

B；培养细菌的培养基都含有蛋白胨；它没有选择作用，B错误；

C；分离纤维素分解菌应该使用选择培养基而不是鉴别培养基；C错误；

D；含四大营养要素的培养基上是基本培养基；没有选择作用，D错误。

故选A。2、A【分析】【分析】

1；培养动物细胞需要给其提供适宜的温度、湿度、pH、气体条件；无菌、无毒的条件，充足的营养物质。

2；动物细胞培养一般包括原代培养和传代培养。

3；动物细胞核移植是指将体细胞核移入一个去核的卵母细胞中；并使其发育成动物个体的过程。

4；哺乳动物的胚胎培养液成分一般都比较复杂；除一些无机盐和有机物外，还需要添加维生素、激素、氨基酸、核苷酸等营养成分，以及血清等物质。

【详解】

A、体外培养供体体细胞时，为了防止代谢产物CO2造成培养基pH波动从而对细胞产生有害影响，可采用开放式培养的方式，使细胞代谢产生的CO2及时溢出培养皿，再通过给培养箱提供恒定的5%的CO2浓度，使之与NaHCO3处于动态平衡；调节pH的相对稳定，A错误；

B；传代次数过多；细胞的遗传物质可能会发生变化，所以用于注射的体细胞传代次数不能过多是为了保持细胞正常的二倍体核型，B正确；

C；卵母细胞较大；含有激发细胞核全能性的物质和营养条件，所以要利用去核卵母细胞作为受体细胞，C正确；

D；由于胚胎不同发育时期生理代谢的需求不同；进行胚胎体外培养时，必须配制一系列含有不同成分的培养液，培养不同发育时期的胚胎，D正确。

故选A。3、D4、C【分析】【分析】

实验室常用的灭菌方法：

①灼烧灭菌：将微生物的接种工具；如接种环；接种针或其他金属工具，直接在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧，可以迅速彻底地灭菌，此外，在接种过程中，试管口或瓶口等容易被污染的部位，也可以通过火焰燃烧来灭菌。

②干热灭菌：能耐高温的；需要保持干燥的物品，如玻璃器皿（吸管；培养皿）和金属用具等，可以采用这种方法灭菌。③高压蒸汽灭菌：将灭菌物品放置在盛有适量水的高压蒸汽灭菌锅内，为达到良好的灭菌效果，一般在压力为100kPa,温度为121℃的条件下，维持15～30min。

【详解】

A；对培养基常用的灭菌方法有干热灭菌和湿热灭菌等；A错误；

B；若需要调节pH；则应该在对培养基进行灭菌前进行调节，B错误；

C；家庭制作腐乳时；毛霉、曲霉、酵母等所需营养物质均来自豆腐块，因此豆腐块就是它们的培养基，C正确；

D；固体培养基中添加的琼脂被用作凝固剂；不属于营养物质，D错误。

故选C。5、B【分析】【分析】

动物和人体内仍保留着少数具有分裂和分化能力的细胞；这些细胞叫做干细胞。哺乳动物的胚胎干细胞是由早期胚胎或原始性腺中分离出来的一类细胞。在功能上具有发育的全能性，即可以分化为成年动物体内任何一种组织细胞。人的骨髓中有许多的造血干细胞，它们能够增殖和分化，不断产生红细胞；白细胞和血小板，补充到血液中去。

【详解】

A；造血干细胞可以分化成红细胞、白细胞和血小板；胚胎干细胞可以分化为任何一种组织细胞，所以造血干细胞分化程度更高，A正确；

B；成体干细胞是成体组织或器官内的干细胞；具有组织特异性，只能分化为特定的细胞或组织，B错误；

C；骨髓中的造血干细胞可不断增殖和分化；不断产生红细胞、白细胞和血小板，补充到血液中去，所以捐献造血干细胞不影响人体健康，C正确；

D；造血干细胞移植可以取代白血病患者病变的造血干细胞；是治疗白血病的有效手段，D正确。

故选B。6、B【分析】【分析】

转基因生物的安全性问题：食物安全（滞后效应；过敏源、营养成分改变）、生物安全（对生物多样性的影响）、环境安全（对生态系统稳定性的影响）。对待转基因技术的正确做法是趋利避害；不能因噎废食。

【详解】

A；转基因培育的植物；理论上目的基因存在于所有体细胞中，A错误；

B；将目的基因整合到受体细胞的叶绿体基因组中能防止基因污染；因为叶绿体基因组不会进入花粉，B正确；

C；转基因技术培育的物种和原来的非转基因生物属于同一物种；C错误；

D；种植转基因抗虫棉；常间行种植普通棉花是为了降低害虫的抗性基因进化的频率，D错误。

故选B。7、B【分析】【分析】

单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应；之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。

【详解】

A；H-Y单克隆抗体是杂交瘤细胞的分泌物；所以H-Y单克隆抗体是由杂交瘤细胞分泌的，A错误；

B；H-Y单克隆抗体具有特异性；H-Y抗原只存在于雄性胚胎中，因此，H-Y单克隆抗体检测阳性的胚胎一定是雄性，而乳腺生物反应器需要雌性个体，因此筛选检测阳性的个体应剔除，B正确；

C；桑葚胚没有内细胞团；可对筛选出的囊胚期的内细胞团进行均等分割，C错误；

D；胚胎移植前要对受体母牛进激素处理；使供受体处于相同的生理状态，不是让受体超数排卵，D错误。

故选B。8、D【分析】【分析】

1；基因工程是指按照人们的愿望；进行严格的设计，通过体外DNA重组和转基因技术，赋予生物以新的遗传特性，创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品；基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工的，又叫做DNA重组技术。

2；基因工程技术的基本步骤：（1）目的基因的获取；（2）基因表达载体的构建是基因工程的核心步骤；基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等，标记基因可便于目的基因的鉴定和筛选。（3）将目的基因导入受体细胞；(4)目的基因的检测与鉴定。

【详解】

A；子链的延伸方向是从5'端到3'端；因此利用PCR技术扩增目的基因时应在引物的5'端添加attB1和attB2序列，A错误；

B；基因工程的核心是基因表达载体的构建；B错误；

C；质粒2上存在青霉素抗性基因；可在含青霉素的的培养基生存，质粒2上无卡那霉素抗性基因，无法在含卡那霉素的培养基上生存，质粒2上不含ccdB基因，不会抑制大肠杆菌增殖，因此若想筛选质粒2，应该只含青霉素的培养基培养，长出的菌落即为含质粒2的大肠杆菌，C错误；

D、用Ca2+处理大肠杆菌会使细胞处于一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状态，故用Ca2+处理大肠杆菌可促进其对环境中质粒4的吸收；D正确。

故选D。二、多选题(共9题，共18分)9、A:B【分析】【分析】

1；基因工程的工具：（1）限制酶：能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列；并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂；（2）DNA连接酶：连接的是两个核苷酸之间的磷酸二酯键；（3）运载体：常用的运载体：质粒、噬菌体的衍生物、动植物病毒。

2；转基因生物的安全性问题：食物安全（滞后效应、过敏源、营养成分改变）、生物安全（对生物多样性的影响）、环境安全（对生态系统稳定性的影响）。

【详解】

A；外源基因插入宿主基因组的部位往往是随机的；因而极有可能破坏原有基因，并使之表达受到影响，A错误；

B；目前科学家对基因的结构、基因间的相互作用以及基因的调控机制等都了解相当有限；再加上转移的基因虽然是功能已知的基因，但不少却是异种生物的基因，因此可能会引起安全性问题，B错误；

C；在“转基因”的过程中；必然用到工具酶，如限制酶和DNA连接酶，C正确；

D；转基因技术成果在农业和医药上发挥了极大的作用；已进入人类的生产和生活，D正确。

故选AB。

【点睛】10、B:C:D【分析】【分析】

良种试管牛的繁殖过程：对供体和受体的选择和处理（同期发情处理；超数排卵处理）；配种或进行人工授精、对胚胎的收集检查培养或保存、进行胚胎移植。

【详解】

A；处理供体甲牛的激素可能是促性腺激素；使其超数排卵，A错误；

B；产生试管牛的过程中经过了两性生殖细胞的融合过程；因此试管牛产生的生殖方式属于有性生殖，B正确；

C；母本甲牛提供卵细胞、父本乙牛提供精子；试管牛细胞核中基因一半来源于父方，一半来源于母方，C正确；

D；体外受精和早期胚胎发育、胚胎移植等技术可以缩短繁殖周期；增加一生繁殖的后代数量，即该技术可充分发挥优良雌性个体的繁殖潜力，D正确。

故选BCD。

【点睛】11、C:D【分析】【分析】

聚酶链式反应扩增DNA片段：

1.PCR原理：在解旋酶作用下；打开DNA双链，每条DNA单链作为母链，以4中游离脱氧核苷酸为原料，合成子链，在引物作用下，DNA聚合酶从引物3'端开始延伸DNA链，即DNA的合成方向是从子链的5'端自3'端延伸的。实际上就是在体外模拟细胞内DNA的复制过程。DNA的复制需要引物，其主要原因是DNA聚合酶只能从3′端延伸DNA链。

2.PCR反应过程是：变性→复性→延伸。

【详解】

A；利用PCR技术扩增目的基因时不需要解旋酶；该过程中氢键的断裂是通过高温完成的，而子链延伸过程需要耐高温的DNA聚合酶，A正确；

B；引物是子链合成延伸基础；即DNA聚合酶从引物3'端开始延伸DNA链，也可以说子链沿着模板链的3’→5’方向延伸，B正确；

C、从理论上推测，第四轮循环产物共有24=16个DNA分子；其中有2个是模板链，只含有引物A的DNA片段即为与其中的一个模板链形成的1个DNA分子，因此，第四轮循环产物中只含有引物A的DNA片段所占的比例为1/16，C错误；

D、DNA复制为半保留复制，DNA复制n次，共形成2n个DNA，其中两个DNA含有母链和子链（引物A或引物B），（2n-2）个DNA都含有子链（含有引物A和引物B）。第三轮循环即DNA复制3次；共形成8个DNA，其中2个DNA含有引物A或引物B，6个DNA含有引物A和引物B，其中只有2个两条脱氧核苷酸链等长的DNA片段，含量为1/4，D错误。

故选CD。

【点睛】12、A:B【分析】【分析】

发酵工程是指采用现代工程技术手段；利用微生物的某些特定功能，为人类生产有用的产品，或直接把微生物应用于工业生产过程的一种技术。发酵工程的内容包括菌种选育；培养基的配制、灭菌、种子扩大培养和接种、发酵过程和产品的分离提纯（生物分离工程）等方面。

【详解】

A；柠檬酸是一种广泛应用的食品酸度调节剂；可以通过黑曲霉发酵制得，A正确；

B；可以将乙型肝炎病毒的抗原基因转入酵母菌通过发酵工程制备乙型肝炎疫苗；B正确；

C；利用发酵工程生产的白僵菌可以用来防治80多种农林害虫；C错误；

D；一种放线菌通过发酵工程产生的井冈霉素可以用来防治水稻枯纹病；D错误。

故选AB。

【点睛】13、A:C【分析】【分析】

从左图看出；在添加麦芽糖的培养基中空质粒组；导入CST1和导入cst1E81K的酵母菌的酵母菌菌落数目相差不大，但在麦芽糖+葡萄糖类似物组中，导入CST1的酵母菌菌落数目最少，说明吸收葡萄糖类似物最多。

【详解】

A；从图中可以看出；后一稀释浓度是前一稀释浓度的5倍，所以是进行等浓度梯度的稀释，A错误；

B；在含葡萄糖类似物的培养基上；导入CST1的酵母菌菌落颜色最浅，说明存活率最低，B错误；

C；导入CST1的酵母菌在葡萄糖类似物的培养基上菌落数目降低；由于葡萄糖类似物被吸收后可以杀死酵母菌，因此可以推测CST1能转运葡萄糖类似物进入酵母菌，所以其功能可能是转运葡萄糖进入细胞，C正确；

D、在麦芽糖+葡萄糖类似物的培养基中，导入cst1E81K的酵母菌菌落数目多，说明其存活率更高，由于葡萄糖类似物被吸收后可以杀死酵母菌，因此可以推测导入cst1E81K的酵母菌葡萄糖吸收速率小于导入CST1的酵母菌；D错误。

故选C。14、A:D【分析】【分析】

纤维素分解菌能合成和分泌纤维素酶，纤维素酶是一种复合酶，包括C1酶；Cx酶和葡萄糖苷酶；前两种酶使纤维素分解成纤维二糖，第三种酶将纤维二糖分解成葡萄糖。用以纤维素为唯一碳源的培养基可以筛选出纤维素分解菌。

【详解】

A；木材、秸秆中富含纤维素；故可以从富含腐殖质的林下土壤中筛选产纤维素酶菌，A正确；

B；应该用以纤维素为唯一碳源的培养基筛选纤维素分解菌；只有纤维素分解菌能够存活，B错误；

C；接种室、接种箱等常用紫外线消毒法处理；接种环等常用灼烧灭菌法处理，吸管、培养皿等常用干热灭菌法处理，培养基用高压蒸汽灭菌法处理，C错误；

D；菌落只能在固体培养基中形成；菌种分离和菌落计数都可以使用固体培养基，D正确。

故选AD。15、B:D【分析】【分析】

细菌的数目可以通过滤膜法来测定。将已知体积的水过滤后；将滤膜放在伊红美蓝培养基上培养。在该培养基上，大肠杆菌的菌落呈黑色，根据黑色菌落的数目，计算水样中大肠杆菌的数量。微生物接种时，为了避免其它杂菌的污染，接种过程要进行无菌操作。灼烧灭菌常适用于接种环；接种针；干热灭菌常适用于玻璃器皿（吸管、培养皿）和金属用具；高压蒸汽灭菌常适用于无菌水、培养基。

【详解】

A；检测前需要对水样收集瓶、滤膜、培养基、镊子灭菌；防止杂菌干扰，A正确；

B；完成过滤后需将滤膜置于固体培养基上；在37℃下培养观察，B错误；

C；为减少实验误差；按照上述实验步骤多次取样重复进行检测，取平均值作为实验数据，C正确；

D；大肠杆菌较小；不能用血细胞计数板直接计数法替代膜过滤法检测，D错误。

故选BD。16、A:B:D【分析】【分析】

蛋白质工程：是指以蛋白质分子的结构规律及与其生理功能的关系作为基础；通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活的需求。

【详解】

A；从不同物种的基因中扩增得到多酶催化体系中的目标酶基因后；可对获得的目的基因利用PCR技术在体外反应体系中扩增，A正确；

B；酶的作用条件较温和；不同的酶其适宜的温度和pH不同，在多酶催化体系中，可能会因为酶的最适反应条件不同而使反应中断，B正确；

C；该方法在分子水平上；通过改变基因的碱基序列，间接改变氨基酸的序列，从而改变蛋白质的结构，实现对酶特性的改造和优化，C错误；

D；该科研实现了在细胞外从二氧化碳固定到合成淀粉的过程；若成熟后推广应用有助于摆脱耕地和自然环境限制，解决粮食危机，D正确。

故选ABD。17、C【分析】【分析】

治疗性克隆是指利用克隆技术产生特定细胞和组织（皮肤；神经或肌肉等）用于治疗性移植。中国政府的态度是禁止生殖性克隆人；不反对治疗性克隆。

【详解】

A；开放式组织培养一般是指使组织培养脱离严格无菌的操作环境；在自然、开放的有菌环境中进行操作。，动物细胞一般不能采用这种方式，A错误；

B；胚胎是由整个受精卵发育而来的；囊胚内部的细胞不能发育为完整的胚胎，B错误；

C；胚胎移植技术；一般采用桑椹胚或囊胚进行移植，C正确；

D；我国不赞成、不允许、不支持、不接受任何形式的生殖性克隆；但是不反对治疗性克隆，D错误。

故选C。三、填空题(共8题，共16分)18、略

【解析】①.水②.碳源③.氮源④.无机盐19、略

【分析】【分析】

1.基因检测可以把人体内的致病基因和易感基因检测出来；通过采取一定的预防措施预防遗传病的发生，但同时可能会带来基因歧视等伦理道德方面的问题。

2.设计试管婴儿不同于试管婴儿；试管婴儿是为了解决不孕不育的问题，而设计试管婴儿是为了解决器官移植方面的医疗问题。

【详解】

1.（1）基因身份证是指把每个人的致病基因和易感基因都检测出来；并记录在磁卡上，这样到医院看病时，只要带上这种身份证，医生就可以“对证”治疗。

（2）反对基因检测的人认为：目前人类对基因结构及基因间相互作用尚缺乏足够的认识；要想通过基因检测达到预防疾病的目的是困难的；况且人类的多基因病，既与基因有关，又与环境和生活习惯有关，有某种致病基因的人不见得就会患病。但是，基因检测结果本身就已经足以给受检者带来巨大的心理压力。个人基因资讯的泄露所造成的基因歧视，势必造成奇特的失业大军，即遗传性失业大军。个人基因资讯被暴露之后，还会造成个人婚姻困难；人际关系疏远等严重后果。支持基因检测的人认为：通过基因检测可以对遗传性疾病及早采取预防措施，适时进行治疗，达到挽救患者生命的目的。对于基因歧视现象，可以通过正确的科学知识传播、伦理道德教育和立法得以解决。

2.设计试管婴儿需要因而具有特定的性别或遗传性状；因此胚胎移植前需要进行遗传学诊断这一环节，而试管婴儿是为了解决不孕不育问题，不需要考虑婴儿的性别等问题，不需要进行遗传学诊断。二者的共同点是：两者都是体外受精，并进行体外早期胚胎培养，都要经过胚胎移植，都是有性生殖。

【点睛】

1.基因与疾病的关系：具有致病基因的个体不一定患遗传病；因为生物的性状还受到环境因素的影响；没有致病基因也可能患病，因为基因表达的蛋白质，在加工或修饰过程中出现错误，也会出现症状。

2.明确设计试管婴儿和试管婴儿目的的不同是解答本题的关键之一。【解析】致病基因易感基因基因结构预防疾病心理压力预防措施基因歧视伦理道德需要不需要体外有性生殖20、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】菌落数30～30021、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】原核生物22、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】80—100℃变性23、略

【分析】【详解】

生物之间存在（种间）竞争多关系，该区域的棉铃虫与盲蝽蟓之间共同以棉花为食，种植转基因抗虫棉后，棉铃虫不能存活，盲蝽蟓的食物等资源充足，故大量繁殖，爆发成灾。【解析】该区域的棉铃虫与盲蝽蟓之间存在竞争关系，种植转基因抗虫棉后，棉铃虫不能存活，盲蝽蟓大量繁殖24、略

【分析】【详解】

蛋白质形成二硫键，使蛋白质的结构更加稳定，因此T4溶菌酶的热稳定性会提高。这项技术属于蛋白质工程技术，其步骤为从预期的蛋白质功能出发→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到并改变相对应的脱氧核苷酸序列（基因）或合成新的基因→获得所需的蛋白质。【解析】会提高T4溶菌酶的耐热性。这项技术属于蛋白质工程技术，该技术的要点是从预期的蛋白质功能出发→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到并改变相对应的脱氧核苷酸序列（基因）或合成新的基因→获得所需的蛋白质。25、略

【分析】【详解】

要提高酶的热稳定性，可采用蛋白质工程技术替换少数氨基酸，改善其功能，需要从改造控制该酶合成的基因着手，具体做法为从预期的蛋白质功能出发→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到并改变相对应的脱氧核苷酸序列→获得所需的蛋白质。【解析】采用蛋白质工程技术替换少数氨基酸，提高该酶的热稳定性，从改造控制该酶合成的基因着手，具体做法为从预期的蛋白质功能出发→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到并改变相对应的脱氧核苷酸序列→获得所需的蛋白质。四、判断题(共2题，共10分)26、A【分析】【详解】

蛋白质工程是指以蛋白质分子的结构规律及其生物功能的关系作为基础；通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活的需求。蛋白质工程的基本思路是：从预期的蛋白质功能出发→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到并改变相对应的脱氧核苷酸序列（基因）或合成新的基因→获得所需要的蛋白质。

故正确。27、A【分析】【分析】

生殖性克隆和治疗性克隆两者有着本质区别；最重要的体现在目的不同。

【详解】

治疗性克隆：是指把克隆出来的组织和器官用于治疗疾病，这种用于医疗目的的使用克隆技术制造胚胎称为治疗性克隆。生殖性克隆：处于生殖的目的使用克隆技术在实验室制造人类胚胎。治疗性克隆和生殖性克隆最重要的差别是目的不同。五、实验题(共2题，共14分)28、略

【分析】【分析】

1；培养基是人们按照微生物对营养物质的不同需求；配制出供其生长繁殖的营养基质；分为固体培养基和液体培养基，培养基中一般含有水、碳源、氮源和无机盐，其中碳源和氮源常采用蛋白胨和牛肉膏，因为它们来源于动物原料，含有糖、维生素和有机氮等营养物质。在提供上述几种主要营养物质的基础上，培养基还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物种和氧气的要求。

2；微生物实验中无菌技术的主要内容：

（1）对实验操作的空间；操作者的衣着和手；进行清洁和消毒。

（2）将用于微生物培养的器皿；接种用具和培养基等器具进行灭菌。

（3）为避免周围环境中微生物的污染；实验操作应在酒精灯火焰附近进行。

（4）实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品相接触。

【详解】

（1）该实验中用到的培养基中加入了牛肉膏；蛋白胨、NaCl和水；蛋白胨来源于动物原料，含有糖、维生素和有机氮等营养物质，故蛋白胨可以为微生物的生长提供碳源、氮源和维生素等营养物质，为了使配制的溶液呈固体状态，还需要加入琼脂。为了防止外来杂菌的入侵，可以将培养基放入盛有适量水的高压灭菌锅内灭菌15-30min。

（2）实验中“将拇指在培养基上轻轻按一下”相当于微生物培养操作中的接种；该操作应该在酒精灯火焰附近进行，这样能够保证接种时处于一个无菌的环境，防止周围环境中的微生物污染培养基。

（3）为避免手上微生物在无菌操作中污染培养基；洗过的手还应酒精棉球擦拭双手；带消毒手套等方法处理。

（4）有同学认为乙中也有菌落产生；是因为培养过程受到杂菌污染，若要验证乙培养基是否被污染，需要再加一个不接种的相同培养基作为对照，与甲乙在相同条件下培养，若该培养基上没有生长菌落，说明培养过程中未被杂交污染，故猜想错误；若该培养基上生长菌落，则说明猜想正确。

【点睛】

本题主要考查微生物的分离和培养，解题关键是识记培养基的概念、微生物实验中无菌技术和实验操作等知识，掌握相关的操作技能，并能将这些实验涉及的方法和技能进行综合运用。【解析】碳源、氮源和维生素琼脂水接种避免周围环境中的微生物污染培养基酒精棉球擦拭双手、戴消毒手套等再加一个不接种的相同培养基（空白培养基），与甲乙在相同条件下培养，若该培养基上没有生长菌落，说明培养过程未被杂交污染，猜想错误；若该培养基上生长菌落，说明培养基中被杂菌污染，猜想正确29、略

【分析】【详解】

(1)植物芳香油的提取方法有蒸馏、压榨和萃取等。具体采用哪种方法要根据植物原料的特点来决定。柚皮易焦糊，宜采用压榨法提取柚皮精油。压榨过程中得到的糊状液体需用过滤法除去其中固定杂质。

(2)筛选、纯化培养某一特定微生物时，常用平板划线法或稀释涂布平板法。为防止杂菌的污染，需对器具培养基等进行消毒灭菌处理，培养基宜采用高压蒸汽灭菌锅进行高温灭菌处理，而超净工作台常使用紫外线或化学药物进行消毒处理。

(3)微生物培养过程中为微生物的生长提供氮源的有尿素、蛋白胨等含氮丰富的物质。电泳法纯化特定生物成分，是利用了待分离样品中各种分子带电性质的差异以及分子本身的大小、形状的不同，这些不同使带电分子产生不同的迁移速度，从而实现样品中不同分子的分离。当待分离分子所带电荷相同时，分子量越大，电泳速度越慢。

(4)抑菌实验时；在长满致病菌的平板上，会出现以抑菌物质为中心的透明圈，透明圈越大，抑菌效果越好。

【点睛】【解析】①.压榨②.过滤③.稀释涂布平板法(或：稀释混合平板法)④.高压蒸汽灭菌锅⑤.消毒⑥.氮源⑦.越慢⑧.直径(或：大小)六、综合题(共4题，共16分)30、略

【分析】【分析】

基因工程技术的基本步骤：

（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取；利用PCR技术扩增和人工合成；

（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤；基因表达载体包括目的基因；启动子、终止子和标记基因等；

（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同；导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法；基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法；

（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术；个体水平上的鉴定：抗虫鉴定；抗病鉴定、活性鉴定等。

【详解】

（1）过程①属于PCR技术扩增，需要耐高温的DNA聚合酶（Taq酶）的催化。过程③属于感受态细胞法导入受体细胞，故需要用Ca2+（或CaCl2）处理根瘤农杆菌；使其成为感受态细胞。

（2）观察一对引物会发现BamHI的识别序列GGATCC和SacI的识别序列GAGCTC；故过程②使用的限制酶是BamHI和SacI。

（3）启动子又叫RNA聚合酶结合位点，故其含有RNA聚合酶识别、结合的核苷酸序列，有了启动子才能驱动基因的转录，最终获得相关表达产物，本研究中设计两个相同启动子分别连接bar和目的基因，其目的是依据bar表达推测目的基因同时表达。

（4）①消化产物经电泳；转膜后与目的基因的探针杂交；不含目的基因的DNA条带在图中没有显示，①正确；

②杂交带位置不同；说明HindIIII消化形成的DNA片段长度不同，②正确；

③相同位置上杂交带对应DNA片段长度相同；脱氧核苷酸序列不一定相同，③错误；

④目的基因插入到受体细胞核DNA的位置和数量都是随机的；所以不同植株的实验结果中杂交带数目不同，④正确。

故选①②④。

【点睛】

本题考查基因工程的相关知识，意在考查考生运用所学基础知识，结合所学知识解决相关的生物学问题的能力。【解析】Taq酶（耐高温的DNA聚合酶）Ca2+（或CaCl2）BamHISacIRNA聚合酶识别、结合依据bar表达推测目的基因同时表达①②④31、略

【分析】【分析】

单克隆抗体制备利用了动物细胞融合技术和动物细胞培养技术。在细胞融合之前要对小鼠进行特异性抗原的免疫；以获得能产生特异性抗体的B淋巴细胞。

融合后的细胞需要进行两次筛选；第一次筛选利用选择培养基，目的是获得杂交瘤细胞，第二次筛选是克隆化培养和抗体检测，目的是获得能产生特异性抗体的杂交瘤细胞。

【详解】

（1）由动物细胞融合技术和动物细胞培养技术制备的单克隆抗体可以针对特定的抗原；因此特异性强，灵敏度高。

（2）由于细胞融合具有随机性；只考虑两两融合的情况下，除了含有未融合的细胞和杂交瘤细胞外，还可能含有B巴细胞相互融合形成的细胞和骨髓瘤细胞相互融合形成的细胞。诱导动物细胞融合时，常用的诱导因素有聚乙二醇；灭活的病毒、电刺激等。

（3）细胞融合以后要对获得的细胞进行两次筛选，第一次筛选目的是获得杂交瘤细胞，第二次筛选的目的是获得能产生特异性抗体的杂交瘤细胞。【解析】(