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PAGEPAGE6第2讲微生物的培育和应用一、单项选择题(每小题给出的四个选项中只有一个符合题目要求)1.下列关于统计菌落数目方法的叙述,错误的是(C)A.采纳平板计数法获得的菌落数往往少于实际的菌落数B.当样品的稀释度足够高时,一个活菌会形成一个菌落C.为了保证结果精确,一般采纳密度较大的平板进行计数D.在某一浓度下涂布三个平板,若三个平板统计的菌落数差别不大,则应以它们的平均值作为统计结果[解析]当两个或多个活菌连在一起时,平板上视察到的只是一个菌落,因此统计的菌落数往往比活菌的实际数目少。一般选择菌落数在30~300的平板计数,密度过大会使计数结果偏小,影响结果的精确性。至少涂布3个平板,作为重复组,取其平均值计数能增加试验的劝服力和精确性。2.下列是从土壤中筛选纤维素分解菌的试验步骤,正确的是(C)①土壤取样②称取10g土壤加入盛有90mL无菌水的锥形瓶中③吸取0.1mL进行平板涂布④依次稀释至101、102、103、104、105、106、107稀释度A.①→②→③→④ B.①→③→②→④C.①→②→④→③ D.①→④→②→③[解析]在分别土壤中某细菌时,应先选取土样(10g),然后加无菌水获得土壤浸出液,并进行不同倍数稀释,最终将稀释液涂布到培育基表面进行培育,并分别和计数。3.(2024·甘肃武威十八中高三月考)关于培育基的配制说法不正确的是(B)A.在配制培育乳酸杆菌的培育基时,需加入维生素B.微生物的适应性强,配制培育基时可以不考虑pHC.虽然各种培育基的详细配方不同,但一般都含有碳源、氮源、水和无机盐D.配制培育基时要留意各种养分的浓度和比例[解析]培育基除须要满意碳源、氮源、水和无机盐几种养分物质外,还须要满意微生物生长对pH、特别养分物质以及氧气的要求,如培育乳酸杆菌时须要在培育基中添加维生素,A正确;B错误;虽然各种培育基的详细配方不同,但一般都含有碳源、氮源、水和无机盐,C正确;不同微生物的生长对各种养分物质的需求不同,配制培育基时要留意各种养分的浓度和比例,D正确。4.(2024·北京高三期末)下列有关微生物培育的叙述正确的是(D)A.通常运用液体培育基分别获得细菌单菌落B.若培育基须要调整pH,应当在灭菌后进行C.用显微镜干脆计数固体培育基中微生物数量D.倒置平板可防止培育基被滴落的冷凝水污染[解析]常用固体或半固体培育基分别获得细菌单菌落,液体培育基无法分别,A错误;若培育基须要调整pH,应当在灭菌前进行,B错误;显微镜干脆计数法是测定培育液中微生物数量的方法,固体培育基上用稀释涂布法干脆计数单个菌落数,C错误;平板倒置是避开冷凝的液体掉到培育基上,污染培育基,D正确。5.(2024·上海高三)下表是培育某种细菌的培育基。以下叙述错误的是(B)蛋白胨乳糖蔗糖K2HPO4伊红美蓝蒸馏水10g5g5g2g0.4g0.065g1000mLA.该培育基属于选择培育基B.表中为该细菌供应碳源的只有乳糖C.表中为该细菌供应氮源的只有蛋白胨D.该培育基可以用来鉴定该细菌是否是大肠杆菌[解析]由表中成分可知,该培育基属于选择培育基,A正确;表中供应碳源的有蛋白胨、乳糖、蔗糖,B错误;表中为该细菌供应氮源的只有蛋白胨,C正确;要鉴别所分别出的细菌是否为大肠杆菌,则应当在培育基中加入伊红美蓝,视察是否出现黑色菌落,D正确。6.(2024·四川成都七中高三)关于平板划线法和涂布平板法的叙述不正确的是(B)A.只能应用于固体培育基接种B.都可以用于微生物的计数C.接种培育后均可获得单菌落D.接种用具都需进行严格灭菌[解析]平板划线法和涂布平板法均是在固体培育基表面操作,A正确。平板划线法和涂布平板法均可以分别菌落,但平板划线法不须要考虑浓度,不能用于微生物的计数,B错误,C正确。二者均需对接种用具消毒,D正确。7.下列关于微生物的培育和分别的叙述中,不正确的是(B)A.细菌能在培育基中以二分裂方式快速增殖B.噬菌体和大肠杆菌都可干脆在蛋白胨培育基中增殖C.灭菌的目的是歼灭与培育菌竞争的杂菌D.分别得到的菌种采纳临时保藏的不足在于保存时间短,简单被污染或产生变异[解析]细菌的增殖方式通常是二分裂增殖,能在液体培育基中以二分裂方式快速扩增,A正确;噬菌体是病毒,必需在活细胞中才能增殖,不能在一般培育基中增殖,B错误;灭菌是歼灭与培育菌相竞争的杂菌,防止污染培育物,C正确;分别得到的菌种可以采纳临时保藏的方法,首先,将菌种接种到试管的固体斜面培育基上,在合适的温度下培育。当菌落长成后,将试管放入4℃二、不定项选择题(每小题给出的选项中有一个或多个符合题目要求)8.(2024·北京高三期末)空气中的微生物在重力等作用下会有肯定程度沉降。某生物爱好小组欲利用平板培育基测定教室内不同高度空气中微生物的分布状况。下列关于试验的叙述正确的是(ABC)A.在配制培育基时必需添加琼脂等凝固剂成分B.将平板培育基放置在教室相同地点的不同高度C.本试验须要设置不开盖的平板培育基作为比照D.菌落数在20~200之间的平板才可以用于计数[解析]平板为固体培育基,故须要加入琼脂等凝固剂成分,A正确;依据试验目的可知,自变量是教室相同地点的不同高度,所以需将平板培育基放置在教室相同地点的不同高度,B正确;本试验须要设置不开盖的平板培育基作为比照,不同高度下放置开盖平板培育基进行试验,C正确;为了保证结果精确,一般选择菌落数在30~300的平板进行计数,D错误。9.漆酶属于木质素降解酶类,在环境修复、农业生产等领域有着广泛用途。如图是分别、纯化和保存漆酶菌株的过程,相关叙述正确的是(BC)A.生活污水中含有大量微生物,是分别产漆酶菌株的首选样品B.筛选培育基中须要加入漆酶的底物,通过菌落特征挑出产漆酶的菌落C.在涂布平板上长出的菌落,再通过划线进一步纯化D.斜面培育基中含有大量养分物,可在常温下长期保存菌株[解析]生活污水中含木质素的物质相对较少,产漆酶菌株也较少,不宜作为分别产漆酶菌株的样品;产漆酶菌株可降解木质素,在筛选培育基中加入木质素可筛选产漆酶的菌株,筛选时可通过菌落特征挑出产漆酶的菌落;在涂布平板上生长的菌落可能还有其他杂菌,可再通过平板划线法进一步纯化;对于须要长期保存的菌种,可以采纳甘油管藏的方法,即在-20℃10.(2024·山东省一般中学学业水同等级考试)生长图形法是一种测定微生物养分需求的简便方法。为探究某嗜热菌所需生长因子的种类,探讨小组把该菌的悬浮液与不含任何生长因子但含有其他必需养分物质的培育基混合后倒成平板,然后在平板上划分数区,将甲、乙、丙三种生长因子分别添加到不同区域,培育结果如图所示,下列说法正确的是(AD)A.倒成平板后干脆培育可推断有无污染B.倒成平板后须要进行灭菌处理C.图示结果表明该菌须要生长因子乙或丙D.生长图形法还可用于某些菌种的筛选[解析]平板上不含任何生长因子,若倒成平板后干脆培育,出现菌落说明已被杂菌感染,因为该嗜热菌不能在缺乏生长因子的培育基中生长,A正确;制备平板时,先灭菌再倒平板,B错误;图中菌落生活在乙丙区域之间,说明同时须要乙和丙,C错误;不同菌种所需生长因子不同,可利用生长图形法筛选菌种,D正确。三、非选择题11.(2024·湖南茶陵三中高三月考)下图为5个不同浓度的土霉素溶液对大肠杆菌生长影响的试验结果。请回答下列相关问题:(1)培育基中通常加入琼脂作为凝固剂。为检测培育基是否被污染,应采纳的检测方法是将未接种的培育基在相宜的温度下放置相宜的时间,视察培育基上是否有菌落产生。(2)该试验是用稀释涂布平板法接种大肠杆菌,在接种前要对培育基进行高压蒸汽灭菌。依据图中结果,对大肠杆菌抑制作用最明显的土霉素浓度是⑤(填图中数字),依据是透亮圈越大,抑制效果越明显。(3)为探讨相同浓度的a、b、c三种不同抗生素对大肠杆菌生长的影响,依据上述探讨方法,请仿照图绘制处理方法。[解析](1)培育基中通常加入琼脂作为凝固剂。检测培育基是否被污染的方法是:将未接种的培育基在相宜的温度下放置相宜的时间,视察培育基上是否有菌落产生。(2)该试验是用稀释涂布平板法接种大肠杆菌;培育基须要用高压蒸汽灭菌法灭菌。透亮圈越大,抑制效果越明显,图中⑤号圆纸片的抑菌圈最大,因此该浓度的土霉素对大肠杆菌抑制作用最明显。(3)该方案的自变量为相同浓度的a、b、c三种不同抗生素,留意在图中要标记清晰,依据比照原则,结合图中探讨方法可绘制下图。12.(2024·福建高考模拟)乳酸杆菌是人体有益的微生物之一,常用于生产酸奶,其发酵产物为乳酸,能溶解四周环境中的难溶性碳酸钙。回答下列问题:(1)为检测某品牌酸奶中的乳酸杆菌含量是否达标,检验人员进行了相关试验。①配置培育基:培育基中除含水、无机盐、碳源、氮源和琼脂外,还需添加维生素和CaCO3。②稀释样品:取1mL待测酸奶,用无菌水进行梯度稀释。③接种培育:用稀释涂布平板法接种,培育时限制的气体条件是无氧。④视察计数:菌落四周出现的透亮圈(或溶钙圈)就是乳酸杆菌的菌落,选择菌落数在30~300的平板计数。每隔24小时统计一次菌落数目,选取菌落数目稳定时的记录作为结果,目的是可以防止因培育时间不足而导致遗漏菌落的数目。(2)生产上不能用含有抗生素的牛奶发酵成酸奶,缘由是抗生素会抑制乳酸菌(或细菌)的繁殖。[解析](1)①配置培育基:培育基中除含水、无机盐、碳源、氮源和琼脂外,还需添加维生素和CaCO3。②稀释样品:取1mL待测酸奶,用无菌水进行梯度稀释。③接种培育:用稀释涂布平板法接种,乳酸菌是厌氧菌,培育时限制的气体条件是无氧。④视察计数:菌落四周出现溶钙圈的就是乳酸杆菌的菌落,选择菌落数在30~300的平板计数。每隔24小时统计一次菌落数目,选取菌落数目稳定时的记录作为结果,目的是可以防止因培育时间不足而导致遗漏菌落的数目。(2)生产上不能用含有抗生素的牛奶发酵成酸奶,因为抗生素会抑制乳酸菌的繁殖。13.(2024·山东高考模拟)自然界中某些酵母菌能分解木糖产生酒精,科学家欲从果园的葡萄上或土壤中分别筛选出这种酵母菌。请回答:(1)获得纯净培育物的关键是防止外来杂菌入侵。试验室筛选微生物的原理是供应有利于目的菌株生长的条件,同时抑制或阻挡其他微生物生长。制备的酵母菌培育基在进行倒平板操作时,为防止培育皿盖的冷凝水落入培育基造成污染,应将平板倒置。(2)用无菌水将葡萄皮上的微生物冲洗到无菌的三角瓶中,取其液体用涂布器涂布接种于以木糖为唯一碳源的固体培育基上培育获得酵母菌菌落,用平板划线法纯化菌株时,划线的某个平板培育后,第一划线区域的第一条线上都不间断地长满了菌落,其次划线区域的第一条线上无菌落,其他线上有菌落,造成这种现象的缘由可能是接种环灼烧后未冷却或划线未从第一区域末端起先。(3)若要统计土样中的酵母菌数量,应采纳稀释涂布平板法。在接种前,随机取若干灭菌后的空白平板培育基培育一段时间,这样做的目的是检测培育基平板灭菌是否合格。[解析](1)获得微生物纯净培育物的关键是防止外来杂菌入侵。试验室筛选微生物的原理是供应有利于目的菌株生长的条件,同时抑制或阻挡其他微生物生长。制备的酵母菌培育基在进行倒平板操作时,为防止培育皿盖的冷凝水落入培育基造成污染,应将平板倒置。(2)要获得能利用木糖的酵母菌,应当用以木糖为唯一碳源的固体培育基培育。在其次次及以后划线时,总是从上一次的末端起先划线,这样做的目的是将聚集的菌种逐步削减以获得单个菌落。划线的某个平板培育后,第一划线区域的划线上都不间断地长满了菌落,其次划线区域的第一条线上无菌落,其他划线上有菌落,造成划线无菌落可能的操作失误是接种环灼烧后未冷却或划线未从第一区域末端起先。(3)接种微生物常用平板划线法和稀释涂布平板法,其中只有稀释涂布平板法可以对微生物进行计数。在接种前,随机取若干灭菌后的空白平板培育基先行培育一段时间,这样做的目的是检测培育基平板灭菌是否合格。14.(2024·山东高考模拟)生物降解法是常用的降解农药的方法,某探讨小组为分别出能降解敌敌畏(一种有毒的有机农药)的细菌进行了以下相关操作。回答下列问题:(1)分别原理:土壤中的细菌能合成(分解敌敌畏的)酶,这种物质在把敌敌畏分解成无机物过程中发挥重要作用。(2)试验流程:①从富含敌敌畏的环境中釆集土样配制成土壤菌液。从稀释10倍的菌液中取1mL菌液,加入9_mL无菌水中,获得稀释100倍的悬液,如此操作直到稀释1000倍。②配制以敌敌畏为唯一碳源的培育基并灭菌,灭菌后倒平板。冷却后需将平板倒置,目的是防止皿盖上凝聚的水珠落入培育基造成污染。③用稀释涂布平板法接种细菌,该方法能胜利统计菌落数目的关键是选择恰当的稀释度,统计的菌落数通常比实际数目低的缘由是
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