江苏专用2024-2025学年高中生物专题2细胞工程2.1动物细胞培养和核移植技术学案新人教版选修3

PAGEPAGE18动物细胞培育和核移植技术1．阐明动物细胞培育是从动物体获得相关组织，分散成单个细胞后，在相宜的培育条件下让细胞生长和增殖的过程。动物细胞培育是动物细胞工程的基础。(重、难点)2.阐明细胞核移植一般是将体细胞核移入一个去核的卵母细胞中，并使重组细胞发育成新胚胎，继而发育成动物个体的过程。3.举例说诞生殖性克隆人面临的伦理问题。4.分析说明我国为什么不赞成、不允许、不支持、不接受任何生殖性克隆人试验。学问点一动物细胞培育1．概念：从动物机体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后，放在相宜的培育基中，让这些细胞生长和增殖。2．原理：细胞增殖。3．过程动物组织块：取动物胚胎或幼龄动物的器官或组织剪碎，用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理单细胞细胞悬液原代培育：动物组织消化后的初次培育贴附性细胞用胰蛋白酶处理，分瓶，传代培育10代细胞传代培育50代左右细胞4．条件(1)无菌、无毒的环境①培育液和全部培育用具应进行无菌处理。②通常还要在细胞培育液中添加肯定量的抗生素，以防污染。③定期更换培育液，防止细胞代谢产物的危害。(2)养分①合成培育基成分：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等。②合成培育基特点：加入血清、血浆等自然成分。(3)温度和pH：温度为36.5±0.5℃；pH为7.2～7.4。(4)气体环境：95%空气＋5%CO2的混合气体。O2是细胞代谢所必需的，CO2的主要作用是维持培育液的pH。eq\a\vs4\al(5).应用(1)生产生物制品：如病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体等。(2)应用于基因工程：动物细胞是基因工程技术中常用的受体细胞，离不开动物细胞培育。(3)检测有毒物质，推断某种物质的毒性。(4)用于生理、病理、药理等方面的探讨，如筛选抗癌药物等。1．动物细胞培育过程解读(1)细胞贴壁和接触抑制①细胞贴壁用培育液将分散的动物细胞稀释制成细胞悬液，再将细胞悬液放入培育瓶内，置于相宜的环境中培育，悬液中分散的细胞很快会贴附在瓶壁上，称为细胞贴壁。②接触抑制当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞就会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的接触抑制。打破接触抑制现象的方法是将贴满瓶壁的细胞重新用胰蛋白酶等处理，然后分瓶接着培育，让细胞接着增殖。(2)原代培育和传代培育原代培育和传代培育一般均需对细胞用胰蛋白酶进行分散处理，区分两种“培育”的关键是看用胰蛋白酶处理的对象。①第一次：用胰蛋白酶对剪碎的动物组织进行处理，分散后培育，即为原代培育。②其次次：细胞培育过程中出现接触抑制，用胰蛋白酶等处理使其从瓶壁上脱离下来，分散到多个培育瓶中接着培育，即为传代培育。(3)细胞株和细胞系①细胞株：传代培育的细胞能达到10～50代，这样的传代细胞称为细胞株。②细胞系：传代培育的细胞在传到50代后，有部分细胞的遗传物质发生了变更，获得不死性，这种具有癌变特点的细胞称为细胞系。2．植物组织培育与动物细胞培育的比较项目植物组织培育动物细胞培育区分原理植物细胞的全能性细胞增殖培育基固体或半固体培育基，包括矿质元素、蔗糖、维生素、琼脂、植物激素等液体培育基，包括无机盐、葡萄糖、维生素、氨基酸、动物血清等细胞来源离体植物器官、组织或细胞胚胎或幼龄动物组织、器官过程脱分化、再分化原代培育、传代培育结果获得新个体或细胞产品大量产生细胞或细胞产物用途①快速繁殖珍贵花卉和果树；②培育无病毒植株、转基因植物；③大规模生产细胞产品，如药物、食品添加剂、香料、色素等①生产蛋白质制品，如病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体等；②检测有毒物质；③用于生理、药理、病理等方面的探讨相同点①都须要人工条件下的无菌、无毒操作，无菌培育；②都进行有丝分裂[提示](1)培育动物细胞时没有脱分化的过程，因高度分化的动物细胞发育潜能变窄，失去了发育成完整个体的实力。(2)不是全部的细胞增殖过程中都存在接触抑制。例如，癌细胞增殖时不存在接触抑制，所以在培育瓶中可以形成多层细胞。1．下图为动物细胞培育过程中细胞增殖状况的变更曲线，图中B、E两点表示经筛选、分装后接着培育。下列推断错误的是()A．B点之前的培育称为原代培育，之后的培育称为传代培育B．接触抑制现象主要发生在AB段和DE段C．分瓶后的每个培育瓶中的细胞群称为一个克隆D．E点后的少数细胞获得不死性，向等同于癌细胞的方向发展解析：选C。人们通常将动物组织消化后的初次培育称为原代培育，分瓶后的培育称为传代培育，B点之后细胞接着生长，可见B点之后进行了传代培育，A正确；当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞就会停止分裂增殖，即会发生接触抑制现象，在AB段和DE段细胞几乎生长停滞，可能发生了接触抑制，B正确；细胞克隆的最基本要求是必需保证分别出来的是一个细胞而不是多个细胞，C错误；E点后细胞已获无限繁殖实力且持续生存，具有了癌细胞的性质，D正确。2．(2024·湖南宁乡高二期末)用动植物成体的体细胞进行离体培育，下列叙述正确的是()A．都须要用含95%空气加5%CO2的混合气体的培育箱B．都须要用液体培育基C．都要在无菌条件下进行D．都可体现细胞的全能性解析：选C。不管是动物细胞培育还是植物组织培育，最基本的一个条件就是无菌环境。此外，动物细胞培育的培育基是液体培育基，其中的碳源是葡萄糖，培育液中还须要加入肯定的动物血清或血浆，其气体环境是95%空气加5%CO2，以维持培育液的pH；而植物组织培育的培育基为固体培育基，其碳源为蔗糖，组织培育的脱分化阶段必需在黑暗条件下进行，而再分化过程须要肯定的光照条件；动物细胞培育就是细胞的增殖，不能体现细胞的全能性，而植物组织培育完成了由一个细胞到一个完整植株的全过程，体现了植物细胞的全能性。3．(2024·南通高二检测)下表为有关动物细胞培育与植物组织培育的比较，错误的是()选项比较项目动物细胞培育植物组织培育A原理动物细胞核的全能性植物细胞的全能性B培育基液体培育基固体培育基C主要过程原代培育，传代培育脱分化，再分化，形成植株D主要应用获得大量细胞或细胞产物植物快速繁殖、获得脱毒苗等解析：选A。动物细胞培育的原理是细胞增殖，植物组织培育的原理是植物细胞的全能性，A错误；动物细胞培育运用液体培育基，制成细胞悬液，植物组织培育一般运用固体培育基，B正确；动物细胞培育的主要过程是原代培育和传代培育，植物组织培育的主要过程是脱分化、再分化，形成植株，C正确；动物细胞培育的目的是获得大量细胞或细胞产物、植物组织培育主要用于植物快速繁殖、获得脱毒苗、制备人工种子等，D正确。学问点二动物体细胞核移植技术和克隆动物1．动物核移植概念(1)供体：动物一个细胞的细胞核。(2)受体：去掉细胞核的卵母细胞。(3)结果：形成重组胚胎，发育成动物个体。2．两种类型eq\b\lc\{(\a\vs4\al\co1(胚胎细胞核移植,体细胞核移植))3．体细胞核移植的过程4．体细胞核移植的应用前景(1)畜牧生产方面：加速家畜遗传改良进程，促进优良畜群繁育。(2)爱护濒危物种方面：增加动物的存活数量。(3)医药卫生领域：转基因克隆动物作为生物反应器，生产医用蛋白。(4)治疗人类疾病：转基因克隆动物细胞、组织和器官作为异种移植的供体等。5．体细胞核移植技术存在的问题(1)胜利率特别低。(2)绝大多数克隆动物存在健康问题。(3)对克隆动物食品的平安性问题存在争议。1．核移植时供体和受体的选择(1)供体：一般选用传代10代以内的细胞，因为10代以内的细胞一般能保持正常的二倍体核型，保证了供体细胞正常的遗传基础。(2)受体：减Ⅱ中期的卵母细胞。一方面细胞大，易于操作；卵黄多，养分丰富，为发育供应足够的养分。另一方面细胞质中含有能刺激融合后重组细胞进行分裂分化并形成重组胚胎的物质。2．克隆动物的特点(1)克隆动物的性状与核供体生物的性状基本相同，但不是完全相同，缘由是：①克隆动物的细胞质遗传物质来自受体卵母细胞；②生物的性状不仅与遗传物质有关，还受环境影响。(2)核基因是供体核基因的100%的复制。(3)克隆动物是一种无性繁殖方式。3．克隆的层次(1)分子水平：如DNA复制；(2)细胞水平：动物细胞培育；(3)个体水平：克隆羊“多利”的诞生。4．克隆人及克隆技术引发的伦理道德问题(1)克隆人的培育过程(2)不赞成克隆人探讨的理由①克隆人严峻违反了人类伦理道德，是克隆技术的滥用。②克隆人冲击了现有的婚姻、家庭和两性关系等传统的伦理道德观念。③克隆人是在人为地制造在心理上和社会地位上都不健全的人。④克隆技术尚不成熟。(3)赞成克隆人探讨的理由①克隆人是一项科学探讨，有它自己内在的发展规律，社会应当允许科学家探讨克隆人。②技术性问题可以通过胚胎分级、基因诊断和染色体检查等方法得到解决，不成熟的技术只有通过实践，才能使之成熟。③中国政府的看法：禁止生殖性克隆人，坚持四不原则：不赞成、不允许、不支持、不接受任何生殖性克隆人的试验。但不反对治疗性克隆。[提示]治疗性克隆和生殖性克隆的比较比较治疗性克隆生殖性克隆不同点概念利用克隆技术产生特定细胞或组织(上皮组织、神经组织或肌肉组织等)等用于治疗性移植的克隆性技术利用克隆技术获得胚胎，并将胚胎孕育成为人类个体的克隆性技术目的治疗人类疾病繁殖新个体操作水平细胞或组织水平个体水平相同点都属于无性生殖，产生新细胞、新组织，遗传信息相同1．(2024·山东莱芜高二期中)下列对动物核移植技术的描述，不正确的是()A．动物体细胞核移植的难度明显高于胚胎细胞的B．体细胞核移植的过程中可通过显微操作去核法去除卵母细胞中的核C．细胞核移植的供体细胞一般选用传代10代以内的细胞D．通过体细胞核移植方法生产的克隆动物是对供体100%的复制解析：选D。早期胚胎细胞作细胞核的供体细胞时妊娠胜利率最高，体细胞核移植的难度高于胚胎细胞核移植的；在核移植前一般要先用显微操作法去除卵母细胞的细胞核，获得卵母细胞的细胞质；核移植时作供核一方的一般是传代10代以内的细胞，缘由是此种细胞能保持正常的二倍体核型，遗传物质不发生变更；通过细胞核移植方法获得的重组细胞，细胞核遗传物质来自供体核，细胞质遗传物质来自受体的细胞质，所以用核移植的方法得到的动物不是对供体动物100%的复制。2.右图为哺乳动物(羊)的生殖过程，下列叙述不正确的是()A．个体2为克隆动物，c为高度分化的体细胞B．个体2的遗传性状与供应c细胞的羊不完全相同C．产生动物个体1与动物个体2的生殖方式是不同的D．e细胞为完成减数分裂的卵细胞解析：选D。在核移植过程中，去核受体细胞一般选用处于减数其次次分裂中期的次级卵母细胞，而不是完成减数分裂的卵细胞。3．(2024·安庆高二检测)下列有关克隆人的说法，错误的是()A．克隆人是一种无性生殖方式B．克隆人证明白人体细胞的细胞核具有全能性C．在现有克隆技术条件下，胜利率为100%D．克隆人和供体并不完全一样解析：选C。克隆是一种无性繁殖技术，将人体细胞的细胞核移植到去核的卵细胞中，然后将其在体外卵裂形成的胚胎移植到母体子宫中，便能发育成克隆人。因此克隆人证明白人体细胞的细胞核具有全能性，但克隆人和供体并不完全一样，要受细胞质中少数遗传物质的限制，同时还要受环境的影响。现有克隆技术尚不成熟，重构胚胎胜利率低。核心学问小结[要点回眸][答题必备]动物细胞培育的原理是细胞增殖。细胞在培育过程中会出现细胞贴壁(生长)和细胞接触抑制现象。动物细胞的培育分为原代培育和传代培育。动物细胞培育的条件包括：无菌、无毒的环境，相宜的养分、温度和pH及气体环境。动物细胞核移植的原理是动物细胞核的全能性。哺乳动物核移植可以分为胚胎细胞核移植和体细胞核移植。在动物细胞培育中CO2的作用是维持培育液的pH。[拓宽教材]1．(选修3P46“探讨”改编)在动物细胞培育过程中，下列处理中不恰当的是()A．培育液和培育用具要进行无菌处理B．供应种类齐全的养分物质C．供应纯氧以保证细胞的呼吸作用D．保证供应相宜的温度和pH解析：选C。动物细胞培育过程中要保证无菌、无毒，须要对培育液和培育用具进行无菌处理，A项正确；培育液中养分成分足够，以满意细胞增殖的须要，B项正确；动物细胞培育过程须要的气体环境应为95%的空气和5%的CO2的混合气体，空气中的O2保证其代谢所用，CO2维持培育液的pH，C项错误；细胞体外培育须要相宜温度和pH，其中温度一般与动物体温接近，D项正确。2．(选修3P49“探讨”改编)结合克隆羊“多利”的产生过程，回答以下问题：(1)以上过程的原理是___________________________________________________。(2)由于限制毛色的基因位于细胞核中，因此“多利”的面部毛色应与________相同，即为________色。(3)若甲、乙两只绵羊分别为雄性、雌性个体，则克隆羊“多利”的性别为________。答案：(1)动物细胞核具有全能性(2)核供体白(3)雄性[精练好题]3．(2024·淮安高二检测)试验小鼠皮肤细胞培育的基本过程如图所示。下列叙述错误的是(多选)()eq\a\vs4\al(试验,小鼠)eq\o(→,\s\up7(甲))eq\a\vs4\al(皮肤,组织)eq\o(→,\s\up7(乙))eq\a\vs4\al(皮肤,细胞)eq\o(→,\s\up7(丙))eq\a\vs4\al(培育,细胞1)eq\o(→,\s\up7(丁))eq\a\vs4\al(培育,细胞2)A．甲过程须要对试验小鼠进行消毒B．乙过程对皮肤组织可用胃蛋白酶处理C．丙过程得到的细胞大多具有异样二倍体核型D．丁过程得到的部分细胞可能失去贴壁黏附性解析：选BC。甲过程表示获得试验小鼠的组织细胞，须要对试验小鼠进行消毒处理，选项A正确；乙表示用胰蛋白酶处理皮肤组织，使其分散成单个皮肤细胞，选项B错误；丙过程表示原代培育，形成的细胞株遗传物质没有发生变更，具有正常的二倍体核型，选项C错误；丁是传代培育过程，该过程部分细胞遗传物质可能发生了变更而失去贴壁黏附性，选项D正确。4．(2024·淮安高二检测)下图所示是某动物细胞培育时，培育液中活细胞和死亡细胞密度统计结果，下列相关叙述错误的是()A．试验中要限制胰蛋白酶溶液浓度和处理时间，以免损伤细胞B．培育液中应适当加入青霉素、链霉素，以避开杂菌污染C．曲线bc段变更的主要缘由是培育液中养分物质不足及有害代谢产物积累等D．培育至第6天时，新产生的细胞数等于死亡细胞数解析：选D。试验中要限制胰蛋白酶溶液的浓度和处理时间，以免损伤细胞，A正确；培育液中应适当加入青霉素、链霉素等肯定量的抗生素，以避开杂菌污染，B正确；曲线bc段表示活细胞密度削减，而此时间段内死细胞密度增加，产生这种变更的主要缘由是培育液中养分物质不足及有害代谢产物积累等，C正确；培育至第6天时，活细胞数等于死细胞数，D错误。5．下列关于治疗性克隆和生殖性克隆的说法，错误的是()A．运用病人自己的细胞产生胰岛细胞以治疗糖尿病属于治疗性克隆B．将一个克隆的胚胎植入一个女性子宫发育出婴儿的过程属于生殖性克隆C．治疗性克隆属于无性生殖，生殖性克隆属于有性生殖D．治疗性克隆和生殖性克隆技术均须要应用到动物细胞培育和核移植解析：选C。治疗性克隆和生殖性克隆的技术都用到动物细胞培育和核移植技术，而且都属于无性生殖，前者可以得到组织或细胞，后者可以得到新个体。6．(2024·甘肃靖远联考)三维细胞培育技术是指将动物细胞与具有三维结构的支架材料共同培育，使细胞能够在三维立体空间生长、增殖和迁移的技术。其培育模式图如下，请回答下列问题：(1)三维培育胚胎干细胞时，首先应保证细胞处于____________的环境，在培育液中加入牛磺酸、丁酰环腺苷酸等物质可以诱导胚胎干细胞的基因____________，从而产生不同类型的组织细胞。培育过程中，培育液中须要通入肯定浓度的CO2，目的是________________________________________________________________________。(2)常用____________将乳腺癌组织消化成单个细胞，其在培育瓶中进行悬液培育时会出现____________现象。经过多次传代后，少数供体细胞中____________的稳定性会降低而变成不死性细胞。(3)乳腺癌细胞在三维培育基中能够形成腺泡结构，呈现类似于动物体内组织细胞的生长状况，有利于构建体内乳腺癌组织模型。与一般细胞悬液培育相比，利用三维细胞技术培育干细胞和癌细胞，其明显优点是_______________________________________________________________________________________________________________________。答案：(1)无菌、无毒选择性表达维持培育液的pH(2)胰蛋白酶或胶原蛋白酶贴壁生长和接触抑制遗传物质(补充：DNA或基因)(3)能够更好地模拟体内环境，培育得到更加类似于体内生长的细胞和组织7．随着科学技术的发展，人们可以依据需求来改造生物的性状。下图是利用奶牛乳汁生产人类血清白蛋白的图解，据图回答下列问题：(1)在此过程中涉及到的细胞水平现代生物技术手段主要有_____________________。(2)在基因工程中，我们称②为________，在②进入③之前要用____________________等工具来构建基因表达载体，能实现②进入③的常用方法是_____________________________。(3)图中①一般经________处理可以得到③，从③到④的过程中一般利用去核后未受精的卵母细胞作为受体，而不用一般的体细胞，缘由是________________________________________________________________________________________________________。(4)⑦是⑥的后代，那么⑦的遗传性状和____________最相像，缘由是_____________________________________________________________________________。假如②的数量太少，常用________来扩增。要实现⑦批量生产人类血清白蛋白，则要求③的性染色体是______。利用该方法得到的动物叫做________________________________________________________________________。答案：(1)核移植、动物细胞培育(2)目的基因限制酶、DNA连接酶和载体显微注射法(3)胰蛋白酶卵母细胞大、易操作、养分物质多，体细胞的细胞核在卵母细胞的细胞质中才能表现出全能性(4)荷斯坦奶牛个体⑦的核遗传物质大部分来自荷斯坦奶牛，⑥只是为胚胎发育供应养分和场所，⑦并没有获得⑥的遗传信息PCR技术XX转基因克隆动物一、单项选择题1．(2024·安徽阜阳高二期末)下列有关动物细胞培育的叙述中，正确的是()A．动物细胞培育前要用胃蛋白酶使细胞分散B．动物细胞培育的主要目的是获得大量的细胞分泌蛋白C．细胞遗传物质的变更发生于原代培育过程中D．动物细胞培育须要无菌、无毒的环境解析：选D。通常将健康幼龄动物组织用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞，将处理后的细胞初次培育，称为原代培育。贴满瓶壁的细胞须要重新用胰蛋白酶等处理，然后分瓶接着培育，让细胞接着增殖，这种培育过程即为传代培育。胃蛋白酶的最适pH约为2，不适合用作细胞培育时分散细胞的酶。动物细胞培育利用了细胞有丝分裂的原理，获得大量的具有相同遗传特性的细胞，细胞传代培育至50代以后，遗传物质可能发生变更。动物细胞培育须要无菌、无毒的环境，养分物质足够，气体环境、温度、pH相宜等条件。2．(2024·南京高二检测)在将动物组织块分散成单个细胞时，可以运用胰蛋白酶。由此不能推想出来的是()A．动物细胞之间可能依靠蛋白质相互联系B．处理时肯定要留意处理时间、加酶量C．胰蛋白酶肯定不会对动物细胞造成损伤D．动物细胞培育液的pH应当与胰蛋白酶作用的相宜pH基本一样解析：选C。在动物细胞培育时，胰蛋白酶可以使细胞间的蛋白质水解，使细胞分散，运用时应把握好浓度、温度和时间，以免消化过度而造成细胞损伤。3．(2024·启东高二检测)从母羊甲的体细胞中取出细胞核，移植入母羊乙的去核卵母细胞中，融合后的细胞经卵裂形成早期胚胎，再植入另一只母羊丙的子宫内，下列有关说法正确的是()A．生出小羊的性状与甲羊完全相同B．一般来说生出小羊的核基因型与甲羊完全相同C．生出小羊的遗传物质由甲、乙双亲共同确定，所以该过程为有性生殖D．生出小羊的性状由甲、乙、丙3个亲本的基因型与环境共同确定解析：选B。核移植获得克隆动物的生殖方式是无性生殖，遗传物质中甲羊的和乙羊的都有，因此认为生出的小羊性状与甲羊完全相同是不正确的，应是主要性状与甲羊相同，核基因型一般与甲羊完全相同，因此B项正确。4．(2024·河北涿鹿中学高二期中)下图是某克隆羊培育过程模式图，试分析获得该克隆羊的生殖方式、该克隆羊的基因型以及该克隆羊发育成熟时所分泌的性激素依次是()A．无性生殖、Aa、雌性激素B．无性生殖、aa、雄性激素C．有性生殖、aa、雄性激素D．有性生殖、AA、雌性激素解析：选B。克隆羊利用了细胞核移植技术，其生殖方式为无性生殖；该克隆羊继承了B羊的全部的细胞核基因和A羊的细胞质基因，因此其基因型为aa；由于B羊为雄性，因此该克隆羊亦为雄性，故该克隆羊发育成熟时所分泌的性激素是雄性激素。5．(2024·福建季延中学高二期末)随着生物技术的快速发展，已灭亡生物的“复活”将不再是神话。假如世界上最终一只野驴刚刚死亡，下列“复活”野驴的方法中，最可行的是()A．将野驴的体细胞取出，利用组织培育技术，经脱分化、再分化，培育成新个体B．取出野驴的体细胞两两融合，再经组织培育培育成新个体C．取出野驴的体细胞核移植到家驴的去核卵母细胞中，经孕育培育成新个体D．将野驴的基因导入家驴的受精卵中，培育成新个体解析：选C。动物细胞的全能性受到限制，因此动物细胞培育不能形成新个体，A错误；动物细胞融合技术还不能形成新的动物个体，况且细胞融合后会导致遗传物质加倍，B错误；将野驴的体细胞核移植到雌性家驴的去核卵母细胞中，可以克隆形成野驴，C正确；将野驴的基因导入家驴的受精卵中，属于基因工程，可培育出新性状的家驴，D错误。6．下图所示为人类治疗性克隆的也许过程，以下说法正确的是()A．治疗性克隆的过程中涉及转基因、核移植、细胞培育等现代生物技术B．治疗性克隆的结果说明动物细胞具有全能性C．治疗性克隆的过程中有细胞的分裂和分化D．治疗性克隆的器官在移植方面的主要优点是其遗传物质与患者完全相同，没有免疫排斥反应解析：选C。治疗性克隆主要涉及核移植、细胞培育等技术，不涉及转基因技术；没有新个体的产生不能说明动物细胞具有全能性；形成器官的克隆过程会出现细胞的分裂和分化；治疗性克隆的器官中遗传物质和患者不完全相同，去核卵母细胞中也有部分遗传物质。二、多项选择题7．(2024·苏北八县一中高二期末)某探讨小组对某种动物的肝肿瘤细胞(甲)和正常肝细胞(乙)进行动物细胞培育。下列有关说法正确的是()A．在利用两种肝组织块制备肝细胞悬液时，也可用胃蛋白酶处理B．细胞培育应在含5%CO2和95%O2的混合气体的恒温培育箱中进行C．为了防止细胞培育过程中细菌的污染，可向培育液中加入适量的抗生素D．在相同相宜条件下培育等量的甲、乙细胞，一段时间后，甲细胞数量比乙多解析：选CD。动物细胞培育的相宜pH为7.2～7.4，而在这样的环境中胃蛋白酶会变性失活，因此在利用两种肝组织块制备肝细胞悬液时，不行用胃蛋白酶处理，应用胰蛋白酶处理，A错误；细胞培育应在含5%CO2和95%空气的混合气体的恒温培育箱中进行，B错误；为了防止培育过程中杂菌的污染，可向培育液中加入适量的抗生素，C正确；甲(肝肿瘤细胞)失去接触抑制，而乙(正常肝细胞)具有接触抑制，因此一段时间后，甲细胞数量比乙多，D正确。8．(2024·盐城高二检测)人脐带间充质干细胞在特定诱导条件下，可分化为脂肪、肝、神经等多种组织细胞。下图表示培育人脐带间充质干细胞的大致过程。下列有关叙述错误的是()A．人脐带间充质干细胞属于专能干细胞B．通过离心除去上清液可以除去胰蛋白酶C．过程③通常用胰蛋白酶处理D．出现接触抑制前，培育瓶中的细胞数量有可能呈“J”型增长解析：选AC。依据题意可知，人脐带间充质干细胞可以分化为脂肪、肝、神经等多种组织细胞，故属于多能干细胞，A错误；离心后细胞沉淀在底层，胰蛋白酶在上清液中，B正确；过程①将剪碎的人脐带组织块用胰蛋白酶分散成单个细胞，过程③不须要胰蛋白酶处理，C错误；出现接触抑制之前，细胞数量的增长可能接近“J”型，D正确。三、非选择题9．下图表示动物细胞培育流程图，请据图回答下列问题：①取动物组织块↓②______________↓③处理组织分散成单个细胞↓④制成____________↓⑤转入培育液中进行培育↓⑥处理贴壁细胞分散成单个细胞，制成________↓⑦转入培育液中进行培育(1)过程②表示________________________。(2)过程③和⑥用________________________处理组织或处理贴壁细胞分散成单个细胞，这样做的目的是___________________________________________________________________________________________________________________________________。(3)④和⑥的过程都要把分散的细胞制成____________________________________。(4)过程⑤进行的细胞培育是________，细胞适于______生长增殖。(5)过程⑦进行的细胞培育是________，一般传至______代后就不易传下去了，传至________接着培育时，增殖会渐渐缓慢，以至于完全停止，部分细胞的______会发生变更。接着培育时，少部分细胞发生了______，朝着等同于________的方向发展。解析：进行动物细胞培育时，首先将组织块剪碎，用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理，使其分散成很多单个细胞，然后，用培育液将分散的细胞稀释制成细胞悬液，再将细胞悬液放入培育瓶内，置于相宜环境中培育。悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上，称为细胞贴壁。以后，细胞进行有丝分裂，数目不断增多。当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞就会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的接触抑制。人们通常将动物组织消化后的初次培育称为原代培育。贴满瓶壁的细胞须要重新用胰蛋白酶等处理，然后分别接着培育，让细胞接着增殖，这样的培育过程通常被称为传代培育。答案：(1)剪碎组织(2)胰蛋白酶解除由于接触对细胞生长和繁殖的抑制(3)细胞悬液(4)原代培育贴壁(5)传代培育1010～50代细胞核型突变癌细胞10．(2024·泰安高二检测)某生物爱好小组对一种抗癌新药进行试验时，以动物肝癌细胞为材料，测定抗癌药物对体外培育细胞增殖的影响。请回答下列有关动物细胞培育的问题：(1)在动物细胞培育时，将细胞所需的养分物质按其种类和所需数量严格配制而成的培育基称为________培育基。通常在培育基中还须要加入适量________等一些自然成分。细胞培育应在含5%CO2的恒温培育箱中进行，CO2的作用是________________。另外，还应当保证被培育的细胞处于________、________的环境。(2)在细胞生长过程中，当细胞贴壁生长到肯定程度时，其生长会受到抑制，这种现象称为________。(3)为了防止细胞培育过程中细菌的污染，可向培育液中加入适量的____________。(4)请你帮助爱好小组的同学分析本试验，试验的自变量是________________，试验组和比照组除了自变量不同外，其他处理均应当相同，这是为了遵循试验设计的________原则。解析：(1)将动物细胞所须要的各种养分物质按其种类和所需数量严格配制而成的培育基，称为合成培育基。由于对细胞所需的养分物质还并不完全清晰，因此，在运用合成培育基时，还要加入一些动物血清、血浆等自然成分。细胞培育所需的气体中有CO2，作用是维持培育液的pH。被培育的细胞必需处于无菌、无毒的环境中，才能保证细胞正常地生长增殖。(2)动物细胞在分裂过程中有接触抑制的现象。(3)抗生素能杀死培育基中的微生物，保证无菌、无毒环境。(4)要测定抗癌药物对体外培育细胞增殖的影响，试验的自变量应为抗癌药物的有无，其他无关变量应当相同，否则会干扰试验结果，这种设计遵循的是试验的单一变量原则。答案：(1)合成血清、血浆维持培育液的pH无菌无毒(2)接触抑制(3)抗生素(4)是否加入抗癌药物单一变量11．(高考全国卷Ⅱ节选)下图表示通过核移植等技术获得某种克隆哺乳动物(二倍体)的流程。回答下列问题：(1)图中A表示正常细胞核，染色体数为2n，则其性染色体的组成可为____________。过程①表示去除细胞核，该过程一般要在卵母细胞培育至适当时期再进行，去核时常采纳________的方法。②代表的过程是__________。(2)经过多次传代后，供体细胞中__________________的稳定性会降低。因此，选材时必需关注传代次数。(3)若获得的克隆动物与供体动物性状不完全相同，从遗传物质的角度分析其缘由是________________________________________________________________________________________________________________________________________________。(4)与克隆羊“多莉(利)”培育胜利一样，其他克隆动物的胜利获得也证明白________________________________________________________________________。解析：(1)核移植过程中，供体的体细胞中性染色体组成可为XX或XY；去核时常采纳显微操作的方法；图示②过程表示胚胎移植。(2)细胞培育过程中，经过多次传代培育，细胞中遗传物质的稳定性会降低。(3)由于卵母细胞的细胞质中的遗传物质会对克隆动物的性状产生影响，所以克隆动物与供体性状不完全相同。(4)克隆动物的胜利获得证明白已分化的动物体细胞的细胞核具有全能性。答案：(1)XX或XY显微操作胚胎移植(2)遗传物质(3)卵母细胞的细胞质中的遗传物质会对克隆动物的性状产生影响(4)动物已分化体细胞的细胞核具有全能性12．(2024·济南高二检测)华南虎是原产中国的老虎品种，已有近30年没有野生华南虎出现的报告，野生华南虎也被一些专家认为已经面临灭亡。科学工作者尝试用