《药物分析》维生素类药物的分析

第九章维生素类药物的分析

AnalysisofVitamines⊙维生素A⊙维生素B1⊙维生素C⊙维生素E⊙第一节维生素A(

VitA)2-CisNeovitaminAa

2,6-dicisIsovitamin

Ab4-CisNeovitaminAb2,4-dicisNeovitaminAc6-CisIsovitaminAa

Retinol(VitAalcohol)VAacetateVApolmitate912345678VitA含量表示I.U.(internationalUnit)国际单位效价(I.U./g)按WHO规定VAacetate

VAalcohol效价(I.U./g)2.907×106

3.33×106

1gpure

VA

acetate≈2.907×106I.U.

按WHO规定VAacetate

VAalcoholVitA含量表示I.U.(internationalUnit)国际单位效价(I.U./g)效价(I.U./g)2.907×1063.33×1061gpure

VA

acetate≈2.907×106I.U.

第一法测定VAacetate→环己烷为溶剂

λmax＝328nm吸收度比值0.5550.9071.0000.8110.299测定吸收度

λ(nm)

300316328340360

⊕如果λmax为326～329nm;-规定值≤±0.02则不需要校正⊕如果λmax为326～329nm;但是，-规定值＞0.02，则需校正VitAUV法校正公式

第一法

A328(校正)=3.25(2A328-A316-A340)若在±3%范围，则仍以A328计算含量若在-15%～-3%范围，则以A325(校正)计算含量若＞3%，或＜-15%，则采用第二法第二法测定其他维生素第一法未通过，包括：则A325(校正)=6.815A325-2.555A310-4.260A334λmax不在326～329nm，必须经皂化：酯乙醚提取VA醇，洗涤，过滤溶于异丙醇在300，310，325，334nm处分别测A⊕当λmax为323～327nm，A300nm/A325nm≤0.73⊕

若在±3%范围，则仍以A325计算含量⊕若λmax不在323～327nm，或者

A300nm/A325nm＞0.73表明干扰杂质含量过高，则可采用色谱法将未皂化部分纯化后再进行测定第一法

A328(校正)=3.25(2A328-A316-A340)Aλ2λ1λ3nmAλ2λ1λ3nmVitAsamplepureVAacetateimpurities校正公式由来用几何图形推导出公式A325(校正)=7A325-2.625A310-4.375A334比实际值高出2.6~2.7%故扣除2.65%得第二法校正公式A325(校正)=6.815A325-2.555A310-4.260A334

称取VitA滴剂0.1082g(标示量50000I.U./g)，加环已烷至50.0ml，取出5.0ml置于另一50ml量瓶中，加环已烷至刻度，摇匀后置石英比色皿中，以环已烷为空白，分别于以下波长处测得相应的吸收度值，试求此滴剂中VitA的标示量百分率：λ(nm)300

316

328

340

360A0.3300.5080.5700.477

0.190精密称取VitA滴剂0.06126g(标示量50000

I.U./g)，置于25ml量瓶中，加环已烷至刻度，精密吸取2ml置于另一25ml量瓶中，加环已烷至刻度，并混匀，置石英比色皿中，以环已烷为空白，分别于以下波长处测得吸收度值，试求此滴剂中VitA为标示量的百分含量：λ(nm)300

316

328

340

360A0.3300.5080.5700.477

0.190⊙第二节维生素B1(

VitB1)VitB1ThiamineHydrochlorideNaOH－H2O环合[O]－2H硫色素Thiochtome结构特点与鉴别噻唑环在碱性介质中可被高铁氰化钾等氧化剂氧化，然后与嘧啶环上的-NH2缩合生成具有荧光的硫色素，后者易溶于异丁醇中显强烈的蓝色荧光，该反应又称为硫色素荧光反应。为维生素B1所特有生成沉淀反应分子结构中含有杂环，易与生物碱沉淀剂(碘化铋钾、碘化汞钾、苦味酸等)，硅钨酸，雷氏盐等作用形成组成恒定的沉淀维生素B1在碱性加热条件下反应放出H2S,与Pb(Ac)2试液形成黑色PbS↓含量测定Assay硅钨酸重量法SilicotungsticAcid

Gravimetry非水溶液滴定法Non-aqueous

Titrimetry硫色素荧光法ThiochroneFluoremetryVitB1

硅钨酸重量法2VitB1+过量硅钨酸*滤过洗涤*用热的稀HCl洗干燥恒重*80℃H+煮沸*2~3分钟；过长，沉淀易于附着于器壁上[VitB1]2·SiO2(OH)2·12WO3·4H2O沉淀⊙第三节维生素C(

VitC)612345L-抗坏血酸L-去氢抗坏血酸L-二酮古罗糖酸有生物活性有生物活性无生物活性-2H+2HH2OOH-(H+)H2O50℃蓝色-3H2O糠醛-CO2戊糖含量测定＊碘量法＊2,6-二氯靛酚法⊙第五节维生素E(

VitE)R1R2﹡﹡VitE(dl-α-TocopherylAcetate)SyntheticNaturalProductR1

R2content(%)α-Tocopheryl52.0

68.0β-Tocopheryl9.3

22.0γ-Tocopheryl28.0

5.0δ-Tocopheryl10.7

5.0ChPVE

中检查生育酚取VitE0.1g，加无水乙醇5ml溶解后，加二苯胺T.S.1滴，用硫酸鈰滴定液(0.01mol/L)滴定，消耗硫酸鈰滴定液(0.01mol/L)不得过1.0ml固定液：5%SE30

柱温：255±10℃

检测器：FID

内标：十六酸十六醇酯鈰量法(%)GC(%)97.9183.5397.9982.5198.4885.0914.54´VE24.40´内标VE丸剂GC法VE(纯品)测得量(mg)17.2217.15加入量(mg)17.3回收率(%)99.5499.13中国药典维生素E

色谱条件与系统适应性试验

SystemSuitabilityTestsSST以硅酮(OV-17)为固定相，涂布浓度为2%；柱温为265℃，理论板数按VE峰计算，应不低于500，VE峰与内标峰的分离度应大于2。内标：正三十二烷校正因子测定取正三十二烷适量，加正已烷溶解并稀释成每1ml中含1.0g的溶液，摇匀，作为内标溶液。另取VitE对照品约20mg，精密称定，置棕色具塞锥形瓶中，精密加入内标溶液10ml，密塞，振摇使溶解；取1~3µl注入气相色谱仪，计算校正因子测定法取本品约20mg，精密称定，置棕色具塞锥形瓶中，精密加入内标溶液10ml，密塞，振摇使溶解；取1~3µl注入气相色谱仪，测定，计算，即得JPVitE:dl-α生育酚色谱柱：ODS15~30cm4mm5~10µm流动相：甲醇-水(491)流速：调整到生育酚的tr≈10minUVD：292nmR≥2.6人血清中VA和VE的含量测定Watersµ-BondapakC1830cm3.9mmResolveC18

预柱甲醇-水(964)，1.2ml/minUVD：0~8min330nm8min后292nm血清样品的制备血样离心后，分离血清，置5ml塑料试管中，充N2密封，于-40℃保存备用Δ4,6Cholestadienol胆甾醇，胆固醇Cholesteral胆甾-5烯-3β-醇VitD2

骨化醇Ergocalciferol9,10-开链麦角甾-5,7,10(19),22-四烯-3β-醇22123456710VitD3

胆骨化醇Cholecalciferol胆钙化醇9,10-开链胆甾-5,7,10(19)-三烯-3β-醇USP24Cleanupcolumn30cm4.6mmC8MobilephaseA

CH3CNCH3OHH2O25251TheamountofH2O&theflowratemaybevariedtomeetsystemsuitabilityrequirement.Analyticalcolumn25cm4.6mmp