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文档简介
《临床技术操作规范•病理学分册》
第1章总则
一、为提高病理学诊断质量,增进临床工作,根据《中华人民共和国执
业医师法》精神,结合医院病理科工作口勺特点,制定本规范。
二、医院病理科和承担医院病理科任务H'、J医学院校病理教研室的重要临
床任务是通过活体组织病理学检查(简称活检)、细胞病理学检查(简
称细胞学检查)和尸体剖检(简称尸检)等作出疾病的病理学诊断(或
称病理诊断)。具有一定规模的病理科,应积极开展教学、培训病理医
师和科学研究等项工作。
三、病理学诊断是病理医师应用病理学知识、有关技术和个人专业实践
经验,对送检的患者标本(或称检材,包括活体组织、细胞和尸体等)
进行病理学检查,结合有关临床资料,通过度析、综合后,作出的有关
该标本病理变化性质的判断和详细疾病的诊断。病理学诊断为临床医师
确定疾病诊断、制定治疗方案、评估疾病预后和总结诊治疾病经验等提
供重要日勺、有时是决定性的根据,并在疾病防止,尤其是传染病防止中
发挥重要作用。
四、病理学诊断汇报书(或称病理诊断汇报)是有关疾病诊断的重要医
学文竹。当波及医、患间医疗争议时,有关日勺病理学诊断汇报书具有法
律意义。病理学诊断汇报书应由具有执业资格的注册主治医师以上(含
主治医师)日勺病理医师签发。各医院可酌情准予条件合适的高年资病理
科住院医师试行签订病理学诊断汇报书。低年资病理科住院医师、病理
科进修医师和非病理学专'业的医师不得签订病理学诊断汇报书。
五、病理学检查是临床医师与病理医师为确立疾病诊断而进行的合作行
为,是有关临床科室与病理科之间特殊形式的会诊。临床医师和病理医
师双方皆应认真履行各自的义务和承担对应的责任。
六、病理学检杳申请单是临床医师向病理医师发出的会诊邀请单。病理
学检查申请单的作用是:临床医师向病理医师传递有关患者的重要临床
信息(包括症状、体征、多种辅助检查成果和手术所见等)、诊断意向
和就详细病例对病理学检查提出口勺某些特殊规定,为进行病理学检查和
病理学诊断提供重要的参照资料或根据。病理学检查申请单是疾病诊治
过程中口勺有效医学文书,各项信息必须真实,应由主管患者口勺临床医师
亲自(或指导有关医师)逐项认真填写并签名。
七、临床医师应保证送检标本与对应的病理学检查申请单内容的真实性
和一致性,所送检材应具有病变代表性和可检查性,并应是标本的全
部。
八、患者或患者的授权人应向医师提供有关患者口勺真实信息(包括姓
名、性别、年龄、病史和也许波及诊断需要日勺隐私信息)。病理医师应
尊重和保护患者的隐私。患者或患者的授权人应保证其自送检材口勺真实
性、完整性和可检查性。
九、病理科应努力为临床、为患者提供优质服务,遵照本规范的规定加
强科室建设,制定完善口勺科室管理制度,并实行有效的质量监控。
十、病理科工作人员应恪尽职守,做好本职工作。病理医师应及时对标
本讲行检杳和发出病理学诊断汇报书,认真看待临床医师就病理学诊断
提出的征询,必要时应复查有关口勺标本和切片,并予以答复。病理科技
术人员应严格执行本规范的技术操作规程,提供合格的病理学常规染色
片、特殊染色片和可靠的其他有关检测成果,并保证通过技术流程处理
的检材真实无误。
第2章病理学检查常规
第一节i般活体组织病理学检查常规
一、申请单和标本的验收
(-)病理科应有专人验收一般活体组织病理学检查(常规活检)申
请单和送检口勺标本。
(二)病理科验收人员必须:
1.同步接受同一患者的申请单和标本。
2.认真查对每例申请单与送检标本及其标志(联号条或其他写明患者
姓名、送检单位和送检日期等附标识)与否一致:对于送检的微小标
本,必须认真查对送检容器内或滤纸上与否确有组织及其数量。发现疑
问时,应立即向送检方提出并在申请单上注明状况。
3.认真检查标本口勺标志与否牢附于放置标本的容器上。
4.认真查阅申请单的各项目与否填写清晰,包括:①患者基本状况[姓
名、性别、年龄,送检单位(医院、科室)、床位、门诊号/住院号、送
检日期、取材部位、标本数量等],②患者临床状况[病史(症状和体
征)、化验/影象学检查成果、手术(包括内镜检查)所见、既往病理学
检查状况(包括原病理号和诊断)和临床诊断等]。
5.在申请单上详细记录患者或患方有关人员的明确地址、及号
码,以便必要时进行联络,并有助于随访患者。
(三)验收标本人员不得对申请单中由临床医师填写的各项内容进行改动
O
(四)下列状况的申请单和标本不予接受:
1.申请单与有关标本未同步送达病理科;
2.申请单中填写的内容与送检标本不符合;
3.标本上无有关患者姓名、科室等标志;
4.申请单内填写口勺字迹潦草不清;
5.申请单中漏填重要项目;
6.标本严重自溶、腐败、干涸等;
7.标本过小,不能或难以制做切片;
8.其他也许影响病理检查可行性和诊断精确性的状况。
病理科不能接受的申请单和标本一律当即退回,不予寄存。
(五)1临床医师采用的标本应尽快置放于盛有固定液(4%中性甲醛,即1
0%中性福尔马林)的容器内,固定液至少为标本体积的5倍。对于需作
特殊项目检查(如微生物、电镜、免疫组织化学、分子生物学等)的标
本,应按有关的技术规定进行固定或预处理。
(六)病理医师只对病理科实际验收标本的病理诊断负责。
(七)病理科应建立与送检方交接申请单和标本的手续制度。详细交接方
法由各医院病理科自行制定。
二、申请单和标本的编号、登记
(一)病理科验收人员应在已验收的申请单上注明验收日期并及时、精确
编号(病理号),并逐项录入活检标本登记簿或计算机内。严防病理号
的错编、错登。
(二)标本的病理号可按年编序,或持续性(不分年度)编序。
(三)同一病例同一次口勺申请单、活检标本登记簿(包括计算机录入)、
放置标本的容器、组织的石蜡包埋块(简称蜡块)及其切片等的病理号
必须完全一致。
(四)病理科应建立验收人员与组织取材人员之间申请单和标本的交接制度,详
细交接措施由各医院病理科自行制定。
(五)在病理科内移交标本时,必须保证安全,严防放置标本的容器倾
覆、破损和标本的散乱、缺失等。
三、标本的预处理
标本验收人员对已验收口勺标本酌情更换合适口勺容器,补充足量的固定
液;对于体积大的标本,值班取材的病理医师在不影响重要病灶定位口勺
状况下,及时、规范地予以剖开,以便充足固定。
四、标本的巨检、组织学取材和记录
对于核验无误的标本,应按照下列程序进行操作:①肉眼检查标本(巨
检):②切取组织块(简称取材);③将巨检和取材状况记录于活检记
录单上(活检记录单印于活检申请单的背面)。巨检和取材日勺技术操作
参见第3章第四节。
巨检和取材时的注意事项:
(一)巨检和取材必须由病理医师进行,应配置人员负责记录。
(二)巨检和取材过程中,应严防污染工作人员和周围环境。
(三)标本一般应经合适固定后再行取材。已知具有传染性(例如结核
病、病毒性肝炎等)的标本,应在不污染环境和/或不扩散传染口勺原则
下,经必要口勺初步巨检或切开后,立即置于盛有足量固定液的专用容器
内,充足固定后再行常规巨检和取材。
(四)病理医师在对每例标本进行巨检和取材前,应与记录人员认真查对
该例标本及其标志与申请单口勺有关内容与否一致。若对申请单填写的内
容或/和标本有疑问(例如患者姓名有误,标本内容、数量、病变特性
与申请单填写的)状况不符等),应暂行搁置,尽快与送检方联络,查明
原因,保证无误后,再行巨检和取材。必要时,可邀请有关临床医师共
同检查标本和取材。末于有疑问H勺标本,在消除疑问前不得进行巨检和
取材,应将有关标本连同其申请单一并临时妥存。
(五)病理医师进行巨检和取材时,记录人员应根据病理申请单内容,向
巨检医师汇报患者的基本临床状况、手术所见、标本状况(采用部位、
数量等)和送检医师的特殊规定等,并如实、清晰地将病理医师的口头
描述记录于活检记录单上。必要时,应在活检记录单上(或另附纸)绘
简图显示巨检所见和标示取材部位。取材者应查对记录内容。
(六)具有医学学术价值的标本可摄影存档,并酌情妥为保留。
(七)病理科宜积极推行巨检和取材的录音记录。每次巨检和取材结束
后,应由专人立即对录音内容进行文字整顿,记录于活检记录单上(手
录或用计算机录入、打印)。有关的录音资料应保留至病理诊断汇报书
发出后两周。
(八)细小标本取材时,可用伊红点染并用软薄纸妥善包裹。
(九)每例标本取材前、后,应用流水彻底清洗取材台面和所有有关器
物,严防检材被无关组织或其他异物污染,严防细小检材被流水冲失。
(+)巨检和取材必须按照本规范的规定进行操作(参见第3章第四
节)。对于由不一样部位或不一样病变区域切取的组织块,应在其病理号之
后再加编次级号(例如:一1,-2,-3,...;A,,B,C,...等)。
(十一)巨检/取材者和记录人员应互相配合、核查,保证所取组织块及
其编号标签精确地置于用于脱水日勺容器(脱水盒等)内。
(十二)标本巨检和取材后剩余的组织/器官应置入合适容器内,添加适
量4舟中性甲醛并附有有关病理号和患者姓名等标志,然后按取材日期有
序地妥为保留。取材剩余的标本一般保留至病理诊断汇报书发出后两
周。
(十三)病理医师在每批标本巨检和取材后,应与记录人员共同查对取材
内容,并在活检记录单/取材工作单上签名和签才日期。
(十四)取材后剩余的病理标本属于污染源,应遵照有关规定处理。
(十五)巨检/取材医师或记录人员与制片口勺技术人员认真办理交接手
续。详细交接措施由各医院病理科自行制定。
五、组织切片制备的基本规定
(一)组织制片过程中,应保证切片号与蜡块号一致。
(二)制片工作一般应在取材后2个工作日内完毕(不含需要脱钙、脱脂
等特殊处理的标本)。
(三)制片完牛后,技术人员应检查制片质量,并加贴标有本病理科病理
号的标签。常规石蜡-HE染色片的优良率应295%,优秀率不<35%。
不合格切片应立即重做。切片质量的基本原则参见第3章第一节的附
表。
(四)制片过程发生意外状况时,有关技术人员和技术室负责人应及时向
科主任汇报,并积极设法予以补救。
(五)制片完毕后,技术人员应将所制切片与其末应的活检记录单/取材
工作单等进行认真查木,确认无误后,将切片连同有关的活检申请单/
活检记录单/取材工作单等一并移交给病理医师。双方经查对无误后,
办理移交签字手续。详细交接措施由各医院病理科自行制定。
(六)常规活检组织切片制备技术日勺基本规定参见第3章第一节。
六、组织切片的光学显微镜检查和病理诊断
(一)病理医师进行病理诊断时:
1.应认真阅读申请单提供的各项资料,必要时(尤其是疑难病例),应
向有关临床医师理解更多的临床信息。
2.应认真阅读活检记录单中有关标本巨检的描述;负责复检的病理医师
必要时亲自观测标本,补充或订正病变描述,指导或亲自补取组织块。
3.应理解患者既往病理学检杳状况(包括切片的病理诊断和有关文字记
录):①由本病理科既往受理者,必须及时调阅有关切片等病理学检查
资料;②非本病理科既往受理者,应积极协助患者从有关病理科商借相
关切片等病理学检查资料参阅。
4.应在活检记录单上签订“医嘱”,告知技术人员进行必要的深切片、
连切片、特殊染色和其他有关技术检测。
5.应全面、细致地阅片,注意多种故意义的病变。
(二)进行初检的病理医师,应提出初诊意见,送交主检病理医师复查。
(三)主检病理医师对难以明确诊断的病例,可以:
1.提请科内上级医师会诊或进行科内读片讨论(会诊);
2.与有关临床医师进行临床一病理会诊;
3.必要时约见患者(尤其门诊患者)或患者亲属(或其他患方有关人
员),理解病情,阐明病理诊断口勺疑难状况和延期签发病理学诊断汇报
书的原因等;
4.于签发病理学诊断汇报书前进行科外病理会诊(”诊断汇报前病理会
诊”),应将各方面会诊意见的原件(或复印件)作为档案资料贴附于有
关患者口勺活检记录单中备查;
5.必要时,提议临床医师反复活检,或亲密随查。
(四)主检病理医师根据常规切片的镜下观测,结合标本巨检、有关技术
检查成果、有关临床资料和参照病理会诊意见等,作出病理诊断或提出
病理诊断意见(意向),清晰地书写于活检记录单的I有关栏目中、并亲
笔签名。各方会诊意见不一、难以明确诊断时.,主检医师可参照会诊意
见酌情诊断,或在病理学诊断汇报竹中将各方会诊意见列出,供临床医
师参照。
(五)对打印的病理学诊断汇报书,主检病理医师应与活检记录单上的病
理诊断文字进行查对,并亲笔签名。[参见本节下文:“八、常规活检
病理学诊断汇报书及其签发”]
七、有关诊断技术的选用
病理医师可借助于组织化学染色(包括特殊染色)、免疫组织化学染
色、申子显微镜技术、分子生物学技术、流式细胞技术等有关诊断技术
检查提供的佐证,对某些病例(尤其是疑难病例)进行病理诊断。(参
见第4章)
八、病理学诊断汇报书及其签发
(-)病理诊断表述的基本类型
I类:检材部位/疾病名称/病变性质明确和基本明确的病理诊断。
I【类:不能完全肯定疾病名称/病变性质,或是市于拟诊的疾病名称/病
变性质有所保留的病理诊断意向,可在拟诊疾病/病变名称之前冠以诸
如病变可“符合为”、“考虑为”、“倾向为”、“提醒为”、“也许
为"、“疑为”、“不能排除(除外)”之类的词语。
in类:检材切片所显示的病变局限性以诊断为某种疾病(即不能做出I类
或
n类病理诊断),只能进行病变口勺形态描述。
IV类:送检标本因过于细小、破碎、固定不妥、自溶、严重受挤压(变
形)、被烧灼、干涸等,无法做出病理诊断。
(二)病理学诊断汇报书的基本内容
1.患者的基本状况,包括病理号,姓名,性别,年龄,送检医院/科室
(住院/门诊),住院号/门诊号,送检/收验日期等。
2.巨检病变和镜下病变要点描述(一般性病变和细小标本可酌情简述或
省略)。
3.与病理诊断有关技术的检查成果。
4.病理诊断的表述(参见上文“病理诊断表述的基本类型”)。
5.对于疑难病例或作出n、in类病理诊断的病例,可酌情就病理诊断及
其有关问题附加:①提议(例如进行其他有关检查、再做活检、科外病
理学会诊、亲密随诊/随访等);②注释/讨论。
6.通过本病理科或/和科外病理会诊的病例,可将各方病理会诊
意见列于该例患者的病理学诊断汇报竹中。
(三)病理学诊断汇报书的书写规定
1.病理学诊断汇志书的文字表述力争严谨、恰当、精练、条理和层
次清晰。
2.病理学诊断汇报书应为一式二份,一份交予送检方,另一份随同患者
的病理学检查申请单/病理学检查记录单一并存档。主检病理医师必须
在每一份病理学诊断汇报书上签名,不能以个人印章替代签名,不能由
他人代为签名;主检病理医师签名的字迹应能识别。
3.手书的病理学诊断汇报书必须二联复写,必须文字规范、字迹清晰,
不得潦草、涂改。
4.手书和计算机打印日勺病理学诊断汇报书中的关键性文字,例如
“癌”、“瘤”、“阳性”、“阴性”和数字等,要认真查对,不得有
误。
5.计算机打印的图文病理学诊断汇报书提供的病变图象要精确,具有典
型(代表)性,放大倍数合适。
6.患者的基本状况项目必须严格按照送检临床医师填写1内文字抄写或用
计算机输录于病理学诊断汇报书中,并认真核杳无误,签发汇报书的病
理医师和病理科的其他人员都不得改动。
7.病理医师不得签发虚假口勺病理学诊断汇报书,不得向临床医师和患方
人员提供有病理医师签名的空白病理学诊断汇报书。
(四)病理学诊断汇报书的发送
1.病理科自接受送检标本至签发该例病理学诊断汇报书的时间,一般情
况下为5个工作日以内;
2.由于某些原因(包括深切片、补取材制片、特殊染色、免疫组
织化学染色、脱钙、疑难病例会诊或传染性标本延长固定期间等)延迟
取材、制片,或是进行其他有关技术检测,不能准期签发病理学诊断报
告书时,应以口头或书面告知有关临床医师或患方,阐明迟发病理学诊
断汇报书的原因。
3.病理科应有专人发送病理学诊断汇报书。住院患者口勺病理学诊断汇报
书应发送至有关临床科室。病理科所在医院门诊患者和外院患者病理学
诊断汇报书的发送措施,由各医院病理科自行制定。
4.病理学诊断汇报书口勺经收人员(包括患方人员)必须履行签罢手续。
5.病理科已发出口勺病理学诊断汇报书被遗失时,一般不予补发;必要
时,经病理科主任同意可以抄件形式补发。
九、资料管理
一般活体组织病理学检查口勺资料必须妥善管理,有关规定参见本章第五
节。
十、会诊
病理学会诊是一般活体组织病理学诊断过程的重要环节,有关规定参见本章第
六节。
第二节手术中迅速活体组织病理学检查常规
一、概述
(一)手术中迅速活体组织病理学检杳(迅速活检)是临床医师在实行手术
过程中,就与手术方案有关的疾病诊断问题祈求病理医师迅速进行的急会诊,
尤其需要临床医师与病理医师间口勺亲密合作。
(二)迅速活检规定病理医师在很短时间内,根据对切除标本的巨检和组织块快
速冷冻切片(或迅速石蜡切片)口勺观测,向手术医师提供的参照性病理诊断意
见。与常规石蜡切片的病理诊断相比,迅速活检会诊具有更多的局限性和误诊
的也许性。有的病例难以迅速诊断,需要等待常规石蜡切片深入明确诊断。
因此,应向临床医师阐明迅速活检的:①局限性、②合用范围、③慎用范围和
④不适宜应用范围。
(三)有关临床医师应于手术前向患者和/或患者授权人阐明迅速活检的意义和
局限性等,获得患者和/或患方H勺知情和理解。患者和/或患者授权人应在由
医院制定的《手术中迅速活检患方知情同意书》签订意见和签名。
(四)主持手术的临床医师应在手术前一天向病理科递交迅速活检申请单,填写
患者的病史,重要的影象学、试验室检查成果和提请病理医师尤其关注的问题
等。尽量不在手术进行过程中临时申请迅速活检。
(五)手术中迅速活检应由通过该项工作训练的主治医师以上的病理医师主持。
尚不具有对应条件的病理科不应勉强开展手术中迅速活检。
(六)负责迅速活检的主检病理医师应理解患者的①临床状况,②手术所见,③
既往有关的病理学检查状况。
二、合用范围
()需要确定病变性质(如肿瘤或非肿瘤/良性肿瘤或恶性肿瘤等),以
决定手术方案的标本。
(二)理解恶性肿瘤的扩散状况,包括肿瘤与否浸润相邻组织、有无区域淋
巴结转移等。
(三)确定肿瘤部位的手术切缘有无肿瘤组织残留。
(四)确认切除的组织,例如甲状旁腺、输卵管、输精管及异位组织等。
三、慎用范围
波及截肢和其他会严重致残口勺根治性手术切除的标本。需要此类手术治疗口勺患
者,其病变性质宜于手术前通过常规活检确定。
四、不适宜应用范围
(一)疑为恶性淋巴瘤。
(二)过小的标本(检材长径WO.2cm者)。
(三)术前易于进行常规活检者。
(四)脂肪组织、骨组织和钙化组织。
(五)需要根据核分裂象计数判断良、恶性的软组织肿瘤。
(六)重要根据肿瘤生物学行为特性而不能根据组织形态判断良、恶性的肿瘤。
(七)已知具有传染性的标本(例如结核病、病毒性肝炎、艾滋病等)。
五、申请单和标本的验收、编号和登记
手术中迅速活体组织病理学检查申请单和标木的验收、编号和登记参照本章第
一节中“一”至"三”项的有关规定。
六、标本的巨检、取材和记录
(一)病理科验收迅速活检申请单和标本后,应参照本章第一节中“四”项日勺有
关规定,立即进行标本的巨检、取材和记录。
(二)主持迅速活检的病理医师应亲自参与标本的巨检和取材(或指导取
材)。
(三)一般选用品有代表性的病变组织1〜2块,需要时,增长取材块数。
七、组织切片的制备
(一)冷冻切片
1.完毕冷冻HE染色切片制备的时间一般应为20〜25分钟。
2.恒冷箱切片机制片:至少应于切片前1小时开机预冷,冷室温度一般为-
15—20℃o常规开展冷冻切片迅速病理学诊断的病理科,恒冷箱切片机宜处在
24小时恒温待机状态。
3.其他措施的冷冻切片制备参见第3章第一节。
(二)迅速石蜡切片
1.完毕迅速石蜡一HE染色切片的时间一般为30分钟。
2.迅速石蜡切片口勺制备措施参见第3章第一节。
(三)制备好的冷冻/迅速石蜡-HE染色切片,加贴标有本病理科病理号的
标签后,立即交由主检病理医师进行诊断。
八、手术中迅速活检会诊意见及其签发
(一)有条件日勺病理科宜由两位中/高级称职的病理医师共同签订迅速活检的病
理诊断意见。对于病变疑难、手术切除范围广泛和会严重致残的手术中迅速活
检,应由两位高级称职H勺病理医师共同签订会诊意见。主检病理医师签名口勺字
迹应能识别。
(二)迅速活检诊断意见一般在收到送检标本后40分钟内发出;同一时间段内相
继收到口勺多例患者标本或是同一例患者的多次标本,其发出汇报的时间依次类
推。对于疑难病变,可酌情延时汇报。
(三)对于难以即时迅速诊断的病变(例如病变不经典、交界性肿瘤病变或送检
组织局限性以明确诊断等),主检病理医师应向手术医师阐明状况,恰如其分
地签发病理诊断意见或告知需要等待常规石蜡切片深入明确病理诊断。
(四)主检病理医师签订的迅速活检病理诊断意见,宜以文字形式汇报(详细发
出方式由各医院自行决定)。迅速活检病理诊断意见汇报书发出前应认真杳对
无误。
九、冷冻切片后剩余组织的处理
(一)冷冻切片后剩余的冷冻组织(简称“冻对”)和冷冻切片取材后剩余、未
曾冷冻口勺组织(简称“冻剩”),均应保留,用以制备常规石蜡切片,以便与
冷冻切片进行对照观测。
(二)“冻对”/“冻剩”组织口勺蜡块和切片需与同一病例手术后送检的切除
标本编为同一病理号,并作出综合性诊断。
(三)当冷冻切片病理诊断意见与其“冻对”组织口勺常规石蜡-HE片的
病理诊断不一致时,该例的病理诊断一般应以石蜡-HE片诊断为准。
十、资料管理
手术中迅速活体组织病理学检查的资料必须妥善管理,有关规定参见本
章第五节。
第三节细胞病理学检查常规
一、申请单和标本的验收、编号和登记
(一)病理科应参照本章第一节(常规活体组织病理学检查常规)中“一”
和“二”项的规定,进行细胞病理学检查(细胞学检查)申请单和标本n勺验收、
编号和登记。
(二)用于细胞学检查的标本必须新鲜,取材后应尽快送至病理科(或细胞
病理学室,下同):病理科核验检材无误后,应尽快讲行涂片和染色。
(三)病理科验收标本人员不得对申请单中由临床医师填写的各项内容进行改
动。
二、细胞涂片、组织印片和压片口勺基本规定
(一)细胞涂片、组织印片和压片(参见第3章第二节)。
(二)肿物细针穿刺物涂片
i.应由掌握细针穿刺技术口勺注册医师或注册助理医师,按照细针穿刺技术操作
常规,亲自对确有适应症且无禁忌症的患者采用穿刺物。
2.适应症:一般为:
(1)浅表肿物:乳腺、甲状腺、涎腺、淋巴结、前列腺、皮下软组织和骨等。
⑵胸腔肿物:肺、胸膜和纵隔等。
(3)腹腔肿物:肝、胰、肾、肾上腺、腹腔内、腹膜后和盆腔内等。
(4)颅内肿物。
3.禁忌症:患者有难以控制的咳嗽、肺动脉高压症、进行性肺气肿、出血
性体质及“晕针史”等。
(三)对于核验无误的送检标本,应立即依序进行:①涂片、印片或
压片,②固定和③染色。
三、细胞病理学诊断汇报书及其签发
(一)细胞病理学诊断可为临床医师诊断疾病(尤其是肿瘤)提供重要参照
根据。
(二)细胞病理学诊断汇报书必须由具有主检资格的注册病理医师签订后发出。
主检病理医师签名附字迹应能识别。
(三)细胞病理学诊断表述的基本类型
1.直接表述性诊断:合用于穿刺标本的细胞病理学诊断汇报。根据形态
学观测口勺实际状况,对于某种疾病/病变做出肯定性(I类)、不一样程度意
向性(H类)细胞学诊断,或是提供形态描述性(in类)细胞学诊断,或是告
知无法做出(IV类)细胞学诊断。[参照本章第一节的八(一)项:“病理学诊断
表述的基本类型”]
2.间接分级性诊断:用于查找恶性肿瘤细胞的诊断。
I级:未见恶性细胞
I【级:查见核异质细胞
Ila:轻度核异质细胞
IIb:重度核异质细胞
IH级:查见可疑恶性细胞
N级:查见高度可疑恶性细胞
V级:查见恶性细胞
(四)细胞病理学诊断的局限性(假阴性或假阳性诊断)
1.假阴性:是指在恶性肿瘤患者H勺有关标本中未能查见恶性细胞。假阴性
率一般为10%左右。因此,细胞病理学检查的阴性成果并不能否认临床医师MJ
恶性肿瘤诊断。
2.假阳性:是指在非恶性肿瘤患者的有关标本中查见了“恶性细胞”。假阳
性率一般WK。因此,细胞病理学诊断应亲密结合患者H勺临床资料,对于临床
上未考虑为恶性肿瘤患者的阳性细胞学诊断应持谨慎态度。
(五)细胞病理学诊断汇报书的基本内容
1.患者的基本状况项目,包括病理号、姓名、性别、年龄、送检医院/科室
(住院/门诊)、住院号/门诊号、送检/收验日期等。
2.细胞病理学诊断的表述(参见上项“细胞病理学诊断汇报表述的基本类
型”)O
3.必要时或条件容许时,可酌情就细胞病理学诊断及其有关问题附加:①
某些提议(例如进行其他有关检查、再做活检、病理科外病理学会诊、亲密随
查/随访等);②注释/讨论。
4.通过本病理科或/和科外病理会诊日勺病例,可将各方日勺细胞病理学诊断
意见附于该例的细胞病理学诊断汇报刊中。
(六)细胞病理学诊断汇报I汕竹写规定
1.参照本章第一节(“常规活体组织病理学检查常规”)中“八(二)”项的
有关规定。
2.计算机图文打印的细胞病理学诊断汇报书提供口勺细胞学图象应具有经典(代
表)性,放大倍数合适。
(七)细胞病理学诊断汇报书日勺发送
1.病理科自接受送检标本至签发细胞病理学诊断汇报日的时间,一般状况
下为1〜2个工作日。
2.因某些原因(包括特殊染色、免疫组化染色、疑难会诊等)不能准期签发细
胞病理学诊断汇报书时,应以口头或书面告知有关临床医师或患方,阐明迟发
汇报书的原因。
3.病理科应有专人发送细胞病理学诊断汇报书。住院患者口勺细胞病理学诊
断汇报书应发送至有关临床科室;本院门诊患者和外院患者的细胞病理学珍断
汇报书的发送措施由各医院病理科自行制定。
4.细胞病理学诊断汇摘书的经收人员(包括患方人员)必须履行病理科规
定欧I签罢手续。
5.已由病理科发出的细胞病理学诊断汇报书被遗失时,一般不予补发;必
要时,经病理科主任同意可以抄件形式补发。
四、资料管理
细胞病理学检查日勺资料必须妥善管理,有关规定参见本章第五节。
五、会诊
细胞病理学会诊是细胞病理学诊断过程的重要环节,有关规定参见本章第六
节。
第四节尸体剖检(尸检)的诊断常规
一、尸检的受理
(一)必须遵照国家有关规定受理尸检。
(二)受理尸检范围:①一般病理尸检;②波及医、患争议的尸检(由卫生
行政主管部门指定的尸检机构实行)。
(三)受理尸检部门:具有独立尸检能力的①医院病理科,②医学院校的病理学
教研室,③经医政部门注册的病理诊断中心。
(四)主持尸检(主检)人员:应是接受过尸检训练、具有中级以上专业职称的
病理学医师或病理学教师。必要时,邀请法医参与尸检。
(五)申请或委托尸检方:①有关医院,②卫生行政部门,③司法机关,
④死者口勺亲属或代理人,或⑤被受理尸检方承认口勺其他申请或委托方。
(六)申请或委托尸检方必须向受理尸检方递交:①死者的死亡证明,②有申请
或委托方当事人签名、负责人签名和加盖委托单位公章的尸检申请书或委托
书,③逐项认真填写的尸检申请书(包括死者的临床资料要点和其他需要阐明
的状况)。
(七)死者亲属或代理人签订阐明尸检有关事项的《死者亲属或代理人委托
尸检知情同意书》(由受理尸检方制定),确认如下事项:
1.同意有关受理尸检机构对于死者进行尸检。
2.授权主持尸检人员艰据实际需要确定尸检的术式、范围、脏器或组织的双留
及其处理方式。
3.主持尸检人员负责遗体尸检后的体表切口缝合,不参与尸检后遗体的其
他安顿事项。
4.明确新生儿和围生期胎儿尸检后日勺尸体处理方式。
5.同意对尸检过程进行必要的摄影、录像,并确认与否同意教学示教。
6.尸检病理学诊断汇天书可提供死者所患口勺重要疾病和死因;难以作出明
确结论时,可仅提交病变描述性尸检汇报。
7.尸检病理学诊断汇很书发送给委托尸检方。
(八)下列状况的尸检可不受理:
1.委托尸检手续不完备者(包括未按规定交纳尸检费用者);
2.拒签《死者亲属或代理人委托尸检知情同意书》者(包括对于尸检口勺术
式、范围、脏器或组织的取留及其处理方式等持有异义从而影响尸检实行和尸
检结论形成者);
3.委托尸检方与受理尸检方就波及尸检的某些重要问题未能到达协议者;
4.死者死亡超过48小时未经冷冻、或冷冻超过7日者;
5.疑因或确因烈性传染病死亡的病例,尸检方不具有对应尸检设施条件者;
6.因其他状况不能受理者。
二、尸检前日勺准备工作
(一)尸检室环境的准咨。
(二)尸检基本器材和工作服的准备。
(三)安排实行尸检的专业人员和技术人员。
(四)将拟行剖验H勺尸体移交至尸检室。
(五)主持尸检人员确认尸检手续完备(死亡证明、尸检申请书或委托书、
死者的临床资料要点等),并请死者亲属或委托弋理人确认尸体。
(六)主持尸检人员认真阅读、熟悉有关死者的临床资料要点(必要时阅读死者
的生前病历),理解申请或委托方对于尸检的规定和尸检时需要注意n'、j问题。
(七)进行尸检编号并登录于尸检登记薄上。
(八)尸检过程现场文字(或语音)记录、摄影或录象工作的准备。
三、尸检的卫生管理
(一)制定尸检室卫生管理制度并认真实行。
(二)尸检人员和尸检室内其他人员必须认真做好个人和工作环境的卫生防护。
(三)疑为或确诊为烈性传染病死者的尸检,必须遵照传染病尸检口勺有关规
定进行操作。
(四)尸检结束后卫生处置
1.认真清洗尸检台和尸检室,并进行环境消毒。
2.认真清洗尸检工作服和器械等,并进行消毒。
3.按照有关规定认真处理尸检污物。
4.尸检人员在专用卫生间内淋浴。
5.进行上述各项卫生处置过程中必须严防污染有关人员和尸检室内、外环境。
四、尸检的技术操作
尸检的技术操作规范参见第3章日勺第三节。
五、尸检组织的切片制备
尸检组织切片制备的技术操作规范参见第3章第一节。
六、尸检组织的病理学有关技术检查
尸检组织病理学有关技术检查的规范参见第4章。
七、尸检组织切片的光学显微镜检查和病理学诊断
(一)光镜检查切片,客观地描述和记录各系统、器官的病变要点;
(二)在综合镜检和巨检(肉眼检查)所见的基础上,结合死者生前的临床资料
等形成尸检口勺病理诊断。
(三)有关镜检诊断的其他事项参见本章第一节的一(六)项(“组织切片口勺光
学显微镜检杳和病理学诊断”)。
八、尸检档案资料
(一)基本内容
1.一般资料:包括死者的尸检号、姓名、性别、年龄、籍贯、民族、出
生地、住址、死亡时间、尸检时间和地点、有关医院(临床科室、住院号/门
诊号/急症号)、委托或申请尸检单位及主持尸检人员和助手等。
2.尸检申请书或委托书。
3.有关的临床资料。
4.由死者亲属或代理人签订的《死者亲属或代理人委托尸检知情同意书》。
5.尸检所见(附有必要的I图像资料)。包括:
(1)对有关尸体及其死亡征象确实认。
⑵体表检查所见。
(3)体腔(胸腔、心包腔、腹腔)检查所见。
(4)脏器检查所见:依序逐一描述各脏器的I肉眼检查和光学显微镜检查所见。
(5)特殊检查成果。例如毒物、病原生物学等检查(附有关检查汇报)。
6.病理学诊断和尸检病理学诊断汇报书副本(参见下项“尸检病理学诊
断汇报书及其签发”)。
7.死亡原因。
8.小结。
9.讨论。包括:
(1)重要疾病及其诊断根据、发生和发展特点。
(2)重要疾病/病变之间、重要疾病与继发/伴发疾病之间FI勺互相关系。
⑶从临床与病理相结合的角度,参照有关文献,进行讨论。
10.其他资料。包括照片及其底片、幻灯片、图表、临床病理讨论记
录、参照文献和电子信息资料等。
(二)受理尸检单位,应积极实行尸检档案资料的计算机管理。
九、尸检病理学诊断汇报书及其签发
(-)尸检病理学诊断汇报书(简称尸检汇报书或尸检汇报)是有关尸检的
正式病理学汇报。
(二)尸检病理学诊断汇报书的基本内容:①重要疾病(与死亡直接有关口勺疾
病);②继发疾病(与重要疾病亲密有关的疾病);③伴发疾病(与重要疾病
无亲密关系时疾病)。可酌情进行死因分析、小结和讨论。疾病诊断力争使用
国际医学规范术语,并按各疾病H勺致死重要性和因果关系排序。
(三)尸检病理学诊断汇报书必须由主检人员签名后发出。主检人员签名的字迹
应能识别。
(四)尸检病理学诊断汇报书应一式两份(正本和副本),两份汇报书具有
同等效力。汇报书的正本随同其他尸检资料一并归档,汇报书的副本发给委托
尸检方。手书的尸检病理学诊断汇报书应二联复写,必须文字规范、字迹清
晰,不得涂改。
(五)尸检病理学诊断汇报书一般在尸检后45个工作日内发出。由于病变复
杂或其他原因不能准时发出尸检病理学诊断汇报书时,可酌情延迟发出并应向
委托尸检方阐明迟发原因。
十、尸检资料的管理
尸检资料必须妥善管理,有关规定参见本章第五节。
第五节病理学检查资料的管理
一、概述
(一)常规活检、手术中迅速活检、细胞病理学检查和尸检等口勺文字资料(含电
子信息资料)、非文字资料(组织的石蜡包埋块、切片等)以及其他有关资料
均为有价值的医学资料,皆由受理病理学检查n勺病理科按照本规范规定的期限
妥为保留。病理科必须设置病理档案资料室和制定病理档案资料管理制度(包
括病理检查资料的归档、借用和偿还手续等),并有专人管理。应积极实行病
理学检查资料的计算机管理。
(二)多种病理学检查的文字资料应装订成册保留。
(三)据以做出常规活检、迅速活检、尸检病理学诊断的原始组织学切片和
查见肿瘤细胞或可疑肿瘤细胞日勺玻片必须妥善保留。未查见恶性肿瘤细胞日勺玻
片,于诊断汇报书发出后保留2周。
二、患者查询病理学检查资料的期限
(一)门诊患者为送检后23年。
(一)住院患者为送检后30年。
三、活检、尸检大体标本的保留期限
(一)活检:自签发病理学诊断汇报书之日起保留2〜4周,详细保留期限由
各医院自行规定。
(二)尸检
1.一般病理尸检:自签发病理学诊断汇报书之E起保留3个月。
2.波及医、患争议的尸检:按照尸检前有关各方签订口勺协议办理。
四、病理学检查资料的借用
(一)医院必须制定有关借用病理学检查资料的措施并严格实行。
(二)有关患方借用病理组织学切片,应注意:
1.患方人员申请借用有关患者的活检切片、尸检切片时,应按照医院制定
的有关规定办理手续。
2.申请借用切片的患方人员必须:①出示本人身份证等有效证件并保留其复印
件;②填写借片申请单并签名;③支付规定日勺借片押金(待偿还切片时退
还)。
3.病理科据以作出诊断的原始切片一般不外借,一般借出(或售出)有关
病例H勺复制切片。复制切片借出(或售出)前,应确认该切片的病变与原切片
相似或基本相似。
4.患方借出的切片应妥善保留,必须在规定的期限内偿还。患方借出的切
片若有破损、丢失等,应按规定支付赔偿金,并承担对应责任。
5.病理科因故不能向患方出借或发售有关切片时,由双方协商处理病理学会诊
问题。病理科可酌情容许患方邀请外院的病理医师前来病理科阅片;有条件口勺
单位可酌情进行远程病理会诊。
(三)有关患方借用细胞病理学玻片
1.一种病例的同一次检查有多张查见恶性肿瘤细胞的“阳性片”或“可疑
阳性片”时,可容许患方借用其中的一张。借用手续参见上项(二)。
2.一种病例仅有一张为查见恶性肿瘤细胞的“阳性片”或“可疑阳性片”时,
该阳性片或可疑阳性片原则上不予外借。其会诊问题由双方协商处理。病理科
可酌情容许患方邀请外院的病理医师前来病理科阅片。
(四)有关借用检材组织的石蜡包埋块
1.活检和尸检检材组织的石蜡包埋块(简称蜡块)是无法复制的病理学检
查资料,属于诊断病理学口勺重要基础档案,原则上不外借。必要时,可由病理
科向患方提供未经染色的切片(通称白片)。
3.患方外借病理切片会诊时,受理会诊的病理科若确实需要有关病例病理
检材的蜡块,可由有关病理科双方协商处理。
第六节病理学会诊
一、具有一定规模的病理科应定期举行科内病理会诊或读片讨论会。
二、积极推进建立地区性病理会诊中心。
三、加强临床一病理会诊。
四、应由具有高级职称的病理医师接受病理科内、外日勺病理学会
诊。
五、接受外院的病理会诊时,由会诊的病理医师签发《病理学会诊征询意见
书》,并在该《意见书》上写明:“病理医师个人会诊征询意见,仅供原病理
诊断口勺病理医师参照”。由作出原病理诊断的病理医师自行决定与否采纳病理
会诊征询意见和采纳口勺程度。做出原诊断的病理科应将《病理会诊征询意见
书》的原件或其复印件贴附于有关患者的病理检查记录单上,一并归档。
六、加做有关技术检测方能作出诊断的会诊病例,会诊医师应在《意见书》中
予以阐明,并向患方进行合适解释。
七、对病理诊断时间较为长期病例的会诊,应考虑到做出原诊断时期口勺诊断病
理学理论、技术水平、对应病变/疾病的定性诊断原则和原诊断病理科当时口勺
客观条件。
八、有条件的病理科可开展远程病理会诊。
第七节病理科时基本设施
一、病理科基本设施的指导原则
(一一)保证病理科完毕基本工作任务。
(二)保护病理工作人员免受污染。
(三)保护环境免受污染。
二、病理科的基本工作空间
(一)病理科口勺常规工作需要在下列的各自独立的房间内进行:
1.收发室(检材的接受、登记,病理诊断汇报书的发放,病理资料查询等)
2.巨检和取材室(检材的肉眼检查和切取组织块,贮存取材后的剩余检材)
3.常规切片前的预处理室(组织块的脱水、透明和浸蜡)
4.制片室(石蜡切片/冷冻切片/细胞学涂片的制做和染色)
5.病理组织学诊断室
6.细胞病理学诊断(酌情附设组织穿刺室)
7.病理会诊室
8.病理档案资料室
9.大体标本制作室和陈列室
10.尸检室及其配套空间(三级医院建立,包括准备室、尸检室、肉眼检查和
取材室、更衣/淋浴室、标本储备室等)
11.储备室
12.淋浴室
13.办公室
(二)较高技术层次的病理科还应设置:
1.特殊染色和免疫组织化学染色试验室
2.细胞遗传和分子病理学试验室
3.其他特殊检测试验室(例如超薄切片制备、电镜检测、细胞培养、流式细胞
术和其他新技术试验室)
4.图书/电子信息/学术活动室
5.进修病理医师教室。
三、病理科常规活检和迅速活检工作的基本设施
(一)收发室
1.办公设施
2.紫外线消毒柜(用于活检申请单等消毒)
3.合于个人和环境防污染规定的上、下水系统
4.其他有关设备
(二)病理标本巨检和取材室
1.便于清洗、消毒的屋顶、室壁和地面装修
2.室内紫外线消毒设备
3.室内高效通风设施
4.封闭式高效能通风柜厨(用于巨检和取材,应便于清洗、消毒,并安装足够
照明和紫外线消毒设备)
5.合于个人和环境防污染规定日勺上、下水系统(包括独立的污水排泄系统和污
水处理池)
6.流水冲洗装置
7.冷水和热水供应系统
8.自动录音设备(酌情安装,用于记录医师巨检标本时的语言描述)
9.标本储存柜(安装排风设备)
10.隔离服装(消毒后使用)
11.其他有关设备。
(三)常规切片的预处理室和常规/迅速制片室
1.排放有毒物质的室内高效通风设施(用于组织块和石蜡切片的
人工脱水流程)
2.符合个人和环境防污染规定口勺上、下水系统(包括独立的污水排泄系统和污
水处理池)
3.室内紫外线消毒设备
4.封闭式高效能通风柜厨(用于人工脱水流程)
5.试验台
6.脱水设备:①人工脱水器具或/和②半自动或全封闭自动脱水机
7.组织块石蜡包埋机
8.石蜡切片机
*9.恒温冷冻切片机
*10.石蜡迅速切片机[*9和10:两项皆配置或配置一项]
#11.一次性切片刀及其配套部件
#12.切片刀和磨刀机[#11和12:两项皆配置或配置一
项]
13.冰箱
14.恒温箱
15.烤箱
16.有关试剂和试剂柜
17.天平
18.染色用器具
19.一般光学显微镜(用于染色质量控制)
20.其他有关设备
(四)特殊染色和免疫组织化学染色试验室
1.用于染色口勺试验室环境设施和染色的常规设备[参见上文:(三)常规切片的
预处理室和制片室]
2.微波炉或其他抗原修复设备
3.有关试剂和试剂柜
4.自动免疫组化染色仪(具有一定规模的病理科,酌情)
5.其他有关设备
(五)病理组织学诊断室和病理会诊室
1.双筒显微镜(每名病理医师配置一台)
*2.双头和/或多头显微镜(用于共览会诊和培训示教)
*3.计算机和打印机(酌情连接局域网,用于病理学检查资料的储存和调阅)
*4.显微摄影设备,计算机图像分析、电子图像存储和放映设
备
[*2〜4:具有一定规模的病理科配置]
5.远程会诊系统(酌情)
6.其他有关设备
(六)病理档案资料室
1.用于储存切片、蜡块和文字资料的柜具
2.计算机和打印机(酌情连接局域网,用于病理学检查资料的储存和调阅)
3.秘书办公设施(具有一定规模的病理科)
4.其他有关设备
(七)必要的专业参照书和基本IKJ专业期刊(具有一定规模的病理科应设置
图书资料室)
(八)病理大体标本制作室和陈列室
1.制作病理大体标本口勺工具
2.用于陈列病理大体标本的展览柜(配置照明装置)
3.其他有关设备
(九)办公室:必要的办公设备
(十)储备室:必要设施
(十一)淋浴室:必备设施
四、细胞病理学检查工作的基本设施
(-)肿物穿刺取材室:
1.便于清洗、消毒的屋顶、室壁和地面装修
2.室内紫外线消毒设备
3.用于实行穿刺术的检查床、椅
4.穿刺用器械和器械柜
5.穿刺用、急救用药物和药物柜
6.其他有关设备
(二)细胞学涂片制片室:
1.用于染色口勺试验室环境设施和常规设备[参见本节明三(三)项:”常规切片
的预处理室和常规/迅速制片室”])
2.可调速离心机
3.自动细胞病理学检查系统(具有一定规模的病理科,酌情)
4.其他有关设备
(三)细胞病理学诊断室:参见本节的三(五)项(病理组织学诊断室和病理会诊
室)。
(四)独立设置(不从属于病理科)的细胞病理学科室:需要其他必要空间的基
本设备(参见本节的“三、病理科常规和迅速活检工作的基本设备”)。
五、尸检工作的基本设施
(-)尸检准备室
1.尸检专用器械和柜具
2.参与尸检人员用隔离用衣物和消毒器物
3.办公设施
4.消毒设施
5.其他有关设备
(二)一般尸检室
1.便于清洗、消毒的屋顶、室壁和地面装修
2.室内紫外线消毒设备
3.室内高效通风设施
4.设计合理、合用的尸检台[具有合于个人和环境防污染规定的上、下水系统
(包括独立口勺污水排泄系统和污水处理池),便于清洗、消毒。]
5.合适的照明装置
6.冷水和热水供应系统
7.阶梯式看台(示教用)
8.其他有关设备
(三)传染病用尸检室:严格按照有关传染病管理法规的规定建设。
(四)更衣/淋浴室:必备设施
(五)病理标本巨检和取材室[参见本节的三(二)项:“病理标本巨检和取材
室”]
(六)常规切片室:从属于病理科的尸检室可不另设(参见本节口勺三(三)项:
“常规切片口勺预处理室和常规/迅速制片室”)
(七)标本储备室:必要设施
六、病理学有关技术试验室日勺基本设施
应用特殊染色和组织化学、免疫组织化学、塑料包埋组织切片制备、电子显微
镜超微病理诊断检材制备、图像分析、流式细胞分析(FCM)、聚合酶链反应
(PCR)、细胞和分子细胞遗传学、病理学摄影技术和其他新开发、引进H勺病理
学有关技术的J病理科,应个根据有关技术规定,建立具有必备基本设施的试验
室。
《临床技术操作规范•病理学分册》/第三章病理学基本技术规范
第一节病理组织学诊断检材的制备技术
一、组织的固定
㈠凡需要进行病理组织学检查的标本(器官或组织),于离体(活体或尸体)
后,应尽快置放(浸泡)于装有足够量固定液口勺容器中固定。固定液量应为被
固定标本体积的510倍。置放标本的容器大小视标本和固定液的体积而定,应
合适大某些。临床科室切取口勺标本置放于容器中固定后,应尽快送交病理科继
续固定。未能及时、充足固定口勺干涸或腐败标本不能再进行固定和用于制做切
片。
㈡常规固定液为4%中性甲醛(10%中性福尔马林),应预先多量配制贮存,以
备随时使用。小标本的固定期间为4~6小时,大标本为18~24小时或更久。
㈢根据病理学特殊检查(特殊染色和组织化学染色、免疫组织化学染色和原位
核酸分子杂交染色、电镜观测等)的需要,应选用其他合适的固定液进行固定
[参见后述口勺“(七)固定液的常用种类和制备。
㈣器官、组织固定的基本措施
[另参见本章第四节(病理标本日勺肉眼检查和组织学切片取材技术)]
1.食管、胃、肠、胆囊、膀胱等空腔器官:依规范措施剪开后,按其自然状态
平铺于硬纸板上(重点暴露黏膜面或内表面的病变处),并用大头针将标本边
缘处固定于纸板匕然后放入4%中性甲醛中固定(黏膜面或内表面朝向容器的I
液面,并覆盖薄层脱脂棉)。
2.肝、脾:由器官背面,沿其长轴每间隔1.5”.0cm纵向平行剖开,切成数
片。将每片肝或脾轻轻地平放于装有4%中性甲醛日勺容器中,容器底面衬以脱脂
棉。应防止标本弯曲和互相间的叠压。
3.肺叶:放入固定液中的肺叶漂浮于液面,需在肺表面覆盖薄层脱脂棉。必要
时从支气管注入适量4%中性甲醛。
4.肾:沿肾外缘中线朝肾门方向作一水平切面(深达于肾盏),再行固定。
5.淋巴结:先用4%中性甲醛固定1小时后,再沿其长轴切成数片(厚2
~3nim),继续固定。
6.骨组织:先锯成小片(若是长骨应作横向锯片),在4%中性甲醛中固定24
小时后,再进行脱钙。
7.微小组织或液体沉淀物:先用拭纸或滤纸妥为包裹(需用大头针扎牢),然
后放入专用小盒内进行中性饮甲醛固定,以防检材遗失。
8.凡进入固定程序的标本必须连带其对的无误的病理检查号(病理号)。
㈤多数固定液对人体有害,需要防护,必须在封闭的通风条件下进行操作。
因组织块的切取和固定:①由较大标本切取用于制作切片的组织块(取材)
时,应与标本日勺断面平行,组织块厚度一般为0.3cm(不应>0.5cm),面积一般
在广1.5X11.5以内,②切取组织块日勺形状,在充足包括肉眼病变的前提下尽
量规则些(例如方形、矩形、三角形等);由一种标本切取的多块组织的形状
有所不一样,便于蜡块与其对应切片的查对。③固定组织块的固定液量,一般
应为组织块总体积的5ro倍以上。④室内常温(25℃左右)下的固定期间为
3~24小时;低温(4℃)下的固定期间应延长。⑤固定组织块的容器要大某
些。⑥组织块固定期间需要间断地轻摇或搅动固定液以利于固定液的渗透。
(七)常用固定液
1.4%中性甲醛(10%中性福尔马林)固定液
甲醛(40%)100ml
无水磷酸氢二钠6.5g
磷酸二氢钠4.0g
蒸循水900nl
2.乙醇一甲醛(酒精一福尔马林,AF)固定液
甲醛(40%)100ml
95%乙醇900ml
[阐明]一般组织块经乙醇一甲醛固定1〜2小时后,即可移入95%乙醇内脱
水。
3.Carnoy固定液
无水乙醇60ml
氯仿30ml
冰醋酸10ml
[阐明]组织化学染色日勺常用固定液,组织经Carnoy液固定1〜2小时后,即
可移入无水乙醇中脱水。
4.Zenker固定液
升汞5.0g
重铭酸钾2.5g
硫酸钠1.0g
蒸饰水(加至)100ml
[阐明]配制本液时,先将升汞溶于蒸储水中、加温至40〜50℃溶解后,再加
入重格酸钾,最终加入硫酸钠,贮存待用。使用前加入5ml冰醋酸,混合,组
织块需固定12~24小时。切片染色前,需进行脱汞沉淀处理。
5.Bouin固定液
饱和苦味酸水溶液(约1.22%)75ml
甲醛(40%)25ml
冰醋酸5ml
[阐明]本液临用时配制。组织块置于Bouin液固定12〜24小时即可(小块组
织只需固定数小时)。经Bouin液固定的组织被苦味酸染成黄色,可用水洗涤
12小时后进入乙醇脱水(兼脱色)。不必将组织中的黄色除净(残存于组织中
的苦味酸无碍染色)
6.过碘酸一赖氨酸一多聚甲醛固定液(PLP)
A液:赖氨酸1.827g
蒸储水50ml
0.Imol/L磷酸盐缓冲液(pH7.4)50ml
B液:8%多聚甲醛水溶液100ml
[阐明]本液临用时配制:取A液3份、B液1份,混合后,加入过碘酸钠,
使液体终浓度为2%。组织块在4℃下固定36、54小时。木液对细胞构造和抗原
性保留很好。
7.B5(醋酸钠一升汞一甲醛)固定液
无水醋酸钠1.25g
升汞6.0g
蒸储水90ml
[阐明]将以上物质混合、溶解,使用前加入甲醛10ml。本液多用于固定淋巴
组织。染色前应进行脱汞沉淀处理。如不加甲醛祢为B4固定液(蒸储水为100
ml)o
8.丙酮固定液
冷丙酮(4℃)固定液用于酶组织化学染色。细胞标本的免疫组化染色也常用冷
丙酮固定10分钟。
二、常规石蜡包埋组织切片(常规切片)的制备
㈠组织块依序进行:①水洗,②脱水,③透明,④浸蜡,⑤包埋和⑥切片。
㈡组织切片制备及其HE染色过程中使用的乙醇、丙酮、二甲苯、石蜡等为
易燃、有毒物,必须专人管理,2m以内不得有明火,局部环境应有良好的通风
和消防设施。
㈢常规切片日勺手工操作(环节次序和各环节日勺持续时间)
1.水洗:用流水冲洗已经固定的组织块30min。
2.脱水(常温下)
(1)乙醇一甲醛(AF)液固定60~120nin
(2)80%乙醇60~120min
(3)95%乙醇I60~120min
(4)95%乙醇II60^120mm
(5)无水乙醇I60^120min
(6)无水乙醉H60~120min
(7)无水乙醇III60min
[注意事项]①未经充足固定的组织不得进入脱水程序。②用于脱水的试剂容
积应为组织块总体积的5〜10倍以上。③自低浓度乙醇向高浓度乙醇逐层移进
脱水。④脱水试剂应及时过滤、更换(500ml乙醇可用于500个组织块脱水:
加入硫酸铜的无水乙醛变蓝时,提醒需要更换)。⑤较大组织块的脱水时间长
于较小者,应将两者分开进行脱水。⑥组织置于无水乙醇内口勺时间不适宜过长
(以免硬化)。⑦丙酮脱水性能强,会使组织块过缩、硬脆,不适宜用以替代
无水乙醇。
3.透明
(1)二甲苯I20min
(2)二甲苯H20min
(3)二甲苯HI20min
[注意事项]①二甲苯的容积应为组织块总体积口勺5〜10倍以上。②组织块在
二甲苯中透明的时间不适宜过长(以防组织硬、脆),并依不一样种类组织及
其大小而异;组织展现棕黄或暗红色透明即可。③二甲苯应及时过滤、更换。
④组织经二甲苯适度处理后不显透明时,常提醒该组织时固定或脱水不充足,
应查找原因并妥善处理。
4.浸蜡
(1)石蜡I(45~50℃)60min
(2)石蜡H(56^58℃)60min
(3)石蜡HI(56^58℃)60min
[注意事项]①熔化石蜡必须有专人负责,必须在熔蜡箱内或水浴中(70
℃)进行,不得用明火加温。②熔蜡的容积应为组织块总体积的5〜10倍以
上。③组织块经二甲苯适度透明后方可转入浸蜡过程,应尽量减少将透明后组
织块表面的二甲苯带入熔蜡中。④浸蜡时间合适,过短时浸蜡不充足(组织过
软),过长时组织硬脆。⑤熔蜡应及时过滤、更浜。
5.包埋
(1)先将熔化的石蜡倾入包埋模具中,再用加热的弯曲钝头银子轻轻夹取已通
过浸蜡的组织块,使组织块的最大面或被尤其韦定处的组织面向下埋入喀蜡
中;应将组织块平正地置放于包埋模具底面的中央处;包埋于同一蜡块内口勺多
块细小组织应彼此靠近并位于同一平面上;腔壁、皮肤和黏膜组织必须垂直包
埋(立埋)。
(2)将与组织块有关的病理号小条置入包埋模具内熔蜡的一侧。
(3)待包埋模具内的熔蜡表面凝固后,即将模具移入冷水中加速凝固。
(4)从包埋模具中取出凝固的包埋蜡块(简称蜡快),用刀片清除组织块周围
的过多石蜡(组织块周围保留广2nlm石蜡为宜)。将包埋蜡块修整成为规则的
正方形或长方形。
(5)将病理号小条
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