《大熊猫主要寄生虫病监测技术规程》

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团体标准

T/CVMAXXXXX—XXXX

大熊猫主要寄生虫病监测技术规程

Technicalregulationsforsurveillanceonkeyparasitesingiantpandas

（征求意见稿）

在提交反馈意见时，请将您知道的相关专利连同支持性文件一并附上。

XXXX-XX-XX发布XXXX-XX-XX实

a中国兽医协会发布

大熊猫主要寄生虫病监测技术规程

1范围

本文件规定了监测目标、监测范围、采样对象与样品类型、采样时间、采样数量、样品检测方法、

检测结果与报告等内容和要求。

本文件适用于四川、陕西、甘肃等大熊猫主要分布区保护机构及全国饲养大熊猫的单位和研究机构

开展大熊猫常见寄生虫病的监测、流行病学调查等。

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文

件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

LY/T1959陆生野生动物疫病分类与代码

LY/T2015大熊猫饲养管理技术规程

LY/T2359陆生野生动物疫源疫病监测技术规范

LY/T2360野生动物疫病危害性等级划分

3术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。

3.1

大熊猫蛔虫病giantpandabaylisascariasis

大熊猫蛔虫病是由蛔科（Ascarididae）、贝蛔属（Baylisascaris）的西氏贝蛔虫（Baylisascaris

schroederi）寄生于大熊猫小肠及小肠相连的其它器官所引起的一种寄生性线虫病（参见附录A）。

3.2

蛔虫感染Baylisascarisschroederiinfection

蛔虫感染是大熊猫西氏贝蛔虫幼虫在大熊猫体内移行和成虫寄生于大熊猫肠道。

3.3

大熊猫足螨病choriopticmangeofthegiantpanda

大熊猫足螨病是由痒螨科（Psoroptidae）、足螨属（Ｃhorioptes）的大熊猫足螨（Chorioptespanda）

主要寄生于大熊猫头面部等皮肤表面所引起的一种体外寄虫病。

4监测范围

4.1野生种群

4

四川、陕西、甘肃等省的大熊猫自然栖息地。

4.2圈养种群

全国饲养大熊猫的单位。

5样品采集

5.1蛔虫采样种类

蛔虫卵、幼虫或（雌雄）成虫。

5.2螨虫采样种类

（第一或第二）若螨、（雌雄）成螨。

5.3采样时间

5.3.1野外大熊猫：蛔虫3个月采样1次。

5.3.2圈养大熊猫：蛔虫每2个月采样1次，每次连续采样三天，足螨每1个月采样1次。

5.4采样数量

采用95%置信区间，根据如下公式：

计算出的具有统计学意义的理论数值，其中n为抽样个数，CL为置信水平（即95%），N为群内个

体数，D为群中的阳性动物数，D=N×p，p为预设的最低流行率。

5.5样品运输和保存

大熊猫蛔虫和足螨检测样品的运输和保存具体操作，应符合附录B的规定。

6大熊猫蛔虫样品检测

6.1诊断依据

6.1.1流行病学史

大熊猫生活环境是否存在食物被粪便污染、圈养个体是否存在过往感染史。食物粪便污染或过往感

染史（参见附录C）。

6.1.2临床表征

6.1.2.1幼虫期

幼虫期临床症状参见附录D.1。

6.1.2.2成虫期

4

成虫期临床症状参见附录D.2。

6.1.3实验室检测

6.1.3.1病原学检测

1）粪便检查中检出蛔虫虫卵或成虫（参见附录E）。

2）呕吐物中查到蛔虫虫体。

6.1.3.2影像学检测

1）X线检测：胸片见肺门扩大、肺叶有点状、絮状或片状阴影；严重感染时腹部平片上除小肠充

气或有液平面以外可以看到肠腔内成团的虫体阴影或呈现平行的线状阴影。

2）超声检测：如蛔虫移行或寄生于胆囊或胆总管时，超声检测可表现为胆囊或胆总管内具有两条

平行的光带。

6.2诊断

根据流行病学、临床表征及实验室检查结果等予以诊断。

6.2.1蛔虫感染

同时符合本规程第6.1.1条和第6.1.3条。

6.2.2蛔虫病

6.2.2.1疑似病例

同时符合本规程第6.1.1条和第6.1.2条中任一条。

6.2.2.2临床诊断病例

符合疑似病例和第6.1.3.2条中任何一条。

6.2.2.3确诊病例

符合疑似病例和第6.1.3.1条中任何一条或符合临床诊断病例和第6.1.3.1条中任何一条。

7大熊猫足螨样品检测

7.1病原学检测方法

7.1.1主要器具及材料：

光学显微镜、载玻片、盖玻片、镊子、甘油、无水酒精、恒温培养箱。

7.1.2样品采集与处理：

根据临床症状（参见附录F）可以做出初步诊断。确认时可以取疑似虫体、痂皮、皮屑，或者刮取

感染部位的赘生物，浸泡于无水酒精中。

7.1.3直接镜检法（参见附录G和H）：

4

滴加1滴500mL/L甘油透明液于载玻片上，挑取一定数量的疑似虫体或病理样品置于透明液中，盖

上盖玻片。放置30min，置于光学显微镜下观察。

7.1.4温水检查法：

将病料没入40℃~45℃的水中，置于37℃恒温箱内。在温热水的作用下，螨虫由皮屑内爬出。集成

团而沉入水底，1~2h后，将浸过病料的液体倒出，沉渣倾入表皿中镜检。

7.1.5螨虫浓集法

为了在较多的病料中，检出其中较少的虫体，而提高检出率，可采用浓集法。此法先取较多的病料，

置于试管中，加入10％NAOH溶液，浸泡过夜（如急待检查右在酒精灯上煮数分钟），使皮屑溶解，虫

体自皮屑中分离出来，而后待其自然沉淀（或以2000转/分离心沉淀5分钟），虫体即沉入管底，弃去

上层液，吸取沉渣检查；或向沉渣中加入60％硫代硫酸钠溶液，直立待虫体上浮，再取表面液体检查。

7.2结果判定

用光学显微镜对取样标本片进行仔细检查，综合临床观察结果。凡发现虫卵、幼螨、若螨、成螨（任

一形态）均为阳性。

7.3记录与报告

检测结果汇总的报告表见附件I。

5

附录A

(资科性附录)

蛔虫病原学

A.1种类

大熊猫西氏贝蛔虫（Baylisascarisschroederi）是大熊猫蛔虫病病原，其幼虫存在于大熊猫的肝

肺等脏器，成虫寄生于大熊猫肠道，可引起消化道西氏贝蛔虫病。

A.2形态

A.2.1虫卵

西氏贝蛔虫受精卵呈黄色至黄褐色，椭圆或长椭圆形，两端钝圆，基本对称，长67.50μm-83.70

μm，宽54.00μm-70.07μm；卵壳由3层膜构成，由里到外依次为薄而透明的内膜、厚而透明的几丁

质中膜和蛋白质外壳；外壳布满棘状突起，电镜下呈圆锥形，是区别于其它蛔虫卵的主要特征。

A.2.2幼虫

2期幼虫虫体细长，头端突起，三片唇明显，口腔狭窄，食道呈柱状，中间相对较细，食道两端可

见粒状的排泄细胞，肠道似线样，尾部侧面可见直肠及肛孔。3期幼虫较2期有所增大，侧翼膜增宽且

边缘变薄，食道靠背侧前端呈漏斗状结构，神经环、排泄孔清楚可见，肠腔为圆形，假体腔两侧可见椭

圆形的排泄细胞柱，排泄细胞柱的中央有排泄管，表皮具横纹。

A.2.3成虫

西氏贝蛔虫成虫寄生于大熊猫肠道，虫体粗大，呈白色或灰褐色，头端具3片唇，一片背唇和两片

亚腹唇，唇内缘含细小的唇齿，头乳突和头感器与猪蛔虫的相似。雌虫：体长139.00mm-189.00mm，

最宽处2.50mm-4.00mm；唇部与体部交界处宽为0.43mm-0.62mm；排泄孔距头端0.90mm-1.20mm，颈

乳突距头端约1.30mm，神经环距头端0.85mm-1.02mm；食道长5.50mm-7.80mm；阴门位于虫体前端，

距头端31.00mm-43.50mm；肛门宽0.60mm-0.86mm，尾长0.78mm-1.075mm；直肠长0.65mm-0.83mm；

尾感器位于距尾端0.14mm-0.23mm处的两侧。雄虫：体长76.00mm-100.00mm，最宽处为

1.40mm-1.90mm，尾部向腹侧弯曲；唇部与体部交界处宽为0.40mm-0.43mm；排泄孔距头端0.78mm

-0.93mm，颈乳突距头端约0.94mm，神经环距头端0.65mm-0.80mm；食道长4.80mm-6.40mm，最大宽

6

处为0.48mm-0.60mm；泄殖腔距尾端0.37mm-0.46mm；泄殖腔四周有约0.16×0.16mm2-0.25×0.25mm2

面积的隆起，并在泄殖腔上、下方各具一带鳞片状的小棘，上方由8-10列新月状突起小棘组成，下方

由11-14列半圆形突起小棘组成；泄殖腔两侧各具一个单乳突，自此向前共具52-60对泄殖腔前乳突，

分布于虫体后1/5内；交合刺一对，等长，末端钝圆不分枝,尾端向腹面弯曲，在肛门前、后有多对乳突，

生殖器官为单管型，有一对镰刀状可伸缩的交合刺。

A.3生活史

西氏贝蛔虫是直接发育的土源性寄生虫，其生活史可大致分为自由生和寄生两个阶段，前者包含虫

卵胚胎期、虫卵幼虫1期和虫卵幼虫2期（感染性期），后者包含组织移行3期和4期幼虫以及肠道5

期幼虫和成虫。由于异宿主（如小鼠）感染试验证实西氏贝蛔虫无法完成上述生活史，因此大熊猫是西

氏贝蛔虫的专性宿主。在自然条件下，西氏贝蛔虫虫卵经过4d-5d便可发育成1期幼虫，经9d便可形

成感染性2期幼虫；含感染性2期幼虫虫卵经大熊猫食入后，在肠道孵出幼虫，幼虫穿过肠壁，经血液

和组织移行，逐步蜕皮，由2期变成3期、4期及5期幼虫并最终回到肠道，发育形成雌、雄异体的成

虫，成虫交配、产卵；通常整个生活史的完成只需77d-93d。另外，西氏贝蛔虫虫卵具很强的抗逆能力，

新鲜虫卵在-10°C处理30d后，仍可保持活力，因此自然环境中的虫卵密度极大；待条件适宜时，大量

虫卵可发育为感染期虫卵，侵袭大熊猫，造成极高的感染率。

7

附录B

（规范性附录）

样品运输和保存

B.1样品编号和记录

B.1.1编号

样品进行统一编号。监测人员在送检样品的同时，须提供样品编号。编号采用数字和字母形式进行

编号；采用层次编码法，由5层17位代码组成。第一层用三位字母表示地点，以采样地点标准名称为

准，超过3个字的，取前三个字的首字母；第二层用六位数字表示时间（年月日）；第三层用一位字母

表示大熊猫谱系号、性别和年龄，第四层用1-2位字母表示样品类型，第五层用四位数字表示样品序号。

样品编号的写法：时间（年月日）+地点（拼音首字母）+谱系号（呼名）、+样品类型（皮屑P；

痂皮J；感染部位的赘生物A）+样品序号（四位数）例如：卧龙2020年1月1日成年大熊猫华

美皮屑样品1份，20200101WL/HM/P0001。

B.1.2记录

样品管（袋）外标记清楚样品编号、采样时间与地点、样品类型等信息，使用铅笔或永久记号笔标

记，避免潮湿或低温保存造成记号标记不清。

样品采集时需要在样品记录表上记录样品编号、采样时间、采样地点、大熊猫性别和年龄、样品种

类等信息。

B.2样品运输与保存

B.2.1运输

皮肤样品应立即运送至实验室检测或于4℃保存，在4℃最多放置12h。在运输时应使用2℃~8℃样

品保温运输箱在12h内运送至目的地。

B.2.2保存

样本应密封于防渗漏的容器中保存，如塑料袋或瓶。包装材料应防水、防破损、防外渗。必须在内

包装的主容器和辅助包装之间填充充足的吸附材料，确保能够吸附主容器中所有的液体。多个主容器装

入一个辅助包装时，必须将它们分别包裹。外包装强度应充分满足对于其容器、重量及预期使用方式的

要求。包装好的样品应置于保温容器中运输，一般使用保温箱或保温瓶，保温容器应密封，防止渗漏。

7

附录C

(资料性附录)

流行病学

C.1流行概况

西氏贝蛔虫感染大熊猫的现象十分普遍，在全国各大熊猫自然栖息地（如四川的青川、北川、汶

川、平武、九寨沟、宝兴、天全以及陕西的佛坪、太白、洋县、宁陕和甘肃的文县等）及人工饲养或繁

育机构均有发现。在野生大熊猫中，其感染率更是多达50%，有时甚至达到100%，是造成野生大熊猫

死亡的主要原发性和继发性病因之一。野生大熊猫感染西氏贝蛔虫的情况，按时间顺序统计如下表。

历年大熊猫西氏贝蛔虫感染情况统计（1974—2013）

时间地点感染率（%）感染强度a

1974-1986四川1002304

1977四川69.2b2236

1981四川—3204

1982-1986陕西91.71-619

1985四川10037-1605

1985-1988四川、甘肃56.2—

1987陕西100b—

1994四川78.0—

2006-2008四川、甘肃、陕西54.0b—

2012-2013四川75.3b—

a范围表示感染强度，单个数值则表示最大感染量；

b虫卵感染率；

“—”无记录信息。

C.2流行环节

C.2.1传染源

能排出受精蛔虫卵的西氏贝蛔虫是该病的传染源。

C.2.2传播途径

在流行区，粪便蛔虫卵污染食物、水源、土壤和地面，大熊猫经口吞入感染期蛔虫卵，或者误食被

虫卵污染的食物而感染。另外，虫卵附在大熊猫被毛上被带进野外栖息地或人工圈养环境，可污染其生

存环境以及人工圈养的室内外地面、土壤、食具、清扫工具以及排水道等。野生鼠类、鸟类等动物和蝇

及蜚蠊等昆虫可机械性播散蛔虫卵。

8

C.2.3易感群体

无论野生还是圈养大熊猫均对西氏贝蛔虫普遍易感，大熊猫种群感染的特点是野生种群高于人工圈

养种群，幼年高于成年。

C.3流行因素

蛔虫生活史简单，不需要中间宿主，为直接发育型；雌虫产卵量大且虫卵对外界环境抵抗力强；因

此虫卵可以广泛存活在土壤和周围环境，造成流行。该因素也是影响大熊猫蛔虫病成为流行最广泛、感

染率最高的肠道寄生虫病的重要原因之一。

9

附录D

(资料性附录)

临床表现

D.1幼虫致病

D.1.1西氏贝蛔虫幼虫所致肺炎

西氏贝蛔虫幼虫在肺内移行，患病大熊猫可出现发热、咳嗽、嗜酸性粒细胞增多等临床表现。

D.1.2异位寄生

重度感染时，幼虫可通过肺毛细血管、左心进入大循环，侵入一些组织和器官，如肝、胰腺、脾脏

等脏器，引起相应部位的病变。

D.2成虫致病

D.2.1肠蛔虫病

间歇性脐周疼痛或上腹部绞痛是肠蛔虫病的特点，其他症状和体征还有腹胀、腹部触痛、消化不良、

腹泻或便秘以及食欲不振、呕吐等。患病大熊猫可出现神经沉郁、被毛凌乱、消瘦、贫血，偶可出现异

嗜症，重度感染者可出现生长发育障碍，甚至死亡。

D.2.2胆道蛔虫病

系肠内蛔虫进入胆管所致。临床表现为阵发性上腹部疼痛、烦躁不安。若虫体完全进入胆管甚至胆

囊，疼痛反而减轻，但炎症现象进一步发展，则表现为明显的固定压痛，并有肌紧张、反跳痛，伴有发

热、寒战或黄疸。

D.2.3蛔虫性肠梗阻

临床特点为腹部阵发性绞痛，呕吐并常吐出蛔虫，停止排气和排便。梗阻形成后，疼痛可逐渐加剧，

持续数分钟，间歇短时可再出现。多数病例在脐部右侧可触及软的、无痛的、可移动团块或香肠形条状

物，阻塞多见于回肠部。早期可有低热、白细胞增多，晚期可出现严重脱水或酸中毒，甚至休克。

D.2.4蛔虫性肠穿孔

西氏贝蛔虫可使病变或正常的肠壁发生穿孔，病变的肠壁如十二指肠溃疡、肠梗阻，肠伤寒等临床

病变表现为亚急性腹膜炎，也可形成弥漫性或局限性腹膜炎。腹腔穿刺有渗出液，并可能检出蛔虫卵。

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临床表现发热不明显，伴有呕吐，腹胀逐渐明显，腹部触诊有柔韧感。

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附录E

(规范性附录)

粪便检查

E.1漂浮法

饱和氯化钠或硫酸镁漂浮法操作步骤：a）将氯化钠或硫酸镁缓慢加入盛有沸水的容器内，不断搅

动，直至不再溶解为止，冷却后配制饱和氯化钠或硫酸镁溶液备用；b）挑取5-10克的竹叶或竹节便于

圆形直简瓶（高约3.5cm，直径约2cm）中；c）加入少量饱和溶液，调匀后再缓慢加入饱和溶液，当

液面接近瓶口时改用滴管滴加，使液面略高于瓶口又不溢出为止；d）在瓶口覆盖一载玻片，静置

15~20min后，将载玻片提起并迅速翻转，镜检。

E.2改良加藤厚涂片法

改良加藤厚涂片法操作步骤：a）透明液配制量取蒸馏水和纯甘油各100ml,混合后再加入3%孔雀

绿或亚甲基蓝1mL，储瓶备用；b）取亲水玻璃纸（25mm×40mm×40μm）放入透明液中浸泡24h以上

即可使用；c）将尼龙娟片（8cm×8cm，80目/时）置于粪便标本上，用刮棒自尼龙绢片刮取粪便使细粪

渣通过尼龙绢片滤出至绢片表面；d）将定量板（圆台孔上底半径3mm，下底半径4mm，高1mm，容

积为38.75mm3，每孔所容粪便重量为41.75mg）小孔朝上置于载玻片中部，用刮棒将尼龙绢片表面的

细粪渣填入圆台形孔中，填满全孔并抹平；e）垂直向上移去定量板，取1张浸泡好的亲水性透明玻璃

纸，抖掉多余浸泡液，盖在粪样上，用一张载玻片于亲水性透明玻璃纸上重直均匀用力压制，使粪便均

匀展开至亲水性透明玻璃纸边缘；f）静置0.5h~1h使之透明后镜检，记录观察到的全部虫卵数。在流

行病学调查中，将每片的全部虫卵数乘以24即得每克粪便虫卵数（EPG）。

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附录F

（规范性附录）

足螨病临床症状

患病大熊猫皮屑脱落。患处脱毛，皮肤发红，增厚，有散在小结节，水泡或皮痂，被毛常被擦断

而显得稀疏、剧痒不安。常用前后肢交替抓痒，特别是被毛较稠密的部位如背部、颈部、头部和耳根等

处。在眼眶周围易见脱毛，食欲时好时坏，时间一长，动物进行性消瘦。天气暖和时，仔细观察，可见

大量足螨从被毛密集区爬到毛尖上，常多个聚集在一起成团状，肉眼观察虫体呈褐色，大熊猫活动时，

常常又从毛尖爬回毛根。除螨直接叮咬导致熊猫肌体损害外，叮咬所形成的结节和水疱破裂还可引起继

发性细菌感染。

11

附录G

（规范性附录）

足螨形态与分类

G.1概述

大熊猫足螨（Chorioptespanda），又称熊猫食皮螨，隶属节肢动物门（Arthropoda）、螯肢动物亚

门（Chelicerata）、蛛形纲（Arachnoidea）、蜱螨亚纲（Acari）、真螨目（Acariformes）、痒螨科（Psoroptibae）、

足螨属（Chorioptes）。

雌螨：体近圆形，长326-347μm，最宽处为288-298μm。颚体较小。螯肢粗壮，螯钳上具有发达的

齿。体背面前方无1对顶毛。体前部具背板一块，呈长钟形。背板后缘下外侧具1对长约245μm的感

毛和1对短毛。感毛外侧有1对肩毛。背面中部至体末端共有8对毛，其中位于亚末端1对最长。体表

背腹两面均具明显的表皮纹。各足均由6节组成，各足基节均具明显的角化突，足Ⅱ基节具有1对胸毛，

足Ⅲ基节和转节外侧的体壁上具有1根较长的毛。足Ⅲ不发达，其基节内侧具1根毛，跗节上具2根最

长的毛。足IV细长，跗节上也具1根长毛。除足Ⅲ外，足I、II、IV跗节末端均具1个由不分节的短

柄上生出的膜状前跗节。生殖孔开口于足II。Ⅲ基节角化突之间，孔成“n”型。孔两侧各具1个角化

突。角化突内侧各具1根毛，生殖孔下缘两侧又具1对纵生的角化突，其外侧各具2个微小孔，孔的后

下侧具1对毛。肛板位于体末端，肛侧毛位于肛孔前缘的水平线上。肛板外侧具2对毛，分列两侧。

雄螨：长272-288μm，宽261-277μm。体末端具一对后腹叶突。体表的表皮纹明显，颚体似雌螨。

背板2块，后背板似矩形，边缘呈不规则形状，后背板向后延伸，盖住整个后腹叶突。后背板上具2

对刚毛，1对位于板的亚中部，另1对位于板的后侧角。后腹叶突末端有5根毛。足Ⅲ基节间有1块椭

圆形的生殖板。板中央有插入器，生殖板两侧各具2个微小圆孔和1根毛。足Ⅲ、IV基节内侧各具1

根毛。肛孔两侧具一对肛侧吸盘。足Ⅲ发达，足IV退化变小。各足具膜状前跗节，足Ⅲ跗节另具一长

鞭毛。

第二若螨：体及颚体同成虫，但略小，长262-279μm，宽232-251μm。背板似雄螨。感毛长约190μm。

体中部至末端体壁上具有6对毛。其它同雌螨。无生殖孔和角突，仅在足Ⅲ和IV基节内侧具4对毛。

肛板两侧缘具4对毛，其中1对很长。足IV细小，不发达。足Ⅲ附节的2根长毛及足IV附节长毛其

长度各为720μm、410μm和200μm。

第一若螨：形态与第二若螨极为相似。不同点是：1）体较第二若螨小，长228μm-236μm，宽208μm

-213μm；2）足Ⅲ基节间微小孔仅1对；3）小孔附近仅1对毛，位于足Ⅲ和足IV基节的内侧。

幼螨：体近圆形，长187μm-193μm，宽155μm-164μm。颚体似若虫，具有一块前背板，体中部至末端

具5对小毛，体腹面足Ⅲ基节内侧仅1对毛，足Ⅲ跗节上2根长毛，缺肛侧毛。

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G.2生物学特性

发育过程中经历幼螨、若螨（雄螨还分为若一螨和若二螨）、成螨三个发育阶段。雌螨产卵于患

部皮肤周围，一般虫卵经过2d~3d孵出幼螨。幼螨采食24h~36h后进入静止期而蜕皮成为若一螨，若

一螨采食24h经过静止期蜕皮成为雄螨或若二螨，雄螨通常以其肛吸盘与若二螨躯体后部的瘤状突起

连接，之后若二螨蜕皮成为雌螨，体后瘤状突起消失。雌雄螨进行交配。大熊猫足螨的整个发育过程需

要9d~10d。

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附录H

（资料性附录）

大熊猫足螨的形态示意图

图H.1大熊猫雄性足螨（杨光友摄）

图H.2大熊猫雌性足螨（杨光友摄）

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附录I

（资料性附录）

大熊猫足螨检测结果汇总报告表（表格样式与填报示例）

填报日期（单位公章）：联系人：办公电话：手机：

阳性样品检测方法、结果

样品信息

检测方法检测结果

监测对象

编号来源地性别、年龄类别病原分离阴性阳性

…碧峰峡雌性成体皮屑√