乙型肝炎病毒

乙型肝炎病毒乙型肝炎病毒（hepatitisbvirus,hbv）属于嗜肝dna病毒科（hepadnaviridae）正嗜肝dna病毒属（orhtohepadnavirus），是乙型肝炎的病原体。hbv感染是全球性公共卫生问题，估计全世界hbv携带者高达3.5亿。我国人群hbv携带率约为10%，hbv携带者超过1.2亿。（一）生物学性状1.形态与结构电镜之下hbv病毒感染患者血清中可知三种形态的病毒颗粒，即为小球型颗粒，小球型颗粒和管形颗粒。（1）大球型颗粒：又称为dane颗粒，是有感染性的完整的hbv，直径42mm，电镜下呈双层结构的球型颗粒。外层相当于病毒的包膜，由脂质双层和病毒基因编码的包膜蛋白组成，包膜蛋白包括hbv表面抗原（hepatitisbsurfaceantigen,hbsag）,前s1抗原（pres1）和前s2抗原（pres2）。内层为病毒的核心，相当于病毒的核衣壳，呈20面体立体对称，核心表面的衣壳蛋白为hbv核心抗原（hepatitisbcoreantigen,hbcag）。病毒核心内部含病毒的双链dna分子、dna多聚酶等。（2）小球型颗粒：直径为22nm，为一种中空颗粒，成分为hbsag,就是hbv在肝细胞内激活时产生短缺的hbsag加装而变成，不不含病毒的dna及磷酸酯酶，并无感染性。这种小球型颗粒大量存有于血液中。（3）管形颗粒：由小球型颗粒聚合而成，颗粒长100~500nm，直径22nm，成分与小球型颗粒相同，具有与hbsag相同的抗原性。2.基因结构与编码蛋白hbvdna分子为不能全然双链环状dna，两链长短不一。短链就是负链，约存有3200个核苷酸，短链为正链，就是短链长度的50%~100%。hbvdna负链含4个对外开放写作侧边（orf），分别称作s,c,p,x区。其中s区存有3个启动子，分别编码主蛋白（含hbsag）、中蛋白（含pres2ag和hbsag）和大蛋白（含pres1ag、pres2ag、hbsag）。c区中存有2个启动子，分别编码hbeag和prec蛋白和含hbcag的c蛋白（衣壳蛋白）。p区最久，约占到基因组的75%以上（与其他区重合），编码dna磷酸酯酶（不含反转录酶和rna酶h活性）。x区编码含154个氨基酸的碱性多肽（hbxag）。rres2和pres1为病毒的主要溶解蛋白，可以与肝细胞病毒受体融合。hbxag可以反式转化成细胞内的原癌基因及hbv基因，与肝癌的出现、发展有关：长链的裂口亦坐落于此区。3.培养特性黑猩猩是hbv的易感动物。hbv的组织培养尚未成功，目前采用的是dna转染细胞培养系统，将病毒dna导入肝癌细胞株，使这些细胞株可分泌hbsag、hbcag、hbeag和dane颗粒。dna转染细胞培养系统可用于抗hbv药物的研究。4.抵抗力hbv对外界环境的抵抗力较强，对低温、潮湿、紫外线均存有耐受性。不被70%乙醇灭活。高压蒸汽杀菌法、100℃冷却10分钟可以灭活hbv，0.5%过氧乙酸、5%次氯酸钠和环氧乙烷等常用于hbv的消毒。（二）致病性与免疫性1.传染源主要传染源为乙型肝炎患者或无症状hbv携带者。乙型肝炎患者潜伏期、急性期或慢性活动初期，其血清都存有传染性。hbv携带者因无症状而难于被察觉到，做为传染源的危害性比患者更大。2.传播途径hb的传播途径主要有3中：①血液和血制品传播：极微量带hbv大球型颗粒的血经微小伤口进入人体即可导致感染。②垂直传播：多发生于胎儿期和围生期。hbv也可通过哺乳传播。③性传播及亲切接触传播：从hbv感染者的精液和阴道分泌物中可检出hbv，hbsag阳性的配偶较其他家庭成员更易感染hbv，表明hbv可以经性途径传播。3.病原体机制与免疫系统机制hbv的病原体机制尚不全然确切。目前指出：免疫病理反应以及病毒与宿主细胞间的相互作用就是肝细胞受损的主要原因。（1）细胞免疫及其街道的免疫病理反应：病毒抗原致敏的杀伤性t细胞（ctl）是清除hbv的重要因素。细胞免疫清除hbv的途径有：①特异性ctl直接杀伤靶细胞。②特异性t细胞分泌的多种细胞因子发挥抗病毒效应。③ctl诱导肝细胞凋亡。然而，特异性ctl介导的细胞免疫在清除病毒的同时又可以导致肝细胞损伤，过度的细胞免疫反应可引起大面积的肝细胞损伤，导致重症肝炎。若特异性细胞免疫功能低下则不能有效清除病毒，病毒在体内持续存在而形成慢性肝炎。（2）体液免疫及其激酶的免疫病理反应：hbv感染科诱导集体产生抗炎-hbs、抗炎-pres1和抗炎-pres2等特异性抗体，这些保护性中和抗体可以轻易去除血循环中游离的病毒，并切断病毒对肝细胞的粘附促进作用。然而hbsag及抗炎-hbs可以构成的免疫系统复合物，引致ⅲ型超敏反应，如果对免疫系统复合物大量沉积于肝脏内，可以引致急性肝发炎，临床表现为重症肝炎。（3）自身免疫反应引起的病理损害：hbv感染肝细胞后，细胞膜上除含有病毒特异性抗原外，还可引起肝细胞表面自身抗原发生改变，暴露出肝特异性性脂蛋白抗原（liverspecificprotein,lsp），导致免疫病例损伤。（4）免疫耐受与慢性肝炎：机体对hbv的免疫系统的免疫耐受就是引致hbv持续性病毒感染的关键原因。当hbv感染者特异性细胞免疫和体液免疫处在较低水平或全然缺位，机体既无法有效率的去除病毒，也无法产生有效率的免疫系统接收者炮弹靶细胞，病毒与宿主之间的“和平共处”，构成免疫耐受，临床上整体表现为无症状hbv携带者或慢性持续性肝炎。（5）病毒变异与免疫逃逸：hbvdna的4个orf区均可发生变异，其中s基因、pres基因及c基因的变异较为重要，这些变异可导致病毒的抗原性和机体特异性免疫应答改变。例如：s基因编码的“a”抗原表位基因发生点突变或插入突变，插入抗原性改变或抗原位点丢失，导致抗-hbs不能与之结合或亲和力降低，从而使hbv逃避体液免疫的监视与中和作用。4.hbv余原发性肝癌hbv病毒感染与原发性肝细胞癌存有密切关系。hbsag携带者出现原发性肝癌的危险性比正常人低217倍。肝癌细胞染色体中存有hbvdna的资源整合，资源整合的hbv基因片段存有50%左右为x基因片段。x基因编码的x蛋白可以反式转化成细胞内原癌基因或生长因子基因等。（三）微生物学检查法hbv病毒感染的实验室确诊方法主要就是检测血清标志物。hbv的血清标志物主要就是未知抗原抗体系统和病毒核酸等。1.hbv抗原、抗体检测主要用elisa法检测hbsag、抗-hbs、hbeag、抗-hbe及抗-hbc（俗称“两对半”），必要时也可检测pres1和pres2的抗原和抗体。（1）hbsag和抗炎-hbs：hbsag就是机体病毒感染hbv后最先发生的抗原，就是hbv病毒感染的标志之一，就是甄选采血员的必验指标。hbsag阳性载于急性乙型肝炎、慢性乙型肝炎或无症状携带者。急性乙型肝炎恢复正常后，通常在1~4个月内hbsag消失，hbsag阳性持续6个月以上则指出已向慢性肝炎转变。无症状hbv携带者可以长期hbsag阳性。抗炎-hbs就是hbv的特异性中和抗体，载于乙型肝炎恢复期、既往hbv感染者或注射hbv疫苗者。抗炎-hbs的发生则表示机体对hbv病毒感染存有免疫力。（2）hbeag和抗-hbe：hbsag与hbvdna多聚酶的消长基本一致。hbeag阳性提示hbv在体内复制，有较强的传染性。若持续阳性则提示有发展成慢性乙型肝炎的可能。如hbeag转为阴性，表示病毒停止复制。抗-hbe阳性表示hbv复制能力减弱，传染性降低。但在prec基因发生变异时，由于变异株的免疫逃逸作用，即时抗-hbe阳性，病毒仍大量繁殖。（3）抗炎-hbe：抗炎-hbe产生晚，滴度低，持续时间短，几乎所有急性期病例均可验出。抗炎-hbcigm阳性提示信息hbv处在激活状态，具备弱的传染性。抗炎-hbcigg在血液中持续时间较长，是感染过hbv得标志，检出低滴度的抗-hbcigg提示既往感染，高滴度提示急性感染。hbcag阳性表示病毒颗粒存在，具有传染性，但由于其仅存在于肝细胞内，不易在血清中检出。2.血清hbvdna检测应用领域核酸杂交技术，床柜pcr技术或荧光定量pcr技术可以轻易检测hbvdna，这些方法特异性弱，敏感性低，可以测到极微量的病毒。3.血清dna多聚酶检测可判断体内是否有病毒复制，但近年来已被检测hbvdna所取代。（四）预防原则1.一般预防措施对患者的用具严格消毒，即时消毒处理其分泌