酶-影响酶促反应的因素(生物化学课件)

pH延迟符号pH对酶反应速度的影响pHpH对酶促反应速度的影响，通常为一“钟形”曲线，即pH过高或过低均可导致酶催化活性的下降酶催化活性最高时溶液的pH值就称为酶的最适pH

选择合适的缓冲液保持酶的相对稳定和保持高活性。考点pH对酶促反应速度的影响，是因为pH改变了酶分子中必需基团的解离状态，因此影响到活性中心的空间构象，进而影响酶的活性。此外底物和辅酶的解离状态也受环境pH的影响，从而影响酶与底物的结合，影响酶发挥催化作用不同酶的最适pH胃蛋白酶淀粉酶胆碱酯酶pH酶的活性0246810人体内大多数酶的最适pH在6.5-8.0之间。胃蛋白酶：1.8，肝精氨酸酶：9.8。一些酶的最适pH值酶最适pH胃蛋白酶1.8过氧化氢酶7.6胰蛋白酶7.7延胡索酸酶7.8核糖核酸酶7.8精氨酸酶9.8碱性磷酸酶10.51、在做体外实验时，必须在反应液中加入足量的适宜缓冲液，以维持反应体系中pH不发生显著变化。2、使用酶类药物时，要注意pH的影响，如胃蛋白酶就和稀盐酸配合使用，不能和碱液（小苏打）混用。应用：底物浓度延迟符号

在其他因素不变的情况下，底物浓度对反应速度的影响呈矩形双曲线关系。底物浓度对酶反应速度的影响

vVmax0.30.2Vmax20.1012345678[S]KmVmax[S]Km+[S]V=当[S]很低时[S]

与v成比例——一级反应当[S]较高时[S]与v不成比例——混合级反应当[S]很高时[S]，v不变——零级反应

在酶促反应中产物的生成量与ES复合物的浓度呈正比。当底物浓度很低时，酶的活性中心没有全部与底物结合，增加底物浓度，由于中间产物生成增多，产物的生成也增加，故反应速度加快。当底物浓度增高到一定浓度时，酶的活性中心已被底物饱和，此时再增加底物浓度，中间产物不再增加，反应速度趋于恒定。K1K3K21913年前后Michaelis和Menten对底物浓度与酶促反应速度的关系做了研究，推导出酶促反应的基本公式，称米氏方程式。（一）米－曼氏方程式LeonorMichaelis（1875－1949）Mau

Menten

（1879－1960）[S]：底物浓度V：不同[S]时的反应速度Vmax：最大反应速度(maximumvelocity)Ｋm：米氏常数(Michaelisconstant)V=Vmax[S]Km+[S]考点（二）Km与Vm是重要的酶促反应动力学参数1.Km等于酶促反应速度为最大反应速度一半时的底物浓度。当反应速率为最大反应速率一半时：Km=[S]2=Km+[S]VmaxVmax[S]VmaxV[S]KmVmax/2考点

2.Km意义：（1）Km是酶的特征性常数之一，Km只与酶的结构、催化的底物及反应环境（如pH、温度）有关,与酶的浓度无关。可判定催化同一化学反应的酶是同工酶还是同一种酶。（2）Km可近似表示酶对底物的亲和力（反比），同一酶对于不同底物有不同的Km值。可确定酶催化的最适底物或天然底物。激活剂延迟符号激活剂(A)对反应速度的影响

非必需激活剂：有些激活剂不存在时，酶仍有一定的催化活性

凡是能提高酶活性的物质都称为酶的激活剂。其中大多为金属离子，如Mg2+、K+、Mn2+

，少数为阴离子如Cl-

，也有的为有机化合物，如胆汁酸盐。激活剂分为必需激活剂和非必需激活剂。

必需激活剂：对酶促反应不可缺少，与酶、底物结合参加反应酶浓度延迟符号

酶促反应的速度常常是在一定的条件下，在规定的时间内，测定其底物消耗量或产物的生成量来表示，即用反应系统中产物的生成量（或底物的消耗量）对反应时间的变化率来表示。影响因素包括：考点底物浓度、酶浓度、pH、温度、抑制剂、激活剂等。※研究一种因素的影响时，其余各因素需恒定。影响酶促反应速度的因素

酶促反应速度取其初速度，即底物的消耗量很小（一般在5﹪以内）时的反应速度。酶促反应速度以“ν”表示，单位是：浓度/单位时间（分、秒等）。102030405060min产物生成量酶反应进程曲线酶浓度对反应速度的影响V[E]

当底物浓度大大超过酶的浓度时，酶被底物饱和，反应速度与酶的浓度变化成正比。考点关系式为：

V=K[E]酶浓度对反应速度的影响温度延迟符号

温度对酶促反应速度存在两方面的影响。升高温度一方面使酶促反应速度加快；同时也使酶蛋白变性加速，使反应速度减慢。综合这两方面因素，使酶促反应速度最快时的环境温度称为酶的最适温度。温血动物体内酶的最适温度多在35-40℃之间。温度对反应速度的影响双重影响考点

此酶是从水生栖热菌ThermusAquaticus（Taq）中分离出的热稳定性DNA聚合酶，用于PCR反应。

TaqDNA聚合酶：最适温度是70--75℃，可耐受100℃高温在80℃时，酶活性几乎完全丧失，酶促反应速度为零。但也有少数酶能耐受高温(1)酶在干燥状态下，耐温度变化的能力较强，故一般酶制剂为干粉状。(2)低