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DB21Ruleforevaluationofresistancetowebblotchinpeanut辽宁省市场监督管理局发布12花生抗网斑病鉴定技术规程本标准规定了花生抗网斑病（PhomaarachidicolaMarasasP离、接种体制备、室内抗性鉴定、田间抗性鉴定、病情调查、抗性评价、鉴定凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）NY/T2391农作物品种区域试验与鉴定规程GB/T6682分析实验室用水规格和试验本标准所用试剂在未加说明时均采用分析纯试剂。实验室用水应符合GB/T6682中规定的三级3.3恒温培养箱28+2）℃。34病原物分离与接种体制备4.1病原物分离子悬浮液涂布于水琼脂平板上，用接种针挑取单孢置于马铃薯葡萄糖（PDA）培养基上，26℃培养箱中暗培养，经观察菌落和孢子形态结合ITS序列比对，鉴定为花生茎点霉菌(P.arachidicolaMarasas.Pauer&Boerema)，致病性测定后确定为供接种用菌株。于4℃条件下保存，或20%甘油中-40℃条件下4.2接种体制备8W×3）培养10d~20d。用无菌解剖刀于超净工作台中刮取病菌的分生孢子器，置于装有少量无菌水的5.1室内离体叶片准备在长宽高为10cm×10cm×8cm的花盆中播种籽粒饱满的花生种子3粒，定期浇水，于每天26℃、12h5.2接种用8号水粉笔沾取孢子悬浮液均匀涂抹于离体叶片，直至整片复叶涂满孢子悬浮液，用6号自封袋5.3接种后管理4将接种后的离体叶片放置于每天26℃、12h光暗交替的植物培养箱中5.5调查方法5.6病情分级013579抗性鉴定圃设置在具备良好的自然发病环境条件、灌溉鉴定材料播种时间、栽培管理与大田生产相同，整个生长季不5在接种期如遇干旱天气，应及时进行田间浇灌，确保病害发013579初次鉴定时表现为免疫、高抗和抗病的花生品种应在次年进行重复鉴定。67附录A(资料性附录)A.1学名和形态描述花生网斑病致病菌为花生茎点霉(PhomaarachidicolaMarasasPauer&Boerema),半知菌门(Deuteromycotina),腔孢纲(CoeZomycetes),球壳孢目(Sphacropsidales),茎点霉属(Phoma)。A.1.2形态描述花生网斑病菌丝体在燕麦琼脂培养基(OA)上菌落呈白色至灰白色，圆形，粘性较差，菌丝体白色A.1.3病菌图片8(资料性附录)花生网斑病症状B.1病名和症状描述花生网斑病peanutwebblotchB.1.2症状描述花生网斑病是花生生产上一种常见的真菌病害，主要为害叶片，也可为害茎和叶柄，其症状随发病条件的不同有所差异。病斑先出现在植株基部的叶片上，侵染初期菌丝体以菌索状于叶片表面蜡质层下，呈白网状，随后从侵染点沿叶脉以放射方式向外扩展，呈星芒状粉点，随病斑扩大，由白、灰白、褐至黑褐色，形成边缘不清网状斑。当湿度大、温度高时，便出现直径1~1.5cm的大块斑点。病斑部背部

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